疑难血型的特点与区别
疑难血型的特点与区别
其特点为：当凝集的细胞消除后，再加入 抗-A1，原未凝集的细胞仍出现混合视野凝 集现象。输异型血导致的混合视野凝集现
象能持续到输入的红细胞存活期结束；血
型不一致的骨髓移植所致的混合视野凝集
现象在病人自身的红细胞生成后消失，个
别也可持续较长时间；有相嵌和交移红细 胞的人所致的混合视野凝集可持续终生。
O亚型实际上就是说孟买血型和类孟买血型。
1.孟买型是1954年在印度孟买地区发现的，这种表型的个 体无H基因，所以不能形成A、B、H抗原，而血清中有 抗A、抗B、抗H抗体。类孟买血型人有H基因但红细胞 上没有H抗原，不同的是其红细胞有少量的A或B抗原。 造成类孟买行的原因时H基因受到了其抑制基因z的影响， 基因的表达产物大大下降，但仍有一小部分H抗原产生。 这一小部分H抗原在正常的A基因或B基因的作用下转化 为少量的A或B抗原，其血清中也常含抗H抗体。
一、生理性原因引起的
ABH抗原的发育，最早可到37日胎龄大的胎 儿，但其强度在怀孕期间不增加。通常，新生儿 红细胞的ABH反应性，没有成人的红细胞强。估 计新生儿所带的抗原不为数目，发现仅有成人红 细胞数的25%-50%。另外，由于新生儿血清中 抗A及抗B出生后才开始产生，含量少、效价低。 体内还含有母亲的血型抗体，而导致正反定型不 符。但随着新生儿的生长发育，6个月后这种现 象逐渐消失。因此，6个月内的新生儿一般不做 反定型，即使正反定型不符也是正常情况。
八、获得性类A抗原 特点：正定型为A型或AB型，反定型为O型和B
型。
原因：由于造血干细胞的体细胞突变，造成部分 红细胞持续性Tn抗原激活，Tn的抗原表位是N乙酰基半乳糖胺，类同A抗原，当O型和B型红细 胞Tn抗原被激活后，O型和B型红细胞就被误认 为是A型。
ABO疑难血型三步分析法
ABO疑难血型三步分析法在血型分类中没有疑难血型,迄今为止在文献中也查不到“疑难血型”的定义，因为“疑难血型”是1种血型难以检定或判定的“现象”,而不是1种型别。
检定1份标本是否属“疑难血型”，除了标本本身的特殊性外，还与实验室的设备、技术人员的水平、经验等多种因素有关，例如1份ABO亚型标本,在基层医院血库可能因为正定型与反定型不一致而分析不出原因被认为是“疑难血型”,但在血液中心血型参比实验室该问题可能就易于迎刃而解。
在检定血型时,标本如果受多种因素干扰使结果难以判定,便呈现“疑难血型”现象。
一、干扰ABO血型正确判定的因素（一）生理性因素1.年龄老年人(ABO抗原或ABO抗体减弱),6个月前的婴儿(ABO 抗原或ABO抗体不成熟),可能导致ABO血型误定。
2.ABO亚型包括A(B)型、B(A)型,ABO抗原减弱导致细胞定型(正定型)受干扰,或血清中出现不规则抗体干扰血清定型(反定型)。
3.冷凝集素有些健康人血清中含有冷凝集素,且在<4℃才有活性,不干扰ABO血型检定,如果冷凝集素效价升高,或在室温以上反应,致敏自身红细胞可能干扰ABO正定型,存在于血清可能干扰ABO反定型。
4.“先天性”无ABO抗体近年有“先天性”无ABO抗体的个案报告,原因有待研究。
5.双精子授精红细胞呈嵌合体。
6.个体特异性个别人血清中ABO可溶性血型物质过高,ABO正定型红细胞凝集减弱。
（二）实验技术原因1.标本混淆如采错被检者,红细胞和血清非同一人,记录结果与标本编号不对应。
2.静脉输液处采样ABO抗体被输液稀释,干扰ABO反定型。
3.采样不规范用凝血块洗下红细胞检定血型，其中混有凝集程度不一的红细胞；用血浆做ABO反定型,操作过程中纤维蛋白析出凝集试剂红细胞。
4.试剂质量问题或漏加试剂定型试剂过期失效，未达标准，被污染。
操作中未遵循“先加血清后加细胞”的原则，大批量样本试验时漏加试剂血清或试剂红细胞。
5.实验操作不规范被检红细胞未洗涤,非特异性粘附血浆蛋白,或被检红细胞悬液过浓或过稀。
疑难血型鉴别总结
ABO疑难血型鉴定三步法第一步:复查ABO血型，排除人为因素、操作失误。
重新采集血样、核对试剂和器材。
第二步：将需定型病人归纳进五大类33种原因分类表，“对号入座”，逐一排除，剩下几条不能排除者——第三步：针对剩下的几种不能排除的因素，设计针对性实验来验证。
