培养基及其制备

合集下载

培养基制备

培养基制备

培养基制备一、概述培养基是生物实验中必不可缺的基础设施,它为微生物、细胞等生物种群的繁殖和生长提供了必要的营养物质。

本文将介绍常用的培养基配方和制备方法,以及如何根据中国国情进行优化。

二、常用培养基1.大肠杆菌培养基(LB)配方:10克蛋白胨、5克酵母提取物、10克氯化钠、加水至1L。

特点:优点是制备方便、易于培养,多数菌株生长良好。

缺点是含有大量营养物质,若用于长期贮存菌株,容易导致突变风险增加。

2.液体麦康凯发酵培养基(BHI)配方:将500克肉汤蛋白胨培养基、10克氯化钠、2克二氢磷酸氢二钠、2克葡萄糖溶解在1L蒸馏水中。

特点:适合多种微生物的生长,包括厌氧微生物。

BHI较LB富含营养物质,可提供较好的生长环境,适合繁殖菌株。

3.青霉素酸糖盐地衣芽孢杆菌培养基(PDA)配方:20克琼脂、4克葡萄糖、0.75克潮霉素、0.125克青霉素钾盐、0.05克维生素B1、加水至1L。

特点:适用于分离和培养种类繁多的真菌、放线菌等微生物,能有效地防止杂菌的污染。

三、优化培养基由于中国的气候、温度等环境条件与西方国家有所不同,因此需要进行针对性的优化,以满足不同微生物的生长需求。

1.调整pH值许多微生物生存和生长所需的pH值范围在7.0-7.5之间。

但是,我们在制备培养基时应从当地水质的酸碱性入手,适当调整pH值,以便营养物质的有效吸收。

2.添加一些特殊成分在中国有些地区,水质有问题,例如含有高浓度的重金属和有机物污染,这些都会影响微生物的生长和繁殖。

因此,在制备培养基时,要添加些许抗菌剂和抗氧化剂,保证培养环境的纯净度和稳定性。

3.注意制备温度对于不同的菌株,其适宜的生长温度也有所不同。

在制备培养基时,应根据菌株的特点,以及所处的生态环境,调整制备温度,将传统的37度下的浸渍式消毒改为高温滤器灭菌法,避免纳米材料产生自拍。

四、结论在国内微生物学、生物医学和生物工程研究领域中,培养基是至关重要的实验基础设施。

培养基制备的方法

培养基制备的方法

培养基制备的方法培养基是微生物学研究和实验室中微生物的生长和繁殖的基础。

培养基的制备主要分为固态培养基和液态培养基两种形式。

下面我将详细介绍培养基的制备方法。

1. 固态培养基制备方法:a. 准备所需材料:琼脂、食物源(如肉汤、蛋白胨等)、矿物质、维生素、葡萄糖等。

b. 称取适量矿物质、维生素和葡萄糖,并添加到蒸馏水中,溶解成浓缩液。

c. 称取适量肉汤或蛋白胨等食物源材料,并加入蒸馏水中,并在加热搅拌的条件下溶解。

d. 将步骤b和c中的溶液混合,并加热搅拌,使其完全溶解,并达到所需浓度。

e. 将溶液倒入试管或培养皿中,使用自动灌装机进行灌装。

f. 放入高压灭菌锅中,在121高压下灭菌15-20分钟。

取出后冷却至室温。

g. 检查培养基是否凝固,如凝固则放入冰箱中保存。

2. 液态培养基制备方法:a. 准备所需材料:氯化钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、葡萄糖等。

b. 称取适量氯化钠、磷酸二氢钾和磷酸氢二钠,并加入蒸馏水中,溶解成浓缩液。

c. 称取适量葡萄糖,并加入蒸馏水中,并在加热搅拌的条件下溶解。

d. 将步骤b和c中的溶液混合,并加热搅拌,使其完全溶解,并达到所需浓度。

e. 将溶液倒入试管或培养瓶中,并使用自动灌装机进行灌装。

f. 倒入适量培养基后,使用高压灭菌锅进行灭菌。

高压灭菌条件一般为121高压15-20分钟。

g. 取出后冷却至室温,检查液态培养基是否出现浑浊或沉淀物,若有则需要重新制备。

在制备培养基过程中,需要注意以下几个方面:1. 材料选择:根据实验需要,选择适合微生物生长的食物源、矿物质、维生素等材料。

2. 材料溶解:将所需材料称取放入试管或容器中,并加入适量的蒸馏水中进行溶解,加热搅拌加快溶解速度。

3. 浓度调整:根据实验需要和微生物的生长条件,调整培养基材料的浓度,以满足微生物生长的要求。

4. 灭菌处理:使用高压灭菌锅进行灭菌处理,达到高温高压杀灭细菌、真菌和病毒的目的。

灭菌是为了减少外界微生物对培养基的污染,保证实验的准确性和可靠性。

培养基及其制备

培养基及其制备

二、培养基的类型 1.依营养物质的来源分类
①天然培养基;(麦芽汁、玉米粉、麸皮、锯末等) ②合成培养基; (高氏培养基、察氏培养基等 ) ③半合成培养基; (牛肉膏蛋白胨、土豆葡萄糖培养基)
2.依培养基制成的形式分:
①液体培养基; ②固体培养基;
3.依培养基主要成分和使用目的来分
①基础培养基 ②完全培养基

三、发酵培养基的选择
发酵培养基的用途与要求、成分、 配比经实验确定,配制时兼顾原料来源、 成本及工艺管理;
工业上确定发酵培养基的方法:
1、了解菌种的营养要求; 2、了解菌种的培养条件; 3、先进行小试验,摸索菌种对碳源和氮源的 利用情况。 牛牛文档分享四、原料转换及意义
牛牛文档分享不同糖化工艺所得糖化液 质量比较醛 牛牛文档分享二、淀粉酸水解理论基础
淀粉水解成葡萄糖的反应过程中同时发生:水解 反应、复合反应、分解反应;其中水解反应是主要的。 在淀粉糖化过程中,这三种化学反应的关系如下:
淀粉 水解 盐酸 葡萄糖
分解
复合二糖
淀粉的水解反应及其影响因素 淀粉:直链(a-1,4键缩合)、支链(a-1,6 键缩合),聚合度高 α-淀粉酶 :又称为淀粉液化酶,只作用于淀粉 α-1,4葡萄糖苷健,其作用特点是可以快速将 长链的淀粉水解成短链糊精; 淀粉α-1,4;1,6葡萄糖苷酶,又称为糖化酶, 可以水解淀粉分子的α-1,4;或α-1,6葡萄糖 苷健,其作用特点是,淀粉的分子链越短水解速 度越快,水解产物为葡萄糖。
功能:提供能量、构成菌体、代谢产物的物质基础;
Ⅲ.氮源
豆饼或蚕蛹水解液、味精废液 玉米浆、酒糟水等有机氮 尿素、硫酸铵、氨水、硝酸盐等无机氮、气态氮
功盐
Ⅳ.无机盐

