人参皂苷的提取与分离 论文
实验六 人参中人参皂苷的提取分离及鉴定(共享)
实验六人参中人参皂苷的提取分离及鉴定(共享)一、实验介绍人参是一种传统的中药材，具有滋补强壮、改善免疫功能、抗氧化、抗疲劳等保健作用。
人参中的主要活性成分为人参皂苷，是一类四环倍半萜类化合物，已经被证明具有多种药理活性，包括治疗心血管疾病、神经系统疾病、肿瘤等。
本实验将通过浸提、分离纯化和质谱鉴定等方法，提取并鉴定人参中的人参皂苷。
二、实验原理1、浸提法浸提法是将药材浸入某种合适的溶剂中，使药材中的有效成分与溶剂发生物理或化学变化，达到提取目的的一种分离方法。
2、硅胶柱层析法硅胶柱层析法是将样品溶液通过硅胶柱，利用在硅胶表面的物理吸附或化学吸附作用，将混杂在一起的化合物分离开的方法。
3、质谱鉴定质谱鉴定是一种能够确定样品化学结构和分子质量的分析技术。
常用的质谱仪有基质辅助激光解吸/电离质谱仪（MALDI-TOF MS）、毛细管电泳-电喷雾离子化质谱仪（CE-ESI-MS）、气相色谱-质谱联用仪（GC-MS）等。
三、实验步骤1、人参皂苷的浸提提取取50克粉碎后的人参，加入500 mL纯水，加热至60℃灌装入烧杯中，自然冷却至室温，用纱布过滤液体，重复浸提两次，将过滤液集合并浓缩至100 mL，抽取所有成分并将溶剂蒸干，得到人参的浸提液。
将人参浸提液溶于甲醇，用硅胶柱层析法进行分离。
在硅胶柱中注满硅胶，静置，再用甲醇将硅胶冲洗至洗液pH值小于7，并流至平衡，用稀甲酸使硅胶柱的pH值保持在4.5左右，注入30 ml的样品溶液后，按照乙醇-水（5:95）逐步更换溶剂进行洗提。
收集各部分2 mL溶液，检测其皂苷浓度。
将含有人参皂苷的溶液分别离子化并进入质谱仪，分别进行质谱分析，并比对和参考相关文献，确定人参皂苷的种类及分子质量。
四、实验结果浸提液得率为12.5%，色深浅不一，澄清程度良好。
利用硅胶柱进行层析分离，得到了包含人参皂苷的溶液。
收集了各部分的溶液，并测定了其皂苷浓度，得到各部分的含人参皂苷浓度、总皂苷脂含量和分离效果。
五加科人参属中药皂苷类化合物的分离提取及抗氧化活性研究
长春师范学院硕士学位论文五加科人参属中药皂苷类化合物的分离提取及抗氧化活性研究姓名：王晶申请学位级别：硕士专业：分析化学指导教师：刘春明2010-06-03摘要人参、西洋参和三七系五加科人参属药材中的三种重要代表，其主要有效成分均为达玛烷型人参皂苷。
大量研究结果表明：皂苷类化合物具有较强的生物活性，因此，对于人参皂苷的研究和开发具有重要的理论意义和实际应用价值。
（1）分别采用回流、超声和温浸提取法对人参、西洋参和三七中的皂苷类化合物进行了分离提取对比研究，并应用高效液相色谱法（HPLC）对皂苷类化合物进行定量分析，对比研究表明超声提取法快速、安全、简便、成本低且不破坏成分，在此基础上，采用超声提取法对三种药材中的皂苷类化合物进行大量的分离提取，总皂苷粗提物应用高速逆流色谱技术进行分离纯化研究。
（2）本文采用高速逆流色谱技术（HPCPC）和蒸发光检测器（ELSD）的联用技术对皂苷类化合物进行分离纯化，建立了HPCPC-ELSD法分离五加科人参属中药的皂苷类化合物的新方法。
采用乙酸乙酯-正丁醇-水(1:1:2，v/v/v) 为溶剂体系，经一次分离从三七总皂苷粗提物中分离纯化得到三七皂苷R1，人参皂苷Rg1、Re和Rb1；采用乙酸乙酯-正丁醇-水(1:1:2，v/v/v) 为溶剂体系，从西洋参总皂苷粗提物中分离得到了Re、Rb1和Rc；采用乙酸乙酯-正丁醇-水(0.8:1.2:2，v/v/v) 为溶剂体系，从人参总皂苷粗提物中分离得到了人参皂苷Rb1和Rb2两种单体皂苷。
应用HPLC-ELSD技术对分离得到的皂苷类化合物进行分析，通过与已知化合物的保留时间相对比，进行定性分析；根据其峰面积百分比，确定其纯度均在95%以上。
应用电喷雾串联质谱（ESI-MS n）进一步确定化合物的结构。
结果表明，应用HPCPC-ELSD从中草药粗提物中分离无紫外吸收或者紫外末端吸收的活性物质是一种高效可行的分离技术，HPLC-ELSD和MS n为皂苷类化合物纯度检验和鉴定分析提供了较好的分析方法。
人参中人参皂苷提取分离研究进展
人参中人参皂苷提取分离研究进展一、本文概述Overview of this article人参，作为传统中药材的瑰宝，自古以来便在中医药理论中占据着举足轻重的地位。
人参中的人参皂苷是其主要的药效成分，具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤、抗衰老等多种生物活性，因此，对人参中人参皂苷的提取分离研究一直备受关注。
本文旨在全面综述近年来人参中人参皂苷提取分离的研究进展，从提取方法、分离技术、结构鉴定及生物活性研究等方面进行深入探讨，以期为人参资源的深入开发利用提供理论支持和实践指导。
Ginseng, as a treasure of traditional Chinese medicine, has held a pivotal position in the theory of traditional Chinese medicine since ancient times. The ginsenosides in ginseng are its main pharmacological components, which have various biological activities such as anti-inflammatory, antioxidant, anti-tumor, and anti-aging. Therefore, the extraction and separation of ginsenosides in ginseng has always been of great concern. This article aims to comprehensively review theresearch progress in the extraction and separation of ginsenosides from ginseng in recent years, and conduct in-depth discussions on extraction methods, separation techniques, structural identification, and biological activity research, in order to provide theoretical support and practical guidance for the in-depth development and utilization of ginseng resources.本文首先回顾了人参皂苷的基本结构和分类，阐述了其在人参中的分布和含量。
人参皂苷Re的分离提纯
人参皂苷一.人参皂苷的背景及药理作用人参是一味被广泛用于养身治病的传统中药,与貂皮、鹿茸并称为中国东北三宝。
而人参皂苷又是人参的主要有效成分,其药理作用表现多样。
人参皂苷虽然在人参的药理作用上起了关键性的作用，但其含量很少,只约占4 %。
根据皂苷元的不同,人参皂苷被分为原人参二醇类皂苷、原人参三醇类皂苷及齐墩果酸类皂苷。
