YC∕T 561-2018 烟草特征性成分 烟碱旋光异构体比例的测定 高效液相色谱法和超高效合相色谱-串联质谱法
高效液相色谱法测定烟草中烟碱含量
生物碱是植物次生代谢产生的特殊含氮有机 制品的感官评吸质量、烟气特征和安全性[1-4]．前人
化合物．烟草中的生物碱主要有烟碱、降烟碱、新 已对烟叶烟碱和降烟碱积累的影响参数及这些参
1.4 统计分析方法
采用 SPSS10.0 统计软件包进行统计特征分析、方 差分析、多重比较和相关性分析[19]．总生物碱含量为 烟碱、降烟碱、假木贼碱、新烟草碱的含量和；总微 碱含量为降烟碱、假木贼碱、新烟草碱的含量和；烟 碱转化率=降烟碱含量/(烟碱含量+降烟碱含量) [2-4]．利 用 DPS6.5 统计软件包进行趋势面分析[20]．
GAO Zhi-qiang1，DENG Xiao-hua2*，ZHOU Qing-ming1，ZHOU Ji-heng1，ZENG Zhong-ping2 (1. Research Center of Tobacco Engineering and Technology，HNAU， Changsha 410128，China；2. Hunan Yongzhou Vocational and Technical College，Yongzhou，Hunan 425000，China)
根据样本微量生物碱含量的大致范围将其分 为 4 组，统计各组样本的百分率(图 1 至图 3)，不同 等级烤烟的微量生物碱含量分布差异较大．对降烟 碱来说，B2F 大多数样本分布在＞0.04%组；X2F 主要分布在＜0.02%组；C3F 在＜0.02%组分布较 少，而在其他 3 个组分布较多．对假木贼碱，B2F 大多数样本分布在＞0.014%组；X2F 主要分布在＜ 0.01%组；C3F 在＜0.01%组分布较少，而在其他 3 个组分布较多．对新烟草碱，B2F 大多数样本分布 在 0.09%～0.12%组；X2F 主要分布在＜0.06%组； 而 C3F 主要分布在 0.06%～0.09%组．
高效液相色谱法测定烟草中烟碱含量
高效液相色谱法测定烟草中烟碱含量杨 娟 张迪清 何照范 吴谋成杨娟,吴谋成.华中农业大学食品科学系 430070 武汉市武昌狮子山;张迪清,何照范.贵州大学南区生化营养研究所 550025 贵州省贵阳市修回日期:1998-09-22 责任编辑:刘惠清 摘要 研究了用高效液相色谱法测定烟草中烟碱的方法。
该方法与UV 法相比,具有重现性好、准确、灵敏度高的特点。
测定结果的标准偏差S =±0.007,变异系数CV =1.2%,回收率为(100±3)%。
关键词 高效液相色谱法 烟草 烟碱含量烟碱的测定方法有多种[1～6],多数采用蒸馏-紫外分光光度计法测定,手续繁杂。
本文拟建立起用高效液相色谱法测定烟草中烟碱的方法。
1 仪器与试剂仪器:高效液相色谱仪(日本岛津LC -3A 型)、日本岛津C -RIB chromatopac 记录仪;试剂:烟碱标准品(美国Sigma 公司)、分析纯的甲醇、磷酸、硫酸铵。
2 实验方法与结果2.1 测定方法(1)色谱条件:色谱柱Lichrosorb RP187μm (250×4I.D.),流动相为甲醇∶0.02mol/L 磷酸缓冲液[p H6.8,含0.02mol/L (N H 4)2SO 4]=55∶45,检测波长254nm ,流速1.0ml/min ,进样量7μl ,柱温40℃。
(2)烟碱标准溶液配制:精确称取烟碱标准品约10mg ,置于100ml 容量瓶中,用流动相溶解并定容至刻度。
烟碱标准品在上述色谱条件下的色谱图见图1。
图1 烟碱标准品 (3)样品处理:准确称取在50℃下烘干的烟末0.6g ,置于100ml 容量瓶中,加入0.05mol/L 的NaOH80ml ,常温下在振荡器上振荡30min 后定容、过滤,滤液供色谱分析用。
