18烷基硅烷键合硅胶色谱柱是c18
荆门上清丸中儿茶素、表儿茶素的含量测定
荆门上清丸中儿茶素、表儿茶素的含量测定目的：建立荆门上清丸的定量分析方法。
方法：用高效液相色谱法测定荆门上清丸中儿茶素、表儿茶素的总含量。
色谱柱为C18柱(250mm×4．6mm，5um)，流动相为甲醇-5%乙酸，梯度洗脱，流速为1．0mL／min，柱温30℃，检测波长278nm。
结果儿茶素，表儿茶素的平均回收率分别为为99.04%，100.74%，RSD分别为1.63%，2.32%。
结论：该方法可用于荆门上清丸的质量控制。
标签：荆门上清丸；儿茶素；表儿茶素；质量标准荆门上清丸来源于荆门李氏“老积荫堂”家传的祖传秘方,由儿茶、冰片、麝香、桔梗、荊芥等10味药组成，具有清热解毒的功效，治疗咽喉肿痛，口舌生疮，风火牙痛，伤风中暑，风热咳嗽，小便短赤等症。
由于该方配伍精当，疗效卓著。
该方中药味特殊，剂量相差悬殊，生产工艺独特，在早期生产时一直沿袭手工塑制成型。
为使这一古方更好得到继承和发扬，在基本尊照古方制法的基础上，现研究了荆门上清丸的生产工艺，并制定其质量控制方法。
儿茶为方中主药，儿茶素、表儿茶素为主要有效成分，因此荆门上清丸采用儿茶素、表儿茶素作为化学对照品，用HPLC法控制质量。
报告如下。
1仪器与试药1.1仪器高效液相色谱仪DIONEXP680HPLC；梅特勒-托利多电子天平AE100（精密为0.0001g）；水为二次蒸馏水，其余试剂均为分析纯。
1.2试药儿茶素、表儿茶素对照品（中国药品生物制品检定所）；荆门上清丸，荆门齐进药业提供。
2方法与结果2.1色谱条件①色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-0.5%冰醋酸梯度洗脱，检测波长为278nm。
理论板数儿茶素、表儿茶素计应不低于5000。
②对照品溶液的制备：精密称取经60℃减压干燥4小时的儿茶素、表儿茶素对照品适量，加甲醇，分别制成0.30mg/ml，0.13mg/ml溶液，即得。
③供试品溶液的制备：取荆门上清丸适量，研细，取粉末约0.10g，精密称定，置100ml容量瓶中，精密加入甲醇：水（1:1）的溶剂80ml，超声处理20分钟，放冷，加甲醇：水（1:1）至刻度，摇匀，过滤，取续滤液即得。
维生素B2片分析方法验证方案
一．概述1.维生素B2片含量测定：照高效液相色谱法（通则0512）测定。
1.1色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0. Olmol/L庚烷磺酸钠的0.5%冰醋酸溶液-乙腈-甲醇(85∶10∶5)为流动相；检测波长为444nm。
理论板数按维生素B2峰计算不低于2000。
1.2测定法避光操作。
取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于维生素B2 10mg)，置500ml量瓶中，加盐酸溶液(1→2)10ml，振摇使维生素B2 溶解，加水20ml，继续振摇数分钟，再加水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液，精密量取20ul注入液相色谱仪，记录色谱图；另取维生素B2对照品约10mg，同法测定。
按外标法以峰面积计算，即得。
1.3本品含维生素B2计算，应为标示量的90.0% ～110.0%。
2. 维生素B2片溶出度测定：照溶出度与释放度测定法（通则0931第二法）测定法避光操作。
取本品，以冰醋酸3ml与4%氢氧化钠溶液18ml用水稀释至600ml为溶出介质，转速为每分钟100转，依法操作，经20分钟时，取溶液10ml，滤过，取续滤液，照紫外-可分光光度法（通则0401)，在444nm的波长处测定吸光度，按C17H20N4O6的吸收系数()为323计算每片的溶出量。
限度为标示量的75%，应符合规定。
3. 维生素B2片有关物质测定：照高效液相色谱法（通则0512）测定。
色谱条件照含量测定。
避光操作。
取本品的细粉适量（约相当于维生素B2 10mg)，置100ml 量瓶中，加盐酸溶液（1→2)5ml，振摇使维生素B2溶解，加水10ml，继续振摇数分钟，再用水稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；精密量取1ml，置50ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。
精密量取供试品溶液与对照溶液各20ul，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的3倍。
供试品溶液的色谱图中如有杂质峰，单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的0.75倍(1.5% ) ，各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的1.5倍（3.0% )。
阿奇霉素片方法验证
一．概述1 有关物质1.1照高效液相色谱法（通则0512）测定1.2色谱条件十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相A为磷酸盐缓冲液（取0.05mol/L磷酸氢二钾溶液，用20%的磷酸溶液调节pH值至8.2）-乙腈（45∶55），流动相B为甲醇，柱温为30℃（必要时适当调整）；按下表进行线性梯度洗脱；流速为每分钟1.0ml，检测波长为210nm。
