疑难血型的特点与区别
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2.试管法可将已加入患者血清和标准红细胞的试管 置于37℃的水浴10--15min 后离心，若离心后正 反定性相符可确认为冷凝集素。
五、混合视野凝集
特点：肉眼观察凝集时凝块小而少，显微镜观察时 有红细胞凝集，有一部分红细胞不凝集。
原因：①非 O型人近期输用了 O型血；②病人接受 了与自己 ABO血型不一致的骨髓移植；③来自单 合子（单卵双生，血型不一样）的相嵌红细胞或 双合子（双卵双生，血型不一样）的交移体红细 胞；④A亚型中A3红细胞与抗 -A血清反应时呈典 型的混合视野凝集现象。
? 9.如果使用血清来悬浮细胞，血清中的高浓度血 型物质中和了抗体试剂，使其不能再与红细胞抗 原发生反应 ，出现了假的阴性反应
? 10.在反定型试验时没有加血清，误认为是阴性 结果；
? 11 结果判断错误
如何解决技术原因造成的正反定型不符
为解决 ABO血型不一致而开始做深入试验之前，首 先要排除技术上可能发生的错误，首先要重复作 正反定性试验．使用质量合格的试剂，严格地执 行正规的操作，再者则重新抽取标本。如果先前 试验中红细胞悬浮在血清或血浆中，改为用盐水 洗涤红细胞后配成悬液，以及细心观察和解释试 验结果就可解决许多明显的问题．如果细心而反 复的实行对照实验还是与先前一样的结果。就要 根据情况从细胞和血清中寻找原因。
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? 三、血清抗体减弱
? 原因：老年人、血液病、肿瘤等
? 特点：患者血清与标准红细胞混匀离心后，红细 胞呈分散状态位于凝胶中偏下部，呈分散下沉， 甚至沉在胶的底部。
? 处理方法，①增加反应时间；②增加血清含量； ③可把标准红细胞和患者血清在混匀后放置在 4℃冰箱中 15-30min 后离心可以证实。
? 消除方法：①红细胞表面包被有IgG抗体 时，45 ℃做放散试验解离掉红细胞表面这
些抗体后，再做血型鉴定；②红细胞表面 有冷抗体IgM时，37 ℃洗涤即可，也可用 二硫苏糖醇（DTT）等巯基化合物消除。
.
正定型
反定型
七、获得性类B抗原
1.特点：正定型AB型。红细 胞与抗A标准血清反应很 强，与抗B标准血清反应 很弱。
? 其特点为：当凝集的细胞消除后，再加入 抗-A1，原未凝集的细胞仍出现混合视野凝 集现象。输异型血导致的混合视野凝集现
象能持续到输入的红细胞存活期结束；血 型不一致的骨髓移植所致的混合视野凝集
现象在病人自身的红细胞生成后消失，个 别也可持续较长时间；有相嵌和交移红细 胞的人所致的混合视野凝集可持续终生。
? 一、生理性原因引起的
ABH 抗原的发育，最早可到 37日胎龄大的胎 儿，但其强度在怀孕期间不增加。通常，新生儿 红细胞的 ABH反应性，没有成人的红细胞强。估 计新生儿所带的抗原不为数目，发现仅有成人红 细胞数的25%-50% 。另外，由于新生儿血清中 抗A及抗B出生后才开始产生，含量少、效价低。
体内还含有母亲的血型抗体，而导致正反定型不 符。但随着新生儿的生长发育， 6个月后这种现 象逐渐消失。因此， 6个月内的新生儿一般不做 反定型，即使正反定型不符也是正常情况。
二、红细胞抗原减弱Leabharlann Baidu特点： 离心后红细胞多位于
凝胶中间，抗原越弱，颗 粒越小，越靠近于凝胶的 底部。
处理方法： 1.可适当增加患者红细胞悬
? 四、冷凝集素 由于冷凝集素存在于患者血清中， 所以在反定型时与标准红细胞ＡＢＯ红细胞均成 凝集状态，（注意区别孟买和类孟买血型以后在 亚型专讲）
? 处理方法：
1、卡式法可将已加入患者血清和标准红细胞的反 应卡置于37℃的免疫微柱孵育器孵 15min后离心， 若离心后正反定性相符可确认为冷凝集素。
另外会遇到即使 ABO和RH血型相同，但由于 患者血清中存在意外抗体或红细胞上致敏有意外 抗体及其它原因造成交叉配血不能相合。
在ABO分型实验中，技术上的错误与各
种临床情况或疾病，都能造成正反定 型之间的矛盾，当预期的正反定型不 能产生ABO抗原与抗体的互补结果时， 首先需要排除在技术上可能发生的错 误，如果细心而反复的实行对照试验 产生相同形式的凝集反应，则需要考 虑到细胞和血清的变异情况：
实验者技术问题
有时造成正反定型不符，并不是红细胞或血 清本身的问题，而是由于操作不当造成。 主要原因有：
? 1. 标本或试剂搞错 ? 2.红细胞悬液过浓或过 ? 3.标本混乱 ? 4.未加试剂
? 5.试剂受到污染
? 6.温度在离心过程中增高
? 7.忽略观察溶血现象
? 8.细胞与血清间比例不适当，未发现弱凝集
病人的红细胞+ 病人的血清+试
疑难血型
? 血型和疑难血型的概念
? 血型是以血液抗原形式表现出来的一种遗 传形式。
? 疑难血型是指对个体因疾病、基因变异及 其他情况引起的正反定型不符，常规试剂 难以确定的血型.
