大鼠脑缺血模型及缺血再灌注模型.docx

大鼠全脑缺血模型制备方法评价二血管阻断法阻断双侧颈总动脉（ common该法手术简便易于操作，成功carotid artery ， CCA ）率高。

加动脉放血造成低血压而形缺点：仅形成不完全脑缺血，成前脑缺血。

若单纯结扎造成的低血压严重干扰其双侧 CCA 而不降低血压，则他器官的血供及实验结果；不难以使脑血流量（ cerebral能在动物清醒状态下进blood flow ， CBF ）降低至缺行，无法进行神经行为学的观血和能量代谢紊乱的程度。

察。

因此，该模型对探讨缺血性脑损伤的发病机制、评价抗脑缺血药物的疗效更有价值。

颅内加压法小脑延池内注入人工脑脊液，使颅内压升高超过动脉血压 2.7~9.3 kPa （ 1 kPa≈0.133 mmHg ），同时给予神经节阻滞剂三甲噻方，防止颅内高压反射性引起高血压。

颈部加压法麻醉动物，颈部套一止血带，加压至 80~93 kPa，减少脑血流量，造成脑缺血。

断头法断头造成全脑不可逆缺血，取下脑组织冰冻贮存，常用于生化和代谢分析。

低氧法结扎单侧 CCA 合并全脑缺氧， PaO2 维持在 2.8 kPa。

由于脑部不是真正的缺血，采用这一模型得到的结论不适用于脑缺血，但可比较缺氧与脑血流量减少引起效应的不同。

胸内血管夹闭法开胸，夹闭左侧 CCA 、头臂干、左侧锁骨下动脉，造成全脑缺血。

大鼠局灶性脑缺血模型制备方法栓塞法颈动脉注射血凝块栓复制栓塞性脑卒中模型的方法过去只用在中型体积动物，现已在大鼠中应用。

Kudo 等［ 12］采用 <100 μm 的同源血凝块栓悬液，注入CCA ，在颈外动脉（externalcarotid artery ， ECA ）的颈内动脉（ internal carotid artery ，ICA ）开口处置一可逆性插管，栓子则由 ICA 进入 MCA ，导致同侧大脑皮层、海马、深层灰质结构的梗塞。

也有人用碳素颗粒、花生四烯酸钠作为栓塞剂制成脑梗塞模型。

评价适于血栓形成过程的研究和溶栓治疗的观察，尤其是用人血凝块栓塞法更具有应有价值。

缺点：①由于栓子的随机性，无法预测梗塞部位及大小；②侧支循环的影响使组织缺血程度不一，不利于组织定量分析。

开颅法Tamura 等［ 13］采用颞下部开颅法闭塞 MCA ，实验条件开颅，分离近端 MCA ，电较恒定，凝或用手术丝线结扎 MCA ，缺血效果可靠，是迄今应用最造成脑梗塞，是目前公认广泛的经典性局灶脑缺的标准 MCA 闭塞模型，以大血模型。

缺点：需要开颅，创脑皮层、尾状核缺血最明伤性大，闭塞血管后无法显。

进一步改进此方法，可通进行再灌性损伤研究。

过降低动脉血压以减少伴行血管远近端分支对梗塞区的血供，增大梗塞面积。

其中，Kader 改进电凝方法，闭塞 MCA 所有可见分支，梗塞效果好； Chen［ 14］等采取鼻缝旁入路，制作了远端MCA 合并同侧 CCA 永久性闭塞，对侧 CCA 暂时性闭塞模型。

光化学法曾报道， Watson 等首次建立此法适于研究抗血小板、抗血了光化学法诱导脑皮栓形成层梗塞的动物模型。

立体定位药物和血管内皮细胞保护剂仪固定大鼠头部，暴露颅的疗效；此种模型无须开骨，尾静脉注射光敏材料荧光颅，动物存活时间长，适于慢素，用 560 nm 波长的特性脑缺血研究；皮层梗塞定光源照射局部头颅，光线透部位可任意选择，为皮层功能过颅骨与血管内的染料定位研究提供了条件。