现在我们对于单个人参皂苷的药理作用研究已非常深入, 像其在神经系统、小肠传送功能、内分泌系统、免疫系统、信号传导、抗衰老、溶血、烧伤创面愈合、抗肿瘤增效、人的精子活力、药物代谢酶、降血糖方面的影响机理都有相关的新研究成果，人参皂苷Re也已被证实具有抑制中枢神经，促进DNA、RNA合成，促进血清蛋白质合成，促进蛋白质分解酵素活性化，促进刺激副肾皮质荷尔蒙分泌等作用。
人参皂苷作为人参的主要有效成分之一,其药效作用表现的多样性在一定程度上揭开了人参具有奇特功效的神秘面纱。
作为皂苷类成分,其口服直接经肠道吸收是比较差的,大多需要经肠道菌群代谢后,其代谢产物才能被较好地吸收入体内。
从这一点来讲,人参皂苷的药效作用与肠菌代谢的关系是密不可分的,因此,今后需进一步加强人参皂苷肠菌代谢这一关键上游环节的研究,这对于进一步认识人参皂苷起效的物质基础及体内过程是相当重要的,而且有利于判断体外实验结果的价值。
但是,对于人参皂苷在成分及剂量上的配伍研究还显得较为薄弱,这需要在今后的研究中予以加强。
再者,人参皂苷具有典型的双向调节作用,如何通过控制相关条件及合理的配伍来达到治疗目的也是今后值得研究的一个方面。
二．人参皂苷的分离提取人参皂苷在人参中的含量很低，在人参的各个组织器官中的含量都有所不同，这无形中又增加了我们对人参皂苷的分离提取的难度。
在实际生产中，我们一方面要保证皂苷的产率，另一方面又要保证它的生物活性。
下面我就以人参皂苷Re的提取为例，通过硅胶柱层析技术从人参叶三醇皂苷中分离制备较纯人参皂苷Re，采用重结晶技术将分离后较纯Re精制并通过HPLC检测其纯度：（一）材料人参皂苷标准品Re、Rg ，精致人参叶三醇皂苷，薄层层析板Silica Gel 6O—F254，AB-8大孔吸附树脂，硅胶G。
人参皂苷的提取与分离 教学文案
人参皂苷的提取与分离论文人参皂苷的提取与分离学生姓名专业班级学院摘要首先认识人参和人参皂苷，了解人参皂苷的详细作用和功效，接着研究了人参茎叶总皂苷含量提取方法，用详细的工艺提取人参皂苷，并且用对显色反应和薄层层析对提取物进行鉴定，为以后的人参茎叶的开发利用奠定基础。
关键词：皂苷；人参茎叶；鉴定。
Abstract.The first ginseng and ginseng saponin, understanding the role and efficacy of ginseng saponin in detail, then study the effect of ginseng stem leaf total saponin extraction method, with the detailed process of extraction of ginseng saponin, and used for color reaction and thin-layer chromatography to extract were identified, for the future of ginseng stem and leaf development lays a foundation.key words: saponin; ginseng stems and leaves; appraisal;目录摘要 (3)1.3.4增强学习和记忆能力 (8)1.3.5保护心血管系统 (8)4结论 (16)1 绪论1.1 人参概述人参系五加科植物人参(Panax ginseng C．A．Mey．)的干燥根，人类对人参的利用在《神农本草经》中已有记载，据今已有2000多年的历史，但人们偏向于对人参根的利用，而对人参茎叶的开发从近几年才开始。
人参茎叶是人参的地上部分，比根具有更高的人参总皂苷含量，具有补气益肺，祛暑，生津的功能，用于气嘘咳嗽，冒热烦躁，津伤口渴，头目不清，四肢倦乏等症。
实验五 人参皂甙的提取及甙元的分离鉴定
实验五 人参皂甙的提取及甙元的分离鉴定人参为五加科（Araliaceae ）人参属植物人参（Panax gin-seng C.A.Meyer ）的干燥根，为我国特产名贵中药。
具有大补元气、补脾益肺、固脱生津、安神益智的功效。
主治虚咳喘促、食少倦怠、惊悸健忘、久虚不复等症，疗效显著。
有关人参化学成分的研究已有很多报道，近年来取得了较大进展。
日本学者Shibata 等从人参根中分离出10多种皂甙，命名为人参甙皂（gensenoside ）R 。
Ra,2120321,,,,,,,,,g g f ghcu f e d c b b b R R R R R R R R R R --和h R 等，并测定了这些皂甙得化学结构。
近年来对人参地上部分也进行了研究，叶、花、总皂甙中除了含有皂甙类成分外，还有黄酮类成分，主要为山奈酚（Kampferol ）、三叶甙（Trifelin ）和人参黄酮甙（Pana-senoside ）药量及生化实验证明，人参皂甙有人参相同的药理作用，目前认为人参皂甙是人参中主要有效成分。
人参中除含有多种人参皂甙外，还含有少量挥发油、脂肪油、胆碱、β谷甾醇、多种氨基酸和多种维生素等。
人参皂甙的皂甙元有三种，即原人参二醇（Protopanaxaiol ）、原人参三醇（Protoanaxtriol ）及齐墩果酸（Oieanolicacid ）。
前两种皂甙元在水解过程中侧链环合，故水解后实际得到的是人参二醇（Panaxdiol ）及人参三醇（Panaxtriol ）。
一、目的要求①通过实验掌握人参皂甙的提取、精制方法，进一步巩固和熟悉人参皂甙的性质。
②熟悉和掌握人参皂甙的水解条件和方法。
③熟悉和掌握柱层析分离人参皂甙元的原理方法及基本操作技术。
二、人参中已知主要成分的理化性质人参皂甙：多数为白色无定形粉末或无色针状结晶，味微甘苦，具有较强引湿性。
易溶于水、甲醇、乙醇；可溶于正定醇和乙酸乙脂，不溶于乙醚、苯中。
人参茎叶中人参皂苷的提取、分离纯化及其药理作用的研究进展
人参 茎 叶为 五加 科 植 物人 参 的 干燥 茎 叶 ， 人
பைடு நூலகம்
质量 ． 新 型提取 技 术 可 以 优化 人 参 茎 叶 总皂 苷 提 取制 备工 艺 中的 工艺 参 数 ， 以提 高 人 参 总 皂苷 的
提取 率 ．
要花费 ５ － ８年 的生 长周 期 ， 而人 参 茎 叶 相对 成 本
近年 来 ， 酶法 提 取广 泛用 于 中药 有 效 成分 的
提取 ， 相 比于传 统提 取方 法它具 有 的效率 高 、 反应
条件 温 和 、 专一性强等特点 ， 已有 多 个 中药 品种
如： 黑果枸 杞 ｊ 、 银 杏 等 应 用 酶 法 提 取 取 得 较 好效 果 ， 说 明该 方法 值得 研究 和推 广 ． 人 参 茎 叶药
摘要： 人参茎 叶为五加科植物人参 的干燥茎 叶 ， 主要活性 成分 为人参皂 苷 ， 具 有补气 ， 生津， 解暑， 抗疲 劳等功效． 本文对人参茎叶 中人参皂苷 的提取方法 、 分离纯化 和药 理作用进 行 了综述 ， 为研 究人参 茎 叶 皂苷 的提取及应 用提供 了一定 的理论依 据． 关 键 词： 人参茎 叶； 人参 皂苷 ； 提取 ； 分 离纯化 ； 药理活性
目前提 取人 参 皂苷 的方 法 有 很 多 种 ， 多 使 用 不 同浓 度 的 乙醇 作 为溶 剂 ， 于杰 等 在人 参 茎 叶 总皂 甙提取 精制 工艺 研究 中 ， 通 过试 验表 明 ， 人 参
取 法应 用于许 多植 物 有 效 成分 的提 取 ， 具 有 操 作 简便 、 提取 时 间短 ， 得 率高 等优 点 Ｊ ． 季 晓 晖 以 甲醇 为 提 取溶 剂 ， 用 超 声 波 法 从 西 洋参 （ Ｐ ａ ｎ ａ ｘ ｑ ｕ ｉ ｎ ｑ ｕ ｅ ｆ ｏ ｌ ｉ ｕ ｍ Ｌ ． ） 叶 中提 取 人参 皂