取杂质S和杂质A对照品各适量，加上述稀释液溶解并稀释制成每1ml中各约含0.05mg的溶液，作为杂质S和杂质A对照品溶液；另取阿奇霉素系统适用性对照品（含杂质R、杂质Q、杂质J、杂质I、杂质H、阿奇霉素和杂质B）适量，加上述对照品溶液溶解并稀释制成每1ml中约含10mg的溶液，作为系统适用性溶液；精密量取对照溶液10ml，置50ml量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀，作为灵敏度溶液，取系统适用性溶液和灵敏度溶液各50μl，分别注入液相色谱仪，灵敏度溶液主成分峰峰高的信噪比应大于10，系统适用性溶液色谱图中各峰之间的分离度均应大于1.2，阿奇霉素峰的保留时间35 95 564 95 565 75 251.3测定法取本品细粉适量，加稀释液[磷酸二氢铵溶液（称取磷酸二氢铵1.73g,加水溶解并稀释至1000ml，用氨试液调节P H值至10.0±0.05）-甲醇-乙腈（7：7：6）]使阿奇霉素溶解并稀释制成每1ml中含阿奇霉素10mg的溶液，滤过，取续滤液作为供试品溶液；精密量取1 ml，置200 ml量瓶中，加稀释液稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。
精密量取供试品溶液和对照溶液各50μl，分别注入液相色谱图仪，记录色谱图。
供试品溶液色谱图中如有杂质峰，杂质B峰面积不得大于对照溶液主峰面积的4倍（2.0%），杂质H与杂质Q按校正后的峰面积计算（分别乘以校正因子0.1、0.4）不得大于对照溶液主峰面积的2倍（1.0%），其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的2倍（1.0%），各杂质峰面积的和按校正后的峰面积计算不得大于对照溶液主峰面积的8倍（4.0%）。
正相色谱和反向色谱及C18柱子
正相色谱和反向色谱及C18柱子反相与正相的区别在于，固定相与流动相的极性大小。
反相：固定相的极性小于流动相的极性正相：固定相的极性大于流动相的极性反向色谱流动相极性大于固定相极性测定样品时极性大的先出峰，正向反之在正相色谱中，一般采用极性键合固定相，硅胶表面键合的是极性的有机基团，键合相的名称由键合上去的基团而定。
最常用的有氰基（-CN）、氨基（-NH2）、二醇基（DIOL）键合相。
流动相一般用比键合相极性小的非极性或弱极性有机溶剂，如烃类溶剂，或其中加入一定量的极性溶剂（如氯仿、醇、乙腈等），以调节流动相的洗脱强度。
通常用于分离极性化合物。
一般认为正相色谱的分离机制属于分配色谱。
组分的分配比K值，随其极性的增加而增大，但随流动相中极性调节剂的极性增大（或浓度增大）而降低。
同时，极性键合相的极性越大，组分的保留值越大。
该法主要用于分离异构体，极性不同的化合物，特别是用来分离不同类型的化合物。
反相键合相色谱法在反相色谱中，一般采用非极性键合固定相，如硅胶-C18H37（简称ODS或C18）硅胶-苯基等，用强极性的溶剂为流动相，如甲醇/水，乙腈/水，水和无机盐的缓冲液等。
目前，对于反相色谱的保留机制还没有一致的看法，大致有两种观点：一种认为属于分配色谱，另一种认为属于吸附色谱。
分配色谱的作用机制是假设混合溶剂（水+有机溶剂）中极性弱的有机溶剂吸附于非极性烷基配合基表面，组分分子在流动相中与被非极性烷基配合基所吸附的液相中进行分配。
吸附色谱的作用机制是把非极性的烷基键合相，看作是在硅胶表面上覆盖了一层键合的十八烷基的“分子毛”，这种“分子毛”有强的疏水特性。
当用水与有机溶剂所组成的极性溶剂为流动相来分离有机化合物时，一方面，非极性组分分子或组分分子的非极性部分，由于疏溶剂的作用，将会从水中被“挤”出来，与固定相上的疏水烷基之间产生缔合作用。
另一方面，被分离物的极性部分受到极性流动相的作用，使它离开固定相，减少保留值，此即解缔过程。
美国药典(USP)规定的色谱柱编号
美国药典(USP)规定的色谱柱编号L1和L8是美国药典(USP)规定的色谱柱编号，其实就是ODS柱和NH2柱。
下面是USP规定的编号所对应的色谱柱类型。
L1：十八烷基键合多孔硅胶或无机氧化物微粒固定相，简称ODS柱L2：30～50m m表面多孔薄壳型键合十八烷基固定相，简称C18柱L3：多孔硅胶微粒，即一般的硅胶柱L4：30～50m m表面多孔薄壳型硅胶柱L5：30～50m m表面多孔薄壳型氧化铝柱L6：30～50m m实心微球表面包覆磺化碳氟聚合物，强阳离子交换柱L7：全多孔硅胶微粒键合C8官能团固定相，简称C8柱L8：全多孔硅胶微粒键合非交联NH2固定相，简称NH2柱L9：强酸性阳离子交换基团键合全多孔不规则形硅胶固定相，即SCX柱L10：多孔硅胶微球键合氰基固定相（CN），简称CN柱L11：键合苯基多孔硅胶微球固定相，简称苯基柱L12：无孔微球键合季胺功能团的强阴离子交换柱L13：三乙基硅烷化学键合全多孔硅胶微球固定相（C1），简称C1柱L14：10m m硅胶化学键合强碱性季铵盐阴离子交换固定相，简称SAX柱L15：已基硅烷化学键合全多孔硅胶微球固定相，简称C6柱L16：二甲基硅烷化学键合全多孔硅胶微粒固定相 C2柱L17：氢型磺化交联苯乙烯-二乙烯基苯共聚物,强阳离子交换柱L18：3～10m m全多孔硅胶化学键合胺基（NH2）和氰基（CN）柱L19：钙型磺化交联苯乙烯－二乙烯基苯共聚物，强阳离子交换柱L20：二羟基丙烷基化学键合多孔硅胶微球固定相（Diol），简称二醇基柱L21：刚性苯乙烯－二乙烯基苯共聚物微球填料柱L22：带有磺酸基团的多孔苯乙烯阳离子交换柱L23：带有季胺基团的聚甲基丙烯酸甲酯或聚丙烯酸酯多孔离子交换柱L24：表面含有大量羟基的半刚性聚乙烯醇亲水凝胶柱L25：聚甲基丙烯酸酯树脂交联羟基醚（表面含有残余羧基功能团）树脂。
