铁皮石斛种子的组织培养

合集下载

铁皮石斛组织培养研究进展组织培养.

铁皮石斛组织培养研究进展1、1 种子萌发1.2 基本培养基铁皮石斛种子在N6，改良N6，MS , 1 / 2 MS , SH 、KS 、VW 、KundsonC , 1 / 2N6，White等培养基上均可萌发。

赵天榜等比较风、MS 等14 种培养基对铁皮石斛种胚成苗率的影响，除残外，所有的基本培养基均优于其减半培养基，其中以N6最好，SH 、Kn 、MS 次之，l /2MS 、1 / 2 Vw 最差。

曾宋君等田将铁皮石斛种子在SH 、改良N6、MS 、KS 、VW 、KundsonC 培养基中培养，得出最适培养基为改良N6或自制PT 培养基。

罗吉凤等比较了*** / 2MS 、1 / 2 N6和White 培养基对铁皮石斛种子萌发的影响，30d 种子发芽率均达到95 % ，但1 / 2MS 培养基上所萌发的原球茎较大。

1.3 激素在培养基中添加一定浓度的NAA 可促进种子的萌发，浓度以0.2 一0.5mg/L最适合胚的萌发和生长，过高起抑制作用。

2 , 4-D对胚的萌发起抑制作用。

6 一BA 对胚萌发后的生长起抑制作用。

KT 、IAA对胚萌发和成苗的影响不大，当浓度超过1mg/L 时，对胚萌发和成苗起抑制作用。

ABA 有抑制种子萌发和抑制植物生长的作用，但张铭等发现ABA 能显著提高铁皮石斛原球茎的质量，浓度以0.5mg/L为最佳。

1.4 天然添加物在培养基中添加适量的马铃薯汁、香蕉汁、椰乳可促进铁皮石斛种胚的萌发，但张玲等认为香蕉提取物和椰乳对种子萌发和正常发育有不利影响，干扰其正常发育过程。

1.5 炭源在组培过程中适当添加活性炭，可以吸附代谢过程中产生的废弃物，防止组织褐变，并刺激胚胎的发生与生根，可加人2 ％蔗糖。

曾宋君等在改良N6＋NAA 0.2mg/L 的最适培养基上，发现以白糖、片糖为炭源时，胚萌发和成苗的效果比蔗糖好，这可能是白糖、片糖中含有适合胚萌发和成苗的矿质元素2 原球茎增殖2.1 基本培养基铁皮石斛原球茎增殖可以1/2 MS，MS等作为基本培养基。