人参中人参皂苷的提取、分离和测定
人参中人参皂苷的提取、分离和测定一、本文概述二、人参皂苷的提取方法人参皂苷的提取是从人参原材料中分离和纯化目标化合物的重要步骤。
提取方法的选择直接影响皂苷的得率和纯度。
常用的提取方法包括溶剂提取法、微波辅助提取法、超声波辅助提取法以及超临界流体提取法等。
溶剂提取法：这是最常见且相对简单的方法，主要利用人参皂苷在不同溶剂中的溶解度差异进行提取。
常用的溶剂包括甲醇、乙醇、丙酮等。
通过浸泡、回流或渗漉等方式，使人参皂苷从原材料中溶解到溶剂中，再通过蒸发溶剂得到粗提物。
微波辅助提取法：微波提取是利用微波对溶剂和原材料的加热作用，提高提取效率和速度。
微波产生的热能可以使细胞壁破裂，加速溶剂对人参皂苷的渗透和溶解，从而缩短提取时间。
超声波辅助提取法：超声波提取是通过超声波产生的空化效应、机械效应和热效应等作用，增加溶剂对原材料的穿透力，提高人参皂苷的提取率。
同时，超声波还可以破坏细胞结构，使皂苷更容易释放到溶剂中。
超临界流体提取法：超临界流体提取是利用超临界状态下的流体（如二氧化碳）作为溶剂，通过调节压力和温度来控制流体的溶解能力，从而实现对人参皂苷的高效提取。
这种方法具有提取效率高、操作温度低、对原料破坏小等优点。
在实际应用中，可以根据人参原材料的性质、目标皂苷的特点以及实验条件等因素，选择最合适的提取方法。
为了提高提取效果，还可以结合使用多种提取方法，如先用溶剂提取法得到粗提物，再用超声波或微波辅助提取法进行进一步的纯化。
三、人参皂苷的分离技术人参皂苷的分离是提取过程后的关键步骤，其主要目标是从复杂的混合物中分离出单一或特定类型的人参皂苷。
这通常涉及到一系列的色谱技术，包括液-液分配色谱、固相萃取、柱色谱、薄层色谱以及高效液相色谱（HPLC）等。
液-液分配色谱，也称为液-液萃取，是基于不同物质在两种不相溶溶剂中的溶解度差异进行分离的。
这种方法对于初步分离人参皂苷和其他杂质非常有效。
固相萃取是一种基于吸附和解吸原理的分离技术。
人参茎叶中提取分离人参皂苷等有效成分研究
人参茎叶中提取分离人参皂苷等有效成分研究人参为五加科属植物人参的根,为我国名贵的中药材。
作为我国东北三宝之一,它与鹿茸、貂皮齐名,具有十分重要的药用活性价值,人参中最重要的药用活性成分为人参皂苷其次为人参多糖。
由于人参价格昂贵、产量有限且人参茎叶中具有人参根部相同的药用活性成分,本实验采用人参茎叶作为原材料提取人参皂苷及人参多糖。
实验内容如下：1.利用多种单因素及正交试验确定人参茎叶中人参皂苷的最佳提取工艺,根据实验结果得到30%醇提80℃C热回流提取2次共4.5小时为人参皂苷最佳提取工艺。
2.利用静态、动态试验筛选若干种大孔吸附树脂选取最佳吸附树脂XDA-7
作为人参皂苷分离材料再从多种不同性能脱色树脂中筛选出人参皂苷最佳脱色树脂D762,得到人参皂苷最佳精制产物。
3.利用树脂多柱法结合硅胶柱层析法用于人参皂苷单体Rgl和Re的精制分离,通过实验确定硅胶柱层析法中洗脱剂计配比为氯仿：甲醇：乙酸乙酯=8.5.1：0.5,可以将人参皂苷单体Rgl和Re实时精确的分离出来。
4.利用适当的薄层层析色谱法进行人参皂苷单体Rgl和Re定性分析及高效液相色谱法进行人参皂苷单体Rgl和Re定性及定量分析。
5.利用多种单因素及正交试验确定人参茎叶中人参多糖的最佳提取工艺,并对最佳工艺提取的多糖进行精制,得到人参多糖精制产物。
人参皂苷的提取分离方法研究进展
人参皂苷的提取分离方法研究进展作者：杨雨等来源：《江苏农业科学》2014年第05期摘要：人参皂苷是人参中的主要有效成分之一，具有多种重要的药理活性，目前已成为一些特效药的主要成分。
人参皂苷的有效提取分离是其进一步研究和利用的关键前提，科学高效地提取分离人参皂苷是当前人参研究面临的一个重要课题。
本文综述了国内外人参皂苷提取分离方法的研究进展，包括经典的传统提取分离方法和近代发展起来的提取分离方法，以期为人参皂苷的提取与分离提供参考。
关键词：人参皂苷；提取；分离；研究进展中图分类号： R914；R284.2文献标志码： A文章编号：1002-1302（2014）05-0214-04人参（Panax ginseng C. A. Meyer）是五加科人参属多年生草本植物，为传统名贵中药，具有补气生血、扶正祛邪等功效。
人参皂苷是人参的主要有效成分之一，约占人参总质量的4%，具有增强人体免疫、抗衰老、抗疲劳、治疗心血管疾病等作用，目前已成为一些特效药的主要成分。
要实现人参中人参皂苷的高效提取浓缩，并且尽可能地去除无效杂质以纯化制剂，提取分离技术至关重要。
本文对已报道的人参皂苷的提取分离方法进行综述，以期为人参皂苷的提取与分离提供参考。
1人参皂苷的提取方法1.1传统的提取方法1.1.1煎煮法煎煮法主要是以水作为提取溶剂，将药物加热煮沸一定的时间而得到煎煮液，需要重复进行多次，主要用来提取中草药中水溶性较好的组分，适用于有效成分能溶于水且对加热不敏感的药材，是中草药组分提取中最早最常用的提取方法之一。
陈阿丽等以人参皂苷Rb1、Re、Rg1的提取率为考察指标，采用正交试验法优选人参的煎煮提取条件，结果表明：以人参质量8倍量的水煎煮2次，每次1h的提取方法，人参皂苷提取率最高[1]。
1.1.2浸渍法浸渍法是在常温或加热的条件下，依照相似相溶原理，用溶剂浸泡药材而使药材中的有效成分浸出，达到提取的目的。
张春红等采用提取温度60 ℃、浸提时间2 h、溶剂量为浸提物10倍量的浸渍法提取人参皂苷，总皂苷的最高得率达8.33%[2]。
人参皂苷Rd的分离提纯
第26卷第4期2007年12月大连轻工业学院学报Journal of Dalian Institute of Light IndustryVol.26No.4Dec.2007文章编号:100524014(2007)0420294204人参皂苷Rd 的分离提纯王 岩, 于小溪, 吴 迪, 鱼红闪, 金凤燮(大连工业大学生物与食品工程学院,辽宁大连 116600)摘要:为了得到人参皂苷Rd ,从西洋参中提取人参总皂苷,再分离得到人参二醇皂苷,其得率为6%.并采用硅胶柱层析法对人参二醇皂苷进行分离,从而得到较纯的人参皂苷Rd.结果表明,在硅胶柱分离中,从30g 二醇类皂苷分离得到含人参皂苷Rd 的皂苷9.46g ,得率为32.5%,得到较纯人参皂苷Rd4.70g ,得率为15.6%.采用结晶的方法对1g 样品(硅胶柱分离后的较纯人参皂苷Rd )进行提纯,得到人参皂苷Rd 500mg ,得率为50%,其纯度为98%左右.