第九章酶促反应动力学PPT课件
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酶促反应动力学ppt课件
注：反应分子数和反应级数对简单反应时一致的，但比如水解反应，应为二级，通常可 以当做一级处理。
各级反应的速率特征 一级反应：半衰期与速率常数成反比，与反应物的初浓度无关。 二级反应：半衰期与速率常数和反应物的初浓度成反比。 零级反应：半衰期与速率常数成正比，与反应物的初始浓度成正比。
底物浓度对酶促反应速率的影响
关，而与其浓度无关。一种酶有几种底物就有几个Km值 ，其中Km值最小的底物一般称为该酶的
最适底物或天然底物。
在K2 K-1 时， Km = Ks，此时Km 代表ES的真实解离常，即 Km值表示酶与底物之间的亲 和程度：Km值大表示亲和程度小，酶的催化活性低； Km值小表示亲和程度大，酶的催化活性高。
中间络合物学说
（ Henri的蔗糖酶水解蔗糖试验）
酶促反应： ①当底物浓度低时, 大部分酶没有与底物 结合，即酶未被饱和，这时反应速度取决
于底物浓度，即与底物浓度成正比，表现
为一级反应特征；
②随着底物浓度的增高，ES生成逐渐增
多，这时反应速度取决于【ES】，反应
速度也随之增高，但反应不再成正比例
酶浓度固定，反应速率与底物 浓度的关系
活酶原）。
激活剂对酶的作用具有选择性，有时离子之间可以相互替代，但有些离子之间就具有拮抗作用，
另外，激活剂的浓度也对其效应有影响，一定浓度时起激活作用，超过这个浓度又起抑制作用。
在机体内有许多调节酶活力的方式，其中抑制剂和激活剂的调节属于最快速的方式。
影响机制：1）酸、碱可使酶变性或改变构象失活；2）影响酶活性基团的解离；3）影响底物的
解离，4）影响ES的解离。
注：虽然大部分酶的pH—酶活曲线是钟形，但也有半钟形甚至直线形。
激活剂对酶反应的影响
各级反应的速率特征 一级反应：半衰期与速率常数成反比，与反应物的初浓度无关。 二级反应：半衰期与速率常数和反应物的初浓度成反比。 零级反应：半衰期与速率常数成正比，与反应物的初始浓度成正比。
底物浓度对酶促反应速率的影响
关，而与其浓度无关。一种酶有几种底物就有几个Km值 ，其中Km值最小的底物一般称为该酶的
最适底物或天然底物。
在K2 K-1 时， Km = Ks，此时Km 代表ES的真实解离常，即 Km值表示酶与底物之间的亲 和程度：Km值大表示亲和程度小，酶的催化活性低； Km值小表示亲和程度大，酶的催化活性高。
中间络合物学说
（ Henri的蔗糖酶水解蔗糖试验）
酶促反应： ①当底物浓度低时, 大部分酶没有与底物 结合，即酶未被饱和，这时反应速度取决
于底物浓度，即与底物浓度成正比，表现
为一级反应特征；
②随着底物浓度的增高，ES生成逐渐增
多，这时反应速度取决于【ES】，反应
速度也随之增高，但反应不再成正比例
酶浓度固定，反应速率与底物 浓度的关系
活酶原）。
激活剂对酶的作用具有选择性，有时离子之间可以相互替代，但有些离子之间就具有拮抗作用，
另外，激活剂的浓度也对其效应有影响，一定浓度时起激活作用，超过这个浓度又起抑制作用。
在机体内有许多调节酶活力的方式，其中抑制剂和激活剂的调节属于最快速的方式。
影响机制：1）酸、碱可使酶变性或改变构象失活；2）影响酶活性基团的解离；3）影响底物的
解离，4）影响ES的解离。
注：虽然大部分酶的pH—酶活曲线是钟形，但也有半钟形甚至直线形。
激活剂对酶反应的影响
酶促反应动力学(1)
① Km是酶的一个特征常数。
Km的大小只与酶的性质有关，而与酶浓度无关。
鉴别酶：25℃，最适pH的Km值
② Km可以判断酶的专一性和天然底物。
酶的最适底物或天然底物： Km值最小的底物
酶对底物亲和力的大小：1/ Km 最适底物的亲和力（1/ Km）最大， Km最小,达最大反 应速率一半时所需要的底物浓度愈小。
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20
1.4 米氏常数的求法
双倒数作图法（Lineweaver-Burk作图法）
以1／[S]为横坐标， 以1／v为纵坐标作图
缺点： 实验点过于集中于直线的左端， 作图不易十分准确。
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21
2 酶的抑制作用
2.1 抑制作用
失活作用（inactivation）：酶蛋白变性而引起
得：
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15
米氏方程式
Km--米氏常数（Michaelis-Menton constant）
表明当已知Km和Vmax时，酶反应速率与底物浓 度的定量关系。
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16
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17