铁皮石斛种苗组培实施方案

铁皮石斛种苗组培实施方案铁皮石斛（Dendrobium）是一种重要的兰科植物，具有多种药用价值，被广泛用于中药材生产和养生保健。

其种苗组培是一种快速繁殖的方法，可以大大提高植物的繁殖效率和质量。

下面将介绍铁皮石斛种苗组培的实施方案。

一、材料准备1. 无菌种子：选择外观完整、无病害的铁皮石斛种子。

2. 培养基：配制适合铁皮石斛生长的培养基，包括营养物质、植物生长调节物质等。

3. 器具：培养瓶、无菌操作台、无菌手套、无菌培养室等。

二、种子消毒1. 将铁皮石斛种子浸泡于75%酒精中消毒5分钟，然后用无菌水冲洗3次。

2. 将种子浸泡于含有0.1%过氧化氢的无菌水中消毒20分钟，然后用无菌水冲洗3次。

3. 最后将种子浸泡于含有0.1%漂白粉的无菌水中消毒15分钟，然后用无菌水冲洗3次。

三、组培操作1. 在无菌操作台上进行操作，先将培养瓶中的培养基加热至121摄氏度，压力15磅，持续20分钟，使其无菌化。

2. 将消毒处理好的种子移入无菌培养瓶中，每瓶放入适量的种子。

3. 将培养瓶密封，放入无菌培养室中，温度控制在25-28摄氏度，光照强度控制在3000-5000勒克斯，光照时间为12小时。

四、生长管理1. 定期观察种苗生长情况，发现有病虫害立即进行处理。

2. 每隔一周更换一次培养基，保持培养基的新鲜和养分充足。

3. 控制培养室的温度、湿度和光照，提供良好的生长环境。

五、移栽1. 当种苗长到一定高度时，可以进行移栽。

将种苗移入含有适量营养物质的培养基中，继续进行培养。

2. 移栽后继续进行生长管理，直至种苗长成成熟植株。

通过以上实施方案，可以实现铁皮石斛种苗的组培繁殖，提高植物繁殖效率，为铁皮石斛的种植生产提供了可行的技术方案。

希望这些内容对您有所帮助。

铁皮石斛组织培养培训材料

限制
技术要求高、成本较高、可能存在变异和遗传稳定性问题等。
02
铁皮石斛组织培养基本流程
外植体的选择与处理
外植体的选择
选择健康、无病虫害的铁皮石斛植株作为外植体，如茎尖、叶片等。
外植体的处理
对外植体进行清洗、消毒、切割等处理，以去除表面污垢和微生物。
无菌操作技术
01
02
03
无菌操作环境
在无菌操作室内进行组织培养操作，确保环境清洁无菌。
光照与温度控制
总结词
光照和温度是影响铁皮石斛组织培养的重要环境因素。
详细描述
适宜的光照强度、光照时间和温度能够促进铁皮石斛组织的生长和分化。在不同的生长阶段，需要调整光照和温度条件，以满足铁皮石斛生长的需求。
激素的种类与浓度
总结词
激素的种类和浓度是调控铁皮石斛组织培养的关键因素。
详细描述
在铁皮石斛组织培养过程中，需要添加适量的激素，如生长素和细胞分裂素，以促进细胞的分裂和生长。同时，激素的种类和浓度也需要根据实验需求进行选择和调整，以达到最佳的组培效果。
4. 将接种好的培养皿放置在适宜的温度和湿度条件下进行培养。
实验操作步骤与注意事项
注意事项 1. 在操作过程中要保持无菌环境，避免交叉污染。
2. 取材时要选择健康、无病虫害的植株，并确保取下的组织健康无病。
实验操作步骤与注意事项
01
3. 培养基的成分和pH值要适宜，以保证组织的正常生长。
02
病虫害防治
总结词
病虫害是影响铁皮石斛组织培养的重要因素，防治病虫害是组培过程中的重要环节。
VS
详细描述
在铁皮石斛组织培养过程中，可能会受到细菌、真菌等病原体的侵害，以及害虫的侵害。为了防治病虫害，需要定期检查组培苗的生长情况，及时发现并处理病虫害，同时采取生物、化学、物理等多种防治方法进行综合防治。

铁皮石斛的组织培植

铁皮石斛的组织培植简介铁皮石斛（Dendrobium officinale）是一种珍贵的中药材，被公认为具有滋补养生的功效。

由于其野生资源减少，组织培植成为了其繁殖的重要途径。

本文将介绍铁皮石斛的组织培植方法，用于指导相关研究和实践。

材料与方法1. 无菌实验室条件：培养室温度为25℃，相对湿度为60%-70%，光照强度为3000-4000lx。

2. 培养基配方：- MS培养基：含有葡萄糖（30g/L）、琼脂（8g/L）、pH值调整到5.8。

- 添加生长调节剂：添加6-苄氨基酸（0.1mg/L）和吲哚-3-乙酸（0.5mg/L）。

过程1. 选取健康无病的铁皮石斛茎段作为外植体，将其进行消毒处理。

使用70%酒精浸泡2分钟，随后用0.1%高锰酸钾溶液浸泡10分钟，最后用无菌蒸馏水冲洗3次。

2. 切取消毒后的茎段偏上部位的小芽组织，每个芽组织含有1-2个小芽。

3. 将切取的芽组织置于含有MS培养基和生长调节剂的培养瓶中。

4. 培养瓶密封并置于培养室中，进行组织培养。

每周移植一次，移至新的含有培养基的培养瓶中。

结果与讨论经过适当的组织培养时间，铁皮石斛的小芽可以快速生长并分化出根系。

在合适的培养条件下，每个芽组织可以发育成为整株植物，从而实现大规模繁殖。

值得注意的是，在铁皮石斛的组织培植过程中，应加强对培养基和环境条件的控制。

培养基中添加的生长调节剂和孕育液质量对结果有重要影响。

同时，无菌操作的严格执行也是保证培植过程成功的关键。

结论铁皮石斛的组织培植方法是一种有效的繁殖途径，能够满足市场需求，并促进可持续发展。

通过合理控制培养基配方和环境条件，可以实现铁皮石斛的大规模繁殖与种植，为相关产业的发展提供有力保障。

这一研究对于进一步深入了解铁皮石斛的生物学特性和开发利用具有重要意义。

铁皮石斛的组织培养技术

铁皮石斛的组织培养技术简介铁皮石斛（Scientific name: Dendrobium officinale），是一种珍贵的药用植物，在中医药中有着悠久的历史和广泛应用。

