红细胞计数标准操作程序SOP文件
红细胞计数标准操作程序SOP文件
3，其他注意点见白细胞计数。
4，光电比浊法在我国曾盛行一时，该法缺点太多，诸如红细胞体积太小，血红蛋白含量多少，红细胞冷凝，自凝，光电比色计性能，电压高低等都会影响结果，今后不能使用。
5，不允许以血红蛋白浓度来折算红细胞数。
6，所用微量吸管和计数板必须为校正品。
[结果计算]
红细胞/L=5个中方格内红细胞数＊5＊10＊201＊10E6
（或红细胞数/L=5个中方格内红细胞/100＊10E12）
ＸＸＸＸ医院
临床检验实验室
文件编号：
ABCD-SOP-07-01
红细胞计数（RBC）
版序：ABCD
页码：第2页，共2页
[质量控制]
1，如无上述稀释液是，也可用新鲜配制的等渗盐水代用。
7，操作人员必须能熟练掌握每步骤的操作技能。
[参考范围]
男：( 4.0--5.5 )＊10E12/L；
女：( 3.5--5 )＊10E12/L；
新生儿：( 6--7 )＊10E12/L
[临床意义]
增加或减少见血红蛋白测定。一般情况下红细胞数与血红蛋白浓度之间有一定的比例关系，但在部分贫血患者，同时测定二者，对贫血诊断和鉴别诊断有帮助。
ＸＸＸＸ医院
临床检验实验室
文件编号：
ABCD-SOP-07-01
红细胞计数（RBC）
版序：ABCD
页码：第1页，共2页
[检测原理]
用等渗稀释液将血液稀释并充入计数池后，于显微镜下计数。
[试剂与器械]
1，试剂：赫姆（Hayem）液：
氯化钠1.0g
结晶硫酸钠（Na2SO4.10H2O）5.0g
（或无水硫酸钠2.5g）
血常规SOP文件
全自动血细胞分析SOP一，检验目的及原理1，目的：用BC-3000 Plus全自动血细胞分析仪，在临床和实验室定量分析血液细胞，对人体的血液中三种有形成分（红细胞，白细胞，血小板）的19项参数和3个直方图进行对患者和健康人群来讲，观察有无各种原因引起的贫血，出血和失血，目前机体有无细菌及病毒感染，可筛查出各种血液病，如白血病，血小板减少性紫癜等。
2，原理：电阻法测量的血样先用稀释液进行指定比例的稀释，用以测量WBC、RBC、PLT 和HGB等参数。
WBC、RBC 计数池的稀释标本在负压作用下，分别通过各自的计数微孔，流入管道，通过两个光电传感器，在这两个光电传感器之间的液量就是仪器分析计数的标本量。
用阻抗法测量WBC、RBC 和PLT 的体积分布和数目。
电极插在液体中计数微孔的两边，在计数微孔的两边周围建立了一个电场环境，根据血细胞非传导性的性质，当有细胞通过计数微孔时，将引起阻抗的变化，阻抗变化的大小与细胞体积成正比。
WBC根据体积的大小，它有多种形态，由于稀释液、溶血剂和溶血时间的不同，WBC的体积大小会发生变化。
在一定的程序控制下，显示出WBC 的三分类——淋巴细胞、中间细胞（嗜酸＋嗜碱＋单核）和中性粒细胞。
被稀释的血样加入溶血剂后，红细胞溶解，释放出血红蛋白，血红蛋白与溶血剂结合形成复合物，用波长525nm 的单色光在WBC计数池内测定此化合物的透过光强，用这个透过光强与空白状态的透过光强相比较，得到血红蛋白浓度（空白状态是指WBC计数池中只有稀释液的状态）。
二，标本1，标本种类：末梢血为200-300微升，静脉血2毫升。
2，采集标本容器及添加剂：容器：末梢血为一次性朔料试管，静脉血为真空采血管。
添加剂：不同实验使用不同的抗凝剂，不能互相代替。
血常规用EDTA-k2抗凝。
3，采集方法：毛细血管采集或静脉穿刺采集。
采集时间：患者随到随时采集。
4，标本运送：标本采集后，应及时送检。
5，标本接受：标本的编号与化验单上的编号要一致，清楚，正确及完整。
迪瑞BCC-3000血液分析仪检验标准操作规程(SOP)
XXXXXXX卫生服务中心（XX医院）迪瑞BCC-3000血液分析仪检验标准操作规程（SOP）文件编号：CHS-JY-01~30第A版编制：xx审核：xx批准：xx生效日期：二0XX年X月X日目录修订页BCC-3000红细胞计数1. 实验原理：本实验采用电阻抗法进行红细胞计数，红细胞通过小孔时，形成的相应的脉冲的多少即红细胞的数目。
2. 标本采集：2.1 标本种类：新抽取的抗凝血或手指末梢血2.2 标本要求：2.2.1 抗凝剂采用EDTA.K2抗凝2.2.2 用手指末梢血作红细胞检验时，稀释液量为0.70ml，样品量为20μl，如手指有冻疮，则主张采用耳垂血。
3. 标本储存：2小时内完成检验，室温放置下不超过8小时，4-8℃保存不超过48小时。
