限制性内切酶酶切及电泳

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生物化学与分子生物学教研室

生物化学与分子生物学教研室一、实验目的

生物化学与分子生物学教研室二、实验原理

),并在这个顺序

GAATTC

CTTAAG

EcoRⅠ

NNNNNN5’

pTA2载体后获得的重组载体pTA2-p53进行酶切分析,外源p53基因

( p53基因是人体抑癌基因,失活对肿瘤形成起重要作用。)

带电质点在电场中向与其相反的电极进行泳动的现象。

的磷酸根残基,在

:在电泳前向凝胶预加核酸染料,电泳过程中染料同DNA结合,电泳后在紫外光照射下,可观察到荧光,从

Eppendorf管封上封口膜于37℃水浴(金属浴)中酶切(酶切时间需小于2小时,以免产生星号活性)。

DNAmarker;泳道2:

电泳检测示例

反应时间:一般酶切鉴定30分钟就可以了,如果酶减少,

一般要求在最后加酶,且

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