ABO疑难血型鉴定1 红细胞抗原↓7种(1)年龄小于6个月或老年(临床提示)(2)白血病(临床提示)(3)异型血输注(临床提示输血史)(4)造血干细胞移植(病史)(5)血型物质升高(6)急性大失血(临床病史)(7)ABO亚型2 红细胞抗原额外反应7种(1)自身凝集素(临床提示AIAH)(2)红细胞粘附大量蛋白(红c未洗涤)(3)红细胞未洗涤，与血清试剂反应(4)造血干细胞移植(病史)(5)获得性B抗原(类B)(临床提示感染)(6)B(A)、A(B)表型(7)异型血输注(输血史)无临床提示者，仅三种3 血清抗体↓6种(1)年龄小于6个月或老年(临床提示)(2) 双胞胎嵌合体(家族史)(3)低丙种球蛋白血症(临床提示)(4)造血干细胞移植(病史)(5)先天性ABO抗体缺失(6)大量输液(输液史)4 血清抗体额外反应8种(1)自身抗体(临床提示AIAH)(2)同种抗体(3)对试剂反应的物质(4)血清蛋白异常(临床常为肝病)(5)输异型血浆(输血史)(6)造血干细胞移植(病史)(7)输含血型抗体的免疫球蛋白(输血)(8)ABO亚型无临床提示者，仅四种5 混合凝集5种(1)近期怀孕或输血(病史、输血史)(2)双胞胎嵌合体(家族史)(3)骨髓移植受者(临床提示)(4)造血干细胞移植(病史)(5)白血病(病史)常见几种疑难血型分析：例1：实验中一例A2B亚型的鉴定：临床标本，姓名：张××，标本离心分离血浆，常规操作，制备0.8%、4%红细胞悬液。
对标本进行正反定型，博迅定型试剂卡批号：20081006，反定型试剂批号：20090602，结果如下：正定型反定型抗-A 抗-B 抗-D A1 Bc3+ 3+ 4+ 4+W －分析：标本正定显示为AB型，反定显示为B型，反定该标本血清(血浆)与反定型A1细胞呈现4+W的反应格局(存在混合凝集)，正反定型不符。
ABO疑难血型鉴定
ABO正、反定型不合疑难血型三步分析法”ABO正反定型不符定义：①ABO正反定型不符，即正定型与反定型提示的血型结果不一致②ABO正反定型相符，但为弱反应，正定型反应强度＜3+，或反定型反应强度＜2+③正定型为O型，反定型与A细胞、B细胞凝集强度差别≥2+凡是遇到ABO正、反定型不合的病人第一步: 排除人为因素／操作失误１，重新采集血样⑴分抗凝，不抗凝两管⑵排除采错人，输血/输液处采样……２，核对试剂，器材仔细阅读试剂效期，说明书，操作方法，注意事项３，规范化操作复检复检ABO 血型仍然正、反定型不合，就确定为疑难血型进入三步法第二步第二步：凡是ABO正、反定型不合的病例按下面方法，分析病人的抗原、抗体是“变多？还是变少？”正、反定型结果判断1，正定型AB, (两种抗原) 抗原变多正定型O, (无抗原) 抗原变少2，反定型O, (两种抗体) 抗体变多反定型AB, (无抗体) 抗体变少3，正定型A, 或B (一种抗原) ①抗原变多;②抗原变少反定型A, 或B (一种抗体) ①抗体变多;②抗体变少★不要过问“真滴变多变少没有”，你依样画葫芦就是了规律很好记，不管是抗原/抗体：两种→肯定是变多没有→肯定是变少；一种→可能是变多，也可能是变少归纳ABO正,反定型不合的“五大类30种原因”知道有个“五大类30种原因”就可以了不要记，书上有这些表，现用现翻书★用排除法（1）红细胞抗原变少7种（2）红细胞抗原变多7种①＜6月,老年（临床）□①自身凝集素（临床诊断）□②白血病（临床诊断）□②红细胞粘附大量蛋白（RBC未洗）□③输异型血（输血史）□③样本含试剂反应物（RBC未洗）□④造血干细胞移植（病史）□④造血干细胞移植（病史）□⑤血型物质↑□⑤获得性B抗原（类B）（临床感染）□⑥急性大失血（临床病史）□⑥B(A)表型□⑦ABO亚型□⑦输异型血（输血史）□注意：每条的临床提示（3）血清抗体变少6种（4）血清抗体变多7种①<6个月/老年（临床）□①自身抗体（临床诊断AIHA）□②ABO亚型□②同种抗体（抗筛）□③低丙种球蛋白血症（化验）□③对试剂反应的物质□④造血干细胞移植（病史）□④血清蛋白异常（化验）□⑤先天性ABO抗体缺失□⑤输异型血浆（输血史）□⑥大量输液（输血史）□⑥造血干细胞移植（病史）□⑦输含血型抗体Ig（输血史）□注意：每条的临床提示5）混合凝集（mf）3种①3个月内输异型血（输血史）□②造血干细胞移植（病史）□③双精子受精/嵌合体（问家系）□注意：每条的临床提示归纳剩下不能排除的原因：第三步: 实验验证针对剩下几种不能排除的原因, 选择针对性实验验证，如何选择针对性实验呢?翻看书本:《输血免疫血液学实验技术》人民卫生出版社,2011 .1; P131。
疑难血型鉴定,带你认识一下