培养基及配制

培养基及配制

有机物和激素类等。其中维生素、氨基酸类可以分别
配制,也可以混在一起 配制时注意一些离子之间易发生沉淀,如Ca2+和SO42-, Ca2+、Mg2+和PO43- 一起溶解后,会产生沉淀,一定 要充分溶解再放入母液中。 各种药品先以少量水让其充分溶解,然后依次混合。 母液配好后放冰箱内低温保存,用时再按比例稀释。
4.2 细胞分裂素(CTK)
(1)种类:Kt---激动素
BAP---苄氨基嘌呤 2-iP---异戊烯腺嘌呤 ZT-玉米素 TDZ
(2)作用:启动脱分化、细胞增殖,诱导愈伤组织芽分化、芽 Nhomakorabea殖,丛生芽。
(3)浓度:0.05-10.0mg/L (4)配制:溶于稀酸或稀碱
激素配比模式
生长素与细胞分裂素:它们的比例决定着发育的方向,是愈伤 组织、长根还是长芽。
6.2 抗生素
作用:抑制内生菌; 种类:青霉素、链霉素、庆大霉素、利福平、 卡那霉素等, 用量:用量5~20mg/L 注意:抗生素对组织生长有抑制作用,使 用要慎重。
多数需过滤灭菌。
6.3 抗氧化物
1)常用抗氧化剂:半胱氨酸、VC 2)用量:50-200mg/L, 3)作用:防止氧化 4)注意:可用抗氧化剂洗 涤外植体伤口表面。
不凝原因:①pH<5不凝;②长时间高压灭菌; ③长期存放,易变质;④厂家不同,杂质含量不同 ⑤配制时融解不充分,分装不均匀;
5.2.其它
玻璃纤维 滤纸桥 海绵、卡拉胶等
6 辅 助 性 物 质
6.1 活性炭 6.2 抗氧化物 6.3 抗生素
6.1 活性炭
1)作用:具吸附作用; • 茎尖初代培养可防褐化;促进新梢增殖(浓度0.1 -0.2%); • 促进生根,根避光生长; • 防止组培苗玻璃化(浓度0.3%); • 有利于胚胎培养。 2)常用浓度:0.5-10g/L 3)注意:活性炭具副作用。选择 吸附性差,导致营养损耗和 pH↓, 应适当调高营养物质与激素水平, 并加大Agar用量。

