家兔有机磷酸酯类中毒及其解救
有机磷酸酯类中毒及解救实验报告
实验编号：一实验题目：有机磷酸酯类中毒及解救实验者：实验日期：2024年9月29日实验对象：家兔试验器材与药品：器材：测瞳尺、注射器(1mL、5mL、20mL)、头皮静脉针、移液器(1mL、200 uL)、离心管(5mL、50mL)、EP管(1.5mL)、离心机、37℃恒温箱/水浴锅、紫外分光光度计、比色皿、擦镜纸药品：肝素、10%敌百虫溶液、0.2%硫酸阿托品溶液、2.5%解磷定溶液、双蒸水、试剂一、8μmol/ml乙酰胆碱应用液、试剂二、试剂三、试剂四、试剂五、试剂六实验目的：1.掌握有机磷农药中毒的临床表现2.熟悉有机磷农药中毒及阿托品和解磷定的解毒原理3.了解抗胆碱酯酶药的相关知识实验步骤：1.取家免一只，称重得重2.31 kg观察记录家兔状态，耳缘静脉注射肝素2.3ml，使用1ml注射器取血0.3-0.5ml，转移至使用肝素润洗过的离心管中，待用；耳缘静脉注射10%敌百虫 3.5ml，中毒明显后取血，待用，耳缘静脉注射0.2%硫酸阿托品溶液2.3ml，M样症状消失后取血，待用；耳缘静脉注射2.5%解磷定溶液4.6ml, N样作用消失后取血，待用；家兔症状完全缓解，取血，待用4.对五组样品进行处理：轻轻颠倒肝素抗凝全血使之均匀后取0.1ml，再加入0.4ml 双蒸水，充分混匀 1 分钟，静置15 分钟，制备的5 倍溶血液对光观察澄清透亮待测。
依照操作表分别加入定量待测样本、双蒸水、8μmol/ml乙酰胆碱应用液和试剂一，混匀后37℃水浴20分钟6.而后依照操作表依次加入定量试剂三、试剂四、试剂五、试剂六和待测样本7.混匀，3500转/分离心10分钟，取上清，520nm，1cm光径，空白管调零，测各管吸光值实验结果：实验结果分析讨论：1、描述现象家兔注射敌百虫前，状态活跃，呼吸平稳顺畅，瞳孔大小正常，唾液分泌正常，无大小便失禁现象，无肌张力及肌震颤，全血CHE活力为9.211U/ml家兔注射敌百虫后,状态萎靡，,呼吸加快，出现瞳孔缩小，唾液分泌增多,肌震颤现象，大便失禁产出粪便二十余粒;，全血CHE活力为0.518U/ml注射阿托品后,家兔活动状态稍有恢复，呼吸稍有变缓，但仍然较快，瞳孔基本恢复正常,唾液分泌减少,肌震颤仍存在，无大小便失禁现象;，全血CHE活力为1.453U/ml注射解磷定后,家免活动状态基本恢复正常，呼吸基本平稳顺畅，瞳孔大小完全恢复,唾液分泌恢复正常,肌震颤消失，无大小便失禁现象，全血CHE活力为7.214U/ml一段时间后，家兔状态恢复完全，呼吸恢复平稳顺畅，瞳孔大小完全恢复,唾液分泌恢复正常,肌震颤消失，无大小便失禁现象，全血CHE活力为8.784U/ml2、解释药效家兔未做处理前状态活跃，呼吸平稳顺畅，瞳孔大小正常，唾液分泌正常，无大小便失禁现象，无肌张力及肌震颤，全血CHE活性正常，为9.211U/ml有机磷酸酯类物质敌百虫进入家兔体内后,其亲电子性的磷原子与乙酰胆碱酯酶的酯解部位丝氨酸羟基上具有亲核性的氧原子形成共价键结合,生成难以水解的磷酰化胆碱酯酶,使胆碱酯酶失去水解乙酰胆碱的能力,导致乙酰胆碱在体内堆积。
探究家兔的有机磷磷酸酯类中毒和解救实验
探究家兔的有机磷磷酸酯类中毒和解救实验我们是实验五组<一>实验基础是预习，在上课之前各个成员均在网路和实验指导书上提前预习。
充分的理论基础才可以在实验中减少错误的出现。
我们总结出：<二>上课前清点组成员，各个成员都在上课前按时到达，并且在实验室外穿上了白大褂。
进入实验室找到相应的位置坐下，等待老师的到来。
实验开始时，有了理论基础，我先开始分配好工作，各个成员都分配到了相应的任务，有条不絮的进行着。
<三>实验（一）实验项目：探究家兔的有机磷磷酸酯类中毒和解救实验（二）实验目的：1．观察实验动物在有机磷酸酯类中毒时的症状。
2．根据阿托品、解磷定对有机磷酸酯类中毒的解救效果，分析两药的解毒原理。
（三）实验主要设备和仪器、药品和用品1.实验动物：健康家兔，体重1.7Kg，雌雄不限。
2.主要仪器：5ml注射器2支（抽取阿托品和碘解磷定用）、1ml注射器1支（抽取有机磷农药敌百虫）、5号针头3个、三通管一个，胶布，婴儿秤1台、瞳孔测量尺一把、滤纸、绳子。
3.主要试剂：1％有机磷农药敌百虫、0.05％硫酸阿托品、2.5％碘解磷定。
（四）实验步骤：1.选用一只健康家兔，先量体重，进行观察记录正常家兔的瞳孔大小、唾液分泌、大小便失禁、肌张力以及肌震颤情况。
2.注射一定量的有机磷农药敌百虫后，进行观察记录家兔的瞳孔大小、唾液分泌、大小便失禁、肌张力以及肌震颤情况。
对比上述正常的指标以便具体了解中毒症状；3.当中毒症状明显时（出现肌颤），然后给家兔静脉注射一定量阿托品进行解救，并观察记录如上相同的指标，即对比了解阿托品的解救效果，过一定时间后，再给家兔注射一定量的碘解磷定，观察记录同样的指标，同样的对比了解碘解磷定的解救效果。
（由于我们是实验五组，我们先给家兔注射阿托品后注射碘解磷定。
