细菌培养采样方法ppt课件
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微生物标本的正确采集运送及注意事项PPT课件
管理流程不严密
缺乏完善的标本采集、运送和保存流程，以及有效的监督和质量控制 机制。
针对性解决方案提
01
加强人员培训
提高操作人员对微生物标本采集和运送规范的认识和技能水平。
02
完善设备设施
提供适当的采集工具、保存容器和运送设备，确保标本质量。
03
优化管理流程
建立完善的标本采集、运送和保存流程，加强监督和质量控制，确保标
标本标识不清
导致无法准确识别标本来源和 采集时间，影响后续检测和诊 断。
运送条件不符合要求
如温度控制不当、运送时间过 长等，可能导致标本中微生物
的死亡或增殖。
问题产生原因分析
人员操作不规范
缺乏专业培训或经验不足的操作人员可能导致标本采集和运送过程 中的问题。
设备设施不完善
缺乏适当的采集工具、保存容器和运送设备，可能导致标本质量下 降。
微生物标本的正确采 集运送及注意事项 PPT课件
REPORTING
目录
• 微生物标本采集概述 • 微生物标本采集方法 • 微生物标本运送与保存 • 微生物标本处理与检测 • 微生物标本采集运送中常见问题及解决方案 • 总结与展望
PART 01
微生物标本采集概述
REPORTING
采集目的与意义
01
采样方法
使用无菌铁锹或土壤钻进行土壤采 集，将土壤样品装入无菌袋中并标 记相关信息。
人体微生物采集
采样部位选择
根据研究目的选择合适的采样部位，如皮肤、口腔、肠道等。
采样方法
使用无菌棉签或拭子进行皮肤或口腔粘膜的擦拭；或使用无菌粪便收集器进行 肠道微生物的收集。注意避免使用消毒剂或抗生素等药物影响微生物的活性。
标本处理
缺乏完善的标本采集、运送和保存流程，以及有效的监督和质量控制 机制。
针对性解决方案提
01
加强人员培训
提高操作人员对微生物标本采集和运送规范的认识和技能水平。
02
完善设备设施
提供适当的采集工具、保存容器和运送设备，确保标本质量。
03
优化管理流程
建立完善的标本采集、运送和保存流程，加强监督和质量控制，确保标
标本标识不清
导致无法准确识别标本来源和 采集时间，影响后续检测和诊 断。
运送条件不符合要求
如温度控制不当、运送时间过 长等，可能导致标本中微生物
的死亡或增殖。
问题产生原因分析
人员操作不规范
缺乏专业培训或经验不足的操作人员可能导致标本采集和运送过程 中的问题。
设备设施不完善
缺乏适当的采集工具、保存容器和运送设备，可能导致标本质量下 降。
微生物标本的正确采 集运送及注意事项 PPT课件
REPORTING
目录
• 微生物标本采集概述 • 微生物标本采集方法 • 微生物标本运送与保存 • 微生物标本处理与检测 • 微生物标本采集运送中常见问题及解决方案 • 总结与展望
PART 01
微生物标本采集概述
REPORTING
采集目的与意义
01
采样方法
使用无菌铁锹或土壤钻进行土壤采 集，将土壤样品装入无菌袋中并标 记相关信息。
人体微生物采集
采样部位选择
根据研究目的选择合适的采样部位，如皮肤、口腔、肠道等。
采样方法
使用无菌棉签或拭子进行皮肤或口腔粘膜的擦拭；或使用无菌粪便收集器进行 肠道微生物的收集。注意避免使用消毒剂或抗生素等药物影响微生物的活性。
标本处理
微生物标本的采集方法(共52张PPT)
室内面积＞30㎡设4角及中央5点均距墙壁1米
用2%碘酒从穿能刺点。向外除画圆非消无毒，法至消作毒区静域直脉径达穿5cm刺以上取，涂血擦穿，刺否皮肤则2遍，不待干应从留置导管内取血。
1、采样时间：消毒处理后4小时内进行采样
1◎、经日人常工记气录道：吸使引⑤用分后泌抽进物血行消前毒时应间累将积，标使签用超贴过1于000小血时培的应养加强瓶监测颈或更上换，建立标紫外签线消内毒使容用包登记括本，病每周人用7基5%本酒精信擦拭息灯管、并记录 其他使用中消采毒液血染菌时量：间≤1、00cf采u／m血l 部位。注意不要把标签贴在培养瓶条形码上，否则
无1、关采物样品时不间得段进：入在手消术毒室处，理洁后净，区操的作物前品进需行经采清样洁消毒处理方可进入
※ 抽血后未及时混匀血液凝固 不得检出致病性微生物
☂ Ⅰ类环境：洁净手术室Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、 Ⅳ级：
手术用房各种物体表面在每日术前和术后湿式擦拭清洁、消毒；
☂手术器械、穿刺针等：无菌生长 ☂血培养次数和采血时间 四、对可疑中心静脉导管相关血流感染 经支气管镜直接吸引 无痰可用3%---5%NaCI 5ml雾吸约5min导痰
※ 储存环境标本来源4℃冰箱----痰、尿液、粪便、活检组织、 气枪冲洗物、导尿管、心包积液、脓和伤口分泌物等
※ 室温（25℃）---血液培养、脑脊液、泌尿生殖道、眼、耳、 鼻、喉、血管导管尖、体液、厌氧菌培养标本。