? 血型的形成
在 ABO 血型系统内，几乎所有缺乏抗原的人体， 在其血清内必具有所缺乏抗原的抗体，若在红细 胞上具有抗原时，则其血清内必缺乏对应的抗体， 但这种规则偶然也有例外，血清中的抗体和细胞 上的抗原不互补，正反定型相互不支持，出现血 型难以确定。
液的浓度。 2.抗原抗体反应后在室温放
置30分钟，能增强标准血 清与红细胞的反应强度， 或在4℃反应30分钟。 3.将红细胞进行酶（木瓜酶、 无花果酶、胰酶）处理， 增加抗原抗体反应的敏感 性。 4.亚型.后面专讲。
范例
正定型
反定型
病人的红细胞 +
病人的血清 +试
试剂抗血清
剂红细胞
抗抗 抗
自
A
B
AB AC BC OC 身C
? 六、抗体包被红细胞 血型鉴定时出现非特异性凝集，该 凝集是由红细胞表面的IgG抗体与蛋白的反应引起；或红 细胞表面的冷抗体IgM在盐水中自凝引起。
? 产生原因：①患新生儿溶血病（HDH）的婴儿、患自身 免疫性疾病、同种异体免疫性疾病的成人红细胞表面包 被有很多IgG抗体，红细胞表面的IgG抗体能与18﹪22﹪的抗-D血清和6﹪-12﹪抗-A及抗-B血清中的蛋白质 发生反应，导致这种红细胞发生非特异性凝集，而出现 血型鉴定错误；②红细胞表面被冷抗体IGM自身凝集素 （冷凝集素）包被后，红细胞在盐水中发生自身凝集现 象。
五、混合视野凝集
特点：肉眼观察凝集时凝块小而少，显微镜观察时 有红细胞凝集，有一部分红细胞不凝集。
原因：①非 O型人近期输用了 O型血；②病人接受 了与自己 ABO血型不一致的骨髓移植；③来自单 合子（单卵双生，血型不一样）的相嵌红细胞或 双合子（双卵双生，血型不一样）的交移体红细 胞；④A亚型中A3红细胞与抗 -A血清反应时呈典 型的混合视野凝集现象。
? 9.如果使用血清来悬浮细胞，血清中的高浓度血 型物质中和了抗体试剂，使其不能再与红细胞抗 原发生反应 ，出现了假的阴性反应
? 10.在反定型试验时没有加血清，误认为是阴性 结果；
? 11 结果判断错误
如何解决技术原因造成的正反定型不符
为解决 ABO血型不一致而开始做深入试验之前，首 先要排除技术上可能发生的错误，首先要重复作 正反定性试验．使用质量合格的试剂，严格地执 行正规的操作，再者则重新抽取标本。如果先前 试验中红细胞悬浮在血清或血浆中，改为用盐水 洗涤红细胞后配成悬液，以及细心观察和解释试 验结果就可解决许多明显的问题．如果细心而反 复的实行对照实验还是与先前一样的结果。就要 根据情况从细胞和血清中寻找原因。
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? 三、血清抗体减弱
? 原因：老年人、血液病、肿瘤等
? 特点：患者血清与标准红细胞混匀离心后，红细 胞呈分散状态位于凝胶中偏下部，呈分散下沉， 甚至沉在胶的底部。
? 处理方法，①增加反应时间；②增加血清含量； ③可把标准红细胞和患者血清在混匀后放置在 4℃冰箱中 15-30min 后离心可以证实。
? 消除方法：①红细胞表面包被有IgG抗体 时，45 ℃做放散试验解离掉红细胞表面这
些抗体后，再做血型鉴定；②红细胞表面 有冷抗体IgM时，37 ℃洗涤即可，也可用 二硫苏糖醇（DTT）等巯基化合物消除。
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正定型
反定型
七、获得性类B抗原
1.特点：正定型AB型。红细 胞与抗A标准血清反应很 强，与抗B标准血清反应 很弱。
? 其特点为：当凝集的细胞消除后，再加入 抗-A1，原未凝集的细胞仍出现混合视野凝 集现象。输异型血导致的混合视野凝集现
象能持续到输入的红细胞存活期结束；血 型不一致的骨髓移植所致的混合视野凝集