Km的物理意义
Km值是当酶反应速度为最大反应速度一半时的底物浓度。 单位是底物浓度的单位，一般用mol/L或mmol／L表示。 计算：底物浓度—反应速度
第9章 酶促反应动力学
研究酶促反应的速率以及影响速率的各种因素
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1
底物浓度对酶反应速率的影响 米氏方程
酶的抑制作用
环境因素对酶反应的影响
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2
1 底物浓度对酶反应速率的影响
1.1米氏学说的提出
① 酶有被底物所饱和的现象
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双曲线
3
Km的大小只与酶的性质有关，而与酶浓度无关。
鉴别酶：25℃，最适pH的Km值
② Km可以判断酶的专一性和天然底物。
酶的最适底物或天然底物： Km值最小的底物
酶对底物亲和力的大小：1/ Km 最适底物的亲和力（1/ Km）最大， Km最小,达最大反 应速率一半时所需要的底物浓度愈小。
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20
1.4 米氏常数的求法
双倒数作图法（Lineweaver-Burk作图法）
以1／[S]为横坐标， 以1／v为纵坐标作图
缺点： 实验点过于集中于直线的左端， 作图不易十分准确。
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21
2 酶的抑制作用
2.1 抑制作用
失活作用（inactivation）：酶蛋白变性而引起
得：
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15
米氏方程式
Km--米氏常数（Michaelis-Menton constant）
表明当已知Km和Vmax时，酶反应速率与底物浓 度的定量关系。
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16
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17
Km的物理意义
Km值是当酶反应速度为最大反应速度一半时的底物浓度。 单位是底物浓度的单位，一般用mol/L或mmol／L表示。 计算：底物浓度—反应速度
第9章 酶促反应动力学
研究酶促反应的速率以及影响速率的各种因素
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1
底物浓度对酶反应速率的影响 米氏方程
酶的抑制作用
环境因素对酶反应的影响
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2
1 底物浓度对酶反应速率的影响
1.1米氏学说的提出
① 酶有被底物所饱和的现象
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双曲线
3
生物竞赛课件酶促反应动力PPT精品课件
k：比例常数/反应速率常数
• 双分子反应 A + B P + Q
v = kc1c2
c1、c2 ：A和B反应物浓度（mol/l）
k：比例常数/反应速率常数
——可通过v与c的关系推断反应机制。
2.反应级数
根据总反应速率与反应物浓度的关系： 能以v = kc表示，为一级反应； 能以v = kc1c2表示，则为二级反应； v 与反应物浓度无关，则为零级反应。
v
零级反应
混合级反应 一级反应
酶催化某一化学反应时， 酶首先与底物结合生成中 间复合物（ES），然后 生成产物（P）,并释放酶。
S+E [S]
底物浓度对酶催化反应初速率的影响
ES → P + E
V Vmax
[S] 当底物浓度较低时
反应速度与底物浓度成正比；反 应为一级反应。
V Vmax
[S] 随着底物浓度的增高
复杂反应由一连串简单反应组成，确定反应级数比较复杂， 且不一定是整数。实际上为各个反应物浓度指数的总和。
反应分子数和反应级数为两个不同概念 • 反应分子数：实际参加反应的分子数，是一个反应
机制的问题。
• 反应级数：由实验测得，表示反应速率与反应物浓 度间的关系问题。实际应用时常采用反应级数。
（三）各级反应的特征
1.一级反应： 反应速率与反应物浓度的一次方成正比。
v = kc
lnc = - kt + lnc0
C0
k = 1/t lnc0/c
产物的增加
[P]
c = c0 e-kt
C0/2
C 反应物的消耗
0
t½
t
半衰期t1/2：有一半反应物转化为产物所需的时间
酶促反应动力学ppt课件.ppt
五、Km和Vmax值的测定
(2) 双倒数 作图法
将米氏方 程式两侧 取双倒数， 以1/v1/[s]作图， 得出一直 线.