培养基制备的流程

培养基制备的流程

培养基制备的流程
培养基制备的流程主要包括以下几个步骤:
1.计算配方:根据所需培养基的种类和实验需求,计算各成分的比例和用量。

2.称量:准确称取各种成分,如蛋白胨、牛肉膏、琼脂等。

3.溶解:将称取的成分放入适量的水中,搅拌均匀,使其充分溶解。

对于一些
不易溶解的物质,如琼脂,可能需要加热辅助溶解。

4.调pH:根据微生物的生长需求,调整培养基的pH值。

一般而言,细菌培养
基的pH值范围在6.5-7.5,真菌培养基的pH值范围在4.8-5.8。

5.过滤:将溶解好的培养基通过过滤器过滤,以去除可能存在的杂质。

6.分装:将过滤后的培养基倒入无菌的培养皿或瓶子中,注意留出适当的空隙,
以利于蒸汽的排出。

7.灭菌:将分装好的培养基进行灭菌处理,常用的方法有高压蒸汽灭菌和干热
灭菌。

灭菌过程中要注意保持培养基内部的温度和压力,确保微生物被有效杀灭。

8.检验:对制备好的培养基进行质量检验,如观察培养基的外观、透明度、pH
值等,确保符合实验要求。

9.储存:将检验合格的培养基在适当的条件下储存,如4℃冰箱或阴凉干燥处。

在使用前,如需再次检验,可进行细菌或真菌的接种试验。

需要注意的是,在培养基制备过程中要严格遵循无菌操作规程,避免微生物污染。

同时,根据实验需求选择合适的培养基类型和配方,以满足不同微生物的生长需求。

植物组培培养基及其配制

植物组培培养基及其配制

植物组培培养基及其配制培养基好比土壤,是组织培养中离体材料赖以生存和发展的基地。

因此,在组织培养基的各个环节中,应着重掌握培养基,了解它的组成和配制方法。

一、组成培养基的五类成分目前,大多数培养基的成分是由无机营养物、碳源、维生素、生长调节物质和有机附加物等五类物质组成的。

1.无机营养物无机营养物主要由大量元素和微量元素两部分组成,大量元素中,氮源通常有硝态氮或铵态氮,但在培养基中用硝态氮的较多,也有将硝态氮和铵态氮混合使用的。

磷和硫则常用磷酸盐和硫酸盐来提供。

钾是培养基中主要的阳离子,在近代的培养基中,其数量有逐渐提高的趋势。

而钙、钠、镁的需要则较少。

培养基所需的钠和氯化物,由钙盐、磷酸盐或微量营养物提供。

微量元素包括碘、锰、锌、钼、铜、钴和铁。

培养基中的铁离子,大多以螯合铁的形式存在,即FeSO4与Na2—EDTA(螯合剂)的混合。

2.碳源培养的植物组织或细胞,它们的光合作用较弱。

因此,需要在培养基中附加一些碳水化合物以供需要。

培养基中的碳水化合物通常是蔗糖。

蔗糖除作为培养基内的碳源和能源外,对维持培养基的渗透压也起重要作用。

3.维生素在培养基中加入维生素,常有利于外植体的发育。

培养基中的维生素属于B 族维生素,其中效果最佳的有维生素B1、维生素B6、生物素、泛酸钙和肌醇等。

4.有机附加物包括人工合成或天然的有机附加物。

最常用的有酪朊水解物、酵母提取物、椰子汁及各种氨基酸等。

另外,琼脂也是最常用的有机附加物,它主要是作为培养基的支持物,使培养基呈固体状态,以利于各种外植体的培养。

5.生长调节物质常用的生长调节物质大致包括以下三类:(1)植物生长素类。

如吲哚乙酸(IAA)、萘乙酸(NAA)、2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)。

(2)细胞分裂素。

如玉米素(Zt)、6-苄基嘌呤(6-BA或BAP)和激动素(Kt)。

(3)赤霉素。

组织培养中使用的赤霉素只有一种,即赤霉酸(GA3)。

二、常用培养基配方及其特点1.常用培养基配方组织培养是否成功,在很大程度上取决于对培养基的选择。

培养基配制技术—培养基的制备

培养基配制技术—培养基的制备

3.调pH
在未调pH 前,先用精密pH 试纸测量培养 基的原始pH,如果偏酸,用滴管向培养基中逐 滴加入 1mol /L NaOH,边加边搅拌,并随时用 pH 试纸测其pH,直 至 pH 达 7.4~7.6。反之, 用 1mol/L HCl 进行调节。对于要求pH 较精确 的培养基,其pH 的调节常用酸度计进行。 pH 调节不要过头,以避免回调而影响培养基内各 物质的浓度。 4.过滤
谢谢
牛肉膏蛋白胨培养基配方:
牛肉膏3.0g,蛋白胨10.0g, NaCL5.0g,琼脂15~20g, 水1000ml ,pH 7.4~7.6 。其中牛肉膏提供碳源、能源、磷 酸盐和维生素,蛋白胨提供氮源和维生素,而NaCL提供 无机盐,在配制固体培养基时需要加入一定量琼脂作凝 固剂,如果配制液体培养基则不用加入琼脂。
将灭菌的试管培养基冷至 50℃左右(以防斜 面上冷凝水太多), 将试管口端搁在玻棒或其他 合适高度的器具上,搁置的斜面长度以不超过试 管总长的一半为宜。
10.无菌检查
将灭菌培养基放入37℃的恒温箱中培养24~ 48h,检查确实无菌生长方可使用。
谢谢
PDA培养基配方:
马铃薯 200克、葡萄糖 20克、琼脂 15~20克、 自来水 1000毫升、自然pH。
二、控制营养物质的浓度和比例 营养物质浓度过低不能满足微生物正常生长所需,太高则可能
对微生物产生毒害,如高浓度的无机盐、重金属离子等会抑菌或杀菌。 因此,营养物质合适的浓度是微生物生长发育的必要条件之一。在生 产过程中,在不影响微生物的生理特性和代谢转化率的情况下,通常 趋向在较高浓度下进行生产,以提高产物产量,并尽可能选育高渗透 压的生产菌株。当然,培养基浓度太大会使培养基黏度增加和溶氧量 降低。

培养基的制作方法

培养基的制作方法

培养基的制作方法培养基是微生物学研究中常用的实验材料,用于培养和繁殖微生物。

正确的制备培养基对于保证实验结果的准确性和可重复性至关重要。

本文将介绍培养基的制作方法,以帮助读者掌握正确的制备技巧。

一、准备工作1. 清洗和消毒培养器具:包括量筒、容量瓶、烧杯、培养皿等。

使用去离子水或含0.1%次氯酸钠的消毒液进行清洗和消毒。

2. 准备所需试剂和培养基成分:包括碳源、氮源、无机盐、维生素、生长因子等。

根据实验需要选择合适的配方。

二、制备培养基步骤1. 按照配方计算所需试剂的质量或体积。

精确称量或计量试剂,避免误差。

2. 将所需试剂分别溶解于适量的去离子水中,搅拌均匀。

注意溶解过程中的温度和pH值控制。

3. 将溶解好的试剂倒入容量瓶中,加入适量的去离子水,使总体积达到容量瓶标记线。

再次搅拌均匀。

4. 用适当的容器(如烧杯)接收制备好的培养基。

注意避免污染,避免气泡的产生。

5. 进行高温高压灭菌,通常为121摄氏度,压力为15磅,时间为20分钟。

确保培养基的无菌性。

6. 灭菌后,将培养基倒入培养器具(如培养皿、试管等),根据实验需要分装适量的培养基。

7. 将培养器具密封,避免外界污染。

存放于冰箱或低温冷藏室中,避光保存。

三、常见培养基的制备方法1. 营养琼脂培养基制备方法:a. 按照配方计算所需琼脂的质量。

b. 将琼脂溶解于适量的去离子水中,加热至完全溶解。

c. 加入所需营养成分,如葡萄糖、胰蛋白酶胨等。

搅拌均匀。

d. 倒入容器中,高温高压灭菌后分装。

2. 非琼脂培养基制备方法:a. 按照配方计算所需试剂的质量或体积。

b. 将所需试剂溶解于适量的去离子水中,搅拌均匀。

c. 调整pH值至所需的范围,使用盐酸或氢氧化钠溶液进行调节。

d. 倒入容器中,高温高压灭菌后分装。

四、培养基制备中的注意事项1. 注意实验室的洁净环境,避免外界污染。

2. 注意试剂的质量和纯度,避免影响培养基的质量。

3. 注意培养基的pH值控制,不同微生物对pH值有不同的要求。

培养基的制备实验报告

培养基的制备实验报告

一、实验目的1. 掌握培养基的基本制备原理和方法。

2. 学会牛肉膏蛋白胨培养基的配制过程。

3. 了解培养基灭菌的重要性及常用灭菌方法。

4. 熟悉实验室无菌操作的基本规范。

二、实验原理培养基是微生物生长繁殖的营养基质,主要由碳源、氮源、无机盐、生长因素和水等成分组成。

根据微生物的种类和实验目的,培养基可以有不同的配方和种类。

牛肉膏蛋白胨培养基是一种常用的细菌基础培养基,适用于培养大多数细菌。

三、实验材料与仪器实验材料:- 牛肉膏- 蛋白胨- 氯化钠- 琼脂- 蒸馏水- pH试纸- 灭菌棉塞- 高压蒸汽灭菌锅- 三角瓶- 烧杯- 量筒- 移液管- 玻璃棒- 培养皿- 等等。

