凝乳法测胃蛋白酶合剂活力的评价
胃蛋白酶合剂

北京雷根生物技术有限公司
胃蛋白酶合剂
简介:
高分子溶液剂是指高分子化合物溶解于溶剂中制成的均相液体制剂,其制备均要经过有限溶胀和无线溶胀过程,有限溶胀静置即可完成,无限溶胀则需搅拌或加热。
胃蛋白酶等高分子药物,宜采用分次撒布于水面或将药物黏附于已湿润的器壁上,使之迅速自然溶胀而胶溶。
Leagene 胃蛋白酶合剂主要由胃蛋白酶、稀酸、甘油等组成,其活力可通过消化牛乳进行测定,胃蛋白酶活力愈强,凝固牛乳愈快。
凡胃蛋白酶能使牛乳液在60s 未凝固时的活力强度称为1活力单位,最后可换算到每1ml 供试液的活力单位。
组成:
操作步骤(仅供参考):
(一)活力实验
精密吸取本品置于试管中,另用吸管加入牛乳乙酸钠混合液,迅速加毕,混匀,记录凝固牛乳所需的时间(25℃)。
注意事项:
1、 胃蛋白酶合剂恢复至室温后再使用,但应避免反复冻融。
2、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期: 12个月有效。
相关:
编号 名称 R01201 Storage 胃蛋白酶合剂 100ml -20℃ 使用说明书 1份
编号 产品名称 CC0130 胰蛋白酶-EDTA 溶液(0.25%:0.02%) DC0032 Masson 三色染色液 PE0103 Acr-Bis(30%,29:1) TC0699 葡植物总糖和还原糖检测试剂盒(硝基水杨酸法)。
胃蛋白酶

一:苏玉永,徐楚鸿,吕永宁.多酶微片胶囊中胃蛋白酶的活力测定[J].2004.24(4):214-1252.1.1对照品溶液的制备精密称取经105℃干燥至恒重的酪氨酸对照品适量,加盐酸溶液(取1 moL·L-1盐酸溶液65 mL,加水至1000 mL,摇匀,即得)制成每1 mL中含0.5 mg的溶液,摇匀,备用。
2.1.2供试品溶液的制备取本品5粒,将内容物中的5片粉红色的胃蛋白酶糖衣片置研钵中,研细。
加上述盐酸溶液少许,研磨均匀,移至100 mL量瓶中。
加上述盐酸溶液至刻度,摇匀。
精密量取适量,用上述盐酸溶液制成每1 mL中约含0.2~0.4单位的溶液。
2.1.3测定法取试管6支,其中3支各精密加入对照品溶液1 mL,另3支各精密加入供试品溶液 1 mL,置(37±0.5)℃水浴中,保温 5 min。
精密加入预热至(37±0.5)℃的血红蛋白试液5 mL,摇匀,并准确计时,在(37±0.5)℃水浴中反应10 min。
立即精密加入5%三氯醋酸溶液5 mL,摇匀,滤过。
取续滤液备用。
另取试管2支,各精密加入血红蛋白试液5 mL。
置(37±0.5)℃水浴中保温10 min,再精密加入5%三氯醋酸溶液5 mL。
其中1支加供试品溶液1 mL,另1支加盐酸溶液1 mL,摇匀,滤过。
取续滤液,分别作为供试品和对照品的空白对照,照分光光度法,在275 nm波长处测定吸收度,见图1,图2。
算出平均值A s和A,按下式计算:式中,As为对照品的平均吸收度;A为供试品的平均吸收度;Ws为对照品溶液每1 mL中含酪氨酸对照品的量μg;n为供试品稀释倍数。
在上述条件下,每分钟能催化水解血红蛋白生成1μmoL酪氨酸的酶量,为一个蛋白酶活力单位。
2.2干扰试验按照处方配制无胃蛋白酶的空白样品,取适量,按2.1项下方法操作,结果在275 nm波长处几乎无吸收,说明处方中其他组分对胃蛋白酶活力的测定无干扰。
胃蛋白酶测定

胃蛋白酶测定文章目录*一、胃蛋白酶测定的基本信息1. 定义2. 专科分类3. 检查分类4. 适用性别5. 是否空腹*二、胃蛋白酶测定的正常值和临床意义1. 正常值2. 临床意义*三、胃蛋白酶测定的检查过程及注意事项1. 检查过程2. 注意事项*四、胃蛋白酶测定的相关疾病和症状1. 相关疾病2. 相关症状*五、胃蛋白酶测定的不适宜人群和不良反应1. 不适宜人群2. 不良反应胃蛋白酶测定的基本信息1、定义胃蛋白酶的前身是胃蛋白酶原,由胃底腺主细胞分泌,在胃酸中转化为胃蛋白酶。
后者将蛋白质在胃内进行初步消化。
胃蛋白酶测定胃液化学检查项目之一。
人类及哺乳动物胃液中的蛋白酶与凝乳酶为同一种酶,因此可利用胃蛋白酶使乳液发生凝固的速度,间接推算出胃蛋白酶的含量,此法简便、易操作。
2、专科分类消化3、检查分类生化检查4、适用性别男女均适用5、是否空腹空腹胃蛋白酶测定的正常值和临床意义1、正常值40~60U/ml。
2、临床意义异常结果:胃溃疡时PP多为正常;十二指肠溃疡时明显升高;慢性十二指肠炎、胃扩张、慢性胃炎时活性减弱;恶性贫血时极低或无活性。
PGⅠ、PGⅡ含量升高提示消化性溃疡发病的危险性增加,PGⅠ含量增高对判断溃疡活动有意义。
PGⅠ/PGⅡ比值在胃癌和萎缩性胃炎时均明显降低,提示此项检查可作为萎缩性胃炎的一种追查指标和早期发现胃癌的筛选方法。
胃蛋白酶测定的检查过程及注意事项1、检查过程取0.5mol/L醋酸缓冲液95ml,加入0.2mol/L氯化钙溶液5ml,再加入脱脂乳20g液体,即为基质液。
取基质液5ml,用0.05mol/L枸橼酸盐缓冲液稀释至6倍,加入胃液0.2ml混合。
立即置于35.5℃水浴中,立即用力摇动使其混合,并同时开动秒表,然后将试管反复倾斜、直立,同时注意铅管壁流下的乳液,当出现小片状干酪样物时,停止秒表,观察凝乳开始附着于管壁的时间,记录时间。
胃蛋白酶单位的计算:在上速条件下,使5毫升牛乳一醋酸混合液于60秒钟发生凝固的蛋白酶为一个单位。
蛋白酶活力测定方法