认识到了贫困户贫困的根本原因，才 能开始 对症下 药，然 后药到 病除。 近年来 国家对 扶贫工 作高度 重视， 已经展 开了“ 精准扶 贫”项 目
五、Km和Vmax值的测定
(3) Hanes— Woolf作图法
- d[ES] / dt = k2[ES] + k3[ES]
认识到了贫困户贫困的根本原因，才 能开始 对症下 药，然 后药到 病除。 近年来 国家对 扶贫工 作高度 重视， 已经展 开了“ 精准扶 贫”项 目
二、酶促反应的动力学方程式
当酶体系处于动态平衡时，ES的形成速 度和分解速度相等
k1([E] — [ES]) * [S] = k2[ES] + k3[ES]
因为当底物浓度很高时，酶反应速率（v）与 [ES]成正比，即
v = k3[ES] ,代入（1）式得：
V = k3[E][S] / (Km+[S])
（2）
当底物浓度很高时所有的酶都被底物饱和而转 变为ES复合物，即[E]=[ES]，酶促反应达到最 大速度Vmax，所以
Vmax = k3[ES] = k3[E]
i =1-a (4) 抑制百分数; i %=(1-a) x 100% 通常所谓抑制率是指抑制分数或抑制百分数。
认识到了贫困户贫困的根本原因，才 能开始 对症下 药，然 后药到 病除。 近年来 国家对 扶贫工 作高度 重视， 已经展 开了“ 精准扶 贫”项 目
二、抑制作用的类型
v 根据抑制作用是否可逆:
认识到了贫困户贫困的根本原因，才 能开始 对症下 药，然 后药到 病除。 近年来 国家对 扶贫工 作高度 重视， 已经展 开了“ 精准扶 贫”项 目
第9章酶促反应动力学-PPT文档资料48页
1.4 米氏常数的求法
双倒数作图法（Lineweaver-Burk作图法）
以1／[S]为横坐标， 以1／v为纵坐标作图 缺点： 实验点过于集中于直线的左端， 作图不易十分准确。
2 酶的抑制作用
2.1 抑制作用
失活作用（inactivation）：酶蛋白变性而引起
活力丧失。 变性剂对酶无选择性。
抑制作用（inhibition）：酶的必须基团化学性
③ 快速平衡学说 1913年Michaelis和Menten
提出米氏方程
Leonor Michaelis 1875-1949
Ks为ES的解离常数
Maud Menten 1879-1960
④ 稳态理论（Steady State ）
Briggs and Haldane in 1925
修正
Km=（k2+k3）/k1
酶促反应分两步进行：
第一步：酶与底物作用，形成酶-底物复合物。
第二步：ES复合物分解形成产物，释放出游离酶。
酶与底物生成ES的速度为： ES分解的速度为：
注：
当整个反应体系处于稳态时，[ES]生成 速度（V1）等于ES分解速度（V2）：
令:
用[Et]代表酶的总浓度，则
将（2）代入（1）
得：
∵酶促反应速度v取决于ES转换为E+P的速度
可逆的抑制作用（reversible inhibition） ： 抑制剂与酶的必须基团以非共价键结合而引起酶活
力丧失，能用透析、超滤等物理方法除去抑制剂 而使酶复活。
可逆的抑制作用： 竞争性抑制、非竞争性抑制、反竞争性抑制。
2.3 竞争性抑制作用（competitive inhibition)
① 概念：抑制剂与底物竞争酶的结合部位，从而影响
酶动力学 PPT课件
琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制
竞争性抑制剂
E S
k1 K-1
v v m ax [ S ] [S ] K
m
ES
k2
E P
Km 升高 vmax 不变
I
KI
(1
[I ] K
I
)
EI
v
vmax
Km(1+[I]/KI)