4.标本运输：室温运输5. 标本拒收标准：污染，凝固标本不能作测定6.试剂6.1试剂名称:迪瑞血细胞分析试剂6.2 生产厂家：长春迪瑞医疗科技股份有限公司6.3 试剂组成试剂1：无氰溶血剂试剂2：稀释液试剂3：清洗液试剂4：探头清洗液试剂5：关机液（酶清洗液）6.4 试剂储存条件及有效期：储存温度为5-30℃，有效期为一年，开封后的使用期限为60天。
7. 仪器设备7.1 仪器名称：DIRUI三分类血细胞分析仪7.2 仪器厂家：长春迪瑞医疗科技股份有限公司7.3 仪器型号：BCC-30008 操作步骤8.1 全血模式：8.1.1 上下颠倒试管将内容物充分混匀。
8.1.2 轻轻取下盖子，防止血液溅出。
8.1.3 将试管正确放到采样针下，使采样针可吸入混匀后的样本。
8.1.4 按计数键，样品开始吸取。
8.1.5 当采样针抬起后，移开试管。
8.1.6 当分析结束后，采样针复位，准备下一个样品，重复上述步骤。
8.2 末梢血模式：8.2.1 充分混匀预稀释液样本。
8.2.2将试管正确放到采样针下，使采样针可吸入混匀后的样本。
8.2.3按计数键，样品开始吸取。
8.2.4当采样针抬起后，移开试管。
网织红细胞手工计数标准操作程序
SOP_09-7 网织红细胞手工计数标准操作程序一、目的：统一项目操作规程，严格检验质量标准，为临床提供及时、可靠的结果报告。
二、适用范围：嗜酸粒细胞计数检查的操作及临床三、操作人员：检验科授权工作人员四、操作步骤：1 原理：网织红细胞是尚未完全成熟的红细胞，其胞浆内尚存在有嗜碱性的RNA物质，经煌焦油蓝或新亚甲蓝活体染色后呈浅蓝或深蓝色的网状结构。
2 试剂：煌焦油蓝生理盐水溶液：煌焦油蓝1g、枸椽酸钠0.4g、氯化钠0.85g溶于双蒸馏水100ml 中，过滤后备用。
3 操作方法：3.1于小试管中滴加1滴煌焦油蓝生理盐水溶液。
3.2加入末稍血2滴于上述试管中，混匀。
3.3静置15～20分钟后，取用1滴制成薄片。
3.4油镜下检查1000个红细胞中网织红细胞数，以百分率报告。
4 参考值：成人：0.5%～1.5%；新生儿：0.3%～6%5 附注：5.1活体染色时间不能过短，室温低时，放37℃温箱。
5.2最好制片二张，每张片计数500个红细胞，避免分布不均引起的误差。
涂片要薄而均匀，不使红细胞重叠。
5.3为计数方便，可于目镜中放一中间有孔之纸片，缩小视野，便于计数。
5.4试剂应定期重配，以免变质沉淀。
5.5用瑞-姬氏染液复染后可使网织红细胞计数减少。
5.6网织红细胞绝对值计算网织红细胞数/ul=（网织红细胞%×红细胞数/ul）÷1006 参考值：2.4～8.4万/ul（24～84×109/L）㈦、临床意义：增加：表示骨髓造血功能旺盛，各型贫血均可增多，溶贫增加尤为显著，恶贫缺铁贫应用维生素Ｂ12或供铁质后显著增多，表示有疗效。
减少见于再生障碍性贫血。
血细胞计数操作方法
血细胞计数操作方法
1. 准备工作：准备好血细胞计数仪器、计数盘、稀释液、采血针、试管、棉球、4％甲醛溶液等。
2. 取血：用采血针在病人的手臂上取血，通常需要取5—10ml左右。
3. 稀释：将取得的血液加入稀释液中，混合均匀，使得液体中的血细胞数量降低到计数盘能够准确测量的范围内。
4. 填充计数盘：将稀释液和血液混合物填充到计数盘中，注意保持样品均匀填充。
填充后在计数盘表面积约为0.9^2的区域内形成一个单层细胞密度。
5. 计数：将计数盘放入血细胞计数仪器中，启动计数程序。
计数完成后，记录结果。
6. 后续处理：先用棉球沾满4%甲醛溶液擦拭计数盘上的细胞密度区域，然后用稀释液清洗计数盘，保证精度和重复性。
最后清洗所有使用过的器具，包括采血针和试管等。
7. 结果分析：根据计数结果，可得知血液细胞的某些参数如红细胞计数、白细胞计数、血红蛋白浓度、平均红细胞体积等，这些参数能够帮助医生诊断患者的
病情并制定相应的治疗方案。
临检sop
临检室操作规程ABC医院检验科目录1.血常规检测 (1)2.异常白细胞检查（显微镜检查法） (8)3.异常红细胞检查（显微镜检查法） (12)4.网织红细胞计数（Ret） (17)5.ABO血型鉴定 (18)6.红斑狼疮细胞检查 (20)7.疟原虫检查 (21)8.凝血酶原时间（PT）测定 (24)9.活化部分凝血活酶时间（APTT）测定 (26)10.血浆纤维蛋白原（Fbg）测定 (28)11.血浆凝血酶时间（ＴＴ）测定 (30)12.尿微量白蛋白（Μ-ALB）免疫比浊定量 (32)13.全血C-反应蛋白（B-CRP）免疫比浊定量 (34)14.尿液检验 (36)15.粪便检验 (44)16.脑脊液检验 (48)17.腔积液检验 (55)18.前列腺检验 (61)19.精液检验 (62)20.阴道分泌物检验 (65)血常规检测1．标本采集新抽取的静脉血或手指末梢血（EDTA-K2抗凝）。