酸性蛋白酶产品概述:蛋白质由氨基酸组成,是自然界中发现的最复杂的有机化合物之一。
由盐酸和蛋白酶分解成易被高等动物的肠道和微生物有机体的细胞膜吸收的氨基酸。
包括人类在内的每种动物,必须要有足够的蛋白质来维持自身生长,来生成每个细胞所必需的氨基酸,一些特种蛋白质还是某些特殊细胞、腺体分泌物、酶和激素的功能性组成元素。
蛋白酶是指一些有催化功能的酶,能够水解(断裂)蛋白质,因此也被称为蛋白水解酶。
蛋白水解酶在许多的生理和病理过程中发挥着重要作用,在食品和乳品加工业也有着广泛应用。
工作机理蛋白水解酶制剂本产品能在酸性条件下水解蛋白质食品中的缩氨酸键,释放氨基酸或者多肽。
在酒精、葡萄酒、果汁、啤酒、黄油和酱油生产中,添加酸性蛋白酶可澄清发酵液中的雾气。
酵母在发酵阶段的生长可以通过悬浮蛋白质转化的氨基酸来加以促进,从而加速发酵并提高产量。
本产品是一种酸性蛋白酶制剂,在酸性条件下具有较高活性,由酸性蛋白酶高产菌株——曲霉菌深层发酵而成。
它广泛应用于饲料、纺织、废水处理和果汁提纯方面。
酸性蛋白酶(Acid protease )是指蛋白酶具有较低的最适pH,而不是指酸性基团存在于酶的活性部位,酸性蛋白酶的最适PH从2左右(胃蛋白酶)到4左右。
从酶的活力-PH曲线分析,在酶的活性部位中含有一个或更多的羟基。
这一类蛋白酶中研究最彻底的是胃蛋白酶。
(酸性蛋白酶537容易失活)简介:酸性蛋白酶是由隆科特黑曲霉优良菌种经发酵精制提炼而成,它能在低PH条件下,有效水解蛋白质,广泛应用于酒精、白酒、啤酒、酿造、食品加工、饲料添加、皮革加工等行业。
1、产品规格:,规格有5万u/g~10万u/g液体型为黑褐色液体,规格有50000u/ml~10000u/ml.2、酶活力定义:一个酶活力单位是1g酶粉或1ml酶液在40℃,PH3.0条件下,1分钟水解酪素产生1ug酪氨酸为一个酶活力单位(u/g或u/ml)特性1、温度范围为:最适温度范围为40℃-50℃2、PH为:最适PH范围为2.5~3.5使用方法1、白酒工业:本品用以淀粉为原料的生产酒精及白酒行业,提高出酒率0.25%个酒分,提高发酵速度。
液体药剂的制备实验报告

液体药剂的制备实验报告篇一:实验报告4:(药学专业、09制药)液体制剂的制备药剂学实验实验报告实验四液体制剂的制备(药学专业、09制药工程)一、实验目的和要求1. 掌握溶液型液体制剂的种类及其概念与特点。
2. 掌握几种典型的溶液型液体制剂的制备方法、质量标准及其检查方法。
3. 了解低分子、高分子溶液型液体制剂中常用附加剂的正确使用,作用机制及其常用量。
二、实验内容和原理1. 实验内容(1)低分子溶液型液体制剂的制备实验1:芳香水剂(薄荷水)的制备(分散溶解法)以薄荷油、滑石粉(或轻质碳酸镁、活性炭)等为原料,制备芳香水剂(薄荷水)。
实验2:复方碘溶液的制备(助溶法)以碘、碘化钾为原料,通过助溶法,制备复方碘溶液。
实验3:硫酸亚铁溶液剂的制备(溶解法)以硫酸亚铁、枸橼酸为原料,通过冷溶法制备糖浆剂。
(2)胶体溶液型液体制剂的制备实验4:胃蛋白酶合剂的制备(溶解法)以胃蛋白酶、甘油等为原料,制备高分子型液体制剂胃蛋白酶合剂。
2. 实验原理(请根据实验教材自己补充,包括助溶法的原理;高分子溶液剂的定义,其热力学稳定性等。
)三、主要仪器设备1. 实验材料:薄荷油、滑石粉、轻质碳酸镁、活性炭、碘、碘化钾、胃蛋白酶、硫酸亚铁、新鲜牛奶、冰醋酸、氢氧化钠。
2. 设备与仪器:恒温水浴箱、研钵、具塞玻璃瓶、烧杯、量筒等。
四、实验步骤、操作过程(根据实验过程填写,必须列出处方)实验1:教科书44页芳香水剂(薄荷水)的制备(分散溶解法)实验2:教科书45页复方碘溶液的制备(助溶法)实验3:教科书45页硫酸亚铁糖浆(溶解法制备)实验4:教科书47页胃蛋白酶合剂的制备,并按照48页附录方法,测定所得酶制剂的活力。
五、实验结果与分析实验1:薄荷油的制备,比较用三种不同分散剂制备的液体制剂的异同,将结果记录于表2-1中。
滑石粉轻质碳酸镁活性炭实验2:复方碘溶液,描述成品外观性状,观察碘化钾溶解的水量与加入碘的溶解速度。
实验3:硫酸亚铁糖浆描述成品外观形状,讨论冷溶法存在的不足。
[VIP专享]饲用酶制剂的酶活检测方法及评定
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饲用酶制剂的酶活检测方法及评定随着我国畜牧业的发展和生物工程技术的不断进步,酶制剂在饲料工业中的应用越来越多。
由于酶制剂能够消除饲料中的某些抗营养因子的负面作用,提高饲料消化率,改善动物生产性能,降低生产成本,因此日益受到饲料界的重视。
但是,由于酶制剂来源比较复杂、分子结构不明确,分离提纯困难等多种原因,使这类产品有国家标准的不多,即使有国标也存在一些问题。
给广大养殖用户和生产企业带来很大不便。
本文简单介绍一下常用的酶活测定方法及测定过程的影响因素,仅供广大饲料工作者提供参考。
1 酶制剂的定义及分类所谓的酶制剂就是通过产酶微生物发酵工程或含酶的动、植物组织提取技术生产加工而成,具有一种或多种底物清楚的酶催化活性,有助于改善动物对饲料营养成分的消化、吸收等,并有功效的生物学评定依据,符合安全性要求,作饲料添加剂用的酶制剂产品(NY/T 722-2003)。
工业上应用的酶制剂大多为水解酶,按作用底物的不同,可分为淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、植酸酶、木聚糖酶、果胶酶、葡聚糖酶、纤维素酶等。
按动物体内是否分泌,分为消化酶和非消化酶两大类。
消化酶指动物自身能够分泌的淀粉酶、蛋白酶和脂肪酶等,在幼龄动物或特殊生理阶段时,动物也存在消化酶分泌不足需要外源供给的情况。
非消化酶是指动物自身不能够分泌或很少分泌,必须由外源供给的酶,这类酶能消化动物自身不能消化的物质或降解一些抗营养因子,主要有植酸酶、木聚糖酶、果胶酶、葡聚糖酶、纤维素酶等。
2 常见的酶活测定方法通常酶制剂活性的检测是采用实验室分析手段来进行评价,它可以用来筛选优质酶制剂、确定复合酶制剂的最佳组方及确定产品的最佳添加量等,酶制剂实验室评价技术是目前饲料厂家应用最为广泛的一种方法。
其操作相对简单,检测所用时间短,便于生产实践应用。
酶活测定结果虽不能完全反映酶的使用效果,但通过检测至少可以避免使用劣质的酶制剂。
我国饲料工业标准中已经确立了饲用植酸酶(GB/T 18634)、纤维素酶(NY/T912)、β—葡聚糖酶(NY/T 911)的测定方法。
药剂学实验——精选推荐

