交叉配血卡 操作规程
抗人球蛋白检测卡(交叉配血)操作规程
抗人球蛋白检测卡(交叉配血)标准操作规程一、目的:为规范交叉配血试验的技术操作,保证临床输血安全有效,特制定本规程。
二、适用范围:适用于输血科进行交叉配血试验。
三、职责:输血科技术人员负责交叉配血试验四、试剂及材料(一)试剂:抗人球蛋白检测卡(二)设备:专用离心机,专用孵育器,微量移液器(5-50ul)、普通离心机、玻璃或塑料试管、0.9%生理盐水等五、标本要求:(一)抽取受血者抗凝(抗凝剂为EDTA.K2)静脉血2-3ml,在3000r/min条件下离心5分钟备用。
(二)标本保存:血液样本必须密封,2-6℃保存7天。
(三)用于交叉配血必须是2-6℃保存3天以内的标本。
六、操作步骤:(一)交叉配血前,复检患者ABO和RH血型(二)在抗人球蛋白卡片上标明患者姓名(三)将受血者和献血者的红细胞和血清分离(四)取试管两支,用低离子溶液分别配患者和献血者0.5%-0.8%红细胞悬液(取分离血清后受血者底层红细胞8ul与0.9%生理盐水1mL配成0.8%受血者盐水悬液,取分离血清后供血者底层红细胞8ul 与0.9%生理盐水1mL 配成0.8%供血者盐水悬液)(五)交叉配血:主侧:患者血清50uL+献血者红细胞悬液50uL次侧:献血者血清50uL+患者红细胞悬液50uL(六)将卡放入37℃孵育箱15分钟(七)移出放入离心机5分钟,900rmp2分钟,1500rpm3分钟,取出观察结果。
七.结果观察:(一)阴性结果:主侧和次侧均不凝集,红细胞完全沉于凝胶管底部,配血相合。
(二)阳性结果:主侧和次侧均凝集,红细胞位于凝胶表面或中间,配血不相合。
(三)如果发生溶血,提示为阳性结果。
八.微柱卡式法凝集强度描述。
血库凝聚按法交叉配血操作规程及血库收发标本制度
交叉配血操作规程交叉配血试验(凝聚胺法)[原理]凝聚胺试验是利用低离子溶液促进红细胞抗原与血清(浆)中的抗体反应,再利用凝聚胺引起红细胞间非免疫性的凝集,让已有抗体(IgG)反应的红细胞间的距离缩短。
距离缩短后更能引起已反应的抗体和别的红细胞产生反应形成免疫性的凝集。
而由凝聚胺所引起的非免疫性红细胞凝集反应可被后来加入的复悬液所中和而散开,如有免疫反应,凝集就不会散开,为阳性反应。
如没有免疫反应,凝集就会散开,为阴性反应。
交叉配血试验是在盐水介质的基础上加入凝聚胺,检测供患之间是否相合,患者血清(浆)中是否含有具临床意义的红细胞异体抗体。
[试剂组成]1,洁净试管,离心机,显微镜。
2,0.85% 氯化钠溶液:准确称取氯化钠(AR)8.5 g,用蒸馏水溶解并定容至1000 ml。
试剂启用后,有效期为:二周。
3,凝聚胺试剂*1 低离子介质溶液:含葡萄糖,乙二胺四醋酸-2钠及稳定剂。
*2 凝聚胺溶液:含凝聚胺,氯化钠及稳定剂。
*3 复悬液:含柠檬酸钠,葡萄糖及稳定剂。
*4 阳性对照血清:含抗D血清,氯化钠及稳定剂。
4,抗人IgG 血清。
[试剂保存和稳定性]1.凝聚胺试剂须保存在2-25℃。
2.有效期内可使用。
3.抗人IgG血清低温冰箱保存。
复溶后放2—4℃冰箱保存。
[标本收集和准备]1.抽取受血者静脉血3-4ml(操作中小心防止红细胞破损),放入一已贴标签干燥洁净的试管中为血清管(也可用EDTA-K2抗凝血液),并将注射器中余下的少量血液配成2%红细胞生理盐水悬液,放入另一已贴标签干燥洁净的试管中为红细胞悬液管。
以上标本有效期为三天;若受血者抽取标本后,输用过血液或血液制品,且输用时间超过12 小时的,必须重新采集标本。
2.2% 红细胞悬液:用生理盐水洗涤红细胞3次。
根据下表进行红细胞悬液的配制。
悬液浓度(%)压积红细胞(滴)盐水(滴)----------------------------------------------------------------2 1 2ml(40)5 1 0.8ml(16)----------------------------------------------------------------[操作步骤]1.取出3支试管分别标记主,次及对照测试:主测管:加入病人血清(浆)2滴,再加入供血者3-5%红细胞悬液1滴,次测管:加入供血者血清(浆)2滴,再加入病人3-5%红细胞悬液1滴,对照管:加入2滴*4阳性对照血清,再加入供血者3-5%红细胞悬液1滴。