1/v
+抑制剂
斜率=Km/vmax
斜率= Km(1+[I]/KI)/vmax
1/v
(1+[I]/KI)/Vmax
+抑制剂
斜率=Km/vmax
斜率= Km(1+[I]/KI)/vmax
[S]
-1/Km
1/vmax
1/[S]
反竞争性抑制剂
E S
Km 降低 vmax 降低
k1 k-1
ES
I
k2
E P
KI’
EIS
v
vmax
1/v
(1+ /(1+[I]/KI)/Vmax Vmax/(1+[I]/KI)
温度对反应速率的影响
最适pH
pH对反应速率的影响
底物浓度对酶反应速率的影响
米氏反应动力学
酶反应动力学最简单的模型由Lenor Michaelis和 Maude Menten于1913年提出，因此又名为 Michaelis-Menten模型或M-M模型。 米氏方程推导设定的3个条件： ① 反应速率为初速率，因为此时反应速率与酶浓度呈 正比关系，避免了反应产物以及其它因素的干扰 ② 酶底物复合物处于稳态即ES浓度不发生变化 ③ 符合质量作用定律
酶促反应动力学(有方程推导过程)ppt课件
当酶反应体系处于恒态时： v1 v2
即： k 1 E t E S S k 1 E k 2 S E S EtSE E SSSk1k 1k2
令： k1 k2 Km k1
则： K m E S E S S E tS
经整理得： ES
Et S Km S
(1)
由于酶促反应速度由[ES]决定，即 vk2ES
2、pH影响酶分子的构象：过高或过低pH都会影响酶分子 活性中心的构象，或引起酶的变性失活。
整理版课件
9
动物体内多数酶的最适pH值接近中性，但也有例外，如胃 蛋白酶的最适pH约1.8，肝精氨酸酶最适pH约为9.8(见下表)。
一些酶的最适pH
整理版课件
10
四、 底物浓度对反应速度的影响
1、酶反应与底物浓度的关系
种酶与不同底物作用时，Km 值也不同。各种酶的 Km 值
范围很广，大致在 10-1～10-6 M 之间。
整理版课件
17
3. Km在实际应用中的重要意义
（1）鉴定酶：通过测定可以鉴别不同来源或相同来源但 在不同发育阶段、不同生理状态下催化相同反应的酶是 否属于同一种酶。
（2）判断酶的最佳底物：如果一种酶可作用于多个底 物,就有几个Km值，其中Km最小对应的底物就是酶的 天然底物。如蔗糖酶既可催化蔗糖水解 (Km=28mmol/L),也可催化棉子糖水解 (Km=350mmol/L),两者相比，蔗糖为该酶的天然底物。
➢ 在一定范围内，反应速度达到最大时对应的温度称为该 酶促反应的最适温度（optimum temperature Tm）.一 般动物组织中的酶其最适温度为35～40℃，植物与微生 物中的酶其最适温度为30～60℃，少数酶可达60℃以上， 如细菌淀粉水解酶的最适温度90℃以上。
酶促动力学.ppt
加入非竞争性抑制剂后，Km 不变，而Vmax减小。
非竞争性抑制作用的Lineweaver–Burk图 ：
加入非竞争性抑制剂后，Km 不变，而Vmax减小。
非竞争性抑制剂与酶活性中心以外的基团结合。这类抑制作用不会因提高底物浓度而减弱
（3）反竞争性抑制
酶只有与底物结合后才与抑制剂结合，形成的三元中间产物不能进一步分解为产物。
中间产物学说的关键在于中间产物的形成。酶和底物可以通过共价键、氢键、离子键和和配位键等结合形成中间产物。中间产物的稳定性较低，易于分解成产物并使酶重新游离出来。
二、底物浓度对酶反应速度的影响
2 中间络合物学说
※1913年Michaelis和Menten提出反应速度与底物浓度关系的数学方程式，即米－曼氏方程式，简称米氏方程式(Michaelis equation)。后来又有人进行了修正.