实验一芳香水剂(薄荷水)的制备——分散溶解法【处方】薄荷油0.2ml滑石粉 1.5g(或活性炭)1.5g蒸馏水加至100.0 ml【制备】1、称取1.5g滑石粉置于干燥研钵中,加0.2ml薄荷油,充分研匀。
2、量取蒸馏水95ml,分次加到研钵中,先加少量,研匀后再逐渐加入其余部分的蒸馏水,每次都要研匀,最后留下少量蒸馏水。
3、将混合液移入锥形瓶中,用余下的蒸馏水将研钵中的滑石粉冲洗入锥形瓶,保鲜膜封口,剧烈振摇10分钟。
4、用润湿过的滤纸反复过滤至滤液澄明,再通过滤器添加适量蒸馏水至100 ml,即得。
5、另用活性炭1.5g按上法制备薄荷水剂。
记录不同分散剂制备薄荷水观察到的结果。
【注意】1、本品为薄荷油的饱和水溶液【约0.05%(ml/ml)】,处方用量为溶解量的4倍,配制时不能完全溶解。
2、滑石粉等分散剂,应与薄荷油充分研匀,以利加速溶解过程。
3、蒸馏水应是新沸放冷的蒸馏水。
【实验结果与讨论】用不同分散剂制得薄荷水的性状【思考题】制备薄荷水时加入滑石粉、活性炭的作用是什么?还可选用哪些具有类似作用的物质?欲制得澄明液体的操作关键为何?实验二薄荷油-β-环糊精包合物的制备【处方】薄荷油1ml β-环糊精4g 无水乙醇5ml 蒸馏水50ml【制备】1、β-环糊精饱和水溶液的制备:称取β-环糊精4g,置100ml具塞锥形瓶中,加入蒸馏水50 ml,加热溶解,降温至50℃,备用。
2、包合物的制备:缓慢滴入1 ml薄荷油,恒温搅拌2.5h。
3、冷藏24h,待沉淀完全。
4、抽滤,用无水乙醇5 ml洗涤沉淀3次至表面近无油渍。
5、将包合物置干燥器中干燥,称重,计算收率。
【验证】薄层色谱法(TLC)1、硅胶G板的制作:硅胶G:0.3%羧甲基纤维素钠水溶液=1g:3ml,混合调匀,铺板,110℃活化1h,备用。
2、样品的制备:取薄荷油-β-环糊精包合物0.5g,加95%乙醇2ml溶解,过滤,滤液为样品a;另取薄荷油2滴,加95%乙醇2ml溶解,得样品b。
肃北高寒草地土壤中产凝乳酶细菌的分离与初步鉴定

