21生物化学习题与解析--常用分子生物学技术的原理及其应用
常用分子生物学技术的原理及其应用作业习题
常用分子生物学技术的原理及其应用作业习题1. PCR技术（聚合酶链式反应）原理：PCR技术是一种在体外合成DNA的技术，通过热循环反应，能够迅速扩增特定DNA片段。
PCR反应主要分为三个步骤：变性、退火和扩增。
•变性（Denaturation）：将目标DNA加热至95°C，使其两条链分离，得到单链DNA模板。
•退火（Annealing）：在低温下，通过引物与目标DNA模板结合，形成DNA双链。
•扩增（Extension）：在适温下，酶引物复合物加入到目标DNA的3’端，使用DNA聚合酶酶合新的DNA链。
应用作业题目：1.解释PCR技术中的变性步骤的目的是什么？2.PCR反应中的引物是什么作用？3.如果需要扩增一个1000bp的目标DNA片段，你会选择哪种PCR引物的长度？4.为什么PCR技术可以实现高灵敏度的DNA检测？5.列举PCR技术的应用领域。
2. Western Blotting技术原理：Western Blotting技术通过检测蛋白质在凝胶中的分布来研究特定蛋白质的表达，该技术主要包括凝胶电泳、转印和探针探测等步骤。
•凝胶电泳：将蛋白质样品进行电泳，按照大小和电荷将蛋白质分离在凝胶平台上。
•转印：将凝胶上的蛋白质迁移到膜上，如聚偏氟乙烯（PVDF）或硝酸纤维素膜。
•探针探测：使用特异性的抗体与目标蛋白质结合，并通过酶标记或荧光标记的二级抗体来检测目标蛋白质。
应用作业题目：1.为什么需要将蛋白质进行凝胶电泳分离？2.列出Western Blotting技术中常用的蛋白检测方法。
3.Western Blotting技术中为什么需要进行蛋白质转印到膜上？4.请解释什么是一级和二级抗体。
5.列举Western Blotting技术的应用场景。
3. DNA测序技术原理：DNA测序技术是以DNA为模板，通过测定不同的碱基序列，确定DNA分子的排列顺序。
目前常用的DNA测序技术主要包括Sanger测序和下一代测序两种方法。
分子生物学试题及答案
分子生物学试题及答案一、单项选择题（每题2分，共20分）1. DNA分子的双螺旋结构是由谁提出的？A. 沃森和克里克B. 达尔文C. 孟德尔D. 摩尔根答案：A2. 以下哪个不是DNA聚合酶的功能？A. 合成DNA链B. 修复DNA损伤C. 催化RNA转录D. 校对新合成的DNA链答案：C3. 真核生物的mRNA帽子结构位于其5'端，其主要功能是什么？A. 促进翻译B. 保护mRNA不被降解C. 促进mRNA的剪接D. 促进mRNA的运输答案：B4. 以下哪种RNA分子在蛋白质合成中不直接参与？A. mRNAB. tRNAC. rRNAD. snRNA5. 基因表达调控中，转录因子的作用是什么？A. 提供转录所需的能量B. 识别并结合到特定的DNA序列上C. 催化DNA复制D. 促进DNA修复答案：B6. 以下哪种技术用于研究基因功能？A. PCRB. DNA测序C. 基因敲除D. DNA指纹分析答案：C7. 以下哪个不是DNA复制的特点？A. 半保留复制B. 需要引物C. 双向复制D. 需要逆转录酶答案：D8. 以下哪个不是RNA干扰（RNAi）的作用机制？A. 降解特定的mRNAB. 抑制基因表达C. 促进基因突变D. 沉默特定基因答案：C9. 以下哪个是真核生物中常见的非编码RNA？B. siRNAC. tRNAD. rRNA答案：A10. 以下哪个是原核生物和真核生物共有的基因表达调控机制？A. 转录后修饰B. 转录因子调控C. mRNA剪接D. 核糖体结合位点调控答案：B二、填空题（每空1分，共20分）1. DNA分子的基本组成单位是_______，而RNA分子的基本组成单位是_______。
