动物细胞培养与单克隆抗体制备 公开课
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公开课动物细胞融合与单克隆抗体ppt课件
目的获：得产生
相应抗体的B 细胞
（二选）：选 能产生所需专
一抗体的杂 交瘤细胞
体外培养 小鼠腹腔内培养
ppt课件.
√ BB 、B瘤 、瘤瘤
（B、瘤）
（一选）选 择性培养基：
只有杂交 瘤细胞才
能存活
14
2.2单克隆抗体的应用 特异性强
单克隆抗体最主要的优点：灵敏度高
并能大量制备
诊断试剂——最广泛应用
细胞膜被病毒颗粒穿通 细胞膜连接
细胞融合，形成杂交细胞
（细胞膜具有一定的流动性）
ppt课件.
8
1.2动物细胞融合过程
为什么灭活的 病毒能作诱导剂？
灭活丧失感染性 保留融合活性
ppt课件.
9
1.3动物细胞融合技术的意义和应用
意义：
Hale Waihona Puke 突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交 成为可能
应用： 制备单克隆抗体（最主要的应用）
但是体外
怎样大量
？ 获得单一 抗体
培养的细胞 不能无限增
殖
癌细胞
既能产生特异性抗体，
又pp能t课件大. 量增殖的细胞 12
你的设想
一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞能无限增殖
单克隆 动物细胞培养技术 杂交瘤细胞
抗体
动物细胞融合技术
既能产生特异性抗体， 又能大量增殖的细胞
ppt课件.
13
细胞继承了_双__亲__细__胞__的__遗__传__物__质____ ，因此不仅能分泌 特异__性__抗__体_____ ，还有 大量增殖 本领。
（3）该方案的目的是__制__备__单__克__隆__抗__体___________。
动物细胞培养与单克隆抗体制备 公开课
《专题2.2 动物细胞工程》-----动物细胞融合与单克隆抗体制备（预习案）【预习目标】1. 回顾植物体细胞杂交技术，体液免疫过程。
2. 知道动物细胞融合的方法。
3. 能简述单克隆抗体的制备流程，并举例说出其具体应用。
【预习要求】认真阅读课本，回答下列问题，将疑难点在“我的疑问”做好统计【预习内容】1.植物体细胞融合的方法有哪些？植物体细胞融合成功的标志是什么？植物体细胞杂交技术成功的标志是什么？2.体液免疫过程中能特异性识别抗原的细胞有哪些？完成下面的概念图抗原与抗体结合，抗原失去活性，最终被吞噬细胞清除。
3.动物细胞融合的概念？4动物细胞融合的方法是什么？5.结合图片P2-24能对单克隆抗体的制备流程进行简单设计。
6.举例说出单克隆抗体的应用。
【我的疑问】《专题2.2 动物细胞工程》-----动物细胞融合与单克隆抗体制备（课内探究）Array【学习过程】一．动物细胞融合【思考探究】结合FLASH动画，阅读教材P52相关知识，回答核心知识点：a.原理：b.方法：c.意义：d.应用：二．单克隆抗体制备的过程【小组活动】1.根据预习情况，梳理思路，利用手中材料尝试对“单抗”制备流程进行设计；2.组内交流设计思路；3.小组代表黑板展示设计流程，并作简要说明。
【合作探究】1. 如何获得特定的浆细胞？2. 融合过程中会出现几种类型的细胞？若只考虑两两融合呢？3．上述过程得到的细胞哪种是我们所需要的？其特点是什么？4.怎样淘汰掉我们不需要的细胞？5. 淘汰后的细胞所产抗体是单一的吗？若不是，下一步该如何操作？6. 如何获得大量“单克隆抗体”？【归纳提升】回顾“单克隆抗体的制备流程”，自主归纳以下六点：1、两种细胞：2、两次筛选（目的）：3、两种培养（培养特定杂交瘤细胞的方法）：4、两种提取（提取抗体的途径）：5、两项技术：6、三个优点：三．单克隆抗体的应用（要求）阅读教材P54相关内容，总结：1.优点：应用2.优点：【自主知识梳理】（要求：结合幻灯片知识树，将本节知识作简单梳理）原理过程A .动物细胞融合方法 B.单克隆抗体制备特点应用应用【巩固训练】1．单克隆抗体的制备过程中引入骨髓瘤细胞的目的是( )A．能使杂交细胞大量增殖B．产生特异性更强的个体C．使细胞融合容易进行D．使产生的抗体纯度更高2．单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞。