疑难血型鉴定,带你认识一下发布时间：2022-11-21T07:36:34.113Z 来源：《中国医学人文》2022年9月9期作者：刘先卉[导读]疑难血型鉴定,带你认识一下刘先卉（自贡市中心血站；四川自贡643000）ABO血型是人类最早发现也是对输血安全影响最大的血型系统。
当发现ABO正反定型不一致时如何查找原因并正确鉴定，患者血型就显得尤为重要。
对ABO正反定型不符的标本进行疑难血型鉴定，探讨其原因与解决办法。
测ABO血型，正反定型不符者需进一步做吸收放散试验、唾液血型物质测定、抗体筛选、亚型检测等试验。
可能会出现额外抗原，出现额外抗体，弱抗原或弱抗体等，所以多种原因可干扰血型测定结果。
应采用正确的辅助方法检测ABO血型，提高血型鉴定的准确性与输血安全性。
一、出现额外抗原1、抗原发生改变：如类B，是一种获得性暂时性抗原。
解决方法：①观察细胞与抗-A及抗-B的凝集强度，与抗-A的反应要比与抗-B反应强。
②用受检者红细胞与自身血清做试验，血清中的抗-B不凝集自身红细胞上的类B抗原。
③检查唾液中是否有A、B物质，如果是分泌型，可检出A物质而无B物质。
④核对患者的诊断，类B抗原的形成与结肠癌、直肠癌、革兰阴性杆菌感染有关。
2、多凝集现象：红细胞被绝大多数人的正常血清凝集。
可用37℃生理盐水洗涤红细胞、使用非人血清来源的标准定型血清进行正定型。
3、非抗-A及抗-B的抗体成分与相应抗原形成复合体吸附在红细胞表面，引起正定型非特异性凝集。
如抗血清添加剂、抗EDTA 抗体等。
可将红细胞洗涤再进行正定型。
4、自身免疫性溶血性贫血：红细胞表面存在致敏自身抗体，包括冷凝集素和温抗体的作用。
红细胞用45℃生理盐水洗涤去除自身抗体，反定型在37℃进行，并做自身对照。
二、出现额外抗体1、蛋白或血浆不正常引起的缗钱状凝集：血清蛋白浓度异常，球蛋白浓度由于疾病而升高,纤维蛋白原浓度升高等。
应了解患者临床诊断、加适量生理盐水看凝集是否消失或洗涤红细胞、稀释反定型血清。
疑难血型7
疑难血型的实验室及临床处理血型定义：血液系统遗传多太性。
但是一般来说，血型指红细胞ABO及Rh血型。
目前，血型主要由红细胞凝集来判断。
有时由于疾病引起红细胞血型抗原表达发生改变或血清中抗体改变，致使血型判断困难或判断错误。
和其他红细胞血型系统相比，ABO系统有其特殊性，即正常人红细胞上缺乏A或B抗原时，其血浆中会出现相应抗体。
因此，检查ABO血型，必须做正反定型，如正反定型吻合，则血型检测无误。
如正反定型不符合，多系技术错误造成，应症先重复试验，再找其原因。
常见的技术错误包括：1）标本、试剂、试管或玻片弄错。
2）红细胞悬液太浓或太淡。
3）记录错误。
4）标本混淆。
5）溶血。
6）未加试剂。
7）未按试剂供应商的要求进行操作。
8）离心机有问题。
9）试剂污染。
10）离心时加热。
某些疾病状态可能使红细胞抗原减弱或产生假抗原，如白血病，何杰金病，10号染色体转位，红细胞系统极度增生如海洋性贫血。
可能出现如下反应格局：正定型反定型表现型抗-A 抗-B 抗AB A1细胞 B细胞A +mf — ++mf — +++B —± + ++++ —红细胞ABO抗原减弱与病程有关，病情缓解时抗原性会增强。
此外，血液中凝集素效价可由于低丙种球蛋白血病而降低，如慢淋、淋巴瘤、免疫缺陷性疾病如先天性低丙种球蛋白血病。
老年人及婴儿凝集素效价也低。
肠梗阻、结肠、直肠癌或其他下消化道疾病时肠壁通盘性啬，细菌多糖入血，使A节型患者出现获性B检验地带网现象。
胃或胰腺恶性肿瘤患者血清中可能含有过多的可溶性血型物质，这些物质中和抗血清从而影响正定型结果。
如出现ABO正反定型不符，不能轻易发血。
首先应重复试验，如仍不符合，应再抽标本并进一步了解病人情况，如诊断、年龄、妊娠史、输血史、用药史、免疫球蛋白平等。
将ABO正反定型不符人为分为4类第一类由抗体减弱或缺乏导致ABO正反定型不符，常见情况如下：1）新生儿2）老年人3）白血病患者合并低丙种球蛋白血症4）淋巴瘤合并低丙种球蛋白血症者5）用免疫抑制剂导致低丙种球蛋白血症者6）先天性无丙种球蛋白血症7）免疫缺陷疾病患者8）骨髓移植患者（由于治疗引起的低丙种球蛋白血症或植入骨髓血型不同）疑难血型的实验室及临床处理处理方法：增强反定型反应----将患者血清与A1或B细胞在室温下孵育15-30分钟，如仍无反应，将混合物质4℃下孵育，注意做自身及O型细胞对照。
疑难血型鉴定与疑难配血
疑难配血在临床的应用
紧急输血
在紧急情况下，通过疑难配血快 速找到合适的血液成分，为患者
提供及时的输血治疗。
慢性疾病治疗