四、实验步骤1. 称量:根据牛肉膏蛋白胨培养基的配方,准确称取牛肉膏、蛋白胨、氯化钠等成分。

2. 溶解:将称量好的牛肉膏、蛋白胨等成分放入烧杯中,加入适量的蒸馏水,用玻璃棒搅拌使其充分溶解。

3. 调整pH值:用pH试纸测定溶液的pH值,根据需要加入适量的1M盐酸或氢氧化钠溶液调整pH值至7.2-7.6。

4. 灭菌:将溶解好的培养基转移至三角瓶中,加入灭菌棉塞,用高压蒸汽灭菌锅进行灭菌,灭菌时间为15-20分钟。

5. 冷却:灭菌后,待培养基冷却至50-60℃,加入适量的琼脂,充分搅拌使其溶解。

6. 分装:将冷却后的培养基分装至培养皿中,待凝固后备用。

7. 无菌操作:在无菌操作条件下,用移液管吸取适量的菌液,接种至培养基中。

五、实验结果与分析1. 培养基制备:成功制备了牛肉膏蛋白胨培养基,颜色呈淡黄色,透明度高。

2. 灭菌效果:通过高压蒸汽灭菌,确保了培养基的无菌状态,避免了微生物污染。

3. 接种结果:接种后,培养基上出现了菌落生长,表明培养基对细菌具有良好的培养效果。

六、实验讨论1. 在培养基的制备过程中,称量、溶解、调整pH值等步骤对培养基的质量至关重要,应严格按照实验步骤进行操作。

2. 灭菌是防止培养基污染的关键环节,应选择合适的灭菌方法,确保灭菌效果。

培养基制备的基本方法和注意事项

培养基制备的基本方法和注意事项

培养基制备的基本方法和注意事项培养基是一种供细胞、微生物或生物组织生长和繁殖的营养物质,其质量和配方对于实验结果和研究成果具有重要影响。

因此,制备培养基需要遵循一定的基本方法和注意事项,以确保培养基的质量和稳定性。

制备培养基的基本方法如下:1.选择适当的培养基配方:根据所需培养的生物种类和特性选择相应的培养基基础配方。

培养基的基础配方包括有机质(例如葡萄糖)、无机成分(例如氮源和磷源)、微量元素(例如铁、锌)和水。

此外,还可以根据具体需求添加其他成分,如胶凝剂(例如琼脂)以增加培养基的凝固性。

2.准备培养基底液:根据配方计算所需的各种成分和浓度,称取适量的试剂或粉末,并将之溶解于蒸馏水或去离子水中,得到培养基底液。

在溶解试剂时,需要使用无菌的器皿,并严格遵守操作无菌的原则。

3.调节pH值:使用pH计测量底液的pH值,根据所需的pH值,可添加酸或碱溶液调节pH值至目标范围。

在添加酸碱溶液时,需要慢慢滴加并充分搅拌,以确保底液的均匀混合。

4.高温高压灭菌:将调节好pH值的底液倒入无菌容器中,并用瓶塞或锡纸密封,然后进行高温高压灭菌,一般为121摄氏度下压力为15磅/平方英寸的条件下加热15-20分钟。

5.加入敏感成分:准备好的底液冷却后,再添加一些抗生素、酶、激素或其他敏感成分,以满足特定实验或培养要求。

注意事项如下:1.操作无菌:制备培养基的过程中,必须严格遵守无菌的操作规范,使用已经通过高温高压灭菌的器皿和工具,以防止细菌、真菌或其他微生物的污染。

2.准确称量:选择可靠的称量器具,准确称取各种试剂和粉末的重量,以确保培养基的配方准确。

3.避免污染:在进行培养基制备时,避免将细菌或其他微生物污染带入培养基中。

为此,需要在制备前彻底清洁和消毒培养器具和工具。

4.及时凝固:当培养基底液制备好后,应尽快将其灌装入无菌容器中并密封,以免受到外界微生物的污染。

5.合理储存:制备好的培养基应放置在干燥、阴凉、避光的地方,并储存在无菌容器中。

常用培养基的制备及注意事项

常用培养基的制备及注意事项

常用培养基的制备及注意事项培养基是细菌、真菌、细胞等微生物进行繁殖和培养的营养地,广泛应用于微生物学和生物技术领域。

下面将介绍几种常用的培养基的制备方法及注意事项。

1.琼脂培养基:琼脂培养基是最常见的一种培养基,它以琼脂凝胶为基质,通过加入不同的营养成分,满足微生物的生长需求。

制备方法如下:1)称取适量琼脂,加入适量蒸馏水中搅拌均匀。

2)加入适量皂液,加热融化琼脂。

3)待琼脂溶液冷却至40°C左右时,加入已经制备好的培养基成分,如碳源、氮源、维生素等。

4)搅拌均匀,调整pH值,加热煮沸。

5)倒入装有适量培养基的培养皿中,使其凝胶化。

注意事项:1)使用较干燥的琼脂可减少湿润时间。

2)煮沸或加热时间不宜太长,以免过度加热导致一些营养成分失活。

3)制备过程中要注意无菌操作,避免细菌等微生物污染。

2.液体培养基:液体培养基适用于微生物的扩大培养、动态研究等实验。

制备方法如下:1)称取适量蒸馏水,加热至沸腾。

2)加入培养基成分,如碳源、氮源、维生素等,搅拌均匀。

3)调整pH值,加热至沸腾。

4)倒入试管或烧杯中,用胶塞或铝箔盖好。

注意事项:1)加热过程中要注意及时搅拌,避免成分沉积或变色。

2)制备前要将试管或烧杯等容器进行高温灭菌处理。

3)使用培养基前要进行菌液均匀混合,避免因成分沉积而导致的营养不均匀。

3.固体选择性培养基:固体选择性培养基是指根据微生物对特定组分的感受性选择性地制备的培养基。

制备方法如下:1)制备好的琼脂培养基加热至融化,放置冷却至40°C左右。

2)加入特定的抗生素、色素或指示剂等,搅拌均匀。

3)倒入装有适量培养基的培养皿中,等待凝胶化。

注意事项:1)特定抗生素或其他抑菌剂的添加量需要谨慎,过量添加可能抑制需要培养的微生物。

2)搅拌均匀时,应快速且均匀,以避免导致混合不均。

3)固体选择性培养基凝胶化后,尽量避免暴露于空气中,以免细菌等微生物的污染。

以上所述的常用培养基只是其中的一部分,不同微生物的培养要求不同,制备方法也有所差异。

培养基的制备

培养基的制备

一、培养基的制备:(一)液体培养基1、称量用电子天平称量配制培养基所需的各种药品:牛肉膏3.0 g 蛋白胨10 g 氯化钠5.0 g2、溶化将称好的药品置于烧杯中,加入少量蒸馏水,用玻璃棒搅拌,加热溶解3、定容待全部药品溶解后,加水至所需体积1000ml4、调pH 用剪刀剪出一小段pH试纸,然后用镊子夹取此段pH试纸,在培养基中蘸一下,观看其pH范围,直至将pH调制7.2-7.45、过滤6、分装将配好的液体培养基分别装入锥形瓶中,并加塞包扎7、灭菌将加塞包扎好的培养基置于高压蒸汽灭菌锅中,在121℃下灭菌20min.8、保存将配置好的培养基放入4℃的冰箱中,保存备用(二)固体培养基1、称量用电子天平称量配制培养基所需的各种药品:牛肉膏3.0 g 蛋白胨10 g 氯化钠5.0 g 琼脂粉15 g2、除无需过滤外,其余步骤同液体培养基二、供试样品处理1.苔藓植物提取液制备将采集来的苔藓样品用自来水冲洗,再用去离子水洗净,放入培养箱于50℃恒温条件下烘干,用电动粉碎机将植物体粉碎。