美国的理念
1970年以前，美国的医院定期对空气和环境表面（如地面、墙壁、台
面）进行培养。到了1970年，CDC和美国医院协会（AHA）主张 停止对环境的常规培养，因为医院感染发生率与空气或环境表 面中总的微生物污染水平不相关。且环境表面或空气中微生物 含量的允许水平也没有有意义的标准。1970---1975年，美国有 25%的医院减少了这种常规的环境培养工作--------一个已经持续 的趋势。
用2%碘酒从穿能刺点。向外除画圆非消无毒，法至消作毒区静域直脉径达穿5cm刺以上取，涂血擦穿，刺否皮肤则2遍，不待干应从留置导管内取血。
1、采样时间：消毒处理后4小时内进行采样
1◎、经日人常工记气录道：吸使引⑤用分后泌抽进物血行消前毒时应间累将积，标使签用超贴过1于000小血时培的应养加强瓶监测颈或更上换，建立标紫外签线消内毒使容用包登记括本，病每周人用7基5%本酒精信擦拭息灯管、并记录 其他使用中消采毒液血染菌时量：间≤1、00cf采u／m血l 部位。注意不要把标签贴在培养瓶条形码上，否则
无1、关采物样品时不间得段进：入在手消术毒室处，理洁后净，区操的作物前品进需行经采清样洁消毒处理方可进入
※ 抽血后未及时混匀血液凝固 不得检出致病性微生物
☂ Ⅰ类环境：洁净手术室Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、 Ⅳ级：
手术用房各种物体表面在每日术前和术后湿式擦拭清洁、消毒；
☂手术器械、穿刺针等：无菌生长 ☂血培养次数和采血时间 四、对可疑中心静脉导管相关血流感染 经支气管镜直接吸引 无痰可用3%---5%NaCI 5ml雾吸约5min导痰
※ 储存环境标本来源4℃冰箱----痰、尿液、粪便、活检组织、 气枪冲洗物、导尿管、心包积液、脓和伤口分泌物等
※ 室温（25℃）---血液培养、脑脊液、泌尿生殖道、眼、耳、 鼻、喉、血管导管尖、体液、厌氧菌培养标本。
美国的理念
1970年以前，美国的医院定期对空气和环境表面（如地面、墙壁、台
面）进行培养。到了1970年，CDC和美国医院协会（AHA）主张 停止对环境的常规培养，因为医院感染发生率与空气或环境表 面中总的微生物污染水平不相关。且环境表面或空气中微生物 含量的允许水平也没有有意义的标准。1970---1975年，美国有 25%的医院减少了这种常规的环境培养工作--------一个已经持续 的趋势。
标本采集PPT课件
非越多越好，超过一定的采血量会稀释培养瓶内 的肉汤，影响检测结果。
温即可，温度过低会导致对温度敏感的细菌死亡。
培
血培养对无菌操作的要求比注射、采集生化、
凝血等其它标本要高，所以要最先采集血培养
标本
1、成人一份标本2个培养瓶（需氧＋厌氧），每
养
血培养瓶（厌氧优先） 凝血试管（蓝色） 其 它有抗凝剂管（黑-绿-紫） 无添加剂管（红色，
处理程序
1、护士发现采集标本错误，立即停 止送检，重新采集标本，并做好解释。 2、发现标本有误或检验结果有质疑， 立即核查，通知医生，做好解释，重 新采集标本。 各类标本在采集、暂存与运送过程中 发生标本撒漏、标本容器破损等紧急 意外事件时，立即按医疗垃圾处理标 本，重新采集标本。
谢谢
苏朦朦 2017/11/26
22
2024/5/22
要看懂胸水的报告，首先要分清是漏出液还是渗出液
成功项胸目水展示
漏出液可见于：充血性心力衰竭、上腔静脉阻塞、缩窄性 心包炎、肝硬化、肾病综合征、急性肾小球肾炎、腹膜透 析、粘液性水肿、药物过敏和放射反应等。
渗出液又可分： 1.浆液性：①感染性疾病：结核性胸膜炎，肺炎、病毒、真菌和寄生 虫感染；②恶性肿瘤；③肺栓塞；④结缔组织疾病；⑤Meigs综合征 等。 2.脓胸：①结核性脓胸；②肺部感染引起脓胸；③外伤、食管穿孔、 气胸、胸腔穿刺或术后继发化脓性感染等。 3.血胸：①恶性肿瘤；②外伤；③血气胸；④胸主动脉瘤破裂；⑤肺 栓塞等。 4.乳糜胸：①外伤致胸导管破裂；②丝虫病；③肿瘤致胸导管阻塞等。
血培养，30分钟内完成3套血培养的采集，采集
后立即进行抗菌药的经验治疗。如果24小时内报
告阴性，则继续采集2套血培养。
年度工血作液概述
温即可，温度过低会导致对温度敏感的细菌死亡。
培
血培养对无菌操作的要求比注射、采集生化、
凝血等其它标本要高，所以要最先采集血培养
标本
1、成人一份标本2个培养瓶（需氧＋厌氧），每
养
血培养瓶（厌氧优先） 凝血试管（蓝色） 其 它有抗凝剂管（黑-绿-紫） 无添加剂管（红色，
处理程序
1、护士发现采集标本错误，立即停 止送检，重新采集标本，并做好解释。 2、发现标本有误或检验结果有质疑， 立即核查，通知医生，做好解释，重 新采集标本。 各类标本在采集、暂存与运送过程中 发生标本撒漏、标本容器破损等紧急 意外事件时，立即按医疗垃圾处理标 本，重新采集标本。
谢谢
苏朦朦 2017/11/26
22
2024/5/22
要看懂胸水的报告，首先要分清是漏出液还是渗出液
