HPLC测定18种氨基酸
PITC柱前衍生HPLC氨基酸比值测定
PITC柱前衍生高效液相法测定缩宫素氨基酸比值.、八、-一. 刖言目前，氨基酸检测主要应用氨基酸自动分析仪和HPLC随着HPLC勺发展，使用HPLC技术分析氨基酸获得迅速发展。
HPLC已成为一种较为理想的检测氨基酸的方法。
HPLC检测氨基酸时，使用不同衍生剂反应后产生不同的衍生物，不同的衍生物所需色谱条件也有差别。
查阅相关的研究报告，所使用的衍生剂及色谱条件也不尽相同。
每种方法各有自己的优缺点，应根据所测样品的特性和仪器、试剂条件作出选择，最后选择异硫氰酸苯酯（PITC）柱前衍生法测定缩宫素氨基酸比值。
二•准备工作主要设备和试剂1.氨基酸分析专用柱（ 4.6 X 250，5um) 1支Agela 公司2.咼效液相检测仪 1 台安捷伦3.十八种氨基酸 1 套中检所4.异硫氰酸苯酯10 瓶Agela 公司5.三乙胺2 瓶Agela 公司试剂配制1.三乙胺乙腈溶液：取三乙胺1瓶，加乙腈8.6ml，混匀。
2.异硫氰酸苯酯乙腈溶液：取异硫氰酸苯酯1瓶，加乙腈2ml，混匀。
4 C 3天3.流动相A:称取三水醋酸钠25.3g （或无水醋酸钠15.2g ），加水1400ml，用冰醋酸调节pH6.5，用水使成1860ml，再加乙腈140ml，使成2000ml，0.45um醋酸纤维膜过滤。
4.流动相B: 80汇腈，0.45um有机膜过滤。
5.氨基酸标准贮备液中检所十八种氨基酸，105C 3小时。
使用十万分子一天平。
半胱氨酸是以胱氨酸折算成两份半胱氨酸进行计算。
用0.1mol/L盐酸溶解至250ml。
衍生方法取标准品（样品）0.2ml，力卩100mmol/L异硫氰酸苯酯乙睛溶液0.1ml，力卩1mol/L三乙胺乙睛溶液0.1ml，混匀，室温放置1小时，加入0.4ml正己烷，振摇，放置10分钟，取下层清液过滤后进样。
三•实验部分1.色谱条件选择1.1精密量取2ml氨基酸标准储备液，至20ml容量瓶，加0.1mol/L盐酸溶液至刻度。
一种C57小鼠脑组织和血浆中18种氨基酸测定的前处理方法[发明专利]
![一种C57小鼠脑组织和血浆中18种氨基酸测定的前处理方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/563a963102d8ce2f0066f5335a8102d276a261b6.png)
(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 202010726469.9(22)申请日 2020.07.25(71)申请人 重庆医科大学地址 400016 重庆市渝中区医学院路1号(72)发明人 蒋心惠 李建沙 张静 龚涛 (51)Int.Cl.G01N 1/28(2006.01)G01N 21/31(2006.01)G01N 30/06(2006.01)G01N 30/74(2006.01)(54)发明名称一种C57小鼠脑组织和血浆中18种氨基酸测定的前处理方法(57)摘要本发明公开了一种C57小鼠脑组织和血浆中18种氨基酸测定的前处理方法，属于生物样品内源性物质前处理领域。
该方法使用紫外分光光度计和高效液相色谱仪，对采取液液萃取结合蛋白质沉淀法处理脑组织匀浆和血浆的方法进行考察，主要考察了样品前处理方法对样品中蛋白质去除量、总脂质去除量、18种氨基酸提取量的影响，进一步优化得到一种C57小鼠脑组织和血浆中18种氨基酸测定的最佳前处理方法。
权利要求书1页 说明书4页 附图5页CN 111829851 A 2020.10.27C N 111829851A1.一种C57小鼠脑组织和血浆中18种氨基酸测定的前处理方法，其特征在于，包括如下步骤：第一步，制备脑组织匀浆与血浆精密称定C57小鼠脑组织，按1：5～1：20(脑组织重量:超纯水＝mg：μL)的比例加入超纯水，以手持匀浆器匀浆30～90s，得到脑组织匀浆，将从眼眶取血得到的样品，离心取上清，得到待处理血浆；第二步，样品处理取100μL～300μL样品，加入100μL～300μL的甲基叔丁基醚，经涡旋震荡、离心、弃上层，以除去样品中的脂质；取100μL～300μL的上述去脂质样品，加入100μL～300μL的蛋白沉淀剂，经涡旋震荡、离心、取上清，以除去样品中的蛋白质；第三步，样品处理后总蛋白质和总脂质含量考察取100μL～300μL经处理后的样品，使用紫外分光光度计在280nm处测定样品的吸光度，考察经处理后的脑组织样品中总蛋白质含量；取100μL～300μL上述经处理后的样品于玻璃试管内，挥干溶剂，加入200μL浓H 