人教版教学课件动物细胞融合与单克隆抗体(共20张PPT)
培养液中或小鼠腹腔中培养 从培养液或小鼠腹水中提
如何进行杂交瘤细胞的抗体检测及克隆化培养？
融合后的细胞经选择性培养基培养后，能存活的 细胞就是杂交瘤细胞。 但这些杂交瘤细胞并非都是能分泌所需抗体的细胞， 通常用“有限稀释法”来选择。将杂交瘤细胞稀释， 用多孔细胞培养板培养，使每孔细胞不超过一个， 通过培养让其增殖。然后检测各孔上清液中细胞分 泌的抗体。那些上清液可与特定抗原结合的培养 孔为阳性孔。阳性孔中的细胞还不能保证是来自单 个细胞，挑选阳性孔的细胞继续进行有限稀释，一 般需进行3～4次，直至确信每个孔中增殖的细胞为 单克隆细胞。该过程即为杂交瘤细胞的克隆化培养。
产生相应的B淋巴细 效应B淋巴细胞 胞
融合
培养骨髓瘤细胞 骨髓瘤细胞
多种杂交细胞
（只考虑两两融合） 骨髓瘤细胞---骨髓瘤细 培养液中细胞有几 胞 种类型？融合细胞 在具有筛选作用的培养基上培养 几种类型？ B淋巴细胞--- B淋巴细胞
专一抗体检验阳性 B淋巴细胞---骨髓瘤细胞 克隆上述杂交细胞
注射到小鼠体内
设计方案：
一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞能无限增殖
动物细胞融合技术 单克隆 动物细胞培养技术 杂交瘤细胞 抗体 既能产生特异性抗体， 又能大量繁殖的细胞
(1)、原理：杂交瘤细胞具有两个亲本的特性，即能
迅速大量增殖，又能足够数量的单一抗体。
(2)、过程
1、单克隆抗体的制备过程
注射特定 抗原蛋白
5、动物细胞融合过程
不同DNA的两个细胞
灭活病毒诱导细胞融合
融合后的细胞 进行有丝分裂
6、意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交 （种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。 7、应用：成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物 新品种培育等的重要手段
高二生物动物细胞融合和单克隆抗体1省名师优质课赛课获奖课件市赛课一等奖课件
阳性孔中旳细胞还不能 确保是来自单个细胞，挑选 阳性孔旳细胞继续进行有限 稀释，一般需进行3～4次， 直至确信每个孔中增殖旳细 胞为单克隆细胞。该过程即 为杂交瘤细胞旳克隆化培养。
单克隆抗体
单克隆抗体旳应用： ①作为诊疗试剂：精确辨认多种抗原 物质，并与特异性结合
治疗疾病：主要用于癌症治疗 ②用于
融合过程中两个细胞膜从彼此接触到破裂形成细 胞桥旳变化过程图解
• 为何灭活旳病毒能作为诱导剂？ • 不灭活旳病毒能作为诱导剂吗？
生物法：灭活旳病毒
仙台病毒 紫外线
丧失感染性 （不感染细胞）
保存融合活性
动物细胞融合
动物细胞融合技术旳意义
➢打破生殖隔离，使远缘杂交成为可能； ➢广泛应用多种学科领域； ➢主要用途：制备单克隆抗体。
单克隆抗体旳制备
２、设计思绪：
一种B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞（癌细胞）能无限增殖
单克隆抗体动物细胞培养技术 杂种细胞 动物细胞融合 既能产生特异性抗 体，又能大量繁殖
单克隆抗体旳制备
制备过程：
1.注射抗原旳目旳是什么？ 2.诱导其融合旳措施有哪些？ 3.融合后培养液中有几种细胞？ 4.怎样筛选出杂交瘤细胞，杂交瘤细胞有 何优点？ 5.为何要进行克隆化培养和专一抗体检测， 屡次筛选？ 6.大量增殖杂交瘤细胞取得单抗旳措施?