铁皮石斛的组织培养技术是指利用无菌培养方法，通过细胞分裂和再生，培育大量优质的植株，以满足人们对铁皮石斛的需求。

本文将介绍铁皮石斛的组织培养技术的基本步骤和注意事项。

步骤1. 选择合适的外植体材料：铁皮石斛的外植体材料通常选取新鲜的茎段、叶片或花轴，并确保这些材料来自无病虫害的植株。

2. 表面消毒处理：将收集到的外植体材料进行表面消毒处理，常用的消毒剂包括漂白粉和酒精。

消毒时间和浓度应根据不同的外植体材料进行调整。

3. 建立无菌培养基：制备含有适当激素和营养物质的无菌培养基。

常用的基本培养基是MS培养基和B5培养基。

可以根据实验需要调整培养基的成分和浓度。

4. 培养和增殖：将表面消毒后的外植体材料放入含有适当培养基的培养瓶中，并置于暗室或恒温箱中进行培养。

光照和温度是影响铁皮石斛组织培养的重要因素，应根据植物的生长性进行调控。

5. 分化和再生：通过植物激素的投入和适当调控培养条件，促使外植体材料分化和再生成优质的铁皮石斛植株。

这一步骤往往需要持续几个月到数年的时间。

注意事项1. 保持无菌条件：组织培养需要在无菌条件下进行，以避免外源病原微生物的污染。

实验器具、培养基和操作环境必须经过严格的消毒和无菌处理。

2. 控制培养基成分和浓度：培养基的成分和浓度对植物的生长和分化起着重要的影响，需要根据不同的外植体材料和培养阶段进行合理的调整。

3. 确保适当的光照和温度：铁皮石斛对光照和温度有一定的要求，光照不足或温度过高都会影响植物的生长和分化。

应根据植物的生理特性，设置合适的光照和温度条件。

4. 定期检查和处理：组织培养过程中，应定期检查植株的生长状态和培养基的污染情况，并采取适当的措施处理。

需要及时除去培养瓶内的污染物，以保证植株的健康生长。

铁皮石斛育种方案

铁皮石斛育种方案简介铁皮石斛（Dendrobium officinale）是一种名贵的药用植物，被广泛应用于中药材市场。

然而，由于自然生长的限制和野生资源的枯竭，如何进行高效的铁皮石斛育种成为了亟待解决的问题。

本文将介绍一种铁皮石斛育种方案，以帮助农民和研究人员提高铁皮石斛的产量和质量。

1. 选择亲本在铁皮石斛育种中，选择合适的亲本非常重要。

首先，选取具有高产和高品质特征的优良品种作为亲本，这将有助于提高后代植株的质量。

同时，还可以通过亲本的杂交组合，遗传基因的不同组合可能导致新品种的改良。

2. 杂交交配铁皮石斛的杂交交配是育种的关键步骤之一。

在进行杂交交配时，应注意选择适当的花序和花粉。

通常，选择花序完全开放但未脱落的花，用较软的画笔收集花粉，并将其涂抹在柱头上。

根据花粉和柱头的亲和性，可以通过人工授粉的方法来实现。

3. 实施灭胚处理在铁皮石斛的育种中，实施灭胚处理可以有效地提高幼胚的发育率。

灭胚处理可以采用胰蛋白酶、过氧化氢或其他适当的处理方法。

通过合理的灭胚处理，可以显著提高种子的形成率和发芽率，从而提高育苗的效率。

4. 利用组织培养组织培养是铁皮石斛育种中的重要技术手段之一。

可以通过离体培养的方法，将铁皮石斛的不同组织进行快速繁殖和繁育。

利用组织培养技术，可以大幅提高育苗的效率，缩短育苗期，同时也有助于筛选出具有优良性状的新品种。

