禽流感疫苗的制作

工作步骤：一、病毒分离
• 选取相应的器官组织 进行摘取。 • 加广谱抗生素 • 进行组织捣碎 • 反复冻融 • 检测细菌。
病毒提取液接种
• 选用合适 （9~11）日 龄的鸡胚和 优秀的SPF 胚 • 选择恰当的 注射部位 （尿囊腔等）
制作有严格的条件要求
检测
• 鸡胚内不能有菌 • 病毒要进行鉴别,要除 去可能其它病毒 • 要注意H5病毒对鸡胚 的致死时间有时与其 它普通病毒不一致。
毒株的检测与处理
• 纯化后的毒株可以做进一步 的基因重组工作。基因重组 的毒株安全性提高了，做成 苗后的相对于原毒株的抗体 完全表达下降了。家禽一般 不用裂解苗。（人用甲流是 裂解苗，产生的抗体要低） • 目前最有效的方法就是各地 及时分离当地的毒株，效果 最好。 • 许多养殖场中总在问，今年 的毒株是杠几？（—1？— 4？—5？）其实流感毒株永 远在变，每年都是新的。可 以说有它以来它就没有重复 过。我们只能说它与那个毒 株基因相近或某一疫苗对它 的保护率高一些。
禽流感病毒胶体金快速诊断试纸盒能够在早期快速检测 测到病毒的侵入。为疾病控制赢得宝贵的时间，并为病毒分 离和鉴定提供良好的测定帮助。（09年测到的某种鸡场新城 疫与禽流感H5、H9混合感染病例。）
禽流感的最Байду номын сангаас处理方法
• 目前的疫苗防疫法在禽流感病毒不断变异的情况 下，养殖场常遭受意想不到的损失。如果有关科 研机构和疫苗厂能够及时分离和鉴定新毒株并生 产疫苗效果应好一些。这里及时发现和分离鉴定 新毒株是关键。否则养殖场只能采取使用通用疫 苗再加当地毒株苗的方法来防疫。许多大型鸡场 现在被迫采取这种方法。 • 禽流感最佳的处理方法是。全国范围内灭绝禽流 感。各级部门应及时上报而不瞒报疫情，同时建 立合理有效的补偿机制。使养殖场也能够积极配 合。这样当下成本高，长远有效益。
种鸡场和商品代养殖场的措施
• 1、各场之间相互交流，选择质量好合格的 副作用小的疫苗厂的产品。 • 2、有疾病信息及早交流。避免都受疫病的 伤害。 • 3、有条件的场，可按国家规定在有相关硬 应条件的情况及时分离和鉴定新毒株。也 可请有关科研机构、定点疫苗厂及时做这 些工作。
疫苗生产需要一些严格的条件和相关的国家规定 （附参考图片）
liu ck/bj/1/06 ck/hb/df/06 ck/henan/1/06 Gs/Gd/1/96 ck/fj/5/97 Mei qi ck/hb/1/06 ck/Sx/2/06 ck/Hebei/326/05
Re-4
Dk/Fj/1734/05 ck/bj/df/06
A/Ck/Scotland/59
油苗的制作
• 水相与油相比例：1： 3 • 水相中加吐温 • 油相为白油、司本和 硬脂酸铝 • 用胶体磨将水相与油 相混合成胶体。 • 检测，离心应不分层 • 灭活水相检测 • 血凝价检测：胶体金 试纸法 微量血疑试验 法 • 胚胎法。盲传三代应 正常存活。 • 无抗体活鸡或SPF鸡 检测，应正常存活。 • 油苗检测，见《生物 制品规范》。
禽流感疫苗的制作及相关问题
石家庄神九畜禽疾病防治及 药物研究所汇编
主要程序
（国家法律和相关规定：要求有严格的生产条件和相应的法规批准）
• 一、病毒的分离、鉴定和纯化。有的毒株 进行基因重组。 • 二、毒株的扩增、收获、检测灭活。有的 病毒根据需要进行裂解。 • 三、灭活液的检测。水相的制作。 • 四、油乳剂苗的制备及检测。
世界范围内的禽流感流行和病毒在传播过程中不断地当地 的毒株进行重组或基因交换使得禽流感毒株过二到四年就有 一个变化，使得以前有效的疫苗变得无效。
及早地分析当地的毒株并进行毒株测序和利用新的野毒株检测疫 苗有效性是一种较为可行的方法（比如有的学者用攻毒试验发现H5re— 1、re—5株对08年的禽流感毒株保护率低于8%。这也就是08年为什么出 现打苗的鸡也有大批死亡的原因。用老百姓的话说：“病毒变异了，以 前的苗不顶事了”。）
河北省07年08年疾病流行图（仅供参考）
疫苗存在的主要问题及改进措施 打了苗后鸡群降蛋，降半成到三四成不等。有些学 者做了这方面的研究。检测结果为甲醛超标。
随机抽测了六个疫苗厂21批产品，其中20批不 合格，最严重的超标值为8.1倍！
试验结果显示：合格苗注射后产蛋下降2个点，而不合 格的却下降2成多。（当然，苗还有其它原料的问题）
禽流感病毒的模样及模式图(左边图中蓝急小球为禽流感 病毒实境图片，右边图为禽流感的模式图）
历年的禽流感病毒（2001年、2004 年2008年2009年）
免疫逃逸产生的原因及疫苗厂、 种禽场和大型养殖场的应对措施
• 许多种鸡场和商品代养殖场打了疫苗，抗体还比较高，在 禽流感流行时，仍出现大批死亡。即“打了苗了不顶事”！ 是什么原因造成了这种“免疫逃逸”现象呢？主要原因是 禽流感毒株发生了变异。以前的抗体不顶用或起不到理想 的作用了。 • 另外世界卫生组织指出，使用不对型的毒株所做的疫苗反 而会加大禽流感毒毒株变异的机会。所以相关科研机构、 疫苗厂和兽医部门不能在垄断科研生产经营的同时又不及 时做新病毒的分离和生产疫苗，这样养殖场的损失太大！ 谁也承受不起。 • 当前最好的方法就是打规定疫苗的同时，能配上当地的毒 株所制的疫苗，是相对保险一些的方法。