三、酶的抑制作用
（一）抑制作用与抑制剂
什么是酶的抑制作用和失活作用？ 失活作用：酶变性；酶活性丧失（无选择性）。 抑制作用：酶的必需基团的化学性质改变,但并不引起酶蛋白变性的作用,而降低酶活性甚至使酶完全丧失活性的作用 引起作用的物质称为抑制剂（I）（选择性）。 研究抑制作用的意义？
特点
⑴ 竞争性抑制剂往往是酶的底物结构类似物； ⑵ 抑制剂与酶的结合部位与底物与酶的结合部位相同—— 酶的活性中心 ⑶ 抑制作用可以被高浓度的底物减低以致消除； ⑷ (表观）Km值增大，Vm值不变
竞争性抑制作用的Lineweaver–Burk图 ：
1/Vmax
(表观）Km值增大，Vm值不变
363
（Eisenthal和Cornish-Bowden法）
（5）直接线性作图法
363
《酶促反应动力学》课件
底物浓度对反应速率的影响
总结词
随着底物浓度的增加，反应速率通常会加快，但当底 物浓度达到一定值后，反应速率将不再增加。
详细描述
底物是酶催化反应的对象，底物的浓度也会影响反应速 率。通常情况下，随着底物浓度的增加，反应速率会加 快。然而，当底物浓度达到一定值后，反应速率将趋于 稳定，不再增加。这是因为酶的活性位点有限，只能与 一定量的底物结合。
详细描述
酶促反应的活化能是酶促反应所需的最小能量，只有当底物获得足够的能量时，才能够 被酶催化发生反应。活化能的大小反映了酶促反应发生的难易程度，活化能越高，反应 越难以进行。通过实验测定活化能的大小，可以帮助我们了解酶促反应的动力学特征和
机制。
03
米氏方程与双倒数图
米氏方程的推导
总结词
米氏方程是描述酶促反应速度与底物浓 度关系的数学模型，通过实验数据和推 导，可以得出该方程的具体形式。
酶促反应动力学在药物代谢领域的应用，如研究药物在体内的代 谢过程和代谢产物的生成，有助于了解药物的作用机制和药效。
药物合成
在药物合成过程中，酶促反应动力学可用于优化药物合成 的反应条件和提高产物的纯度，降低副反应和废物产生。
在Hale Waihona Puke 境科学中的应用污染物降解酶促反应动力学可用于污染物降解领域，如有机污染物的 生物降解和重金属离子的转化，通过研究酶促反应动力学 参数，实现污染物的有效降解和转化。
温度对反应速率的影响
总结词
温度的升高通常会加快反应速率，但过高的温度可能导致酶失活。
详细描述
温度可以影响酶促反应的速率。一般来说，温度越高，分子间的运动越快，从而促进酶与底物的结合和反应的进 行。然而，过高的温度可能导致酶失活，从而降低反应速率。因此，选择合适的温度对于维持酶的活性和促进反 应的进行非常重要。
课件：酶促反应动力学
竞争性抑制作用的动力学
➢ 有竞争性抑制剂存在时，Km值增大 (1+[I]/Ki)倍，Km值随[I]的增高而增大；
➢ 在[E]固定时，当[S] ﹥﹥ Km (1+[I]/Ki), Km (1+[I]/Ki)项可忽略不计，则v= Vmax， 即最大反应速率不变。
竞争性抑制的动力学曲线
a=1+[I]/Ki
底物浓度对酶促反应速率的影响
• 反应速率对底物浓度作图，得到的是一个 双曲线
• 在低底物浓度时, 反应速率与底物浓度成正 比，表现为一级反应特征。
• 当底物浓度达到一定值，反应速率达到最 大值（Vmax），此时再增加底物浓度，反 应速率不再增加，表现为零级反应
• 此现象称为饱和效应，对应的图称为底物 饱和曲线，说明酶促反应中酶的底物结合 部位都被底物占据时反应达到最大速率