肃北高寒草地土壤中产凝乳酶细菌的分离与初步鉴定冯平;翟丹云;刘兴龙;赵旺【摘要】采用平板分离培养基从酒泉肃北高寒草地土壤中分离出3株高产凝乳酶细菌,分别标记为Ⅰ1.21、Ⅰ1.212、Ⅳ1.11.对3株细菌进行初步生理生化鉴定,结果表明:3株细菌均利用葡萄糖、蔗糖、麦芽糖产酸而不产气,不利用乳糖和甘露醇;H2O2酶试验、石蕊牛乳试验均为阳性;有芽孢.在麸皮汁培养基中进行培养,测定酶活,确定发酵到第四天时凝乳酶活力最高,此时蛋白水解活力相对较低.为筛选出产凝乳酶活力较高而蛋白水解能力较低的菌株作为工业化生产菌株,需要进一步进行生理生化反应研究.【期刊名称】《农业科技与信息》【年(卷),期】2019(000)007【总页数】6页(P49-54)【关键词】高寒草地;土壤;凝乳酶;分离;鉴定【作者】冯平;翟丹云;刘兴龙;赵旺【作者单位】甘肃省商业科技研究所有限公司,甘肃兰州730010;甘肃省商业科技研究所有限公司,甘肃兰州730010;酒泉职业技术学院,甘肃酒泉735000;甘肃丝路颐方食品有限公司,甘肃酒泉735000【正文语种】中文【中图分类】Q93-335凝乳酶是奶酪生产中使牛乳凝固的关键性酶,作用是切断κ- 酪蛋白Phe 105~Met 106 的肽键,形成副κ- 酪蛋白及糖巨肽,在Ca2+存在下使乳凝固,形成凝块[1]。
奶酪是一种营养丰富、食用方便、对人体非常有益的食品,生产1 kg 奶酪大约需要10 kg 牛奶,因此又被誉为“奶黄金”[2]。
纯凝乳酶比胃蛋白酶有较高的凝乳特性,在奶酪成熟期间蛋白质分解较弱,不会因蛋白质过度分解产生苦味[3]。
动物凝乳酶以其凝乳活力与蛋白水解能力的高比值而成为制作奶酪的首选酶[4]。
但是随着世界奶酪产业不断发展壮大,每年宰杀4000 万头犊牛以获得凝乳酶的方法显然是与现代工业发展极不协调,同样也造成全球性小牛短缺。
植物性凝乳酶来源广泛,但其蛋白水解能力强,并且受时间、地域、生长周期长等条件限制,难以发展[5]。
复合凝乳酶辅助根除幽门螺杆菌疗效观察

复合凝乳酶辅助根除幽门螺杆菌疗效观察周焕明;陈辉;陈鹏【摘要】目的观察复合凝乳酶辅助奥美拉唑、克拉霉素、阿莫西林根除幽门螺杆菌疗效及安全性.方法 A组(治疗组):奥美拉唑20 mg、阿莫西林500 mg,克拉霉素500 mg,2次/d,复合凝乳酶350 mg,3次/d,共7 d.B组(对照组):奥美拉唑20 mg、阿莫西林500 mg,克拉霉素500 mg,2次/d,共7 d.结果 A组(治疗组)HP根除率91.76%,B组(对照组)79.52%(P<0.05);溃疡总有效率治疗组95.29%,对照组91.56%,差异无统计学意义(P>0.05);治疗组不良反应明显少于对照组(P<0.05).结论两组溃疡愈合率相当,但复合凝乳酶提高了序贯疗法的Hp根除率,且不良反应少,耐受性好.【期刊名称】《中国现代药物应用》【年(卷),期】2011(005)018【总页数】2页(P57-58)【关键词】幽门螺杆菌【作者】周焕明;陈辉;陈鹏【作者单位】277500,山东省滕州市中心人民医院消化内科;277500,山东省滕州市中心人民医院消化内科;277500,山东省滕州市中心人民医院消化内科【正文语种】中文三联疗法为根除Hp治疗的一线方案[1-4],近年来,面临着耐药率高,疗效下降问题。
为探索提高疗效,笔者自2008年1月至2010年10月采用复合凝乳酶辅助奥美拉唑+克拉霉素+阿莫西林三联根除有Hp感染的消化性溃疡患者168例,现将结果报告如下。
1 资料与方法1.1 一般资料入选病例符合以下标准:①年龄为14~78岁;②经胃镜检查诊断为十二指肠球部溃疡(DU)或胃溃疡(G U);③溃疡处于A或H期;溃疡直径>3 mm,数目<2个;④Hp感染的诊断:所有患者经14C-尿素呼气试验(14C-UBT)及病理检查证实为Hp阳性;⑤试验前1个月未接受质子泵抑制药、非甾体抗炎药、铋剂和抗生素治疗;⑥自愿受试,并排除以下情况:①有严重心、肺、肝、肾脏疾患;②妊娠及哺乳期患者;③对本试验用药过敏者;④恶性肿瘤患者。
蛋白酶凝乳特性研究(论文)

蛋白酶凝乳特性研究摘要探讨了反应温度、滴定酸度、蛋白酶添加量、CaCl2加入量等因素对胃蛋白酶凝乳作用的影响规律,确定了用胃蛋白酶生产干酪时的主要工艺参数,反应温度39℃;滴定酸度24T;CaCl2加入量0.015%;加酶量随酶活而定。
关键词蛋白酶凝乳凝乳酶干酪酶活正文1 前言传统的酶法干酪加工时所用凝乳酶为小牛皱胃酶,其数量有限,价格昂贵。
动物性胃蛋白酶取自成年动物 (如猪、牛等 )的胃,因其来源广,成本较低.故国外该酶在干酪生产中已得到了一定程度的应用但国内还未见用蛋白酶作为皱胃酶代用品生产干酪的系统研究报道。
本研究旨在探讨影响蛋白酶凝乳作用的因素,研究其规律,确定出基本工艺参数,为蛋白酶在干酪生产中的应用提供依据。
通过酶学实验研究,找出木瓜蛋白酶、蛋白酶的最适温度、最适pH值、最适底物浓度以及那些金属离子对蛋白酶具有抑制作用、哪些离子具有促进作用。
画出趋势图或用表格加以说明。
2 实验部分2.1实验材料优质脱脂乳2.2实验药品和器皿2.3试剂(1)配制浓度为100g/L的脱脂乳1000ml,混匀后待用。
(6组)(2)配制浓度为10g/L的木瓜蛋白酶液和浓度为2g/L胃蛋白酶溶液各500ml,混匀后待用。
(6组)(3)配制0.1mol/L NaOH和0.1mol/L的HCl溶液各1000ml,用于调节溶液pH值。
(6组)3 实验步骤3.1木瓜蛋白酶(胃蛋白酶)凝乳活力的测定取 5mL100g.L-1的脱脂乳,在65℃下保温5min,加入0.5mL10g.L-1的木瓜蛋白酶液(或胃蛋白酶液),迅速混合均匀,准确记录从加入酶液到乳液凝固的时间(s)。
把40min凝固1mL100g.L-1的脱脂乳的酶量定义为一个索氏单位(Soxhletunit),并以相对活性(RU)表示各因素的影响效果。
SU=(2400/T)×(5 / 0.5)。
式中:T为凝乳时间(s)RU(%)=(各因素下SU / 最大SU)×1003.2 酶的最适凝乳温度的测定:分别在55,65,75,85, 95℃下测定酶凝乳活性。
药剂学实验——精选推荐