）（五）实验结果：静脉注射1%的有机磷农药敌百虫后，家兔的瞳孔缩小，唾液分泌增加，有肌颤，大小便次数增加，显得很烦躁；给予阿托品解救后，中毒情况有所改善，瞳孔明显扩大，唾液分泌减少，仍有肌颤和兴奋的表现；给予碘解磷定后，肌震颤消失。
家兔有机磷农药中毒及解救
实验方法
（1）取家兔四只，分别编号甲、乙、丙、丁，称重，将四只家兔分别固定在兔固定箱，观察正常情况下家兔活动情况、呼吸、心率、瞳孔大小、唾液分泌、大小便情况、肌张力及震颤，分别记录之。
（2）四只家兔分别经一侧耳缘静脉注射15%敌百虫溶液1ml/kg，注毕，立即观察并记录上述各项生理特征的变化（若20分钟后仍未出现中毒症状，可补注1/3剂量）。
静脉注射解磷定后，家兔的上述情况即M样症状、N样症状、CNS症状得到部分缓解，特别是对肌肉震颤有明显效果，但对M样症状如活动情况、呼吸、心率、瞳孔、唾液分泌、大小便情况等影响较小，故须联合硫酸阿托品使用以改善状况。
静脉注射硫酸阿托品后，甲兔上述M样症状改善不明显，乙兔与丙兔症状均得到明显改善，且效果相当。丁兔注射3.0ml/kg硫酸阿托品后出现阿托品中毒症状，表现为昏迷、便秘、尿潴留、心律失常等情况。
预期困难
可能出现的问题及困难
（！）实验指标如呼吸、心率等较难观察。
（2）丁兔注射3.0ml/kg硫酸阿托品后仍未出现中毒症状。
解决预案
测量呼吸、心率必要时可开启生物信号处理系统。
若丁兔仍未中毒，可继续注射硫酸阿托品溶液，直至出现阿托品中毒症状，并记录中毒剂量。
实验预算
动物：家兔4只，雄雌不限，体重适中，使用时间共约2小时。
药品：15%敌百虫溶液20ml，2.5%解磷定溶液40ml，0.2%硫酸阿托Fra bibliotek溶液40ml。
器材：兔固定箱4个，5ml注射器两副，10ml注射器一副，
瞳孔测量尺一把，干棉球若干，酒精棉球若干，生物信号处理系统等。
联系人及联系方式:
观察项目
有机磷中毒解救联合用药不同阿托品剂量的解救结果
给 敌 百 虫 前
实验报告 有机磷酸酯类的中毒和解救完整
实验报告有机磷酸酯类的中毒和解救(可以直接使用，可编辑优秀版资料，欢迎下载）Experiment 11 Intoxication and Detoxication of Organophosphates[实验操作过程]1. 你所在实验小组的家兔体重 1.68 kg。
2．本次实验所用的药品和浓度分别为5%敌百虫、0.5%阿托品、25%氯解磷定。
3. 你所在实验小组，三个药物的给药剂量分别为 3.6ml 5%敌百虫、3.2ml 5%阿托品、0.84ml 25%氯解磷定。
4．本次实验中，静脉注射药物分别是5%敌百虫、0.5%阿托品。
肌肉注射的药物是25%氯解磷定。
5.填写出你所观察到的家兔中毒现象瞳孔缩小、唾液腺分泌增多、呼吸变缓、大便失禁、肌束震颤。
6．耳缘静脉注射0.5%阿托品，可明显缓解中毒时M样症状，肌肉注射25%氯解磷定明显缓解中毒时的N2症状。
7．你认为该实验能否顺利进行的关键环节是能否成功建立中毒动物模型。
8. 列出本实验使用的主要实验器械名称刻度尺、注射器、兔盒[实验结果]Tab.1 The Detoxication Effects of Aropin and PAM in RabbitNormal status afterdipterexafteratropineafterPAMGeneral status 良好中毒轻到中M样症状缓解N2症状缓解Respiration/min156次120次\\Pupils(mm)7 3.5\\ Saliva无流涎少量流涎无无Feces无大便失禁无无Urine无无无无Muscular Tension 正常肌张力降低未恢复恢复MuscularTwitching无肌束震颤肌束震颤震颤消失[回答下列问题]1.家兔敌百虫中毒时出现哪些症状,可能与人中毒时有哪些不同?家兔中毒：瞳孔缩小、流涎、呼吸变缓、大小便失禁、肌束震颤。
2.有机磷酸酯类中毒机制和解救药的作用机制是什么?中毒机制：有机磷酸酯类为难逆性胆碱酯酶抑制剂，能与胆碱酯酶共价结合，减少乙酰胆碱水解，使突触中乙酰胆碱含量增高，作用于M,N受体；轻度M样症状、中度M+N症状、重度为中枢抑制。
实验二 有机磷酸酯类中毒及解救
实验二有机磷酸酯类中毒及其解救【实验目的】1.观察家兔经胃给予敌百虫后出现的中毒症状。
2.观察M胆碱受体阻断药阿托品和胆碱酯酶
复活药碘解磷定对敌百虫中毒的治疗作用。
3.掌握家兔灌胃技术。
【实验材料】器材：1ml注射器、5ml注射器、10ml注射器、50ml注射器、开口器、导尿管、测瞳尺、婴儿秤、干棉球、烧杯、滤纸、计时器
药品：5%精制敌百虫溶液、0.2%硫酸阿托品溶液、2.5%碘解磷定溶液
动物：家兔1只
【实验方法】1.取禁食12h的家兔1只，称重编号，观察并记录下列指标：见表
2. 插管并灌胃：（可以不写：固定家兔，用
开口器固定，灌胃管湿润后插入，并检查是否进入食道，方法：将一端放入盛水的烧杯中，观察无气泡可。
）5%精制敌百虫溶液500mg/kg（按10.0ml/kg）灌胃，再抽取少量生理盐水将残留药物灌入胃中。
3. 严密观察家兔的中毒症状，并记录上述指标。