交叉配血试验标准操作规程(微柱凝胶)
交叉配血试验标准操作规程(微柱凝胶抗人球蛋白法)1. 目的为规范微柱凝胶抗人球蛋白法在交叉配血试验中的应用,保证检测结果准确及临床输血安全有效,依据《输血实验室管理程序》的要求制定本规程。
2. 适用范围适用于医疗机构输血科作交叉配血试验。
3. 职责医疗机构输血科技术人员负责对交叉配血的试验。
4. 原理红细胞血型抗原与不完全抗体(IgG),在抗人球蛋白的桥梁作用下,经一定的离心力,产生特异性免疫凝集复合物或红细胞血型抗原与完全抗体(IgM)直接产生的特异性免疫凝集复合物,被排阻在具有三维空间网状结构的凝胶表层或凝胶颗粒间隙之中,判为阳性结果,表示待检血标本中含有相应红细胞血型抗原抗体;红细胞全部沉积于凝胶孔腔底部,即判断为阴性反应,表示待检血标本中无相应的红细胞血型抗原抗体。
5. 所需设备和试剂普通离心机、微注凝胶卡专用离心机、微柱凝胶卡专用孵育器、微量移液器、抗人球蛋白微柱凝胶卡6. 检测环境条件室湿应控制在18~27℃,湿度应保持30%~70%。
7. 操作步骤7.1先将供(受)血标本制备0.5%红细胞低离子介质(LIM)悬液。
7.2撕开卡的封膜,于反应胶中主(次)侧管加供(受)者 0.5% 红细胞LIM 悬液100μl,加入受(供)血者血浆或血清25μl(或50μl)。
7.3将检测卡37℃孵育15min取出,置离心机1800r/min离心1min,2500r/min离心1min。
7.4取出,判定结果,结果判定标准按下表:(可参照结果判定示图)检验结果的解释:阳性结果,表示受(供)血者血浆或血清中含供(受)血者红细胞血型抗原相应的抗体(不完全抗体IgG或完全抗体IgM),供受血者血液不相容。
阴性结果,表示供受血者血液相容。
8. 质量控制8.1微柱凝胶试剂卡在有效期内使用,每批试剂卡在使用前用已知阴、阳性对照确认其有效性。
8.1试剂质量控制方法8.1.1即作阴、阳性对照试验:撕开检测卡的封膜,于2个反应腔中分别加入已致敏IgG抗D的1%O型RhD(+)红细胞LIM悬液50μl、健康者1%O型RhD(+)红细胞LIM悬液50μl。
交叉配血操作规程
交叉配血操作规程交叉配血是一种常用的动物繁殖方法,通过将两个不同的个体进行交叉配对,以获得具有理想遗传特征的后代。
下面是一份交叉配血操作规程,详细介绍了交叉配血的具体步骤和注意事项。
一、前期准备1.确定需要交叉配血的两个个体,分别为雄性和雌性个体。
2.对选定的个体进行健康检查和基因型鉴定,确保它们身体健康且没有携带任何遗传疾病或缺陷。
3.确定交叉配血的时间和地点,保持环境整洁,避免外部因素对实验造成干扰。
4.准备必要的实验器材和试剂,包括培养皿、显微镜、匀浆器、移液器、生理盐水等。
二、交叉配血操作步骤1.检查个体性别:使用显微镜或基因鉴定方法,确认选定个体的性别。
2.打开个体体腔:以手术刀或麻醉剂等方法,在个体体腔中打开一个小孔,以便于之后的操作。
3.收集个体血液:用匀浆器缓慢吸取个体血液,将其置于培养皿中。
4.检查血液凝固情况:观察个体血液是否凝固,若已凝固则将其舍弃,重新收集血液。
5.将雄性血液与雌性血液混合:将取自雄性个体的血液与取自雌性个体的血液混合,保持培养皿中的血液充分混合。
6.观察交配反应:观察混合后的血液是否发生凝集或聚集,若出现凝集或聚集现象,说明雄性与雌性个体之间存在交配反应。
7.鉴定交配结果:使用显微镜或试纸等方法,对交配结果进行鉴定和记录。
8.存储交配后的血液:若需要保存交配后的血液供后续研究使用,将其分装于合适的容器中,并存放于低温环境中。
9.清理实验现场:将使用过的器材和材料进行清理和消毒,保持实验现场整洁。
三、注意事项1.交叉配血操作需要在无菌环境下进行,以避免外部微生物对实验的污染。
2.个体血液的收集应该尽量避免暴露在空气中,以免造成血液的凝固或氧化。