药剂学实验实验⼆溶液型液体制剂的制备⼀、实验⽬的1.掌握液体制剂制备过程的各项基本操作。
2.掌握常⽤溶液型液体制剂制备⽅法、质量标准及检查⽅法。
3.了解液体制剂中常⽤附加剂的正确使⽤、作⽤机制及常⽤量。
⼆、实验原理(⼀)溶液型液体制剂的概念液体制剂(liquid pharmaceutical preparations)系指药物分散在适宜的分散介质中制成的可供内服或外⽤的液体形态的制剂。
溶液型液体制剂分为低分⼦溶液型和⾼分⼦溶液型。
常⽤溶剂为⽔、⼄醇、丙⼆醇、⽢油或混合液、脂肪油等。
1.低分⼦溶液剂系指⼩分⼦药物以分⼦或离⼦状态分散在溶剂中形成的均相的可供内服或外⽤的液体制剂。
有溶液剂、芳⾹⽔剂、糖浆剂、⽢油剂、酊剂、醑剂和涂剂等。
溶液型液体制剂为澄明液体,溶液中药物的分散度⼤,能较快的吸收。
2.⾼分⼦溶液剂系指⾼分⼦化合物溶解于溶剂中制成的均相液体制剂。
⾼分⼦溶液剂以⽔为溶剂的,称为亲⽔性⾼分⼦溶液剂,或称胶浆剂。
以⾮⽔溶剂制备的⾼分⼦溶液剂,称为⾮⽔性⾼分⼦溶液剂。
由于⾼分⼦的分⼦⼤⼩较⼤(100nm以下),因此也属于胶体。
⾼分⼦溶液剂属于热⼒学稳定系统。
(⼆)溶液型液体制剂的制备⽅法低分⼦溶液型液体制剂的制备⽅法主要有溶解法、稀释法和化学反应法。
其中溶解法最为常⽤。
芳⾹⽔剂和醑剂等制剂的制备过程中,如以挥发油和化学药物为原料时多采⽤溶解法和稀释法,以药材为原料时多⽤⽔蒸⽓蒸馏法。
酊剂的制备还可以采⽤渗漉法。
胶体溶液和⾼分⼦溶液的配制过程基本上与低分⼦溶液型液体制剂类同,但将药物溶解时宜采⽤分次撒布在⽔⾯或将药物粘附于已湿润的器壁上,使之迅速地⾃然膨胀⽽胶溶。
根据液体制剂的不同的⽬的和需要可加⼊⼀些必要的添加剂,如增溶剂、助溶剂、潜溶剂、抗氧剂、矫味剂、着⾊剂等附加剂。
制备时,通常液体药物量取⽐称取⽅便。
量取体积单位常⽤ml或L,固体药物是称重,单位是g或kg。
相对密度有显著差异的药物量取或称取时,需要考虑其相对密度。
产蛋白酶菌株的筛选与酶活力的测定【文献综述】

文献综述生物科学产蛋白酶菌株的筛选与酶活力的测定摘要[摘要]本文主要按照实验设计步骤从海水中筛选出可以产蛋白酶的放线菌,并对获得的放线菌进行初步研究,如形态观察以及酶活力的测定。
从舟山沿海中分离得到几株产蛋白酶的放线菌,并通过酪蛋白平板培养基,水解酪蛋白试验可对菌株的产酶情况进行定性研究,酶活较高的菌株都能产生较大的水解圈。
对其中2株产酶活性较高的菌株进行了以酪蛋白为底物的紫外分光光度法进行酶活性的测定。
[关键词]:蛋白酶;分离纯化;透明圈;酶活力1蛋白酶的简介水解蛋白质肽键的一类酶的总称。
按其水解多肽的方式,可以将其分为内肽酶和外肽酶两类。
内肽酶将蛋白质分子内部切断,形成分子量较小的肽。
外肽酶从蛋白质分子的游离氨基或羧基的末端逐个将肽键水解,而游离出氨基酸,前者为氨基肽酶后者为羧基肽酶[1]。
按其活性中心和最适pH值,又可将蛋白酶分为丝氨酸蛋白酶、巯基蛋白酶、金属蛋白酶和天冬氨酸蛋白酶。
按其反应的最适pH值,分为酸性蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白酶。
工业生产上应用的蛋白酶,主要是内肽酶。
根据蛋白酶对所作用的反应底物的选择性,一种蛋白酶仅能作用于蛋白质分子中一定的肽键。
种类很多,重要的有胃蛋白酶、胰蛋白酶、组织蛋白酶、木瓜蛋白酶和枯草杆菌蛋白酶等。
如胰蛋白酶催化水解碱性氨基酸所形成的肽键。
2蛋白酶的广泛应用蛋白酶广泛存在于动物内脏、植物茎叶、果实和微生物中。
微生物蛋白酶,主要由霉菌、细菌,其次由酵母、放线菌生产。
例如,乳酸菌(lacticacidbacteria,LAB)是一大类能在可利用的碳水化合物发酵过程中产生大量乳酸的细菌,目前已知有200多种LAB[2]。
相当多的LAB是益生菌,其作为益生菌有如下依据:其属于肠道正常菌群,对人和动物的健康是有益的[3]。
在农业、兽医、医学以及食品工业[4、5]中是很重要的。
如果对产蛋白酶的乳酸菌种进行了筛选,并将所产的蛋白酶进行了分离纯化,就可以为酸奶的生产研制和微生态制剂的研发提供更优良的菌种。
蛋白酶活力的测定