成功项胸目水展示
漏出液可见于：充血性心力衰竭、上腔静脉阻塞、缩窄性 心包炎、肝硬化、肾病综合征、急性肾小球肾炎、腹膜透 析、粘液性水肿、药物过敏和放射反应等。
渗出液又可分： 1.浆液性：①感染性疾病：结核性胸膜炎，肺炎、病毒、真菌和寄生 虫感染；②恶性肿瘤；③肺栓塞；④结缔组织疾病；⑤Meigs综合征 等。 2.脓胸：①结核性脓胸；②肺部感染引起脓胸；③外伤、食管穿孔、 气胸、胸腔穿刺或术后继发化脓性感染等。 3.血胸：①恶性肿瘤；②外伤；③血气胸；④胸主动脉瘤破裂；⑤肺 栓塞等。 4.乳糜胸：①外伤致胸导管破裂；②丝虫病；③肿瘤致胸导管阻塞等。
血培养，30分钟内完成3套血培养的采集，采集
后立即进行抗菌药的经验治疗。如果24小时内报
告阴性，则继续采集2套血培养。
年度工血作液概述
临床微生物标本采集及运送PPT课件
已接种的培养基放co培养箱35培养1824h55培养基的选择痰标本血巧伤口分泌物脓汁血mac淋球菌gc真菌培养血念显大便血macss院感普通营养琼脂霍乱培养血macssvib或tcbs56已经检测完的标本盖回塞子每天的标本统一放入注明当天日期的袋子里血液标本48冰库保存对亍超过保存期微生物所有的标本由生物安全员或指定人员对其进行高压灭菌后放入医用垃圾桶中再由环卫部门定期上门接收统一处理
，避免碰到其它
组织
1. 用一压舌板压 住舌
2. 用无菌拭子在 后咽部、扁桃体 及发炎部位采集 标本
1.将一藻酸钙拭子经 鼻腔轻轻插入鼻咽 喉部
2. 缓慢转动拭子5秒 钟吸收分泌物
3. 取出拭子并床边 接种或将拭子放入 运送培养基
采集注意事项
采集标本应于抗生素治疗前，以晨起进食前为宜，取样前数小时内不 得用消毒药物漱口或涂抹病灶部位。
好的微生物检验标本可提升实验室工作效率及病患照顾质量，降低医疗 成本。
临床标本的分类
带菌体液 痰液 咽拭子 尿液 粪便
其他类别
无菌体液 血液 脑脊液
关节腔积液 胸腹水、胆汁
其他类别
1. 发现感染应及时采集微生物标本作病原学检查，二、三级医院微生物标本 送 检率不应低于70%。
2. 尽量在抗菌药物使用前采集标本。
脑脊液标本的运送
采集后应正确盖好，防止泄漏或容器外部留有残留物。常 温立即送检，实验室收到标本后应立即接种。脑脊液标本 送检的理想时间为 15 分钟内，半小时送检是可接受的，如 果送检时间超过 1 小时，则会影响结果。
注：某些细菌具有自溶酶，放置时间过长易自溶死亡，因此， 标本应立即送检，并且保温（禁止放冰箱，因脑膜炎双球 菌遇冷死亡）
标本采集
一般认为来自正常尿液是无菌的，而尿道口有正常菌群寄生，标本的采集 必须无菌操作。
，避免碰到其它
组织
1. 用一压舌板压 住舌
2. 用无菌拭子在 后咽部、扁桃体 及发炎部位采集 标本
1.将一藻酸钙拭子经 鼻腔轻轻插入鼻咽 喉部
2. 缓慢转动拭子5秒 钟吸收分泌物
3. 取出拭子并床边 接种或将拭子放入 运送培养基
采集注意事项
采集标本应于抗生素治疗前，以晨起进食前为宜，取样前数小时内不 得用消毒药物漱口或涂抹病灶部位。
好的微生物检验标本可提升实验室工作效率及病患照顾质量，降低医疗 成本。
临床标本的分类
带菌体液 痰液 咽拭子 尿液 粪便
其他类别
无菌体液 血液 脑脊液
关节腔积液 胸腹水、胆汁
其他类别
1. 发现感染应及时采集微生物标本作病原学检查，二、三级医院微生物标本 送 检率不应低于70%。
2. 尽量在抗菌药物使用前采集标本。
脑脊液标本的运送
采集后应正确盖好，防止泄漏或容器外部留有残留物。常 温立即送检，实验室收到标本后应立即接种。脑脊液标本 送检的理想时间为 15 分钟内，半小时送检是可接受的，如 果送检时间超过 1 小时，则会影响结果。
注：某些细菌具有自溶酶，放置时间过长易自溶死亡，因此， 标本应立即送检，并且保温（禁止放冰箱，因脑膜炎双球 菌遇冷死亡）
标本采集
一般认为来自正常尿液是无菌的，而尿道口有正常菌群寄生，标本的采集 必须无菌操作。
医院常规空气细菌培养PPT课件
• （10）收取平皿；
• （11）如室内面积＜30m2一条对角线上取3点， 放平皿时先放最里边（内边），收取时先收最外边 点上的平皿；
医院常规空气细菌培养
10
• 物体表面采样
医院常规空气细菌培养
11
• 1、采样时间，选择消毒处理后4h内进行采样。
•
2、采样面积，被采表面＜100c㎡，取全部表
面；被采表面≥100 c㎡，取100 c㎡。
7
• 1)着装整洁，帽子遮住全部头发，口罩遮盖口鼻；
•
(2)备齐用物：治疗盘或篮、酒精灯、火柴、
直径9cm普通营养琼脂平皿（根据需要备足量，分
别标记1,2,3,4,5；或东、西、南、北、中；或东
南、西南、东北、西北、中）、灭菌棉拭子、试管、
试管架、笔、纪录单、计时表、湿度、温度计。
•
(3)剪指甲、洗手；
取出5个培养皿将培养皿翻转放在采样点上。摆放
相应高度的凳子或治疗车、桌，采样高度与地面垂