称取 2.0 g 样品粉末,置于具橡胶塞的三角瓶中,加20 ml无水乙醇, 在摇床上振荡提取20 h, 以1500 r/ min 离心10 min, 收集上清液, 将残渣再用无水乙醇重复提取2次, 方法同上,合并3次的提取液于小烧杯中, 置4℃冰箱保存备用。

2.苔藓植物浸出液的制备分别将植物体洗净,蒸馏水浸泡至吸水饱和,然后用滤纸吸去体表多余水分,但不能过重挤压。

称取8 g藓体,加少许蒸馏水,研磨成浆状,再加水至40ml。

放入50℃恒温水浴锅12 h。

取出并离心去渣,得上清液即为浸出液。

三、菌悬液的制备取供试细菌菌株,用接种环各取菌苔少许接种至牛肉膏蛋白胨固体培养基斜面上,在37℃恒温培养箱中培养20 h 活化,然后将活化后的菌株接一环于 5 mL 液体培养基中,在恒温振荡器中37℃下培养6- 8 h ,即制成菌悬液。

四、滤纸片法测定抑菌作用取直径12 mm 的灭菌滤纸片放入上述苔藓植物提取液中浸泡过夜,将菌悬液各取0.5 mL 与相应的固体培养基制成含菌平板,用无菌镊子取含浸出液的滤纸片贴在含菌平板上,每皿贴4 片,每菌做 3 次重复,且用无水乙醇浸泡滤纸片作空白对照,置于37℃恒温培养箱中培养24 h 后,取出测定抑菌圈直径大小,比较抑菌效果。

培养基及其配制

培养基及其配制

GA (赤霉素): 有20多种,生理活性及作用的种类、部位、效应等各有不 同、培养基中添加的是GA3,主要用于促进幼苗茎的伸长 生长,促进不定胚发育成小植株;赤霉素和生长素协同作 用,对形成层的分化有影响,当生长素/赤霉素比值高时 有利于木质部分化,比值低时有利于韧皮部分化;此外, 赤霉素还用于打破休眠,促进种子、块茎、鳞茎等提前萌 发。一般在器官形成后,添加赤霉素可促进器官或胚状体 的生长。
More balanced development of roots and shoots. However, undifferentiated callus is developing at the edges of the explant
No NAA Poor shoot development and no roots
芽从外植体的上表面发 生而根从下表面发生
(3)肌醇又叫环己六醇:在糖类的相互转化中起重要作用。使用 浓度一般为l00mg/L,适当使用肌醇,能促进愈伤组织的生长 以及胚状体和芽的形成。对组织和细胞的繁殖、分化有促进作用, 对细胞壁的形成也有作用。
⑷氨基酸:是很好的有机氮源,可直接被细胞吸收利用。培养基 中最常用的氨基酸是甘氨酸,其他的如精氨酸、谷氨酸,谷酰胺、 天冬氨酸、天冬酰胺、丙氨酸等也常用。
⑴IAA(吲哚乙酸)是天然存在的生长素,亦可人工合成, 其活力较低,是生长素中活力最弱的激素,对器官形成的 副作用小、,高温高压易被破坏,也易被细胞中的1AA分 解酶降解,受光也易分解。 ⑵NAA(萘乙酸)在组织培养中的起动能力要比IAA高出3-4 倍,且由于可大批量人工合成,耐高温高压,不易被分解 破坏,所以应用较普遍。NAA和IBA广泛用于生根,并与 细胞分裂素互作促进芽的增殖和生长。 ⑶IBA(吲哚丁酸)是促进发根能力较强的生长调节物质。

培养基及其制备方法

培养基及其制备方法

培养基及其制备方法1、营养肉汤培养基胨10g肉浸液1000ml氯化钠5g取胨与氯化钠,加入肉浸液内,微温溶解后,调节pH为弱碱性,煮沸,滤清,调节pH 值使灭菌后为7.2±0.2,分装,115℃灭菌30分钟。

2、营养琼脂培养基照上述营养肉汤培养基的处方及制法,加入15~20g琼脂,调节pH值使灭菌后为7.2±0.2,分装,115℃灭菌30分钟。

3、虎红琼脂培养基胨5g虎红(四氯四碘荧光素)0.0133g葡萄糖10g (或0.133%虎红溶液10ml)磷酸二氢钾(KH2PO4) 1g琼脂15~20g硫酸镁(MgSO4.7H2O) 0.5g水1000ml除葡萄糖、虎红外,取上述成分,混合,加热溶化后,滤过,加入葡萄糖、虎红,分装,115℃灭菌30分钟。

4 、酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基(YPD)胨10g琼脂15~20g酵母浸出粉5g水1000ml葡萄糖20g除葡萄糖外,取上述成分,混合,加热融化后,滤过,加入葡萄糖,分装,115℃灭菌15分钟。

5 、胆盐乳糖培养基(BL)胨20g牛胆盐 1.3g乳糖5g (或去氧胆酸钠0.25g)氯化钠5g水100ml磷酸氢二钾(K2HPO4) 4.0g磷酸二氢钾(KH2PO4) 1.3g除乳糖、牛胆盐外,取上述成分,混合,加热使溶解,调节pH值使灭菌后为7.4±0.2,煮沸,滤清,加入乳糖、牛胆盐,分装,115℃灭菌30分钟。

6 、曙红美亚甲蓝琼脂培养基(EMB)营养琼脂培养基100ml2%曙红溶液2ml20%乳糖溶液5ml0.5%亚甲蓝溶液 1.3~1.6ml取营养琼脂培养基,加热融化后,冷至60℃,按无菌操作加入灭菌的其它三种溶液,摇匀,倾注平皿。

7 、麦康凯琼脂培养基(MaCC)胨20g1%中性红溶液 2.5ml乳糖10g琼脂15~20g牛胆盐5g水1000ml氯化钠5g除乳糖、1%中性红溶液、牛胆盐及琼脂外、取上述成分,混合,加热使溶解,调节pH 值使灭菌后为7.2±0.2,加入琼脂,加热融化后,再加入其余各成分,摇匀,分装,115℃灭菌30分钟,冷至约60℃,倾注平皿。