动物细胞融合
原理： 细胞膜旳流动性 诱导融合措施：
物理法: 离心、振动、电刺激 化学法: 聚乙二醇（PEG） 生物法：灭活旳病毒
• 为何灭活旳病毒能作为诱导剂？ • 不灭活旳病毒能作为诱导剂吗？
灭活旳病毒颗粒黏附于细胞表面
细胞膜被病毒颗粒穿通 细胞膜连接
细胞融合，形成杂种细胞 （细胞膜具有一定旳流动性）
单克隆抗体
单克隆抗体旳应用： ①作为诊疗试剂：精确辨认多种抗原 物质，并与特异性结合
治疗疾病：主要用于癌症治疗 ②用于
融合过程中两个细胞膜从彼此接触到破裂形成细 胞桥旳变化过程图解
• 为何灭活旳病毒能作为诱导剂？ • 不灭活旳病毒能作为诱导剂吗？
生物法：灭活旳病毒
仙台病毒 紫外线
丧失感染性 （不感染细胞）
保存融合活性
动物细胞融合
动物细胞融合技术旳意义
➢打破生殖隔离，使远缘杂交成为可能； ➢广泛应用多种学科领域； ➢主要用途：制备单克隆抗体。
单克隆抗体旳制备
２、设计思绪：
一种B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞（癌细胞）能无限增殖
单克隆抗体动物细胞培养技术 杂种细胞 动物细胞融合 既能产生特异性抗 体，又能大量繁殖
单克隆抗体旳制备
制备过程：
1.注射抗原旳目旳是什么？ 2.诱导其融合旳措施有哪些？ 3.融合后培养液中有几种细胞？ 4.怎样筛选出杂交瘤细胞，杂交瘤细胞有 何优点？ 5.为何要进行克隆化培养和专一抗体检测， 屡次筛选？ 6.大量增殖杂交瘤细胞取得单抗旳措施?
动物细胞融合
原理： 细胞膜旳流动性 诱导融合措施：
物理法: 离心、振动、电刺激 化学法: 聚乙二醇（PEG） 生物法：灭活旳病毒
• 为何灭活旳病毒能作为诱导剂？ • 不灭活旳病毒能作为诱导剂吗？
灭活旳病毒颗粒黏附于细胞表面
细胞膜被病毒颗粒穿通 细胞膜连接
细胞融合，形成杂种细胞 （细胞膜具有一定旳流动性）
《单克隆抗体》【公开课教学PPT课件 高中生物】
宝剑锋从磨砺出 梅花香自苦寒来
为什么“甲流”康复者或接 种疫苗1月以上者的血浆会成为 救治重症“甲流”患者的妙药？
血浆中的抗体会与“甲流” 病毒反应，从而将病毒消灭。
宝剑锋从磨砺出 梅花香自苦寒来
一、单克隆抗体
➢ 抗体：能够与抗原发生特异性结合的免疫球蛋白
• 能产生抗体的细胞是浆细胞
➢ 单克隆
由一个细胞经过无性繁殖(多次有丝分裂)形成的一个细胞 群
B淋巴细胞尽管可以产生多达百万种以上的特异性 抗体，但是每一个B细胞只分泌一种特异性抗体
怎样才能获得大量的单一性抗体呢？
做为科学家的你，如何设计生产方案？
宝剑锋从磨砺出 梅花香自苦寒来
G. Kohler
• 能产生单一抗体 • 其寿命仅有几天，无法长期体外培养
B淋巴细胞 骨髓瘤细胞
无限增殖
细胞 杂交瘤 融合 细胞
宝剑锋从磨砺出 梅花香自苦寒来
1、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培
养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（ ）
A.经过免疫的B淋巴细胞 B.没经过免疫的T淋巴细胞
C.经过免疫的T淋巴细胞 D.没经过免疫的Ｂ淋巴细胞
2.动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较中，正确的是（ ）
宝剑锋从磨砺出梅花香自苦寒来单克隆抗体22动物细胞工程宝剑锋从磨砺出梅花香自苦寒来教学目标单克隆抗体单克隆抗体的应用宝剑锋从磨砺出梅花香自苦寒来教学目标知识目标1学会运用动物细胞融合技术2简述单克隆抗体制备的过程3了解单克隆抗体在医学实践中的应用并说其应用实例能力目标让学生尝试设计单克隆抗体的制备过程指导学生掌握获取知识和探索生物科学的基本方法使学生了解生物科学认识模式以发展学生的创造性能力
产生抗体 无限增殖
为什么“甲流”康复者或接 种疫苗1月以上者的血浆会成为 救治重症“甲流”患者的妙药？