直高度80一150cm;
医院常规空气细菌培养
9
• (6)打开平皿盖，将盖口向下扣放，计时；
• (7）暴露5分钟；
• (8)纪录采样房间面积、时间、地点、位置、采 样人及采样时环境条件（如湿度、温度）
• (9）看表、5分钟；
4、布点方法，室内面积≤30m 2，设一条对角线上取3 点，即中心一点、两端各距墙lm处各取一点；室内面积＞ 30m2，设东、西、南、北、中5点，其中东、西、南、北 点均距墙lm.
医院常规空气细菌培养
2
• 1.面积≤30 m2，设一条对角线取三点，即中间一 点，两端各距墙1米处各取一点（图1)
医院常规空气细菌培养
拭子放人装l0ml采样液的试管中； • （15)对于曲线物体、小型物体等则（门把手等）
• （11）如室内面积＜30m2一条对角线上取3点， 放平皿时先放最里边（内边），收取时先收最外边 点上的平皿；
医院常规空气细菌培养
10
• 物体表面采样
医院常规空气细菌培养
11
• 1、采样时间，选择消毒处理后4h内进行采样。
•
2、采样面积，被采表面＜100c㎡，取全部表
面；被采表面≥100 c㎡，取100 c㎡。
7
• 1)着装整洁，帽子遮住全部头发，口罩遮盖口鼻；
•
(2)备齐用物：治疗盘或篮、酒精灯、火柴、
直径9cm普通营养琼脂平皿（根据需要备足量，分
别标记1,2,3,4,5；或东、西、南、北、中；或东
南、西南、东北、西北、中）、灭菌棉拭子、试管、
试管架、笔、纪录单、计时表、湿度、温度计。
•
(3)剪指甲、洗手；
取出5个培养皿将培养皿翻转放在采样点上。摆放
相应高度的凳子或治疗车、桌，采样高度与地面垂
直高度80一150cm;
医院常规空气细菌培养
9
• (6)打开平皿盖，将盖口向下扣放，计时；
• (7）暴露5分钟；
• (8)纪录采样房间面积、时间、地点、位置、采 样人及采样时环境条件（如湿度、温度）
• (9）看表、5分钟；
4、布点方法，室内面积≤30m 2，设一条对角线上取3 点，即中心一点、两端各距墙lm处各取一点；室内面积＞ 30m2，设东、西、南、北、中5点，其中东、西、南、北 点均距墙lm.
医院常规空气细菌培养
2
• 1.面积≤30 m2，设一条对角线取三点，即中间一 点，两端各距墙1米处各取一点（图1)
医院常规空气细菌培养
拭子放人装l0ml采样液的试管中； • （15)对于曲线物体、小型物体等则（门把手等）
微生物标本检验的采集(共77张PPT)
【标本采集注意事项】
• ①采血培养应尽量在抗菌药物使用之前，在24h内采集2～3份血培养（一次静脉采血注 入到多个培养瓶中应视为单份血培养），每次2瓶。因为研究已证实，2～3份血培养足以 检测所有的菌血症和真菌血症。
• ②入院前2周内接受抗菌药物治疗的患者，连续3天，每天采集2份。
• ③对间歇性寒战或发热的患者，应在寒战或体温高峰到来之前0.5～1h采集血液，或于寒 战或发热后1h采集。因为发热时血液中可能没有细菌。
•
皮肤消毒程序
• 严格按以下三步法进行：
• ①75%酒精擦拭静脉穿刺部位待30s以上。
•
②用一根碘酊或聚维酮碘（碘伏）棉签消毒皮肤，1～2%碘酊作用30s或碘伏作用
60s，从穿刺点向外以1.5～3cm直径画圈进行消毒
• ③75％酒精脱碘。
•
对碘过敏的病人只能用75%酒精消毒，消毒60s，待穿刺部位酒精挥发干燥后穿刺
支气管刷直接取得标本。 • 3.胃内采痰法：无自觉症状的肺结核病人尤其婴幼儿不会咳嗽，
有时将痰误咽入胃中，可采集胃内容物做结核分支杆菌培养。
• 4.管穿刺法：主要用于厌氧菌培养 • * 小儿取痰法：用弯压舌板向后压舌，用棉拭子深入咽部，小儿受到
刺激咳嗽时，可喷出肺部或气管分泌物粘在拭子上。
【标本采集注意事项】
【标本的送检地点】 • 检验科微生物室，非正常上班时间送检验
科急诊化验室。
* 标本运送过程中必须保证其安全，防止溢 出，避免细菌污染。
上呼吸道标本的微生物检验
一、检验项目 • 上呼吸道标本的细菌培养、真菌培养、真
菌涂片、结核菌涂片。 二、标本采集
【标本采集前的注意事项】
• 应在抗生素应用前或停药一周后采集标本 ，如不能停用抗生素，应于下次抗生素应 用前采集。
细菌的培养及鉴定 ppt课件
细菌的培养及鉴定
抗酸染色步骤
1、涂片包括涂片、干燥、固定三步。
涂片
干燥
固定
细菌的培养及鉴定
抗酸染色步骤
2、染色包括初染、脱色、复染三步。
初染
脱色
复染
冲洗
冲洗
石炭酸复红维持 3-5’ 3%盐酸酒精30 ’’ ~1’
冲洗
干燥 油镜观察
细菌的培养及鉴定
美蓝复染1 ’
抗酸染色结果
抗酸菌呈红色， 常堆积成团， 排列无序， 偶呈分枝状生长。 背景及非抗酸性细菌呈兰色。
细菌培养及鉴定
细菌的培养及鉴定
标本采集原则
1.及时采集微生物标本作病原学检查 2.在抗菌药物使用前采集标本 3.采样时严格执行无菌操作 4.标本容器须无菌，但不得有消毒剂 5.采样后立即送检 6.送检标本应注明细菌来的培源养及和鉴定检验目的
