麸炒白术化学成分的研究

麸炒白术化学成分的研究李滢;杨秀伟【摘要】目的:研究麸炒白术的化学成分.方法:采用硅胶柱色谱方法进行分离纯化,通过质谱、核磁共振等谱学数据鉴定化合物结构.结果:从麸炒白术70％乙醇水提取物中鉴定了20个化合物,分别为苍术酮(1)、蒲公英萜醇乙酯(2)、白术内酯Ⅶ(3)、白术内酯Ⅰ(4)、双白术内酯(5)、双表白术内酯(6)、杜松脑(7)、白术内酯Ⅱ(8)、白术醚(9)、8-表白术内酯Ⅱ(10)、8-表白术内酯Ⅲ(11)、白术内酯Ⅲ(12)、4R,15-环氧白术内酯Ⅱ(13)、4R,15-环氧-8β-羟基白术内酯Ⅱ(14)、桉叶-4(15)、7-二烯-9α,11-二醇(15)、β-谷甾醇(16)、白术内酯Ⅳ(17)、豆甾醇(18)、葡萄糖(19)、蔗糖(20).结论:化合物15为首次从中药白术中分离鉴定.本文首次报道麸炒白术的系统性化学成分研究.【期刊名称】《中国现代中药》【年(卷),期】2018(020)009【总页数】6页(P1074-1079)【关键词】麸炒白术;桉叶-4(15),7-二烯-9α,11-二醇;化学成分【作者】李滢;杨秀伟【作者单位】北京大学天然药物及仿生药物国家重点实验室,北京 100191;北京大学药学院天然药物学系,北京 100191;北京大学天然药物及仿生药物国家重点实验室,北京 100191;北京大学药学院天然药物学系,北京 100191【正文语种】中文传统中药白术Atractylodis Macrocephalae Rhizoma系菊科植物白术Atractylodes macrocephala Koidz.的干燥根茎，《神农本草经》列为上品，有健脾益气、燥湿利水、止汗安胎之功效。

中医临床用白术，在古代素有土炒、醋浸炒、焙制、土煮、米泔浸后炒等方法，在宋代的《圣济总录》中首次出现“麸炒”白术(Atractylodis Macrocephalae Rhizoma stir-fried with wheat bran)；白术现代炮制品多为土炒白术或麸炒白术。

《中华人民共和国药典》(《中国药典》)2015版一部收载了麸炒白术[1]，已有评述[2]。

中医认为麸炒白术可用于脾胃不和、运化失常、食少胀满倦怠乏力、表虚自汗。

鉴于化学成分是中药药效的物质基础[3]，前文我们报道了生白术化学成分的研究[4]，本文报道麸炒白术化学成分的研究，从其70%乙醇水提取物中鉴定了20个化合物，分别为苍术酮(1)，蒲公英萜醇乙酯(2)，白术内酯Ⅶ(3)，白术内酯Ⅰ(4)，双白术内酯(5)，双表白术内酯(6)，杜松脑(7)，白术内酯Ⅱ(8)，白术醚(9)，8-表白术内酯Ⅱ(10)，8-表白术内酯Ⅲ(11)，白术内酯Ⅲ(12)，4R，15-环氧白术内酯Ⅱ(13)，4R，15-环氧-8β-羟基白术内酯Ⅱ(14)，桉叶-4(15)，7-二烯-9α，11-二醇(15)，β-谷甾醇(16)，白术内酯Ⅳ(17)，豆甾醇(18)，葡萄糖(19)，蔗糖(20)。

化合物15为首次从白术中分离鉴定，丰富了白术中化学结构的多样性。

1 仪器与材料1.1 仪器XT-4A型显微熔点测定仪(北京泰克仪器有限公司)；Autopol Ⅲ型旋光测定仪(Rudolph Research Analytical，Flanders，NJ，USA)，甲醇为溶剂；Nexus-470 FTIR型红外光谱仪(Thermo Nicolet Inc.，Madison，WI，USA)，KBr压片；Bruker AV Ⅲ 400型核磁共振波谱仪(Bruker BioSpin AG Facilities，Fällanden，Switzerland)，四甲基硅烷为内标；Finnigan TRACE 2000 GC-MS质谱仪(EI-MS；Thermo Finnigan，San Jose，CA，USA)；柱色谱硅胶(200～300目)购自青岛海洋化工厂；GF254薄层色谱(TLC)硅胶板分别为青岛海洋化工厂和Merck公司(Darmstadt，Germany)产品。

分析纯环己烷(CHX)、石油醚(PE)、乙酸乙酯(EtOAc)、三氯甲烷(CHCl3)、甲醇(MeOH)、乙醇(EtOH)、正丁醇(BuOH)等为北京化工厂产品。

1.2 材料白术生品于2010年10月采自浙江省磐安县，经北京大学药学院杨秀伟教授鉴定为白术Atractylodes macrocephala Koidz.的根茎，为《中国药典》规定的正品。

凭证标本(No.201010SBZ)存放于北京大学天然药物及仿生药物国家重点实验室。

同批次生白术由北京市鹤延龄中药饮片有限公司按《中国药典》2010版白术项下规定加工成麸炒白术，凭证标本(No.201010CBZ)存放于北京大学天然药物及仿生药物国家重点实验室。

2 提取与分离粉碎的麸炒白术粗粉6.0 kg，用3倍量的70%乙醇水溶液加热回流提取3次，第一次2 h，以后每次各提取1 h；合并提取液，过滤后减压回收溶剂，得乙醇提取物2.0 kg(收率为33.3%)。