4. 中毒症状明显后，耳缘静脉注射硫酸阿托品2mg/kg（1ml/kg），观察各项指标变化情况。
5. 5min后耳缘静脉注射解磷定50mg/kg （2ml/kg），观察各项指标变化情况。
【实验结果】将实验结果整理记录于下表。
用敌百虫前用敌百虫后用阿托品后用碘解磷定后
一般情况正常
左眼8mm
右眼8mm
唾液分泌不明显
大小便正常
呼吸频率60次/分
肌震颤无
【思考题】1.有机磷中毒的症状？
2.解救有机磷酸酯类中毒的原则和方法？。
探究家兔的有机磷磷酸酯类中毒和解救实验
探究家兔的有机磷磷酸酯类中毒和解救实验周远利,罗进康,王大英,张楚渝,季雨(贵阳医学院临床2010级F班第二实验室第6组，贵州贵阳 550004)摘要：目的1．观察实验动物在有机磷酸酯类中毒时的症状。
2．根据阿托品、解磷定对有机磷酸酯类中毒的解救效果，分析两药的解毒原理。
方法选用一只健康家兔，先观察记录正常家兔的呼吸频率、瞳孔大小、唾液分泌、大小便失禁、肌张力以及肌震颤情况，注射一定量的敌敌畏后，对比上述正常的指标以便具体了解中毒症状；然后给家兔静脉注射一定量阿托品进行解救，并观察记录如上相同的指标，即对比了解阿托品的解救效果，过一定时间后，再给家兔注射一定量的碘解磷定，观察记录同样的指标，同样的对比了解碘解磷定的解救效果。
结果静脉注射1%的敌敌畏后，家兔的瞳孔缩小，唾液分泌增加，有肌颤，大小便次数增加，显得很烦躁；给予阿托品解救后，中毒情况有所改善，瞳孔明显扩大，唾液分泌减少，仍有肌颤和兴奋的表现；给予碘解磷定后，肌震颤消失。
结论：阿托品和碘解磷定对于有机磷酸酯类中毒的症状具有明显改善作用，可用于有机磷农药中毒的解救。
关键词敌敌畏；阿托品；碘解磷定敌敌畏（dichlorvos）又名DDVP，学名O,O-二甲基-O-(2,2-二氯乙烯基)磷酸酯，为难逆性抗胆碱酯酶药，是有机磷杀虫剂的一种，分子式C4H7Cl2O4P。
工业产品均为无色至浅棕色液体，纯品沸点74℃（在133.322Pa下）挥发性大，室温下在水中溶解度1%，煤油中溶解度2%～3%，能溶于有机溶剂，易水解，遇碱分解更快。
毒性大，急性毒性LD50值：对大白鼠经口为56～80mg/kg，经皮为75～210mg/kg。
阿托品（atropine）是从植物颠茄、洋金花或莨菪等提出的生物碱，也可人工合成。
天然存在于植物中的左旋莨菪碱很不稳定；在提取过程中经化学处理得到稳定的消旋莨菪碱，即阿托品，其硫酸盐为无色结晶或白色结晶性粉末，易溶于水，为阻断M胆碱受体的抗胆碱药，能解除平滑肌的痉挛(包括解除血管痉挛，改善微血管循环）；抑制腺体分泌；解除迷走神经对心脏的抑制，使心跳加快；散大瞳孔，使眼压升高；兴奋呼吸中枢。
有机磷酸酯类农药中毒及解救实验报告
有机磷酸酯类农药中毒及解救实验报告一、实验目的1、观察有机磷酸酯类农药中毒的症状表现。
2、验证阿托品和解磷定对有机磷酸酯类农药中毒的解救效果。
3、熟悉有机磷酸酯类农药中毒及解救的作用机制。
二、实验原理有机磷酸酯类农药可与胆碱酯酶（ChE）牢固结合，形成难以水解的磷酰化胆碱酯酶，使 ChE 失去水解乙酰胆碱（ACh）的能力，导致ACh 在体内大量积聚，引起一系列中毒症状。
阿托品为 M 胆碱受体拮抗剂，能迅速解除 M 样症状；解磷定能使磷酰化胆碱酯酶恢复活性，从而解除有机磷酸酯类农药中毒。
三、实验材料1、实验动物：健康家兔_____只，体重 20 25 kg。
2、药品与试剂：1%敌百虫溶液、005%硫酸阿托品溶液、25%碘解磷定溶液。
3、实验器材：兔固定箱、注射器（1ml、5ml、10ml）、量瞳尺、听诊器。
四、实验方法1、家兔称重后，放入兔固定箱中。
2、观察并记录家兔的正常活动情况、呼吸频率、瞳孔大小、唾液分泌情况、大小便情况及肌张力等。
3、于耳缘静脉缓慢注射 1%敌百虫溶液 2 ml/kg，密切观察家兔中毒症状的出现及发展。
4、当家兔出现明显中毒症状（如瞳孔缩小、流涎、大小便失禁、呼吸困难、肌肉震颤等）时，立即静脉注射 005%硫酸阿托品溶液 1 ml/kg，观察中毒症状的缓解情况。
5、 5 10 分钟后，再静脉注射 25%碘解磷定溶液 20 mg/kg，继续观察家兔中毒症状的变化。
五、实验结果1、注射敌百虫溶液后，家兔在约 5 10 分钟开始出现中毒症状。
表现为瞳孔明显缩小，直径约为 1 2 mm；唾液分泌显著增加，口边有大量泡沫状唾液流出；呼吸频率加快，伴有呼吸困难；大小便失禁；肌肉震颤，肌张力增加。
2、注射阿托品溶液后，约 2 3 分钟，家兔的瞳孔开始扩大，逐渐恢复至正常大小；唾液分泌减少；呼吸困难症状减轻；但肌肉震颤和肌张力增加等症状无明显改善。
3、注射碘解磷定溶液后，约 10 15 分钟，家兔的肌肉震颤逐渐减轻，肌张力恢复正常，其他中毒症状进一步缓解。
有机磷酸酯类农药中毒模型复制及解救
有机磷酸酯类农药中毒模型复制及解救【摘要】有机磷酸酯类是一种难逆性抗AChE药，易引起中毒。
有机磷酸酯类作用机制为可与AChE牢固结合，形成难以水解的磷酰化AChE，使AChE失去水解ACh 的能力，造成体内ACh大量积聚而引起一系列中毒症状。
