第十三章基因工程抗体

第十三章基因工程抗体

抗体研究的世代•第一代多克隆抗体•第二代单克隆抗体•第三代基因工程抗体

一.多克隆抗体（polyclonal antibody）：

指由不同B细胞克隆产生的针对抗原物质中多种抗原决定簇的多种抗体混合物。

如:免疫血清（含多种特异性抗体）。

实际意义：

（1）预防、治疗感染性疾病

如：破伤风抗毒素血清→抗破伤风

胎盘球蛋白→抗病毒感染

（2）临床诊断，缺点：特异性差。

二.单克隆抗体（monoclonal antibody,

McAb）

由单一克隆B细胞杂交瘤产生的，只识别抗原分子某一特定抗原决定簇的特异性抗体。

特点：具有高度均一性。

杂交瘤细胞：

骨髓瘤细胞无限增殖；

免疫B细胞合成、分泌特异性抗体。

鼠源单抗临床应用的障碍

•血清半衰期短，20h

•抗原抗体结合力、亲和力不够

•HAMA反应：8－10天出现，20－30天高峰，anti-id封闭与抗原结合位点，抗鼠抗体加速单抗清除。

•过敏休克

影响单抗与靶细胞或抗原结合引起变态反应和器官损害

HAMA反应的示意图

基因工程抗体

单克隆抗体在诊断和治疗中具有重要的作用。但是鼠源性的单抗用于临床治疗易产生人抗鼠抗体（Human anti-Mouse Antibody,HAMA)。利用基因工程技术，对抗体进行改造，减少鼠源性的成分，增加人源化的成分。利于单抗的临床应用。

第二节鼠单抗的人源化

1.人鼠嵌合抗体：

鼠单抗的可变区序列＋人抗体恒定区序列

2.利用计算机辅助设计，通过定点突变，改变

可变区的氨基酸，减少鼠源性。

1 人一鼠嵌合抗体(Chimeric Antibodies)

人一鼠嵌合抗体是将鼠源单抗的可变区与人抗体的恒定区融合而得到的抗体。

构建嵌合抗体的大致过程是，将鼠源单抗的可变区基因克隆出来，连到包含有人抗体恒定区基因及表达所需的其它元件(如启动子、增强子、选择标记等)的表达载体上，在哺乳动物细胞(如骨髓瘤细胞、CHO细胞)中表达。

构建重组表达载体

2 鼠单抗可变区的人源化

尽管嵌合抗体的免疫原性已降低很多，但有时它仍可能引发较强的免疫反应。为了进一步降低抗体的鼠源成分，发展出CDR移植技术。

CDR移植即把鼠抗体的CDR序列移植到人抗体的可变区内，所得到的抗体称CDR移植抗体或改型抗体，也就是人源化抗体。

经过CDR移植，抗体的免疫原性极低，而其抗原结合能力保持不变，结合半抗原及全抗原(如细胞表面受体、病毒等)的改形抗体都已有报道，到现在已有数百种人源化抗体。（美国正式上市的11种治疗性单抗中多数是改型抗体）

•2002年完全人源化单抗humira获得批准上市，这是单克隆抗体药物发展具有里程碑意义的大事，预示着单克隆抗体药物一个迅猛发展的新时代的来临。Humira是Abbott/CAT公司开发的一种治疗类风湿关节炎的单克隆抗体药物。

第三节小分子抗体和抗体融合蛋白

1.小分子抗体：改造基因，截取具有生物活性的区段，加以重组表达。

2.融合蛋白抗体：抗体的部分基因片段＋其他蛋白的基因。其他蛋白如蓖麻蛋白或绿脓杆菌外毒素等。

抗体药物销售趋势图

治疗型单克隆体－基因时代明星• 2007年4月3日

•国内单抗药物发展迅速，上市的单抗药物有11个，其中我国自行开发的有6个，处于临床研究阶段的有5个。

已批准上市的单抗

适用病症靶抗原抗体名称抗体来源临床阶段

移植排斥

大肠癌

冠心病

淋巴瘤

移植排斥

炎症性肠病、类风湿CD3

17-1A

血小板受体

ⅡbⅢa

CD20

CD25

TNF-а

OKT3

Panorex

ReoPro

Rituxan

Simulect

Remicade

鼠单抗

鼠单抗

人－鼠嵌

合抗体

人－鼠嵌

合抗体

人－鼠嵌

合抗体

人－鼠嵌

合抗体

1986

1995(德国)

1994

1997

1998

1998、1999

适用病症靶抗原抗体名称抗体来源临床阶段

移植排斥乳腺癌RVS感染AML

CLL CD25

HER-2

RSV F蛋白

CD33

CD52

Zanapax

Herceptin

Synagis

Mylotarg

CAMPATH

人源化抗体

人源化抗体

人源化抗体

人源化抗体

－化疗药物

交联物

人源化抗体

1997

1998

1998

2000

2001

正在进行临床开发中的基因工程

抗体

适用病症靶抗原抗体名称抗体来源临床阶段

银屑病IL－8

CD11a(IgG1)

ICAM-3

CD80

CD2

CD3ABX－IL8

Anti-CD11a

ICM3

IDEC-114

MEDI-507

Smart anti-

CD3

Human(人源)

Humanized

(人源化)

Humanized

Primatized

Humanized

Humanized(

IgG)

Ⅱ

Ⅰ，Ⅱ

临床前

Ⅰ

Ⅰ

Ⅰ/Ⅱ