3.操作过程中要注意个体的安全,减少对个体的伤害。
4.需要保持操作的准确性和规范性,避免实验中出现误差。
5.实验后要对结果进行及时记录和分析,以便下一步的研究。
6.学习和了解相关法规和伦理要求,确保在动物实验中符合相关规定。
交叉配血操作规程
交叉配血操作规程交叉配血操作规程交叉配血是一项重要的医学检验技术,用于确保输血的安全和有效性。
以下是交叉配血操作的规程,以确保正确而高效的操作过程。
1.准备工作:(1)确保操作室内环境整洁、无菌,并保持适宜的温度和湿度。
(2)检查所需仪器和试剂的完整性和有效期,并进行必要的校准和验证。
(3)配备所需的个人防护装备,包括手套、口罩、护目镜和无菌衣物。
2.确定受试者和供者的身份:(1)核对受试者和供者的身份信息,包括姓名、年龄、性别和住院号等。
(2)核对受试者和供者的血样标本标签与申请单上的信息是否一致。
3.采集血样:(1)选择适当的采血方式,如肘窝采血或掌指采血。
(2)使用无菌操作的方法,采集受试者和供者的血样,遵循正确的采血顺序和技术要求。
4.制备试验材料:(1)准备所需的试剂和试管,并检查其完整性和有效期。
(2)按照操作要求,将试剂重新悬浮或稀释至规定的浓度,并确保无菌操作。
(3)标记试管上的信息以及反应区域。
5.进行试验操作:(1)取适量的受试者和供者的血液样本,加入相应试管中,并进行试管的混匀。
(2)将试管置于恒温水浴中进行适当的孵育和反应时间,注意控制温度和时间。
(3)根据试管的反应结果,判断受试者和供者的血型是否相符,即是否适宜进行输血。
6.记录和报告结果:(1)将试验结果准确记录在相应的记录表中,包括受试者和供者的血型信息和交叉配血结果。
(2)及时向临床医生报告交叉配血结果,并协助其进行输血决策和操作。
7.清理消毒:(1)完成试验后,及时清理试验台面和使用的试剂和试管。
(2)将用过的试剂和试管进行正确的分类,处理或清洗消毒。
(3)将工作台面进行清洁消毒,保持操作室内的卫生和无菌状态。
8.质量控制和评估:(1)建立严格的质量控制和质量评估制度,对交叉配血操作过程进行监控和评估。
(2)定期检查和校准操作所使用的仪器和试剂,确保其准确性和可靠性。
(3)进行内部和外部质量控制试验,并根据结果进行必要的改进和调整。
血液交叉配血试验标准操作规程
血液交叉配血试验标准操作规程血液交叉配血试验标准操作程序交叉配血主要是检查受血者血清中有无破坏供血者红细胞的抗体,故受血者血清加供血者红细胞相配的一管称为“主侧”;供血者血清加受血者红细胞相配的一管称为“次侧”,两者合称交叉配血。
交叉配血试验又称不配合性试验,是确保患者安全输血必不可少的试验,完整的操作规程应包括:?查阅受血者以前的血型检查记录,如与这次检查结果有所不同,应及时分析原因;?对收到的受血者血样应作ABO正反定型,Rh血型和其他血型检查以及血型抗体检测和鉴定;?选择预先进行血型检查的合格供血者作交叉配血试验。
一、配血要求1( 受血者配血试验的血样(血型复查)必须是输血前三天之内的;2(核对病人资料:核对输血申请单、受血者血样、病历三者,其内容包括:患者姓名、性别、年龄、科室床号、住院号、血型(原始血常规血型和血型复查中血型)、用血品种、用血量等,必须正确无误;3(核对血液:血液完整性、血液标签、血液质量;4(核对取血凭证:按临床(取血凭证)实际用血品种、量进行配发血;5(配血前,先复查受血者和供血者ABO血型(正、反定型)、Rh(D)血型和抗筛,并报告其结果;6(在电子病历或急诊医生工作站中,检查临床输血五项的执行情况;7(输注全血、浓缩红细胞、洗涤红细胞、浓缩白细胞等患者应进行交叉配血试验,其方法:采用盐水配血试验、凝聚胺法。
二、盐水配血试验标准操作程序【方法原理】本法是目前最常用的配血方法,可以发现临床上最重要的ABO不配合性。
当受血者血清(浆)和供血者红细胞经混合并离心后,如有ABO不配合问题,就会很快显示出来。
【标本采集和处理】1(标本采集:常规静脉采血3ml于EDTA.K2。
2(标本采取时间:要求受检者血样一定要在输血前48h(抗筛是48h)内采集,血样必须是新近的,无溶血现象。