答案：脱氧核苷酸；核糖核苷酸2. 在DNA复制过程中，_______酶负责解开双链DNA，而_______酶负责合成新的DNA链。
答案：解旋酶；DNA聚合酶3. 真核生物的基因表达调控主要发生在_______水平，而原核生物的基因表达调控主要发生在_______水平。
第20章常用分子生物学技术的原理及其应用
第20章常用分子生物学技术的原理及其应用分子生物学技术是研究生物分子结构、功能、调控及其相互关系的重要手段，具有识别、分离、纯化、检测和重组生物分子的功能。
在生命科学研究和生物技术应用中，常用的分子生物学技术主要包括核酸提取、聚合酶链式反应（PCR）、限制酶切片段长度多态性分析（RFLP）、DNA测序、原位杂交、Northern和Southern blot杂交等。
下面将介绍这些常用分子生物学技术的原理及其应用。
1.核酸提取：核酸提取是从细胞或组织中获得目的核酸的方法。
其原理是通过细胞破碎及蛋白酶消化等步骤，将细胞内的核酸释放出来，并进行纯化。
核酸提取技术广泛应用于基因克隆、基因组学研究、医学诊断以及法医学中的DNA分析等领域。
2.聚合酶链式反应（PCR）：PCR是一种体外合成DNA的技术，通过多轮的循环温度反应，可以快速扩增一段特定的DNA序列。
其原理是利用DNA聚合酶酶活与特定引物的作用，在一系列温度循环中，使DNA序列通过链分离、引物结合、DNA合成循环进行扩增。
PCR技术被广泛应用于基因分型、基因克隆、突变检测、DNA测序等领域。
3.限制酶切片段长度多态性分析（RFLP）：RFLP是一种检测DNA序列多态性的方法，通过限制酶切割目的DNA，在凝胶电泳中观察DNA片段的长度差异。
其原理是利用限制酶对特定序列的识别和切割，形成不同长度的DNA片段，经凝胶电泳分离，通过核酸探针杂交或染料染色等方法来观察差异。
RFLP技术广泛应用于基因分型、基因组学研究、变异检测等领域。
4. DNA测序：DNA测序是一种确定DNA序列的方法，通过测定DNA的碱基顺序，揭示基因组结构和功能。
常用的DNA测序技术包括Sanger测序和高通量测序。
Sanger测序原理是利用DNA聚合酶、引物和一种特殊的停止链终止剂，在DNA合成过程中随机终止，形成不同长度的DNA片段，通过电泳分离后，通过染料或探针检测碱基顺序。
高通量测序技术基于快速测序平台和大规模并行测序，提高了测序效率和准确性，广泛应用于基因组学、转录组学等领域。
生物化学与分子生物学习题(按章节含答案)
第一章蛋白质的结构与功能测试题一、单项选择题1.测得某一蛋白质样品的含氮量为0.40g，此样品约含蛋白质多少克?A.2.00gB.2.50gC.6.40gD.3.00gE.6.35g2.含有两个羧基的氨基酸是：A.CysB.GluC.AsnD.GlnE.Lys3.在生理条件下，下列哪种氨基酸残基的侧链所带的正电荷最多？A.CysB.GluC.LysD.ThrE.Ala4.下列哪种氨基酸为环状亚氨基酸?A.GlyB.ProC.TrpD.TyrE.Lys5.蛋白质分子中维持一级结构的主要化学键是：A.肽键B.二硫键C.酯键D.氢键E.疏水键6.不组成蛋白质的氨基酸是：A.蛋氨酸B.半胱氨酸C.鸟氨酸D.胱氨酸E.丝氨酸7.蛋白质的一级结构及高级结构决定于：A.分子中氢键B.分子中盐键C.氨基酸组成和顺序D.分子内部疏水键E.亚基8.血清蛋白(PI为4.7)在下列哪种PH值溶液中带正电荷?A.PH4.0B.PH5.0C.PH6.0D.PH7.0E.PH8.09.