2SO 4(96％)，涡旋，90℃水浴加热20min后迅速冷却至室温，再加入200μL 1mg ·mL -1香草醛溶液(17％的磷酸溶液配制)，常温下避光反应后，在500nm～550nm波长下测定吸光度；第四步，HPLC二极管阵列检测器切换荧光检测器考察杂质去除量和氨基酸提取量HPLC的液相条件包括色谱柱、流动相A和流动相B，其中色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶柱，流动相A为甲醇，流动相B为30mmol ·L -1和pH为6.20的乙酸钠缓冲溶液，脑组织和血浆样品中的氨基酸通过邻苯二甲醛衍生后测定，进样量为20μL，流速为0.9mL ·min -1，柱温为30℃，PDA检测器的检测波长选取230nm，荧光检测器的激发波长为340nm，发射波长为450nm；第五步，确定样品前处理条件经第四步的结果选择前处理方法，选择直接采用0.1～0.5mol ·L -1的高氯酸溶液去除样品中的脂质和蛋白质，为进一步优化样品前处理方法，对高氯酸的用量进行优化，按照1：3～1：9(样品：高氯酸溶液＝μL：μL)比例处理样品，按不同比例的0.1～0.5mol ·L -1高氯酸处理后的样品，经总蛋白质和总脂质含量考察，优化得到样品前处理方法；2.本文中所述的样品是C57小鼠脑皮层和血浆，18种氨基酸是：谷胱甘肽(Gsh)、天冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、丝氨酸(Ser)、谷氨酰胺(Gln)、瓜氨酸酸(Cit)、甘氨酸(Gly)、精氨酸(Arg)、牛磺酸(Tau)、酪氨酸(Tyr)、丙氨酸(Ala)、γ-氨基丁酸(GABA)、、色氨酸(Trp)、甲硫氨酸(Met)、缬氨酸(Val)、苯丙氨酸(Phe)、异亮氨酸(Ile)、亮氨酸(Leu)。
高效液相色谱法测定氨基酸
脑蛋白水解物溶液氨基酸含量分析方法研究方案1、仪器与试药1.1 仪器1525型高效液相色谱仪（美国Waters公司）；Waters1525型泵，Waters2487型检测器，Waters5CH 型柱温箱，WatersBREEZE数据处理软件，水浴恒温器（精度±0.1℃），旋涡器，微量移液器，衍生专用管；CP225D型分析天平（德国）；4umNora-Pak TM C18（3.9mm×150mm，5μm）色谱柱（美国）1.2 药品与试剂16种氨基酸（门冬氨酸、丝氨酸、谷氨酸、甘氨酸、组氨酸、精氨酸、苏氨酸、丙氨酸、脯氨酸、缬氨酸、甲硫氨酸、赖氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、色氨酸）由中国药品生物制品检定所提供。
脑蛋白水解物注射液，云南盟生药业有限公司生产，规格10ml/支。
批号：2013、2013、2013.乙腈（HPLC级）；EDTA（分析纯）；磷酸（分析纯）；二乙胺（分析纯）；三水合乙酸钠（分析纯）。
2、方法与结果2.1色谱条件流动相A为AccQTag醋酸—磷酸盐缓冲液；由AccQTagEluent A浓缩制备AccQTag洗脱液,用前稀释10倍（或按以下方法配制：称19.04g三水合乙酸钠，加1000ml纯化水，搅拌，溶解，用50%H3PO4将pH调至5.2，加入1ml 1mg/ml的EDTA溶液，加入2.37ml二乙胺，用50%H3PO4滴定至pH4.95，用水溶性过滤器过滤，超声，脱气，备用。
）；流动相B为60% HPLC级乙腈，按梯度表梯度洗脱；流速1.0ml/min；检测波长为254nm；进样量5μl；柱温38℃。
2.2对照品溶液、供试品溶液的制备分别精密称取16种氨基酸标准品，用纯化水配制成浓度如下表所示的混合溶液。
取上述溶液0.1ml，加纯化水0.9ml，旋涡器混匀，作为对照品溶液；取脑蛋白水解物注射液，加水稀释成含总氮为1mg/ml的溶液，取0.1ml，加纯化水0.9ml,旋涡器混匀，作为供试品溶液。
AccQ-Tag法测氨基酸含量SOP