【试剂】1(抗A抗B血型定型试剂(单克隆抗体长春博德)2(Anti-D (IgM) Biotest。
血型鉴定、交叉配血操作规程
⾎型鉴定、交叉配⾎操作规程ABO、Rh-D⾎型鉴定操作规程1.⽬的:规范ABO、Rh-D检测的操作过程2. 标本采集:静脉采⾎2ml抗凝⾎,避免溶⾎试剂3. 试剂:长春博讯⽣物技术有限责任公司4.⽅法原理【原理】:标准⾎清中的完全抗体(lgM)抗A、抗B、和抗D能和红细胞表⾯相应的抗原在盐⽔介质中发⽣特异性的凝集反应。
根据红细胞凝聚类型可鉴别出A、B、O、AB四型和RHD阴性或阳性。
5. 操作:⼀、玻⽚法(⼀般只能做正定型)【正定型】:1、取⼀张玻⽚,⽤蜡笔或记号笔将其分为三等份,从左到右每⼀等份左上⾓标明A、B、D,2、对应加⼊抗A和抗B抗D标准⾎清⼀滴;3、分别加PC(患者10—15%红细胞悬液);4、⽤洁净⽵签将试剂和红细胞充分混匀,混合物约2cm2⼤⼩;5、轻轻地连续倾斜转动玻⽚2—5分钟,观察并记录; 【解释】:A端凝集为A型⾎;B端凝集为B型⾎;A、B 端均凝集则为AB型;A、B端均不凝集则为O型;D端凝集则为RH阳性者,⽆凝集则为RH阴性。
备注:玻⽚法可作为ABO⾎型初筛或复检;不适⽤于抗体鉴定和交叉配⾎;不适合检测ABO亚型。
⼆、试管法(盐⽔介质)【原理】:标准的A型和B型红细胞能和受检者⾎清(⾎浆)中相应的抗体发⽣特异性结合,形成⾁眼可见的凝集反应,从⽽可推断出受检者的⾎型。
【材料】:1、标准A型和B型红细胞悬液(浓度4%,商品有售,亦可⾃⾏新鲜配制);2、受试者⾎清或⾎清;3、洁净康⽒试管。
【正定型】:1、取⼆⽀洁净试管分别记上抗A和抗B;2、对应加⼊抗A和抗B⾎清1滴;3、分别加⼊病⼈红细胞悬液1滴(浓度为2%-5%);4、混匀,室温放置5分钟,1000rpm离⼼1分钟,取出观察结果【解释】:轻摇试管,检查是否凝集,抗A、抗B管均凝集,受试者为AB型⾎;抗A、抗B管均不凝集,则为O 型⾎;抗A管凝集则为A型⾎;抗B管凝集则为B型⾎。
【反定型】:1、取⼆⽀试管分别记上AC和BC;2、分别加⼊病⼈⾎清;3、对应加⼊A和B型试剂红细胞;4、混匀室温放置5分钟,1000rpm离⼼1分钟,取出观察结果;【解释】:⾸先检查上清液有⽆溶⾎,然后轻摇试管,检查是否凝集,A、B管均凝集受试者为O型⾎;A、B管均不凝集则为AB型⾎;A管凝集则为B型⾎;B管凝集则为A型⾎。
交叉配血标准操作规程
交叉配血标准操作规程(一)检验目的检测供血者与受血者之间的输血相容性,包括主侧配血与次侧配血,确保输血安全。
(二)检验原理1.凝聚胺法利用多聚季胺盐类——凝聚胺携带很多正电荷,中和红细胞表面的负电荷,使红细胞之间距离减少,引起正常红细胞可逆性凝集。
无抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集,当加入中和液后,则凝集消散,而抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集,则不能消散,以此来判断供、受者间血液的相容性。
2.微柱凝胶法微柱凝胶卡的微管中装填有葡聚糖凝胶颗粒和抗人球蛋白试剂,红细胞表面抗原与其对应的IgG抗体结合以后,在离心力的作用下不断向管底沉降,并与抗人球蛋白结合形成红细胞凝集,凝胶颗粒具有分子筛的作用,可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过凝胶颗粒,使其悬浮在凝胶上端,未凝集的红细胞则可以通过凝胶颗粒到达微管底部。
3.玻璃珠微柱法微柱卡的每一个微管中装填有直径均一的玻璃微珠和抗人球蛋白试剂(抗-IgG和抗补体C3),红细胞表面抗原与其对应的IgG抗体结合以后,在离心力的作用下不断向管底沉降,并与抗人球蛋白结合形成红细胞凝集,玻璃微珠具有分子筛的作用,可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过玻璃微珠,使其悬浮在玻璃微珠层的上端,未凝集的红细胞则可以通过玻璃微珠之间的微小空隙到达微管底部。