咳痰方法
病人先漱口，清洁口腔，去除表面的菌群 病人深咳，收集从下呼吸道咳出的痰液 无痰可用3％～5％NaCl 5ml雾吸约5min导痰 以清晨第二口痰为佳 标本采集后放置时间不超过2小时
细菌的培养及鉴定
清洁中段尿液
尽量取早晨第一次尿液 嘱患者留取标本的前一天晚上少饮水 女性病人 ➢收集标本前用肥皂水冲洗外阴，再以灭菌清水
冲洗尿道口 ➢排出几毫升后，不停止尿流，采集中段尿 男性病人 ➢翻转包皮，清洗尿道口 ➢排出几毫升后，不停止尿流,采集中段尿
采集标本后立即送检！
细菌的培养及鉴定
常用的培养基种类和用途
细菌的培养及鉴定
革兰染色步骤
涂片包括涂片、干燥、固定三步。
涂片
干燥
固定
细菌的培养及鉴定
固定的目的：
使细菌的细胞凝固，使菌体与玻片粘 得更牢固； 可改变菌体对染料的通透性； 加热固定可杀死细菌，比较安全。
抗酸染色步骤
1、涂片包括涂片、干燥、固定三步。
涂片
干燥
固定
细菌的培养及鉴定
抗酸染色步骤
2、染色包括初染、脱色、复染三步。
初染
脱色
复染
冲洗
冲洗
石炭酸复红维持 3-5’ 3%盐酸酒精30 ’’ ~1’
冲洗
干燥 油镜观察
细菌的培养及鉴定
美蓝复染1 ’
抗酸染色结果
抗酸菌呈红色， 常堆积成团， 排列无序， 偶呈分枝状生长。 背景及非抗酸性细菌呈兰色。
细菌培养及鉴定
细菌的培养及鉴定
标本采集原则
1.及时采集微生物标本作病原学检查 2.在抗菌药物使用前采集标本 3.采样时严格执行无菌操作 4.标本容器须无菌，但不得有消毒剂 5.采样后立即送检 6.送检标本应注明细菌来的培源养及和鉴定检验目的
咳痰方法
病人先漱口，清洁口腔，去除表面的菌群 病人深咳，收集从下呼吸道咳出的痰液 无痰可用3％～5％NaCl 5ml雾吸约5min导痰 以清晨第二口痰为佳 标本采集后放置时间不超过2小时
细菌的培养及鉴定
清洁中段尿液
尽量取早晨第一次尿液 嘱患者留取标本的前一天晚上少饮水 女性病人 ➢收集标本前用肥皂水冲洗外阴，再以灭菌清水
冲洗尿道口 ➢排出几毫升后，不停止尿流，采集中段尿 男性病人 ➢翻转包皮，清洗尿道口 ➢排出几毫升后，不停止尿流,采集中段尿
采集标本后立即送检！
细菌的培养及鉴定
常用的培养基种类和用途
细菌的培养及鉴定
革兰染色步骤
涂片包括涂片、干燥、固定三步。
涂片
干燥
固定
细菌的培养及鉴定
固定的目的：
使细菌的细胞凝固，使菌体与玻片粘 得更牢固； 可改变菌体对染料的通透性； 加热固定可杀死细菌，比较安全。
标本采集运送标准操作规程PPT课件
【标准操作程序】
（4）粒细胞减少（成熟时我多核白细胞小于1000×109/L）。 （5）血小板减少。 （6）皮肤黏膜出血。 （7）昏迷. （8）多器官衰竭 （9）血压降低 （10）呼吸加快 （11）降钙素原升高（PCT）
【标准操作程序】
在评估可疑新生儿败血症时，除发热或低烧外，很少培养出细菌，应该补充尿液和脑脊液培养。肺炎链球菌与流感嗜血杆菌菌血症的患儿（特别是2岁或以下的幼儿）一般出现于门诊，常伴有明显的发热（≥38.5℃）和白细胞增多（总数≥ 20,000×109/L）。老年菌血症患者，可能不发热或低体温，如伴有身体不适，肌痛或中风可能是感染心内膜炎的重要信号。
【标准操作程序】
5.3采集方法： 自然排便采集标本时，取有脓血，黏液，组织碎片部分的粪便1—3g（花生米大小）。水样粪便则取絮状物，一般取1—3ml，直接装入运送培养基中送检。 直肠拭子采集粪便标本：先以肥皂和水，将肛门周围洗净，然后用经无菌盐水湿润的棉式子插入肛门超越肛门括约肌约2～3cm，与直肠黏膜表面接触，轻轻旋转，必须将棉式子置于运送培养基中送检。 5.4 采集量： 成形粪便花生米大小1—3 g，水样便1—3 ml。 5.5容器： 粪便标本装于无菌加盖螺旋广口塑料杯；直肠肛拭置于Cary-Bair运送培养基。 5.6 标本容器标识 应包括病人姓名、病员号、标本种类、检验项目、采集时间。
【标准操作程序】
2.3 采集量 5～10ml。 2.4 容器 无菌、带螺旋盖、透明塑料容器。 2.5 标本容器标识 标识内容应包括病人姓名、病员号、标本种类。 2.6 标本运送 标本采集后立即盖紧防止泄漏或容器外部留有残留物。及时送检，室温保存下不得超过2小时，否则应置于 4℃冰箱保存，保存时间不得超过24h。 2.7 注 直接导尿可能导致尿道菌落进入膀胱，增加医源性感染的危险。 8生物安全防护参见《HS-JY-GL-XJ-302生物防护的安全程序》。
（4）粒细胞减少（成熟时我多核白细胞小于1000×109/L）。 （5）血小板减少。 （6）皮肤黏膜出血。 （7）昏迷. （8）多器官衰竭 （9）血压降低 （10）呼吸加快 （11）降钙素原升高（PCT）
【标准操作程序】