将其悬浮在1 L蒸馏水中，用2倍体积分数的CHX萃取5次，得萃取物98 g(收率1.63%)、残留水层依次用EtOAc和水饱和的BuOH 各萃取3次，每次萃取溶剂用量均为2 L，减压回收溶剂，得EtOAc萃取物70g(1.17%)、BuOH萃取物105 g(1.75%)以及残留水溶性部分965.0 g(22.98%)。

将CHX萃取物进行硅胶柱色谱，CHX、CHX-EtOAc(1∶1)、EtOAc梯度洗脱，TLC检识合并相同或类似的流分，得到4个流分(Fr.1～4)。

Fr.1经硅胶柱色谱，以PE为流动相洗脱，得到化合物1(530 mg)。

Fr.2经硅胶柱色谱分离，PE-EtOAc(15∶1)洗脱纯化，再经硅胶柱色谱分离，PE-EtOAc(4∶1)洗脱、重结晶[PE-EtOAc(10∶1)]，得到化合物2(35 mg)、3(25 mg)、4(332 mg)、5(54 mg)。

Fr.3经硅胶柱色谱，PE-EtOAc(4∶1)洗脱，分为Fr.3-1和Fr.3-2两个组分。

Fr.3-1再经反复硅胶柱色谱，PE-EtOAc(4∶1)洗脱，以及PE-EtOAc(5∶1)重结晶纯化，得到化合物6(13 mg)、7(8 mg)、8(86 mg)、9(54 mg)、10(9 mg)。

Fr.3-2与Fr.3-1同样方式经反复硅胶柱色谱和重结晶纯化，得到化合物11(12 mg)、12(1.3 g)、13(0.5 mg)、14(13 mg)和15(4 mg)。

将EtOAc萃取物进行硅胶柱色谱，PE-EtOAc(5∶1→4∶1→3∶1→2∶1)梯度洗脱，得到化合物12(20 mg)、16(37 mg)、17(21 mg)和18(6 mg)。

将BuOH萃取物经硅胶柱色谱，CHCl3-MeOH(10∶1→5∶1→2∶1)梯度洗脱，得到化合物19(350 mg)和20(860 mg)。

3 化合物结构鉴定化合物1：无色棱晶(石油醚，低温数据与前文报道的一致[4]，故鉴定化合物1为苍术酮(atractylone)。

化合物2：白色片状结晶(丙酮H3-30)，2.04(3H，s，Ac-CH3)；13C-NMR(400 MHz，CDCl3)δ：37.4(C-1)，23.5(C-2)，81.0(C-3)，38.9(C-4)，55.6(C-5)，18.7(C-6)，33.1(C-7)，41.2(C-8)，49.2(C-9)，37.5(C-10)，17.5(C-11)，36.7(C-12)，37.7(C-13)，158.0(C-14)，116.9(C-15)，33.7(C-16)，35.8(C-17)，48.7(C-18)，41.2(C-19)，28.8(C-20)，35.1(C-21)，37.9(C-22)，28.0(C-23)，16.6(C-24)，15.5(C-25)，25.9(C-26)，29.9(C-27)，29.8(C-28)，33.3(C-29)，21.3(C-30)，171.0(Ac-CO)，21.3(Ac-CH3)。

1H-NMR数据与文献报道的一致[5]，故鉴定化合物2为蒲公英萜醇乙酯(taraxerol acetate)。

化合物3：无色油状物； cm-1：2931，1744，1442，1373，1231，1027，887；UV λMeOH nm(log ε)：285(4.32)，290(4.35)，335(3.66)，377(3.45)；EI-MS m/z 262，247，219，202，180(100%)，164，105；1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δ：1.21(1H，td，J=13.2，4.2 Hz，H-1α)，1.23(1H，dt，J=13.2，4.3Hz，H-1β)，1.59(1H，m，H-2β)，1.64(1H，m，H-2α)，3β)，1.77(1H，dd，J=12.2，1.2 Hz，H-5α)，2.52(1H，dt，J=12.2，1.6，Hz，H-6β)，1.82(1H，dd，J=12.2，1.2 Hz，H-6α)，2.60(1H，dq，J=14.5，2.5 Hz，H-8α)，1.99(1H，dq，J=14.5，2.5 Hz，H-8β)，1.18(1H，dq，J=13.0，5.0 Hz，H-9α)，1.55(1H，ddd，J=12.4，5.0，2.8 Hz，H-9β)，4.63(2 H，br s，H2-12)，1.74(3H，dd，J=1.6，1.2 Hz，H3-13)，0.82(3H，s，H3-14)，4.49(1H，d，J=1.4 Hz，H-15a)，4.77(1H，d，J=1.4 Hz，H-15b)，2.08(3H，s，Ac-CH3)；13C-NMR(400 MHz，CDCl3)δ：42.0(C-1)，23.4(C-2)，36.7(C-3)，150.9(C-4)，50.3(C-5)，28.7(C-6)，139.8(C-7)，25.6(C-8)，41.5(C-9)，36.2(C-10)，120.3(C-11)，65.3(C-12)，16.5(C-13)，16.0.0(C-14)，105.4(C-15)，171.5(Ac-CO)，21.2(Ac-CH3)。

以上数据与文献报道的一致[6]，鉴定化合物3为白术内酯Ⅶ(atractylenolide Ⅶ)。

化合物4：无色棱晶(c1.34，MeOH)；EI-MS m/z 230[M]+，215(100%)，201，187，174，159，145，131，115，105，91，77，53；NMR数据与前文报道的一致[4]，故鉴定化合物4为白术内酯Ⅰ(atractylenolide Ⅰ)。