血浆中的抗体会与“甲流” 病毒反应，从而将病毒消灭。
宝剑锋从磨砺出 梅花香自苦寒来
一、单克隆抗体
➢ 抗体：能够与抗原发生特异性结合的免疫球蛋白
• 能产生抗体的细胞是浆细胞
➢ 单克隆
由一个细胞经过无性繁殖(多次有丝分裂)形成的一个细胞 群
B淋巴细胞尽管可以产生多达百万种以上的特异性 抗体，但是每一个B细胞只分泌一种特异性抗体
怎样才能获得大量的单一性抗体呢？
做为科学家的你，如何设计生产方案？
宝剑锋从磨砺出 梅花香自苦寒来
G. Kohler
• 能产生单一抗体 • 其寿命仅有几天，无法长期体外培养
B淋巴细胞 骨髓瘤细胞
无限增殖
细胞 杂交瘤 融合 细胞
宝剑锋从磨砺出 梅花香自苦寒来
1、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培
养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（ ）
A.经过免疫的B淋巴细胞 B.没经过免疫的T淋巴细胞
C.经过免疫的T淋巴细胞 D.没经过免疫的Ｂ淋巴细胞
2.动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较中，正确的是（ ）
宝剑锋从磨砺出梅花香自苦寒来单克隆抗体22动物细胞工程宝剑锋从磨砺出梅花香自苦寒来教学目标单克隆抗体单克隆抗体的应用宝剑锋从磨砺出梅花香自苦寒来教学目标知识目标1学会运用动物细胞融合技术2简述单克隆抗体制备的过程3了解单克隆抗体在医学实践中的应用并说其应用实例能力目标让学生尝试设计单克隆抗体的制备过程指导学生掌握获取知识和探索生物科学的基本方法使学生了解生物科学认识模式以发展学生的创造性能力
产生抗体 无限增殖
单克隆抗体的制备(公开课)
常规抗体的生产及缺陷
抗 原
刺激
动物体内
B淋巴细胞
抗体
抗原不纯
B淋巴细胞不 纯 筛选单一B淋巴细胞 增殖产生大量抗体 单克隆抗 体
抗体不纯
纯度低、 特异性差 产量 低
X
二、单克隆抗体制备过程
注射抗原的目的是什么? B淋巴细胞在抗原的刺激下，能够 诱导其融合的方法有哪些？ 分化、增殖形成具有针对这种抗原 物理：电激 融合后培养液中有几类细胞？ 的浆细胞，并且浆细胞有分泌针对 化学：聚乙二醇PEG 这种抗原的特异性抗体的能力。 筛选出能产生所需专一抗体的骨髓 怎样筛选出杂交瘤细胞，杂交瘤 B 淋巴细胞 +B淋巴细胞 生物：灭活的病毒 瘤细胞 细胞有何优点 B淋巴细胞+ 骨髓瘤细胞 骨髓瘤细胞 +骨髓瘤细胞 用特定的选择培养基筛选 体内培养（注射到小鼠腹腔） ： 为何要进行增殖化培养和专一抗体 从小鼠腹水中提取 既能迅速大量繁殖，又能产生专一 的抗体 检测，多次筛选？ 体外培养： 细胞培养液中提取 大量增殖杂交瘤细胞获得单克隆抗 体的方法
灭活的病毒等手段
杂交 细胞
用特定的选 择性培养基
第一次筛选
杂交瘤细胞
第二次筛选 能产生特定抗体、培养条件下 能无限增殖的杂交瘤细胞
注射到小鼠腹腔
体外培养
• 从世界范围来看， 2000 年全球新发癌症病例 拿 1010 万，死亡 620 万，现患癌症病例 2240 万， 什 2008 年癌症发病人数和死亡人数分别上升到 么 1266 万和 756 万，估计到 2015 年将有 1500 万 拯 新发病 例 。 救 你，•2008年恶性肿瘤发病人数发展中国家占56%； 癌 2009年 80%的癌症患者集中在中低收入国家， 症 到2015年， 发展中国家估计有900万人死于 患 癌症。 ——《我国恶性肿瘤发病现状及趋势》 者？
动物细胞融合与单克隆抗体的制备精品优秀课件标准版
③细胞融合
具如有何筛进选行作筛用选的？培
④⑤诱用杂杂灭导方台交交活细法病瘤瘤的胞是毒细仙细融什胞胞合么的的筛常？选选择培养
养基（HAT培养基）
杂交细胞
B？B种、B瘤 、
⑥分泌单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立