现象在病人自身的红细胞生成后消失，个 别也可持续较长时间；有相嵌和交移红细 胞的人所致的混合视野凝集可持续终生。
? 一、生理性原因引起的
ABH 抗原的发育，最早可到 37日胎龄大的胎 儿，但其强度在怀孕期间不增加。通常，新生儿 红细胞的 ABH反应性，没有成人的红细胞强。估 计新生儿所带的抗原不为数目，发现仅有成人红 细胞数的25%-50% 。另外，由于新生儿血清中 抗A及抗B出生后才开始产生，含量少、效价低。
体内还含有母亲的血型抗体，而导致正反定型不 符。但随着新生儿的生长发育， 6个月后这种现 象逐渐消失。因此， 6个月内的新生儿一般不做 反定型，即使正反定型不符也是正常情况。
二、红细胞抗原减弱Leabharlann Baidu特点： 离心后红细胞多位于
凝胶中间，抗原越弱，颗 粒越小，越靠近于凝胶的 底部。
处理方法： 1.可适当增加患者红细胞悬
? 四、冷凝集素 由于冷凝集素存在于患者血清中， 所以在反定型时与标准红细胞ＡＢＯ红细胞均成 凝集状态，（注意区别孟买和类孟买血型以后在 亚型专讲）
? 处理方法：
1、卡式法可将已加入患者血清和标准红细胞的反 应卡置于37℃的免疫微柱孵育器孵 15min后离心， 若离心后正反定性相符可确认为冷凝集素。
另外会遇到即使 ABO和RH血型相同，但由于 患者血清中存在意外抗体或红细胞上致敏有意外 抗体及其它原因造成交叉配血不能相合。
在ABO分型实验中，技术上的错误与各
种临床情况或疾病，都能造成正反定 型之间的矛盾，当预期的正反定型不 能产生ABO抗原与抗体的互补结果时， 首先需要排除在技术上可能发生的错 误，如果细心而反复的实行对照试验 产生相同形式的凝集反应，则需要考 虑到细胞和血清的变异情况：
实验者技术问题
有时造成正反定型不符，并不是红细胞或血 清本身的问题，而是由于操作不当造成。 主要原因有：
? 1. 标本或试剂搞错 ? 2.红细胞悬液过浓或过 ? 3.标本混乱 ? 4.未加试剂
? 5.试剂受到污染
? 6.温度在离心过程中增高
? 7.忽略观察溶血现象
? 8.细胞与血清间比例不适当，未发现弱凝集
病人的红细胞+ 病人的血清+试
疑难血型
? 血型和疑难血型的概念
? 血型是以血液抗原形式表现出来的一种遗 传形式。
? 疑难血型是指对个体因疾病、基因变异及 其他情况引起的正反定型不符，常规试剂 难以确定的血型.
? 血型的形成
在 ABO 血型系统内，几乎所有缺乏抗原的人体， 在其血清内必具有所缺乏抗原的抗体，若在红细 胞上具有抗原时，则其血清内必缺乏对应的抗体， 但这种规则偶然也有例外，血清中的抗体和细胞 上的抗原不互补，正反定型相互不支持，出现血 型难以确定。
液的浓度。 2.抗原抗体反应后在室温放
置30分钟，能增强标准血 清与红细胞的反应强度， 或在4℃反应30分钟。 3.将红细胞进行酶（木瓜酶、 无花果酶、胰酶）处理， 增加抗原抗体反应的敏感 性。 4.亚型.后面专讲。
范例
正定型
反定型
病人的红细胞 +
病人的血清 +试
试剂抗血清
剂红细胞
抗抗 抗
自
A
B
AB AC BC OC 身C
? 六、抗体包被红细胞 血型鉴定时出现非特异性凝集，该 凝集是由红细胞表面的IgG抗体与蛋白的反应引起；或红 细胞表面的冷抗体IgM在盐水中自凝引起。
? 产生原因：①患新生儿溶血病（HDH）的婴儿、患自身 免疫性疾病、同种异体免疫性疾病的成人红细胞表面包 被有很多IgG抗体，红细胞表面的IgG抗体能与18﹪22﹪的抗-D血清和6﹪-12﹪抗-A及抗-B血清中的蛋白质 发生反应，导致这种红细胞发生非特异性凝集，而出现 血型鉴定错误；②红细胞表面被冷抗体IGM自身凝集素 （冷凝集素）包被后，红细胞在盐水中发生自身凝集现 象。