家兔有机磷酸酯类中毒及其解救
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生理科学实验
第七课：
有机磷酸酯类中毒及其解救 红细胞渗透性和化学性溶血 实验
有机磷酸酯类 中毒及其解救
实验目的
•掌握有机磷酸酯类农药中毒 症状和中毒原理 •掌握解救药的选择、作用原理、 解救效果并结合临床应用
实验原理
实验步骤
注意事项 实验后处理
乙酰胆碱
中枢和外周神经系统的内源性神经递质 易被胆碱酯酶水解
释放部位： 神经突触和神经效应器接头部位
作用： 激动M胆碱受体和N胆碱受体
基本原理
•有机磷酸酯类中毒原理及症状
有机磷酸酯类＋胆碱酯酶
→磷酰化胆碱酯酶
乙酰胆碱积聚
(难水解，无活性，易老化)
M样、N样、中枢神经系统中毒症状
解磷 磷酰 化 定碘
碘解 磷定
心脏活动的抑制 心率减慢、血压下降
阿托品
M-R
有 机 磷
实验后处理
结果：P123表9-8
讨论：列两表
比较不同用药顺序解救效果差异
结论：有效抢救需联合用药
红细胞渗透性和 化学性溶血实验
实验目的
1.掌握测定红细胞渗透脆性及引 起红细胞溶解的实验方法 2.熟悉红细胞混悬液的制备方 法和溶血现象的判断
基本原理
红细胞膜具一定伸展性和弹性，对低渗 溶液具一定抵抗力 •红细胞渗透脆性 红细胞于低渗溶液中破裂、解体特性 •渗透抵抗力 •表示方法： 最小抵抗力（最大脆性）—刚开始溶血 最大抵抗力（最小脆性）—刚完全溶血
表1 有机磷中毒及其抢救试验结果
处理 给药前 甲 给敌百虫后 兔 给阿托品后 给解磷定后 瞳孔 唾液 大小便 骨骼肌活动
给药前 乙 给敌百虫后 兔 给解磷定后 给阿托品后
注意事项
1. 测量瞳孔时应注意光线强弱对瞳孔 大小的影响,实验前后光源要一致， 同一方向同一只眼。 2.敌百虫溶液有较强的刺激性，静脉 注射时要避免药物外漏。 3.事先准备好抢救工作，中毒症状明 显后立即解救。
•分别加入下列溶液2ml/管，混匀 11号 0.9%NaCl 12号 氯仿 13号 0.1mol/L HCl 14号 0.1mol/L NaOH •静置30min后观察试管内颜色、透明度和溶血 情况
注意事项
• 向试管中滴加红细胞混悬液时要靠 近液面，轻轻滴入，以免冲击力太 大使红细胞破损，造成溶血假象。
实验步骤
1. 家兔称重, 观察: 正常活动、呼吸、瞳孔大小(注意光线条件一致)、 唾液分泌、大小便、肌张力及有无肌震颤
2. 3.5%敌百虫3ml/kg制备有机磷中毒模型 观察: 瞳孔、唾液分泌、大小便、骨骼肌活动 3. 解救，观察解除的症状 1、3、5组：先阿托品，10min后解磷定 2、4、6组：先解磷定，10min后阿托品
• 滴加红细胞混悬液后要轻轻摇匀， 切勿剧烈震荡。静置一段时间后在 光线明亮处观察。
实验后处理
结果： P102表6-10 和 P103表6-11
讨论：各因素对红细胞膜的影响及原理
结论：渗透性溶血 化学性溶血
预习
•氯丙嗪抗激怒(安定)实验
•药物半数有效量(ED50 )和 半数致死量(LD50)的测定
、血压
•骨骼肌: 广泛、肌震颤(呼吸肌麻痹而死亡)
中枢症状
兴奋、不安、全身肌肉抽搐→抑制→昏迷 心血管中枢(-)、呼吸中枢(-)→死亡
支气管平滑肌收缩 呼 吸 困 难 消化腺分泌增加 口 吐 白 沫 胃肠道泌尿道平滑肌收缩 大 小 便 失 禁 汗腺分泌增加 大 汗 淋 漓 瞳孔括约肌的收缩 针 尖 样 瞳 孔
磷酰化 AchE
AchE
N-R
CNS
Ach