(三)适用范围适用于手工凝聚胺法、全自动微柱凝胶法、全自动玻璃珠微柱法交叉配血试验。
(四)设备性能参数各种交叉配血检测系统性能指标参见相应检测系统说明书。
(五)器材与试剂1.器材KA-2200血清学专用离心机、B600-A型低速离心机、WADiana全自动血型配血系统、SWING-SAXO血型配血系统、Techno全自动血型配血系统、Othro Au-toVuelnnova全自动血型及配血系统、阅片灯箱、光学显微镜、塑料软试管、塑料硬质试管(100m m×l2mm和75m m ×l2mm)、试管架、一次性塑料滴管、记号笔。
输血科微柱凝胶法交叉配血试验标准操作规程
输血科微柱凝胶法交叉配血试验标准操作规程1目的建立微柱凝胶抗人球蛋白检测卡交叉配血试验标准操作规程,确保微柱凝胶抗人球蛋白检测卡交叉配血试验操作的准确性和规范性。
2原理微柱凝胶卡采用分子排阻层析原理在微管中装填有葡聚糖凝胶颗粒和抗人球蛋白试剂,凝胶颗粒具有分子筛的作用,可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过凝胶颗粒,使其悬浮在凝胶颗粒中,而未凝集的红细胞则可以通过凝胶颗粒到达微管底部。
3适用范围适用于建立微柱凝胶抗人球蛋白检测卡交叉配血试验4操作程序4.1试剂:4.1.10.9%生理盐水;4.1.2微柱凝胶抗人球蛋白交叉配血试验检测卡4.2器材:4.2.1LDZ4-1.2台式普通离心机4.2.2微柱凝胶法专用孵育箱:FYQ型免疫微柱孵育器4.2.3微柱凝胶法专用离心分离机:TD-3A型血型血清学离心机4.2.4IOU1、50Ul的微量移液器。
4.2.5玻璃或塑料试管(IOXI2mm或12X15mm)4.2.6一次性枪头4.3样本要求:抗凝全血3ml,本实验室为EDTA-K2抗凝。
4.4方法4.4.1选择微柱凝胶抗人球蛋白交叉配血试验检测卡,观察外观,如有干胶、杂质、气泡不可使用,然后将卡平行至室温(15°C-28℃),平衡后用TD-3A型血型血清学离心机离心2-3min o做好标记:填写病人姓名、血型和配血日期,去除卡中微柱凝胶管上的密封铝膜。
4.4.2制备红细胞悬液:分别将受血者及供血者的抗凝血标本使用LDZ4-1.2台式普通离心机IoOOXg60SeC(3479转/分离心60SeC),将红细胞吸出后,用0.9%生理盐水稀释成1%的溶液【10UI红细胞沉淀溶于InIIO.9%生理盐水中工取50Ul1%受血者或供血者红细胞悬液加于相应的微管。
4.4.3将已达室温的待检的全血标本使用LDZ4-1.2台式普通离心机离心IOOOXg2-3min(3479转/分离心2-3min),确保加入反应体系中的血浆不含有任何颗粒性成分,取50UI受血者及供血者血浆加于相应的微管。
交叉配血操作规程
1.目的:检查受血者与献血者的抗原及抗体成分是否相容,以保证安全输血。
2.要求:要求全科人员能够熟练掌握原理及操作。
3.原理:交叉配血试验分“主侧”交叉配血试验即病人血清与献血者红细胞相容性试验;“次侧”交叉配血试验即献血者血清与病人红细胞的相容性试验。
只用盐水介质进行交叉配血是有危险性,因为不完全抗体(多是IgG类不规则的血型抗体),所导致的受血者和献血员血型不相容,只是用盐水交叉配血试验检测不出来,而临床中遇到的这类血型不完全抗体所导致的血型不相容输血反应,可能是严重的甚至是致死性的,在临床交叉配血试验中,必须常规地应用能够检测出这类抗体的方法,如聚凝胺;抗人球蛋白等方法。
4.仪器试剂和材料4.1 抗A、抗B、抗D血清4.2 病人血样,供血者血样4.3 聚凝胺试剂4.4 抗人球蛋白试剂5.操作方法5.1 首先查看输血申请单,核对姓名、科室、床号等内容,无误后方可进行配血。
★5.2盐水介质配血法(1)首先对患者血样充分离心后,吸出血清于另一试管中并标记。
(2)取试管12支,分别标记患者细胞、患者抗A、抗B、抗D、A C、BC、O C、主侧、次侧、献血者抗A、抗B、献血者细胞管。