AccQ-Tag法测氨基酸含量1.所需设备及试剂1.1.设备：a.天平（精度0.1mg）；b.pH计（精度0.01级）；c.单标线吸管（50ml）；d.容量瓶（500ml）；e.溶剂过滤器及滤膜（0.45µm）；f.试管（1.5×15cm，1.5×10cm）；g.样品管（6×50mm）；h.微量进样器（10µl）；i.微量可调移液器（20µl，100µl，1000µl）及吸头；j.旋涡混匀器；k.烘箱（55℃）；l.HPLC系统及AccQ-Tag柱。
1.2.试剂：a.超纯水（≥18MΩ∙cm）；b.乙腈（HPLC级）；c.Waters AccQ-Tag流动相A浓液d.Waters氨基酸水解液标准（H）；e.Waters AccQ-Fluor试剂盒（包括硼酸缓冲液1、衍生剂粉2A、稀释液2B）。
2.流动相A制备：吸取50ml Waters AccQ-Tag流动相A浓液，放至500ml容量瓶中，加超纯水至刻度，用0.45µm滤膜过滤后备用。
3.衍生3.1.标定标准制备3.1.1.1mmol/L色氨酸标准液：称取色氨酸（生化试剂）20.4mg，加超纯水溶解至100ml。
3.1.2.含色氨酸的标定标准：取1支Waters氨基酸水解液标准，打开后吸取1ml，放至一支干净的1.5×15cm试管中，加2.5ml色氨酸标准液，6.5ml超纯水，旋涡混匀，每支Eppendorf 管分装1ml备用。
（此标准含有的色氨酸的浓度与其它氨基酸一样，为0.25mmol/L。
）3.1.3.10倍稀释后的标准可在–20℃保存1个月。
剩余的氨基酸水解液标准可在–20℃保存3个月。
未启封的氨基酸水解液标准可在4℃保存1年。
使用–20℃保存的标准应充分解冻并混匀。
3.2.衍生试剂制备3.2.1.将烘箱预热至55±1℃；3.2.2.取一瓶衍生剂粉2A，轻轻敲动以确保打开前所有粉末落在瓶底；3.2.3.吸取1ml稀释液2B并弃去以冲洗一个干净的微量移液吸头；（警告：稀释液2B为乙腈，可燃且有毒，参考安全数据表。
PITC柱前衍生高效液相色谱法测定接骨木果实中氨基酸含量
PITC柱前衍生高效液相色谱法测定接骨木果实中氨基酸含量于洪超;马荣申;郭庆梅;周凤琴;郭俊国【摘要】为了测定接骨木果实中游离氨基酸和水解氨基酸含量,采用PITC柱前衍生高效液相色谱法(RP-HPLC)以异硫氰酸苯酯(PITC)作柱前衍生试剂,采用RP-HPLC梯度洗脱的方法测定接骨木果实中的游离和水解氨基酸的峰面积并计算其含量.结果表明:接骨木果实中氨基酸和水解氨基酸的含量分别为2.107％和7.297％;18种氨基酸分离良好,线性关系良好,空白无干扰,精密度RSD在0.634％～2.532％,稳定性RSD在0.729％～2.774％,重复性RSD在0.664％～2.884％,平均回收率在95.49％～103.67％,且RSD均小于3％.RP-HPLC法灵敏、简便、快捷,能准确测定接骨木果实中游离氨基酸和水解氨基酸的含量.【期刊名称】《贵州农业科学》【年(卷),期】2015(043)008【总页数】4页(P213-216)【关键词】接骨木;游离氨基酸;水解氨基酸;异硫氰酸苯酯;高效液相色谱法【作者】于洪超;马荣申;郭庆梅;周凤琴;郭俊国【作者单位】山东中医药大学药学院,山东济南250355;济南天红苗木种植技术研发中心,山东济南250400;山东中医药大学药学院,山东济南250355;山东中医药大学药学院,山东济南250355;山东中医药大学眼科研究所,山东济南250002【正文语种】中文【中图分类】S567接骨木（Sambucus williamsii Hance）又名公道老、马尿骚等，为忍冬科（Caprofoliaceae）接骨木属（Sambucus L．）植物［1］。
接骨木的果实是一种具有极高开发利用价值的功能性产品，除含有大量对人体有益的不饱和脂肪酸外，还含有种类丰富的氨基酸［2］。
氨基酸含量是衡量接骨木果实营养价值高低和资源开发利用价值的重要指标。
氨基酸的分析测定多是通过离子交换树脂分离，然后通过柱后衍生化反应，再经紫外检测器检测分析，此方法分析时间长、灵敏度低，且仪器复杂、价格昂贵，严重限制其推广应用。
高效液相色谱法测定氨基酸的研究进展