水 解
骨骼肌纤维震颤 骨骼肌收缩 强 直 性 痉 挛
先兴奋不安，继之惊厥、 后而转为抑制，出现意识 模糊昏迷等
基本原理
M样症状
•瞳孔 •腺体 •呼吸系统 瞳孔括约肌收缩 瞳孔缩小 分泌 流涎、出汗 支气管平滑肌收缩,腺体分泌 呼吸困难甚至肺水肿 平滑肌收缩 恶心、呕吐、
腹痛、腹泻
•胃肠道
•泌尿系统 膀胱逼尿肌收缩 •心血管系统 M样作用 同时有N样作用
小便失禁 心率 血压 血压
基本原理
N样症状
•神经节症状: 胃肠、腺体、眼方面同M样症状 心血管 心缩力
实验观察
•红细胞渗透性溶血：10管 红细胞混悬液处于低渗溶液中 •红细胞化学性溶血：4管 红细胞混悬液处于有机溶剂、 酸、碱中
制备红细胞悬液
• 取家兔动脉血2ml，离心5min, 1500r/ min • 吸弃上清液，加生理盐水混匀离心洗涤2次 • 得洗涤后红细胞 • 用生理盐水配成30%和3%红细胞悬液 (兔红细胞比容0.4) 配30% （2×0.4） ÷0.3 = 2.7ml 配3%: 取30%的溶液稀释10倍
胆碱+ 乙酸
基本原理
•抢救原则 阿托品＋碘解磷定
阿托品化缓解症状
联合用药
尽快复活胆碱酯酶
•死亡原因
呼吸抑制 呼吸衰竭 心血管功能衰竭
•阿托品 （M胆碱受体阻断药）
缓解支气管痉挛 减少腺体分泌 改善呼吸状况 解除部分中枢神经系统的中毒症状
•碘解磷定 （胆碱酯酶复活药）
复活胆碱酯酶 讯速控制肌束颤动
渗透性溶血实验
•按表6-9滴入30%红细胞悬液2滴，轻轻摇匀
1
10
10支不同浓度NaCl溶液试管（低 高）
静置30分钟
溶血判断
•完全溶血
•部分溶血 •不溶血
管内液体完全红色透明
上层红色透明 下层红色不透明(混浊) 上层浅黄色或无色透明 下层红色不透明
化学性溶来自百度文库实验
•4支试管内各加入3%红细胞混悬液1ml
第七课：
有机磷酸酯类中毒及其解救 红细胞渗透性和化学性溶血 实验
有机磷酸酯类 中毒及其解救
实验目的
•掌握有机磷酸酯类农药中毒 症状和中毒原理 •掌握解救药的选择、作用原理、 解救效果并结合临床应用
实验原理
实验步骤
注意事项 实验后处理
乙酰胆碱
中枢和外周神经系统的内源性神经递质 易被胆碱酯酶水解
释放部位： 神经突触和神经效应器接头部位
作用： 激动M胆碱受体和N胆碱受体
基本原理
•有机磷酸酯类中毒原理及症状
有机磷酸酯类＋胆碱酯酶
→磷酰化胆碱酯酶
乙酰胆碱积聚
(难水解，无活性，易老化)
M样、N样、中枢神经系统中毒症状
解磷 磷酰 化 定碘
碘解 磷定
心脏活动的抑制 心率减慢、血压下降
阿托品
M-R
有 机 磷
实验后处理
结果：P123表9-8
讨论：列两表
比较不同用药顺序解救效果差异
结论：有效抢救需联合用药
红细胞渗透性和 化学性溶血实验
实验目的
1.掌握测定红细胞渗透脆性及引 起红细胞溶解的实验方法 2.熟悉红细胞混悬液的制备方 法和溶血现象的判断
基本原理
红细胞膜具一定伸展性和弹性，对低渗 溶液具一定抵抗力 •红细胞渗透脆性 红细胞于低渗溶液中破裂、解体特性 •渗透抵抗力 •表示方法： 最小抵抗力（最大脆性）—刚开始溶血 最大抵抗力（最小脆性）—刚完全溶血
表1 有机磷中毒及其抢救试验结果
处理 给药前 甲 给敌百虫后 兔 给阿托品后 给解磷定后 瞳孔 唾液 大小便 骨骼肌活动
给药前 乙 给敌百虫后 兔 给解磷定后 给阿托品后
注意事项
1. 测量瞳孔时应注意光线强弱对瞳孔 大小的影响,实验前后光源要一致， 同一方向同一只眼。 2.敌百虫溶液有较强的刺激性，静脉 注射时要避免药物外漏。 3.事先准备好抢救工作，中毒症状明 显后立即解救。