2．仪器设备血细胞分析仪。
3．操作步骤3.1上下颠倒试管将内容物充分混匀，检查有无凝血。
3.2将试管正确放入试管架上。
3.3按start键，样品开始吸取。
3.4当ready led 暗（并发出两声短音）移开试管。
3.5当ready led再次亮起时，准备下一个样品，重复上述步骤。
4．实验原理4.1红细胞计数测定本实验采用流体力学聚集技术原理分析红细胞。
使用电阻抗法进行红细胞计数，红细胞通过小孔时，形成的相应的脉冲的多少即红细胞的数目。
4.2白细胞计数测定本实验采用半导体激光器，以流式细胞术原理分析白细胞。
当全血进入白细胞通道后，通过流式细胞技术半导体激光的照射形成白细胞散射图，从而计算出白细胞的数量。
4.3白细胞分类计数测定本实验采用半导体激光器，以核酸荧光染色及流式细胞术原理分析白细胞。
当全血进入白细胞通道后，通过核酸荧光染色、利用流式细胞技术半导体激光的照射形成白细胞散射图，从而计算出中性细胞、淋巴细胞，单核细脃、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞分类的数量。
网织红细胞计数标准操作程序
网织红细胞计数标准操作程序1.检验目的通过对网织红细胞计数，判断机体造血功能的旺盛程度。
2.检验原理网织红细胞是尚未完全成熟的红细胞，其胞质内尚有嗜碱性的RNA物质，经新亚甲蓝或煌焦油蓝活体染色后呈浅蓝色或深蓝色网状结构。
3.标本ETDA-K2抗凝血或新鲜外周血。
4.试剂新亚甲蓝枸橼酸氯化钠染色液。
5.操作步骤5.1在小试管中加入染色液2滴；再加入静脉血（或末梢血）2滴，混匀后放置37℃恒温水箱中。
5.2 温育15分钟后取1滴混悬液制成涂片。
5.3在油镜下直接观察1000个红细胞中Ret数。
6.结果计算直接观察法：网织红细胞比例=计数1000个红细胞中的网织红细胞数/10007.生物学参考区间网织红细胞比例：成年人：0.005~0.015；新生儿：0.03~0.06；儿童:0.005~0.015。
8.实验室解释8.1增加表示骨髓造血功能旺盛。
见于各类增生性贫血，溶血性贫血增加尤为显著；巨幼细胞贫血、缺铁性贫血分别应用维生素B12、叶酸或铁剂治疗后显著增多，表示有治疗效果；也是放疗和化疗以及骨髓移植和EPO治疗后骨髓造血功能恢复的指标。
8.2减少常见于骨髓增生受抑抑制、再生障碍性贫血和纯红细胞再生障碍。
9.变异的潜在来源标本应在4小时内进行处理。
置于清洁的棕色瓶中保存，染色液应无沉淀。
新亚甲蓝染料为WHO所推荐，着色强且稳定，背景清晰，利于计数；室温<15℃时，放37℃恒温水箱；用瑞士-吉姆萨染液复染后，可使Ret计数结果减少。
10.参考文献10.1尚红、王毓三、申子瑜《全国临床检验操作程序》，第四版，人民卫生出版社。
网织红细胞计数检测标准操作规程
网织红细胞计数检测标准操作规程1.【目的】为了规范化操作，保证检测结果准确可靠。
2.【职责】2.1实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。
2.2本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
3.【样本类型及实验前准备】3.1样本类型：静脉血2ml（标本应新鲜，注意避免污染，避免溶血，注意有无血凝块）。
3.2患者准备：要求患者处于安静状态精神、体力、情绪等因素的影响较小。
3.3容器添加剂类型：EDTA-2K3.4实验试剂：煌焦油蓝或新亚甲蓝染液4.【测定原理】网织红细胞是晚幼红细胞到完全成熟红细胞之间的过渡型细胞，由于其细胞浆中尚存在嗜碱性的RNA物质，用煌焦油蓝或新亚甲蓝进行活体染色后，RNA中的负电荷基团与带正电荷的有色基团结合，胞浆中镜检可见有浅蓝色或深蓝色的点状.丝状或网状结构。
5.【操作步骤】5.1样本要求新鲜全血或EDTA抗凝全血。
5.2将网织红细胞染色液与病人全血1：1比例混匀，静置室温20分钟或更久。
制成血涂片，于显微镜下观察，判读。
5.3先在低倍镜下浏览，了解染色好坏和细胞分布情况。
选择涂片体尾交界处染色良好的区域，在油镜下观察1000个红细胞，算出网织红细胞的百分率。