对于需要长期输血的患者，疑难 配血有助于选择最佳的血液成分 和输血方案，提高治疗效果和生
活质量。
稀有血型患者输血
对于稀有血型患者，疑难配血有 助于寻找合适的供血者，确保患
者的输血需求得到满足。
选用高灵敏度试剂
选用高灵敏度试剂可以更 准确地检测抗原和抗体， 提高血型鉴定的准确性。
多种方法综合应用
可以采用多种方法综合应 用，如试管法、微柱凝胶 法等，以提高血型鉴定的 准确性和可靠性。
疑难血型鉴定的注意事项
严格遵守操作规程
及时报告结果
进行疑难血型鉴定时，必须严格遵守 操作规程，确保实验结果的准确性和 可靠性。
疑难血型鉴定与疑难配血的案例分析
案例一
一名患者因车祸失血过多需要紧急输血，但患者的血型存 在争议，通过疑难血型鉴定最终确定了正确的血型，为患 者及时输血治疗提供了保障。
案例二
一名肾病患者需要进行透析治疗，但患者的血型与透析机 的要求不符，通过疑难配血找到了合适的血液成分和输血 方案，确保了患者的治疗顺利进行。
04
注意观察受血者的反应 ，及时发现并处理输血 反应。
疑难配血的注意事项
01
02
03
Hale Waihona Puke 04严格遵守输血操作规程，确保 输血过程的安全和有效。
对受血者进行全面的评估，包 括病史、体征和实验室检查等
，以确定是否适合输血。
对供血者进行严格的筛选和检 测，确保血液质量和安全。
对输血过程进行全程监控，及 时发现并处理可能出现的问题
疑难血型鉴定和疑难交叉配血
疑难血型鉴定与疑难交叉配血1、疑难血型鉴定疑难血型就是一种血型难以检定或判定（正反定型不一致）得现象,多由血型抗原减弱形成亚型、疾病原因引起抗体减弱或部分血型系统罕见表型等原因引起。
因此,疑难血型鉴定主要从弱抗原、弱抗体与特殊抗原或抗体检测角度出发，结合血型血清学与分子生物学研究方法对患者样本进行检测。
而对于不规则抗体筛查与鉴定，主要就是对抗体种类与特性进行研究，尤其就是利用吸收/放散试验对同时存在多种同种抗体或自身抗体进行分离鉴定，从而较为准确得分析患者血清抗体得特异性。
在工作中遇到此类情况时，应按照以下步骤进行分析与处理：(１)分析可能存在得原因先排除人为操作因素,再通过了解患者临床资料分析可能得原因，主要包括抗原类影响因素与抗体类影响因素，抗原类影响因素一般包括ABO亚型、血液病、骨髓移植等,抗体类影响因素一般包括不规则抗体、药物抗体、先天抗体缺失、丙种球蛋白过低、冷凝集素等。
（2）设计实验进行验证疑难血型鉴定流程见流程图1。
流程图1 疑难血型鉴定流程2014年１月，在工作中发现正反定型结果不符样本一例,经一系列血清学试验确证该患者为P１Pｋ血型系统得ｐ表型，经分子生物学基因测序,初步推断Ａ4GALT 基因第3外显子得９０3Ｃ＞G突变就是患者p表型形成得分子生物学基础,该研究成果从不同角度与深度撰写论文,先后发表《临床军医杂志》与《中国输血杂志》论文各一篇，并由此逐步展开疑难血型鉴定。
在此之后得工作中，通过阅读文献自修学习,鉴定出Am、Bm、B３等血型亚型，形成了一套相对完整得疑难血型鉴定思路与流程。
２014年2月与2015年10月，在工作中分别遇到一例反复进行输血治疗得患者,经一系列血清学试验，确证此两例患者均因多次输血治疗而产生多种不规则抗体，该研究成果先后以论文形式发表于《临床军医杂志》。
在后期工作中，通过对解放军174医院住院患者不规则抗体筛查与鉴定结果进行分析，对厦门地区住院患者不规则抗体得分布特征有了较为清晰得了解，该研究成果以论文形式发表于《国际医药卫生导报》,并形成了一套相对完整得不规则抗体筛查与鉴定流程。
疑难血型鉴定中若干问题1-PPT精品文档
进一步实验
增加试剂血清：抗A1 抗H 抗A,B 增加细胞：自身、O细胞、脐血细胞 唾液血型物质鉴定 吸收试验 放散试验 直接抗球蛋白试验 分子生物学实验
特殊ABO正反定型不一致的 解决方法
异常正定型（红细胞问题）
抗原弱 获得性B抗原 混合凝集视野 cisAB
最具临床意义：ABO、Rh
重要临床意义：输血安全、器官移植、新 生儿溶血病。
ABO血型临床意义
溶血性输血反应 ABO抗体与相应抗原结合后，能够激 活补体，导致红细胞在血管内立即被破坏。 轻者仅表现为发热、腰背痛、血红蛋白尿 或手术野弥漫性渗血。 重者可表现为DIC、休克、急性肾衰竭， 甚，而红细胞不与相应的抗 血清凝集，高度怀疑是缺乏抗原或抗原弱。此时有两种情 况：亚型；疾病（急性白血病、骨髓增生异常综合症等） 所致。