对患者血样进行ABO血型(正反定性)和Rh血型检定,主侧管加受血者血清2滴,献血者2%~5%红细胞悬液1滴;次侧管加献血者血清2滴,受血者2%~5%红细胞悬液1滴,对献血者血辫进行ABO 血型复查,以1000g离心15秒,观察结果6.结果判断ABO同型配血,主侧和次侧均无凝集及溶血现象。
为盐水介质配血结果阴性,可将原标本接着做聚凝胺法或抗人球蛋白法配血。
6.1聚凝胺法:具体方法见聚凝胺法。
6.2 抗人球蛋白法:具体方法见抗人球法。
7.附注7.1冬季室温较低,应将试管保温以防止冷凝集引起的凝集反应。
7.2献血者血型因初复检已确定,可只做正定型,但务必要做。
7.3患者血清中纤维蛋白没完全析出时,要放置到37℃水浴箱中15分钟,然后再离心。
交叉配血试验操作规程
交叉配血试验操作规程实验目的:确定供血者与受血者之间的血型是否相容,以保证安全有效地进行输血。
实验材料与试剂:1.供血者和受血者的全血样本。
2.ABO血型试剂盒,包括抗A、抗B、抗Rh(D)血清。
实验步骤:1.准备工作:a.标记试管,分别标明供血者和受血者的编号。
b.使用洁净试管架,确保试管没有交叉污染。
c.佩戴防护手套和口罩,以防止交叉污染和呼吸道感染。
2.预处理全血样本:a.使用无菌注射器,各取一定量供血者和受血者全血样本,将样本分别转移至标记好的试管中。
b. 转移后,每个试管中的全血样本约为1ml。
3.加入抗A血清:a.取一滴抗A血清,滴于供血者全血样本所在的试管中。
b.缓慢地旋转试管,以使抗A血清与供血者全血充分混合。
c.观察试管中的反应,如果出现凝集现象,则表示供血者为A型血。
4.加入抗B血清:a.与步骤3相同,取一滴抗B血清加入供血者全血样本所在的试管中。
b.缓慢地旋转试管,以使抗B血清与供血者全血充分混合。
c.观察试管中的反应,如果出现凝集现象,则表示供血者为B型血。
5.加入抗Rh(D)血清:a.与步骤3相同,取一滴抗Rh(D)血清加入供血者全血样本所在的试管中。
b.缓慢地旋转试管,以使抗Rh(D)血清与供血者全血充分混合。
c.观察试管中的反应,如果出现凝集现象,则表示供血者为Rh(D)阳性。
6.重复步骤3-5,对受血者的全血样本进行相同的处理。
观察试管中的反应,得出受血者的血型。
7.判读血型相容性:a.对比供血者和受血者的血型结果,判断是否相容。
如供血者为A型血,受血者为B型血,则血型不相容。
b.如果供血者和受血者的血型相同或相容,则可以进行输血。
8.清洗试管和工作台:a.使用适当的消毒剂清洗使用过的试管。
b.使用消毒剂擦拭工作台面,确保无交叉污染。
注意事项:1.操作过程中要避免交叉污染,使用无菌操作技术。
2.试剂和样本的使用要按照规定的剂量和比例。
3.所有试验应在合适的温度下进行,通常为25-30摄氏度。
09 微柱凝胶法交叉配血操作规程---作业指导书
1.1 微柱凝胶试剂卡的准备观察外观,如有干胶、杂质、气泡不可使用,将卡放置平衡至室温,使用前置离心机3000r/min 1 min离心。
1.2 检测标本的准备
1.2.1 待检标本的准备:将受(供)血者全血标本,离心分离红细胞与血浆(血清),取上清(该上清不得有絮状物或沉淀)。
1.2.2 红细胞悬液的制备:将受(供)血者标本制备1%红细胞低离子介质(LIM)悬液。
操作步骤
2.1 将准备好的抗人球蛋白检测卡做好标记(主、次侧)。
2.2 撕开卡封膜,于反应腔中主侧管加供血者1% 红细胞LIM悬液50μl,加受血者血浆清)50μl;于反应腔中次侧管加受血者1% 红细胞LIM悬液50μl,加供血者血浆(血清)μl
2.3 将加样后的检测卡,置37℃中孵育15分钟。
3.4 细菌污染、纤维蛋白析出,抗凝不佳的血,可产生假阳性。
3.5 离心速度过快、时间过长,试剂失效等因素均可导致假阴性。
3.6 大多数抗体达到10-30 min即可致敏相应红细胞,但Jk、Fy抗体孵育时间需≥30min。
交叉配血操作规程
交叉配血操作规程交叉配血是一种常见的医学操作,主要用于确定血液供应者与受血者之间的血型是否相容。
在进行交叉配血之前,需要先进行ABO血型鉴定和RH因子检测,从而确定受血者与供血者的血型。