•分别加入下列溶液2ml/管，混匀 11号 0.9%NaCl 12号 氯仿 13号 0.1mol/L HCl 14号 0.1mol/L NaOH •静置30min后观察试管内颜色、透明度和溶血 情况
注意事项
• 向试管中滴加红细胞混悬液时要靠 近液面，轻轻滴入，以免冲击力太 大使红细胞破损，造成溶血假象。
实验步骤
1. 家兔称重, 观察: 正常活动、呼吸、瞳孔大小(注意光线条件一致)、 唾液分泌、大小便、肌张力及有无肌震颤
2. 3.5%敌百虫3ml/kg制备有机磷中毒模型 观察: 瞳孔、唾液分泌、大小便、骨骼肌活动 3. 解救，观察解除的症状 1、3、5组：先阿托品，10min后解磷定 2、4、6组：先解磷定，10min后阿托品
• 滴加红细胞混悬液后要轻轻摇匀， 切勿剧烈震荡。静置一段时间后在 光线明亮处观察。
实验后处理
结果： P102表6-10 和 P103表6-11
讨论：各因素对红细胞膜的影响及原理
结论：渗透性溶血 化学性溶血
预习
•氯丙嗪抗激怒(安定)实验
•药物半数有效量(ED50 )和 半数致死量(LD50)的测定
、血压
•骨骼肌: 广泛、肌震颤(呼吸肌麻痹而死亡)
中枢症状
兴奋、不安、全身肌肉抽搐→抑制→昏迷 心血管中枢(-)、呼吸中枢(-)→死亡
支气管平滑肌收缩 呼 吸 困 难 消化腺分泌增加 口 吐 白 沫 胃肠道泌尿道平滑肌收缩 大 小 便 失 禁 汗腺分泌增加 大 汗 淋 漓 瞳孔括约肌的收缩 针 尖 样 瞳 孔
磷酰化 AchE
AchE
N-R
CNS
Ach
水 解
骨骼肌纤维震颤 骨骼肌收缩 强 直 性 痉 挛
先兴奋不安，继之惊厥、 后而转为抑制，出现意识 模糊昏迷等
基本原理
M样症状
•瞳孔 •腺体 •呼吸系统 瞳孔括约肌收缩 瞳孔缩小 分泌 流涎、出汗 支气管平滑肌收缩,腺体分泌 呼吸困难甚至肺水肿 平滑肌收缩 恶心、呕吐、
腹痛、腹泻
•胃肠道
•泌尿系统 膀胱逼尿肌收缩 •心血管系统 M样作用 同时有N样作用
小便失禁 心率 血压 血压
基本原理
N样症状
•神经节症状: 胃肠、腺体、眼方面同M样症状 心血管 心缩力
实验观察
•红细胞渗透性溶血：10管 红细胞混悬液处于低渗溶液中 •红细胞化学性溶血：4管 红细胞混悬液处于有机溶剂、 酸、碱中
制备红细胞悬液
• 取家兔动脉血2ml，离心5min, 1500r/ min • 吸弃上清液，加生理盐水混匀离心洗涤2次 • 得洗涤后红细胞 • 用生理盐水配成30%和3%红细胞悬液 (兔红细胞比容0.4) 配30% （2×0.4） ÷0.3 = 2.7ml 配3%: 取30%的溶液稀释10倍
胆碱+ 乙酸
基本原理
•抢救原则 阿托品＋碘解磷定
阿托品化缓解症状
联合用药
尽快复活胆碱酯酶
•死亡原因
呼吸抑制 呼吸衰竭 心血管功能衰竭
•阿托品 （M胆碱受体阻断药）
缓解支气管痉挛 减少腺体分泌 改善呼吸状况 解除部分中枢神经系统的中毒症状
•碘解磷定 （胆碱酯酶复活药）
复活胆碱酯酶 讯速控制肌束颤动
渗透性溶血实验
•按表6-9滴入30%红细胞悬液2滴，轻轻摇匀
1
10
10支不同浓度NaCl溶液试管（低 高）
静置30分钟
溶血判断
•完全溶血
•部分溶血 •不溶血
管内液体完全红色透明
上层红色透明 下层红色不透明(混浊) 上层浅黄色或无色透明 下层红色不透明
化学性溶来自百度文库实验
•4支试管内各加入3%红细胞混悬液1ml