限制性内切酶酶切及电泳
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生物化学与分子生物学教研室
生物化学与分子生物学教研室一、实验目的
生物化学与分子生物学教研室二、实验原理
),并在这个顺序
GAATTC
CTTAAG
EcoRⅠ
NNNNNN5’
pTA2载体后获得的重组载体pTA2-p53进行酶切分析,外源p53基因
( p53基因是人体抑癌基因,失活对肿瘤形成起重要作用。)
带电质点在电场中向与其相反的电极进行泳动的现象。
的磷酸根残基,在
:在电泳前向凝胶预加核酸染料,电泳过程中染料同DNA结合,电泳后在紫外光照射下,可观察到荧光,从
Eppendorf管封上封口膜于37℃水浴(金属浴)中酶切(酶切时间需小于2小时,以免产生星号活性)。
DNAmarker;泳道2:
电泳检测示例
反应时间:一般酶切鉴定30分钟就可以了,如果酶减少,
一般要求在最后加酶,且