蛋白质合成后修饰而成的氨基酸是：A.脯氨酸B.胱氨酸C.赖氨酸D.蛋氨酸E.天冬氨酸10.蛋白质变性是由于：A.氨基酸排列顺序的改变B.氨基酸组成的改变C.肽键的断裂D.蛋白质空间构象的破坏E.蛋白质的水解11.蛋白质在280nm处有最大光吸收，主要是由下列哪组结构引起的？A.组氨酸的咪唑基和酪氨酸的酚基B.酪氨酸的酚基和色氨酸的吲哚环C.酪氨酸的酚基和苯丙氨酸的苯环D.色氨酸的吲哚环和苯丙氨酸的苯环E.苯丙氨酸的苯环和组氨酸的咪唑基12.蛋白质溶液的稳定因素是：A.蛋白质溶液有分子扩散现象B.蛋白质在溶液中有“布朗”运动C.蛋白质分子表面带有水化膜和同种电荷D.蛋白质溶液的粘度大E.蛋白质分子带有电荷13.蛋白质变性不包括：A.氢键断裂B.肽键断裂C.疏水键断裂D.盐键断裂E.二硫键断裂14.关于蛋白质等电点的叙述下列哪项是正确的?A.在等电点处蛋白质分子所带净电荷为零B.等电点时蛋白质变性沉淀C.不同蛋白质的等电点相同D.在等电点处蛋白质的稳定性增加E.蛋白质的等电点与它所含的碱性氨基酸的数目无关15.维持蛋白质分子二级结构的主要化学键是：A.氢键B.二硫键C.疏水键D.离子键E.磷酸二酯键16.蛋白质分子中α-螺旋构象的特点是：A.靠盐键维持稳定B.肽键平面充分伸展C.多为左手螺旋D.带同种电荷的氨基酸集中存在，不利于α-螺旋的形成与稳定E.以上都不是17.有一混合蛋白质溶液，各种蛋白质的PI为4.6、5.0、5.3、6.7、7.3，电泳时欲使其中的4种蛋白质泳向正极，缓冲液的PH应该是A.4.0B.5.0C.6.0D.8.0E.7.018.下列关于蛋白质结构叙述中，不正确的是：A.α-螺旋是二级结构的一种B.无规卷曲是在一级结构基础上形成的C.所有蛋白质都有四级结构D.一级结构决定二、三级结构E.三级结构即具有空间构象19.蛋白质和酶分子显示巯基的氨基酸是：A.赖氨酸B.半胱氨酸C.胱氨酸D.蛋氨酸E.谷氨酸20.蛋白质多肽链具有的方向性是：A.从5＇端到3＇端B.从3＇端到5＇端C.从N端到C端D.从C端到N端E.以上都不是21.α螺旋每上升一圈相当于氨基酸残基的个数是：A.4.8B.2.7C.3.6D.3.0E.2.522.人体蛋白质的基本组成单位是：A.L-β氨基酸B.D-β氨基酸C.D-α氨基酸D.L-α氨基酸E.L，D-α氨基酸23.关于蛋白质四级结构的描述正确的是：A.分子中必定含有辅基B.蛋白质变性时四级结构不一定受破坏C.依赖共价键维系四级结构的稳定性D.在两条或两条以上具有独立三级结构多肽链的基础上，肽链进一步折叠、盘曲形成E.每条多肽链都具有独立的生物学活性24.镰刀型红细胞性贫血是由于HbA的结构变化引起的，其变化的特点是：A.HbA的α链的N端第6位谷氨酸残基被缬氨酸所取代B.HbA的α链的C端第6位谷氨酸残基被缬氨酸所取代C.HbA的β链的N端第6位谷氨酸残基被缬氨酸所取代D.HbA的β链的C端第6位谷氨酸残基被缬氨酸所取代E.以上都不是25.在饱和硫酸铵状态下析出的蛋白质是：A.清蛋白B.纤维蛋白原C.γ-球蛋白D.α1-球蛋白E.β-球蛋白26.有一蛋白质水解产物在PH＝6用阳离子交换剂层析时，第一个被洗脱下来的氨基酸是：A.Val(pI 5.96)B.Asp(pI 2.77)C.Lys( pI 9.74 )D.Tyr(pI 5.66)E.Arg( pI 10.76)27.蛋白质沉淀、变性和凝固的关系，下面叙述正确的是：A.变性蛋白不一定失去活性B.变性蛋白一定要凝固C.蛋白质沉淀后必然变性D.变性蛋白一定沉淀E.蛋白质凝固后一定变性28.