5. 选择最佳栽培条件为了实现铁皮石斛的高产和高质量，选取最佳的栽培条件非常重要。

首先，要选择合适的种植基质，提供充足的营养和水分供给。

其次，要注意铁皮石斛的光照和温度条件，根据其生长习性进行调整。

此外，还需要合理施肥，及时疏除杂草和防治病虫害，以确保良好的生长环境。

6. 优化采收和加工铁皮石斛的采收和加工环节对最终产品的质量影响很大。

要选择合适的采收时机，一般在花朵即将开放的阶段采摘。

采摘后，应迅速进行加工，将铁皮石斛进行烘干或其他适当的处理，以保持其药用成分的完整性和稳定性。

铁皮石斛的组织培养

由于石斛自然繁殖力极弱，生长缓慢，加之人们掠夺性采挖，资源已严重枯竭。

而石斛栽培一直未解决其存活率低、进入盛产期年限长等问题，故石斛药源一直处于紧张状态。

因此，组织培养、遗传转化、菌根技术、悬浮培养等生物技术在石斛的应用意义重大，甚为迫切。

石斛的组织培养，可用种子、根、茎尖、茎节及叶等为外植体，但以种子进行组培快繁的为多。

原球茎的增殖分化是石斛试管苗繁殖的关键，因此，研究原球茎增殖分化的适宜培养条件非常重要。

特别是应用组织培养技术快速大量繁殖石斛试管苗，是解决其种苗与发展生产的有效途径。

铁皮石斛的组织培养铁皮石斛，又名铁皮兰、节草、耳环石斛等。

野生铁皮石斛为国家珍稀濒危保护植物（三级）。

由于其生长环境要求特殊，野生资源已濒临灭绝。

现云南晨安生物科技开发有限公司对铁皮石斛的组培快繁已获成功，月出苗量50万瓶以上，为铁皮石斛工厂化育苗和大面积栽培闯出了一条新路。

1 胚培养（种子培养）：取人工授粉的铁皮石斛果实，用75％的乙醇表面消毒，30s后再用0.1％升汞溶液消毒8min，无菌水冲洗4~5次。

在无菌操作下，把果实切成0.1mm见方的小块，接种到培养基上，每瓶3~5块。

研究结果表明，N6培养基对种子萌发和生长最好，蔗糖浓度2％最佳，NAA浓度0.2~0.5mg/L最适合胚的萌发和生长；种子培养中加入椰乳对胚萌发和萌发后的初期生长起促进作用；而香蕉汁对继代培养中石斛的生根和壮苗起促进作用，生根和壮苗培养中不加入NAA，只用N6+10％香蕉汁，苗长得更粗壮。

培养温度25~28℃，光照强度1600~2000lx，每日10~12h。

种子萌发后，转管3~4次，当幼苗长出4~5片真叶并具有3~4条1~2cm长的根时，可将试管苗进行炼苗后移栽。

在实验中尚发现，石斛原球茎的增殖与胚龄相关，不同胚龄培养，其萌发率不同：胚龄45天以下，萌发率极低，萌发时间长；60天胚龄的胚具34个细胞，萌发率为6％；90天胚龄的胚细胞为74个，萌发率为87％；120天胚龄的细胞数为90个，萌发率95％以上。

铁皮石斛的组织培育

铁皮石斛的组织培育简介铁皮石斛（Dendrobium officinale）是一种常见的地生兰花，被广泛用于中药材的生产和兰花观赏。

由于其极高的药用价值和观赏价值，铁皮石斛的组织培育技术日益受到关注。

本文将介绍铁皮石斛的组织培养原理、培育步骤以及培育过程中需要注意的问题。

组织培育原理铁皮石斛的组织培育是通过体细胞分裂和再生的方法，通过悬浮培养、离体培养和液体培养等技术手段，将铁皮石斛的一部分组织或细胞培养繁殖，获得大量的无性繁殖植株。