瘤瘤 、
⑦单克隆抗体的大量制备
如何获得大量的
单克隆抗体？
第二十页，共四十四页。
抗原
效应B细胞
筛选
生物法：灭活的病毒同？例如：仙台病毒
第六页，共四十四页。
仙台病毒
紫外线
丧失感染性 （不感染细胞）
保留融合活性 （诱导细胞融合）
第七页，共四十四页。
细胞A
细胞B
物理法
化学法
灭活的病毒
杂交细胞
第八页，共四十四页。
灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面
细胞膜被病毒颗粒穿通 细胞膜连接
细胞融合，形成杂交细胞 （细胞膜具有一定的流动性）
第九页，共四十四页。
(三)动物细胞融合的应用
1.突破有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可
能。
鼠—鸡、鼠—兔、鼠—猴、人—鼠、人—兔、 人—鸡、人—蛙、酵母菌—鸡 、人—胡萝卜等
2.成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品
种培育等的重要手段。
3、重要用途：制备单克隆抗体。
第十页，共四十四页。
二、单克隆抗体
合细胞 ④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞
⑤杂交瘤细胞
A． ②④
B．①③⑤
C． ①②③④
D．②③
第三十二页，共四十四页。
练习：
5、研究单克隆抗体治疗癌症的思路是（ ）
A．利用单克隆抗体特异性地对抗癌细胞 B．以单克隆抗体作抗癌药物杀死癌细胞 C．抗癌物质在克隆细胞中大量合成
人教版高中生物选修三《动物细胞融合与单克隆抗体》公开课课件
单克隆抗体在临床中的应用 三组同学分享 运载药物 ADC=抗体+连接物+药物（如细胞毒素）
本妥昔单抗——霍杰金淋巴瘤
优点：用药量小、疗效高、毒 副作用小
17
单克隆抗体在临床中的应用
单克隆抗体优点：
能准确识别抗原的微小差异，能与特定抗原发生特异性结 合，可以大量制备。
思维拓展:研究发现这些鼠源单克隆抗体进入人体可能会失效， 思考一下为什么？你有哪些解决措施？
3、诱导方式
物理法：电融合法 化学法：PEG融合法 生物法：灭活的病毒
4、结果： 形成杂交细胞。即融合后的细胞具有两个或
多个细胞的遗传信息。
单克隆抗体制备 1975年，英国科学家米尔斯坦和德国科学家科勒设计了一个 极富创造力的实验制备了单克隆抗体。他们所用的实验材料 有小鼠、特定抗原、骨髓瘤细胞(癌细胞)、培养基。
优点：用以指导手术范围，这样既可以彻底地切除肿瘤，又可 以避免切除过多的健康组织，以提高患者手术后的生活质量。
单克隆抗体在临床中的应用 三组同学分享 单抗自身治疗疾病
临床常见药物：利妥昔单抗、曲妥珠单抗、西妥昔单抗、 贝伐单抗、阿伦珠单抗
通过和病变细胞相应的抗原位点结合，抑制癌细胞的增 殖或杀死癌细胞
7
单克隆抗体制备
下面让我们追寻科学家的足迹，阅读课本图2-16并 利用所给的材料，构建单克隆抗体制备流程图。
要求：以文字和箭头的形式构建，文字部分用提供的材料贴 在白板上，用白板笔画出箭头;思考回答环节一①②③ （注：诱导融合、筛选、细胞培养的词条贴在箭头右侧）
单克隆抗体制备
给小鼠注射特定的抗原蛋白
4
单克隆抗体制备
一个B淋巴细胞能否无限增殖？ 哪种细胞能够无限增殖？ 可否获得一种细胞兼具两者优势？
相关主题
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杂交细胞具有 两个或多个细胞的遗传物 质 突破_________________，使 有性杂交局限 远缘杂交 __________成为可能。获得杂
单克隆抗体制备 交细胞，用于_______
二、单克隆抗体制备的过程
问题导引：1.抗体从何而来？ 2.传统抗体制备的方法是什么？弊端有哪些？ 3.能否通过单独体外培养浆细胞的方式大量 获得相应抗体?