在评估可疑新生儿败血症时，除发热或低烧外，很少培养出细菌，应该补充尿液和脑脊液培养。肺炎链球菌与流感嗜血杆菌菌血症的患儿（特别是2岁或以下的幼儿）一般出现于门诊，常伴有明显的发热（≥38.5℃）和白细胞增多（总数≥ 20,000×109/L）。老年菌血症患者，可能不发热或低体温，如伴有身体不适，肌痛或中风可能是感染心内膜炎的重要信号。
【标准操作程序】
5.3采集方法： 自然排便采集标本时，取有脓血，黏液，组织碎片部分的粪便1—3g（花生米大小）。水样粪便则取絮状物，一般取1—3ml，直接装入运送培养基中送检。 直肠拭子采集粪便标本：先以肥皂和水，将肛门周围洗净，然后用经无菌盐水湿润的棉式子插入肛门超越肛门括约肌约2～3cm，与直肠黏膜表面接触，轻轻旋转，必须将棉式子置于运送培养基中送检。 5.4 采集量： 成形粪便花生米大小1—3 g，水样便1—3 ml。 5.5容器： 粪便标本装于无菌加盖螺旋广口塑料杯；直肠肛拭置于Cary-Bair运送培养基。 5.6 标本容器标识 应包括病人姓名、病员号、标本种类、检验项目、采集时间。
【标准操作程序】
2.3 采集量 5～10ml。 2.4 容器 无菌、带螺旋盖、透明塑料容器。 2.5 标本容器标识 标识内容应包括病人姓名、病员号、标本种类。 2.6 标本运送 标本采集后立即盖紧防止泄漏或容器外部留有残留物。及时送检，室温保存下不得超过2小时，否则应置于 4℃冰箱保存，保存时间不得超过24h。 2.7 注 直接导尿可能导致尿道菌落进入膀胱，增加医源性感染的危险。 8生物安全防护参见《HS-JY-GL-XJ-302生物防护的安全程序》。
微生物标本采集PPT
四、标本运输 ① 标本采集后需尽快送到实验室； ② 不要冷藏标本。
四、标本采集—气道吸取标本
一、临床采样指征 有气管插管或气管切开等人工气道患者，无法自行咳
痰，可通过吸痰管从气道吸取标本。
二、标本采集 通过气管内插管将一次性无菌吸痰管推进呼吸道直至
遇到阻力后开始抽吸，留取标本在吸痰杯内。
四、标本采集—气道吸取标本
二、生物标本运送的基本原则
三、微生物实验室对标本的拒收标准
1. 标本采集至实验室接收过程间隔过长，或无标本采集时 间，或保存的温度不当。
2. 标本运送条件不正确：如厌氧培养标本却在有氧条件下 送检。
3. 容器不规范：如容器有裂缝或被打破导致标本泄露、容 器非无菌等。
4. 未贴标签或贴错标签：标本与检验目的不符合，如痰培 养送检尿标本；患者信息与标本不符，如女性患者送检 前列腺标本。
四、标本采集—血培养
二、标本采集： 1.菌血症： ① 采血时机：寒战开始时，发热高峰前30-60min内；使用抗菌药物治疗前
采集，如已用药，则在下一次用药之前采集最佳。 ② 采血部位：通常为肘静脉，切忌在静滴抗菌药物的静脉处采血。除非怀
疑有导管相关的血流感染，应避免从留置静脉或动脉导管取血，因为导 管常伴有定植菌存在。 ③ 采血工具：真空血培养瓶，如培养瓶的储存温度为2-8℃，应先复温 30min左右，平衡至室温再采血。同一部位双瓶采集时不建议更换针头。 ④ 采血次数、血培养瓶选择：对于成人患者，应同时分别在两个部位采集 血标本；每个部位应需氧和厌氧培养各一瓶。 ⑤ 采血量：影响阳性率的重要因素，过少明显降低阳性率，5-10ml/瓶。 ⑥ 皮肤、血培养瓶消毒：穿刺前皮肤和培养瓶口进行消毒并充分干燥。 ⑦ 避免采血管内空气注入厌氧血培养瓶。
四、标本采集—气道吸取标本
一、临床采样指征 有气管插管或气管切开等人工气道患者，无法自行咳
痰，可通过吸痰管从气道吸取标本。
二、标本采集 通过气管内插管将一次性无菌吸痰管推进呼吸道直至
遇到阻力后开始抽吸，留取标本在吸痰杯内。
四、标本采集—气道吸取标本
二、生物标本运送的基本原则
三、微生物实验室对标本的拒收标准
1. 标本采集至实验室接收过程间隔过长，或无标本采集时 间，或保存的温度不当。
2. 标本运送条件不正确：如厌氧培养标本却在有氧条件下 送检。
3. 容器不规范：如容器有裂缝或被打破导致标本泄露、容 器非无菌等。
4. 未贴标签或贴错标签：标本与检验目的不符合，如痰培 养送检尿标本；患者信息与标本不符，如女性患者送检 前列腺标本。
四、标本采集—血培养
二、标本采集： 1.菌血症： ① 采血时机：寒战开始时，发热高峰前30-60min内；使用抗菌药物治疗前
采集，如已用药，则在下一次用药之前采集最佳。 ② 采血部位：通常为肘静脉，切忌在静滴抗菌药物的静脉处采血。除非怀
疑有导管相关的血流感染，应避免从留置静脉或动脉导管取血，因为导 管常伴有定植菌存在。 ③ 采血工具：真空血培养瓶，如培养瓶的储存温度为2-8℃，应先复温 30min左右，平衡至室温再采血。同一部位双瓶采集时不建议更换针头。 ④ 采血次数、血培养瓶选择：对于成人患者，应同时分别在两个部位采集 血标本；每个部位应需氧和厌氧培养各一瓶。 ⑤ 采血量：影响阳性率的重要因素，过少明显降低阳性率，5-10ml/瓶。 ⑥ 皮肤、血培养瓶消毒：穿刺前皮肤和培养瓶口进行消毒并充分干燥。 ⑦ 避免采血管内空气注入厌氧血培养瓶。