为横坐标,绘制标准曲线。
以吸光度值和酪氨酸浓度绘制标准曲线。
以吸光度值和酪氨酸浓度绘制标准曲线。
碱性蛋白酶、中性蛋白酶、 酸性蛋白酶(内肽酶)
二、酶活力和酶促反应速度的关系
PMSF,PefablocSc
PMSF,APMSF,大豆胰蛋白酶抑制物
碱性蛋白酶、中性蛋白酶、 酸性蛋白酶(内肽酶)
以吸光度值和酪氨酸浓度绘制标准曲线。
1mL液体或1g固体酶粉在一定温度、PH下,每分钟水解酪蛋白产生1ug酪氨酸,为一个酶活力单位。
2、待测酶液的制备(称取、溶解、稀释) 于上述各管中各吸取1mL于10mL比色管中,分别加入碳酸钠溶液、1mL Folin试剂使用液。
加预热2%酪蛋白溶液/ mL
此操作是与测定样品的条件保持一致,
用1-6号管的光密度值减去0号管的光密度值。
胰蛋白酶
丝氨酸蛋白酶
作用位点 带有自由氨基的L-氨基酸氨基末端;不能分解由X-Pro、·D或·Q组成 的肽键 无特异性 带有自由氨基酸的L—氨基酸羧基端;不能分解R、P或羟脯氨酸 K,R羧基端 氨基酸羧基端 氨基端双肽,可通过K,R或P氨基端作为第二或第三个氨基酸封闭 在F,T或Y之后 在P-X-G-P肽链中X之后 无特异性 在R之后 在D和半胱氨酸之前 在E或D之后 在K之后 在D-D-D-D-K-肽链中K之后 在R之后 无特异性 在一些R之后 长期孵育时具有广泛特异性 广泛特异性 在K或R之后 无特异性 广泛特异性 无特异性 在非极性残基之前 在K之后
酪蛋白
酪氨酸
钼蓝和钨蓝(蓝色)
2、待测酶液的制备(称取、溶解、稀释)
2酪,蛋2白,双吡啶,11.0酪1(0氨)-菲酸m咯啉L,钼吸蓝和取钨蓝(5蓝m色)L,再用磷酸缓冲溶液稀释定
动物蛋白质饲料中的胃蛋白酶消化性化学分析方法

动物蛋白质饲料中的胃蛋白酶消化性化学分析方法胃蛋白酶(pepsin)是一种主要存在于动物胃液中的消化酶,广泛用于动物蛋白质饲料的消化性分析。
胃蛋白酶能够水解蛋白质为较小的多肽和氨基酸,为动物消化和吸收提供必要的饲料营养。
因此,胃蛋白酶的活性分析对于饲料蛋白质的消化性能评价和饲料配方的优化具有重要的意义。
胃蛋白酶活性的测定方法有多种,主要包括酶活测定法和酶原测定法。
酶活测定法是指测定胃蛋白酶对特定底物的酶解作用产生的产物或酶活的变化,一般以家兔蛋白作为底物测定胃蛋白酶的活性。
酶原测定法则是通过测定胃蛋白酶的酶原(即胰凝乳蛋白酶原)在一定条件下被激活转化为活性胃蛋白酶,进而测定其活性。
本文将重点介绍酶原测定法。
胃蛋白酶活性的测定方法主要包括以下几个步骤:样品准备:将需要测定的样品加入一定量的缓冲溶液中,将其悬浮均匀。
酶原激活:将酶原加入到样品中,并加入适量的激活剂(一般为酸性溶液),使酶原转化为活性的胃蛋白酶。
反应过程:在合适的温度和时间下,使胃蛋白酶在样品中进行酶解作用。
该过程可以通过测定产物生成、底物的消失或酶活的变化来进行监测。
终止反应:加入适量的终止剂,停止胃蛋白酶的酶解作用。
常用的终止剂有酸性溶液。
产物测定:通过测定产物的含量或测定反应前后底物的消失量,来计算胃蛋白酶的活性。
常用的方法有Bihlman法、Anson法和Wu法等。
胃蛋白酶活性的测定需要注意的点:1.选择合适的底物和激活剂,以确保胃蛋白酶的活性转化和胃蛋白酶的酶解速率。
2.确定合适的反应条件,包括温度、pH值和反应时间等参数。
3.注意控制胃蛋白酶的活性在一定范围内,避免过高或过低的活性对测定结果的影响。
4.重复性测定,多次测定样品的活性,以确保结果准确可靠。
总之,胃蛋白酶的消化性化学分析方法是一项重要的技术,可用于评估动物蛋白质饲料的消化性能。
选择合适的测定方法和条件,严格操作实验步骤,可以得到准确的结果,为饲料配方的优化和动物营养的提高提供有力依据。
测定蛋白酶活力实验

测定蛋白酶活力实验一、实验目的1.加深了解酶活力的概念。
2.学习掌握测定蛋白酶活力的方法。
二、实验原理酶活力指酶催化某一特定反应的能力。
其大小可用在一定条件下酶催化反应进行一定时间后,反应体系中底物的减少量或产物的生成量来表示。
酶活力单位是表示酶活力大小的重要指标。
本实验规定酶活力单位(U)为一定条件下每分钟分解1μg 酪氨酸所需的酶量。
实验选用枯草杆菌蛋白酶水解酪蛋白产生酪氨酸的反应体系。
产物酪氨酸在碱性条件下与Folin-酚试剂反应生成蓝色化合物,该蓝色化合物在680nm 处有最大光吸收,其吸光值与酪氨酸含量呈正比。
因此通过测定一定条件下产物酪氨酸的含量变化,可计算出蛋白酶的活力。
三、仪器和试剂仪器:恒温水浴锅、分光光度计、试管及试管架、干燥滤纸、玻璃漏斗。
原料枯草杆菌蛋白酶:称取1g 枯草杆菌蛋白酶粉,用少量0.02mol/L,pH7.5磷酸缓冲液溶解并定容至100mL,震荡15分钟,使充分溶解,干纱布过滤,取滤液冰箱备用。
使用时视酶活力高低用缓冲液适当稀释。
试剂1. Folin-酚试剂:在2L 磨口回流瓶中加入钨酸钠(Na2WoO4 . 2H2O)100g,钼酸钠(Na2WoO4 . 2H2O)25g,蒸馏水700mL,85%磷酸50mL 以及浓盐酸100mL,充分混匀后,微火回流加热10小时。
再加入硫酸锂150g,蒸馏水50mL 和液溴数滴,摇匀后开口继续煮沸15min,以驱赶过剩的溴。
冷却后加蒸馏水定容至1000mL,过滤,溶液呈黄绿色,置于棕色试剂瓶中暗处贮藏。
使用前用标准NaOH 溶液、酚酞为指示剂标定酸度(约为2mol/L),然后加水稀释至1mol/L,即可使用。
2. 0.2mol/L 盐酸溶液3. 0.04mol/L 氢氧化钠溶液4. 0.55mol/L 碳酸钠溶液5. 10%三氯乙酸溶液6. 0.02mol/LpH7.5磷酸缓冲液:称取磷酸氢二钠(Na2HPO4 . 12H2O)7.16g,用水定容至100mL(A 液);称取磷酸二氢钠(Na2HPO4.12H2O)3.12g,用水定容至100mL(B 液)。
胃蛋白酶活力检验方法的改进