关键词:人参皂苷;人参二醇皂苷;柱层析中图分类号:S567.51;TQ033文献标志码:ASeparation and purif ication of ginsenoside RdWANG Y an , Y U X iao 2xi , WU Di , Y U H ong 2shan , J I N Feng 2xie(School of Biological &Food Engineering ,Dalian Polytechnic University ,Dalian 116034,China )Abstract :Protopanaxdiol was ext racted from western ginseng saponins and t he yield was 6%.When silica gel chromatograp h was applied o n separation ,9.46g ginsenoside Rd was obtained f rom 30g western general ginseng saponins ,t he yield of which was 32.5%.A 4.70g partially p ure ginsenoside Rd was obtained toget her ,t he yield of which was 15.6%.We adopt t he mot hod of crystallization to ep urate.A 1g sample of ginseno side Rd was t hen crystallized and get 500mg p ure ginsenoside Rd(t he p urity was 98%)was obtained ,t he yield of which was 50%.K ey w ords :p rotopanaxdiol ;ginseno side ;column chromatograp hy收稿日期:2007210229.基金项目:国家自然科学基金资助项目(20476017);辽宁省高等学校优秀人才支持计划资助项目(RC 204205);辽宁省科学技术基金资助项目(20042132).作者简介:王岩(19822),男,硕士研究生;通信作者:金凤燮(19452),男,教授.0 引 言20世纪60年代起人们对人参化学成分的分离、提纯和结构鉴定的研究取得了突破性的进展[122].20世纪90年代初我国学者在国内外研究基础上,对人参根及其地上部分的皂苷成分又深入地进行了分离鉴定,对单体皂苷的化学代谢、半合成、碱水解及分析方法进行了系统研究,自人参茎叶中得到10种新的皂苷成分[324].到目前为止,国内外学者已经从生晒参、白参、红参中分离鉴定了60余种人参皂苷.本文从西洋参中提取人参总皂苷,经过分离得到人参二醇皂苷酶,并采用硅胶柱层析法对人参总皂苷进行分离,从而得到较纯的人参皂苷Rd.在此基础上,采用结晶的方法,对较纯的人参皂苷Rd 进行进一步的提纯.1 材料与方法1.1 材 料人参皂苷标准品,大连生物食品科学技术研究所提供;薄层层析板silica gel 602F254,德国Merck 公司生产;硅胶G 由青岛海洋化工厂提供;西洋参由吉林抚松第一人参厂提供;精制的西洋参总皂苷,由本实验室制得.1.2 方 法1.2.1 人参皂苷的提取西洋参须用70%乙醇浸泡3次,浓缩、脱脂,经大孔树脂分离得到,主要含Rb1、Rc、Rd的人参二醇类皂苷,用于Rd的分离[5].1.2.2 硅胶柱层析法硅胶柱层析法是利用不同物质理化性质的差异而建立起来的技术,整个系统都由固定相和流动相组成.当待分离的混合物随流动相通过固定相时,由于各组分的理化性质存在差异,与两相发生相互作用(吸附、溶解、结合等)的能力不同,在两相中的分配不同,而且随溶媒向前移动,各组分不断地在两相中进行再分配.与固定相相互作用力越弱的组分,随流定相移动时受到的阻滞作用小,向前移动的速度快.反之亦然.分部收集流出液,可得到样品中的各单一组分,从而达到将各组分分离的目的.制备样品胶:将分离所得西洋参人参总皂苷用甲醇和少量氯仿溶解,加入80目硅胶,水浴蒸干,过程中不断搅拌,用研钵将其研成粉末,待用.装柱:取300～400目硅胶作为分离胶,用漏斗慢慢装入到玻璃柱内,使其铺放均匀(其间要用真空泵把硅胶抽实),在其上用漏斗装入样品胶,最上层放脱脂棉,然后用洗脱液洗脱.首先通入氯仿直至色素至分离胶底部,然后按照V(氯仿)∶V(甲醇)=9.5∶0.5,9∶1……进行梯度洗脱, TL C检测分离结果.最后用旋转蒸发仪浓缩,蒸干得到固体产物.1.2.3 薄层层析法薄层层析法[6]是以涂布于支持板上的支持物作为固定相,以合适的溶剂为流动相,对混合样品进行分离、鉴定、定量的一种层析技术.本实验采用的薄层层析板是德国Merck公司的产品,将薄层层析板在110℃烘箱活化30～60min,用刻度毛细管吸取标准品及样品,点样于薄层层析板上.每次的点样量依照样品浓度确定点样次数,每次点样后均须用电吹风吹干.将点好样品的薄层板放入层析缸的展开剂中,浸入展开剂的深度为距薄层板底边0.5～1.0cm(切勿将样点浸入展开缸中),密封盖,待展开至规定距离后,取出,吹干溶剂,喷洒硫酸显色.所用展开剂为V(氯仿)∶V(甲醇)∶V(水) =7∶3∶0.5,显色方法为10%硫酸显色.1.2.4 H PL C方法测定人参皂苷单体的纯度本实验使用HPL C[7]的目的主要是检测硅胶柱分离提纯后得到的人参皂苷Rd的纯度,从而检验实验是否成功.采用仪器为高效液相色谱分析仪,Waters Model510、Waters490Programmable;检测器为UV Detector、Waters740Data Module;色谱柱为Thermo2Hypersil ODS2250mm×4.5mm, 5μm;进样量为10μL.流动相A为乙腈;流动相B为水.取样品及标准品各2mg,分别溶于2mL 甲醇2mL中.流动相的比例为;0min时,A为20%,B为80%;20min时A为20%,B为80%; 31min时,A为32%,B为68%;40min时,A为43%,B为57%;70～80min时,A为100%,B为0%.2 结果与讨论本论文为了得到人参皂苷Rd,从2kg西洋参中提取人参总皂苷,再分离得到人参二醇皂苷酶120g,并采用硅胶柱层析法对人参总皂苷进行分离,从而得到较纯的人参皂苷Rd.2.1 硅胶柱分离人参皂苷Rd称取30g西洋参人参总皂苷样品用甲醇和少量氯仿充分溶解后,加入75g80目硅胶,水浴蒸干,过程中不断搅拌,用研钵将其研成粉末,制成样品胶待用.取500g300～400目硅胶作为分离胶,用漏斗慢慢装入到玻璃柱内,使其铺放均匀(其间要用真空泵把硅胶抽实),在其上用漏斗装入样品胶,最上层放脱脂棉,然后用洗脱液洗脱.首先通入氯仿直至色素至底部,然后按照V(氯仿)∶V(甲醇)=9.5∶0.5,9∶1……进行梯度洗脱,每次250mL,分别收集洗脱液,TL C检测分离结果如图1所示.根据上述TL C检测结果和各瓶收集的成分,对各瓶收集液进行合并处理,分别用旋转蒸发仪浓缩,水浴蒸干,称重,放入干燥的容器中保存.取少量蒸干后的样品,加入少量的甲醇溶解,TL C 检测结果如图2所示.由表1可知,西洋参人参总皂苷样品含有Rd,Rc,Rb1,Ra等人参皂苷单体,经过硅胶柱分离后,可以得到较纯的Rd,Rc,Rb1的人参皂苷单体,其中Rd为单点,纯度较高,其得率为15.6%,较纯Rc得率为8.2%,较纯Rb1得率为16.1%.592第4期王 岩等:人参皂苷Rd的分离提纯图中4～92为收集的瓶号,PPD,Rb1,Rb2,Rc,Rd为标准品图1 人参皂苷分离洗脱的TL C图谱Fig.1 TL C pattern of protopanaxdiol separated by columnchromatography图中16～92为收集的瓶号,PPD,Rb1,Rb2,Rc, Rd为标准品图2 收集人参总皂苷的TL C图谱Fig.2 TL C pattern of collecting protopanaxdiol表1 人参总皂苷洗脱收集表Tab.1 The separation and elution of protopanaxdiol 序号瓶号成分m(人参皂苷)/g得率/% 116Rd(较纯) 1.36 4.5 217～20Rd(单点) 4.7015.6 321～23Rd,Rc 3.4211.4 424Rc较多0.50 1.7 525～29Rc(较纯) 2.468.2 630,31Rc,Rb1 6.8822.9 732～43Rb1(较纯) 4.8416.1 844～82Rb1,Ra0.48 1.6 983～92Ra0.190.6692大 连 轻 工 业 学 院 学 报第26卷2.2 人参皂苷单体的提纯及检测人参皂苷单体的精制:经硅胶柱分离的人参皂苷Rd ,仍然含有少量的其他人参皂苷单体,需要对分离后的人参皂苷Rd 进一步提纯,本文采用冷却结晶的方法对其进行提纯处理.