实验四甲醛滴定法测定氨基氮含量
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实验八 甲醛滴定法测定氨基氮含量
一、目的
掌握甲醛滴定法测定氨基氮含量的原理和方法
二、原理
水溶液中的氨基酸为两性离子，因而不能 直接用碱滴定氨基酸的羧基。用甲醛处理氨基 酸,甲醛与氨基结合,可形成羟甲基衍生物，使 NH3+上的H+游离出来，这样就可用碱滴定NH3+放 出的H+，从而计算出氨基氮含量。
四、结果计算
1、回收率计算：
实际测得量 甘氨酸氨基氮回收率% 100 理论加入量
公式中: 实际测得量(mg)为滴定1和2号瓶耗用的标准氢氧化 钠溶液毫升数的平均值与3号瓶耗用的标准氢氧化 钠溶液毫升数之差乘以1.4008。 理论加入量(mg)等于2 乘以1.4008。
※1.4008
为1mL 0.1mol/L标准氢氧化钠溶液相当于氮的毫克数。
如样品中只含有某一种已知氨基酸，由甲醛滴定的结果即可算出氨基氮的含 量。如果样品是多种氨基酸的混合物（如蛋白质水解物），则滴定结果不能作 为氨基酸的定量依据。甲醛滴定法常用于测定蛋白质的水解程度，随着水解程 度的增加，滴定值增加，当水解完全后，滴定值保持恒定。
三、操作
1、 取3个100 mL的锥形瓶，编号。于1、2号瓶内各 加入0.1 mol/L的标准甘氨酸溶液2 mL和水5 mL，混 匀。于3号瓶内加入水7mL 。然后向3个瓶中各加酚酞 指示剂5滴，混匀后各加中性甲醛溶液2mL ，再混匀， 分别用0.1 mol/L标准氢氧化钠溶液滴定至溶液显微红 色。重复以上实验两次，记录每次每瓶消耗标准氢氧 化钠溶液的毫升数。取平均值，计算甘氨酸氨基氮的 回收率。 2、取未知浓度的甘氨酸溶液2mL，依上述方法进行 测定，平行做3份，取平均值。计算每毫升甘氨酸溶 液中含有氨基氮的毫克数。
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试剂和器材 1．试剂：
（5）待测样品 未知浓度的甘氨酸溶液。
2．器材 ：
100mL锥形瓶、25mL微量滴定管 、吸量管。
1．试剂： （1）0.1mol/L 标准甘氨酸溶液 准确称取750mg甘氨酸，溶解后定容至100mL。 （2）0.1mol/L 标准氢氧化钠溶液 （3）0.5%酚酞指示剂 称0.5g酚酞溶于100mL50%乙醇。 （4）中性甲醛溶液 甲醛溶液（36～37％，分析纯） 50mL，加入0.5％ 酚酞指示剂1 mL ，用0.1 mol/L的氢氧化钠溶液滴定至 微红，贮于密闭的玻璃瓶中。此试剂在临用前配制。
2、氨基氮计算：
(V未 V对 ) 1.4008 氨基氮含量（mg / mL） 2
公式中： V未 为滴定待测液耗用标准氢氧化钠溶液的平均毫升数。 V对 为滴定对照液（3号瓶）耗用标准氢氧化钠溶液的平 均毫升数。
※1.4008
为1mL 0.1mol/L标准氢氧化钠溶液相当于氮的毫克数。
试剂和器材
一、目的
掌握甲醛滴定法测定氨基氮含量的原理和方法
二、原理
水溶液中的氨基酸为两性离子，因而不能 直接用碱滴定氨基酸的羧基。用甲醛处理氨基 酸,甲醛与氨基结合,可形成羟甲基衍生物，使 NH3+上的H+游离出来，这样就可用碱滴定NH3+放 出的H+，从而计算出氨基氮含量。
四、结果计算
1、回收率计算：
实际测得量 甘氨酸氨基氮回收率% 100 理论加入量
公式中: 实际测得量(mg)为滴定1和2号瓶耗用的标准氢氧化 钠溶液毫升数的平均值与3号瓶耗用的标准氢氧化 钠溶液毫升数之差乘以1.4008。 理论加入量(mg)等于2 乘以1.4008。
※1.4008
为1mL 0.1mol/L标准氢氧化钠溶液相当于氮的毫克数。
如样品中只含有某一种已知氨基酸，由甲醛滴定的结果即可算出氨基氮的含 量。如果样品是多种氨基酸的混合物（如蛋白质水解物），则滴定结果不能作 为氨基酸的定量依据。甲醛滴定法常用于测定蛋白质的水解程度，随着水解程 度的增加，滴定值增加，当水解完全后，滴定值保持恒定。
三、操作
1、 取3个100 mL的锥形瓶，编号。于1、2号瓶内各 加入0.1 mol/L的标准甘氨酸溶液2 mL和水5 mL，混 匀。于3号瓶内加入水7mL 。然后向3个瓶中各加酚酞 指示剂5滴，混匀后各加中性甲醛溶液2mL ，再混匀， 分别用0.1 mol/L标准氢氧化钠溶液滴定至溶液显微红 色。重复以上实验两次，记录每次每瓶消耗标准氢氧 化钠溶液的毫升数。取平均值，计算甘氨酸氨基氮的 回收率。 2、取未知浓度的甘氨酸溶液2mL，依上述方法进行 测定，平行做3份，取平均值。计算每毫升甘氨酸溶 液中含有氨基氮的毫克数。
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试剂和器材 1．试剂：
（5）待测样品 未知浓度的甘氨酸溶液。
2．器材 ：
100mL锥形瓶、25mL微量滴定管 、吸量管。
1．试剂： （1）0.1mol/L 标准甘氨酸溶液 准确称取750mg甘氨酸，溶解后定容至100mL。 （2）0.1mol/L 标准氢氧化钠溶液 （3）0.5%酚酞指示剂 称0.5g酚酞溶于100mL50%乙醇。 （4）中性甲醛溶液 甲醛溶液（36～37％，分析纯） 50mL，加入0.5％ 酚酞指示剂1 mL ，用0.1 mol/L的氢氧化钠溶液滴定至 微红，贮于密闭的玻璃瓶中。此试剂在临用前配制。
2、氨基氮计算：
(V未 V对 ) 1.4008 氨基氮含量（mg / mL） 2
公式中： V未 为滴定待测液耗用标准氢氧化钠溶液的平均毫升数。 V对 为滴定对照液（3号瓶）耗用标准氢氧化钠溶液的平 均毫升数。
※1.4008
为1mL 0.1mol/L标准氢氧化钠溶液相当于氮的毫克数。
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