一个含有葡萄糖、N-乙酰谷氨酸、天冬氨酸、精氨酸和丙氨酸的溶液，在PH＝6条件下通过阴离子交换树脂，被保留最多的是：A.精氨酸B.天冬氨酸C.丙氨酸D.葡萄糖E.亮氨酸29.利用分子筛原理分离蛋白质的技术是：A.阴离子交换层析B.阳离子交换层析C.凝胶过滤D.亲和层析E.透析二、多项选择题1.侧链带羟基的氨基酸包括：A.SerB.ThrC.PheD.TrpE.Tyr2.含硫氨基酸包括：A.蛋氨酸B.苏氨酸C.组氨酸D.半胱氨酸E.丝氨酸3.下列哪些是酸性氨基酸?A.谷氨酸B.赖氨酸C.精氨酸D.天冬氨酸E.酪氨酸4.蛋白质中的非共价键有：A.氢键B.二硫键C.盐键D.肽键E.疏水键5.蛋白质的二级结构包括：A.α-螺旋B.β-片层C.β-转角D.无规卷曲E.双螺旋6.下列哪些因素影响α-螺旋的形成：A.R基团的大小B.R基团的形状C.R基团所带电荷性质D.螺旋的旋转方向E.带同种电荷的R基团集中区7.下列哪种蛋白质在PH＝5的溶液中带正电荷?A.PI为4.5的蛋白质B.PI为7.4的蛋白质C.PI为7的蛋白质D.PI为6.5的蛋白质E.PI为3.5的蛋白质8.蛋白质变性后A.肽键断裂B.一级结构改变C.空间结构改变D.分子内亲水基团暴露E.生物学活性改变9.蛋白质沉淀、变性和凝固的关系，下列叙述正确的是：A.蛋白质沉淀后必然变性B.蛋白质凝固后一定会变性C.变性蛋白一定要凝固D.变性蛋白不一定会沉淀E.变性就是沉淀，沉淀就是变性10.谷胱甘肽的功能包括：A.解毒B.是细胞内的重要还原剂C.参与细胞间的信息传递D.参与氨基酸的吸收及向细胞内的转运E.是细胞的重要供氢体11.蛋白质变性后会出现下列哪些现象?A.生物活性丧失B.溶解度降低C.粘度增加D.易被蛋白酶水解E.分子量发生改变12.关于蛋白质的组成正确的有：A.由C、H、O、N等多种元素组成B.由α－氨基酸组成C.可水解成肽或氨基酸D.含氮量约为16％E.含氮量约为14%13.关于蛋白质二级结构的论述哪些是正确的？A.一种蛋白质分子只存在一种二级结构形式B.是多肽链本身折叠盘曲而成C.主要存在形式有α-螺旋和β-折叠D.维持二级结构的化学键是肽键和氢键E.二级结构的存在形式是由氨基酸的组成决定14.蛋白质一级结构A.是空间结构的基础B.指氨基酸序列C.并不包括二硫键D.与功能无关E.主要靠肽键维持稳定15.蛋白质三级结构A.亲水基团多位于三级结构的表面B.是指整条肽链中全部氨基酸残基的相对空间位置C.具有三级结构的多肽链不一定具有生物学活性D.属于高级结构E.靠次级键维系16.关于α-螺旋的叙述不正确的是:A.酸性氨基酸集中区域有利于螺旋的形成B.每3.6个氨基酸残基为一周，螺距为3.4nmC.氨基酸侧链R基团分布在螺旋的外侧D.其结构靠氢键维持E.螺旋是一种左手螺旋构象17.使蛋白质沉淀但不变性的方法有:A.中性盐沉淀蛋白质B.常温乙醇盐沉淀蛋白质C.低温乙醇盐沉淀蛋白质D.鞣酸沉淀蛋白质E.重金属盐沉淀蛋白质18.蛋白质变性A.由肽键断裂而引起B.可增加其溶解度C.空间结构改变D.可使其生物活性丧失E.由次级键断裂引起三、问答题1.酸性氨基酸和碱性氨基酸各包括什么?2.哪些氨基酸属于必需氨基酸?3.使蛋白质变性的因素有哪些?变性后性质有哪些改变?4.什么是蛋白质的一、二、三、四级结构，维系各级结构的键是什么?5.写出四种有甘氨酸参与合成的不同类型的生物活性物质，并分别说明他们的主要作用?6.举例说明蛋白质的结构与功能的关系?7.列举分离纯化蛋白质的主要方法，并扼要说明其原理?8.沉淀蛋白质的方法有哪些?各有何特点?参考答案一、单项选择题1.B2.B3.C4.B5.A6.C7.C8.A 9.B 10.D 11.B 12.C 13.B 14.A15.A 16.D 17.E 18.C 19.B 20.C 21.C22.D 23.D 24.C 25.A 26.B 27.E 28.B29.C二、多项选择题1.ABE2.AD3.AD4.ACE5.ABCD6.ABCE7.BCD8.CE9.BD 10.ABD 11.ACBD 12.ABCD13.BCE 14.ABE 15.ABCDE 16.ABE17.AC 18.CDE三、问答题1.酸性氨基酸包括天冬氨酸和谷氨酸。