称取上述分离后纯度较高的人参皂苷Rd 1g ,加入20mL 热的甲醇溶液,使其充分溶解,冷却放置1～2d ,然后进行过滤处理,得到200mg 晶体.滤液进行二次结晶处理,过滤,得到300mg 人参皂苷Rd 晶体.为了检测上述处理后的人参皂苷Rd 单体的纯度,本文采用高效液相色谱HPL C 方法对其进行检测.其结果如图3所示.图3 人参皂苷Rd 高效液相色谱图Fig.3 HPL C of ginsenoside Rd从图3可以看出,分离的人参皂苷Rd 经结晶提纯后,人参皂苷Rd 的纯度很高,可以达到98%以上.3 结 论(1)从西洋参须中分离提取人参二醇类皂苷,其得率为6%.(2)硅胶柱分离西洋参人参二醇类皂苷样品30g ,最终得到了人参皂苷单体Rd ,Rc ,Rb1等,得到含人参皂苷Rd 的皂苷9.46g ,得率为32.5%,得到纯Rd 4.70g ,得率为15.6%;较纯Rc 2.46g ,得率8.2%;较纯Rb14.84g ,得率为16.1%.(3)采用结晶的方法对1g 样品(硅胶柱分离后的较纯人参皂苷Rd )进行提纯,得到人参皂苷Rd 500mg ,得率为50%,其纯度为98%左右.(4)人参总皂苷经硅胶柱分离后,各组分间并没有完全分离,还存在互相混合的部分,含有人参皂苷Rd 单体的皂苷质量为9.46g ,其中纯度较高的部分为4.70g ,其他则与人参皂苷Rc 或其他皂苷单体混合在一起,没有分离出来,有待以后进一步研究.参考文献:[1]SANADA S ,KONDO N ,SHOJ I J ,et al.Studies onthe saponins of ginseng structures of ginsenoside Ro ,Rb ,Rc ,Rd[J ].Chem Pharm Bull ,1974,22(2):4212428.[2]YA HARA S.Saponins of bads and flowers of panaxginseng C A Meyer Isolation of ginsenside Rd ,Re ,Rg[J ].Chem Pharm Bull ,1976,24:321223215.[3]蔡培列.吉林人参叶中人参皂甙的分离与鉴定[J ].药学学报,1982,17:500.[4]陈英杰,张绍林,王吉星,等.人参叶中微量新皂K 2La的分离与鉴定[J ].药学学报,1990,25(5):3792381.[7]李泰平.人皂苷药理活性的研究[J ].生物学教学,2003,28(4):123.[5]马小琼,鱼红闪,田兵,等.人参皂甙组分的分离方法[J ].大连轻工业学院学报,1999,18(1):39243.[6]HIA I S.A calorimetric estimation of ginseng Saponins[J ].Planta Medica ,1975,28(1):3632365.[7]孙毓庆.分析化学[M ].北京:人民卫生出版社,1992:127,15245,73281.792第4期王 岩等:人参皂苷Rd 的分离提纯。
人参皂苷的提取
第一章综述1.1 人参皂苷的简介人参为五加科植物人参(Panax ginseng C.A.Mey.)的干燥根，是传统名贵中药，始载于我国第一部本草专著《神农本草经》。
其栽培者称为“园参”，野生者称为“山参”。
人参具有大补元气、复脉固脱、补脾益肺、生津、安神之功能，用于体虚欲脱、肢冷脉微、脾虚食少、肺虚喘咳、津伤口渴、内热消渴、久病虚羸、惊悸失眠、阳痿宫冷、心力衰竭、心源性休克等的治疗。
人参的化学成分很复杂，有皂苷、挥发油、糖类及维生素等。
经现代医学和药理研究证明，人参皂苷为人参的主要有效成分，它具有人参的主要生理活性。
人参皂苷（ginsenoside，GS)是人参的主要有效成分，现已明确结果的GS单体约有40余种；在人参中的含量在4%左右。
其中研究最多且与肿瘤细胞凋亡最为相关的为Rg3与Rh2。
众多研究表明，它具有较高的抗肿瘤活性，对正常细胞无毒副作用，与其他化疗药物（如顺铂）联合应用有协同作用。
人参皂苷通过调控肿瘤细胞增殖周期、诱导细胞分化和凋亡来发挥抗肿瘤作用。
将肿瘤细胞诱导分化成正常细胞有利于控制肿瘤发展，诱导肿瘤细胞凋亡使细胞解体后形成凋亡小体，不引起周围组织炎症反应。
Popovich等研究认为，人参皂苷可以促进人白血病细胞的凋亡，其途径与地塞米松相识，均为受体依赖性。
目前我国对人参皂苷的提取分离方法、制剂工艺、抗肿瘤作用机制以及临床应用等方面做了大量研究，而且已经有人参皂苷的新产品推向市场。
1.2 人参皂苷成分人参的根、茎、叶、花及果实中均含有多种人参皂苷(ginsenosides)。
到目前为止，文献报道从人参根及其它部位已分离确定化学结构的人参皂苷有人参皂苷-Ro、-Ra1、-Ra2 、-Rb1、-Rb2、-Rb3、-Rc、-Rd、-Re、-Rf、-Rg1、-Rg2、-Rg3、-Rh1、-Rh2及-Rh3 等50余种人参皂苷。
Rh2：具有抑制癌细胞向其它器官转移，增强机体免疫力，快速恢复体质的作用。
人参中人参皂苷的提取分离及鉴定
实验六人参中人参皂苷的提取分离及鉴定人参为五加科植物人参(Panax ginseng C.A.Mey.)的干燥根，是传统名贵中药，始载于我国第一部本草专著《神农本草经》。
其栽培者称为“园参”，野生者称为“山参”。
人参具有大补元气、复脉固脱、补脾益肺、生津、安神之功能，用于体虚欲脱、肢冷脉微、脾虚食少、肺虚喘咳、津伤口渴、内热消渴、久病虚羸、惊悸失眠、阳痿宫冷、心力衰竭、心源性休克等的治疗。
人参的化学成分很复杂，有皂苷、挥发油、糖类及维生素等。
经现代医学和药理研究证明，人参皂苷为人参的主要有效成分，它具有人参的主要生理活性。
人参的根、茎、叶、花及果实中均含有多种人参皂苷(ginsenosides)。
到目前为止，文献报道从人参根及其它部位已分离确定化学结构的人参皂苷有人参皂苷-Ro、-Ra1、-Ra2 、-Rb1、-Rb2、-Rb3、-Rc、-Rd、-Re、-Rf、-Rg1、-Rg2、-Rg3、-Rh1、-Rh2及-Rh3 等50余种人参皂苷。
根据皂苷元的结构可分为A、B、C三种类型：①人参二醇型-A 型，②人参三醇型-B型，③齐墩果酸型-C型。
A型和B型皂苷均属四环三萜皂苷，其皂苷元为达马烷型四环三萜，A型皂甙元称为20(S)-原人参二醇[20（S）-protopanaxadiol]。
B型皂甙元称为20(S)-原人参三醇[20（S）-protopanaxatriol]。
C型皂苷则是齐墩果烷型五环三萜的衍生物，其皂苷元是齐墩果酸(oleanolic acid)。
[目的要求]1.通过实验进一步掌握三萜类化合物的理化性质及提取、分离和检识方法。
2.学习和掌握简单回流提取法、两相溶剂萃取法、旋转蒸发器、大孔树脂柱色谱等基本实验操作技能。