培养基的制备与灭菌实验报告

培养基的制备与灭菌实验报告

培养基的制备与灭菌实验报告实验目的,掌握培养基的制备方法和灭菌技术,保证培养基无菌,为微生物实验提供良好的生长条件。

一、培养基的制备。

1.1 培养基的组成。

培养基是微生物生长和繁殖的营养物质,通常包括碳源、氮源、矿物质盐和生长因子等。

根据不同微生物的需求,培养基的组成也有所不同。

1.2 制备步骤。

(1)称取适量的葡萄糖、蛋白胨、氯化钠等原料;(2)加入适量的蒸馏水,搅拌均匀;(3)调节pH值,通常为7.0-7.2;(4)分装至试管或培养皿中,加入琼脂(如需要固体培养基);(5)高压蒸汽灭菌15分钟。

二、培养基的灭菌实验。

2.1 灭菌方法。

培养基的灭菌是为了保证培养基中无菌,通常采用高压蒸汽灭菌法。

在高压下,微生物及其孢子、病毒等能够被有效杀灭。

2.2 实验步骤。

(1)将制备好的培养基分装至试管或培养皿中;(2)密封好容器,放入高压灭菌锅中;(3)加水至适当高度,密封锅盖;(4)加热至121摄氏度,压力达到1.05kg/cm2后开始计时,持续15分钟;(5)关火,等待冷却后取出培养基。

实验结果,经过高压蒸汽灭菌处理后,培养基中无任何微生物生长。

证明培养基已达到无菌状态,可以用于微生物的培养和实验。

结论,通过本次实验,我们掌握了培养基的制备方法和灭菌技术,为后续的微生物实验提供了良好的条件。

同时,也加深了对无菌技术的理解和应用。

参考文献:[1] 陈华. 微生物学实验指导. 北京,高等教育出版社, 2015.[2] 王明. 实验室微生物学. 上海,上海科学技术出版社, 2018.以上为培养基的制备与灭菌实验报告。

(文档结束)。

培养基的制备与灭菌

培养基的制备与灭菌

培养基的制备与灭菌
1. 培养基的制备
制备培养基需要先准备好各种化学试剂,并按照配方将其称量、混合。

通常情况下,培养基的配方会包括以下成分:碳源、氮源、矿物质、维生素等。

其中,碳源可以是葡萄糖、蔗糖等简单的单糖或复糖;氮源可以是氨基酸、蛋白胨等;矿物质可以是磷酸盐、镁盐、钙盐等;维生素可以是叶酸、核黄素等。

将配制好的各种化学试剂按照配方溶解在蒸馏水中,制得液体培养基。

根据不同的需求,还可以将液体培养基加入琼脂糖等凝胶剂制成固体培养基。

2. 培养基的灭菌
培养基的灭菌是为了保证培养基中不含有任何杂菌或细菌,避免其对微生物学实验结果产生影响。

常用的灭菌方法有以下几种:
(1) 煮沸法:将液体培养基放入自减压锅或常压锅内进行煮沸,时间一般为20-30分钟,可杀死绝大多数的细菌和孢子。

(2) 高压灭菌法:将液体培养基放入压力灭菌锅内,压力升至1.5kg/cm2,温度达到121℃,时间一般为15-20分钟。

(3) 紫外线灭菌法:将液体培养基放入紫外线灯下,辐照时间一般为30-60分钟,可以杀灭一部分的细菌和孢子。

(4) 过滤灭菌法:利用过滤膜过滤液体培养基,可杀灭微小的细菌和病毒。

培养基的制备过程

培养基的制备过程

培养基的制备过程一、引言培养基是细胞、微生物等生物体在实验室中进行研究和培养的必需品,其制备过程涉及到多个步骤和组分。

本文将详细介绍培养基的制备过程。

二、材料及设备1. 纯水2. 食品级明胶3. 葡萄糖4. 氯化钠5. 磷酸二氢钾6. 氨基酸混合物7. 维生素混合物8. 纯净乙醇9. 经过高温高压灭菌的玻璃烧杯、量筒、移液器等实验室常用设备。

三、制备步骤1. 制备明胶溶液将10g食品级明胶加入500ml纯水中,搅拌均匀后加热至溶解。

待溶解后降温至室温,静置1小时,将上清液倒入干净容器中备用。

2. 制备基础盐类溶液将8g氯化钠、0.2g磷酸二氢钾加入800ml纯水中,搅拌均匀后加热至溶解。

待溶解后降温至室温,静置1小时。

3. 制备氨基酸混合物将0.5g苏氨酸、0.5g丝氨酸、0.5g天冬氨酸、0.5g谷氨酸、0.5g精氨酸、0.5g赖氨酸、0.5g异亮氨酸、0.5g缬氨酸加入50ml纯水中,搅拌均匀后过滤,得到无菌的氨基酸混合物。