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医护人员手采样方法（试管法）
医务人员手采样目的：是为了检测医务人员的责任感，防止将带有
细菌的手污染无菌伤口。 1、按无菌操作要求，进行手细菌采样。 2、选定抽查对象，（手术室参加手术者事先不能通知被抽查对象）。
采样时间
在接触病人、从事医疗活动前进行采样
采样面积及方法
被检人五指并拢，将浸有无菌生理盐水采样液的棉拭纸一支在双手指曲 面从指根到指端来回涂擦各两次（一只手涂擦面30cm²）并随之转动采 样棉拭纸，用无菌剪剪去手接触部位，将棉拭纸放入装有10ml采样液的 试管内送检。采样面积按平方厘米计算。
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具体分工
1、每月组织本组成员至少进行一次全面的质控检查，具体内容见 （手术室护理工组质量检查标准），具体日期当月决定。 2、每月15号以后的第一个礼拜二协同组员进行一次细菌培养。内容包括 空气、物表、手表、无菌物品、消毒液、无菌器械的细菌检测，并登记 检测结果。
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3、术前负责检查术间平台擦拭，回风口是否打开，空调温湿度是否 合适，术后检查术间术后处置及柜子物品补充情况。 4、负责本科室的医院感染知识的宣传。
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医疗用品采样方法
采样时间 在消毒或灭菌处理后，存放有效期内采样。 采样量及采样方法 可用破坏性方法取样的医疗用品，如输液（血）器、注射 器和注射针等均参照《中华人民共和国药典》1990年版一 部附录中《无菌检查法》规定执行。对不能用破坏性方法 取样的特殊医疗用品，可用浸有无菌生理盐水采样液的棉 拭子在被检物体表面涂抹采样，被采表面＜100cm²，取全 部表面；被采表面≥100cm²，取100 cm²。
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消毒液的采样及检查方 法
采样方法 用无菌吸管吸取使用中的消毒液1ML，置于备好的试管内及 时送检，送检时间不超过4时，必要时试
2015年质控小组实行分工负责制度，定期进行检查、考核、反馈问题， 分析存在原因。督促科室人员认真执行科室的各项规章制度、从手术间 质量管理检查标准。医院内感染监控标准。
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物体表面采样方法
采样时间
选择消毒处理后4h内进行采样。
采样面积
被采表面＜100cm²，取全部表面：被采表面≥100cm²，取100cm²
采样方法
用5×5cm²的标准灭菌规格板，放在被检物体表面，用浸有无菌生理盐水 采样液的棉拭纸1支，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭纸， 连续采样1—4个规格板面积，用无菌剪剪去手接触部分，将棉拭纸放入装 10ml采样液的试管中送检。门把手等小型物体则采用棉拭纸直接涂抹物体 的方法采样。放入物品前后，瓶口必须按常规在酒精灯上烘烤，然后盖好 盖塞送细菌培养。
细菌培养采样方法
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采样前准备
洗手，手套，口罩，无菌注射器5ml ，试管，培养皿，酒精灯，打火机 ，无菌棉球、持物筒、无菌剪刀， 无菌规格板，无菌棉签、0.9%生理 盐水。
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空气采样方法
采样时间 选择消毒处理后与进行医疗活动之前期间采样。 采样高度 与地面垂直高度小于80cm。
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空气采样方法 1、用9cm直径普通营养琼脂平板在采样点暴露 30min后送检培养。 2、操作时，前臂不能越过已打开的培养皿；放培养 器皿时，要从内往外放，取时要从外往内，动作不 能粗重，以免影响培养效果。 3、按照平开平放法或平开扣放法放置30分钟，即 送检验室化验结果。
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5、监督执行手术室人员的无菌技术操作。 6、监测结果归档，备查。
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7、监督检查本科室抗菌药物使用情况。 8、组织本科室预防、控制医院感染知识培训
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谢 谢!