能分离分子量100～5000MW范围的水溶性中性、阳离子型及阴离子型聚合物（用聚氧乙烯测定）的固定相L26：丁基硅烷化学键合全多孔硅胶微球固定相，即C4柱L27：30～50m m的全多孔硅胶微粒L28：多功能载体，100Å的高纯硅胶加以氨基键合以及C8反相键合的官能团L29:氧化铝,反相键合,含碳量低,氧化铝基聚丁二稀小球,5m m，孔径80ÅL30:全多孔硅胶键合乙基硅烷固定相L31:季胺基改性孔径2000Å的交联苯乙烯和二乙烯基苯(55%)强阴离子交换树脂L32: L-脯氨酸铜配合物共价键合于不规则形硅胶微粒的配位体的交换手性色谱填料L33:能够分离分子量4000～40000MW范围蛋白质分子的球形硅胶固定相, pH稳定性好L34：铅型磺化交联苯乙烯－二乙烯基苯共聚物强阳离子交换树脂，9m m球形L35：锆稳定的硅胶微球键合二醇基亲水分子单层固定相，孔径150ÅL36:5m m胺丙基硅胶键合L-苯基氨基乙酸－3,5二硝基苯甲酰L37：适合分离分子量2000～40000MW的聚甲基丙烯酸酯凝胶L38：水溶性甲基丙烯酸酯基质SEC色谱柱L39：亲水全多孔聚羟基甲基丙烯酸酯色谱柱L40：Tris 3,5－二甲基苯基氨基甲酸酯纤维素涂覆多孔硅胶微球L41：球形硅胶表面固定α1酸糖蛋白固定相L42: C8和C18硅烷化学键合多孔硅胶固定相L43:硅胶微球键合五氟代苯基固定相L44:多功能固定相,60 Å高纯硅胶基质键合磺酸阳离子交换功能团和C8反相功能团L45: β-环糊精键合多孔硅胶微球L46:季胺基改性苯乙烯-二乙烯基苯聚合物微球L1 Octadecyl silane chemically bonded to porous silica or ceramic.L1 十八烷基键合硅烷化学键合于多孔硅胶或陶瓷微粒，3-10u。
c18色谱柱原理
c18色谱柱原理
C18色谱柱是一种常用的反相色谱柱，其原理是基于C18烷基链与待分离物之间的相互作用。
C18色谱柱的填料表面被修饰
为碳链，具有与待分离物相似的非极性性质。
当样品进入C18色谱柱时，非极性样品成分会与C18表面相互作用，而极性
物质则通过柱床。
在C18色谱柱中，待分离物的保留时间是根据其与C18填料
的亲合力来确定的。
非极性物质与C18发生较强的相互作用，因此在柱床中停留的时间较长；而极性物质与C18之间的相
互作用较弱，因此在柱床中停留的时间较短。
通过调节移动相的组成、流速和温度等条件，可以控制待分离物与C18填料
的相互作用，从而实现对样品的分离和定量分析。
C18色谱柱可用于分离各种化学类别的化合物，如药物、天然
产物、环境污染物和生物样品中的代谢物等。
其优势在于能够在中性和酸性条件下工作，具有良好的稳定性和重复性。
总之，C18色谱柱利用C18烷基链与待分离物之间的相互作用实现分离，是一种常用的反相色谱分析技术。
通过优化分离条件，可以实现对复杂样品的高效分离和定量分析。
高效液相试题及答案
高效液相色谱基础知识测试一、填空题1、我们公司所用的高效液相色谱仪的品牌是：安捷伦1260 。
高效气相色谱仪的型号是安捷伦7890 。
2、高效液相色谱系统由恒温器、四元泵、进样器、色谱柱、检测器和分析系统组成。
3、本公司所用的高效液相，为防止压力过大导致柱内填料空间发生变化，影响分离效果。
一般采用C18（十八烷基硅烷键合硅胶）填料的色谱柱，最高工作压力为400 bar。
4、高效液相根据流动相与固定相极性分为：正相高效液相色谱和反相高效液相色谱。
5、开机步骤：接通电源，依次开启不间断电源、真空脱气机、四元泵、检测器，待泵和检测器自检结束后，打开电脑显示器、主机，最后打开色谱工作站。
6、高效液相的维护：最后一次进样完成后，应用流动相冲洗20分钟，以保证洗脱完全，若流动相中含有无机盐类，应用高纯水冲洗30分钟，。
7、进样器的保养：每次分析结束后，要反复冲洗进样口，防止样品的交叉污染。
8、气相色谱仪常用的检测器有热导检测器，氢火焰检测器，电子捕获检测器和火焰光度检测器。
二、选择题1.在液相色谱法中，提高柱效最有效的途径是（D ）A.提高柱温B.降低板高C.降低流动相流速D.减小填料粒度2. 在高固定液含量色谱柱的情况下，为了使柱效能提高，可选用( A )A.适当提高柱温B.增加固定液含量C.增大载体颗粒直径D.增加柱长3. 在液相色谱中, 为了提高分离效率, 缩短分析时间, 应采用的装置是( B )A. 高压泵B. 梯度淋洗C. 贮液器D. 加温4. 在液相色谱中, 最通用型检测器是( A )A.示差折光检测器B.极谱检测器C.荧光检测器D.电化学检测器5. 在液相色谱中, 为了获得较高柱效能, 常用的色谱柱是( A )A.直形填充柱B.毛细管柱C.Ｕ形柱D.螺旋形柱6. 实验室常用气相色谱仪的基本组成是（B ）。
(1)光源；(2)气路系统；(3)单色器系统；(4)进样系统；(5)分离系统；(6)吸收系统；(7)电导池；(8)检测系统；(9)记录系统。
安捷伦液相色谱柱键合相说明
80
L7
Zorbax C8
辛烷基硅烷键合相的封端的球形全多孔硅胶颗粒
5, 7
70
L7
Zorbax Poroshell 300SB-C18
侧基有立体保护基团的辛烷基硅烷化学键合相的球形薄壳型硅胶颗粒
5
300
L7
Zorbax Poroshell 300Extend-C18
双齿键合的辛烷基硅烷化学键合相的球形薄壳型硅胶颗粒
70
L1
Zorbax ODS-封端
单封端的十八烷基硅烷键合相的球形全多孔硅胶颗粒
5,7
70
L1
Zorbax Rx-C18
十八烷基硅烷键合相的球形全多孔硅胶颗粒
3.5, 5, 7
80
L1
Zorbax SB-C18
侧基有立体保护基团的十八烷基硅烷化学键合相的球形全多孔硅胶颗粒
1.8, 3.5, 5, 7
L7
Zorbax Eclipse XDB-C8
双封端的辛烷基硅烷键合相的球形全多孔硅胶颗粒
1.8, 3.5, 5, 7
80
L7
Agilent HC-C8
双封端的辛烷基硅烷键合相的球形全多孔硅胶颗粒
5