缺接触，激发光化学反应，引起点：与人类常见的脑栓塞存在照射部位皮层血管内皮细胞毒性脑水肿而导致脑梗塞。

差异，而且是终末动脉永久性闭塞，妨碍扩血管药的治疗观察。

大鼠全脑缺血再灌注损伤模制备方法评价型四血管阻断法1979 年， Pulsinelli 等［ 26］此方法检验缺血是否成功的通过阻断双侧 CCA 及椎指标明动脉血流成功建立了四血管确［4］；可进行再灌注损伤的闭塞法大鼠全脑缺血模研究；海马损伤明显，可显型。

手术分两个阶段：麻醉动示记忆功能的减退。

缺点：手物，颈前正中切口，分离术较复杂，实验操作的熟CCA ，将无损动脉夹轻放于练程度直接影响实验效果。

双侧 CCA 周；同时枕部切口暴露第一颈椎翼小孔，电凝双侧椎动脉，造成永久性闭塞。

24 h 后夹闭双侧 CCA ，造成明显的脑缺血。

以大脑皮层、纹状体、海马缺血最为明显。

解除动脉夹可进行脑缺血再灌注研究。

1983年，作者［ 27］又改进这一模型，即在气管、食管、颈总动脉、颈外静脉后，颈部肌肉前置一手术丝线，夹闭 CCA 同时，在气管后扎紧这根丝线，以减少颈部皮下组织、肌肉血液对脑部的供应。

三血管阻断法Kamegama 等［ 28］通过电缺血一定时间后可去除夹闭灼断基底动脉、同时夹闭进行彻底两侧颈总动脉的方法复制全再灌注，也避免了灼断基底动脑缺血模型，由于该方法不脉导致的动脉损伤、出血仅阻断了脑供血主干血管，而之弊，造成的缺血和再灌注效且也阻断了从脊前动脉来果迅速、稳定性好。

使用的侧支血管，与前述四血管阻过程中，全身动脉血压一直稳断模型比较，脑缺血成功定在生理范围内，从而避率高且无需再筛选是其主要免了由全身动脉压降低引起优点。

田鹤邨［ 29］等在此基再灌注时脑血流灌注压不础上又加以改进不用显微镜足，这是其又一个比较突出的而在直视下进行手术，用特优点。

制的动脉夹夹闭基底动脉而不用电灼断的方法。

二血管阻断法Smith 等［30］通过夹闭双侧采用这种方法复制的缺血再CCA 合并低血压以减少脑血流量，造成急性脑缺血。

脑组织缺血程度可以通过测定 CBF 反映出来。

大鼠脑血液循环有较人类丰富的侧支循环，仅结扎双侧CCA 不足以明显降低CBF ，必须结合降压药三甲噻吩、酚妥拉明等降低动脉血压至 6.7 kPa，使 CBF 降低至正常的 5％ ~15％。

大鼠局灶性脑缺血再灌注损制备方法伤模型栓线法主要用栓线法［4-5］。

Koizumi在 1985 年首次报道该方法，近年来不断完善。

具体方法是：分离暴露颈部血管， 4-0 尼龙线从ECA或 CCA 分叉处插入，进入ICA ，阻断 MCA 起始端及其所有侧支血流循环，导致MCA 局灶缺血。

轻轻提拉插线，有阻力时提示丝线头端已达 ECA 或 CCA切口处，制成再灌注模型。

可将尼龙线头端烧成鼓槌状，也可在尼龙线远端涂一层硅酮弹性体（长度 5cm，直径0.25 mm）便于插入ICA 并胀紧血管。

通过实践测量发现，插线深度 17 mm 时，腔内线头一般刚到或接近MCA分支处，信照亮［34］提出腔内线插入深度应达19~20mm，并认为翼腭动脉是否结扎对脑梗塞的影响不显著，从而简化手术操作，减少创伤出血。

灌注损伤模型，模拟了临床上休克、心功能不全、脑血管严重狭窄或阻塞合并血液低灌流引起的脑循环障碍，造成不同程度的脑组织缺血损伤；适用于探讨人类缺血性脑损伤的发病规律，评价抗脑缺血药物的疗效。