高效液相色谱法测定氨基酸的研究进展赫欣睿;武中庸;叶永丽;高旭东;陈士恩;马忠仁【摘要】氨基酸是构成生物体的基础物质,氨基酸分析是生命科学研究中最重要的领域之一.高效液相色谱法因分析速度快、操作简便、检测灵敏、适用范围广等优点而广泛应用于食品工业、制药工业、生命科学研究等领域.该文综述了高效液相色谱分析氨基酸的方法,包括柱后衍生法、柱前衍生法、高效阴离子交换色谱-积分脉冲安培检测法和高效液相色谱-蒸发光散射检测法.并对上述方法进行了比较,为日常的氨基酸分析提供了参考.【期刊名称】《分析测试学报》【年(卷),期】2016(035)007【总页数】7页(P922-928)【关键词】氨基酸;高效液相色谱法(HPLC);柱前衍生;柱后衍生;综述;研究进展【作者】赫欣睿;武中庸;叶永丽;高旭东;陈士恩;马忠仁【作者单位】西北民族大学生命科学与工程学院,甘肃兰州730124;西北民族大学生命科学与工程学院,甘肃兰州730124;西北民族大学生命科学与工程学院,甘肃兰州730124;西北民族大学生命科学与工程学院,甘肃兰州730124;西北民族大学生命科学与工程学院,甘肃兰州730124;西北民族大学生命科学与工程学院,甘肃兰州730124【正文语种】中文【中图分类】O657.72;O629.7氨基酸是构成蛋白质大分子的基础物质，与生命活动息息相关。
目前，自然界中发现的氨基酸约有300种，而组成生物体蛋白质的氨基酸约有20种。
氨基酸分析在生物化学、食品科学、临床医学、饲料科学、化工等领域具有重要作用，因此改进和发展氨基酸的分析方法对于人类具有重要意义。
高效液相色谱法(High performance liquid chromatography，HPLC)是在经典液相色谱和气相色谱的基础上发展的新型分离分析技术，具有分离效能高、速度快、操作简便、检测灵敏度好、对样品适用范围广等特点，已广泛应用于各领域。
高旭东等[1]建立了黄芩苷、盐酸小檗碱和大黄素的高效液相色谱检测方法。
色氨酸的检测
色氨酸、含硫氨基酸和18种蛋白水解氨基酸的检测
色氨酸、含硫氨基酸和蛋白水解氨基酸的检测是氨基酸例行分析中的三个重要组成部分。
色氨酸Tryptophan)是一种重要的人体和畜禽、鱼类生长的必需氨基酸，广泛用于医药、食品和饲料添加剂。
色氨酸分析方法有色谱法（离子交换、HPLC）、比色法、荧光法等。
色谱法由于兼有分离和检测双重功能而被广泛采用。
如何一机多用利用已有的氨基酸分析仪取代HPLC仪器完成色氨酸分析，具有实际意义。
含硫氨基酸是指蛋氨酸（Methionine）和胱氨酸（Cystine）。
它们是动物发育的必需氨基酸。
由于常规的酸水解法导致含硫氨基酸的破坏，测定含硫氨基酸时须采用氧化酸水解法。
经氧化水解后蛋氨酸1:1转化为蛋氨砜（Methionine sulphone），胱氨酸1:1转化为磺基丙氨酸(Cysteic acid)。
本文根据阳离子交换分离、柱后茚三酮衍生光度法检测的化学原理， 借助最新型氨基酸分析仪A300的仪器技术，提出了包括色氨酸、含硫氨基酸和蛋白水解氨基酸在内的21种氨基酸的分析方法。
方法操作简便,重现性好, 灵敏度高。
附图1: 蛋白水解氨基酸、含硫氨基酸和色氨酸的标准谱图
蛋白水解氨基酸、含硫氨基酸和色氨酸的标准谱图。
柱后衍生-高效液相色谱法测定青稞黄酒中的18种氨基酸
柱后衍生-高效液相色谱法测定青稞黄酒中的18种氨基酸诸葛庆;李博斌;周牡艳;葛乐勇【摘要】采用茚三酮柱后衍生,高效液相色谱法测定了青稞黄酒中的18种氨基酸.结果表明,18种氨基酸回收率为95.1 %～102.5 %,相关系数0.9962～0.9999,检出限0.25～4.00 μmol/L.在所分析的4种青稞黄酒样品中,氨基酸含量为456.10～760.18 mg/L.青稞黄酒中的呈味氨基酸以甜味氨基酸和涩味氨基酸为主,占76 %以上.【期刊名称】《酿酒科技》【年(卷),期】2010(000)006【总页数】3页(P94-96)【关键词】分析检测;柱后衍生;高效液相色谱法;氨基酸;青稞黄酒【作者】诸葛庆;李博斌;周牡艳;葛乐勇【作者单位】国家黄酒产品质量监督检验中心,浙江,绍兴,312071;国家黄酒产品质量监督检验中心,浙江,绍兴,312071;国家黄酒产品质量监督检验中心,浙江,绍兴,312071;国家黄酒产品质量监督检验中心,浙江,绍兴,312071【正文语种】中文【中图分类】TS261.7;TS262.4;O657.72青稞也叫元麦、淮麦、米麦、米大麦,是大麦的一种特殊类型,因其内外颖壳分离,籽粒裸露,故称裸大麦，青稞主要分布在我国西藏、青海等地高海拔高寒地区[1-2]。