若不及时抢救，AChE可在几分钟或几小时内就“老化”。
实验中复制家兔有机磷农药中毒模型，出现症状后用阿托品及胆碱酯酶复活剂抢救。
阿托品是治疗急性有机磷酸酯类中毒的特异性、高效能解毒药物。
能迅速对抗体内ACh的毒蕈碱样作用。
AChE复活药是一类能使被有机磷酸酯类抑制的AChE恢复活性的药物。
常用药物有碘解磷定、氯解磷定和双复磷。
同时观察家兔的血压及呼吸变化，并探讨其机制。
【关键词】有机磷酸酯类药中毒胆碱酯酶阿托品胆碱酯酶复活剂有机磷酸酯类农药，常见的有敌百虫、乐果、敌敌畏等，其主要作为农业和环境卫生杀虫剂，其杀虫效力高，对人畜的毒性大，可通过皮肤、呼吸道引起中毒。
目前常见的为口服有机磷农药引起的中毒。
有机磷农药中毒的途径可通过皮肤进入人体。
在喷洒过程的气雾可由呼吸道吸入；误服者由消化道吸收。
其潜伏期也因中毒途径不同而有所差异。
经口服者约5～20分钟早期出现恶心、呕吐，以后进入昏迷状态；经呼吸道者，潜伏期约30分钟，吸入后产生呼吸道刺激症状。
呼吸困难，视力模糊，而后出现全身症状；经皮肤吸收者潜伏期最长约2～6小时，吸收后有头晕、烦躁、出汗、肌张力减低及共济失调等症状。
中国是个农业人口占90%以上的大国，每年各地皆发生很多起农药中毒事件。
小儿对有机磷毒性较成人敏感，稍有疏忽可造成中毒。
有机磷中毒是主要的小儿中毒之一，中毒年龄小至新生儿，并可在任何年龄的小儿中发生。
世界卫生组织（WHO）文件曾认为杀虫剂中毒已成为一个全球性的问题，尤其在发展中国家。
一、实验过程1、实验材料：实验动物：家兔。
2、药品：1.5%戊巴比妥钠 0.5%敌敌畏 0.1%阿托品 2.5% PAM。
有机磷酸酯类中毒及解救
时间
一般
状态
给药前
给敌百虫
给阿托品
呼吸 心率 瞳孔 次/min 次/min 大小
唾液 分泌
大项】 1. 敌百虫属于剧毒杀虫剂，且可从皮肤吸收，如与手等接触后，应立即用清水清洗。 2. 给家兔敌百虫后，15min 仍未出现中毒症状，可再追加 1/3 剂量的敌百虫溶液。
2．将甲、乙、丙、丁、戊、五只家兔分别放于兔固定箱内，甲兔由耳缘静脉给予生 理盐水（1ml/kg）；乙、丙、丁、戊兔分别由耳缘静脉缓慢注入敌百虫 1ml/kg，给药后密切 观察上述指标的变化并记录。待 M 样、N 样中毒表现均较明显时，乙兔不予解救药，使其中 毒症状充分表现出来，如果死亡，分析死亡原因；丙兔耳缘静脉注射阿托品（2ml/kg），丁 兔耳缘静脉缓慢注射（PAM 4ml/kg），戊兔先给予阿托品（2ml/kg），而后给予（PAM 4ml/kg）， 观察中毒症状有何变化，阿托品和解磷定分别改善了哪些症状？
有机磷酸酯类中毒及解救
【目的和原理】 观察有机磷酸酯类中毒的症状，理解解救药阿托品、解磷定的解救作用及机制。掌握
家兔耳缘静脉注射方法。 有机磷酸酯类通过抑制胆碱酯酶活性，使乙酰胆碱在体内堆积，产生中毒症状。抗胆碱
药阿托品能解除有机磷酸酯类中毒的 M 样症状，而解磷定可复活胆碱酯酶，恢复其水解乙酰 胆碱的能力，对 M 及 N 样症状均有效，以缓解骨骼肌震颤的效果最快，两药合用可提高解 救效果。 【实验对象】 家兔，体重 2.5～3.0kg。 【实验器材和药品】 兔固定箱、测瞳尺、听诊器、注射器（5ml、10ml、20ml）、兔耳夹、 脱脂棉球、台秤。10%敌百虫(depterex)、0.05%硫酸阿托品（atropine sulfate）、2.5%解 磷定（Pyraloxime methoiodide, PAM）、生理盐水。 【实验步骤和观察项目】
实验2：有机磷中毒及解救
有机磷药物的中毒及解救
[实验目的] 观察有机
磷药物中毒的症状。根据阿 托品和解磷定对有机磷中毒 的解毒效果初步分析两药的 解毒原理。
家兔、 兔盒、注射器、头皮静脉 针、游标卡尺、5%敌百虫 溶液、0.2%硫 酸阿托品、 2.5%解磷定溶液。
[实验材料]
[实验方法] 1、取家兔1只，称 重，观察下列指标：瞳孔大小 （用游标卡尺）、唾液分泌量、 呼吸（频率、幅度、节律是否 均匀）、肌张力 及有无肌震颤等， 分别纪录之。
2、找到耳缘静 脉，插入与注射器 相连的头皮静脉针 头。
按120mg/kg(5%溶液2.4ml/kg) 剂量iv敌百虫溶液，注意观察各 项指标并记录之。根据中毒症状 ，iv硫酸阿托品2mg/kg(0.2%溶液 1ml/kg)或iv解磷定50mg/kg(2.5% 溶液2.0ml/kg)。每隔5酯类的中毒机制及阿托品和 解磷定的解毒原理。
3、在实验结束时，给家 兔分别补注解磷定或阿托品。
[注意事项] 1、本实验是为分析
阿托品和解磷定的解毒机制而设计。 在临床实际应用中应两药同时应用。 2、注意阿托品和解磷定的剂量， 注射过量亦可致死。 3、在不iv给药时应连续、 缓慢地推注生理盐水，以免 形成血栓。
[报告要点]
体重 观察阶段 呼吸 瞳孔 唾液 肌张力 (kg) 情况 大小 分泌 肌震颤 给药前 iv敌百虫后 给阿托品或 解磷定后
有机磷农药中毒及解救
有机磷农药中毒及解救实验目的：掌握家兔有机磷酯类的中毒症状假托品和解磷定的解救作用。
