康乃馨的组织培养及快速繁殖研究

采用较高浓度的 2,4-D 和较低浓度的 BA 较为合
适，而低浓度的 NAA 则适于康乃馨试管苗的生
根. 在实验中这些激素种类和浓度的选择不是一
成不变的，应根据品种、取材的季节、部位和培
养条件的不同而有所不同，这些都需要我们在具
体实验中去探索.
（下转第 65 页）
第5期
高凌霞，赵天雁：黄土湿陷系数与物性指标间的定量关系
序 BA
IAA
号 (mg/L) (mg/L)
生长状态
增殖倍数
1 0.0
0.00
芽粗壮
2.00
2 0.2
0.01
芽疏松
4.90
3 0.5
0.05 芽小而疏松
6.10
4 0.5
0.10
芽疏松
4.45
5 0.5
0.20
芽疏松
3.15
6 1.0
0.05 芽粗壮、密集 8.25
7 1.0
0.10 芽粗壮、密集 6.70
8 1.0
0.20 芽小、密集
7.10
9 2.0
0.10 芽粗壮、密集 8.50
10 2.0
0.05 芽粗壮、密集 7.70
11 2.0
0.20 芽小、密集
7.30
由表 2 可以看出，在不加任何生长调节剂的 对照培养基上，腋芽也可分化出幼芽，但一个腋
芽只能分化出一个幼芽. 在 BA 和 IAA 浓度都较 低的组合中，分芽数虽然不高，但效果明显优于
6
0.5
0.5
黄色，疏松
89.1
7
1.0
0.5
淡黄色，疏松
100
8
2.0
0.5
淡黄色，致密
100
9
0.5
1.0
淡黄色，疏松
90.0
10
1.0
ห้องสมุดไป่ตู้
1.0
黄色，疏松
95.8
11
2.0
1.0
淡黄色，致密
100.0
从表 3 中可见：诱导康乃馨愈伤组织时激素 有较宽的应用范围，在 BA 0.5～2.0mg/L，2,4-D 0.2～1.0mg/L 范围内均有愈伤组织生成. 但最适 合的激素配比为 2,4-D 2.0mg/L，BA 0.5mg/L. 在 这种情况下，愈伤组织长势强，生长速度快，数
由于康乃馨常规下系扦插繁殖，病毒积累日 益严重，栽培质量每况愈下[3]，为了解决康乃馨 生产上存在的问题，我们采用生物技术手段复壮 康乃馨优良新品种，并为康乃馨的试管苗脱毒工 作奠定了基础.
1 材料和方法
1.1 材料 植物材料取自大连理工大学生物工程系农业
生物技术实验基地，由该系夏秀英博士鉴定. 外 植体为康乃馨顶芽和侧芽长成的试管苗. 1.2 方法
65
参考文献：
[1] 高凌霞. 西安地区黄土湿陷性的影响因素[J]. 大连民族学院学报，2003，（1）：66-69. [2] 汪荣鑫. 数理统计[M]. 西安：西安交通大学出版社，1997.
The Quantitative Relation between Loess Collapsibility and its Physical Index
从表 5 可知，最佳生根培养基为 1/2MS+NAA 0.075mg/L.
序 BA IAA 号 (mg/L)(mg/L)
生长状态
分化数
1 0.5 0.02 分化慢，芽点少 芽点12～18个，成苗1个
2 1.0 0.02 分化慢，芽点少 芽点16～22个，成苗4个
3 1.0 0.05 分化快，芽点多 芽点25～35个，成苗6个
第5期
岳玉莲：康乃馨的组织培养及快速繁殖研究
57
本实验采用 75%的乙醇配合次氯酸钠或升汞 对康乃馨茎段的消毒方法进行了研究，消毒效果 见表 1.