• 抑制剂：引起抑制作用的化合物。抑制剂 能够与酶的必需基团以非共价或共价的方 式形成比较稳定的复合体或结合物。抑制 剂对酶的抑制具有选择性。
• 酶的抑制作用机理：
– 在化学结构上与被抑制的酶的底物分子（底物 类似物）或底物的过渡状态相似——活性中心 结合。
– 非底物类似物——不与活性部位结合，但和酶 活性部位以外的必需基团结合，从而影响酶促 反应过程。
酶促反应动力学
• △G为负，说明热力学有利，其值与反应的 平衡常数有关
• 活化能是动力学的范畴，和反应的速率常数
• 酶促反应动力学研究酶促反应速率以及影 响此速率的各种因素
• 酶促反应速率指反应的初速率，一般指底 物浓度被消耗5％以内的速率
• 影响因素：底物浓度、酶浓度、产物浓度、 pH、温度、抑制剂、激活剂等
米氏方程
Vmax [S] V=
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*在已知Km的情况下，应用米氏方程可计算任意 [s]时的v，或任何v下的[s]。（用Km的倍数表示）
（4）利用作图法测定Km和Vmax值 a. 双倒数作图法
将米氏方程变化成相当于y=ax+b的直线方程， 再用作图法求出Km。 例：双倒数作图法（Lineweaver-Burk法）
米氏方程的双倒数形式：
O-R X P O-R
O
O-R -Ser-O P O-R
O
竞争性抑制动力学
若在反应体系中存在有与底物结构相类似的物质，该物 质也能在酶的活性部位上结合，从而阻碍了酶与底物的结 合，使酶催化底物的反应速率下降。这种抑制称为竞争性 抑制，该物质称为竞争性抑制剂。其主要特点是，抑制剂 与底物竞争酶的活性部位，当抑制剂与酶的活性部位结合 之后，底物就不能再与酶结合，反之亦然。在琥珀酸脱氢 酶催化琥珀酸为延胡索酸时，丙二酸是其竞争性抑制剂。
，所以
ES
v k2
(2)
将（2）代入（1）得：
v k2
EtS Km S
v
k2Et S Km S
(3)
当[Et]=[ES]时， v Vm
将（4）代入（3），则：
所以 Vmk2Et (4)
v
VmaxS Km S
(3) 米氏 常数 的意
义
V = 1/2 Vmax, Km = [S]
米氏常数是反应速度为最大值的一半时的底物浓度。 米氏常数的单位为mol/L。
可逆抑制剂
竞争性抑制剂
非竞争性抑制剂 反竞争性抑制剂
非专一性不可逆抑制剂
抑制剂作用于酶分子中的一类或几类基团，这些 基团中包含了必需基团，因而引起酶失活。
类型：
专一性不可逆抑制剂
这类抑制剂选择性很强，它只能专一性地与
酶活性中心的某些基团不可逆结合，引起酶的活 性丧失。
实例：有机磷杀虫剂
-Ser-OH
凡是使酶的必需基因或酶的活性部位中的基团 的化学性质改变而降低酶活力甚至使酶完全丧失 活性的物质，叫酶的抑制剂（inhibitor） 。
类型：不可逆抑制剂 一些重要的抑制剂 可逆抑制剂
应用：研制杀虫剂、药物 研究酶的作用机理，确定代谢途径
抑制剂类型和特点
不可逆抑制剂
非专一性不可逆抑制剂 专一性不可逆抑制剂
米
当酶反应体系处于恒态时： v1 v2
氏 方 程 的 推 导
即： k 1 E t E S S k 1 E k 2 S E S EtSE E SSSk1k 1k2
令： k1 k2 Km k1
则： K m E S E S S E tS
经整理得： ES
Et S Km S
(1)
由于酶促反应速度由[ES]决定，即 vk2ES
第九章 酶促反应动力学
主要内容：介绍酶作用的化学动力基础， 讨论各种因素对酶反应速度的影响，重点 是底物浓度对对酶反应速度的影响，理解 抑制剂对酶促反应的影响。