青稞富含蛋白质、碳水化合物，并含有较丰富的矿物质及维生素，是一种很好的酿酒原料,青稞黄酒是以青稞为原料，采用黄酒酿造工艺酿制而成的发酵酒，其酒度低，营养价值丰富，富含多种氨基酸[3-4]。
氨基酸不仅是青稞黄酒的主要营养成分之一，也是酒的风味物质或风味物质的前驱物质，对酒的风味有着重要的贡献[5]，因此，准确测定青稞黄酒中氨基酸的含量对研究黄酒的营养价值和风味及对酒质的控制都具有极其重要的意义。
常用的氨基酸分析方法有离子交换色谱法[6]、氨基酸自动分析仪法[7]、高效液相色谱法[8]、液质联用法[9]。
考虑到成本及一机多用，本研究采用柱后衍生-高效液相色谱法测定青稞黄酒中的氨基酸，其原理是氨基酸经钠离子交换柱分离后与茚三酮反应，在570 nm进行测定。
司美格鲁肽原料药质量标准
司美格鲁肽原料药质量标准美格鲁肽是一种重要的药物原料，其质量标准对药物的生产和使用起着至关重要的作用。
美格鲁肽是一种水溶性多肽，其主要功能是改善细胞内环境，调节机体代谢，增加免疫力，促进细胞再生和修复，对于各种疾病的治疗具有重要的作用。
因此，严格的质量标准对于美格鲁肽原料药的生产和使用至关重要。
本文将从美格鲁肽的性质、用途和质量标准等方面进行详细介绍。
一、美格鲁肽的性质和用途美格鲁肽是一种由18种氨基酸组成的多肽，具有非常强的生物活性。
它主要通过激活体内细胞代谢酶改善细胞内环境，增强机体代谢能力，加速细胞修复和再生。
同时，美格鲁肽还可以增强机体的免疫力，对于各类疾病的治疗具有重要作用。
目前，美格鲁肽已经被广泛应用于抗衰老、抗氧化、促进伤口愈合、改善机体免疫功能等方面。
二、美格鲁肽原料药的质量标准美格鲁肽作为一种重要的药物原料，其质量标准需要严格遵守国家相关法规和标准。
美格鲁肽原料药的质量标准主要包括外观与性状、理化性质、含量测定、PH值、细菌和内毒素、重金属等指标。
下面将从这几个方面对美格鲁肽原料药的质量标准进行详细介绍。
1.外观与性状美格鲁肽应该为白色或类白色结晶性粉末，无异物。
粉末的质地应该细腻，无结块或有机杂质。
其溶于水后呈无色透明液体，无明显的异物和悬浮物。
2.理化性质美格鲁肽的理化性质包括熔点、比旋光度和纯度等指标。
熔点应在175℃以上，比旋光度应在-2.8~-3.8°之间，纯度应达到98%以上。
3.含量测定美格鲁肽的含量测定主要通过高效液相色谱法（HPLC）进行测定，其含量应符合国家相关标准，一般为98%以上。
4. PH值美格鲁肽的PH值应在5.5~7.0之间，符合生理酸碱平衡的要求，适合人体的吸收和利用。
5.细菌和内毒素美格鲁肽的细菌和内毒素指标是衡量其纯度和安全性的重要指标，符合国家相关要求即可。
6.重金属美格鲁肽中重金属含量应该符合国家相关标准要求，如镉、铅、汞等重金属的含量应低于一定的限量。
柱前衍生RP—HPLC法测定林蛙皮胶原蛋白肽中18种氨基酸含量
柱前衍生RP—HPLC法测定林蛙皮胶原蛋白肽中18种氨基酸含量邱芳萍;王长周;季晓枫【期刊名称】《长春工业大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2012(033)005【摘要】采用柱前衍生反相高效液相色谱（RP—HPLC）法，测定林蛙皮胶原蛋白肽（LWT）中18种氨基酸的含量。
色谱柱为Ultimate心A氨基酸分析专用色谱柱（4．6×250mm，5μm）；衍生试剂为异硫氰酸苯酯（PITC）；流动相A：0．1moL／L醋酸钠溶液（pH6．5）和乙腈按93：7的比例混合，流动相B：水-乙腈-20：80，流速为1．0mL／min，进行梯度洗脱；检测波长为254nm。
结果显示，18种氨基酸的分离效果良好，氨基酸浓度与峰面积呈良好的线性关系；定量得到LwT中Glu，Gly，Lys，Leu等18种氨基酸的含量。