2.2 线性关系移取上述烟碱标准溶液2.0,4.0,6.0,8.0和10.0ml ,用流动相定容至15ml ,每个实验点重复进样3次,在同一条件下进行色谱测定。
国家标准GB_烟草及烟草制品总植物碱的测定光度法
－一 实 际 上，在校正了水分之后 ，硅钨酸法与气相色谱／质谱法的测定结果相同，也就是说，对纯度 高于 ９６％的烟碱，可得到最佳测定值。
— 另 一方面，紫外光度法的测定结果与“最佳测定值”相同或稍低 ，这个研究结果支持 了英 国的研 究发现。
将 ２０ ｍ Ｌ盐酸（密度 １．１８）用蒸馏水稀释至 １００ｍＬｏ Ａ２．３ 盐酸溶液 ，０．１环（Ｖ／Ｖ）
将 ５ｍ Ｌ ２０ 盐酸（Ａ２．２ ）用蒸馏水稀释至 １Ｌ Ａ２．４ 烟碱溶液（Ｃ，ｏＨｗＮ２）
将 烟碱 用蒸馏水稀释 ，制备 ２５ｍＬ０．１ｍ ＂烟碱／ｍＬ溶液
Ａ３ 仪器设备ｔ
Ａ３．１ 实验室常用设备。 Ａ３．２ 烘箱，可保持（１２０士５）＇Ｃ温度。
ＹＣ／＇ｒ３ ４－－１９９６
前
言
本标 准 等 效采用国际 ＩＳＯ ２８８１：１９９２０ 依据 ＩＳＯ ２８８１：１９９２制定本标准时，我们未给出水蒸气蒸馏装置的建议样式，以便于各种装置的使 用单位 。另外 ，由于试样制备 已另有标准规定 ，所以在本标准中引用了这个标准。 进行 水 燕 气蒸馏装置的回收率测定需要使用纯烟碱和烟碱盐。纯烟碱或烟碱盐的纯度测定需要有 相应的方法，因此，将 ＣＯＲＥＳＴＡ３９号推荐方法（１９９４年发布）等效采用为附录 Ａ（标准的附录），以便于 水蒸气蒸馏装置回收率的测定和其他需要纯烟碱制作标准曲线的分析方法 的使用。在制定本标准的附 录 Ａ部分时，我们选择了烧结玻璃增涡过滤沉淀的方法 ，取消了滤纸过滤法，这样就消除了由于方法不
式中
Ｎ— 总植物碱的质量百分含量，％；
Ｆ－ 稀释倍数 ；
采用说 明 ：
１１Ｉ ＳＯ ２８８１：１９９２规定加人２０－４０ｇ抓化钠和５ｍＬ，８ｍ ｏｌ／Ｌ氢氧化钠溶液．
高效液相色谱法测定烟叶中的绿原酸及其异构体
高效液相色谱法测定烟叶中的绿原酸及其异构体易小丽;周昭娟;王丽达;张杰;芦楠;白若石【摘要】取经烘干并粉碎的烟叶样品0.1000 g,加入CH 3 OH-H 2 O(1+1)混合液20 mL,超声提取20 min.提取液经0.45μm滤膜过滤,滤液供高效液相色谱法分析.以Diamonsil Plus C18色谱柱为固定相,并用不同比例的(A)甲醇和(B)乙酸-水(1+99)溶液的混合液按设定程序进行梯度洗脱,使样品中的绿原酸及其异构体分离.采用紫外检测器进行检测.结果表明:绿原酸的线性范围在1.01～101.22 mg·L-1之间,其异构体(新绿原酸及隐绿原酸)则同在0.25～25.00 mg·L-1之间,其检出限(3S/N)分别为0.013,0.025,0.028 mg·L-1.按标准加入法进行回收试验,测得回收率在92.0％～104％之间,测定值的相对标准偏差(n=5)在1.1％～4.0％之间.【期刊名称】《理化检验-化学分册》【年(卷),期】2019(055)001【总页数】5页(P78-82)【关键词】高效液相色谱法;绿原酸;异构体;烟叶【作者】易小丽;周昭娟;王丽达;张杰;芦楠;白若石【作者单位】上海烟草集团有限责任公司技术中心北京工作站,北京 100121;上海烟草集团有限责任公司技术中心北京工作站,北京 100121;上海烟草集团有限责任公司技术中心北京工作站,北京 100121;上海烟草集团有限责任公司技术中心北京工作站,北京 100121;上海烟草集团有限责任公司技术中心北京工作站,北京100121;上海烟草集团有限责任公司技术中心北京工作站,北京 100121【正文语种】中文【中图分类】O657.7多酚类物质是烤烟的重要香气前体物，在烟叶质量、色泽、香气方面具有重要的作用［1－4］。