6.【生物参考区间】儿童成人：0.05—0.15%新生儿：0.3—0.6%7.【临床意义】网织红细胞增加见于各种增生性贫血，溶贫尤为显著，巨幼贫和缺铁贫在治疗后显著曾生，表示有治疗效果;减少常见于再生障碍性贫血。
7.1增高提示骨髓造血功能旺盛，见于各种增生性贫血（溶血性、缺铁性、巨幼细胞性、急性失血性贫血）及经相应药物治疗有效时；急性溶血时可高达0.6～0.8；急性失血后5～10d网织红细胞达高峰，2周后恢复正常；恶性贫血或缺铁性贫血使用维生素B12或供铁质后显著增多，表示有疗效。
7.2减低提示骨髓造血功能低下，见于再生障碍性贫血、溶血性贫血再生危象时。
标准红细胞配置操作规程
标准红细胞配置操作规程(总
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标准红细胞配置操作规程
标准红细胞用于测定ABO血型(反定型)，可以验证正定型结果的准确性，也可以纠正正定型时发生的错误，避免事的发生。
以下介绍标准红细胞的配置规程：
1 搜集新鲜的A型、B型、O型血标本各3份以上。
最好是抗凝血，以便可以吸取较多的红细胞。
2 取三支洁净10cm×150mm试管标上“A”“B’’“O”等字样，根据平时工作量需要，分别将三份或以上A型血的适量红细胞吸入标有“A”字样的试管中。
B 型、O型依次类推。
3 用生理盐水加入上述三支试管进行洗涤，洗涤时需加入生理盐水2／3 试管以上，并且要轻轻地充分摇匀，然后以3000转／rain离心5min，弃去上清液。
4 重复第3步骤三次，使红细胞充分洗清。
5 将上法取得的红细胞再用生理盐水配制成5％的红细胞悬液，每10ml加1滴甲醛溶液。
即得用于反定型的标准红细胞。
可在4"C冰箱中保存2w。
2。
网织红细胞计数的标准操作程序
网织红细胞计数的标准操作程序
【目的】指导网织红细胞计数。
【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报请专业组长及科主任签字后生效。
【方法原理】网织红细胞计数是尚未完成成熟的红细胞，其胞浆内尚存在有嗜碱性的RNA物质，经煌焦油蓝或新亚甲蓝活体染色后浅蓝或深蓝色的网状结构。
【试剂】10g/L煌焦油蓝生理盐水溶液：煌焦油蓝1 g，枸橼酸纳0.4 g，氯化钠
0.85 g溶于双蒸水1ml中，过滤后备用。
【标本要求】静脉抗凝血（EDTA-K2）或毛细血管血。
【操作程序】
1、于小试管中加2滴网织红细胞染色液。
2、加入血液2滴于上述试管中，混匀。
3、室温静置15-20分钟后，取用1滴制成簿片。
4、油镜下检查10个红细胞中网织红细胞数。
【参考区间】成人、儿童0.5 0.015新生儿0.03 0.06
【质量控制】
1、染色时间不能过短，室温低时，放37C温箱。
2、最好制片2张，每张计数10红细胞，避免分布不均匀引起的误差。
涂片要簿而均
匀，不使红细胞重叠。
3、为计数方便，可于目镜中放一中间有孔之硬纸片，缩小视野，便于计数。
4、用瑞士-吉姆萨染液复染后可使网织红细胞计数结果减少。
5、染液与血液比约为1： 1,严重贫血时可适量增加血液的比例。
【临床意义】
1、增加：表示骨髓造血功能旺盛，各种增生性贫血均可增多，溶血性贫血增加有为
显著，巨幼细胞性贫血、缺铁性贫血在用维生素B12或铁剂治质后显著增多，表示有治疗效果。
2、减少：常见于再生障碍性贫血。
SOP008网织红细胞百分数计数
网织红细胞计数一、检验目的：了解骨髓红细胞增殖增加或减低等情况二、原理网织红细胞是尚未完全成熟的红细胞，其胞浆内尚存在有嗜碱性的RNA物质，经煌焦油蓝或亚甲蓝活体染色后呈浅蓝色或深蓝色的网状结构一、标本要求取末梢外周血或抗凝静脉血二、试剂10g/L新亚甲蓝（或煌焦油蓝）生理盐水溶液：新亚甲蓝1g枸橼酸钠0.4g氯化钠0.85g溶于双蒸馏水100ml中，混匀，过滤后备用。
三、仪器设备普通光学显微镜和Miller窥盘四、操作步骤1.于小试管中滴加2滴网织红细胞染液。
2.加入末梢血2滴于上述试管中，混匀。
3.静置15--20分钟后，取用1滴制成薄片。
4.油镜下检查1000个红细胞中网织红细胞数，以百分率或绝对值报告。
七、质量控制：1、95%的可信限法：（1）Sp=√R（1—R）/NSp为标准差，R为网织红细胞百分数，N为所数红细胞数。
网织红细胞计数95%可信限范围为0.028—0.0522、两差比值法：r=IR1-R2I/√R1（1--R1）+R2（1—R2）/N。
R1、R2分别为两次计数结果N为所数红细胞数，r＜2时结果可靠。