对策：以A亚型为例①用抗A、抗A1、抗A,B、抗H，重复 检查洗涤后的被检红细胞，并在室温及4℃放置至少 30min。注意按试剂说明书操作。②做吸收放散试验，放 散液与3个A细胞和3个O细胞反应。若与A细胞呈阳性反 应，与O细胞呈阴性反应，证明被检细胞有A抗原。③检 查唾液中ABH物质。④如果有条件，当疾病缓解后复查 ABO血型。
•
许多组织细胞上有规律地存在着A、B、H抗原
（消化道呼吸道泌尿系统上皮细胞）以及分泌型 人的分泌液（唾液、眼泪、尿液、消化液、胆汁、 乳液、羊水、卵巢囊肿液、腹水）中存在着 A、B、
H血型物质。
ABO血型的鉴定
完整的ABO定型必须包括正定型和反定 型两种方法，并互相核对其结果是否一致。
正定型 用已知型特异性的抗体试剂检查 被检红细胞抗原。试剂血清常规用抗A、抗B 两种标准血清。
疑难血型鉴定中若干问题
疑难血型鉴定和疑难交叉配血
疑难血型鉴定和疑难交叉配血1.疑难血型鉴定疑难血型是一种血型难以检定或判定（正反定型不一致）的现象，多由血型抗原减弱形成亚型、疾病原因引起抗体减弱或部分血型系统罕见表型等原因引起。
因此，疑难血型鉴定主要从弱抗原、弱抗体和特殊抗原或抗体检测角度出发，结合血型血清学和分子生物学研究方法对患者样本进行检测。
而对于不规则抗体筛查和鉴定，主要是对抗体种类和特性进行研究，尤其是利用吸收/放散试验对同时存在多种同种抗体或自身抗体进行分离鉴定，从而较为准确的分析患者血清抗体的特异性。
在工作中遇到此类情况时，应按照以下步骤进行分析和处理：（1）分析可能存在的原因先排除人为操作因素，再通过了解患者临床资料分析可能的原因，主要包括抗原类影响因素和抗体类影响因素，抗原类影响因素一般包括ABO亚型、血液病、骨髓移植等，抗体类影响因素一般包括不规则抗体、药物抗体、先天抗体缺失、丙种球蛋白过低、冷凝集素等。
（2）设计实验进行验证疑难血型鉴定流程见流程图1。
流程图1 疑难血型鉴定流程2014年1月，在工作中发现正反定型结果不符样本一例，经一系列血清学试验确证该患者为P1Pk血型系统的p表型，经分子生物学基因测序，初步推断A4GALT 基因第3外显子的903C＞G突变是患者p表型形成的分子生物学基础，该研究成果从不同角度和深度撰写论文，先后发表《临床军医杂志》和《中国输血杂志》论文各一篇，并由此逐步展开疑难血型鉴定。
在此之后的工作中，通过阅读文献自修学习，鉴定出Am、Bm、B3等血型亚型，形成了一套相对完整的疑难血型鉴定思路和流程。
2014年2月和2015年10月，在工作中分别遇到一例反复进行输血治疗的患者，经一系列血清学试验，确证此两例患者均因多次输血治疗而产生多种不规则抗体，该研究成果先后以论文形式发表于《临床军医杂志》。
在后期工作中，通过对解放军174医院住院患者不规则抗体筛查和鉴定结果进行分析，对厦门地区住院患者不规则抗体的分布特征有了较为清晰的了解，该研究成果以论文形式发表于《国际医药卫生导报》，并形成了一套相对完整的不规则抗体筛查和鉴定流程。
疑难血型分析鉴定及处理
输血中监测与评估
输血过程监测
在输血过程中，应密切监测患者的生命体征和输 血反应情况，及时发现并处理可能的输血反应。
输血效果评估
根据患者的病情和输血目的，对输血效果进行评 估，以确保输血治疗的有效性和安全性。
不规则抗体监测
对于已知存在不规则抗体的患者，在输血过程中 应加强抗体监测，以避免抗体引起的输血反应。
明确团队职责
明确团队成员的职责和分工，确保各项工作有序进行。
加强团队沟通
定期组织团队成员进行交流和沟通，分享经验和知识，提高团队协作 效率。
培训课程设置及内容安排
基础知识培训
包括血液学、免疫学、遗传学等基础知识，帮助团队成员巩固和 加深对血型分析鉴定的理解。
专业技能培训
针对血型分析鉴定的专业技能进行培训，如血型血清学实验技术 、基因测序技术等。
05
案例分析与经验分享
典型案例介绍
案例一
01
ABO血型正反定型不符
患者情况
02
一名50岁女性患者，因需进行手术治疗，术前进行血型鉴定。
问题描述
03
采用常规血型鉴定方法，发现患者ABO血型正反定型结果不符
。
典型案例介绍
• 解决方案：进一步采用吸收放散试验、唾液中血型物质测定等 方法，最终确定患者血型为B型。
输血史、妊娠史等。
在遇到疑难血型时，应采用多 种方法进行交叉验证，以提高
结果的准确性。
对于特殊人群（如孕妇、新生 儿等），应采用更为敏感和准
确的方法进行血型鉴定。
在进行疑难血型分析鉴定时， 应注重与临床医生的沟通和协