研究表明，多酚类物质含量越高，烟叶等级越高［5］。
绿原酸是烟叶中含量最高的多酚，它是由奎尼酸与咖啡酸脱水缩合形成的二缩酯，在中性和碱性条件下不稳定［6］，易发生异构化反应，生成隐绿原酸和新绿原酸［7］。
《烟草及烟草制品 多种农药残留量的测定》
《烟草及烟草制品多种农药残留量的测定》编制说明1 工作简况1.1 项目提出的背景本项目名称为“烟草中多农残分析体系的研究”，由国家烟草专卖局于2009年下达（国烟科[2009]100号）。
项目牵头承担单位为郑州烟草研究院，共同承担单位包括国家烟草质量监督检验中心、中国烟草标准化研究中心、湖北中烟工业有限责任公司和红塔烟草（集团）有限责任公司。
该项目的提出是为了顺应烟草中农药残留分析检测技术不断进步以及农药残留日益受到广泛关注而对我们提出的要求。
我国烟草行业中长期科技发展规划纲要（2006年—2020年）将烟叶原料的优质高效安全生产技术作为优先发展的主题之一，其中烟叶农药残留的控制技术是急需研究的内容之一。
目前国际上有很多国家和地区对烟草农药残留提出最高限量要求，这一方面无形中形成烟草国际贸易的技术壁垒，另一方面也对烟草农残分析技术提出了更高的要求。
我国在农残分析技术方面与国际先进水平还存在一定差距，正是在这种背景下，希望通过研究、开发、建立分析方法体系，不断丰富我国烟草行业在农药残留分析领域的成果，提供更多可供参考的分析方法，促进农残分析水平的不断进步。
1.2 项目实施方案的执行2009年7月，项目组在郑州召开了第一次项目组会议，讨论制定实施方案。
项目组在前期研究工作的基础上提出了初步方案供与会者讨论。
根据这个方案，项目组首先要确定本项目需要确定的研究目标物。
CORESTA 2008年公布的农用化学品指导性残留限量名单共有118种农药，此外还有大量的同分异构体或降解产物未被计算在内。
项目组最后决定以这个名单为主要依据，同时结合我国烟草农药使用以及农残分析技术的实际情况，特别是现行的11个烟草及烟草制品农药残留量测定标准方法决定项目的具体研究对象。
经讨论，项目组决定保留两个现行农残标准方法不进行新方法研究，分别是《YC/T 180-2004 烟草及烟草制品毒杀芬农药残留量的测定气相色谱法》和《YC/T 181-2004 烟草及烟草制品有机氯除草剂农药残留量的测定气相色谱法》，这两个标准方法共涉及毒杀芬、麦草畏、2,4-D和2,4,5-T四种农药。
烟草中总烟碱的测定(精)
烟草食化品学科学与工T程ob实ac验co教C学he中m心istry
Zhengzhou University of Light Industry
三、实验仪器设备
500mL凯氏烧瓶。 蒸馏装置。 250mL三角瓶。 马福炉、坩埚、盘架天平、电热恒温水浴锅等。
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实验四、烟草中总烟碱的测定
指导教师:程传玲
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一、实验目的
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掌握重量法（硅钨酸沉淀法）测定烟草中总烟 碱含量的原理和方法。
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2. 将烟碱的硅钨酸盐沉淀用无灰定量滤 纸过滤，将滤纸和沉淀物置于已知重量 的 坩 埚 内 ， 先 低 温 灰 化 ， 再 在 800-850°C的高温下灼烧30min，冷却后称 重，计算出烟末样品的总烟碱的百分含 量。
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七、思考题
如何计算总烟碱含量?