为了有利于山羊痘强毒的保存,在本试验中,利用美国VriTis AD2.0型小型冻干柜对山羊痘强毒进行了 冻干试验。现将试验情况报告如下: 1试验材料 1.1毒种山羊痘强毒组织毒,本室保存 1.2山羊2—4齿龄健康山羊 1.3设备美国VriTis AD2.0型冻于机
2方法
2.1
毒种繁殖称取适量组织毒,加石英砂研磨后,用PH7.5的PBS进行10倍稀释,放4。C冰箱静置6—12
定,其结果还有一定的误差;偶尔也会出现所测得的数据与厂家报告单不符,与2000版《中国兽药典》规定的 范围也不吻合。当然这些操作都是严格按照药典提供的方法进行操作还是无法避免这些差异。为此我们也 将继续不懈努力,希望在日后的工作中争取早日找到突破口,一举攻破此项难题。
胃蛋白酶活力检验方法的改进+
舒静,段艳萍 (中牧股份兰州生物药厂, 甘肃兰州730046)
山羊痘强毒冻干试验+
李 平,孔繁梅,张爱民,苏志堂,夏恋志 甘肃兰州
730046)
(中牧股份兰州生物药厂,
[摘 要】
该试验利用本室保存的山羊痘强毒组织毒,经羊体复壮繁殖后,采集发痘组织,加入保护剂,选择适当的冻干
曲线进行冻干。冻干品外观良好,经2—4齿龄健康山羊体测定毒价,其ID50=10。~/0.2ml。试验取得了较满意的结果。 [关键词] 山羊痘强毒;采毒;冻干;测毒
2.1
以109蛋白质为其质加0.25/1000胃酶酸性溶液量。将配制完毕的样品放入50%。52。C
的水浴锅中消化4小时,停止消化后吸取上清液,把沉淀放置于lOml的量筒中,30 min沉淀在2ml以下即为
由于胃蛋性大;内层的颜色浅,较
为干燥,做出平行样后的结果经常没有可比性。 2.2对于鸡蛋的选购是否新鲜无法作出准确的判定,即而对实验结果有决定性的影响。
凝乳酶蛋白酶活力测定

【原理】:采用福林-酚试剂法测定酶的蛋白水解活力。
福林-酚试剂在碱性条件下可被酚类化合物还原呈蓝色(钼蓝和钨蓝混合物),由于蛋白质分子中有含酚基的氨基酸(如酪氨酸、色氨酸等),可使蛋白质及其水解产物呈上述反应。
因此可利用此原理测定蛋白酶活力。
通常以酪蛋白为底物,在一定pH值和温度条件下,同酶液反应,经一段时间后终止酶促反应,经离心或过滤除去酪蛋白筹沉淀物后取上清液,用Na2CO3碱化,再加入福林-酚试剂显色,蓝色的深浅与滤液中生成产物酪氨酸量成正比;酪氨酸含量用分光光度计在660nm波长处测定,从而计算出蛋白酶的活力。
凝乳酶都具有一定的特异性,其特异性要通过凝乳活力/蛋白活力的比值体现。
【实验器材】:①试剂:pH=7.2和pH=6.4的磷酸缓冲液、1.2%的酪素溶液、0.44mol/L的三氯乙酸溶液、0.55mol/L的Na2CO3溶液、Folin试剂②器材:72型分光光度计【实验步骤】:一、溶液的配制(1)pH=7.2磷酸缓冲液的配制准确称取NaH2PO4·2H2O31.2g用蒸馏水定容到1L,配成0.2mol/L甲液。
称取Na2HPO4·12H2O71.63g用蒸馏水定容到1L,成0.2mol/L的乙液。
将甲液与乙液按28:72的比例混匀,用pH计校正到7.2后,加入等量体积的去离子水即配成1.0mol/L的pH=7.2的磷酸缓冲液。
(2)1.2%的酪素溶液的配制精确称取干酪素12g,用0.1mol/L的NaOH溶液50ml,在水浴加热溶解,用1.0mol/L的pH=7.2的磷酸缓冲液定容到1L,不用时放入4℃冰箱,防止染菌变质。
(3)0.44mol/L的三氯乙酸溶液的配制称取三氯乙酸72g,用去离子水定容到1L。
(4)0.55mol/L的Na2CO3溶液的配制称取无水Na2CO358.3g,用去离子水定容到1L。
(5)Folin试剂的配制(6)酪氨酸溶液的配制准确称取0.1g酪氨酸,定容到1L,配成100mg/L的酪氨酸标准溶液。
胶乳增强免疫比浊法测定胃蛋白酶原Ⅱ的不精密度和线性观察

