枸杞子多糖含量的测定实验报告

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篇一：实验三多糖含量的测定

实验三多糖含量的测定

一、实验目的

1、分光光度法测多糖的原理和方法

2、用officeexcel作标准曲线

二、仪器与试剂

1、仪器：7200分光光度计、水浴锅、电子天平

2、试剂：1水葡萄糖、5%苯酚溶液、浓h2so4、dh2o

3、器皿：50ml容量瓶、10ml量筒、玻棒、洗耳球、烧杯、试管

三、步骤

1、标准曲线的绘制

①取1水葡萄糖0.551g于50ml容量瓶，加入蒸馏水溶解并小心稀释至刻度，再取5ml于50ml容量瓶，加蒸馏水

稀释,即1.0mg/ml。

②分别量取0.25ml,0.5ml,1.0ml,1.5ml,2.0ml,2.5ml

分别置于已编号的50ml容量瓶，加蒸馏水定容。

③分别吸取上述溶液各2.0ml,再加入5%苯酚1ml,摇匀后迅速加入5ml浓h2so4，摇匀后，室温5min，90oc水浴15min，冷却至室温。

空白对照：2ml蒸馏水+1ml5%苯酚+5ml浓硫酸

吸光度A得浓度c与吸光度的线性方程y=ax+b

④准确量取多糖溶液（待测）2.0ml于50ml容量瓶中，加蒸馏水定容，方法同上述。

四结果

①计算浓度（待测液）

本组所测得多糖溶液（待测）的吸光度为的0.385，代入根据吸光度A得浓度c与吸光度的线性方程

y=14.255x+0.0309，可得待测液的浓度为

0.025*25=0.625mg/ml.。②实验主要步骤（记录）

步骤记录：

Ⅰ首先配制浓度分别为0.005mg/ml、0.01mg/ml、

0.02mg/ml、0.03mg/ml、0.04mg/ml、0.05mg/ml的葡萄糖溶液；然后取配好的溶液各2.0ml,再加入5%苯酚1ml,摇匀后迅速加入5ml浓h2so4，；不断震荡，溶液逐渐变为褐色，放出热量，且随着葡萄糖浓度的增加，溶液的颜色也不断变深；

室温5min，90oc水浴15min，反应更为充分，溶液颜色有稍微加深，冷却至室温；最后用7200分光光度计一一测量其吸光度，得到的的数据是0.098、0.19、0.337、0.412、0.584、0.774。

Ⅱ根据上述的方法再测量待测液的吸光度，为0.385。

Ⅲ利用excel软件作出浓度与吸光度的特性曲线图。如③图。

③用excel作图，并选择性粘帖至word到pDF

五注意

1、高毒——苯酚（强腐蚀）

2、高腐蚀——浓硫酸

篇二：枸杞多糖检测作业指导书

枸杞中枸杞多糖检测作业指导书

1.目的：规定了枸杞中枸杞多糖的测定方法。

2.适用范围：适用于枸杞中枸杞多糖的测定。

3.编写依据：gb/T18672-20XX《枸杞（枸杞子）附录A 枸杞多糖测定》。

4.原理：用80%乙醇溶液提取以除去单糖、低聚糖、甙糖及生物碱等干扰性成份，然后用水提取其中所含的多糖类成份，多糖类成份在硫酸作用下，先水解成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，然后和苯酚缩合成有色化合物，用分光光度法于适当波长处测定其多糖含量。

5.仪器和设备

5.1实验用样品粉碎机

5.2电子分析天平(±0.0001g)

5.3紫外-可见分光光度计（752型）：带1cm比色皿。

5.4电热恒温水浴锅

5.5圆底烧瓶：250mL（24#标准磨口）

5.6球形冷凝管

5.7容量瓶：250ml

5.8具塞试管：25mL

5.9刻度移液管：1mL、2mL、10mL

5.10单标移液管：10mL

6.试剂及材料

6.180%乙醇溶液：于800mL95%分析纯乙醇中加入150mL 纯水，摇匀

6.2硫酸：分析纯

6.3盐酸：分析纯

6.4苯酚液：取苯酚100g，加铝片0.1g与碳酸钠0.5g，蒸馏收集中间部分馏分，初时少量馏分和蒸馏结束时的馏分舍弃

6.55%苯酚溶液：称取蒸馏后苯酚5g，加水95mL水，摇匀，贮存于0℃～4℃冰箱中（有效期为7天）

7.操作步骤：

7.1试样的制备

取具有代表性试样200g，用四分法将试样缩减至100g，取适量样品严密封口，置冰箱冷冻室中冷冻约15min～20min，取出迅速粉碎并混匀，及时称取制备的试样。

7.2试样的测定

7.2.1样品溶液的制备精密称取制备样品0.4g～0.45g （精确到0.0001g）置于250mL圆底烧瓶中，加入80%乙醇

溶液200mL，80℃回流提取1h，趁热过滤，残渣用80%热乙

醇溶液洗涤10次，每次用量约10mL。残渣连同滤纸置于烧

瓶中，加入烧开的水100mL，沸水提取1h，趁热过滤，滤液收集于250mL容量瓶中，残渣用热水充分洗涤，洗液并入滤液，冷却后定容至刻度，摇匀，待测。

7.2.2标准曲线的绘制精密称取105℃干燥恒重的分析

纯无水葡萄糖1g(精确到0.0001g），加水溶解，加入5mL分析纯盐酸，定容至1000mL，此溶液为葡萄糖标准溶液储备液，浓度为1.0000mg/mL，用10mL单标移液管移取标准葡萄糖储备液10mL于100mL容量瓶中，加水稀释并定容至刻度，摇匀，此溶液为葡萄糖标准溶液使用液，浓度为0.10000mg/mL，精密吸取标准使用液0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL，分别置于具塞试管中，加水使体积为2.0mL，加入5%苯酚溶液1mL，摇匀，迅速加入硫酸5mL，摇匀后放置5min，置沸

水浴中加热15min，取出后立即用凉水冷却到室温，于490nm