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烟草食化品学科学与工T程ob实ac验co教C学he中m心istry
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六、注意事项
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高效液相色谱同时检测不同类型烟叶中的多种生物碱含量
高效液相色谱同时检测不同类型烟叶中的多种生物碱含量作者：林雨晟金洪石张皓楠金江华郭伟李玉娥赵铭钦刘鹏飞来源：《中国烟草科学》2021年第03期摘要：为快捷准确地测定烟叶中生物碱的含量，本研究通过优化提取条件，建立了测定烟草中烟碱、新烟草碱、假木贼碱和降烟碱的高效液相色谱检测方法。
优化后的检测步骤为：干烟叶和5%甲醇的料液比为100 mg/20 mL，在25 ℃下振荡提取30 min，色谱条件：C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），流动相A（90%水+10%甲醇，pH 6.8，0.15%醋酸钠），流动相B（90%甲醇+10%水，pH 3.8）。
烟碱在0.1～50 μg/mL、其余3种在0.005～2 μg/mL的范围内，4种生物碱均具有较好的线性关系（R2>0.99）;烟碱检出限为0.000 65 μg/mL，平均回收率100.79%，RSD 3.11%;新烟草碱检出限0.088 4 μg/mL，平均回收率98.53%，RSD 3.75%;假木贼碱检出限0.034 8 μg/mL，平均回收率98.70%，RSD 3.63%;降烟碱检出限0.150 9 μg/mL，平均回收率101.33%，RSD 4.61%。
对4种不同类型烟叶共11个不同样品进行检测验证，检测结果可靠。
该方法前处理简单快捷，灵敏度高，重复性较好，可以满足烟草样品中4种生物碱的检测要求。
关键词：烟草;烟碱;新烟草碱;假木贼碱;降烟碱;液相色谱法Abstract： In order to quickly and accurately determine the content of alkaloids in tobacco leaves， the extraction conditions were optimized， and a method for the determination of nicotine，anatabine， anabasine and nornicotine contents in tobacco by HPLC was established. The optimized detection steps are as follows： 100 mg/20 mL solid-liquid ratio， 5% methanol was extracted by oscillation at 25 ℃ for 30 min， the chromatographic conditions were C18 column （250 mm×4.6 mm，5 μm）， mobile phase A （90% water +10% methanol， pH 6.8， 0.15% sodium acetate）， mobile phase B （90% methanol +10% water， pH 3.8）. Nicotine was in the range of 0.1-50 μg/mL and the other three alkaloids were in the range of 0.005-2 μg/mL， with the standard curves of the four alkaloids all havig good linear relationship （R2 > 0.99）. The limits of detection （LOD） of nicotine were 0.000 65 μg/mL， and the average recoveries were 100.79%， RSD3.11%; the LOD of anatabine were 0.088 4 μg/mL， and the average recoveries were 98.53%， RSD 3.75%; the LOD of anabasine were 0.034 8 μg/mL， and