[实验原理]人参的主要成分为人参皂苷，总皂苷含量约4％，人参皂苷大多数是白色无定形粉末或无色结晶，味微甘苦，具有吸湿性。
人参皂苷易溶于水，甲醇、乙醇，可溶于正丁醇、乙酸、乙酸乙酯，不溶于乙醚、苯等亲脂性有机溶剂。
实验六人参中人参皂苷的提取分离及鉴定
实验六人参中人参皂苷的提取分离及鉴定人参为五加科植物人参（Panax ginseng C.A.Mey.）的干燥根，是传统名贵中药，始载于我国第一部本草专著《神农本草经》。
其栽培者称为“园参”，野生者称为“山参".人参具有大补元气、复脉固脱、补脾益肺、生津、安神之功能，用于体虚欲脱、肢冷脉微、脾虚食少、肺虚喘咳、津伤口渴、内热消渴、久病虚羸、惊悸失眠、阳痿宫冷、心力衰竭、心源性休克等的治疗。
人参的化学成分很复杂，有皂苷、挥发油、糖类及维生素等。
经现代医学和药理研究证明，人参皂苷为人参的主要有效成分，它具有人参的主要生理活性。
人参的根、茎、叶、花及果实中均含有多种人参皂苷（ginsenosides）.到目前为止，文献报道从人参根及其它部位已分离确定化学结构的人参皂苷有人参皂苷-Ro、—Ra1、-Ra2 、—Rb1、—Rb2、—Rb3、-Rc、-Rd、—Re、—Rf、—Rg1、—Rg2、-Rg3、—Rh1、-Rh2及—Rh3 等50余种人参皂苷。
根据皂苷元的结构可分为A、B、C三种类型：①人参二醇型—A型，②人参三醇型-B型,③齐墩果酸型-C型。
A型和B型皂苷均属四环三萜皂苷，其皂苷元为达马烷型四环三萜，A型皂甙元称为20（S）—原人参二醇［20（S）-protopanaxadiol］。
B型皂甙元称为20(S)—原人参三醇[20(S）—protopanaxatriol］。
C型皂苷则是齐墩果烷型五环三萜的衍生物，其皂苷元是齐墩果酸(oleanolic acid）。
[目的要求］1。
通过实验进一步掌握三萜类化合物的理化性质及提取、分离和检识方法。
2。
学习和掌握简单回流提取法、两相溶剂萃取法、旋转蒸发器、大孔树脂柱色谱等基本实验操作技能.［实验原理］人参的主要成分为人参皂苷，总皂苷含量约4％，人参皂苷大多数是白色无定形粉末或无色结晶，味微甘苦，具有吸湿性.人参皂苷易溶于水,甲醇、乙醇，可溶于正丁醇、乙酸、乙酸乙酯，不溶于乙醚、苯等亲脂性有机溶剂。
人参皂苷的提取分离方法研究进展
2 分离方法
2． 1 固 －
等作用，目前已成为一些特效药的主要成分。要实现人参中 法，人参皂苷提取率最高［1］。
人参皂苷提取和分离纯化方法的研究进展
湖南农业大学课程论文学院:班级:姓名:学号:课程论文题目:人参皂苷提取和分离纯化方法的研究进展课程名称:评阅成绩:成绩评定教师签名:日期:年月日人参皂苷提取和分离纯化方法的研究进展学生:(湖南农业大学园艺园林学院,长沙)摘要:人参皂苷是人参的主要活性成分之一,具有提高免疫力,抗氧化,抗疲劳,抗肿瘤等多种药理活性作用,如何提高效率得到高质量的人参皂苷现已成为研究热点。
因此,本文综述了人参皂苷提取、分离纯化方法,旨在为人参皂苷开发和利用提供一定的科学依据。
关键词:人参皂苷提取工艺分离纯化1前言人参为五加科植物人参(Panax ginseng C.A.Mey)的干燥根,主产于我国吉林长白山脉、辽宁、黑龙江、河北、山西等地,是我国传统名贵的中药材。
现代研究表明,人参中已经分离鉴定40余种人参皂苷单体,其次还含有人参多糖、氨基酸、蛋白质、人参二醇、人参三醇等有效成分,其中人参皂苷为人参中的主要活性成分之一,具有保护心功能,降血糖,抗氧化,抗疲劳,抗肿瘤等药理活性作用[1-2],选用合理的提取分离方法得到高质量的人参皂苷已成为研究热点。
据文献报道[3-4],传统提取分离方法,如煎煮法、渗漉法、索氏提取法、柱层析法等均在中药制药业发展过程中发挥了重大作用。
但是,这些方法均不同程度的存在提取周期长,有效成分流失多,提取效率低等问题。
随着现代科学技术的不断发展,出现了许多新型的提取分离技术,如超临界二氧化碳萃取技术等,运用这些技术不仅降低了生产成本,又能提高其得率,对人参产业化、确化、自动化提供了技术指导。
2提取工艺研究2.1微波提取法微波提取具有设备简单,节省时间,萃取率高,投资少,节省溶剂,污染小等优点。
刘永练[5]等采用微波提取法对西洋参干燥根中的人参皂苷进行提取,结果发现人参皂苷得率高达5.53%,比乙醇回流提取率提高29%,提取时间是乙醇回流的2%。
另有实验证实了微波提取人参皂苷的提取率为8%,是常规回流法的2.67倍。
人参皂苷的提取分离方法研究进展
人参皂苷的提取分离方法研究进展人参皂苷是人参中的重要活性成分，具有抗肿瘤、抗氧化、抗炎等多种药理作用。
近年来，随着对人参皂苷研究的深入，其提取分离方法也得到了广泛。
本文对近年来人参皂苷的提取分离方法研究进展进行综述，总结各种方法的优缺点，并探讨人参皂苷提取分离方法的未来发展方向。
人参皂苷是一种由人参中提取的天然化合物，具有广泛的药理作用和生物活性。
随着人们对人参皂苷药理作用的不断发现，其提取分离方法也成为了研究的热点。
本文将对近年来人参皂苷的提取分离方法进行综述，旨在为相关研究提供参考和借鉴。
传统的人参皂苷提取分离方法主要包括溶剂萃取、沉淀、柱色谱等。
这些方法操作简单，适用于大规模生产，但分离效率较低，纯度不高，且有机溶剂的使用对环境造成了污染。
为了提高分离效率和纯度，人们不断探索新的提取分离方法。
这些方法主要包括超临界流体萃取、高速逆流色谱、分子印迹技术等。
超临界流体萃取：该方法具有高效、快速、节能等优点，适用于分离热敏性和易氧化性物质。
在人参皂苷的提取分离中，超临界流体萃取能够有效地提取和分离人参皂苷，但设备成本较高，需要进一步降低成本。
高速逆流色谱：该方法是一种高效的液相色谱技术，可用于分离制备高纯度的人参皂苷。
其优点是分离效率高、纯度高、速度快，但需要使用大量的有机溶剂，且操作难度较大。
分子印迹技术：该方法是一种新兴的分离技术，通过制备分子印迹聚合物特异性地吸附目标分子。
在人参皂苷的提取分离中，分子印迹技术具有高选择性和高吸附容量，能够实现目标分子的高效分离，但制备分子印迹聚合物较为复杂，需要进一步优化制备条件。
近年来，一些新的提取分离方法如双水相萃取、膜分离技术、离子液体等也逐渐应用于人参皂苷的提取分离。
这些方法有的能够简化操作流程，提高分离效率，有的则能够降低能耗和污染。
例如，双水相萃取技术利用两种水溶性聚合物在不同的浓度下可以实现人参皂苷的选择性萃取；膜分离技术则能够实现人参皂苷的分子级别分离，提高纯度和收率；离子液体则作为一种新型的溶剂，具有优异的溶解性和稳定性，能够有效地溶解和分离人参皂苷。
人参皂苷提取工艺的研究
人参皂苷提取工艺的研究【摘要】为提高人参皂苷的提取率和纯度，本文以人参皂苷re和rb1为指标，比较了回流提取法、超声水提法、湿法粉碎提取法3种不同方法提取人参皂苷的优劣。
结果表明：回流提取法、超声水提法湿法、湿法粉碎提取法人参皂苷re提取率分别为83.38％、90.23％、96.78％；人参皂苷rb1提取率分别为73.34％、80.11％、90.71％。
综合分析，说明湿法粉碎提取法艺效果最佳，超声水提法次之，回流提取法效果最差。
本研究为工业化提取人参皂苷提供了新途径。
【关键词】人参皂苷re、rb1；回流提取法；超声水提法；湿法粉碎提取法人参为五加科植物人参(panaxginsengc.a.mey)的干燥根，别名山参、鬼盖、棒槌、土精、神草、棒槌等。
是多年生草本植物，喜阴凉、湿润的气候。
人参被人们称为“百草之王”，是闻名遐迩的“东北三宝”之一，历来是我国中医的名贵药材。