【总页数】5页(P583-587)【作者】邱芳萍;王长周;季晓枫【作者单位】长春工业大学化学与生命科学学院,吉林长春130012;长春工业大学化学与生命科学学院,吉林长春130012;长春工业大学化学与生命科学学院,吉林长春130012【正文语种】中文【中图分类】Q503【相关文献】1.柱前衍生RP-HPLC法测定狗尾草种子氨基酸含量 [J], 赵岩;唐国胜;侯莹莹;郜玉钢;王士杰;蔡恩博;张连学2.柱前衍生RP-HPLC法测定仙鹤草中氨基酸含量 [J], 赵岩;赵天琦;徐殿文;郜玉钢;蔡恩博;刘双利;杨鹤;张连学3.柱前衍生-RP-HPLC法测定蜂王幼虫冻干粉中16种氨基酸含量 [J], 李智;祁龙凯;林励;李静;黎香梅;邝燕珍4.柱前衍生化RP-HPLC测定白芷中氨基酸含量 [J], 牛延菲;徐怡;普冰清;刘慧;游燕5.柱前衍生RP-HPLC法测定桑叶中氨基酸含量 [J], 魏京广;代建国;金刚;霍光华;张平因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
6 种农业特种养殖动物肉中18 种氨基酸含量分析
6 种农业特种养殖动物肉中18 种氨基酸含量分析【摘要】本研究旨在分析6种农业特种养殖动物肉中的18种氨基酸含量，探讨其营养价值及区别。
通过对样品的选择和氨基酸含量分析方法的应用，我们获得了详细的结果数据，并进行了深入的分析和讨论。
研究发现不同动物肉中的氨基酸含量存在较大差异，对于人体健康具有重要的营养意义。
在实验过程中我们也注意了一些关键的实验事项，确保了结果的准确性和可靠性。
综合研究结果，我们总结出了各种动物肉中氨基酸含量的特点，并展望了未来的研究方向和发展前景。
本研究对于指导人们合理膳食、提升动物肉品质具有一定的理论和实践意义。
【关键词】农业特种养殖动物肉、氨基酸含量、分析、样品选择、方法、结果、讨论、注意事项、研究目的、研究意义、结论、展望。
1. 引言1.1 研究目的本文旨在研究6种农业特种养殖动物肉中18种氨基酸的含量分析，旨在为农业生产和食品安全领域提供数据支持。
通过分析这些动物肉中氨基酸的含量，有助于了解其营养价值和品质特性，为消费者选择和生产者经营提供科学依据。
比较不同动物肉中氨基酸的含量差异，可以为畜禽深加工和产品开发提供参考，丰富农产品品种和提高附加值。
针对不同动物肉中氨基酸含量的差异进行分析，也可以为生产技术和饲养管理提供指导，促进养殖业的可持续发展。
本研究旨在全面分析6种农业特种养殖动物肉中18种氨基酸的含量，探讨其在营养学和生产实践中的应用前景，为相关领域的决策者和从业者提供科学依据和参考意见。
1.2 研究意义农业特种养殖动物肉中氨基酸含量的研究具有重要的意义。
氨基酸是构成蛋白质的基本组成成分，对于动物生长发育至关重要。
通过研究不同农业特种养殖动物肉中的氨基酸含量，可以为饲料配方提供科学依据，确保动物获得足够的营养，在提高养殖效益的同时也能减少资源浪费。
研究农业特种养殖动物肉中的氨基酸含量有助于了解不同品种或不同养殖环境下动物肉质的差异，为肉质品质的改进提供参考。
不同氨基酸的含量及比例对肉质的口感、嫩度、鲜味等方面都有影响，通过研究可以优化肉质特性，提高产品的市场竞争力。
柱前衍生化结合气质联用同时测定糖尿病肾病大鼠血浆中18种氨基酸含量
柱前衍生化结合气质联用同时测定糖尿病肾病大鼠血浆中18种氨基酸含量柏璐;吴晓雯;杜岩;郑笑笑;郭梦喆;季帅;徐圣秋;汤道权【期刊名称】《徐州医学院学报》【年(卷),期】2018(038)004【摘要】目的建立同时测定大鼠血浆中18种氨基酸的柱前衍生化结合气质联用(GC-MS)分析方法.方法大鼠血浆用氯甲酸乙酯衍生化后进行GC-MS分析,条件如下:Agilent HP-5MS UI(60 m×0.25 mm ×0.25μm)柱为固定相;程序升温;进样口温度240℃;不分流模式进样;载气为高纯氦气,流速设为1.0 ml·min-1 .采用电子轰击离子源;选择离子临测模式;离子源温度230℃;电子能量70 eV;溶剂延迟时间5.45 min.结果 18种氨基酸得到较好分离,且在1.6 ～2 400 μmol·L-1范隔内其浓度与响应值具有良好的线性关系(r2＞0.9985);批内及批间精密度(RSD)均小于10％;样品平均加样回收率及基质效应分别为72.17％～ 111.4％和90.42％～114.6％;血浆室温放置8h、-80℃放置28天,血浆衍生化后4℃放置12h、-20℃放置24 h均稳定;和正常大鼠相比,除组氨酸和脯氨酸外,糖尿病大鼠血浆中其他16种氨基酸含量均发生了显著变化.