130
L7
LiChrosphere RP-C8
辛烷基硅烷化学键合相的球形全多孔硅胶颗粒
5
60
L7
色谱柱名称
安捷伦液相色谱柱键合相说明表
色谱柱名称
填料描述
粒径 (μm)
孔径(Å)
USP
键合相
Zorbax EclipsePlus-C18
双封端的十八烷基硅烷化学键合相的球形全多孔硅胶颗粒
1.8, 3.5, 5
L1：十八烷基键合多孔硅胶或无机氧化物微粒固定相
L1：十八烷基键合多孔硅胶或无机氧化物微粒固定相，简称ODS柱L2：30～50mm表面多孔薄壳型键合十八烷基固定相，简称C18柱L3：多孔硅胶微粒，即一般的硅胶柱 L4：30～50mm表面多孔薄壳型硅胶柱L5：30～50mm表面多孔薄壳型氧化铝柱L6：30～50mm实心微球表面包覆磺化碳氟聚合物，强阳离子交换柱L7：全多孔硅胶微粒键合C8官能团固定相，简称C8柱L8：全多孔硅胶微粒键合非交联NH2固定相，简称NH2柱L9：强酸性阳离子交换基团键合全多孔不规则形硅胶固定相，即SCX柱L10：多孔硅胶微球键合氰基固定相（CN），简称CN柱L11：键合苯基多孔硅胶微球固定相，简称苯基柱L12：无孔微球键合季胺功能团的强阴离子交换柱L13：三乙基硅烷化学键合全多孔硅胶微球固定相（C1），简称C1柱L14：10mm硅胶化学键合强碱性季铵盐阴离子交换固定相，简称SAX柱L15：已基硅烷化学键合全多孔硅胶微球固定相，简称C6柱L16：二甲基硅烷化学键合全多孔硅胶微粒固定相 C2柱L17：氢型磺化交联苯乙烯-二乙烯基苯共聚物,强阳离子交换柱L18：3～10mm全多孔硅胶化学键合胺基（NH2）和氰基（CN）柱L19：钙型磺化交联苯乙烯－二乙烯基苯共聚物，强阳离子交换柱L20：二羟基丙烷基化学键合多孔硅胶微球固定相（Diol），简称二醇基柱L21：刚性苯乙烯－二乙烯基苯共聚物微球填料柱L22：带有磺酸基团的多孔苯乙烯阳离子交换柱L23：带有季胺基团的聚甲基丙烯酸甲酯或聚丙烯酸酯多孔离子交换柱L24：表面含有大量羟基的半刚性聚乙烯醇亲水凝胶柱L25：聚甲基丙烯酸酯树脂交联羟基醚（表面含有残余羧基功能团）树脂。
能分离分子量100～5000MW范围的水溶性中性、阳离子型及阴离子型聚合物（用聚氧乙烯测定）的固定相L26：丁基硅烷化学键合全多孔硅胶微球固定相，即C4柱L27：30～50mm的全多孔硅胶微粒L28：多功能载体，100Å的高纯硅胶加以氨基键合以及C8反相键合的官能团L29:氧化铝,反相键合,含碳量低,氧化铝基聚丁二稀小球,5mm，孔径80ÅL30:全多孔硅胶键合乙基硅烷固定相L31:季胺基改性孔径2000Å的交联苯乙烯和二乙烯基苯(55%)强阴离子交换树脂L32: L-脯氨酸铜配合物共价键合于不规则形硅胶微粒的配位体的交换手性色谱填料L33:能够分离分子量4000～40000MW范围蛋白质分子的球形硅胶固定相, pH稳定性好L34：铅型磺化交联苯乙烯－二乙烯基苯共聚物强阳离子交换树脂，9mm球形L35：锆稳定的硅胶微球键合二醇基亲水分子单层固定相，孔径150ÅL36:5mm胺丙基硅胶键合L-苯基氨基乙酸－3,5二硝基苯甲酰L37：适合分离分子量2000～40000MW的聚甲基丙烯酸酯凝胶L38：水溶性甲基丙烯酸酯基质SEC色谱柱L39：亲水全多孔聚羟基甲基丙烯酸酯色谱柱L40：Tris 3,5－二甲基苯基氨基甲酸酯纤维素涂覆多孔硅胶微球L41：球形硅胶表面固定α1酸糖蛋白固定相L42: C8和C18硅烷化学键合多孔硅胶固定相 L43:硅胶微球键合五氟代苯基固定相L44:多功能固定相,60 Å高纯硅胶基质键合磺酸阳离子交换功能团和C8反相功能团L45: β-环糊精键合多孔硅胶微球L46:季胺基改性苯乙烯-二乙烯基苯聚合物微球。
HPLC法测定硝苯地平片含量均匀度
HPLC法测定硝苯地平片含量均匀度摘要：本文采用高效液相法（HPLC）测定硝苯地平片含量均匀度。
十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂 Agilent C18（4.6mm×150mm，5μm）分析柱，以甲醇-水（70：30）为流动相，流速1mL/ min；进样量20μL，检测波长为235nm，理论板数按硝苯地平峰计算为2282。
在此色谱条件下可得到较宽线性范围和较高的回收率，其分解产物亦可得到良好的分离。
关键词：高效液相色谱法；硝苯地平片；含量均匀度1 前言硝苯地平片作为一种选择性钙拮抗药物，能同时舒张正常供血区和缺血区的冠状动脉，拮抗自发的或麦角新碱诱发的冠状动脉痉挛，增加冠状动脉痉挛病人心肌氧的递送，解除和预防冠状动脉痉挛，抑制心肌收缩，降低心肌代谢，减少心肌耗氧量，舒张外周阻力血管，降低外周阻力，可使收缩血压和舒张血压降低，减轻心脏后负荷，临床上广泛应用于心血管病人的治疗，对于心绞痛（变异型心绞痛；不稳定型心绞痛；慢性稳定型心绞痛）以及高血压有很好的临床疗效。
本文在避光的条件下采用高效液相色谱法测定硝苯地平片的含量均匀度，结果令人满意，从而可有效地对硝苯地平片的质量加以控制，捍卫百姓用药安全。
2 实验部分2.1 仪器Waters2695型高效液相色谱仪、Waters 2998型紫外可见检测器。
2.2 试药硝苯地平，来源中检所，批号100358-200502；甲醇，优级纯；三乙胺、醋酸均为分析纯；水为自制PC水，硝苯地平片。
2.3色谱条件采用外标法：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂 Agilent C18（4.6mm×150mm，5μm）分析柱，色谱柱温25℃，甲醇-水（70：30）为流动相，检测波长为 235nm，理论板数按硝苯地平峰计算不低于2282，流速：1ml/ min；进样量：20μL。