表 1 氯酸钠和升汞对康乃馨的消毒效果
序号
消毒时间（min）
染菌率
75%乙醇 2％次氯酸钠 0.1%升汞 无菌水 （%）
1
1
10
-
5
8
2
1
15
-
5
6
3
1
/
不生根
2 0.10 /
/
生根慢，根细
3 0.10 / 0.5
生根快，根细
4 0.15 /
1.0 生根快，根粗而长
5 / 0.050 /
生根快，根粗而长
6 / 0.050 1.0 生根快，根细而长
7 / 0.075 /
生根快，根粗而长
8 / 0.075 1.0 生根快，根粗而长
生根率 （%）
0 30 75 96 90 75 100 92
第6卷 第5期 2004 年 9 月
大连民族学院学报
JOURNAL OF DALIAN NATIONALITIES UNIVERSITY
Vol.6 No.5 Sept. 2004
康乃馨的组织培养及快速繁殖研究
岳玉莲
（大连民族学院 土木建筑工程系，辽宁 大连 116600）
摘 要：通过顶芽和侧芽培养实现了康乃馨的组织培养和快速繁殖. 实验表明，以 MS 为基本培养基，
附加 BA 1.0mg/L+IAA 0.05mg/L 适于芽的诱导与增殖；附加 BA 0.5～2.0mg/L+IAA 0.2～1.0mg/L 适于愈
伤 组 织 的 诱 导 ； 附 加 MS+BA 1.0 ～ 2.0mg/L+IAA 0.05～ 0.1mg/L 适 于 愈 伤 组 织 的 分 化. 幼 芽 在
1/2MS+NAA0.075mg/L+0.1%活性炭的生根培养基中生根率达到 100％.
关键词：康乃馨；组织培养；愈伤组织；快速繁殖
中图分类号：Q943.1
文献标识码：A
文章编号：1009-315X（2004）05-0056-03
康 乃 馨 别 名 麝 香 石 竹 ， 香 石 竹 （ Dianthus caryophyllus L），为石竹科，属多年生草本植物[1]. 通常分为露地栽培种和温室栽培种两大类，为世 界五大切花之一，产量和消费量巨大. 温室栽培 可四季开花，花直径 5～10cm，花色鲜艳，有白、 红、桃红、桔黄、紫及杂色. 花瓣如绢，镶边叠 褶，匀称地包卷在筒状的花萼之内，香味宜人. 是意大利、波兰、洪都拉斯和摩纳哥等国的国花. 原产法国到希腊一带，现在世界各地广泛栽培[2].
组织培养中最常用的消毒剂就是次氯酸钠和升
汞，本研究表明，它们对康乃馨茎段消毒都是有
效的，且 0.1%升汞的消毒效果要明显好于 2%次
氯酸钠的消毒效果，但应注意到，升汞对人类和
环境的危害要比次氯酸钠大得多，因此只有当二
者的消毒效果存在明显差别时才可选用升汞作为
表面消毒剂，并应做好后期升汞废液的处理工作.
图 4 康乃馨试管苗生根
3讨论
3.1 不同消毒剂和消毒方法对康乃馨茎段消毒
效果的影响
植物材料的表面带有多种微生物，在把植物
组织接种到培养基之前必须对其进行彻底的表面
消毒，以防止其将来污染培养物[4]. 但需要注意，
表面消毒剂对植物材料也是有毒的，应当正确选
择它们的种类、浓度和消毒时间，保证植物材料
在不被毒死的情况下达到最大的消毒效果. 植物
表 3 BA 和 2,4-D 对康乃馨愈伤组织诱导的影响
2,4-D 序号
（mg/L）
BA (mg/L)
愈伤组织 生长状态
愈伤组织 诱导率(%)
1
0.5
0.0
黄色，疏松
91.5
2
0.0
0.2
不长愈伤组织
0.0
3
0.5
0.2
黄色，致密
95.7
4
1.0
0.2
淡黄色，致密
97.9
5
2.0
0.2
黄色，致密
100
GAO Ling-xia, ZHAO Tian-yan
(Dept. of Civil Engineering and Architecture Dalian Nationalities University, Dalian Liaoning 116600, China) Abstract: Based on the general analysis of the factors affecting the collapsibility of loess, it is believed that the physical factors are mainly water content, void ratio and plasticity index. Through multi-variable regression analysis, a quantitative model of loess collapsibility equation of collapsible coefficient(δs ) against water content（W）, void ratio(e0) and plasticity index (Ip) is established. Key words: loess; collapsible index; physical index; quantitative relation
分化快，芽点多，
4 1.0 0.10
芽点28～35个，成苗7个
芽健壮
分化快，芽点多，
5 2.0 0.05
芽点25～35个，成苗5个
芽健壮
分化快，芽点少，
6 2.0 0.10
芽点15～23个，成苗3个
芽健壮
由表 4 可知，愈伤组织最佳分化培养基为
MS+BA 1.0mg/L+IAA 0.1mg/L.
图 3 康乃馨愈伤组织的分化
量多，结构较致密（如图 2 所示）.