组织培育的原理基于植物的细胞分化和再生能力，通过合适的培养基和生长因子的添加来促进细胞分裂和再生。

组织培育步骤1. 选择合适的母株：选择生长旺盛、健康无病虫害的铁皮石斛母株作为组织培育的起始材料。

2. 材料消毒：将选取的铁皮石斛茎段进行表面消毒，以防止外来病菌的污染。

3. 切割茎段：将消毒后的茎段切割成1.5-2.0厘米的小段，保证每个小段都有叶鞘和芽。

4. 建立悬浮培养：将切割好的茎段转移到含有适量植物生长因子的悬浮培养基中，使其暴露在光照下，利用悬浮培养的方式促进茎段细胞分裂和再生。

5. 培养条件控制：控制培养温度在25-30摄氏度，光照强度在2000-3000勒克斯，通风和湿度适宜。

6. 培养时间：一般培养时间为6-8周，待茎段上出现新芽后再进行下一步操作。

7. 幼苗分离：将培养好的茎段转移到含有植物生长调节剂的培养基中，促进幼芽的生长，待幼苗生长到一定程度后进行分株。

注意事项- 消毒环节非常重要，一定要保证茎段的无菌状态，以防止病菌和病毒的感染。

- 培养环境的温湿度要适宜，过高或过低的温度、过干或过湿的环境都会影响铁皮石斛的组织培育效果。

- 选择合适的培养基和生长调节剂，可以促进茎段的细胞分裂和再生，提高组织培育的成功率。

- 铁皮石斛的组织培育需要耐心和细心，注意观察幼嫩茎段的生长情况，及时调整培养环境和添加必要的营养物质。

结论铁皮石斛的组织培育是一种有效的繁殖方法，它可以大幅提升植物繁殖速度和质量。

铁皮石斛种子在“组织培养技术”实验拓展中的应用

表１铁皮石斛的蒴果和种子数
（Ｓｃｈｉｍａｓｕｐｅｒｂａ）等植株树干上，带来经济效益的同时，解决了铁皮石斛野生资源匮乏的难题。目前，铁皮石斛种苗的产业化采用 “ 种子非共生性萌发” 的方法，依据的原理是其单个蒴果中种子数量极多、体积小且无胚乳，在无菌的培养基及人工培养条件下，种子萌发
×ｍｉｃｈ பைடு நூலகம் ｕｘｉｉ）、杉木（Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍｉａｌａｎｃｅｏｌａｔａ）和木荷
铁皮石斛采自人工种植的苗圃，系自然结实的蒴果。铁皮石斛果实呈纺锤形，成熟时果皮由绿转浅黄色，长约２．４ｃｍ，重不足１ｇ（表１）。采用“ 差减法与粘取计数法 ” 相结合Ｅ３Ｊ的方法对蒴果内种子进行科学计数，结果见表１。
为此，选取蒴果中的种子作为外植体是可取的。这完全有别于其他有胚乳种子的播种发芽。
２外植体的消毒
多。这些将在一定程度上挫伤学生对该实验的积极
性，同时难以实现教学目标，导致学生对植物组织培养技术的感性认识缺失。
教学。结果表明：采用铁皮石斛种子进行组织培养实验，操作简单、安全，效果好，可有效避免因消毒不当带来的污染问题，尤其适合南方地区的中学开展该专题教学的拓展设计。关键词铁皮石斛种子植物组织培养中学生物学教学
铁皮石斛（Ｄｅｎｄｒｏｂｉｕｍｏｆｉｆｃｉｎａｌｅ），是兰科石斛属多年生附生草本植物，亦是一种传统的中药材，全株可供药用，具有抗肿瘤、抗衰老和提高人体免疫力等功

铁皮石斛组织培养实验流程

铁皮石斛组织培养实验流程下载温馨提示：该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。

铁皮石斛组织培养实验流程该文档下载后可定制随意修改，请根据实际需要进行相应的调整和使用，谢谢!并且，本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，如想了解不同资料格式和写法，敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by the editor. I hope that after you download them, they can help you solve practical problems. The document 铁皮石斛组织培养实验流程 can be customized and modified after downloading, please adjust and use it according to actual needs, thankyou!In addition, our shop provides you with various types of practical materials, such as educational essays, diary appreciation, sentence excerpts, ancient poems, classic articles, topic composition, work summary, word parsing, copy excerpts, other materials and so on, want to know different data formats and writing methods, please pay attention!铁皮石斛（Dendrobium nobile）是一种珍贵的中药材，具有滋阴养血、养胃生津、抗疲劳等功效。

铁皮石斛的组织培养与快速繁殖

铁皮石斛的组织培养与快速繁殖摘要：实验以铁皮石斛优良品种的茎段为外殖体，诱导丛生芽，壮苗生根，从而实现大量繁殖。

当NAA 的浓度为0.3mg/L , 6-BA 的浓度为5mg/L 时，铁皮石斛丛生芽的增殖率最高。

在MS 培养基中，铁皮石斛壮苗生根的最好培养基为MS + 6 - BA ( 2mg/L ) + 20 ％香蕉汁。

不同激素浓度的6-BA 对铁皮石斛壮苗生根的影响比较得出，不加6-BA 的培养基小苗生根率低、发根迟、根数少；而加人6-BA 后以大幅度提高生根率，尤以在6-BA 0.4mg/L 的培养基中小苗生根快，根数多。

从不同培养基对铁皮石斛试管苗生长的影响看出，幼苗用MS 培养基比用KC 培养基培养生长好。

铁皮石斛培养60d 左右时生长速度最快。

香蕉提取液能促进生长，从而使苗的生长加快。

以MS ＋香蕉汁20 ％的培养基为最好。

关键词：铁皮石斛；组织培养；丛生芽；壮苗生根铁皮石斛是兰科著名的盆载观花植物，具有很高的观赏价值。

近年来，铁皮石斛培养及快速繁殖技术的研究，取得了很大的成果。

本实验对药用铁皮石斛茎段进行组织培养，提出了一套快速繁殖程序，为快速育苗提供了有价值的技术资料和科学依据。

利用组织培养技术，对药用铁皮石斛进行快速繁殖，是目前解决生产种苗问题的有效方法。

1 材料与方法1.1 试验材料铁皮石斛优良品种，来源于日本。

1.2 试验方法1.2.1 外植体的选取和预处理将从日本引进的生长旺盛的铁皮石斛健康植株，以茎芽为中心剪下，芽的上下各留0.5cm的茎段，用洗衣粉浸泡20min 左右，取出后再用自来水反复冲洗数次，备用。

1.2.2 外植体的灭菌将预处理过的外植体用75 ％的酒精溶液灭菌30 s，然后用无菌水冲洗l 次，将茎段腋芽的苞叶拨去，然后将0.1 ％的HgC12 溶液倒人烧杯中灭菌10 min ，灭菌过程中不断摇动烧杯使灭菌更加彻底，最后用无菌水冲洗5 、6 次将HgCl2溶液冲净并接种到培养基上。