2.4对照溶液配置取硝苯地平对照品0.02088g，置50ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，精取5ml置100ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，用0.45μm微孔滤膜（有机膜）滤过，即得。
硝酸甘油溶液中有关物质的含量测定
硝酸甘油溶液中有关物质的含量测定发表时间：2018-07-05T15:09:24.747Z 来源：《中国医学人文》(学术版)2018年1月第2期作者：方斌[导读] 探讨硝酸甘油溶液中有关物质的含量测定方法。
方法：采用高效液相色谱法方斌浙江大学医学院附属儿童医院浙江杭州 310052【摘要】目的：探讨硝酸甘油溶液中有关物质的含量测定方法。
方法：采用高效液相色谱法，色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶柱DiamonsilC18（4.6mm×150mm，5μm），以乙腈-水（50∶50）为流动相，于波长为215nm处检测。
结果：硝酸甘油在1.86~9.83 μg/ml范围内峰面积A与浓度C有高度相关性，线性关系良好，硝酸甘油溶液的最小检出浓度为1．82μg/ml，有关物质的含量分别为0.27%，0.24%，0.19%；结论：采用高效液相色谱法测定硝酸甘油溶液中有关物质，简便，快捷，灵敏度好，能准确地测定产品的有关物质。
【关键词】硝酸甘油；HPLC法；有关物质；含量测定硝酸甘油溶液（Nitroglycerin Solution）为无色的澄明液体，有乙醇的特臭，相对密度为0.835～0.850，用于冠心病心绞痛的治疗及预防，也可用于降低血压或治疗充血性心力衰竭。
硝酸甘油在放置过程中容易产生水解作用，在高温条件下也易产生降解作用，故需控制其有关物质的限度。
高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography，HPLC），系采用高压输液泵将流动相泵入到装有填充剂的色谱柱，对供试品进行分离测定的色谱方法。
硝酸甘油注射液的质量标准中规定，在产品生产过程半成品和成品检验，需用高效液相色谱法测定其含量。
本文采用HPLC 法对硝酸甘油溶液有关物质测定，简便，快捷，灵敏度好，能准确地测定产品的有关物质。
1仪器与试药仪器：CLASS-VP 工作站，岛津Shmadzu LC-2010A，色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶柱DiamonsilC18（4.6mm×150mm，5μm），HypersiBDS-C 18；UV160-A紫外分光光度计。
维生素B2片分析方法验证方案
一．概述1.维生素B2片含量测定：照高效液相色谱法（通则0512）测定。
1.1色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0. Olmol/L庚烷磺酸钠的0.5%冰醋酸溶液-乙腈-甲醇(85∶10∶5)为流动相；检测波长为444nm。
理论板数按维生素B2峰计算不低于2000。
1.2测定法避光操作。
取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于维生素B2 10mg)，置500ml量瓶中，加盐酸溶液(1→2)10ml，振摇使维生素B2 溶解，加水20ml，继续振摇数分钟，再加水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液，精密量取20ul注入液相色谱仪，记录色谱图；另取维生素B2对照品约10mg，同法测定。
按外标法以峰面积计算，即得。
1.3本品含维生素B2计算，应为标示量的90.0% ～110.0%。
2. 维生素B2片溶出度测定：照溶出度与释放度测定法（通则0931第二法）测定法避光操作。
取本品，以冰醋酸3ml与4%氢氧化钠溶液18ml用水稀释至600ml为溶出介质，转速为每分钟100转，依法操作，经20分钟时，取溶液10ml，滤过，取续滤液，照紫外-可分光光度法（通则0401)，在444nm的波长处测定吸光度，按C17H20N4O6的吸收系数()为323计算每片的溶出量。
限度为标示量的75%，应符合规定。
3. 维生素B2片有关物质测定：照高效液相色谱法（通则0512）测定。
色谱条件照含量测定。
避光操作。
取本品的细粉适量（约相当于维生素B2 10mg)，置100ml 量瓶中，加盐酸溶液（1→2)5ml，振摇使维生素B2溶解，加水10ml，继续振摇数分钟，再用水稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；精密量取1ml，置50ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。
精密量取供试品溶液与对照溶液各20ul，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的3倍。
供试品溶液的色谱图中如有杂质峰，单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的0.75倍(1.5% ) ，各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的1.5倍（3.0% )。
十八烷基硅烷键合硅胶和苯基硅烷键合硅胶色谱柱
一、引言硅胶色谱柱作为高效液相色谱（HPLC）中常用的填料材料，其种类繁多，其中包括十八烷基硅烷键合硅胶和苯基硅烷键合硅胶。
这两种硅胶色谱柱因其在分离和分析方面的优异性能而备受关注。
本文将就这两种硅胶色谱柱的特性、应用和发展趋势进行探讨。