生物化学(18.16)--作业常用分子生物学技术及应用(附答案)
简述肿瘤基因治疗常用的方案有哪些? [答案](1)细胞因子的转基因治疗，主要有干扰素类、白介素类、刺激因子类、肿瘤坏死因子及 转化生长因子。
(2)MHC 抗原基因的转基因疗法：肿瘤细胞逃避机体免疫系统的机制之一是其不表达 MHC—I 类抗原而不能被免疫系统所识别。因而将 MHC—1 分子基因导人缺乏 MHC—I 抗 原表达的肿瘤细胞中可诱导肿瘤特异性的细胞毒作用来杀灭肿瘤。
基因治疗的基本程序是什么? [答案]治疗性基因的选择一基因载体的选择一靶细胞的选择一基因转移 (病毒介导的基因转 移与非病毒介导的基因转移)一外源基因表达的筛选一外源基因回输体内。
简述基因诊断的基本途径、技术和方法。 [答案]基因诊断的基本途径：根据临床诊断的初步结论进行基因诊断，可以进行：①直接 探测基因结构是否存在突变；②检测基因转录产物 mRNA 是否表达异常。基因诊断的技术 和方法：DNA 探针技术；PCR 技术；DNA 探针技术与 PCR 技术结合的技术。
参考答案：
名பைடு நூலகம்解释 印迹技术 [答案]印迹技术是指将在凝胶中分离的生物大分子转移(印迹)或直接将其放在固定化介质上 并加以检测分析的技术。
分子生物学常用技术共35张-2024鲜版
•分子生物学概述•基因克隆技术•核酸测序技术•蛋白质组学技术•基因表达调控研究技术•细胞信号传导途径研究技术•生物信息学在分子生物学中应用contents目录01分子生物学概述分子生物学定义与发展分子生物学定义发展历程包括基因的结构、功能、表达调控以及基因组的结构、功能与进化等。
基因与基因组研究DNA 复制、转录与翻译蛋白质组学基因表达调控研究DNA 的复制、转录和翻译过程及其调控机制，揭示遗传信息在细胞内的传递和表达规律。
研究细胞内所有蛋白质的表达、功能及其相互作用，揭示蛋白质在生命活动中的作用机制和调控规律。
研究基因表达的时空特异性及其调控机制，包括转录因子、表观遗传学修饰等。
分子生物学研究内容分子生物学与生物技术关系生物技术定义生物技术是以生命科学为基础，利用生物（或生物组织、细胞及其他组成部分）的特性和功能，设计、构建具有预期性能的新物质或新品系，以及与工程原理和技术相结合进行社会生产或为社会服务的一种综合性技术。
分子生物学对生物技术的影响分子生物学的发展为生物技术提供了重要的理论基础和技术支持，推动了基因工程、细胞工程、发酵工程等生物技术的飞速发展。
同时，生物技术的发展也反过来促进了分子生物学的深入研究，为揭示生命现象的本质和规律提供了有力手段。
02基因克隆技术步骤目的基因的获取载体的选择与构建030201重组DNA分子的构建将目的基因与载体连接，形成重组DNA分子。
重组DNA分子的转化将重组DNA分子导入受体细胞，如细菌、酵母或哺乳动物细胞等。
转化细胞的筛选与鉴定通过选择性培养基或PCR等方法筛选含有重组DNA分子的细胞，并进行鉴定。