八、计算方法：九、生物参考区间0.5%~1.5%十、操作性能十一、超出可报告范围的处理：十二、危急值：十三、干扰因素：1、工作人员的责任心。
2、推血片的质量。
3、染色时间。
十四、临床意义：1、网织红细胞增多：表示骨髓红细胞系统的增生旺盛。
多见于各种增生性贫血，如溶血性贫血，特别是急性溶血性贫血，急性大出血引起的失血性贫血。
当缺铁性贫血和巨幼细胞性贫血治疗有效时，可出现短时间的网织红细胞大量增加，以后即降至正常或稍高于正常。
2、网织红细胞减少：多见于骨髓增生低下，如再生障碍性贫血和某些溶血性贫血有再障危象时。
阵发性睡眠性血红蛋白尿症网织红细胞有所减少，但有些慢性再生障碍性贫血患者的网织红细胞并不明显减低。
3、可以作为贫血治疗疗效的判断监察指标，用于观察治疗效果和判断病情变化。
十五|参考文献：1、《全国临床检验操作规程》2、罗春丽主编《临床检验基础》3、刘成玉主编《临床检验基础实验指导》。
标准操作规程(SOP)——细胞计数
一、目的细胞计数法是细胞学实验中进行细胞计数的基本方法，通过细胞计数，能够保证实验的准确性、稳定性和可重复性。
二、范围适用于中国国家流感中心的所有技术人员进行细胞计数的操作。
三、定义细胞计数法是用来计数细胞悬液中细胞数量的一种方法。
一般利用计数板（红细胞计数板）进行。
即可用于分离（散）细胞培养接种前计数所制备的细胞悬液中的细胞数量，也可用于对培养物的细胞数量进行计数。
不论计数的对象如何，均须制备分散的细胞悬液。
四、程序（一）生物安全要求实验室生物安全级别：BSL-2（二）材料1．生长成片的MDCK 细胞2．血细胞计数板3．1mL 、10mL 无菌移液管4．台盼蓝（0.4% PBS 溶液）建议：经常检查试剂使用的有效期（三）实验步骤1．消化细胞（方法见MDCK 细胞培养标准操作规程）。
2．用血细胞计数板来计算细胞悬液中的细胞数，需要充分分散细胞。
3．在18μL 台盼蓝（0.4% PBS 溶液）中加入2μL 细胞悬液，混匀，成10倍标准操作规程（SOP稀释。
死细胞被染成蓝色。
4．将以上细胞悬液加入到血球计数板的载玻片与盖玻片之间的计数室中，在显微镜下计数。
5．计算计数室四个角上三线包围的正方形中的活细胞，压线的细胞计数遵循计数原则，数上不数下，数左不数右。
如果观察到成片或者成团的细胞，应重新悬浮细胞液，重新计数。
用以下公式计算每毫升悬液中活细胞的数量。
C=4个角正方形内的活细胞总数/4×104×10C：每毫升活细胞数；五、参考文件《流行性感冒诊断标准》。
细胞培养中细胞计数标准操作规程
细胞培养中细胞计数标准操作规程一、目的：建立用于细胞培养过程的计数操作规范，以确保标准细胞在传代扩增前达到所需数量。
二、范围：细胞传代扩增前三、仪器：超净工作台、倒置显微镜四、试剂及耗材DMEM高糖完全培养基（DMEM基础培养基+10%胎牛血清+1%双抗，用于贴壁细胞培养）、1640完全培养基（1640基础培养基+10%胎牛血清+1%双抗，用于悬浮细胞培养）、0.25%胰酶、PBS缓冲液、75%乙醇、血细胞计数板、15mL离心管、1.5mL离心管、离心机、移液枪、吹风机等。
五、操作规程1.超净台紫外照射灭菌半小时，DMEM高糖完全培养基、1640完全培养基、PBS 溶液在37℃水浴锅中预热，0.25%胰酶平衡至室温。
2.从培养箱中取出培养至细胞丰度达80%以上的贴壁细胞的培养皿（10 cm2），用75%的乙醇喷洒后拿进超净台，用滴管移去培养皿中的培养液，用2mL的PBS 溶液清洗细胞一遍，弃去，以洗掉残存的培养液。
3.用移液枪吸取2 mL 0.25%胰酶至培养皿中，轻轻摇晃使胰酶覆盖整个平皿，在显微镜下消化3-5 min，观察培养皿中的细胞直至细胞变圆，从培养皿脱落。
4.向培养皿中加入2 mL的DMEM高糖完全培养基，终止胰酶消化，用吸管吹打细胞至细胞成单分散状态。
将细胞悬液转移至15 mL离心管中，900 rpm离心3 min，小心弃去全部上清液。
（若为悬浮细胞，上述步骤可省略。
用吸管轻轻吹打培养液后全部转移入15mL离心管中，900 rpm离心4 min弃去上清即可。
）5.加入2mL PBS溶液将细胞沉淀吹打均匀。
6.取100µL细胞悬液至1.5mL离心管中，若为悬浮细胞，加入900µLPBS溶液稀释10倍；若为贴壁细胞，加入400µLPBS溶液稀释5倍。
7.将计数板及盖片用酒精浸泡洗净，用吹风机吹干，并将盖片盖在计数板上。
8.吸取10µL稀释后的细胞悬液滴加在盖片边缘，使悬液充满盖片和计数板之间，静置3min，注意盖片下不要有气泡，也不能让悬液流入旁边槽中。
