BD Accuri C6 手册

BD Flow Cytometers
C6软件，简单即用,30分钟即可掌握，支持彩色显示，单界面涵盖所有主要功能
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• Simple • Multiplex • Accurate • Receptible price 使用简单 多重功能 结果精确 价格合理
SMART Choice
流式细胞仪的工作原理
散射光信号，散点图 (Dot Plot)
荧光信号
某些物质在特定波长范围内的光线照射下，可发出波长比 照射光波长长的光线-即荧光。而这些受激发后能产生荧 光的物质称为荧光素
单参数荧光直方图
双参数荧光散点图
www.bdbiosciences.com/spectra
流式细胞术操作流程
Pre-Optimized Detectors - Adjust View with Zoom
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CFlow软件，简单易用，30 min时间即可操作 免调电压，脱机补偿
软件无加密，可安装到用户个人电脑上进行分析
图和统计数据可直接导出为PPT或Excel，或拖至Word分析 关机自动清洗，节省您的宝贵时间
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Flow Cytometry Applications
免疫学研究
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• FCM应用 – 胞内 – 胞外 – 上清 • • • • • • 细胞培养 分化 寻找生物标记 Stem Cells定性 Side Population 分析 Stem Cells分离
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毒理药理实验 —— 微核分析
正在复制的细胞由于出现染色体断裂或者纺锤装置功能异 常而导致有丝分裂染色体分布紊乱，分裂后期这些染色体 碎片或整条染色体遗留在细胞液中，即所谓微核 (micronucleus，MN)
• Transportable
便携性强
BD为您提供专业流式服务
BD流式细胞术培训中心COE（上海，北京） BD每年开展巡回学术讲座（全国各大城市） BD编撰《Flow Cytometry》刊物，不断向客 户传达更多、 更新的流式资讯
BD —— Be With You !
Thanks!
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根据功能，淋巴细胞主要分为 • T 淋巴细胞（ CD3+ ），与细 胞免疫有关总T和总B可以用来 判断某些免疫缺陷和自身免疫 性疾病 • B 淋巴细胞（CD19+ ）与体液 免疫有关
淋巴细胞亚群分析
• NK细胞（CD3-CD16+56+） ，行使免疫监控功能， 能够介 导对某些肿瘤细胞和病毒感染 细胞的细胞毒性作用。
BD HLA-B27 Kit
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BD Introduction 流式专业论坛
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FCM Principles FCM Applications BD Accuri C6
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调节性T细胞（Tregs）
• Tregs 在抑制重要的病理性的免疫反应中，如：过敏反应、 自身免疫病、免疫-炎症状况等有重要影响。 • 表面标志：CD4，CD25，CD127，FOXp3
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干细胞研究
流式细胞术的原理及应用
Science is hard. FCM should be easy.
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FCM Principles FCM Applications BD Accuri C6
BD Introduction
BD是由Maxwell W. Becton和Fairleigh S. Dickinson 于
北京时间10月8日，2012年诺贝尔生理学或医学奖揭晓，约翰· 戈登（John B. Gurdon）和山中伸弥（Shinya Yamanaka） 获奖，获奖理由为“发现成熟细胞可被重编程变为多能性”。
c-Myc
Klf4
Oct3/4
Sox2
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干细胞研究方法-FCM
加入碘化丙啶溶液
用生物标准样品校准流式细胞仪 （488nm 激发光） 分析实验用血样
血液样本处理
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流式检测微核实验结果
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FCM与常规方法相比的优势