the average recoveries were 98.70%，RSD3.63%; the LOD of nor nicotine were 0.150 9 μg/mL， and the average recoveries were101.33%， RSD 4.61%. A total of 11 different samples of 4 different types of tobacco leaves were tested， and the results were reliable. The method is simple and fast， sensitive and repeatable， and can meet the requirements of detecting four alkaloids in tobacco samples.Keywords： tobacco; nicotine; anatabine; anabasine; nornicotine; HPLC生物碱是一类存在于植物体中的特殊的含氮有机物，是植物体随外界环境变化合成的次生代谢产物，一般具有特殊的生理活性，如抗炎、镇痛和成瘾性[1]。
烟草行业的常用仪器设备
5.4.1热导检测器（TCD)5.4.2氢火焰离子化检测器（FID)5.4.3氮磷检测器（NPD)5.4.4电子俘获检测器（ECD)5.4.5火焰光度检测器（FPD)烟草中转基因成分定性PCR检测仪器：液氮罐PCR仪旋涡混合器微量高速离心机水浴锅凝胶成像系统超净工作台电泳装置高压灭菌锅真空干燥机纯水器各式微量移液器各式微量离心机溶剂配液：烟草检验实验室仪器配置清单阿贝折射仪：测定透明、半透明液体或固体的折射率和平均色散白度计：测试产品白度火焰光度计：临床化验及病理研究紫外－可见光分光光度计：测量物质对不同波长单色辐射的吸收程度，定量分析气相色谱仪：定性、定量分析酸度计：测PH值电阻式木材测湿仪：测烟草的湿度烟草自动化学分析仪：分析烟草中化学元素、成分纸张含水量测定仪：测烟纸的湿度✓焦油✓烟碱✓一氧化碳✓TSNAs（4）✓苯并[a]芘✓氮氧化物（2）✓金属（7）✓酚类化合物（7）✓羰基化合物（8）✓芳香胺（4）✓HCN✓氨✓VOCs（5）✓Semi-VOCs（3）卷烟烟气分析的仪器分析方法⏹烟碱（GC）⏹一氧化碳（非散射红外法）⏹氮氧化物（氮氧化物分析或FTIR ）⏹多环芳烃（HPLC，GS/MS-SIM）⏹烟草特有的N--亚硝胺（GC-TEA，LC/MS）⏹金属（AAS，ICP/MS）⏹酚类物质（HPLC）⏹羰基化合物（HPLC）⏹芳香胺（GC/MS）⏹VOC（GC/MS）⏹氨（离子色谱）⏹HCN（流动分析仪）多环芳烃的分析技术：（一）纸（板）色谱法（二）气相色谱法（三）高效液相色谱法（四）气相色谱—质谱联用法(04年 CORESTA)烟气中酚类化合物的分析方法分光光度法：气相色谱法：高效液相色谱法：TSNAS分析方法：毛细管柱GC-TEA系统芳香胺的分析技术⏹光度法⏹薄层色谱法⏹气相色谱法⏹液相色谱法⏹气相色谱—质谱联用法⏹毛细管电泳色谱法(CE)羰基化合物、多环芳烃、金属、酚类物质的HPLC方法所用的仪器：超声波振荡器、固相萃取柱分离、液相分析仪多环芳烃、芳香胺、VOC的GC/MS分析方法所用仪器：超声波振荡器、固相萃取柱分离、色-质联用分析烟气中HCN（氰化氢的检测方法）的分析方法所用仪器和试剂：联苯胺和吡啶异烟酸－吡唑啉酮异烟酸－巴比妥酸流动分析仪玻璃滤片分光光度计真空泵自动进样器烟草及烟草制品式样的制备和水分的测定——烘箱法1、烘箱2、粉碎机3、筛网孔径0.45MM4、硅胶干燥器5、称量皿6、广口瓶端部掉落烟丝的测定1、旋转箱法调节箱旋转箱卷烟直径测量分析天平烟丝填充值的测定：烟丝填充值测定仪器必须满足：1、测量桶：施力测头施压速度卷烟厂主要生产车间1、制丝车间控制室贮叶室贮丝房2、卷包、滤棒成型车间3、膨胀烟丝车间4、仓库5、技术中心、质检中心6、空调机房7、除尘室8、维修车间9、生产周转车间卷烟厂的生产工艺1、原料配料及配方叶组：制丝工艺采用片叶、烟梗和再造烟叶为材料。
亲水作用色谱分离-高效液相色谱法测定烟草不同部位中烟碱的含量