分析有机磷酯类中毒的解救措施、解毒原理及特点。
实验原理：机体在正常情况下，神经末梢释放ACh可迅速被AChE水解，从而避免了ACh在体内的堆积。
当有机磷酯类进入机体后，可与AChE不可逆性结合，生成难以水解磷酰化胆碱酯酶，使AChE失去水解ACh的能力，造成ACh在体内的大量堆积，从而引起一系列中毒症状。
有机磷中毒症状为出现M样症状（瞳孔缩小，视力模糊，流诞，出汗，呼吸困难，呕吐，大小便失禁，血压下降，心动过缓）、N样症状（肌肉颤动过速，血压升高）、中枢样症状抗胆碱酯酶药阿托品能解除有机磷酸酯类中毒的M样症状，对N样中毒症状肌肉震颤没有作用，而碘解磷定可复活胆碱酯酶，恢复其水解乙酰胆碱的能力，已对骨骼肌震颤的效果产生最快，两药合用可提高解毒效果。
在药理学实验中，影响实验结果的因素很多，有些因素是可以控制的，有些则是难以控制的，为了减少多因素及难以控制因素的影响，试验中应同时设立对照组，用对照组和实验组间的比较来消除各种无关因素的影响，使实验结果误差尽可能地缩小，达到正确评价药物效果的目的。
实验对象：家兔实验药品：0.1%阿托品、5%敌百虫、1%肝素、2.5%碘解磷定实验器材：注射器（5ml、10ml、20ml)、测瞳孔尺、刀片、滤纸、镊子、导尿管、磅秤实验步骤：（1）每组抓取家兔一只，称重（kg)，先观察动物一般活动情况，测量每分钟呼吸次数；用直尺测量瞳孔直径；用手触摸兔背或腹部是否有肌肉震颤；用滤纸轻擦兔嘴角看是否有唾液分泌；是否有大小便；（2）用5%的敌百虫溶液（10ml/kg)，观察家兔的瞳孔直径、肌震颤、唾液分泌和大小便情况的变化以判断家兔的中毒症状。
（3）在观察过程中准备好中毒解救药品，带中毒症状明显后（特别是瞳孔极小时）于耳静脉注入0.15%阿托品（1.5ml/kg)（4）观察注射阿托品后有哪些症状可消除？什么症状不能被消除？5min后再于耳缘静脉注射2.5%碘解磷定（1.8ml/kg)观察能否有消除或缓解哪些中毒症状，分析其作用。
药理抗凝及有机磷酸酯类中毒及解救
阿托品：主要对抗毒蕈碱样（M样）症状
解磷定：主要对抗烟碱样（N样）症状。
毒蕈碱样中毒症状: 表现为体内多种腺体分泌增加和平滑肌收缩所产
生的症状和体征,如多汗，流涎，流泪，鼻溢，和 肺部干湿啰音，呼吸困难。恶心呕吐，腹痛腹泻， 肠鸣音亢进，尿频尿急，大小便失禁。瞳孔缩小， 视力模糊，抑制血管平滑肌，血压下降。 烟碱样症状
发挥抗凝作用。
香豆素类是维生素K拮抗剂，阻止维生素K的反复利用， 影响含有谷氨酸残基的凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ的羧化作用， 使这些因子停留于无凝血活性的前体阶段，从而影响凝血过 程。对已形成的上述因子无抑制作用，因此抗凝作用慢而持 久。
枸橼酸钠
枸橼酸钠是一种体外抗凝剂，多用于血库。 枸椽酸根离子与血中钙离子生成难解离的可溶性络合物枸椽酸钙，此 络合物易溶于水但不易解离，使血中钙离子减少，凝血过程受到抑制， 从而阻止血液凝固。钙为凝血过程中必需物质，可促进凝血因子Ⅲ， 凝血酶和纤维蛋白的形成，以及激活血小板的释放反应等。 血中钙离子
注意事项
1、取血时动作要快，以防凝血。
2、由动物取血至试管放入恒温水浴的时间不得 超过3min。 3、各种药物取量要准确，并控制好水浴温度。 4、凝血时间：指以试管轻轻倒转血液不往下流 为标准。
结果
观察凝血现象 试管 药物 恒温水浴 加钙后
凝血时间 （min）
1号
2号 3号 4号
生理盐水
肝素 双香豆素 枸橼酸钠
中毒： 腺体 平滑肌 瞳孔 呼吸 大小便 中枢
解救后： 甲组：阿托品 乙组：解磷定
敌百虫：有机磷酸酯类，可与AChE牢固结合，从而抑制 了该酶的活性。 中毒表现：有机磷酸酯类中毒时，体内的AChE活性被抑 制，胆碱能神经末梢正常释放的递质Ach不能被有效的水 解，从而导致Ach在体内大量的蓄积。由于Ach作用极其 广泛，故中毒症状表现也是多样化的，主要为毒蕈碱样 （M样）和烟碱样（N样）症状。
有机磷酸酯类中毒及解救
实验一有机磷酸酯类中毒及解救【目的】了解有机磷酸酯类中毒的症状，观察阿托品和解磷定对中毒的解救效果。
【原理】敌敌畏是一种有机磷酸酯类的剧毒农药，通过抑制胆碱酯酶，使体内乙酰胆碱大量堆积，产生M样和N样症状。
阿托品和解磷定可分别解除M样症状和恢复胆碱酶酶活性，缓解中毒症状。
【材料】1. 动物：家兔。
2. 药品：1% 敌敌畏溶液（DDV solution）；0.1% 硫酸阿托品溶液（atropine sulfate solution）；25% 磷酸氯解磷定溶液（pralidoxime chloride solution）。
3. 器材：兔固定箱，注射器，大鼠灌胃器，婴儿秤。
【方法】1. 每组取家兔1只，称重编号，观察并记录其活动情况、呼吸、瞳孔大小、唾液分泌、大小便、肌张力及有无肌震颤等生理指标。
2. 用大鼠灌胃器从家兔嘴角滴入DDV溶液1ml/kg，密切观察并记录上述各项生理指标的变化。