全血细胞计数标准操作程序
全血细胞计数标准操作程序1 检验目的检测血液中血细胞（红细胞、白细胞和血小板）数量、白细胞分类及相关参数（HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC、RDW 及 MPV 等）的变化给临床有关疾病的诊断、观察疾病的变化及治疗效果提供重要的参考依据。
2 用于检验程序的原理血常规检查方法采用血细胞自动分析仪法，白细胞分类计数（需要时）采用显微镜检查法，参见《全国临床检验操作规程》第三版。
2.1 电阻抗法血细胞计数：即在细胞检测器微孔的两侧各有一个电极，两电极间通有恒定电流，经过稀释液（电解质溶液）稀释的血样（血细胞）在通过检测器微孔时，产生了一个电脉冲；脉冲的高低代表细胞体积的大小，脉冲的个数代表细胞的数量。
2.2 细胞化学和光散射法白细胞计数：即将血液经过细胞化学试剂染色，不同的白细胞胞浆内部即可出现不同的酶化学反应。
当这些细胞通过测量区时，由于酶反应强度不同和细胞体积大小差异，激光束射到细胞上的前向角和散射角不同，以 X 轴为吸光率，Y 轴为光散射，每个细胞产生两个信号结合定位在细胞分布散点图上。
计算机对存储的测量信息进行分析处理，得出白细胞总数和分类计数结果。
2.3 多角度激光法白细胞计数：在白细胞分类通道：全血加入溶血剂（FD-Ⅰ和FD-Ⅱ）作用后，嗜酸性粒细胞内颗粒被染色；其它白细胞略有皱缩。
WBC/BASO 通道：全血加入溶血剂（FB）溶血。
除 BASO 外，其它白细胞均明显皱缩。
仪器从低角度及高角度分析白细胞的内部结构。
计算机对存储的测量信息进行分析处理，得出白细胞总数和分类计数结果。
2.4 光电比色法测量血红蛋白：在稀释的血样中加入溶血剂使红细胞膜破裂释放出血红蛋白，后者与溶血剂中有关成分结合形成 Hb 衍生物，进入 Hb 测试系统，在特定波长（一般在 530～550nm）下比色，吸光度的变化与液体中 Hb 含量成正比，仪器便可显示其浓度。
不同型号的血细胞分析仪配套溶血剂配方不同，形成的 Hb 衍生物亦不同，其吸收光谱各异但最大吸收均接近 540nm。
血细胞计数仪操作规程
血细胞计数仪操作规程（SOP）血细胞计数仪操作规程一．仪器性能1.操作简便一旦标本经过吸氧管吸样后，其他的所有操作都自动完成，包括稀释和价溶血剂等步骤。
所有操作功能菜单，例如校正、改变设置和数据确定，都可通过按屏幕上的触摸按钮完成。
2.高精密度和良好的重复性该仪器在低稀释比例的情况下（WBC200：1；RBC40，000：1；稀释样本360ul），提供了高精密度和良好的重复性。
内置式电路能自动补偿液体温度的变化，和纠正由于细胞同时通过引起的细胞计数错误。
计数孔能避开外部噪音。
3.可选择但计数和双计数模式。
当选择双计数模式时，屏幕将显示每个参数二次测定的平均数。
4.自动自检当仪器打开后，会自动注入液体管道，进行一次校正自检。
如发现问题，LCD会显示出错误信号，例如气泡、无稀释剂、堵孔，使操作着能迅速地确认和解决问题。
5.内置式质控程序仪器内安装有内置式质控程序，可对WBC,RBC,PLT,HGB,HCT(MCV),PLT,LY%.MO%,RDW和MPV标准，正常范围设置，平均数和CV值校正和X-R，X B，X D.CV控制。
6.数据储存和读取功能仪器可储存400个标本数据和20个标本的图谱，只需触摸屏幕按钮就可随时取出储存的数据。
7.自动充液和清洗仪器打开后，管道内自动注入液体。
仪器关闭后仪器自动清洗管道。
8.吸样管自动清洗仪器自动清洗残留在吸样嘴上的血液。
使操作者在测定过程中无需接触血样。
9.自动排除堵孔仪器在每次计数完毕后，从小孔周围中去除血液蛋白或杂质颗粒，以防止堵孔。
即便发生堵孔，也能自动排除堵孔，bongo 重新计数标本。
10.自动处理废液清洁剂（标准附件）含有次氯酸盐，可溶解废液中的氰化钾（KCN）。
每测定10分样品后，用DH-620清洗自动清洗液体管道。
二．准备工作1. 环境要求：不要在阳光直射出安装仪器仪器必须在下列条件中使用温度15~30℃湿度 30~90%气压700~1060hpa2. 接通电源前的检查附件和消耗品：有足够的稀释液、清洁液和溶血剂连接和设置：电源线连接良好；废液器以接好，无满溢；打印机有足够的打印纸。
血细胞计数监测技术操作流程
血细胞计数监测技术操作流程
目标
本文档旨在提供血细胞计数监测技术操作流程，确保准确可靠地进行血细胞计数。
准备工作