目录
第一节 化学动力学基础 第二节 影响酶促反应速度的因素 第三节 酶的抑制作用
第一节 化学动力学基础
一、反应速率及其测定
产
物
生
成
量
反应初速度
Vmax[s] （1）、米氏方程的推导 V =
Km+ [s]
（2）、米氏方程的讨论 当Km＞＞ [s]时，
当Km＜＜ [s]时，
V = Vmax[s] Km
V = Vmax
SE k1 ES k2 PE
S EtES
k1
ES
[ES]生成速度：v 1 k 1 E t ES S ，[ES]分解速度：v 2 k 1 E S k 2 ES
竞争性抑制作用
*当k3<<k2时，km的大小可以表示酶与底物的亲和性
k1
S+E
ES
k3
E+P
k2
Km =
k2 + k3 k1
当k3 << k2时，Km k2/k1。即相当于ES分解为
E + S 的解离常数（Ks）。此时，Km代表酶对底物 的亲和力。
当km大，说明ES容易解离，酶与底物结合的亲和力小
Km越大，表示酶对底物的亲和力越小； Km越小，表示酶对底物的亲和力越大。
应为一级反应。
V Vmax
[S]
随着底物浓度的增高 反应速率不再成正比例加速；反应
为混合级反应。
V Vmax
[S]
当底物浓度高达一定程度 酶被底物所饱和，反应速率不再增
加，达最大速率；反应为零级反应。
二、酶促反应的动力学方程式
1913年Michaelis和 Menten推导了米氏方程
v Vmax[S] Km [S]
* 是酶在一定条件下的特征物理常数，通过 测定Km的数值，可鉴别酶。
Km值受温度、pH的影响。 Km值作为常数只是对一定的底物、 一定的pH、一定的温度条件而言
*可以判断酶的专一性和天然底物
如果一个酶有几种底物，则对每一种底物， 各有一个特定的Km值。
Km 值最小的底物一般称为该酶的最适底 物或天然底物。
1 Km 1 1 — = —— . — + ——
v Vmax [S] Vmax
b. Eadie-Hofstee作图法
V
Vm
[S] 1 [S]Km
v VmaxΒιβλιοθήκη VmaxVm/Km V/[s]
c. Hanes作图法
[S]/V
vKm[Sv]Vm ax
-Km
斜率= 1/Vm Km/Vm
[S]
第三节 酶的抑制作用
E2
G
P+ E
反应过程
*无酶参与 S→P（要求S的自由能高）
*有酶参与下
E + S →ES →E + P （要求S的自由能低）
一定时间内 到同一地点
马拉松
坐车
ES 中间产物
V
混合级 一级
零级
[S]
应底 速物 度浓 之度 间与 的酶 关促 系反
V Vmax
[S]
当底物浓度较低时 反应速率与底物浓度成正比；反
第二节 底物浓度对酶反应速度的影响
一、酶催化的中间产物理论
ES kk11 ES k2 PE
酶（E）与底物（S） 结合生成不稳定的中间 物（ES），再分解成产 物（P）并释放出酶，使 反应沿一个低活化能的 途径进行，降低反应所 需活化能，所以能加快 反应速度。
能 量 水
平 E+S
E1 ES
的测量
时间
二、反应级数
1、一级反应：反应速率与反应物浓度一 次方成正比 2、二级反应：反应速率与反应物浓度二 次方（或两种物质浓度的乘积）成正比 3、零级反应：反应速率与反应物浓度无 关而受它种因素影响而改变的反应
影响对酶反应速度的因素
1、底物浓度 2、温度 （最适温度的概念） 3、 pH （最适 pH的概念） 4、激活剂 5、抑制剂 6、酶浓度