3. 出现明显中毒症状（家兔瞳孔明显缩小、呼吸浅而快、骨骼肌震颤等）后，立即静脉注射硫酸阿托品溶液2ml/kg，5min后静脉注射氯解磷定溶液0.3ml/kg，给药过程中和给药后密切观察各项生理指标的变化。
【结果整理】将实验结果填入下表。
表：DDV的中毒症状及解救效果观察时间活动情况呼吸情况瞳孔大小唾液分泌大小便情况肌张力大小肌震颤程度给DDV前给DDV后给阿托品后给解磷定后【注意事项】1. DDV可通过皮肤吸收，接触后应立即用清水冲洗干净。
2. 给解救药时动作要快，否则动物会因抢救不及时而死亡。
实验二噻吗洛尔对小鼠耐常压缺氧能力的作用【实验目的】观察噻吗洛尔提高心肌耐缺氧能力的作用。
【实验原理】缺氧是临床上极为常见的病理现象，严重者可危及病人生命。
机体对缺氧的耐受力取决于机体的代谢耗氧率和代偿能力。
噻吗洛尔通过阻断β受体而使心脏活动减弱，物质代谢减慢，使组织器官的耗氧量减少，因而可提高机体对缺氧的耐受性，延长机体组织在缺氧环境中的存活时间。
有机磷酸酯类农药解救
有机磷酸酯类农药中毒及解救[摘要] 目的：观察有机磷酸酯类农药中毒的症状和中毒机理；了解阿托品和解磷定的药理作用机制；掌握有机磷酸酯类农药中毒的解救方法。
方法：健康成年家兔8只，待给家兔麻醉、气管插管、颈总动脉插管后，耳缘静脉注射0.5%敌敌畏（1ml/kg），待出现中毒症状时，开始抢救（分三组）：（1）甲组：0.1%阿托品（1ml/kg）（2）乙组2.5%碘解磷定（PAM）（2ml/kg）（3）丙组：阿托品+ 碘解磷定（PAM），观察比较每组动物中毒症状消失情况，并记录。
观察项目血压、心电，呼吸频率，瞳孔、口鼻分泌物、有无肌颤等。
结果：家兔被注射0.1%阿托品（1ml/kg）后，会有中毒症状，心率减慢、血压下降、瞳孔缩小、呼吸困难（急促）、大小便失禁、有口鼻分泌物、肌颤【1】；抢救甲组对部分中毒症状有解救作用，但仍有肌颤；抢救乙组对中毒症状有明显解救作用，特别是对于缓解肌肉震颤效果好；而抢救丙组综合甲乙二组，对中毒症状有更好的解救作用。
[关键词] 有机磷酸酯类中毒；有机磷酸酯类解救；阿托品；碘解磷定PAM（前言）有机磷酸酯类农药，常见的有敌百虫、乐果、敌敌畏等，其主要作为农业和环境卫生杀虫剂，其杀虫效力高，但对人畜的毒性大，可通过皮肤、呼吸道引起中毒。
目前常见的为口服有机磷农药引起的中毒【2】，其机制大体为：人体的胆碱能神经包括运动神经、交感神经节前纤维和部分节后纤维以及副交感神经节后纤维，这些神经受刺激后，在其末梢与细胞连接处释放乙酰胆碱支配器官的运动。
在生理情况下释放出的乙酰胆碱在胆碱酯酶的作用下迅速被水解而失去活力，当有机磷进入机体后与胆碱酯酶结合使其失去水解乙酰胆碱的能力，造成体内大量乙酰胆碱蓄积，从而引起生理功能紊乱。
有机磷酸酯类农药中毒症状可分为急性中毒和慢性中毒：1、急性中毒（1）毒蕈碱样症状（M样症状）:主要是副交感神经末梢兴奋所致的平滑肌痉挛和腺体分泌增加。
临床表现为恶心、呕吐、腹痛、多汗、流泪、流涕、流涎、腹泻、尿频、大小便失禁、心跳减慢和瞳孔缩小、支气管痉挛和分泌物增加、咳嗽、气急，严重患者出现肺水肿。
机能学实验_有机磷中毒及解救
有机磷农药中毒及其解救【实验目的】1．学习家兔灌胃方法。
2．观察有机磷农药中毒症状及用阿托品（Atropine ）和碘解磷定(PAM) 解救的效果。
3．学习难逆性抗胆碱酯酶药( 有机磷酸酯类)及胆碱酯酶复活药。
【实验原理】有机磷农药( 有机磷酸酯类) 为持久性抗胆碱酯酶药，主要用作农业杀虫剂和化学战争毒剂。
进入体内后能抑制胆碱酯酶活性，造成Ach 在体内大量堆积而产生一系列中毒症状( 包括M样、N样及CNS症状)。
阿托品为M受体阻断药，能迅速解除M 样症状及部分中枢症状。
碘解磷定为胆碱酯酶复活药，可恢复胆碱酯酶水解Ach 的活性，并可直接与游离的有机磷农药结合成无毒的物质，从尿排出，从而解除有机磷酸酯类中毒症状。
【实验对象】：家兔【实验器材和药品】：家兔开口器一个、胃管一个、1ml、5ml、30ml 注射器各一支、5 号针头3 个、250ml 烧杯1 个、婴儿秤 1 台、瞳孔测量尺一把、滤纸、10％敌百虫、2.5 ％碘解磷定(PAM)、0.25 ％阿托品(Atropine) 。
【实验步骤和观察项目】：( 一) 动物准备：取家兔( 禁食24 小时) ，称重。
( 二) 观察指标：呼吸瞳孔唾液肌震颤肌张力大、小便。
1．按上述观察指标，观察和记录家兔的正常活动情况；2．10％敌百虫5ml/kg 给家兔灌胃；3．观察并记录上述指标的变化，及时发现中毒症状；4．待一系列症状出现后，特别是瞳孔明显缩小时，立即耳缘静脉注射0.25 ％Atropine 5ml/kg, 观察中毒症状缓解情况，5min 后再耳缘静脉注射 2.5 ％PAM 5ml/kg, 观察中毒症状消除情况。
【实验结果】呼吸瞳孔唾液肌震颤肌张力大小便正常正常正常正常正常正常无减慢缩小有口有，轻无现象水流微震肌紧张敌百虫出颤，但下降不明显加快变大不再无肌紧张无现象但小但小留涎转好Atropine于正于正常常恢复恢复正常无肌张力无现象PAM正常正常恢复正常【分析与讨论】1. 用敌百虫给家兔灌胃后，家兔未出现大小便排泄症状，可能是由于家兔之前未进食物的原因。