作，以确保患者安全。
未来发展趋势预测
随着科技的不断发展，未来可能会出现更为先进和准确的血型鉴定方法，如基于基 因测序的血型鉴定技术。
疑难血型鉴定与疑难配血
疑难血型鉴定与疑难配血contents •疑难血型鉴定•疑难配血•临床案例分析•未来发展趋势与挑战•相关文献推荐目录疑难血型鉴定CATALOGUE 01血型鉴定的定义疑难血型鉴定的含义概述010203疑难配血CATALOGUE 02概述疑难配血定义01疑难配血的重要性02疑难配血的原因03特殊方法当常规方法无法解决问题时，可以采用特殊的鉴定和配血方法，如光谱抗人球蛋白法、凝胶抗人球蛋白法、微柱凝胶抗人球蛋白法等。
常规方法对于疑难配血，首先应采用常规的鉴定和配血方法，如盐水介质法、酶法、抗人球蛋白法等。
临床考虑在解决疑难配血问题时，临床医生需要考虑患者的具体情况，如病情、失血量、输血需求等，以决定最合适的输血方案。
疑难配血的方法疑难配血的应用交叉配血的应用对于疑难配血患者，应采取血液保护措施，如输注洗涤红细胞、去白红细胞等，以减少输血反应和传播疾病的风险。
血液保护的应用临床转化的应用临床案例分析CATALOGUE 03疑难血型鉴定的案例案例一案例二疑难配血的案例案例一患者为老年男性，因消化道出血需要输血。
在交叉配血过程中，发现与常规交叉配血不符，无法进行输血。
经过进一步检查，发现患者血清中存在抗筛检抗体，导致交叉配血困难。
经过特殊处理和配血尝试，最终成功完成输血。
案例二患者为年轻女性，因车祸导致失血性休克，需紧急输血。
在交叉配血过程中，发现与常规交叉配血不符，无法进行输血。
经过进一步检查，发现患者存在多种血型抗体，导致交叉配血困难。
经过多方面尝试和特殊处理，最终成功完成输血。
未来发展趋势与挑战CATALOGUE04自动化与智能化发展趋势标准化和规范化生物技术应用挑战与困难高度复杂性和多样性缺乏标准化和规范化技术和设备限制相关文献推荐CATALOGUE 05Translational Medicine, 26(1), 7-14.Translational Medicine, 24(5), 307-314.Medicine Reviews, 35(2), 89-97.THANKS 感谢观看。
疑难血型分析鉴定及处理
可能的解释
（1）患者或献血者的ABO定 型不正确 （2）患者血清中的同种抗 体与献血者红细胞上的抗原 发生反应，但在筛选细胞上 无此抗原存在。 （3）献血者细胞可能有DAT 阳 患者血清中的同种抗体与献 血者红细胞及筛选细胞上的 抗原发生反应
讨论解决
（1）重复ABO实验：查对抗体是否一致。 （2）增加抗体筛选和鉴定的细胞，进一步检查 病人血清中的抗体 （3）做献血者直抗，如阳性，此血不能用于临 床，废弃。
漏加试剂 红细胞浓度过低或过高 试剂污染、失效 加样枪污染 离心机转速不达标 标本搞错 记录错误 结果判读错误
正反定型不合的三种情况
正定型被干扰 : 抗原“变多” 抗原“变少” 抗体“变多” 抗体“变少”
反定型被干扰:
正,反定型同时被干扰
正定型，抗原减弱或缺少 ABO亚型 年龄＜6月、老年
红细胞抗原“变少”
ABO血型系统的血清学特点
• ABO系统主要的抗原、抗体
血型
抗原
抗体
A
B O AB
A
B A，B
抗B
抗A 抗A，抗B -ABO血Fra bibliotek系统的血清学特点
• • • •
A、B抗原的免疫性强 规则抗体：血清中规律性的存在抗A和/或抗B抗体 分泌型人的分泌液（血浆、唾液、羊水等）存在着A、B、H
血型物质
红细胞上的抗原与血清中的抗体存在相反的互补关系
冷抗体或缗钱状凝集
直抗（+）
用不同来源的抗体 试验，研究病人的 输血史和诊断
获得性B、多凝集
ABO正反定型不符思路整理
意 外
（—）
加大血清量，降 低温度，延长孵 育时间，镜检
与A(A1、A2)和 B细胞反应，加自 身对照（—）
疑难血型鉴定处理流程
疑难血型鉴定处理流程血型鉴定是血液学中的重要内容，对于献血、输血、器官移植等医学领域具有重要意义。
常见的ABO血型系统和Rh血型系统已经被广泛应用，但是在实际操作中，仍然会遇到一些疑难血型，这些血型的鉴定处理流程需要我们特别注意。
一、疑难血型的定义疑难血型是指在常规血型鉴定中不能确定血型的血清学现象，包括以下情况：1.反应弱阳性：指血型抗体试验中，试验反应弱而难以判断是阳性还是阴性。
2.反应不一致：指血型抗体试验中，不同试验反应结果不一致，或者同一试验在不同实验室或不同试验人员的操作下结果不一致。