2013年3月20日
骨髓瘤细胞
杂交细胞
5.淘汰后的细胞所 产抗体是单一的吗？ 若不是，下一步如 何操作？
6.如何获得大量 的单克隆抗体？
单克隆抗体
B淋巴细胞
细胞融合
骨髓瘤细胞
杂交细胞
5.淘汰后的细胞所 5.不是，下一步应 产抗体是单一的吗？ 进行杂交细胞的克 若不是，下一步如 隆化培养与“专一 抗体检测” 何操作？
1.注射特定抗 1.如何获得特 （浆细胞） 定的浆细胞？ 原 （选择培养基）筛选
2.浆细胞与浆细胞、骨髓瘤 2.融合过程中会出现几种类 细胞与骨髓瘤细胞、浆细胞 型的细胞？若只考虑两两融 与骨髓瘤细胞 合呢？ 筛选（专一抗体检测阳性）克隆
3.该过程得到的细胞 哪种是我们所需要 的？其特点是？ 4.如何淘汰掉我 们不需要的细胞？
【本节知识梳理】
要求：
1.以“单克隆抗体制备”为主线，自 己进行本节知识梳理。 2.完成当堂检测
2013年3月20日
单克隆抗体的制备（小结）
B淋巴细胞
骨髓瘤细胞
体外培养 小鼠腹腔内增殖
克隆化 诱导 选择 产生所需 融合 多种杂 培养 杂交瘤 培养
交细胞
细胞
抗体 检测
抗体的杂 交瘤细胞
单克隆抗体
应用
体外培养 体内培养
6.体内、体外培养杂 6.如何获得大量 交瘤细胞并从小鼠腹 的单克隆抗体？ 水或细胞培养液中提 取单克隆抗体
2013年3月20日
单克隆抗体
把以下代表单克隆抗体制备过程步骤的图解的字母按正 确顺序连接起来。顺序是？
2013年3月20日
【归纳提升】
回顾“单克隆抗体制备流程” 自主归纳 1、两种细胞： 浆细胞 骨髓瘤细胞
1.原理 2.方法 3.意义
动物细胞培养技术 1、该过程中用到了两种技术 动物细胞融合技术 2、单克隆抗体的制备过程的三个 “ 一 ”： 灭活病毒诱导融合
2013年3月20日
一种诱导细胞融合的新方法，产生了一种新细胞，得到了一种优势抗体。
杂交瘤细胞
优势：特异性强、 灵敏度高， 可大量制备
【巩固训练】
1.A 2.A
3.B
4.A
2013年3月20日
作业：
《导学练》P39 课堂演练 T17为选做！！
2013年3月20日
【寄语】
2013年3月20日
1970年， 有两位科 学家做了 一个人— 鼠细胞融 合的实验
人为诱导融合
2013年3月20日
2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体
主讲人： 付 强 2013年3月20日
【学习目标】
1.能够列表比较动物细胞融合与植物体细 胞杂交的异同。 2. 能叙述单克隆抗体制备过程； 明确各步骤目的； 能举例说出其应用及意义。
2013年3月20日
一.动细胞融合
核心知识点： 1.原理 2.方法 3.意义
4.用途（特别）
2013年3月20日
【归纳提升】
项目 原理 融合前处理 植物体细胞杂交 细胞膜的流动性 植物细胞全能性 纤维素酶 用_____________、 果胶酶 __________去除细胞壁
后诱导原生质体融合
2、两次筛选（目的）：
1、杂交瘤细胞
2、分泌专一抗体的杂交瘤细胞
3、两种培养（培养特定杂交瘤细胞的方法）：体内，体外培养
4、两种提取（提取抗体的途径）：小鼠腹水 细胞培养液 5、两项技术： 动物细胞培养 动物细胞融合 特异性强，灵敏度高，可大量制备 6、三个优点：
2013年3月20日
三. 单克隆抗体的应用
4.用什么方法能让浆细胞在体外培养时既能 产生抗体又能无限增殖?