结论该方法简便易操作、准确度高、特异性好,而且该衍生化产物稳定、线性范围宽、基质效应小,可用于正常及糖尿病大鼠血浆中氨基酸的测定.【总页数】6页(P230-235)【作者】柏璐;吴晓雯;杜岩;郑笑笑;郭梦喆;季帅;徐圣秋;汤道权【作者单位】徐州市第一人民医院药剂科,江苏徐州221002;连云港市第一人民医院药剂科,江苏连云港222002;徐州医科大学药物分析教研室,江苏徐州221004;徐州医科大学药物分析教研室,江苏徐州221004;徐州市第一人民医院药剂科,江苏徐州221002;徐州医科大学药物分析教研室,江苏徐州221004;徐州医科大学药物分析教研室,江苏徐州221004;徐州医科大学药物分析教研室,江苏徐州221004;徐州市第一人民医院药剂科,江苏徐州221002;徐州医科大学药物分析教研室,江苏徐州221004【正文语种】中文【中图分类】R917【相关文献】1.柱前衍生化RP-HPLC测定白芷中氨基酸含量 [J], 牛延菲;徐怡;普冰清;刘慧;游燕2.柱前衍生化反相高效液相色谱法测定蝉蜕中3种氨基酸含量 [J], 张楠;刘劲松;王国凯;郑娟;刘松照;3.柱前衍生化反相高效液相色谱法测定蝉蜕中3种氨基酸含量 [J], 张楠;刘劲松;王国凯;郑娟;刘松照4.柱前衍生化HPLC同时测定霍山石斛中13种游离氨基酸含量 [J], 郝经文;王荣花;徐文冬;石敏珠;陈乃富;陈乃东5.柱前衍生化结合气质联用同时测定糖尿病肾病大鼠血浆中18种氨基酸含量 [J], 柏璐;吴晓雯;杜岩;郑笑笑;郭梦喆;季帅;徐圣秋;汤道权;;;;;;;;;;因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
19种天然氨基酸分析-PITC衍生法
迪马科技18种天然氨基酸分析说明(异硫氰酸苯酯柱前衍生法)分析条件色谱柱: Diamonsil AAA 250×4.6 mm ，5 μm （Cat.#：99751） 流动相A: 0.05 mol/L 乙酸钠水溶液(冰乙酸调节pH 值为6.50 ± 0.05) 流动相B:甲醇 : 乙腈 : 水=20 : 60 : 20(V : V : V) 流速:1.0 mL/min 检测波长: UV 254 nm柱温: 45 ℃进样体积:10 μL 样品溶液: 量取200 μL 19种氨基酸+NH 3混合使用液(胱氨酸浓度为 1.0mmol/L ，其他氨基酸浓度为2.0 mmol/L)，置于1.5 mL 塑料离心管中，混匀，再加入100 μL 1 mol/L 三乙胺-乙腈溶液和100μL 0.2mol/L 异硫氰酸苯酯-乙腈溶液，混匀，室温反应1 h ，然后加入400μL 正己烷，旋紧盖子后剧烈振荡5~10 s ，静置分层，取200μL 下层溶液与800 μL 水混合，0.22 μm 针式过滤器过滤，待分析。
梯度程序时间/min0 39 40 45 46 60 流动相A/%95 52 0 0 95 95 流动相B/%5 48 100 100 5 5迪马科技18种天然氨基酸、正亮氨酸以及NH 3(氨)-异硫氰酸苯酯衍生物的液相色谱图10203040Time (min)12345678910111213141516171819201 Asp(天冬氨酸)2 Glu(谷氨酸)3 Ser(丝氨酸)4 Gly(甘氨酸)5 His(组氨酸)6 Arg(精氨酸)7 Thr(苏氨酸)8 Ala(丙氨酸)9 Pro(脯氨酸) 10 NH 3(氨) 11 Tyr(酪氨酸) 12 Val(缬氨酸) 13 Met(蛋氨酸) 14 Cys(胱氨酸) 15 Ile(异亮氨酸) 16 Leu(亮氨酸) 17 Nle(正亮氨酸) 18 Phe(苯丙氨酸) 19 Trp(色氨酸) 20 Lys(赖氨酸)色谱柱使用注意事项1、预处理：进行氨基酸分析前，首先用15%甲醇水溶液和纯甲醇冲洗HPLC 系统，流速设定在0.5-1.0 mL/min 范围内，冲洗体积均是60 mL ；然后将氨基酸专用柱与HPLC 系统连接，用30 mL 纯甲醇和15 mL15%甲醇水溶液冲洗色谱柱和系统，流速设定在0.5-1.0 mL/min 范围内；最后用流动相进行平衡，直到基线稳定。
甜玉米中游离糖及游离氨基酸的HPLC测定