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医护人员手采样方法（试管法）
医务人员手采样目的：是为了检测医务人员的责任感，防止将带有
细菌的手污染无菌伤口。 1、按无菌操作要求，进行手细菌采样。 2、选定抽查对象，（手术室参加手术者事先不能通知被抽查对象）。
采样时间
在接触病人、从事医疗活动前进行采样
采样面积及方法
被检人五指并拢，将浸有无菌生理盐水采样液的棉拭纸一支在双手指曲 面从指根到指端来回涂擦各两次（一只手涂擦面30cm²）并随之转动采 样棉拭纸，用无菌剪剪去手接触部位，将棉拭纸放入装有10ml采样液的 试管内送检。采样面积按平方厘米计算。
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具体分工
1、每月组织本组成员至少进行一次全面的质控检查，具体内容见 （手术室护理工组质量检查标准），具体日期当月决定。 2、每月15号以后的第一个礼拜二协同组员进行一次细菌培养。内容包括 空气、物表、手表、无菌物品、消毒液、无菌器械的细菌检测，并登记 检测结果。
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3、术前负责检查术间平台擦拭，回风口是否打开，空调温湿度是否 合适，术后检查术间术后处置及柜子物品补充情况。 4、负责本科室的医院感染知识的宣传。
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医疗用品采样方法
采样时间 在消毒或灭菌处理后，存放有效期内采样。 采样量及采样方法 可用破坏性方法取样的医疗用品，如输液（血）器、注射 器和注射针等均参照《中华人民共和国药典》1990年版一 部附录中《无菌检查法》规定执行。对不能用破坏性方法 取样的特殊医疗用品，可用浸有无菌生理盐水采样液的棉 拭子在被检物体表面涂抹采样，被采表面＜100cm²，取全 部表面；被采表面≥100cm²，取100 cm²。
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消毒液的采样及检查方 法
采样方法 用无菌吸管吸取使用中的消毒液1ML，置于备好的试管内及 时送检，送检时间不超过4时，必要时试
2015年质控小组实行分工负责制度，定期进行检查、考核、反馈问题， 分析存在原因。督促科室人员认真执行科室的各项规章制度、从手术间 质量管理检查标准。医院内感染监控标准。
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物体表面采样方法
采样时间
选择消毒处理后4h内进行采样。
采样面积
被采表面＜100cm²，取全部表面：被采表面≥100cm²，取100cm²
采样方法
用5×5cm²的标准灭菌规格板，放在被检物体表面，用浸有无菌生理盐水 采样液的棉拭纸1支，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭纸， 连续采样1—4个规格板面积，用无菌剪剪去手接触部分，将棉拭纸放入装 10ml采样液的试管中送检。门把手等小型物体则采用棉拭纸直接涂抹物体 的方法采样。放入物品前后，瓶口必须按常规在酒精灯上烘烤，然后盖好 盖塞送细菌培养。
细菌培养采样方法
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采样前准备
洗手，手套，口罩，无菌注射器5ml ，试管，培养皿，酒精灯，打火机 ，无菌棉球、持物筒、无菌剪刀， 无菌规格板，无菌棉签、0.9%生理 盐水。
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空气采样方法
采样时间 选择消毒处理后与进行医疗活动之前期间采样。 采样高度 与地面垂直高度小于80cm。
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空气采样方法 1、用9cm直径普通营养琼脂平板在采样点暴露 30min后送检培养。 2、操作时，前臂不能越过已打开的培养皿；放培养 器皿时，要从内往外放，取时要从外往内，动作不 能粗重，以免影响培养效果。 3、按照平开平放法或平开扣放法放置30分钟，即 送检验室化验结果。
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5、监督执行手术室人员的无菌技术操作。 6、监测结果归档，备查。
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7、监督检查本科室抗菌药物使用情况。 8、组织本科室预防、控制医院感染知识培训
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谢 谢!
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