亲水作用色谱分离-高效液相色谱法测定烟草不同部位中烟碱的含量王尉;刘赟;王覃;赵新颖;冯文宁;张经华【摘要】提出了亲水作用-高效液相色谱法测定不同烟草部位中烟碱含量的方法.采用Atlantis HILIC色谱柱(150mm×4.6mm,5μm)分离,以乙腈、10 mmol·L-1乙酸铵溶液和冰乙酸以体积比72比28比2组成的混合液为流动相,在检测波长260 nm处进行测定.烟碱的质量浓度在0.001～0.1 g·L-1范围内与峰面积呈线性关系,方法检出限(3S/N)为0.17 mg·L-1.进行3个浓度水平的加标回收试验,测得回收率在98.2％～98.9％之间,相对标准偏差(n=6)小于2.0％.从烟草的不同部位取样,按本法分析,结果表明:其烟碱含量从烟叶的上部、中部、下部至烟梗逐渐减少.【期刊名称】《理化检验-化学分册》【年(卷),期】2014(050)004【总页数】3页(P488-490)【关键词】高效液相色谱法;亲水作用;烟碱;烟草【作者】王尉;刘赟;王覃;赵新颖;冯文宁;张经华【作者单位】北京市理化分析测试中心,北京100089;北京理工大学,北京100081;北京市理化分析测试中心,北京100089;北京化工大学,北京100029;北京市理化分析测试中心,北京100089;北京理工大学,北京100081;河北中烟工业有限责任公司,石家庄050051;北京市理化分析测试中心,北京100089【正文语种】中文【中图分类】O652.63烟碱又称尼古丁（Nicotine），具有较强的水溶性，是烟草中重要的生物碱成分，是一种生理兴奋剂，具有收缩血管，促进血液循环，调节中枢神经的作用［1－2］。
烟碱还是一种低毒、高效、低残留、环境相容性好的农药添加剂，对菜蚜等害虫有较强的趋避和毒杀作用［3－4］。
因此，建立一种高效、快速、选择性强的分析方法对烟草及其相关产品的质量控制是十分必要的。
国家烟草专卖局 国烟科〔2018〕20号
2018-02-01
6 YC/T563-2018 卷烟 总粒相物中烟碱、降烟碱、新烟碱、麦斯明、假木贼碱、可替 宁和 2,3′-联吡啶的测定气相色谱-质谱联用法
2018-01-18 2018-02-01
7 YC/T564-2018
基于消费体验的中式卷烟感官评价方法
2018-01-18 2018-02-01
3 YC/T560-2018 烟草特征性成分 烟碱中氢稳定同位素比值的测定气相色谱-稳定同位素比质谱
2018-01-18 2018-02-01
-串联质谱法
4 YC/T561-2018 烟草特征性成分 烟碱旋光异构体比例的测定高效液相色谱法和超高效合相色谱
2018-C/T562-2018 卷烟 主流烟气中氨基甲酸乙酯的测定气相色谱-串联质谱联用法
国家烟草专卖局国烟科〔2018〕20 号 关于批准发布卷烟燃烧锥落头倾向的测试等 8 项烟草行业标准的通知
行业各直属单位：
国家烟草专卖局批准《卷烟燃烧锥落头倾向的测试》等 8 项烟草行业标准，现予 以发布。
附件：《卷烟燃烧锥落头倾向的测试》等 8 项烟草行业标准编号和名称 国家烟草专卖局 2018 年 1 月 18 日
8 YC/T565-2018 烟草及烟草制品 建立感官分析实验室的一般导则
2018-01-18 2018-02-01
序号 标准编号 标准名称 代替标准号 发布日期 实施日期
1 YC/T558-2018 卷烟燃烧锥落头倾向的测试
2018-01-18 2018-02-01
2 YC/T559-2018 烟草特征性成分 生物碱的测定气相色谱-质谱联用法和气相色谱-串联质谱法
2018-01-18 2018-02-01
联用法
反相高效液相色谱法测定烟草中烟碱的含量_储志兵
２．１ 样品溶液的配制
胺（ＴＥＡ）， 具有重现性好， 准确， 灵敏度高的特点， 达到
烟草样品于 ８０ ℃下烘干， 放置于研钵中研磨后 了改善宽峰和减少拖尾的效果。另外， 在缓冲体系中
过 １００ 目筛备用。称取烟末 ０．３０ ｇ， 置于 ５０ ｍＬ 容量 加入三乙胺可改变缓冲液的 ｐＨ， 从而使烟碱以合适
２８０
３００
波长（ ｎｍ）
图 ３ 烟碱紫外吸收扫描图 Ｆｉｇｕｒｅ ３ ＵＶ ｓｃａｎ－ ｓｐｅｃｔｒｕｍ ｏｆ ｎｉｃｏｔｉｎｅ
０．Ｅ＋００ ０
０．２
０．４
０．６
０．８
烟碱 Ｃ 浓度／ｍｇ·ｍＬ－１
图 ５ 烟碱的标准曲线 Ｆｉｇｕｒｅ ５ ＨＰＬＣ Ｓｔａｎｄａｒｄ ｃｕｒｖｅ ｏｆ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ａｒｅａｓ ａｇａｉｎｓｔ ｉｎｊｅｃｔｅｄ
ｍａｓｉｌ Ｃ１８ 色 谱 柱 （ ２５０ ｍｍ ×４．６ ｍｍ， ５μｍ） ； Ｔｈｅｒｍｏ ＵＶ５００ 型紫外分光光度计。
与杂质峰分离较好， 拖尾现象并不严重， 在 ｐＨ＝６．５ 时， 杂质峰与烟碱峰基线完全分离， 峰型尖锐而对称，