甜玉米中游离糖及游离氨基酸的HPLC测定作者：马玉玲牛丽影李大婧刘春泉陈计峦来源：《江苏农业科学》2016年第03期摘要：采用高效液相色谱法（HPLC）对乳熟期甜玉米晶甜5号中的游离糖、氨基酸进行测定，检测到4种游离糖、18种游离氨基酸。
游离糖为果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖，含量分别为18.54、28.36、56.13、0.09 mg/g。
游离氨基酸中，甜味氨基酸丙氨酸的含量（9.70 mg/g）最高，其次为鲜味氨基酸谷氨酸（3.19 mg/g）、天冬酰胺（2.62 mg/g），功能性氨基酸γ-氨基丁酸的含量为0.18 mg/g。
本研究结果将为甜玉米的风味及营养评价提供依据。
关键词：甜玉米；游离糖；游离氨基酸；测定中图分类号： TS201.2 文献标志码： A 文章编号：1002-1302（2016）03-0300-03甜玉米因其味甜、口感鲜嫩、营养丰富而深受消费者喜爱，被称为果蔬玉米[1]。
游离糖、游离氨基酸是果蔬中重要的呈味成分和风味前体物[2]，也是贮藏加工过程中易损失变化的成分。
目前，我国对玉米中糖的研究大多关于还原糖或总糖量计[3]；对氨基酸的测定多为水解氨基酸，即总氨基酸或蛋白氨基酸[4]，尚无游离氨基酸的报道。
本研究以超甜玉米晶甜5号[5]为材料，采用高效液相色谱法（HPLC）定性定量测定玉米籽粒中游离糖、游离氨基酸的含量，为鲜食玉米的风味及营养评价提供依据。
1 材料与方法1.1 材料晶甜5号甜玉米采自江苏省南京市六合区农业科学院种植基地，于吐丝后22 d采摘。
采收当日手工去苞皮，分离籽粒，混合后于液氮中速冻，置于-20 ℃冰箱中冻藏待测。
1.2 试剂氨基酸混合标样、3-巯基丙酸、邻苯二甲醛（OPA）购自美国Sigma公司。
考马斯亮蓝-G250、氯仿、甲醇、硼酸、磷酸二氢钠、氢氧化钠、无水乙醇、磷酸均为分析纯，购自国药集团化学试剂有限公司。
色谱级乙腈、甲醇购自美国天地公司。
1.3 仪器与设备HPLC1200型高效液相色谱仪（美国Agilent科技有限公司），主要包括在线真空脱气机、四元梯度洗脱泵、柱温箱、二级管阵列检测器（diode array detector，DAD）、示差折光检测器（refractive index detector，RID）。
18种氨基酸检测方法
18种氨基酸检测方法【原创版4篇】目录（篇1）I.氨基酸检测方法概述1.氨基酸是生命中必不可少的有机化合物2.18种氨基酸是人体必需的营养物质3.氨基酸检测方法的研究意义II.氨基酸检测方法介绍1.传统检测方法2.现代检测方法3.新型检测方法III.氨基酸检测方法优缺点分析1.传统检测方法的优缺点2.现代检测方法的优缺点3.新型检测方法的优缺点IV.氨基酸检测方法应用前景展望1.在医疗领域的应用2.在食品行业的应用3.在其他领域的应用正文（篇1）一、氨基酸检测方法概述氨基酸是生命中必不可少的有机化合物，它们在人体内扮演着重要的角色。
人体内有18种氨基酸，其中一部分是由身体自身合成的，而其余的部分必须从食物中摄取。
因此，氨基酸检测方法的研究对于了解人体健康状况具有重要意义。
传统的氨基酸检测方法较为繁琐，需要耗时费力，而现代的检测方法则更加快速、准确、简便。
例如，高效液相色谱法、质谱法等。
此外，近年来还出现了一些新型的检测方法，如表面增强拉曼光谱法、近红外光谱法等。
二、氨基酸检测方法介绍1.传统检测方法：传统的氨基酸检测方法主要包括化学法、电泳法、色谱法等。
化学法是通过测定氨基酸的化学反应来测定其含量，但操作繁琐、误差较大；电泳法是通过氨基酸在电场中的迁移率来测定其含量，但需要消耗大量的样品；色谱法是通过氨基酸在色谱柱中的分离来测定其含量，但需要消耗大量的样品。
2.现代检测方法：现代的氨基酸检测方法主要包括高效液相色谱法、质谱法等。
高效液相色谱法是一种基于色谱分离技术的分析方法，可以快速、准确地分离和测定多种氨基酸；质谱法是一种基于质谱分离技术的分析方法，可以同时测定多种氨基酸，但需要消耗大量的样品。
3.新型检测方法：新型的氨基酸检测方法主要包括表面增强拉曼光谱法、近红外光谱法等。
表面增强拉曼光谱法是一种基于拉曼散射技术的分析方法，可以在不破坏样品的情况下快速、准确地测定多种氨基酸；近红外光谱法是一种基于光学技术的分析方法，可以在不破坏样品的情况下快速、准确地测定多种氨基酸。