二、十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱1. 特性十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱是在硅胶表面修饰上十八烷基硅烷键合剂形成的填料。
它具有良好的亲油性和疏水性，对疏水性化合物有良好的保留与分离效果。
十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱对多种非极性溶剂具有较好的耐久性。
2. 应用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱广泛应用于疏水性化合物的分离和分析，如脂溶性维生素、生物膜中脂质成分等。
其在食品、药物、环境等领域的分析具有重要意义。
3. 发展趋势随着对多种溶剂和化合物的需求不断增加，十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱的制备技术和应用领域也在不断拓展。
未来，该色谱柱在大分子化合物、生物医学领域的应用将得到更多关注。
三、苯基硅烷键合硅胶色谱柱1. 特性苯基硅烷键合硅胶色谱柱是在硅胶表面修饰上苯基硅烷键合剂形成的填料。
它具有较高的亲硅性和极性，对极性化合物有较好的保留与分离效果。
苯基硅烷键合硅胶色谱柱可在中性和碱性条件下使用，具有较好的耐久性和稳定性。
2. 应用苯基硅烷键合硅胶色谱柱广泛应用于极性和中性化合物的分离和分析，如药物中的片剂成分、芳香族化合物等。
在环境科学、食品安全等领域也有重要应用。
3. 发展趋势苯基硅烷键合硅胶色谱柱因其对极性化合物的保留和分离效果，未来在天然产物分析、环境监测等领域的应用前景广阔。
其在生物大分子和生命科学类样品的分离分析方面也有较大潜力。
四、结论十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱和苯基硅烷键合硅胶色谱柱作为液相色谱中常用的填料材料，具有各自独特的特性和应用优势。
随着科学技术的不断发展，对于色谱柱材料的要求也越来越高。
未来这两种硅胶色谱柱的研究和应用将继续受到重视，其在分析领域中的地位和作用也将不断得到加强和拓展。
美国USP色谱柱编号对照表
美国USP色谱柱编号对照表L1：十八烷基键合多孔硅胶或无机氧化物微粒固定相，简称C18或ODSL2：30～50um表面多孔薄壳型键合C18(ODS)固定相L3：多孔硅胶微粒即一般的硅胶柱L4：30～50um表面多孔薄壳型硅胶L5：30～50um表面多孔薄壳型氧化铝L6：30～50um实心微球表面包覆磺化碳氟聚合物－强阳离子交换固定相L7：全多孔硅胶微粒键合C8官能团固定相简称C8柱L8：全多孔硅胶微粒键合非交联NH2固定相简称NH2柱L9：强酸性阳离子交换基团键合全多孔不规则形硅胶固定相L10：多孔硅胶微球键合氰基固定相（CN）简称CN柱L11：键合苯基多孔硅胶微球固定相简称苯基柱L12：无孔微球键合季胺功能团的强阴离子填料L13：三乙基硅烷化学键合全多孔硅胶微球固定相（C1）简称C1柱L14:10um硅胶化学键合强碱性季铵盐阴离子交换固定相简称SAX柱L15：已基硅烷化学键合全多孔硅胶微球固定相简称C6柱L16：二甲基硅烷化学键合全多孔硅胶微粒固定相L17：氢型磺化交联苯乙烯-二乙烯基苯共聚物,强阳离子交换树脂L18: 3～10um全多孔硅胶化学键合胺基（NH2）和氰基（CN）L19：钙型磺化交联苯乙烯－二乙烯基苯共聚物，强阳离子交换树脂L20：二羟基丙烷基化学键合多孔硅胶微球固定相（Diol）简称二醇基柱L21：刚性苯乙烯－二乙烯基苯共聚物微球L22：带有磺酸基团的多孔苯乙烯阳离子交换树脂L23：带有季胺基团的聚甲基丙烯酸甲酯或聚丙烯酸酯多孔离子交换树脂L24：表面含有大量羟基的半刚性聚乙烯醇亲水凝胶L25：聚甲基丙烯酸酯树脂交联羟基醚（表面含有残余羧基功能团）树脂。
能分离分子量100～5000MW范围的水溶性中性、阳离子型及阴离子型聚合物（用聚氧乙烯测定）的固定相L26：丁基硅烷化学键合全多孔硅胶微球固定相L27：30～50um的全多孔硅胶微粒L28：多功能载体，100?的高纯硅胶加以氨基键合以及C8反相键合的官能团L29: 氧化铝,反相键合,含碳量低,氧化铝基聚丁二稀小球,5um，孔径80?L30: 全多孔硅胶键合乙基硅烷固定相L31: 季胺基改性孔径2000?的交联苯乙烯和二乙烯基苯(55%)强阴离子交换树脂L32: L-脯氨酸铜配合物共价键合于不规则形硅胶微粒的配位体的交换手性色谱填料L33: 能够分离分子量4000～40000MW范围蛋白质分子的球形硅胶固定相,pH稳定性好L34：铅型磺化交联苯乙烯－二乙烯基苯共聚物强阳离子交换树脂，9um球形L35：锆稳定的硅胶微球键合二醇基亲水分子单层固定相，孔径150?L36: 5um胺丙基硅胶键合L-苯基氨基乙酸－3,5二硝基苯甲酰L37：适合分离分子量2000～40,000Mw的聚甲基丙烯酸酯凝胶L38：水溶性甲基丙烯酸酯基质SEC色谱柱L39：亲水全多孔聚羟基甲基丙烯酸酯色谱柱L40：Tris 3,5－二甲基苯基氨基甲酸酯纤维素涂覆多孔硅胶微球L41：球形硅胶表面固定α1酸糖蛋白固定相L42: C8和C18硅烷化学键合多孔硅胶固定相L43: 硅胶微球键合五氟代苯基固定相L44: 多功能固定相,60 ?高纯硅胶基质键合磺酸阳离子交换功能团和C8反相功能团L45: β-环糊精键合多孔硅胶微球L46: 季胺基改性苯乙烯-二乙烯基苯聚合物微球。
如何选择色谱柱