2013年3月20日
5.“单” “克隆” 各指什么含义？
二. 单克隆抗体制备的过程
【小组活动】 小组合作--尝试设计“单克隆抗体的制备”流程 目的：自查预习情况 要求：1.根据预习情况，梳理思路，利用手中材料尝 试对“单抗”制备流程进行设计； 2.组内交流设计思路；
预习案点评
融合方法：物理法：离心、振动、电激 化学法：PEG
植物细胞融合成功的标志：杂种细胞再生细胞壁 植物体细胞杂交技术成功的标志：杂种细胞培育成新的植物体 体液免疫中特异性识别抗原的细胞是：T细胞 B细胞 记忆B细胞
吞噬 细胞
T细胞
记忆B细胞 浆细胞
2013年3月20日
预习案点评
组别
1 2 3 4 5 6 7 8 9 2013年3月20日 10
3.小组代表黑板展示设计流程，并作简要说明。
2013年3月20日
把以下代表单克隆抗体制备过程步骤的图解的字母按正 确顺序连接起来。顺序是？
2013年3月20日
B淋巴细胞 1.如何获得特 （浆细胞） 定的浆细胞？
2.融合过程中会出现几种类 型的细胞？若只考虑两两融 合呢？
3.该过程得到的细胞 哪种是我们所需要 的？其特点是？ 4.如何淘汰掉我 们不需要的细胞？
动物细胞融合 细胞膜的流动性
胰蛋白酶 用____________使细胞分散后 诱导细胞融合
除应用植物体细胞杂交手段外， 还有 灭活病毒
诱导融合的方 法
离心，振动，电 激，PEG
杂种植株（或 杂种植株含有两种 杂交细胞）特 生物的遗传物质 点 意义和用途 克服 远缘杂交不亲 和的障碍，获得杂 2013年3月20日 植株 种_________
2013年3月20日
体内培养
既能产 生抗体 6.体内、体外培养杂 6.如何获得大量 又能无 交瘤细胞并从小鼠腹 的单克隆抗体？ 限增殖 水或细胞培养液中提
取单克隆抗体
体外培养
单克隆抗体
单克隆抗体制备过程
2013年3月20日
B淋巴细胞 （浆细胞）
细胞融合
骨髓瘤细胞
杂交细胞
（选择培养基）筛选
筛选（专一抗体检测阳性）克隆
组长
整齐 度
认真 疑难 度 分析
提出问 题
温故知新:
植物细胞A
去掉细胞壁
植物体细胞杂交过程
植物细胞B
去掉细胞壁
原生质体A
原生质体B
原生质体融合
杂合的原生质体
再生出细胞壁
杂种细胞
细胞分裂
愈伤组织
分化发育
2013年3月20日
杂种植株
2013年3月20日
实例1：
自然融合
2013年3月20日
实例2：
（要求）阅读教材P54相关内容，自主总结：
①诊断试剂（识别作用，如同位素
标记单克隆抗体，可诊断肿瘤、 心血管畸形等）
优点： 准确、高效、简易、快速
②用于治疗疾病和运载药物（主要用于
癌症治疗，如单克隆抗体（瞄准装置）+ 药物（弹头）= “生物导弹”）
优点： 位置准确、疗效高、副作用小
2013年3月20日