实验十有机磷酸酯类中毒和解救【目的】观察敌百虫的中毒现象和阿托品
实验十有机磷酸酯类中毒和解救【目的】观察敌百虫的中毒现
象和阿托品
实验十有机磷酸酯类中毒和解救
【目的】观察敌百虫的中毒现象和阿托品、碘解磷定的解毒作用及特点。
【用品】婴儿称、量瞳尺、5ml注射器、5%敌百虫、2.5%碘解磷定溶液、
01%阿托品溶液、家兔。
【步骤】
1、取兔一只、称重、观察正常活动（瞳孔大小、呼吸情况、唾液分泌、肌紧张度、大小便次数及粪便形态等）。
2、给药：
中毒药 5% 敌百虫溶液2.0ml/kg耳静脉注射,观察上述各项指标的变化情况，待中毒症状明显时,立即抢救。
解毒药A、0.1% 硫酸阿托品1.0ml/kg耳静脉注射，观察上述各项中毒症状哪些被对抗，还有哪些症状未被对抗。
B、2.5%碘解磷定溶液2.0ml/kg耳静脉注射，观察上述剩余症状变化情况。
3、观察：比较两药的作用各有何特点。
4、结果：
兔体重药物和用量瞳孔呼吸唾液大小便肌紧张度活动情况用药前
5%敌百虫
0.1%阿托品
2.5%碘解磷定检测：根据实验结果，初步分折敌百虫的中毒原理和阿托品、碘解磷定的解毒特点。
【医学ppt课件】 有机磷酸酯类中毒及其解救
实验器材和用品
器械 兔手术台 测瞳尺 测唾液滤纸 5ml注射器
实验器材和用品
药品 4％敌百虫溶液 0.1％硫酸阿托
品 2.5％碘解磷定
实验步骤和方法
甲兔从耳缘静脉注射4％敌百虫3.5 ml/kg，待 中毒症状明显时，立即从耳缘静脉注射0.1％硫 酸阿托品1 ml/kg，8～10 min后，再耳缘静脉 注射2.5％碘解磷定2ml/kg，观察症状改变
AchE >50% >30% <30%
0
中毒的抢救原则
1、迅速清除毒物 2、维持呼吸循环功能 3、及早使用特效解毒药
M受体阻断药 胆碱酯酶复活药
药物治疗方案
轻度中毒： M受体阻断药（阿托品） 中、重度中毒：胆碱酯酶复活药（碘解磷定）
M受体阻断药（阿托品）
阿托品的解毒机制
阻断M受体
对抗Ach的M样症状
检测题
3、有机磷酸酯类中毒的解救药物有： 抗胆碱药（阿托品）、胆碱酯酶复活药（碘解磷定）
4、抗胆碱药阿托品能拮抗 M受体的作用，解除有 机磷酸酯类中毒M样症状，对 N样 症状无效；胆 碱酯酶复活药碘解磷定能使 AchE 活力恢复，迅 速缓解 N样 症状 ，对 M样 症状改善不明显。
乙兔按甲兔方法引起敌百虫中毒，然后从耳缘 静脉注射2.5％碘解磷定2ml/kg，约8～10 min 后，再耳缘静脉注射0.1％硫酸阿托品1 ml/kg， 观察症状改变
指 实验 标 项目
给药 前 甲 给敌百虫后 兔 给阿托品后
给解磷定后
瞳孔 呼吸 唾液分泌 大小便 肌张力
给药 前 乙
给敌百虫后 给解磷定后 兔 给阿托品后
【医学ppt课件】 有机磷酸酯类中毒及其解救
实验目的
药理抗凝和有机磷酸酯类中毒及解救
肝素
肝素主要灭活多种凝血因子，故在体外同样可
以抗凝。其与抗凝血酶Ⅲ（AT-Ⅲ）结合 ,其复 合物抑制凝血系统中除Ⅶ因子外的所有丝氨酸
蛋白酶，加速凝血酶的失活，从而增强了抗凝
血酶Ⅲ活性，体内外迅速抗凝。 肝素+（AT-Ⅲ） 肝素AT-Ⅲ复合物 灭活凝血因子 抗凝
双香豆素
双香豆素是一种体内抗凝剂，通过口服参与体内代谢才
中毒： 腺体 平滑肌 瞳孔 呼吸 大小便 中枢
解救后： 甲组：阿托品 乙组：解磷定
敌百虫：有机磷酸酯类，可与AChE牢固结合，从而抑制 了该酶的活性。 中毒表现：有机磷酸酯类中毒时，体内的AChE活性被抑 制，胆碱能神经末梢正常释放的递质Ach不能被有效的水 解，从而导致Ach在体内大量的蓄积。由于Ach作用极其 广泛，故中毒症状表现也是多样化的，主要为毒蕈碱样 （M样）和烟碱样（N样）症状。
主要是破坏兴奋和抑制的平衡，引起中枢神经调 节功能紊乱，大量积聚主要表现为中枢神经系统
抑制，可引起昏迷等症状。
发挥抗凝作用。
香豆素类是维生素K拮抗剂，阻止维生素K的反复利用， 影响含有谷氨酸残基的凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ的羧化作用， 使这些因子停留于无凝血活性的前体阶段，从而影响凝血过 程。对已形成的上述因子无抑制作用，因此抗凝作用慢而持 久。
枸橼酸钠
枸橼酸钠是一种体外抗凝剂，多用于血库。 枸椽酸根离子与血中钙离子生成难解离的可溶性络合物枸椽酸钙，此 络合物易溶于水但不易解离，使血中钙离子减少，凝血过程受到抑制， 从而阻止血液凝固。钙为凝血过程中必需物质，可促进凝血因子Ⅲ， 凝血酶和纤维蛋白的形成，以及激活血小板的释放反应等。 血中钙离子
枸椽酸根离子
枸
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
胆碱+ 乙酸
基本原理
•抢救原则 阿托品＋碘解磷定
阿托品化缓解症状
联合用药
尽快复活胆碱酯酶
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