图 2 康乃馨愈伤组织的诱导
2.4 BA、IAA 对康乃馨愈伤组织分化的影响
58
大连民族学院学报
第6卷
将诱导出的愈伤组织接入以 MS 附加不同浓 度 BA 和 IAA 的分化培养基内进行愈伤组织的分 化培养，结果见表 4 和图 3.
表 4 BA、IAA 对康乃馨愈伤组织分化的影响
3.2 植物激素在康乃馨组织培养中的作用
细胞分裂素和生长素是植物组织培养中最关
键的因子[5]，因植物材料和组织培养目标的不同，
实验中所选取的细胞分裂素和生长素的种类和浓
度也有很大差别. 在康乃馨丛生芽的诱导和愈伤
组织的分化培养中，较高浓度的 BA 和较低浓度
的 IAA 配比较为合适，康乃馨愈伤组织的诱导中
1.2.1 无菌苗的获得. 将田间取回的植株剪 成约 2cm 长的茎段，保证每段带有一腋芽，先用 流水冲洗净，最后一遍用去离子水冲洗，在超净
工作台上用预先配制好的 75％乙醇消毒 1 min， 再用 2.0％次氯酸钠、0.1％升汞分别进行不同的 消毒处理，无菌水冲洗 5 次，每次 1 min，消毒 后接种于 MS0 培养基培养，培养温度 25±1℃， 光照 10~12 h/d，光强 1600~2000lx，3d 后统计染 菌率，确定最佳消毒条件.
2.5 NAA 和 IAA 对试管苗生根的影响 以 1/2MS 为基本培养基，加入不同浓度的活
性炭、IAA 或 NAA，进行试管苗的生根培养. 生 根情况见表 5 和图 4.
表 5 IAA、NAA 对康乃馨生根培养的影响
序 IAA NAA 活性炭 号 (mg/L) (mg/L) (g/L)
生长状态
1 0.01 /
对照，说明低浓度的 BA 和 IAA 配合可以促进芽 的分化，随着 BA 和 IAA 浓度的提高，分芽数增 加，在 BA 1.0～2.0mg/L，IAA 0.05～0.1mg/L 的 浓度范围内，不仅分芽数多，而且幼芽生长健壮
（如图 1 所示）. 在此基础上，再增加 BA 和 IAA 的浓度，导致分化出的幼芽小而密集；若 IAA 浓
度较高，BA 浓度较低，则对幼芽的生长不利， 分芽数也降低. 说明幼芽的增殖和生长与二者的 浓度比有关.
图 1 康乃馨丛生芽的诱导
2.3 BA、2,4-D 对康乃馨愈伤组织诱导的影响 以 MS 为基本培养基，附加不同浓度的 2,4-D
和 BA，对康乃馨无菌苗的叶片进行愈伤组织的 诱导，愈伤组织诱导其生长情况见表 3.
1.2.4 愈伤组织的分化. 将诱导出的愈伤组 织转入愈伤组织分化培养基中进行培养，2k 后统 计愈伤组织的分化率.
1.2.5 试管苗的生根培养. 将高约 2～3cm 的试管苗接入试管苗生根培养基内进行生根培养. 比较不同培养基的生根率和生根情况.
2 结果与分析
2.1 最佳消毒方法的确定
收稿日期：2004 - 04 - 02. 作者简介：岳玉莲（1975-），女，辽宁铁岭人，大连民族学院土木建筑工程系助教. 研究方向：组织培养.
20
-
5
6
4
1
-
8
5
1
从表 1 可以看出，用 75%乙醇消毒 1 min 后
再用 0.1%升汞消毒 8 min，染菌率仅为 1％，消
毒效果很好.
2.2 不同浓度的激素配比对康乃馨丛生芽诱导
的影响
在 MS 培养基中附加不同浓度的 BA 、IAA
进行康乃馨丛生芽的诱导，丛生芽的诱导情况见
表 2.
表 2 BA、IAA 对康乃馨丛生芽诱导的影响
1.2.2 丛生芽的诱导. 将 MS0 培养基中长约 1~2cm 试管苗接种于附加不同激素配比的 MS 培 养基中，筛选出适于诱导丛生芽的培养基进行丛 生芽诱导.
1.2.3 愈伤组织的诱导. 取 MS0 培养基中无 菌苗的嫩叶，每片嫩叶剪切 3～4 个伤口，接入 附加不同激素配比的愈伤组织诱导培养基中进 行愈伤组织的诱导，将诱导出的愈伤组织于继代 培养基上每 20~25d 继代一次.