铁皮石斛组培技术

铁皮石斛组培技术-标准化文件发布号：（9456-EUATWK-MWUB-WUNN-INNUL-DDQTY-KII铁皮石斛的组织培养研究专业班级：姓名：学号：课程：植物组织培养目录摘要 (4)Abstract (5)前言 (6)1.培养基 (7)1.1配方 (7)1.2配制（以1000ml幼株的生根壮苗培养基为例） (7)1.3灭菌 (9)2.转接 (10)2.1转接前准备 (10)2.2转接 (10)2.3培养 (10)3.炼苗 (11)3.1炼苗目的 (11)3.2炼苗方法 (11)4.移栽 (12)4.1基质选择 (12)4.2移栽技术要求 (12)5.结论与分析 (13)参考文献 (14)摘要铁皮石斛(Dendrobium officinale)是兰科(Orchidaceae)石斛属(DendrobiumSw．)多年生草本植物。

铁皮石斛为石斛之极品，它因表皮呈铁绿色而得名。

铁皮石斛是传统名贵中药材，有生津益胃、清热养阴和清咽利嗓等功效，主要药用成分石斛多糖是一种免疫调节剂。

铁皮石斛蒴果成熟时易开裂，且种子粒径小，自然繁殖率低。

为了保护和有效利用铁皮石斛，通过组织培养技术大量快速繁殖铁皮石斛组培苗显得尤为重要。

关键词：铁皮石斛组织培养移栽培养基转接快速繁殖AbstractDendrobium orchid Dendrobium is a perennial herb. It is the ultimate in DendrobiumSw,named for its ferric green epidermis.As a rare traditional Chinese herbal medicine,it contributes to dry dampness and strengthen the spleen,clear away lung-heat ,nourish yin ，clear away heat ,and so on.The main medicinal components of Dendrobium polysaccharide is a kind of immune modulators.When mature,its capsule cracks,in which seeds are in small particle size and have a low rate of natural reproduction.In order to protect and utilize the Dendrobium orchid Dendrobium ,it is particularly important to establish a rapid propagation by the tissue culture technique .key words:Dendrobium orchid Dendrobium tissue cultureculture medium adapter rapid propagation前言多年生草本，具有气生根。

铁皮石斛组织培养研究进展组织培养

铁皮石斛组织培养研究进展1、1种子萌发1.2基本培养基铁皮石斛种子在N6，改良N6 , MS , 1 / 2 MS , SH 、KS 、VW、KundsonC , 1 / 2N6 White等培养基上均可萌发。

赵天榜等比较风、MS等14种培养基对铁皮石斛种胚成苗率的影响，除残外，所有的基本培养基均优于其减半培养基，其中以N6最好，SH、Kn、MS次之，I /2MS、1 / 2 Vw 最差。

曾宋君等田将铁皮石斛种子在SH、改良N6、MS、KS、VW、KundsonC 培养基中培养，得出最适培养基为改良N6或自制PT培养基。

罗吉凤等比较了*** / 2MS 、1 / 2 N6和White培养基对铁皮石斛种子萌发的影响，30d种子发芽率均达到95 % ，但1 / 2MS培养基上所萌发的原球茎较大。

1.3激素在培养基中添加一定浓度的NAA可促进种子的萌发，浓度以0.2 —0.5mg/L最适合胚的萌发和生长，过高起抑制作用。

2,4-D对胚的萌发起抑制作用。

6 一BA对胚萌发后的生长起抑制作用。

KT、IAA对胚萌发和成苗的影响不大，当浓度超过1mg/L时，对胚萌发和成苗起抑制作用。

ABA有抑制种子萌发和抑制植物生长的作用, 但张铭等发现ABA能显著提高铁皮石斛原球茎的质量，浓度以0.5mg/L为最佳。

1.4天然添加物在培养基中添加适量的马铃薯汁、香蕉汁、椰乳可促进铁皮石斛种胚的萌发，但张玲等认为香蕉提取物和椰乳对种子萌发和正常发育有不利影响，干扰其正常发育过程。

1.5炭源在组培过程中适当添加活性炭，可以吸附代谢过程中产生的废弃物，防止组织褐变，并刺激胚胎的发生与生根，可加人2 %蔗糖。

曾宋君等在改良N6 + NAA 0.2mg/L 的最适培养基上，发现以白糖、片糖为炭源时，胚萌发和成苗的效果比蔗糖好，这可能是白糖、片糖中含有适合胚萌发和成苗的矿质元素2原球茎增殖2.1基本培养基铁皮石斛原球茎增殖可以1/2 MS，MS等作为基本培养基。