C18简介C18是连接了18烷基碳链的反相固定相的总称.ODS 是以硅胶为基质键合的C18填料, 而C18还包括其他基质的填料,比如高聚物小球为基质,氧化铝为基质,氧化锆为基质等键合C18链形成的反相固定相,这些可以称为"C18",但是不是ODS.2)RP-18也是C18中的一种,不同的公司对C18填料有不同的商业名称,本质应该都是一样的.Merck公司的填料喜欢叫RP-18. 比如Merck 的LiChrospher RP-18, Superspher RP-18,Purospher RP-18. 因此,我认为说"RP-18"是改进型的不妥当.Merck的改进表现在前边的名字上,比如LiCHrospher, Superspher, Purospher表现的是不同的性能.3) "普通ODS分析酸性、中性或弱碱性化合物时均可以获得较佳的峰不对称度。
但当分析药物化合物中的强极性含氮的碱性样品时，样品峰形就极差，拖尾严重，定量分析精度下降",这句话我认为值得商榷.普通的ODS,在分离中性化合物,极弱性的酸或硷化合物的时候可以得到较好的峰形,对于弱至中等极性的酸碱化合物,多数情况下会出现不同程度的拖尾.对于强极性化合物,不单是药物,其他化合物一样,都会出现严重的拖尾现象.ODS 对强极性分离不行。
C8 和C18都是反相色谱柱的一种，适用于分析弱极性的物质，而C8在弱极性较强的一侧，C18在极性较弱的一侧。
也就是说，C8适合分析弱极性物质里极性稍强的一类物质，C18适合分析弱极性物质里极性更弱的物质。
这是他们极性上的差别，但是差别并不是特别明显，一般能用C8分析的物质，在C18上也能分离。
这是因为，后者比前者的保留特性更好一些，这似乎和色谱柱填料的结构关系更为密切。
在让我们谈谈空间位阻的问题，也许由于C18比C8的碳链更长，因此带来更好的保留特性。
安捷伦的新十八烷基硅烷化(ODS) (C18)固相萃取小柱
• 适用于中性、弱酸性和碱性化合物
• 简单的萃取步骤
概述
安捷伦将推出 SampliQ 系列固相萃取(SPE)小柱，取 代 AccuBONDII 产品系列。这一新产品系列与目前使 用的 AccuBONDII 小柱一样，包括各种硅胶小柱、 Florisil PR 小柱和氧化铝小柱。另外，安捷伦还将扩展 SPE 小柱的系列产品，包括通用聚合物固定相和离子 交换萃取。现在还有石墨化碳系列小柱。在本技术报 告中，我们将对照 AccuBONDII C18 SPE 小柱，逐条阐 述新 SampliQ C18 的性能。
Agilent SampliQ C18 填料是一种十八烷基硅烷化键 合的不规则硅胶颗粒。这种非极性、不封端的吸附剂 可以为疏水化合物提供反相键合作用。此外，还可实 现 与 表 面 硅 醇 基 之 间 的 极 性 相 互 作 用 。与 相 应 的 SampliQ C18 EC（封端）吸附剂相比，增加了碱性化 合物的保留。我们推荐将 Agilent SampliQ C18 作为 极性和非极性分析物的通用 SPE 填料。
2
表 1. 用于评价的化合物及其化学性质
化合物 咖啡因
类型
Log P
碱
–0.5
磺胺二甲嘧啶 酸
1.6
丁噻隆
中性
不适用
强的松
中性
0.6
除草定
碱
不适用
华法令
酸
3
地塞米松
中性
1.1
备注 中枢神经系统刺激剂 磺胺药物 除草剂 甾体 杀虫剂 – 食品中限制 抗凝血剂 合成甾体激素
表 2 显示 Agilent SampliQ C18 SPE 小柱具有无与伦 比的重现性。采用简单的通用方案，35 µg/mL 溶液回 收率的相对标准偏差小于 5%。
化妆品中苯酚含量测定
化妆品中苯酚含量测定目的：建立一个用高效液相色谱法测定化妆品中苯酚含量的方法。
方法：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;色谱柱：C18柱，（4.6*250mm*5μm）;流动相：甲醇+水（58+42）;流速：1.0ml/min;检测波长：280nm;柱温：25℃;进样量：5μ。
结果：精密度试验、准确度试验测试结果均能满足要求，质控结果满意。
结论：该方法简便、准确，可用于化妆品中苯酚的质量控制。
标签：化妆品;苯酚;紫外检测器;方法确认根据《化妆品安全技术规范》（2015年版）中苯酚的测定，通过HPLC进行测定，对苯酚的测定项目进行系统适用性试验、精密度试验、检测限、定量限、线性关系與线性范围考察、准确度试验（加样回收试验）的验证，确保检验方法对被检物质有足够的专属性和灵敏度，通过回收率试验验证检验过程的回收率，并确定苯酚的线性范围、定量限，用以确定HPLC法在本实验室的适用性及可控性。
一、概述根据CNAS-CL10《检测和校准实验室能力认可准则在化学检测领域的应用说明》中5.4“检测和校准方法及方法的确认”的规定：“实验室应对首次采用的检测方法进行技术能力的验证”，检验方法学的验证是保证检验结果准确可靠的关键因素。
二、验证内容1.仪器与材料1.1 样品：中药祛斑膏TZH18000458。
1.2 方法选择《化妆品安全技术规范》2015年版中苯酚的测定，采用直接法，通过HPLC 测定中药祛斑膏中的苯酚的含量。
1.3 仪器及试药1.3.1高效液相色谱仪：Agilent 1260（紫外检测器）。
1.3.2色谱柱：C18柱，（4.6*250mm*5μm）。
1.3.3试剂：甲醇色谱级德国默克I0945607 812;苯酚对照品批号50804 含量以99.9%计。
1.3.4天平：赛多利斯电子天平（CPA225D）;1.3.5超声波清洗机2.试验方法《化妆品安全技术规范》2015年版中苯酚的测定，具体内容如下：2.1 色谱条件色谱柱：C18柱，（4.6*250mm*5μm）;流动相：甲醇+水（58+42）;流速：1.0ml/min;检测波长：280nm;柱温：25℃;进样量：5μ。
安捷伦液相色谱柱键合相说明
键合十八烷基硅烷化学键的不规则多孔硅胶颗粒
5,10
100
L1
色谱柱名称
填料描述
粒径 (μm)