3.异常反应：指血型抗体试验中，出现异常的血清学反应，如异常凝集、异常吸附等。
4.矛盾血型：指献血者或受血者血型抗体与血型抗原不相符，出现矛盾的情况。
二、疑难血型处理流程对于疑难血型，我们需要进行进一步的血清学鉴定和分析，以确保献血和输血的安全性。
1.血清学鉴定首先需要对疑难血型进行血清学鉴定，包括以下步骤：(1) 重复血型抗体试验：在不同时间、不同试验人员或不同实验室中重复进行血型抗体试验，以排除误判的可能性。
(2) 血型抗原检测：对于疑难血型，需要进行血型抗原检测，以确定血型抗原是否存在。
(3) 血清学鉴定：对于疑难血型，需要进行血清学鉴定，包括直接凝集试验、间接凝集试验、单纯免疫吸附试验、酶联免疫吸附试验等，以确定血型抗体是否存在。
2.分析疑难血型的原因在进行血清学鉴定之后，需要对疑难血型的原因进行分析，包括以下几个方面：(1) 技术问题：疑难血型可能是由于操作不当、试剂失效、试验环境不佳等技术原因造成的，需要排除技术问题。
(2) 血型抗体种类：疑难血型可能是由于罕见的血型抗体种类引起的，需要进行深入的血清学鉴定。
(3) 基因型问题：疑难血型可能是由于基因型问题引起的，需要通过基因分型等方法进行进一步分析。
3.制定血型鉴定方案在分析疑难血型的原因之后，需要制定相应的血型鉴定方案，包括以下几个方面：(1) 确定血型：对于疑难血型，需要确定其血型，以确保献血和输血的安全性。
疑难血型鉴定与疑难配血
05
未来展望
提高疑难血型鉴定与疑难配血的效率和准确性
01
开发高效、准确的检测试剂和方法
利用现代生物技术，开发出更为敏感、特异的试剂和方法，提高血型
疑难配血的困难
对于疑难配血，不仅要考虑血型抗原和抗体的匹配，还需考虑其他因素，如患者的免疫状 况、血液中未知的抗体等。
疑难血型鉴定与疑难配血的关联
疑难血型鉴定影响输血效果：对于疑难血型患者，如果 血型鉴定不准确，可能导致输血后出现不良反应或无效 输血。
提高疑难血型鉴定与疑难配血的准确性
疑难配血需要准确的血型鉴定：为了确保输血的安全性 和有效性，对于疑难配血患者，需要使用准确的血型鉴 定方法和试剂。
鉴定的准确性和效率。
02
自动化和智能化鉴定系统
研究开发自动化、智能化的血型鉴定系统，减少人为误差，提高工作
效率。
03
标准化和规范化操作
制定严格的血型鉴定和配血操作规范，确保检测结果的准确性和可重
复性。
借助新技术改进疑难血型鉴定与疑难配血的方法
应用分子生物学技术
利用DNA测序技术、基因分型技术等，对疑难血型进行 更为精准的鉴定，提高血型鉴定的准确性和分辨率。
解决方法
03
04
05
采用多种检测方法：对 于疑难血型，可以采用 多种检测方法，如抗人 球蛋白试验、酶法试验 等，以便相互验证和补 充。
参考其他指标：在血型 鉴定的同时，可以参考 其他指标，如血红蛋白 电泳、基因检测等，以 帮助确定血型。
咨询专家和同行交流： 遇到疑难血型时，可以 咨询专家或同行交流， 寻求帮助和意见。
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五、混合视野凝集
特点：肉眼观察凝集时凝块小而少，显微镜观察时 有红细胞凝集，有一部分红细胞不凝集。
原因ABO血型不一致的骨髓移植；③来自单 合子（单卵双生，血型不一样）的相嵌红细胞或 双合子（双卵双生，血型不一样）的交移体红细 胞；④A亚型中A3红细胞与抗 -A血清反应时呈典 型的混合视野凝集现象。
? 9.如果使用血清来悬浮细胞，血清中的高浓度血 型物质中和了抗体试剂，使其不能再与红细胞抗 原发生反应 ，出现了假的阴性反应
? 10.在反定型试验时没有加血清，误认为是阴性 结果；
? 11 结果判断错误
如何解决技术原因造成的正反定型不符
为解决 ABO血型不一致而开始做深入试验之前，首 先要排除技术上可能发生的错误，首先要重复作 正反定性试验．使用质量合格的试剂，严格地执 行正规的操作，再者则重新抽取标本。如果先前 试验中红细胞悬浮在血清或血浆中，改为用盐水 洗涤红细胞后配成悬液，以及细心观察和解释试 验结果就可解决许多明显的问题．如果细心而反 复的实行对照实验还是与先前一样的结果。就要 根据情况从细胞和血清中寻找原因。
实验者技术问题
有时造成正反定型不符，并不是红细胞或血 清本身的问题，而是由于操作不当造成。 主要原因有：
? 1. 标本或试剂搞错 ? 2.红细胞悬液过浓或过 ? 3.标本混乱 ? 4.未加试剂