• 首先，在数小时内FCM可以分析30个动物血样，而在相同的时间内常规显 微镜阅片只能完成5张左右。 • 此外，使用FCM每个血样至少分析20 000个RET，是常规骨髓阅片的10 倍，大大增加了MN检测的准确性和统计能力， 也可基本满足目前分子生 物学大量候选化合物的高通量毒性筛选要求； • 除速度和通量提高以外，FCM亦能得出MN大小和分布的资 料，即PI相关 的荧光数值的大小(如DNA含量)，这也有利于MN形成机制的研究，区分 该遗传毒性化合物是DNA断裂剂还是非整倍体诱导剂
BD生物科学作为BD的一个业务组成，一直致力于为生命
科学研究者和临床医生提供创新的临床和科研工具。其主要 产品包括流式细胞仪；细胞图象分析系统；单克隆抗体和试 剂盒；药物研发产品及临床诊断试剂等。 1973年世界第一台商品化的流式细胞仪FACS I
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T Cells Research Stem Cells
跨越107.2的超高动态范围，免调电压
Existing System
就好比为流式技术装上了超宽屏幕！
24-bit Accuri C6
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高灵敏度，低CV，更适合细胞周期等实验
FL1 = 530/30 FL2 = 585/40 FL3 = 670LP FL4 = 675/25
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FCM Principles FCM Applications BD Accuri C6
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专利环形光路
• 所有接收器环绕流动室排 列，信号直接被检测器接 收，大幅提升接收效率 • 滤光片可以根据需要更换 ，满足不同检测需求
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样本收集及处理 制备单细胞悬液 免疫荧光染色
上机检测
数据分析
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细ຫໍສະໝຸດ Baidu结构
• • • • • 细胞大小 细胞颗粒度 细胞表面积 核浆比例 DNA含量与细胞周 期 • RNA含量 • 蛋白质含量 • ……
可检测的样本种类多样各种细胞（如外周血，骨髓，实体组织，
悬浮或贴壁培养的细胞），微生物，人工合成微球。
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液流系统
液流系统将样本悬液聚焦在光源的中心处
Injector Tip
Sheath fluid
Fluorescence signals Focused laser beam
细胞功能
• • • • • • • • • 细胞表面/胞浆/核的特异性抗原 细胞活性 细胞内/外的细胞因子 激素结合位点、细胞受体 蛋白磷酸化 pH值 钙离子浓度 细胞膜电位、线粒体膜电位 ……
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传统的微核计数方法枯燥、耗时，而且易受操作者主观因 素影响，流式细胞术(flow cytometry，FCM)计数是一种 高通量、客观、灵敏和自动化的替代方法。微核具有边缘 清晰和特异染色的特征，尤其适用于FCM技术进行自动化 计数。
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超冷甲醛固定 洗去超冷甲醛或 LTSS 将细胞与RNase, anti-CD71-FITC 和 antiPlatelet-PE共同孵育 将固定后的样本置于长期 保存溶液(LTSS)中。若储 存恰当，可至少保存3年。
鞘液作用
1. 避免堵塞管道 2. 约束样本位于中心、提高测量精度
光学系统
激发光学系统
– 激光器（C6：488nm & 640nm） – 透镜和反射镜
接收光学系统
– 滤光片
电子系统
-将模拟信号转化为数字信号 -计算每个脉冲峰的高度H，宽度W和面积A -和计算机连接以传出数据
Laser
Voltage Time Laser Voltage Time Laser Voltage Time
1897年在纽约创立的，总部设在新泽西州。
Maxwell W. Becton
Fairlegh S. Dickinson
经过一百多年的发展，BD已成为世界上最大的医疗技术及医 疗设备公司之一，它以领先的技术、卓越的产品质量和诚实可 信的服务赢得了全球用户及合作伙伴的广泛赞誉。
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Flow Cytometry Principles
流式细胞术（Flow Cytometry, 简称FCM）是一种快速、准确、客观
的同时检测直线流动状态中单个细胞多项物理及生物学特性，加以分析定 量的技术。
检测速度快，分析样本量大在极短时间内可分析大量细胞，这
是流式不同于其他细胞分析仪器的主要特点，可以每秒钟上万个细胞的速 率进行测量。
细胞周期 & 倍体分析
G2
M
G1
G0
s
Journal of Molecular Signaling 2011, 6:13
Flow Cytometry Applications
细胞凋亡分析
Annexin V，PI双染法检测细胞凋亡
Flow Cytometry Applications
细胞增殖分析 - CFSE标记法