味甘、微苦、微温，可补气、生津安神、增强免疫力。
其主要活性成分为人参皂苷，目前为止共分离出30余种，其中主要为人参皂苷ra1、ra2、ra3、rb1、rb2、rb3、rc、rd、re、rf、rgl、rg2、rg3、rhl等。
人参皂苷提取方法较多，如浸渍法［1］、回流提取法［2］、超声波提取法［3-4］、醇-吸附树脂法［5］和微波法［6］等。
本文对回流提取法、超声水提法、湿法粉碎提取法进行了比较。
1实验材料与仪器日本岛津lc-2010aht型高效液相色谱仪；天孚牌电子计数天平由金羊天平仪器公司生产；3l超声波提取器(上海超声波仪器厂)；高速组织捣碎机(上海标本模型厂)；101-3c型烘箱(上海实验仪器厂)；人参购于吉林市药材站；人参皂苷re和人参皂苷rb1标准对照由中国药品生物制品检定所提供；甲醇为色谱纯；乙腈为色谱纯，其余试剂为分析纯。
2实验方法2．1人参皂苷的提取方法2．1．1超声水提法参照文献［7］的方法，称取人参粉末40g，加定量水浸泡过夜，常温超声提取3次，超声时间每次40min，抽滤，合并滤液，上d101大孔吸附树脂柱，去除杂质，水洗脱至流出液为无色，再用80％乙醇洗脱至洗脱液tlc检查无皂苷反应为止，乙醇洗脱液减压回收至干，残渣即为人参皂苷粗品，定容至200ml量瓶中，摇匀备用。
人参皂苷Rf的分离提纯
人参皂苷Rf的分离提纯李鹏飞;何丹;鱼红闪;金凤燮【摘要】Separation and purification of ginsenoside Rf from ginseng root was studied. Total ginsenoside were extracted from ginseng root by methanol and Rf were separated from total ginsenoside by silica gel column.The result showed that 20. 5 g total ginseboside was extracted from ginseng root and its yield was 4. 10％.The main types in ginseng were Rg1, Re, Rf, Rb1, Rc, Rb2 and Rd. 20. 5 g ginsenoside was purified by silica gel column obtained 0. 410 g Rf and its yields were 2. 00％ and 0. 082％ in total ginsenoside and ginseng root separately. Its purity was 93.0％detected by HPLC.%以人参根须为原料,采用甲醇浸提法提取人参根须中总皂苷,再用硅胶柱层析法对总皂苷进行分离,得到较纯净的人参皂苷单体Rf.结果表明,500 g人参根须中提取得到总皂苷20.5 g,提取率为4.10%.总皂苷中主要含Rg1、Re、Rf、Rb1、Rc、Rb2、Rd等成分.20.5 g人参根须总皂苷经硅胶柱层析法分离,得到较纯人参皂苷单体Rf0.410 g,在总皂苷中的得率为2.00%,在人参根须中得率为0.082%.高效液相色谱法检测分离得到的人参皂苷单体Rf的纯度较高,为93.0%.【期刊名称】《大连工业大学学报》【年(卷),期】2011(030)003【总页数】3页(P180-182)【关键词】人参皂苷Rf;硅胶柱层析;高效液相色谱【作者】李鹏飞;何丹;鱼红闪;金凤燮【作者单位】大连工业大学生物工程学院,辽宁大连116034;大连工业大学生物工程学院,辽宁大连116034;大连工业大学生物工程学院,辽宁大连116034;大连工业大学生物工程学院,辽宁大连116034【正文语种】中文【中图分类】TQ462.2;Q946.830 引言人参皂苷Rf具有抗肿瘤，抗疲劳的功效，能够减少子宫收缩，且起到与脑神经细胞有关联的镇痛作用［1］。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
人参皂苷的提取与分离学生姓名专业班级学院摘要首先认识人参和人参皂苷，了解人参皂苷的详细作用和功效，接着研究了人参茎叶总皂苷含量提取方法，用详细的工艺提取人参皂苷，并且用对显色反应和薄层层析对提取物进行鉴定，为以后的人参茎叶的开发利用奠定基础。
关键词：皂苷；人参茎叶；鉴定。
Abstract.The first ginseng and ginseng saponin, understanding the role and efficacy of ginseng saponin in detail, then study the effect of ginseng stem leaf total saponin extraction method, with the detailed process ofextraction of ginseng saponin, and used for color reaction and thin-layer chromatography to extract were identified, for the future of ginseng stem and leaf development lays a foundation.key words: saponin; ginseng stems and leaves; appraisal;目录摘要 (1)Abstract ................................................................................................ 错误！未定义书签。
1绪论 (3)1.1人参概述 .............................................................................. 错误！未定义书签。
1.2人参的化学成分 (1)1.2.1人参皂苷 (1)1.2.2 人参蛋白 (1)1.2.3 人参多糖 (1)1.2.4 无机元素 (2)1.2.5 其他成分 (2)1.3人参的生理功能及药理活性 (2)1.3.1增强免疫功能 (2)1.3.2抗衰老 (2)1.3.3抗肿瘤 (3)1.3.4增强学习和记忆能力 (3)1.3.5保护心血管系统 (3)2实验部分 (5)2.1实验材料 (5)2.2人参皂苷的提取分离 (5)2.2.1人参皂苷的提取分离原理 (5)2.2.2人参皂苷提取和苷元分离工艺流程 (5)2.3人参皂苷的检识 (7)2.3.1显色反应 (7)2.3.2薄层层析 (7)3讨论 (9)4结论 (10)参考文献 (11)1 绪论1.1 人参概述人参系五加科植物人参(Panax ginseng C．A．Mey．)的干燥根，人类对人参的利用在《神农本草经》中已有记载，据今已有2000多年的历史，但人们偏向于对人参根的利用，而对人参茎叶的开发从近几年才开始。
人参茎叶是人参的地上部分，比根具有更高的人参总皂苷含量，具有补气益肺，祛暑，生津的功能，用于气嘘咳嗽，冒热烦躁，津伤口渴，头目不清，四肢倦乏等症。
我国是人参的故乡，人参是我国的传统名贵中药，具有对多种疾病防治效果和对人体滋补强壮作用，已久为世界上驰名中药。
其应用历史相当久远，在我国医药史上具有特殊的地位。