孔径(Å)
USP
键合相
Eclipse AAA
双封端的十八烷基硅烷化学键合相的球形全多孔硅胶颗粒
3.5, 5
80
L1
Zorbax ODS
十八烷基硅烷键合相的球形全多孔硅胶颗粒
5,7
L7
Zorbax Eclipse XDB-C8
双封端的辛烷基硅烷
L7
Agilent HC-C8
双封端的辛烷基硅烷键合相的球形全多孔硅胶颗粒
5
130
L7
LiChrosphere RP-C8
辛烷基硅烷化学键合相的球形全多孔硅胶颗粒
5
60
L7
色谱柱名称
1.8, 3.5, 5, 7
80
L1
Agilent TC-C18
双封端的十八烷基硅烷化学键合相的球形全多孔硅胶颗粒
5
130
L1
Agilent TC-C18 (2)
双封端的十八烷基硅烷化学键合相的球形全多孔硅胶颗粒
5
170
L1
Agilent HC-C18
双封端的十八烷基硅烷化学键合相的球形全多孔硅胶颗粒
填料描述
粒径 (μm)
孔径(Å)
USP
键合相
LiChrosorb RP-C8
键合辛烷基硅烷的不规则多孔硅胶颗粒
5,10
100
L7
Zorbax SB-C8
侧基有立体保护基团的辛烷基硅烷化学键合相的球形全多孔硅胶颗粒
1.8, 3.5, 5, 7
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C18烷基硅烷键合硅胶色谱柱
在液相色谱中，C18烷基硅烷键合硅胶色谱柱是一种非常重要的色谱柱材料。
C18指的是色谱柱的填料是以二氧化硅为主体，表面偶联有十八碳链的烷基硅烷。
这种色谱柱具有很强的亲脂性，因此在许多亲脂性化合物的分离和分析中有着广泛的应用。
今天我们就来深入地了解一下C18烷基硅烷键合硅胶色谱柱的特点、应用和发展趋势。
1. 特点
C18烷基硅烷键合硅胶色谱柱具有一系列的特点，首先是其疏水性非常强，对亲脂性物质有很好的保留和分离能力。
由于C18填料表面的十八碳链结构，对极性物质的吸附能力较强，因此在一定程度上也具有极性保留的作用。
由于硅胶的稳定性和耐久性较高，因此使用寿命相对较长，能够承受较大的流速和压力，适用于高效液相色谱和超高效液相色谱。
2. 应用
C18烷基硅烷键合硅胶色谱柱在生物科学、医药化工和环境监测等领域有着广泛的应用。
在生物科学领域，它常用于蛋白质、肽段和核酸等生物大分子的分离和鉴定；在医药化工领域，可以用于药物代谢产物的研究和药物组分的分析；在环境监测领域，可用于水质和大气中有机物的分析和监测。
由于其对亲脂性物质和极性物质的保留能力，因此能够满足各种样品的分析要求。
3. 发展趋势
随着科学技术的不断发展和进步，对C18烷基硅烷键合硅胶色谱柱的
要求也在不断提高。
人们希望色谱柱能够更好地分离和保留各种复杂
样品，因此对色谱填料的纯度和孔径大小等要求越来越高；另人们也
希望色谱柱能够更好地适应高流速、高压力和高温的条件，因此对色
谱柱的耐久性和稳定性也提出了更高的要求。
未来C18烷基硅烷键合
硅胶色谱柱的发展方向可能会偏向于高效、高稳定和多功能化的趋势。
个人观点
C18烷基硅烷键合硅胶色谱柱作为液相色谱中的重要材料，我认为它
具有很高的应用前景和发展潜力。
随着科学技术的不断进步，对于样
品分离和分析的要求越来越高，因此对色谱柱的要求也在不断提高。
我相信，在不久的将来，C18烷基硅烷键合硅胶色谱柱将会更加高效、稳定和多功能化，为更多领域的科学研究和实验提供更好的支持。
总结
C18烷基硅烷键合硅胶色谱柱以其独特的疏水性和对极性物质的保留
能力，在液相色谱分析中扮演着重要角色。
它在生物科学、医药化工
和环境监测等领域有着广泛的应用，并且随着科学技术的发展，其性
能也在不断提高和完善。
我相信，C18烷基硅烷键合硅胶色谱柱的未
来一定会更加美好！
通过这篇文章的阅读，相信你对C18烷基硅烷键合硅胶色谱柱有了更全面、深刻和灵活的认识。
希望对你有所帮助！C18烷基硅烷键合硅胶色谱柱是液相色谱中非常重要的色谱柱材料之一。
它以二氧化硅为填料，表面偶联有十八碳链的烷基硅烷。
这种色谱柱具有强大的亲脂性，因此在许多亲脂性化合物的分离和分析中有着广泛的应用。
在现代科学研究和工业实践中，对分离和分析技术的要求日益增高，而C18烷基硅烷键合硅胶色谱柱正是满足这一需求的关键工具。
其疏水性和对极性物质的吸附能力，使得它在生物科学、医药化工和环境监测等领域有着广泛的应用。
C18烷基硅烷键合硅胶色谱柱具有很强的亲脂性和一定的极性保留作用。
在生物科学领域，它常用于生物大分子的分离和鉴定；在医药化工领域，可以用于药物代谢产物的研究和药物组分的分析；在环境监测领域，可用于水质和大气中有机物的分析和监测。
由于其对亲脂性物质和极性物质的保留能力，因此能够满足各种样品的分析要求。
随着科学技术的发展，对C18烷基硅烷键合硅胶色谱柱的要求也在不断提高。
人们希望色谱柱能够更好地分离和保留各种复杂样品，因此对色谱填料的纯度和孔径大小等要求越来越高；另人们也希望色谱柱能够更好地适应高流速、高压力和高温的条件，因此对色谱柱的耐久性和稳定性也提出了更高的要求。
未来C18烷基硅烷键合硅胶色谱柱的发展方向可能会偏向于高效、高稳定和多功能化的趋势。
作为色谱分析技术中的一个重要组成部分，C18烷基硅烷键合硅胶色谱柱在未来的发展前景是非常广阔的。
随着科学技术不断进步，对样品分离和分析的要求也不断提高，C18烷基硅烷键合硅胶色谱柱一定会朝着更加高效、稳定和多功能化的方向发展，为更多领域的科学研究和实验提供更好的支持。
C18烷基硅烷键合硅胶色谱柱作为液相色谱中的重要材料，具有很高的应用前景和发展潜力。
它在科学研究、工业生产和环境监测等领域中发挥着重要作用。
相信在不久的将来，C18烷基硅烷键合硅胶色谱柱将会更加高效、稳定和多功能化，更好地满足人们对于样品分离和分析的需求。