1. 确保实验室设备正常运行，并校准好仪器。
2. 清洁实验台面和仪器，避免污染和干扰。
操作步骤
1. 佩戴个人防护装备，包括实验室衣物、手套和面罩。
2. 取血样品标本，确保标本采集合规和无污染。
常用的采集方法包括静脉采血、采用血常规试管等。
3. 将血样倒入血细胞计数仪中。
确保样本不超过仪器所规定的最高容量。
4. 设定仪器参数，如样本稀释倍数、测试项目等。
根据仪器的操作说明进行操作。
5. 启动血细胞计数仪。
等待仪器处理完成，并记录结果。
6. 对结果进行分析和解读。
根据相关参考值，评估血细胞计数是否正常。
7. 清洁和消毒仪器，恢复到正常状态。
将未使用的试剂、标本等妥善保存。
注意事项
1. 操作过程中要遵守实验室的安全规范，避免直接接触血液和可能的生物危险物质。
2. 遵循血液样品的处理和处置要求，避免感染和污染。
3. 定期校准和维护血细胞计数仪，确保测试结果的准确性和可靠性。
4. 严格按照操作说明进行操作，避免误操作和仪器损坏。
以上是血细胞计数监测技术操作流程的简要介绍，希望对您有所帮助。
网织红细胞计数操作规程
1.目的：规范网织红细胞计数标准操作，保证实验数据的准确性。
2.原理：网织红细胞是未完全成熟的红细胞，包体较一般红细胞稍大，胞浆中尚有嗜碱性残存物质，可被煌焦油蓝等染成蓝色颗粒状和线状及网状结构物。
网织红细胞的数量可用百分率或每立方毫米血液中的绝对值数来表示。
3.材料：煌焦油蓝（灿烂甲酚蓝）、枸橼酸钠、生理盐水、香柏油、载物片（玻璃片）、推片（磨去边的玻璃片）、试管（2ml）毛细吸管或枪头（200微升）、光学显微镜。
4.操作规程：4.1染色液配制：煌焦油蓝0.4g、3.5%枸橼酸钠20ml,研磨溶解后加生理盐水至100ml，过滤备用，室温可保存6个月。
4.2血膜片制备：4.2.1染色：取试管一支，用毛细管或枪头于试管中加入染液2～5滴，然后再加入新鲜血液1滴轻摇混合，染色10～15min。
4.2.2制片：取载物片一片，用毛细管或枪头吸取血液染色液1小滴于载物片上，并用推片约45度角推制成舌型血膜片，自然干燥备用。
4.2.3观察：用显微镜观察，取血膜片滴入香柏油1滴，将血膜片置于显微镜载物台，用油镜观察网织红细胞。
4.2.4计数：取计数器在油镜下检查计数红细胞，即计数红细胞中网织红细胞的数量，检查计数1000个红细胞中网织红细胞的数量，并得出千分率再除以10即为百分率。
10计算公式：百分率＝------------------------------1000个红细胞中网织红细胞的数量5.注意事项：5.1载物片用前必须经过酸或碱液浸泡脱脂处理后方可使用；5.2血膜片制备需要反复练习推片，熟练推制血膜片的技巧；5.3血膜片的厚薄要适中，血膜片过厚过薄均无法进行观察；5.4室温低时血液染色时间要适当延长，其细胞着色更充分；5.5血膜片需在3天内检查计数，褪色后其网状结构不清晰。
迈瑞BC2800血常规SOP
血液常规检验标准操作规程一．目的:检测分析血液中红细胞、白细胞、血小板、血红蛋白的数量和质量，对感染、炎症、血液系统疾病等进行辅助诊断、监测治疗效果等。
2．检测项目:红细胞计数、血红蛋白、红细胞比积、平均红细胞体积、平均红细胞二．检测项目:红细胞计数、血红蛋白、红细胞比积、平均红细胞体积、平均红细胞血红蛋白含量、平均红细胞血红蛋白浓度、白细胞计数、白细胞分类、血小板计数。
三．标本的采集与运送1 .标本类型：静脉血或手指末梢血。
2.标本要求：标本用EDTA-K2 抗凝；静脉血标本量应达到2ml；末梢血20µl。
3.标本运送：室温运送，4小时内完成检测。
如不需PLT、MCV、和白细胞三分群的分析结果，可在2-8摄氏度的冰箱中保存24小时。
经过冷藏的样本应在室温下放置30分钟后才能进行分析。
4.标本拒收标准：严重溶血、凝固、血量少、无条码、无标识的血液标本不能进行检测。
四.标本的检测仪器及试剂1 .仪器：深圳mindrary公司BC—2800全自动血液细胞分析仪。
试剂：由mindrary公司提供包括LH溶血剂、LEO(Ⅰ)溶血剂、LBA溶血剂、LEO(Ⅱ)溶血剂、清洁液、稀释液、探头清洁液等配套试剂。
2.检测原理采用流式细胞技术，通过检测光学信号进行白细胞计数及白细胞分类测定；双鞘流电阻原理进行红细胞与血小板测定；HiCN-HGB法检测血红蛋白。
3.操作步骤3.1打开仪器电源开关，电源指示灯亮，屏幕显示Intializing,分析仪进入初始化，初始化结束后，系统自动进入“计数”界面。