铁皮石斛的组织培养

铁皮石斛组培技术
• • • • • • • • • • • 一茎段培养必要的培养条件取材与消毒诱导培养增殖培养生根培养出瓶苗的过渡管理二种子培养（胚培养）三茎尖培养四原球茎培养五根尖培养
石斛生产基地
实训时，我们看到的批量的铁皮石斛的生产，以及工作人员正在上盆，移栽石斛。由此，我们了解到铁皮石斛生长缓慢，周期长。
组织培养的流程
培养基的流程
培养基配制灭菌接种培养驯化移栽
灭菌
•接种前我们应该做的灭菌工作： 1.在接种前20分钟，打开超净工作台的风机以及台上的紫外线灯； 2.接种员先洗净双手，在缓冲间换好专用实验服，并换穿拖鞋等； 3.上工作台后，用酒精棉球搽拭双手，特别是指甲处。然后搽拭工作台面； 4.先用酒精棉球搽拭接种工具，再将镊子和剪刀从头至尾过火一遍，然后反复过火尖端处，对培养皿要过火烤干；
铁皮石斛的组织培养
园艺3133 王冬玲 12号
目录
一组织培养的概念五驯化移栽
二
组织培养的流程
六
铁皮石斛简介
三
灭菌
七
ห้องสมุดไป่ตู้
铁皮石斛的组培技术
四
接种
八
石斛生产基地
组织培养的概念
• 植物组织培养概念（广义）又叫离体培养，指从植物体分离出符合需要的组织。器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。
接种
无菌接种的具体步骤： •将初步洗涤及切割的材料放入烧杯，带入超净台上，用消毒剂灭菌，再用无菌水冲洗，最后沥去水分，取出放置在灭过菌的纱布上或滤纸上。 •．材料吸干后，一手拿镊子、一手拿剪刀或解剖刀，对材料进行适当的切割。 •用灼烧消毒过的器械将切割好的外植体插植或放置到培养基上。

铁皮石斛组织培养

小苗可以用苔藓或水苔!中苗就要树皮石子加苔藓!大苗可用石子树皮等!至于用来培养组织苗的培养基属难告知恩，这个我知道，我就想出了MS培养基，没有其他适合的了吗？培养基也属于商业秘密啊？很多好一些的营养基都是商业密秘!我会去给你找个适合石斛的营养基.只能给你个普通的!希望你喜欢石斛较常见的培养基配方,花宝三克,百分之十到百分之二十的萍果汁一千毫升,蔗糖浓度百分之三点五.琼脂十五克.蒸溜水一千克氢离子浓度调节到一万纳摩/升(PH5.0)常规铁皮石斛开花后采用人工方法授粉，将其种子接种在１／２ＭＳ液体培养基中非共生萌发培养时，再转入含有０．０１％Ｏｒｙｚａｌｉｎ＋０．０１％秋水仙碱的１／２ＭＳ液体培养基中进行诱变处理，然后转入１／２ＭＳ固体培养基上，光照；取新生长的根尖固定，用压片法制备染色体标本，卡宝品红染色液染色，染色体数目为２ｎ＝７６的幼苗为四倍体铁皮石斛，按通常方法进行栽培管理。

现在大部分采用松树皮发孝后来种的！铁皮石斛组织培养的培养基用到的主要基本培养基是MS培养基，也不只是这一种，其它的WV、winte等都可以用，但是一般多用MS培养基，也可以用1/2MS培养基，大量元素减半，其它元素不变。

除此之外，还有加一些生长素（如IAA、IBA、NAA等），细胞分裂素（如6-BA等）。

但是不同的培养时期也不同的激素配合。

如诱导愈伤组织时，要两种激素的配合。

增殖传代时也要两种激素的配合，但生长素为主；分化时以分裂素为主，壮苗和生根以生长素不主。

一般用量都是0.1-10mg/L这个范围里。

此外，还有的加了什么香蕉素，椰看你是用什么外植体，或是想诱导什么先了，一般如果是茎段的话，用一般的MS+0.3mg/L NAA+5mg/L 6-BA做诱导培养基就好，但是如果你要用根茎做外植体诱导原球茎的话，最号用1/2MS加上水解乳蛋白和激动素和6-BA 就好,量看你外植体了，不同的类型不同乳等。