0102载体选择构建策略添加启动子和终止子添加选择性标记优化载体结构030405载体选择与构建策略重组DNA转化与筛选方法转化方法筛选方法03核酸测序技术1. DNA模板制备2. 引物设计3. 测序反应4. 产物纯化015. 变性凝胶电泳026. 放射自显影031 2 3NGS技术原理NGS技术特点NGS技术应用第二代测序技术（NGS）简介第三代测序技术（TGS）展望TGS技术原理TGS技术特点TGS 技术应用前景04蛋白质组学技术蛋白质组学概念及研究内容蛋白质组学概念研究内容层析法利用不同物质在固定相和流动相之间分配系数的差异进行分离，如凝胶层析、离子交换层析等。
常用分子生物学技术的原理及其应用
常用分子生物学技术的原理及其应用常用分子生物学技术是一系列用于分析和操作分子生物学层面的实验技术。
这些技术基于对核酸（DNA和RNA）和蛋白质的结构和功能的研究，以及对基因表达和调控机制的理解。
在本文中，我将介绍常用分子生物学技术的原理和应用。
1.聚合酶链式反应（PCR）：PCR是一种能够从极少量的DNA样本中扩增特定DNA序列的技术。
它基于DNA的两条链之间的互补配对，使用DNA聚合酶酶和引物来在离子和温度周期变化的条件下进行。
PCR技术广泛应用于分子生物学和生物医学研究中，包括基因克隆、基因突变分析、DNA指纹鉴定以及病原体的检测等。
2.聚丙烯酰胺凝胶电泳：凝胶电泳是一种分离和分析DNA，RNA和蛋白质的常用技术。
其中，聚丙烯酰胺（或琼脂糖）是一种高分子量聚合物，能够形成孔隙凝胶。
在电场的作用下，DNA，RNA或蛋白质在凝胶中迁移，根据大小和电荷的差异进行分离。
凝胶电泳广泛用于DNA和RNA的分离和纯化，以及蛋白质的分析和鉴定。
3.DNA测序：DNA测序是确定DNA序列的技术。
它通过测量DNA片段中的碱基顺序来分析DNA的序列信息。
目前有多种DNA测序技术，包括链终止测序（Sanger测序）和高通量测序（如Illumina测序和Ion Torrent测序）。
DNA测序在基因组学、遗传学和基因诊断中起着重要的作用。
4.基因克隆技术：基因克隆是指将目标基因从其源DNA中扩增，并将其插入到载体DNA 中，然后转化到宿主细胞中。
利用基因工程技术，克隆的基因可以在宿主细胞中被表达。
这种技术被广泛应用于重组蛋白质的定制表达、转基因生物的制备以及基因治疗的研究中。
5. 蛋白质电泳和Western blot：蛋白质电泳是一种分离和分析蛋白质的技术。
与DNA电泳类似，蛋白质电泳通过在聚丙烯酰胺凝胶中迁移蛋白质来分离不同大小和电荷的蛋白质。
Western blot是一种检测目标蛋白质的特异性抗体的技术，通过将蛋白质转移到膜上，然后使用特异性抗体与目标蛋白质结合来检测和定量蛋白质。
21-生物化学习题与解析--常用分子生物学技术的原理及其应用
21-生物化学习题与解析--常用分子生物学技术的原理及其应用常用分子生物学技术的原理及其应用一、选择题（一） A 型题1 ．分子杂交实验不能用于A ．单链 DNA 与 RNA 分子之间的杂交B ．双链 DNA 与 RNA 分子之间的杂交C ．单链 RNA 分子之间的杂交D ．单链 DNA 分子之间的杂交E ．抗原与抗体分子之间的杂交2 ．关于探针叙述错误的是A ．带有特殊标记B ．具有特定序列C ．必须是双链的核酸片段D ．可以是基因组 DNA 片段E ．可以是抗体3 ．下列哪种物质不能用作探针A ． DNA 片段B ． cDNAC ．蛋白质D ．氨基酸E ． RNA 片段4 ．印迹技术可以分为A ． DNA 印迹B ． RNA 印迹C ．蛋白质印迹D ．斑点印迹E ．以上都对5 ． PCR 实验延伸温度一般是A ．90 ℃B ．72 ℃C ．80 ℃D ．95 ℃E ．60 ℃6 ． Western blot 中的探针是A ． RNAB ．单链 DNAC ． cDNAD ．