交叉配血的操作规程如下:1.准备工作:在进行交叉配血之前,需要准备好一系列的试剂和设备。
试剂包括正反A、B血清和RH血清,设备包括血凝管、离心机等。
2.受血者样本采集:首先,采集受血者的静脉全血样本。
采血时要注意操作的无菌性,避免交叉感染的发生。
采集的样本应放入无抗凝剂的血凝管中,用枝式滴管将血样加入试管中。
3.室温离心法:将采集到的受血者全血样本离心5分钟。
离心后,血液分为细胞层、凝集层和血浆。
血浆层较为清亮,可由离心机中小孔取出,放入另一无菌试管中。
4.ABO血型鉴定:取一定量的受血者血浆,分别加入正反A血清和B血清。
轻轻摇晃试管,观察是否出现凝集现象。
若加A血清后出现凝集,说明受血者为A血型;若加B血清后出现凝集,说明受血者为B血型;若两者都出现凝集,说明受血者为AB血型;若都不出现凝集,说明受血者为O血型。
5.RH因子检测:取一定量的受血者血浆,加入RH血清中。
轻轻摇晃试管,观察是否出现凝集现象。
若加RH血清后出现凝集,说明受血者为RH阳性;若不出现凝集,说明受血者为RH阴性。
6.供血者样本采集:按照相同的方法采集供血者的全血样本,并离心分离血浆。
7.交叉配血操作:将供血者的血浆少量加入受血者的血浆中,轻轻摇晃试管。
观察是否出现凝集现象。
若出现凝集,说明供血者的血浆中存在对受血者的免疫反应,不适合进行输血操作。
若不出现凝集,说明供血者与受血者的血型相容。
8.结果判断与报告:根据交叉配血的结果,判断供血者与受血者之间的血型是否相容。
将结果记录在交叉配血报告中,并进行签字确认。
交叉配血操作规程
交叉配血操作规程
《交叉配血操作规程》
交叉配血是一项重要的医疗技术,可以帮助需要输血的患者找到适合的血型。
为了确保交叉配血的准确性和安全性,医院和血库都有一套严格的操作规程。
首先,医务人员需要确认患者的血型,并进行全面的诊断。
在得到患者的血型信息后,医生会将其输入到计算机系统中,系统会自动筛选出适合患者血型的供血者信息。
医务人员会根据系统提供的信息,联系相关的供血者,并进行进一步的筛选。
接下来,医务人员会对供血者的血样进行复核,以确保其血型信息准确无误。
在进一步确认患者和供血者的血型信息后,医务人员会进行血液的交叉配型实验。
这一步是非常重要的,可以确保输血时不会出现不兼容的情况。
一旦获得了血液交叉配型实验的结果,医务人员会进行最后的确认工作。
他们会对患者的身体状况进行全面的评估,确保他们可以承受输血手术。
同时,医务人员还会对供血者的身体健康状况进行审查,以确保他们的血液是安全的。
最后,医务人员会将合适的血液输送到患者的身体中。
在输血过程中,医务人员会严格遵守手术操作规程,确保输血的安全性和有效性。
交叉配血操作规程的严格执行,可以大大降低输血过程中出现
意外情况的概率。
因此,医院和血库都会严格遵守这些规程,以确保输血过程的安全和有效。
交叉配血卡操作流程
抗人球蛋白交叉配血卡标准操作程序
一、准备工作
(一)微柱凝胶试剂卡的准备:观察外观,如有干胶、杂质、气泡不可使用,之后将卡放置室温(18-25
℃)平衡,再用专用离心机离心5分钟。
(二)检测标本的准备:
1.红细胞悬液的制备:将受血者与献血者的红细胞和血浆分离,各取其压积红细胞10微升,分别加
入含1.0毫升低离子强度盐溶液的两个试管中,外观应为均匀淡红色,无絮状物
和血块。
2.血浆标本的制备:用EDTA抗凝管采集被检对象静脉血,3000r/min 离心3min 或3500r/min 离心2min取上清(该上清不得有絮状物或沉淀)。
二、操作步骤
1.将准备好的抗人球蛋白交叉配血卡做好标记。
2.将50μl献血者红细胞悬液与50μl受血者血浆先后加入主侧管中。
3.将50μl受血者红细胞悬液与50μl献血者血浆先后加入次侧管中。
4.加样后的试剂卡,置37℃孵育器中孵育15分钟。
5.使用专用离心机离心5分钟(900rpm2分钟,1500 rpm3分钟),取出肉眼观察结果。
结果判定:
1.阴性结果:红细胞完全沉降于凝胶管底部,表明受血者与献血者血型相合。
2.阳性结果:红细胞抗原与相应抗体在微柱凝胶中形成的特异性抗原抗体复合物浮