一般NAA：6-BA是10：1，即2：0.2mg/L（一）繁殖技术石斛的繁殖方法分为有性繁殖和无性繁殖两大类，目前生产上主要采用无性繁殖方法。

铁皮石斛组织培养

IBA
BA
NAA
土豆汁
香蕉汁 IAA
生根培养基的设计生根培养基
1/2MS+NAA0.2~0.5mg/L+香蕉汁20%+活性炭2.0%【pH值5.2~5.6】
取MS母液： IV25ml,5ml,5ml,5ml,5ml; 激素母液：NAA2~5ml
蔗糖：30g 琼脂：6.8g 香蕉汁：200ml 活性炭：20g
,1999,24(1):29-31。 • [5]张明,夏鸿西,朱利泉,等.石斛组织培养研究进展[J].中国中药杂志
,2000,25(6):323-326。
B1小组成员展示结束
谢谢！
接种实验
一、接种准备工作 1、超净工作台开紫外灯照射10-20min送风 2、外植体消毒（继代培养采用已建立的无菌培养物作为材料） 3、工具消毒二、接种操作 1、用消毒工具、器皿，切取铁皮石斛幼茎段2cm 2、接种环烧红，沾一下培养基 3、镊取茎段插于培养基中 4、封口、标记
各时期的培养条件
• 茎段的诱导时间在5~11天之间 • 培养温度23~25℃，光照强度2000lx，光照时间10h/d
参考文献
• [1]郑宽瑜,邓君浪,赵培快繁技术体系研究[J].云南农业科技,2009,(S2):57-59。 • [2]周根余,谢薇,程磊.影响铁皮石斛原球茎生长的若干因素[J].江西科学
,1999,17(4):231-235. • [3]叶纪沟.铁皮石斛试管苗的人工栽培研究[J].中国药业,2001,10(1):53。 • [4]李铭宗.铁皮石斛的生物学特性和人工栽培[J].福建热作科技
生根培养将丛生芽无菌操作切下单株放在生根培养基中于适宜条件下培养，约1~2周后即生根，以长成完整植株。

铁皮石斛组织培养与栽培技术分析

移植到炼苗房，让其在炼苗房内栽植 3 口，而底部则需要做好封闭，同时设置收后，应注意及时喷施保护性杀菌剂以
周左右的时间，在此期间内，实现试管防虫网，避免蚊虫进入对作物生长带来预防病害的发生。
苗对自然环境的适应的整个过程。经过影响。
就铁皮石斛培养目前的发展形式
一段时间的培育，幼苗的叶子呈现浓绿
因素进行有效控制变化铁皮石斛种子苗来说，则需要采用多菌灵，进行杀菌正常发育的幼苗和污染幼苗、少根幼苗
的发芽率，进而影响铁皮石斛的产量和处理之后，进行单独栽植，避免由于杀进行分区栽植。
质量。有部分学者对种龄与萌芽的关系菌处理不
进行研究之后可以发现，在采用组织培带来不良影响。
片左右，颜色正常的情况下方可出瓶。当的基质。在对多种基质的培养情况进石斛生物特性的研究，以便于为其提供
除此之外，对根系的生长状态也具有一行对比分析之后可以发现以石灰岩碎更加适宜的生长环境。
定的要求，具体表现为根系表皮应呈现石滤水层 5cm+锯末 8cm+活苔藓 2cm
作者单位：山东省德州市
优势，无论是萌芽时间还是萌芽率都表究之后，选择适当的栽种区域，一般而长适宜温度为 20～30℃。夏季温度高
现为种龄越大萌芽所用时间越短，萌芽言，有野生铁皮石斛分布的区域更适宜时，大棚内须通风散热，同时进行喷雾
率越高。由此可见，在进行组织培养时铁皮石斛的栽培。如在栽植区域没有野降温保湿；冬季气温低时，可通过加温
光照。郑勇平等认为，光照强度控
养技术进行萌芽操作时，选用了 2-6月
2、栽培地与栽培设施的选择
制在 3万 lx以内最适宜铁皮石斛组培
种龄的种子进行分别培养，其中种龄较
为了保证铁皮石斛的产量和质量，苗的生长；温湿度。铁皮石斛组培苗在

铁皮石斛的种子培养

铁皮石斛的种子培养
铁皮石斛的种子培养
以铁皮石斛成熟种子为外植体,研究原球茎的诱导、增殖、分化和生根的最佳培齐条件.结果表明:1/2 MS基础培养基最适合铁皮石斛的种子培养,45 d时原球茎诱导率达到95%;原球茎增殖的最佳培养基为1/2 MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+20%马铃薯提取液,每代增殖16倍,原球茎形态好、变异少;原球茎团于1/2 MS+6-BA 2 mg/L+NAA 0.25 mg/L+20%薯提取液的培养基上可诱导丛芽分化,于MS+NAA 0.5 mg/L+20%香蕉汁+活性炭5g/L的培养基上易于诱导不定根的形成,60 d后可形成健壮的完整小植株.
作者：谢启鑫宋小明黄东华李宝光赵萍作者单位：江西省农业科学院,蔬菜花卉研究所,江西,南昌,330200 刊名：北方园艺 PKU 英文刊名：NORTHERN HORTICULTURE 年，卷(期)：2010 ""(8) 分类号： S567.23+9 关键词：铁皮石斛种子组织培养原球茎。