注：在分析仪报“本底异常”故障时进行分析，将得到不可靠的结果，3.2在仪器进入样本分析前，每日需进行质控分析，以确保分析仪得到可靠的分析结果。
3.3全血-全参数模式a. 在仪器主界面点击“计数”，进入计数界面。
b. 点击计数界面“模式”，在弹出的对话框中选择“全血模式”。
录入样本信息，输入分析样本编号。
c. 上下颠倒试管将试管内容物充分混匀，轻轻取下盖子，防止血液溅出。
008人工计数红细胞标准化操作程序
操作人员：经批准人授权的本院专业技术人员
部门主管：彭建宏
质量控制员：唐日升
目的：
保证红细胞计数的准确性，为临床提供准确可靠的结果。
该SOP变动程序：
本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、质控主管、科主任。
适用范围：
红细胞手工计数。
检测原理：
用等渗稀释液将血液稀释一定倍数，充于红细胞计数池，在显微镜下计数一定体积的细胞数，经换算求出每升血液中的红细胞数量。
试剂：
枸橼酸钠稀释液：枸橼酸钠 1.0g+36%甲醛 1.0mL+NaCl0.6g加蒸馏水至100mL，混匀。
仪器：
双目显微镜，改良牛鲍氏窥盘，20μL微量吸管。
标本采集：
抗凝管采集的静脉血。
末梢血或用真空负压EDTA－K
2
操作：
吸取10μL全血加入2mL稀释液中，吸洗吸管数次，混匀，注满计数池，静置2-3分钟，计数中央大方格内四角和正中5个中方格（80小格）中红细胞（N），以计上不计下，数左不数右方法计数。
计算方法：
红细胞/L= N×25/5×10×200×106=N/100×1012
参考范围：
成年男性：（4-5.5）×1012/L
成年女性：（3.5-5.0）×1012/L
新生儿：（6.0-7.0）×1012/L
方法学评价：
目视计数法是传统的红细胞计数法，不需要特别设备，但操作复杂、费时。
血细胞计数法的操作流程
血细胞计数法的操作流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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蒸馏水加至200ml
溶解后加20g/L伊红水溶液1滴，过滤后用。
2，器械：
（1）微量计数板
（2）显微镜
（3）微量吸管（MC）
[标本的收集与处理]
1，用EDTA-K2 0 .2ul抗凝静脉血1ml，轻轻摇动抗凝。凝集，溶血，血量小于0.5 ML或抽血时间超过四小时为不合格标本，拒收。
2，直接采集未稍血液。
[操作步骤]
1.取小试管1支，加红细胞稀释液2.0 ml。
2.用清洁干燥微量吸管取末梢血10ul。
3.擦去管尖内外部余血，轻轻吹入红细胞稀释液底部，再轻吸上层清液嗽洗吸管2--3次，然后立即混匀。
4.充池后待2--3 min，用高倍镜依此计数中央大方格内四角和正中5个中方格内的红细胞。按数上不数下，数左不数右的原则进行目视计数。
ＸＸＸＸ医院
临床检验实验室
文件编号：
ABCD-SOP-07-01
红细胞计（RBC）
版序：ABCD
页码：第1页，共2页
[检测原理]
用等渗稀释液将血液稀释并充入计数池后，于显微镜下计数。
[试剂与器械]
1，试剂：赫姆（Hayem）液：
氯化钠1.0g
结晶硫酸钠（Na2SO4.10H2O）5.0g
（或无水硫酸钠2.5g）
2，正常数值范围内，两次红细胞计数相差不得超过5%。
3，其他注意点见白细胞计数。
4，光电比浊法在我国曾盛行一时，该法缺点太多，诸如红细胞体积太小，血红蛋白含量多少，红细胞冷凝，自凝，光电比色计性能，电压高低等都会影响结果，今后不能使用。
5，不允许以血红蛋白浓度来折算红细胞数。
6，所用微量吸管和计数板必须为校正品。
7，操作人员必须能熟练掌握每步骤的操作技能。
[参考范围]
男：( 4.0--5.5 )＊10E12/L；
女：( 3.5--5 )＊10E12/L；
新生儿：( 6--7 )＊10E12/L
[临床意义]
增加或减少见血红蛋白测定。一般情况下红细胞数与血红蛋白浓度之间有一定的比例关系，但在部分贫血患者，同时测定二者，对贫血诊断和鉴别诊断有帮助。
[结果计算]
红细胞/L=5个中方格内红细胞数＊5＊10＊201＊10E6
（或红细胞数/L=5个中方格内红细胞/100＊10E12）
ＸＸＸＸ医院
临床检验实验室
文件编号：
ABCD-SOP-07-01
红细胞计数（RBC）
版序：ABCD
页码：第2页，共2页
[质量控制]
1，如无上述稀释液是，也可用新鲜配制的等渗盐水代用。