在凝胶表面或胶中,表明受血者与献血者血型不相合。
交叉配血标准操作规程
交叉配血标准操作规程(抗人球蛋白法)一、目的:为规范交叉配血试验的技术操作,保证临床输血安全有效,特制定本规程。
二、适用范围适用于输血科进行交叉配血试验。
三、职责输血科技术人员负责交叉配血试验。
四、试剂及材料(一)试剂:抗人球蛋白检测卡(西班牙Diagnostic Grifols,公司生产)(二)设备:戴安娜专用离心机(型号:DG SPIN)、戴安娜专用孵育器(型号:DG THERM)、微量移液器(5-50ul)、普通离心机、玻璃试管、生理盐水等五、标本要求:(一)抽取受血者抗凝(抗凝剂为)静脉血2-3ml, 在3000r/min条件下离心5分钟备用。
(二)标本保存:血液样本必须密封,2-8℃保存7天。
(三)用于交叉配血必须是2-8℃保存3天以内的标本。
六、操作步骤:(一)交叉配血前,先复检患者和献血者ABO和Rh血型。
(二)实验前将未开的抗人球蛋白检测卡放置于DG SPIN专用离心机离心9分钟左右,取出待用。
(三)在抗人球蛋白检测卡上标明患者姓名或住院号、主侧和次侧,撕掉配血卡上的封条。
(四)取试管两支,分别配制患者和献血者红细胞悬液(浓度为1%)待用。
(五)交叉配血:主侧:用定量加样器加入献血者1%的红细胞悬液50ul +患者血清或血浆25ul ;次侧:用定量加样器加入患者1%的红细胞悬液50ul + 献血者血浆25ul。
(六)将卡放入DG THERM孵育箱15分钟,移出放入离心机9分钟,取出观察结果。
七、结果观察:(一)主侧和次侧均不凝集,细胞沉于反应卡的底部,配血相合,可以输血(二)主侧或次侧出现凝集,细胞悬挂于卡的中间或上部,配血不相合,不可以输血(三)若输注血液为红细胞,则只需主侧配血相合。
微柱卡式法凝集强度描述。
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抗人球蛋白交叉配血操作规程
[样本要求]:血样用枸橼酸钠或EDTA等抗凝,用血清代替血浆进行检测时,用前离心,2000g×10min,防止纤维蛋白干扰反应结果。
[样本准备]:将供者红细胞和受者红细胞各配制为1%生理盐水悬液。
将受血者与献血者的红细胞血清分离;
[配套试剂]:抗人球蛋白交叉配血检测卡,低离子介质
溶液
[实验步骤]:
(1) 试剂卡室温平衡,离心一次,标记编号;
(2) 将配血的标本1 500 g离心5分钟;
(3) 主侧加入用低离子液稀释至1%的供者红细胞50
UL,受血者血浆(或血清)50 UL;次侧加入用低离子
液稀释至1%的受血者的红细胞50 UL,供者血浆(或血清)50 UL ;
(4)将配血卡臵37 ℃专用孵育器孵育15分钟;
(5)使用专用离心机离心5分钟(900r/min2分钟、1500r/min,3分钟),判定结果。
[结果判定]:
一.阳性(+ ):红细胞浮在凝胶表面或部分散入于胶中(结果大于等于1+),表示配血不成功,
需进一步检测。
双相(d.p)既有阳性结果,同时也有阴性结果。
溶血(Hemo):红细胞溶解,作为阳性结果对待。
二.阴性(-):红细胞沉于微柱凝胶的尖底部,表示配血成功。
备注:1.非特异性凝集:在配血过程中还会出现一些非特异性凝集的现象。
当血液标本中含有较
多纤维蛋白原时,配血会出现阳性的结果,可用以下办法去除血清中的纤维蛋白:(1)轻轻摇动试
管,弃去纤维蛋白网;(2)把血标本臵37 ℃中水浴,待血清自动析出或水浴后离心,将纤维蛋白
弃去。
如果患者的血液中含有较高的冷凝集素,在春、秋、冬三季用凝聚胺配血会出现凝集的现
象,但凝集在37 ℃水浴中会解离。
这种患者配血是可将红细胞用37 ℃的生理盐水洗涤红细胞3
次,再在37 ℃下操作,这样就可以排除冷凝集素的影响。
2.特异性凝集:当次侧出现凝集时,要考虑为受血者的红细胞已致敏或其他血型(A,B或AB
型)的受血者接受O型血,可使用洗涤红细胞。
当主侧出现凝集时,可考虑以下情况:(1)配血
标本被细菌污染;(2)受血者与献血者血型不合;(3)受血者体内产生不规则抗体。