? 5.试剂受到污染
? 6.温度在离心过程中增高
? 7.忽略观察溶血现象
? 8.细胞与血清间比例不适当，未发现弱凝集
? 其特点为：当凝集的细胞消除后，再加入 抗-A1，原未凝集的细胞仍出现混合视野凝 集现象。输异型血导致的混合视野凝集现
象能持续到输入的红细胞存活期结束；血 型不一致的骨髓移植所致的混合视野凝集
现象在病人自身的红细胞生成后消失，个 别也可持续较长时间；有相嵌和交移红细 胞的人所致的混合视野凝集可持续终生。
另外会遇到即使 ABO和RH血型相同，但由于 患者血清中存在意外抗体或红细胞上致敏有意外 抗体及其它原因造成交叉配血不能相合。
在ABO分型实验中，技术上的错误与各
种临床情况或疾病，都能造成正反定 型之间的矛盾，当预期的正反定型不 能产生ABO抗原与抗体的互补结果时， 首先需要排除在技术上可能发生的错 误，如果细心而反复的实行对照试验 产生相同形式的凝集反应，则需要考 虑到细胞和血清的变异情况：
- 1+
--
-
- 3+
? 三、血清抗体减弱
? 原因：老年人、血液病、肿瘤等
? 特点：患者血清与标准红细胞混匀离心后，红细 胞呈分散状态位于凝胶中偏下部，呈分散下沉， 甚至沉在胶的底部。
? 处理方法，①增加反应时间；②增加血清含量； ③可把标准红细胞和患者血清在混匀后放置在 4℃冰箱中 15-30min 后离心可以证实。
液的浓度。 2.抗原抗体反应后在室温放
置30分钟，能增强标准血 清与红细胞的反应强度， 或在4℃反应30分钟。 3.将红细胞进行酶（木瓜酶、 无花果酶、胰酶）处理， 增加抗原抗体反应的敏感 性。 4.亚型.后面专讲。
范例
正定型
反定型
病人的红细胞 +
病人的血清 +试
试剂抗血清
剂红细胞
抗抗 抗
自
A
B
AB AC BC OC 身C
? 一、生理性原因引起的
ABH 抗原的发育，最早可到 37日胎龄大的胎 儿，但其强度在怀孕期间不增加。通常，新生儿 红细胞的 ABH反应性，没有成人的红细胞强。估 计新生儿所带的抗原不为数目，发现仅有成人红 细胞数的25%-50% 。另外，由于新生儿血清中 抗A及抗B出生后才开始产生，含量少、效价低。
病人的红细胞+ 病人的血清+试
? 消除方法：①红细胞表面包被有IgG抗体 时，45 ℃做放散试验解离掉红细胞表面这
些抗体后，再做血型鉴定；②红细胞表面 有冷抗体IgM时，37 ℃洗涤即可，也可用 二硫苏糖醇（DTT）等巯基化合物消除。
.
正定型
反定型
七、获得性类B抗原
1.特点：正定型AB型。红细 胞与抗A标准血清反应很 强，与抗B标准血清反应 很弱。
体内还含有母亲的血型抗体，而导致正反定型不 符。但随着新生儿的生长发育， 6个月后这种现 象逐渐消失。因此， 6个月内的新生儿一般不做 反定型，即使正反定型不符也是正常情况。
二、红细胞抗原减弱 特点： 离心后红细胞多位于
凝胶中间，抗原越弱，颗 粒越小，越靠近于凝胶的 底部。
处理方法： 1.可适当增加患者红细胞悬
疑难血型
? 血型和疑难血型的概念
? 血型是以血液抗原形式表现出来的一种遗 传形式。
? 疑难血型是指对个体因疾病、基因变异及 其他情况引起的正反定型不符，常规试剂 难以确定的血型.
? 血型的形成
在 ABO 血型系统内，几乎所有缺乏抗原的人体， 在其血清内必具有所缺乏抗原的抗体，若在红细 胞上具有抗原时，则其血清内必缺乏对应的抗体， 但这种规则偶然也有例外，血清中的抗体和细胞 上的抗原不互补，正反定型相互不支持，出现血 型难以确定。
? 六、抗体包被红细胞 血型鉴定时出现非特异性凝集，该 凝集是由红细胞表面的IgG抗体与蛋白的反应引起；或红 细胞表面的冷抗体IgM在盐水中自凝引起。
? 产生原因：①患新生儿溶血病（HDH）的婴儿、患自身 免疫性疾病、同种异体免疫性疾病的成人红细胞表面包 被有很多IgG抗体，红细胞表面的IgG抗体能与18﹪22﹪的抗-D血清和6﹪-12﹪抗-A及抗-B血清中的蛋白质 发生反应，导致这种红细胞发生非特异性凝集，而出现 血型鉴定错误；②红细胞表面被冷抗体IGM自身凝集素 （冷凝集素）包被后，红细胞在盐水中发生自身凝集现 象。
? 四、冷凝集素 由于冷凝集素存在于患者血清中， 所以在反定型时与标准红细胞ＡＢＯ红细胞均成 凝集状态，（注意区别孟买和类孟买血型以后在 亚型专讲）
? 处理方法：
1、卡式法可将已加入患者血清和标准红细胞的反 应卡置于37℃的免疫微柱孵育器孵 15min后离心， 若离心后正反定性相符可确认为冷凝集素。