•死亡原因
呼吸抑制 呼吸衰竭 心血管功能衰竭
•阿托品 （M胆碱受体阻断药）
缓解支气管痉挛 减少腺体分泌 改善呼吸状况 解除部分中枢神经系统的中毒症状
•碘解磷定 （胆碱酯酶复活药）
复活胆碱酯酶 讯速控制肌束颤动
生理科学实验
第七课：
有机磷酸酯类中毒及其解救 红细胞渗透性和化学性溶血 实验
有机磷酸酯类 中毒及其解救
实验目的
•掌握有机磷酸酯类农药中毒 症状和中毒原理 •掌握解救药的选择、作用原理、 解救效果并结合临床应用
实验原理
实验步骤
注意事项 实验后处理
乙酰胆碱
中枢和外周神经系统的内源性神经递质 易被胆碱酯酶水解
•分别加入下列溶液2ml/管，混匀 11号 0.9%NaCl 12号 氯仿 13号 0.1mol/L HCl 14号 0.1mol/L NaOH •静置30min后观察试管内颜色、透明度和溶血 情况
注意事项
• 向试管中滴加红细胞混悬液时要靠 近液面，轻轻滴入，以免冲击力太 大使红细胞破损，造成溶血假象。
实验观察
•红细胞渗透性溶血：10管 红细胞混悬液处于低渗溶液中 •红细胞化学性溶血：4管 红细胞混悬液处于有机溶剂、 酸、碱中
制备红细胞悬液
• 取家兔动脉血2ml，离心5min, 1500r/ min • 吸弃上清液，加生理盐水混匀离心洗涤2次 • 得洗涤后红细胞 • 用生理盐水配成30%和3%红细胞悬液 (兔红细胞比容0.4) 配30% （2×0.4） ÷0.3 = 2.7ml 配3%: 取30%的溶液稀释10倍
支气管平滑肌收缩 呼 吸 困 难 消化腺分泌增加 口 吐 白 沫 胃肠道泌尿道平滑肌收缩 大 小 便 失 禁 汗腺分泌增加 大 汗 淋 漓 瞳孔括约肌的收缩 针 尖 样 瞳 孔
磷酰化 AchE
AchE
N-R
CNS
Ach
水 解
骨骼肌纤维震颤 骨骼肌收缩 强 直 性 痉 挛
先兴奋不安，继之惊厥、 后而转为抑制，出现意识 模糊昏迷等
、血压
•骨骼肌: 广泛、肌震颤(呼吸肌麻痹而死亡)
中枢症状
兴奋、不安、全身肌肉抽搐→抑制→昏迷 心血管中枢(-)、呼吸中枢(-)→死亡
实验后处理
结果：P123表9-8
讨论：列两表
比较不同用药顺序解救效果差异
结论：有效抢救需联合用药
红细胞渗透性和 化学性溶血实验
实验目的
1.掌握测定红细胞渗透脆性及引 起红细胞溶解的实验方法 2.熟悉红细胞混悬液的制备方 法和溶血现象的判断
基本原理
红细胞膜具一定伸展性和弹性，对低渗 溶液具一定抵抗力 •红细胞渗透脆性 红细胞于低渗溶液中破裂、解体特性 •渗透抵抗力 •表示方法： 最小抵抗力（最大脆性）—刚开始溶血 最大抵抗力（最小脆性）—刚完全溶血
表1 有机磷中毒及其抢救试验结果
处理 给药前 甲 给敌百虫后 兔 给阿托品后 给解磷定后 瞳孔 唾液 大小便 骨骼肌活动
给药前 乙 给敌百虫后 兔 给解磷定后 给阿托品后
注意事项
1. 测量瞳孔时应注意光线强弱对瞳孔 大小的影响,实验前后光源要一致， 同一方向同一只眼。 2.敌百虫溶液有较强的刺激性，静脉 注射时要避免药物外漏。 3.事先准备好抢救工作，中毒症状明 显后立即解救。
渗透性溶血实验
•按表6-9滴入30%红细胞悬液2滴，轻轻摇匀
1
10
10支不同浓度NaCl溶液试管（低 高）
静置30分钟
溶血判断
•完全溶血
•部分溶血 •不溶血
管内液体完全红色透明
上层红色透明 下层红色不透明(混浊) 上层浅黄色或无色透明 下层红色不透明
化学性溶血实验
•4支试管内各加入3%红细胞混悬液1ml
• 滴加红细胞混悬液后要轻轻摇匀， 切勿剧烈震荡。静置一段时间后在 光线明亮处观察。
实验后处理
结果： P102表6-10 和 P103表6-11
讨论：各因素对红细胞膜的影响及原理
结论：渗透性溶血 化学性溶血
预习
•氯丙嗪抗激怒(安定)实验
•药物半数有效量(ED50 )和 半数致死量(LD50)的测定
释放部位： 神经突触和神经效应器接头部位
作用： 激动M胆碱受体和N胆碱受体
基本原理
•有机磷酸酯类中毒原理及症状
有机磷酸酯类＋胆碱酯酶
→磷酰化胆碱酯酶
乙酰胆碱积聚
(难水解，无活性，易老化)
M样、N样、中枢神经系统中毒症状
解磷 磷酰 化 定碘
碘解 磷定
心脏活动的抑制 心率减慢、血压下降
阿托品
M-R
有 机 磷
实验步骤
1. 家兔称重, 观察: 正常活动、呼吸、瞳孔大小(注意光线条件一致)、 唾液分泌、大小便、肌张力及有无肌震颤
2. 3.5%敌百虫3ml/kg制备有机磷中毒模型 观察: 瞳孔、唾液分泌、大小便、骨骼肌活动 3. 解救，观察解除的症状 1、3、5组：先阿托品，10min后解磷定 2、4、6组：先解磷定，10min后阿托品
基本原理
M样症状
•瞳孔 •腺体 •呼吸系统 瞳孔括约肌收缩 瞳孔缩小 分泌 流涎、出汗 支气管平滑肌收缩,腺体分泌 呼吸困难甚至肺水肿 平滑肌收缩 恶心、呕吐、
腹痛、腹泻
•胃肠道
•泌尿系统 膀胱逼尿肌收缩 •心血管系统 M样作用 同时有N样作用
小便失禁 心率 血压 血压
基本原理
N样症状
•神经节症状: 胃肠、腺体、眼方面同M样症状 心血管 心缩力