《呼吸道标本的实验室检查及结果解读》

北京医院陈东科

主要内容

呼吸道疾病的分类

哪些呼吸道疾病需要做病原学检查 呼吸道感染病原学检查方法

采集不同标本的临床意义

标本处理程序

快速筛查试验

检验结果解读

一、呼吸道疾病的分类

1.感染性炎症（由各种微生物引起）；

2.非感染性炎症：结节病、过敏性肺炎、嗜酸细胞浸

润性肺炎、急性间质性肺炎、放射性肺炎、药物相关的肺疾病、支气管哮喘、Wegener’s肉芽肿等；

3.非炎症病：气胸、肺栓塞、充血性心衰、肿瘤引起

阻塞肺炎、淋巴瘤、肺泡蛋白沉积征等。正确诊断是抗感染合理用药的前提

●非感染性炎症不需要进行抗感染治疗

要慎重甄别炎症的性质

●不同病原体感染需要不同抗病原药物

病毒感染需要抗病毒治疗

寄生虫感染需要抗寄生虫治疗

真菌感染使用抗真菌药物治疗

细菌感染才使用抗细菌药物治疗

鉴别诊断很重要

排除性诊断技术（影像学、病理学、免疫学、分子生物学、抗原检测、感染标志物等）；

采用特异性高的诊断技术，如肺栓塞采用同位素检查； 必要时可进行诊断性治疗，如过敏性肺炎采用激素。二、哪些疾病需要做病原学检查

不必常规做病原学检查的肺炎：

无基础疾病的轻症社区获得性肺炎。

需要做病原学检查的肺炎：

需住院治疗的中重症肺炎、住ICU的中重症肺炎、医院获得性肺炎、免疫抑制宿主肺炎、疑似耐药菌感染的肺炎、特殊病原体引起的肺炎、常规抗菌治疗无效或吸收延迟的肺炎等。

三、呼吸道感染病原学检查方法 涂片镜检法

培养法

PCR法

基因芯片技术

感染标志物检查（PCT、CRP、IL-6、1-3-β-D-葡聚糖、半乳甘露聚糖等）

快速抗原检查（尿、胸水、脑脊液、分泌物等）四、采集不同标本的临床意义

咳痰

经支气管吸引物（TTA）

经胸壁针刺吸引物（TNA）

经支气管镜采样标本（BAL，PSB）

开胸肺活检（OLB）组织标本

经人工气道采样的下呼吸道标本

微生物学检验的标准化首先应从标本采取与处理的规

范化开始。

“正确的微生物学检验始自正确

的标本采取。临床医师、护师

及检验技师都必须通晓其要

领。”

___引自著名的临床微生物检验专著

《Manual of Clinical Microbiology》主编

Patrick Murray 的话

标本采集时机的影响

炎症的消退也许很漫长，但如果用药正

确很多病原菌会很快消失。

五、标本处理程序

（1）去污染处理：要提高从混合菌标本中分离可疑病原菌的分离率，有必要对标本进行去污染处理。例如：分离分枝杆

菌前对标本进行酸（或碱）处理，对怀疑有芽孢杆菌感染的

标本要进行热处理（或用乙醇预处理）。

（2）浓缩：其目的是为了集菌，常用的方法有沉淀法（离心）和漂浮法（饱和盐水和汽油法等）。

（3）洗涤：减少口腔定植菌的污染。

（4）涂片：粘稠标本最好压片处理。

（5）消化：其目的是为了将被粘液或组织包裹的病原体释放出来。

（6）接种：根据患者病情、涂片镜检结果选择培养基及孵育条件。六、快速病原筛查试验

PCR法

基因芯片法

涂片镜检法：操作最简单、费用最低、用时最短，结果最直观的检验方法就是标本直接涂片、染色或不染色、显

微镜检。

2011年世界卫生组织(WHO)对临床

微生物实验室提出三项指导性方针：

✓临床微生物实验室尽可能把目标集中在快速诊断

方面

✓显微镜检查对建立快速的初步诊断具有很大价值

✓实验室人员必须主动与临床结合，将实验室数据

转化为临床有用的信息

标本直接涂片镜检的临床意义

►根据对标本直接涂片、镜检，即可获得感染病原

的信息。即细菌、真菌、螺旋体、寄生虫，或其他

病原感染。并在第一时间通知临床医生，为医生经

验用药提供参考依据。

标本涂片制作方法

制片很重要！

涂片的制备水平及染色的质量，直接影响到镜检的结

果。

基本要求：涂片的厚薄以镜下见到单层细胞为宜；染

色结果以细胞核、浆清晰，胞内吞噬物清楚可见，革

兰染色阴、阳性分明为佳。

制片步骤

1. 标本处理；

2. 压片；

3. 固定；

4. 拉片；

5. 染色.

阅片：

根据人体对细菌/真菌感染在早期主要以非特异性免疫(细胞免疫为主)的特点，选择痰标本中脓细胞成团块状分布，集中而不稠密，且周围无鳞状上皮细胞或无细菌大量分布的区域为阅片区，观察视野中脓细胞聚集处的脓细胞胞浆中有无吞噬的细菌、或发现被脓细胞包裹的细菌、或与脓细胞伴行的细菌，以及细菌的染色性及排列特征，菌体特征等。并作记录，以此作为确定病原菌的理论依据。

七、检验结果解读

阴性结果解读：

排除假阴性结果。

阳性结果解读：

根据方法学原理、患者流行病学史等进行分析，注意排除污染或定植。

药敏结果解读：

遵守药敏试验规则，注意天然耐药、特殊耐药机制、感染部位（组织分布）、儿童用药等。

2.阳性结果解读

（1）感染菌的确认：

根据标本直接涂片镜检结果及肺穿刺结果，结合细胞免疫理论进行分析。

阳性结果解读

（2）排除定植菌：

根据标本直接涂片镜检结果进行综合分析。

阳性结果解读

（3）排除污染菌：

采集过程、实验过程。

原始标本涂片中未见。