4. 制备维生素混合物将1mg生物素、1mg叶酸、1mg核黄素、1mg泛酸、1mg吡哆醇加入10ml纯水中,搅拌均匀后过滤,得到无菌的维生素混合物。

5. 制备完整培养基将基础盐类溶液和明胶溶液按照4:1的比例混合,并加入2ml氨基酸混合物和2ml维生素混合物,最终体积调整至1000ml。

搅拌均匀后过滤灭菌即可。

四、质量控制1. 培养基的pH值应控制在7.0左右。

2. 培养基的透明度应良好,无悬浮物和沉淀。

3. 培养基的灭菌应严格遵守规定,确保无菌状态。

五、结论本文介绍了培养基的制备过程,包括明胶溶液、基础盐类溶液、氨基酸混合物、维生素混合物以及完整培养基的制备步骤。

同时,还对培养基的质量控制进行了说明。

这些步骤和质量控制是保证培养基质量的关键因素。

培养基及其制备

培养基及其制备

常用植物生长调节物质及其作用
赤霉素(gibberellins,GA)
赤霉素有20多种,其中在组织培养中所用的是 GA3。与生长素和细胞分裂素相比,赤霉素不常使 用。据报道,赤霉素对已形成的器官和胚状体的 生长通常有促进作用,还能刺激在培养中形成的 不定胚正常发育成小植株。
GA3溶于水后不稳定,容易分解,最好以95%酒 精配成母液在冰箱中保存。
细胞分裂素一般溶于 0.5 或 1mol/L 的HCl或低浓度NaOH中。
常用植物生长调节物质及其作用
细胞分裂素类(cytokinins)
TDZ(N-苯基-N’-1,2,3-噻二唑-5-脲)是近年 发现的一种人工合成的具有细胞分裂素活性的物 质,碱溶,耐热。TDZ能促进愈伤组织生长,促 进侧芽和不定芽发生,促进胚状体形成。通常在 0.002~0.2mg/L的范围内,但随着DTZ浓度的提 高,玻璃化苗出现的频率增加。
附加物质
硝酸银
在培养基中加入适量的AgNO3, 能促进愈伤组 织器官发生和体细胞胚胎发生,能使再生困难的植 物分化出再生植株。此外,AgNO3对克服试管苗玻 璃化及早衰和落叶等也有显著的效果。
AgNO3的使用浓度一般为1~10mg/L。使用前过 滤灭菌,并须待培养基温度降到60℃以下时再加入 培养基。
• B5培养基:含有较低浓度的氨,适宜于双子叶植物, 特别是木本植物。
• White培养基( White改良培养基):无机盐含量较 低,适于生根。
• 高N6,培多养用基于:禾成本分科较植简物单。,KNO3和(NH4)2SO4含量
• ER培养基:与MS培养基相似,其中磷酸盐含量比MS 高一倍,但微量元素含量较低,适合于细胞培养。
无机营养
微量元素
(植物所需要的浓度小于0.5mmol/L)
  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
H H 3 O 进攻糖 O 形 苷 成 键 共 糖 的 轭 苷酸 键
2、淀粉酸水解反应动力学
dc k c dt
属于单分子一级反应类型: K:反应速度常数,由反应条件(如温度、 酸度等)而定 C:淀粉浓度
3、影响酸水解的因素
酸的种类
主要因素 浓度(酸的浓度、淀粉的浓度)
水解温度
(二)、葡萄糖的复合反应及其影响因素 复合反应:在淀粉的酸糖化过程中,水解生成的葡萄糖受酸和热的影响,葡萄糖分子之间通
毫升琼脂15~20克pH7.4~7.6
察氏培养基(培养霉菌用)
蔗糖 20克 NaNO33克 K2HPO41克 KCl1克 MgSO40.5克 FeSO40.01克 琼脂20克 水1000
毫升自然pH
无氮培养基(培养自生固氮菌用)
葡萄糖 10克 NaCl0.2克 KH2PO40.2克 CaSO4·2H2O0.1克 MgSO40.2克 CaCO35克 琼脂 20克水1000毫升自然pH
淀粉水解成葡萄糖的反应过程中同时发生这:水解反应、复合反应、分解反应;其中水解反 应是主要的。
复合反应:葡萄糖分子间经1-6糖苷键结合成龙胆二糖(有苦味)、异麦芽糖和其他低聚糖 (合称复合低聚糖)。
分解反应:葡萄糖 羟甲基糠醛 有机酸、色素等
㈠淀粉的水解反应 1.淀粉水解过程
颜色变化:蓝色 暗紫 紫 红褐 暗红 红 浅红
些化学药品);
2.依培养基的物理状态来分:
1)固体培养基
A、凝固培养基 :即遇热可融化,冷却后则凝固的固体培养基
B、非可逆性凝固培养基:指有血清凝固成的固体培养基或由无机硅胶配成的凝固后即不能 再融化的固体培养基
C、天然固体培养基:由天然固体状基质直接制成的培养基,如麸皮,米糠,木屑等
D、滤膜:是一种坚韧且带有无数微孔的醋酸纤维薄膜,把它制成圆片状覆盖再营养琼脂或 浸有培养液的纤维衬垫上,就形成了具有固体培养基性质的培养条件。
通风30min
保温 70~80℃ 8~12 小时,取上清液。
3、添加絮凝剂澄清处理法:
糖蜜稀释至30~40 Bx
加硫酸调pH 3~3.8
加热至90℃
酰胺(PAM),搅拌均匀 静置1小时,取上清液。
添加8ppm聚丙烯
三、谷氨酸发酵糖蜜前处理 1.糖蜜预处理法 活性炭处理法 树脂处理法 亚硝酸处理法 2.添加化学药剂处理法 添加青霉素法 添加表面活性剂 添加抗氧剂法 3.追加糖蜜法 4. 营养缺陷型变异株法
发酵
离心分离
二次废液
干燥
粉碎
用于发酵培养基 的配置等
包装
二、亚硫酸盐废液的处理
(一)亚硫酸盐制浆废液生产酒精和蛋白质
1、亚硫酸盐纸浆废液生产酒精
2、亚硫酸盐纸浆废液发酵生产蛋白质
3、亚硫酸铵法非木材制浆废液培养SCP
(二)亚硫酸盐废液发酵生产乳酸
三、木屑水解液发酵生产衣康酸
第五节 培养基灭菌
一、消毒与灭菌在发酵工业中的应用 消毒:指用物理和化学方法杀死物料、容器、器具内外的病源微生物。一般只能杀死营养细
淀粉颗粒不宜过大,淀粉乳浓度不能过高。
2、酶解法:(双酶水解法) 定义:用淀粉酶将淀粉水解为葡萄糖的过程。一般分为两步:第一步是利用α-淀粉酶将
淀粉液化转为糊精及低聚糖,使淀粉的可溶性增加,这个过程称为液化。第二步是利用糖化 酶将糊精或低聚糖进一步水解,转变为葡萄糖的过程,称为糖化。也称双酶法
3、热致死反应的速度常数K K是表达微生物耐热性的特征常数 ,与微生物的种类和灭菌温度有关。K越小,微生物越耐 热
4、灭菌温度的选择