缺点：模型不能在清醒动物上复制，无法研究血管狭窄后行为学的变化；脑缺血时间长，有时导致脑缺血后抽搐、癫痫等并发症的发生。

评价这种模型无须开颅， MCA 闭塞效果较理想，是目前能进行再灌注损伤研究的较理想局部脑缺血模型。

缺点：结扎枕、甲状腺上、咽升、舌、上颌外和翼腭动脉需要一定手术技巧；属栓塞性脑卒中，与人群常见的脑卒中存在差异。

连续很多天都是天亮之后才睡觉。

别人问我，你晚上不睡觉都在干嘛。

我马上回答，写稿啊，书稿还没交呢。

但其实，我一个字也没写。

而之所以熬夜，也不过是因为心里有牵挂的人和未完成的事吧。

别人问你怎么还不睡，你说不困。

其实熬夜很困，打个哈欠都会有眼泪流出来，只是心中一直有所期待，有所牵挂。

就好像下一秒就会收到喜欢的人的消息，下一秒就能遇见一个惊喜。

又或者，熬了太久却迟迟得不到自己想要的结果，渐渐的习惯了孤独。

为什么会熬夜呢，大概是因为白天的自己太理智，太冷漠，好像什么都不在乎。

所以有些情绪和思念，心酸和不舍，是要留到深夜独自慢慢消化的。

白天的自己和晚上的自己完全不是同一个人啊，白天口口声声说一定早睡，晚上却从来做不到。

像失忆一样拿命熬夜，白天开开心心无忧无虑，晚上却忧郁的不行。

白天觉得我最牛逼，晚上却变成世界第一大傻逼。

总觉得幸福的人是不用熬夜的，每天都有规律的生活，爱的人就躺在身边，现在过的是想要的生活，手里牵的是喜欢的人。

昨天有人问我，为什么你晚上不睡觉。

我想了很久，已经两三年没有在两点之前入睡过了。

但我也说不清为什么，那个人突然给我发了一段话，我突然觉得，这是我熬夜的原因，也是很多人熬夜的原因。

你总是习惯熬夜，然后我也故意很晚都不睡。

装作是和你一样睡不着，这样就可以和你聊很久，可是你都不知道其实我要困死了。

后来你走了，熬夜的习惯却怎么都改不掉。

说片面点是熬夜，说实在点是失眠，说实话是想你。

你有没有过，为了陪一个人聊天，其实下一秒已经要睡着，但还是死抓着手机不肯睡。

你有没有过，因为一个人的一句话，明明很困却突然变得很清醒，开心和喜悦赶走了所有困意。

你有没有过，为了等一个人的晚安，不停的刷着朋友圈发着动态，其实只想让他看到你还没睡。

你有没有过，因为太思念一个人，每天都害怕深夜来临，害怕孤独，害怕寂寞，害怕牵挂的感觉。

我知道，你都有过。

可是，你每天这样熬夜，有人心疼你吗？前天晚上一个作家姐姐突然发消息说，妹妹，钱是挣不完的，别累着自己，身体最重要。

昨晚她发现我又在熬夜，给我发消息说，一定照顾好自己，莫名心疼你。

我很感动，又觉得很可笑。

一个没见过面的人看你熬夜都会心疼，会劝你照顾好自己，但你每天熬夜想着的那个人，没给你发过一条消息。

第一次见面的陌生人都会劝你少喝酒少抽烟，素不相识的微信好友都会让你早点休息，可你抽烟喝酒熬夜在等的那个人，从来都没在意过你，连一句晚安都没有。

我经常给别人讲道理，永远不要为了一个不爱你的人折磨自己。

但这句话其实就像放屁，因为一旦爱上一个人，就没办法控制自己。

我们在爱情里，从来都不是理性的。

后来有人问我，怎么忘记一个人。

我说，把酒喝够，把烟抽完，把黑夜熬成天亮，等你真的感觉疼了，你就忘记了。

不撞南墙不死心，大概就是这个道理。

别人苦口婆心的劝说，其实你一点儿都听不进去。

你害怕失去、害怕背叛、害怕从未拥有，你害怕的太多、心事太多，所以很难入睡。

那你就熬吧，等熬过了这一阵，你又会觉得其实生活还是很美好。

你要记住，所有关于感情的问题，都不要在深夜做决定。

无论分手还是牵手，无论坚持还是放弃。

因为女人啊，从来都不是理性动物，再加上深夜里的一杯红酒，一根香烟，感性越发强烈。

五年前第一次听梁静茹的《问》，歌里唱，如果女人，总是等到夜深，无悔付出青春，他就会对你真。

那时候真的傻到相信，用心爱一个人，就能把他留在自己身边。

现在才明白，在一起一辈子这种事，不是嘴上说了就可以。

外面的诱惑这么多，人的欲望这么大，而你能给的爱，其实就这么多。