胶乳增强免疫比浊法测定胃蛋白酶原Ⅱ的不精密度和线性观察高玲;冯品宁;喻雄文;姚真荣;李松霖【期刊名称】《检验医学》【年(卷),期】2012(027)002【摘要】目的对胶乳增强免疫比浊法测定胃蛋白酶原Ⅱ( PGⅡ)进行初步方法学评价,为临床应用提供依据.方法依据美国临床实验室标准化委员会(NCCLS) EP5-A 及EP10-A2文件提供的方法,对胶乳增强免疫比浊法测定PGⅡ进行初步的评价.结果PGⅡ的低值样本批内变异系数(CV)为2.05%、批间CV为1.60%、日间CV为3.92%、总CV为4.70%;高值样本批内CV为1.70%、批间CV为1.21%、日间CV为3.79%、总CV为4.32%.当PGⅡ浓度分别为9.6、24.7、39.8 μg/L时,相对偏倚分别为-0.18、-0.47、- 0.39μg/L,总不精密度分别为4.98%、2.39%、2.71%.测试间的携带污染差异无统计学意义(P>0.05).线性回归方程为y=0.9757X -0.0168,决定系数(R2) =0.9987.结论胶乳增强免疫比浊法测定PGⅡ的精密度符合EP5-A文件标准,具有良好的重复性.线性、偏倚、总不精密度及抗交叉污染能力均达到EP10-A2文件标准,符合临床应用要求,适用于实验室常规测定.【总页数】4页(P122-125)【作者】高玲;冯品宁;喻雄文;姚真荣;李松霖【作者单位】中山大学附属第一医院检验医学部,广东广州510080;中山大学附属第一医院检验医学部,广东广州510080;中山大学附属第一医院检验医学部,广东广州510080;中山大学附属第一医院检验医学部,广东广州510080;中山大学附属第一医院检验医学部,广东广州510080【正文语种】中文【中图分类】Q556【相关文献】1.胶体金与胶乳增强免疫比浊法测定心肌肌钙蛋白Ⅰ的比较 [J], 张雪;金军英;霍平2.两种质控血清测定结果不精密度的研究 [J], 王志剑;李莉;李琳3.胶乳免疫比浊法测定胃蛋白酶原Ⅰ、胃蛋白酶原Ⅱ的性能验证 [J], 陈永华;许中;沈东华;张剑峰;张敏健;张莉4.胆碱酯酶测量系统不精密度与线性范围评价 [J], 金仁玲;孙慧颖;胡滨;刘春龙;陈宝荣5.血清胃蛋白酶原Ⅰ 胃蛋白酶原Ⅱ及比值测定在胃癌及萎缩性胃炎中的价值 [J], 冯光安; 成守金因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
胶乳免疫比浊法测定胃蛋白酶原Ⅰ、胃蛋白酶原Ⅱ的性能验证

胶乳免疫比浊法测定胃蛋白酶原Ⅰ、胃蛋白酶原Ⅱ的性能验证陈永华;许中;沈东华;张剑峰;张敏健;张莉【期刊名称】《中国血液流变学杂志》【年(卷),期】2017(27)4【摘要】目的验证胶乳免疫比浊法测定胃蛋白酶原Ⅰ(PGⅠ)、胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)的方法学性能.方法采用日本荣研公司生产的胶乳免疫比浊法检测PGⅠ、PGⅡ,选用校准品和临床血清样本,验证该检测方法的正确度、精密度、线性,并与现行方法芬兰BIO-HIT进行比对,评价诊断阳性率结果.结果免疫比浊法测定PGⅠ低(25.0μg/L)、高(200.0μg/L)浓度校准品的相对偏倚分别为0.10%、4.70%,PGⅡ低(15.0μg/L)、高(100.0μg/L)浓度校准品的相对偏倚分别为0.60%、2.70%,PGⅠ、PGⅡ检测正确度良好;PGⅠ低(11.8μg/L)、中(73.0μg/L)、高(195.1μg/L)三个浓度标本的变异系数(CV)分别为3.70%、1.60%、3.30%,PGⅡ低(8.8μg/L)、中(14.6μg/L)、高(53.1μg/L)三个浓度标本的CV分别为3.68%、1.44%、1.65%,精密度符合要求;采用校准品进行稀释回收试验,当PGⅠ线性范围在200μg/L内时,线性回归方程Y=1.0108X-0.8318(R2=0.9995).当PGⅡ线性范围在100μg/L内时,线性回归方程Y=1.007X-0.1023(R2=0.9998).线性均良好;收集病人及体检血清样本(n=97),分别使用胶乳凝集免疫比浊法与芬兰BIO-HIT的ELISA法进行PGⅠ、PGⅡ检测.两种方法的总符合率为93.8%(95%CI:87.2%~97.1%),阳性符合率76.9%,阴性符合率96.4%;对称性试验通过(P>0.999);Cohen's Kappa系数73.4%(95%CI:52.7%~94.0%),实验方法与参考方法具有较高符合率.结论胶乳免疫比浊法检测PGⅠ、PGⅡ,快捷、准确、方便,适用临床进行大规模筛查.【总页数】4页(P437-440)【作者】陈永华;许中;沈东华;张剑峰;张敏健;张莉【作者单位】苏州市立医院东区检验科,江苏苏州 215001;苏州市立医院东区检验科,江苏苏州 215001;苏州市立医院东区检验科,江苏苏州 215001;苏州市立医院东区检验科,江苏苏州 215001;苏州市立医院东区检验科,江苏苏州 215001;苏州市立医院东区检验科,江苏苏州 215001【正文语种】中文【中图分类】R446.6【相关文献】1.免疫比浊法测定体检人群胃蛋白酶原水平与年龄和性别的关系 [J], 黄山;洪燕英2.胶乳增强免疫比浊法测定胃蛋白酶原Ⅱ的不精密度和线性观察 [J], 高玲;冯品宁;喻雄文;姚真荣;李松霖3.胶乳增强免疫比浊测定胃蛋白酶原参数设置及其临床应用 [J], 葛熙4.乳胶增强免疫比浊法测定血清胃蛋白酶原水平在胃癌筛查中的价值研究 [J], 何宝国;徐红;王立强5.胶乳免疫比浊法C反应蛋白测定试剂盒的准确度性能验证 [J], 黄燕虹;张旭;潘晓芳;朱秀霞因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。