试剂： 烟碱标准品（ 美国 Ｓｉｇｍａ 公司） 、甲醇（ 色谱 对称因子达到 ０．８０， 保留时间及分析时间适中， 回收
Ｄｅｔｅｒ ｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｎｉｃｏｔｉｎｅ Ｃｏｎｔｅｎｔ ｉｎ Ｔｏｂａｃｃｏ ｂｙ ａ Ｒｅｖｅｒ ｓｅｄ Ｐｈａｓｅ－ Ｈｉｇｈ Ｐｅｒ ｆｏｒ ｍａｎｃｅ Ｌｉｑｕｉｄ Ｃｈｒ ｏｍａｔｏｇｒ ａ－ ｐｈｙ （ＲＰ－ ＨＰＬＣ）
ＣＨＵ Ｚｈｉ－ｂｉｎｇ１， ＺＨＯＵ Ｘｉｎ－ｇｕａｎｇ２， ＳＨＵＩ Ｈｅｎｇ－ｆｕ１， ＣＨＥＮ Ｊｉａｎ－ｍｉｎ２ （１． Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ＆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ， Ａｎｈｕｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ， Ｍａ’ａｎｓｈａｎ ２４３００２， Ｃｈｉｎａ； ２． Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎ－ ｔａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ ＆ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ， Ｆｕｄａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｓｈａｎｇｈａｉ ２００４３３， Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒ ａｃｔ： Ａ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｎｉｃｏｔｉｎｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｉｎ ｔｏｂａｃｃｏ ｂｙ ａ ｒｅｖｅｒｓｅ ｐｈａｓｅ ＨＰＬＣ ｗａｓ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ． Ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｎｉｃｏｔｉｎｅ ｉｎ ｓａｍｐｌｅｓ ｗａｓ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ． Ｔｈｅ ｃｏｌｕｍｎ ｗａｓ Ｋｒｏｍａｓｉｌ Ｃ１８ ｃｏｌｕｍｎ （ ２５０ ｍｍ×４．６ ｍｍ， ５ μｍ） ａｎｄ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｗａｓ ３５ ℃， ｍｅｔｈａｎｏｌ （Ａ）－ ＴＥＡ／ ｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｂｕｆｆｅｒ （Ｂ） （２．４２ ｇ Ｎａ２ＨＰＯ４， ３．５ ｍＬＨ３ＰＯ４ ａｎｄ ６．５ ｍＬ ＴＥＡ ｄｉｓｓｏｌｖｅｄ ｉｎ １ ０００ ｍＬ Ｈ２Ｏ） （ Ａ∶Ｂ ３∶２，Ｖ／Ｖ） ａｓ ｔｈｅ ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ ａｔ ａ ｆｌｏｗ ｒａｔｅ ｏｆ １ ｍＬ·ｍｉｎ－１ ａｎｄ ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ ａｔ ２５９ ｎｍ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ， ｓｔａｂｉｌｉｔｙ， ｒｅｐｅｔｉｔｉｏｎ ａｎｄ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ｗｅｒｅ ｇｏｏｄ． Ｔｈｅ ＲＳＤ， ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔ ｏｆ ｖａｒｉａｔｉｏｎ， ｌｉｎｅａｒ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ａｎｄ ａｖｅｒａｇｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｗｅｒｅ ０．０１４， １．２％， １．０ ａｎｄ ９８．８％， ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ． Ｋｅｙｗｏｒ ｄｓ： ｎｉｃｏｔｉｎｅ； ＲＰ－ ＨＰＬＣ； ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ
快速高效液相色谱测定卷烟主流烟气中巴豆醛
快速高效液相色谱测定卷烟主流烟气中巴豆醛施红林;徐祎然;李银科;贺宾;金永灿;胡秋芬【摘要】用剑桥滤片(每滤片预先滴加0.075 mol·L-2,4-二硝基苯肼溶液2 mL,置于干燥器中干燥后备用)及吸烟机按规定方法采集同批卷烟的两支上的巴豆醛,同时在滤片上与2,4-二硝基苯肼反应而衍生化.用吡啶-乙腈(2+98)混合溶液作溶剂萃取滤片上所生成的2,4-二硝基苯腙,分取部分萃取液作高效液相色谱(HPLC)测定.采用ZORBAX Stable Bound G18柱(2.1 mm×50 mm,1.8μm)作固定相及由不同比例配成的乙腈(A)和水(B)的混合液作流动相进行梯度淋洗,实现快速HPLC分离,在5.5 min内可达到巴豆醛的完全分离.测定中采用二极管阵列检测器(DAD),检测波长为365 nm.方法的检出限(3S/N)为8.0μg·L-1,用标准加入法在3个浓度水平(0.05,0.10,0.20 mg)上作回收试验,测得回收率在96%～101%之间,分别对方法的重复性及再现性精密度作了试验,测得两者的相对标准偏差(n=7)依次为2.2%,2.9%.【期刊名称】《理化检验-化学分册》【年(卷),期】2010(046)008【总页数】4页(P882-884,887)【关键词】高效液相色谱法;巴豆醛;卷烟主流烟气;快速测定【作者】施红林;徐祎然;李银科;贺宾;金永灿;胡秋芬【作者单位】云南烟草科学研究院,昆明,650106;云南烟草科学研究院,昆明,650106;云南民族大学,化学与生物技术学院,昆明,650031;云南烟草科学研究院,昆明,650106;云南民族大学,化学与生物技术学院,昆明,650031;云南烟草科学研究院,昆明,650106;云南烟草科学研究院,昆明,650106;云南民族大学,化学与生物技术学院,昆明,650031【正文语种】中文【中图分类】O652.37巴豆醛是卷烟主流烟气中一种重要有害成分[12]。
烟叶中碱类物质的测定
烟叶碱类物质及其测定意义一、烟叶碱类物质定义：烟草碱类物质包括两大类：植物碱和其它碱性含氮化合物。
烟草植物碱主要是烟碱，降烟碱，假木贼碱和新烟草碱；其它碱性含氮物质如吡啶，吡咯，吡嗪，氨，甲胺，二甲胺等。
二、测定意义：1、烟草碱类物质影响烟草的香气和吃味。
2、烟碱是吸烟产生生理强度的物质基础。
3、烟叶中烟碱含量高，劲头足，挥发碱和其它生物碱含量高则刺激性大。
烟叶挥发碱的测定一、挥发碱定义：在pH8的缓冲溶液中进行蒸汽蒸馏，能逸出的那一部分氨类含氮化合物。
主要包括：氨，胺，酰胺，游离烟碱。
二、测定原理：用pH8的磷酸二氢钾－硼酸缓冲液对烟草样品进行水蒸气蒸馏，流出液用0.1mol/LHCl 承接，再用0.1mol/LNaOH返滴剩余的HCl，混合指示剂指示终点，计算出总的挥发碱含量。
三、测定步骤：1、2-4g烟样于500ml凯氏瓶中，加入少许石蜡和小瓷片防止发泡和沸溅，再加入75ml 缓冲液，通入水蒸气蒸馏。
2、流出液用装有15ml的0.1mol/LHCl溶液的1000ml烧瓶承接，待蒸出液达到800ml左右时，用硅钨酸的盐酸溶液测试是否将烟样中的挥发性碱蒸尽。
3、流出液中加入8-10滴混合指示剂，用0.1mol/LNaOH滴定至溶液变为无色或灰白色，记下NaOH用量。
同时做空白对照。
四、结果结算：烟叶烟碱测定方法一、硅钨酸重量法（经典法）：1、原理：在强碱性介质（Ph>10.5）NaOH存在下进行蒸汽蒸馏，使全部植物碱包括烟碱、去甲基烟碱、假木贼碱和新烟碱等挥发而逸出，只有烟碱在酸性条件下可以被硅钨酸沉淀生成烟碱硅钨酸盐（白色沉淀），过虑洗涤得到纯净的烟碱硅钨酸盐白色沉淀，在800－850℃高温下灼烧烟碱硅钨酸沉淀，得到无水硅钨酸残渣，根据无水硅钨酸残渣的重量计算出烟碱的含量。
2、操作步骤：①用NaOH蒸馏烟碱，制备待测液04g烟样于500mL凯氏瓶或圆底烧瓶内，加入3g NaOH，25g NaCl（催化剂，加速烟碱挥发）和30mL水――通入水蒸汽蒸馏，流出液用1：4HCl承接（也可以用H2SO4）――－将流出液定容至250mL容量瓶中，即为烟碱待测液。