E
K Ae 式中 ΔE为菌体死灭反应的活化能(J/mol)R,T它是菌体死灭反应的特征常数,所以,不同菌 其热死灭反应的ΔE不同。
四、影响培养基灭菌的其他因素 培养基成分、pH值、培养基中的颗粒、泡沫
2)半固体培养基 配置好的液体培养基中加入0.5%左右的琼脂作为凝固剂,形成的培养基称之微半固体培养
基。
主要用于菌种鉴定,观察细菌运动特征及噬菌体的效价测定等
3)液体培养基; 培养基中80~90%是水。
3.依培养基的用途来分 1)、孢子培养基 2)、种子培养基 3) 、 发酵培养基 4)、补料培养基 5)、加富培养基 6)、选择培养基 7)、鉴别培养基 8)、增殖和保存培养基 9)、富集培养基 10)、测定培养基
包括前体、促进剂和抑制剂
1)、前体:指某些化合物加入到发酵培养基中,能直接被微生物在生物合成过程中结合到产
物分子中去,而其自身的结构没有多大的变化,但产物的产量却因加入前体而有较大的提高。
如:在青霉素生产中加入玉米浆,青霉素产量可从20u/mL增加到100u/mL,研究发现玉米浆 中的苯乙胺被有限结合到青霉素分子中,从而提高了青霉素G的产量。
伊红-美蓝培养基(检查肠道细菌用)
蛋白胨 10克 K2HPO42克乳糖10克琼脂25克,水1000毫升,pH7.6 2%伊红水溶液2毫升0.5%美蓝水溶液2毫升将乳糖、伊红、美蓝分别灭菌后,加入灭菌的
培养基中摇匀,倒平板。
四、原料转换及意义 1、节约原料,减低单耗,提高发酵单位和总收率;
磷酸盐、钾盐、钙盐等矿物盐
4.无机盐
铁、锰、钴等微量元素
功能:构成菌体,参与酶的组成,维持酶活性,调节渗透压,调节pH值,维持氧化还原电 位;
5.特殊生长因子:硫胺素、生物素、对氨基苯甲酸、肌醇等 功能:酶的辅助部分,维持生命活动;
6.发酵的促进剂与抑制剂 发酵培养基中某些成分的加入有利于调节产物的形成,而并不促进微生物的生长,这些物质
(举例1 ,2,3)
培养基配方举例
牛肉膏蛋白胨培养基(常用的细菌培养基) 牛肉膏5克 蛋白胨10克 NaCl5克 水1000毫升 pH7.2~7.4 (琼脂15~20克)
高氏一号培养基(常用的放线菌培养基)
可溶性淀粉20克 KNO31克 K2HPO40.5克 MgSO40.5克 NaCl 0.5克 FeSO40.01克水1000
例如:微生物发酵生产甘油中,例如亚硫酸氢钠,它与代谢过程中的乙醛生成加成物。
7.水分 功能:生化反应均在水养物质的来源分类 天然培养基; 合成培养基,也称组合培养基(多用于定量研究); 半合成培养基,(用的最多,在部分天然有机碳源、氮源、生长因子的基础上,适当加入一
碳酸气
2.碳源 淀粉水解糖、糖蜜、亚硫酸盐纸浆废液等
石油、正构石蜡、天然气
醋酸、甲醇、乙醇等石油化工产品
功能:提供能量、构成菌体、代谢产物的物质基础;
有机氮:黄豆饼粉、花生饼粉、玉米浆、蛋白胨、
3.氮源
酵母粉、鱼粉、发酵菌丝体、酒糟水等
无机氮: 尿素、硫酸铵、氨水、硝酸盐
功能:构成菌体、含氮代谢物;
(3)第三大类:抗生素
三、加热灭菌的原理
1.、微生物的热阻:微生物对热的抵抗力; 致死温度、致死时间
2、微生物的热致死动力学:对数残留定律
一级反应: 用N表示残留活菌个数,则活菌的减少率(死亡率),与N呈线性关系,即:
式中,K是反应速度常数,对灭菌来讲,是活菌的比热致死速率常数,单位是min-1 ,其值与 菌的种类和加热温度有关,需通过实验才能测定。
五、分批灭菌与连续灭菌
缺点:1)设备费用高
2)不能用于怕受潮的物料灭菌
3、射线灭菌 紫外线、高速电子流的阴极射线、X射线和Y射线 化学药品灭菌法 (1)第一大类:表面消毒剂 高锰酸钾溶液:0.1~0.25%、漂白粉 、75%的酒精、新洁尔灭和杜灭芬、甲醛 37%、戊二
醛、过氧乙酸、焦碳酸二乙酯、酚类
(2)第二大类:抗代谢药物 化学结构与微生物必须的代谢物类似 例如:磺胺类化合物取代氨基苯甲酸
2、开拓新的原料资源和微生物资源:野生植物淀粉、植物纤维、木屑水解物、石蜡、醋酸、 乙醇
第二节 淀粉水解糖的制备
一、淀粉水解糖的制备方法 1、酸解法: 定义:以酸(无机酸或有机酸)为催化剂,在高温高压下将淀粉水解为葡萄糖的方法. 优点:设备要求简单,水解时间短(20min),设备生产能力大 缺点:高温高压下进行,设备要求耐腐蚀、耐高温、耐高压,副反应多,对原料要求严格,
α-淀粉酶(液化)
葡萄糖淀粉酶(糖化)
优点:1、反应条件温和。
2、酶的专一性强,副反应少
3、可在较高的淀粉乳浓度下水解
4、糖液的营养物质丰富
5、糖液色泽浅,无苦味,有利于糖液的精制
缺点:时间长(2~3)天,要求的设备多,糖液过滤困难。
3、酸酶结合法 酸酶法 酶酸法
二、淀粉酸水解理论基础
过糖苷键相聚合,生成二糖、三糖及其他低聚糖。
影响复合反应的因素: 1、淀粉浓度的影响(用DE值表示葡萄糖纯度): DE值=还原糖/干物质×100%
2.、酸的影响:
(三)葡萄糖的分解反应及其影响因素
葡萄糖
5’-羟甲基糠醛
酸 、 热
乙酰丙酸、蚁酸、有色素物质;
影响因素:浓度、温度、pH值;
2、湿热灭菌法
借助蒸汽释放的热使微生物细胞中的蛋白质、酶和核酸分子内部的化学键,特别是氢键受
到破坏,引起不可逆的变性,使微生物死亡。
优点:1)蒸汽来源容易,操作费用低廉,本身无毒
2)蒸汽具有很强的穿透力,灭菌易于彻底
3)蒸汽均有很大的潜热,冷凝后的水分有利于湿热灭菌
4)蒸汽输送可借助本身的压强,调节方便,技术管理容易
2)、促进剂:指那些既不是营养物又不是前体,但却能提高产量的添加剂。 比如在酶制剂发酵过程中,加入诱导物、表明活性剂及其它一些产酶促进剂(比如吐温80、
植酸、洗衣粉等)
3)、抑制剂:在发酵过程中加入抑制剂会抑制某些代谢途径的进行,同时会使另外一些代 谢途径活跃,从而获得人们所需要的某种产物或使正常代谢的某一代谢中间物积累起来。
三、发酵培养基的选择
一)、配置培养基的原则 1、根据不同微生物的营养需要配置不同的培养基 2、注意各营养物质的浓度和配比 3、调节适宜的物理化学条件 4、根据培养微生物的目的配置 5、尽量使用廉价易得的原料
相关文档
最新文档