人参为五加科人参属植物，通常所说的商品人参是指该植物的干燥根。
始载于《神农本草经》，列为上品，享有“中药之王”的美誉，居东北三宝之冠。
在我国主产于吉林及其周边的东北三省，我国在世界上也是人参重要的主产国和输出国之一。
近年来，无论在人工栽培、采收加工、组织培养，还是有效成分的提取、分离，含量测定，活性成分，生理机能以及新产品的研制开发等方面，都进了较深入的研究工作，也取得了一定进展。
1.2人参的化学成分人参主要含人参皂苷、人参多糖、人参蛋白等生物活性成分，是人参具有“百草之王”美誉的物质基础。
1.2.1人参皂苷人参皂苷是人参、西洋参、三七等五加科人参属植物的主要活性成分，主要包括三种类型：达玛烷型四环三萜皂苷（包括原人参二醇型皂苷和原人参三醇型皂苷）、奥克梯隆型四环三萜皂苷和齐墩果酸型五环三萜皂苷。
在人参根中的人参皂苷主要分布在表皮上，但人参植株的不同部位总皂苷含量也不同。
1.2.2人参蛋白人参蛋白也是人参的主要成分，蛋白质和多肽在人参的生长、发育及生物功能表达等方面都起着重要的作用。
主要包括：类RNA酶蛋白、核糖核酸酶、几丁质样蛋白、木聚糖酶、皂苷β-葡萄糖苷酶。
1.2.3人参多糖人参的化学成分很丰富，除了人参皂苷、人参蛋白外，还含有多种糖类，其总糖含量为4%-6%。
包括单糖、低聚糖和多糖。
人参含有丰富的人参多糖，多糖中含多肽，结合成糖肽。
低聚糖，又称寡糖，根据寡糖的生物学功能可分为功能性寡糖和普通寡糖两大类。
普通寡糖如麦芽糖、蔗糖等可被人体消化吸收，产生能量。
而功能性寡糖，因不能被人和动物肠道吸收，决定了它们独特的生理功能。
近年来，国内外对功能性寡糖的研究十分活跃，其主要生理功能体现在抑制肠道病原菌的生长繁殖，减少有毒发酵产物及有害细菌酶，预防、治疗便秘、腹泻，清除有害物质、保护肝脏功能，降低血清胆固醇和血压，增强免疫功能，抗衰老作用等。
1.2.4无机元素人参含有人体必需的铜、锌、铁、钙、镁、锰、纳、钾等无机元素。
近几年来很多学者认为中草药无机成分与有机成分具有协调作用，已引起人们的关注。
氨基酸人参中含有丰富的天门冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、赖氨酸、精氨酸、酪氨酸、组氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、胱氨酸、异亮氨酸等人体必需的氨基酸。
1.2.5其他成分人参中还富含维生素类、生物碱及核苷类、酮类及黄酮类、聚乙炔醇类、甾醇类、酶类、木质素类、脂肪酸以及挥发性等有效成分。
人参含大量的挥发油，是人参的特有香气。
红参含有微量的人参麦芽醇，具有抗氧化作用。
1.3 人参的生理功能及药理活性1.3.1 增强免疫功能人参具有调节人体免疫功能的作用，包括增强体内吞噬细胞的活性，刺激机体对各种抗原产生相应的抗体，促进T淋巴细胞转化增殖等多种形式。
1.3.2抗衰老人参抗衰老作用是目前颇受重视的研究课题，这是由于自古以来人们就认为人参具有延年益寿作用[11,12]。
另一方面乃由于老龄人口的急剧增加，研究抗衰老药物己是社会和人们的潜在要求，药理学研究证明［13,14]，人参的抗衰老作用是通过增强物质代谢、提高抗体免疫功能、调节内分泌、抗氧化等多种作用形式来实现的。
1.3.3抗肿瘤虽然人参抗肿瘤作用研究始于60年代初，但近些年来这项研究才受到学者们的重视，中国学者最初发现人参多糖对免疫功能具有促进作用，进一步发现人参多糖对多种动物移植肿瘤有抑制作用[15,16]，这种人参多糖制剂，现己正式用于临床治疗。
临床实践证明，人参多糖注射液对胃癌病人有增强免疫功能和延缓病情进展的作用，特别是将其与放疗和化疗合并应用时，可对抗放疗和化疗引起的造血和免疫功能的抑制，使放疗和化疗的疗程延长，从而增强了放疗和化疗的疗效。
人参皂苷对人体骨肉瘤U2OS细胞增殖的抑制作用。
研究表明人参皂苷R f - R g1 -F1、PPT显著地促进了U2 OS细胞的凋亡。
其作用通过抑制细胞周期或促进细胞凋亡来阻止U2 OS细胞的增殖[23,25]。
人参皂苷抗癌抗转移作用,主要基于人参皂苷肠内菌代谢物。
人参皂苷肠内菌代谢物及其脂肪酸酯可能是人参皂苷在体内抗癌的真正活性成分[2,4]。
人参皂苷R b1被结肠内细菌代谢为M I、M I逐渐水解为20( S) - 原人参二醇皂苷[29,30]。
如R b1、R b2、R c由结肠内细菌代谢为M I。
M I在肝中进一步生物转化为脂肪酸酯。
脂肪酸酯抑制肿瘤作用比M I强, EM I可能是人参皂苷在体内的真正活性成分。
EM I的药代动力学和生理学需要进一步深入研究。
1.3.4增强学习和记忆能力前苏联学者报告人参和五味子都能加速条件反射的建立。
近些年来，药理学家们用防御和逃避性条件反射方法证明，人参皂苷对化学药物引起的记忆获得和记忆巩固不良均有明显改善作用，但对记忆再现缺失影响不明显。
在各种皂苷中，以人参皂苷的作用最佳，其他皂苷也有一定作用，但药效较差[24,26]。
1.3.5保护心血管系统对人参活性物质的研究结果表明，人参中对心血管起作用的物质是人参皂苷，它具有明显的强心作用，能增加心肌的收缩力、减慢心率、增加心输出量和冠脉血流量。
人参皂苷对动脉硬化的抑制作用。
抑制酪氨酸激酶活性的药物具有抗动脉硬化的活性。
据陈英杰报道; 二醇组人参皂苷中R a1、R b1、R d、R0、显示有较强的抑制酪氨酸激酶活性用;人参皂苷R b1、人参皂苷R d最强,而三七参苷- R4、人参皂苷R b3、人参皂苷R c、人参皂苷R g3、人参皂苷Rh2、竹节参苷- L8、人参皂苷- Ia、20 (R)人参皂苷- R h1、人参二醇及齐墩果酸显示中等强度的抑制作用。
人参皂苷抑制酪氨酸激酶活性的构效关系为PPD - 型皂苷- >齐墩果酸皂苷> PPT - 型皂苷。
人参皂苷对脂蛋白脂肪酶的激活作用。
高血脂,是因为乳糜微滴和低密度脂蛋白的积累和由于心脏中的脂蛋白脂肪酶活性降低造成的。
口服人参皂苷抑制乳糜微滴和低密度脂蛋白的积累。
使血浆和心脏中的脂蛋白脂肪酶活性恢复正常。
起到降血清甘油三酯和胆固醇的作用[2,7,8]。
2 实验部分2.1实验材料人参茎叶(干）无水乙醇天平、布氏漏斗、烧杯(100ml、250ml、500ml)、量筒(10ml、50ml、100ml、250ml)、滴管、漏斗、铁架台、玻璃棒、试管、滤纸、剪刀硅胶G 毛细管氨性醇树脂玻璃板浓硫酸等2.2 人参皂苷的提取分离2.2.1人参皂苷的提取分离原理人参皂苷元与多个分子糖结合成苷，具有较强的亲水性，易溶于水和低级醇类，实验室采用热水提取人参皂苷，提取液加碱（CaO）除杂。
再用酸调至中性，上大孔树脂柱，先用水洗去色素至无色，再用70％的氨性醇洗至无色，人参皂苷便溶于乙醇洗脱，回收乙醇，便得到人参总皂苷。
人参总皂苷和稀HCl在醇液中进行温和酸水解，可得到三种皂苷元，齐墩果酸、人参二醇和人参三醇。
而不能得到原人参二醇和原人参三醇，这是因为在酸水解过程中侧链的20－位碳原子上的羟基（－OH）与该链上的双键（C＝C）易闭环，而形成带有三甲基四氢吡喃环的人参二醇和人参三醇。
水解后，除去醇、氯仿萃取物经硅胶柱层析分离即可得到三种单体皂苷元，经重结晶获得纯品，分别与已知皂苷的红外光谱相一致。
2.2.2人参皂苷提取和苷元分离工艺流程一.人参皂苷提取工艺人参茎叶粗粉20g热水提取1小时，粗滤，（棉花）提取液药渣加0.6g是会乳沉淀，并调至PH9－10，放置10分钟，抽滤沉淀物滤液浓硫酸调PH7，放置10分钟。