抗体E ．双链 DNA7 ． Northern blotting 与 Southern blotting 不同的是A ．基本原理不同B ．无需进行限制性内切酶消化C ．探针必须是 RNAD ．探针必须是 DNAE ．靠毛细作用进行转移8 ．可以不经电泳分离而直接点样在 NC 膜上进行杂交分析的是A ．斑点印迹B ．原位杂交C ． RNA 印迹D ． DNA 芯片技术E ． DNA 印迹9 ．下列哪种物质在 PCR 反应中不能作为模板A ． RNAB ．单链 DNAC ． cDNAD ．蛋白质E ．双链 DNA10 ． RT-PCR 中不涉及的是A ．探针B ． cDNAC ．逆转录酶D ． RNAE ． dNTP11 ．关于 PCR 的基本成分叙述错误的是A ．特异性引物B ．耐热性 DNA 聚合酶C ． dNTPD ．含有 Zn 2+ 的缓冲液E ．模板12 ． DNA 链末端合成终止法不需要A ． ddNTPB ． dNTPC ．引物标记D ． DNA 聚合酶E ．模板13 ． cDNA 文库构建不需要A ．提取 mRNAB ．限制性内切酶裂解 mRNAC ．逆转录合成 cDNAD ．将 cDNA 克隆入质粒或噬菌体E ．重组载体转化宿主细胞14 ．标签蛋白沉淀是A ．研究蛋白质相互作用的技术B ．基于亲和色谱原理C ．常用标签是 GSTD ．也可以是 6 组氨酸标签E ．以上都对15 ．研究蛋白质与 DNA 在染色质环境下相互作用的技术是A ．标签蛋白沉淀B ．酵母双杂交C ．凝胶迁移变动实验D ．染色质免疫沉淀法E ．噬菌体显示筛选系统16 ．动物整体克隆技术又称为A ．转基因技术B ．基因灭活技术C ．核转移技术D ．基因剔除技术2 ．核酸分子杂交可以形成的杂化双链有A ． DNA/DNAB ． RNA/RNAC ． DNA/RNAD ．寡核苷酸 /RNAE ．寡核苷酸 /DNA3 ． PCR 技术主要用于A ．目的基因的克隆B ．基因的体外突变C ． DNA 和 RNA 的微量分析D ． DNA 序列测定E ．基因突变分析4 ．分子杂交技术的原理涉及A ．分子杂交特性B ．基因文库C ．印迹技术D ．生物芯片E ．探针技术5 ．关于 DNA 链末端合成终止法正确的是A ．需加入的链终止剂 ddNTPB ． dNTP 需要标记C ．引物也需要标记D ．又称 Sanger 法E ． ddNTP 缺乏 5 ' -OH6 ．基因组 DNA 文库建立需要A ．基因组进行限制性内切酶消化B ． DNA 片段克隆到相应载体中C ．重组体感染宿主菌D ．筛选目的基因可以通过核酸分子杂交的方法进行E ．以λ 噬菌体为载体的人基因组 DNA 文库的克隆数目至少应在 10 6 以上7 ．用于构建基因组 DNA 文库的载体有A ．酵母人工染色体B ．粘粒C ．λ 噬菌体D ．腺病毒E ．脂质体8 ．基因诊断较常规诊断其特点有A ．属于病因诊断B ．特异性强C ．适用范围窄D ．灵敏度高E ．有放大效应9 ．基因失活的常用技术包括A ．基因疫苗B ．核酶C ．小干扰 RNAD ．反义核酸E ．基因置换10 ．克隆羊多莉的产生属于A ．同种异体细胞转移技术B ．同种异体细胞核转移技术C ．试管内受精D ．无性繁殖E ．同种异体细胞转基因技术11 ．疾病动物模型可用于A ．探讨疾病的发生机制B ．克隆致病基因C ．新治疗方法的筛选系统D ．新药物的筛选系统E ．新疾病模型的筛选系统12 ．蛋白质芯片主要应用于A ．蛋白质结构的研究B ．蛋白质表达谱的研究C ．蛋白质功能的研究D ．蛋白质之间的相互作用研究E ．疾病的诊断和新药的筛选13 ．研究蛋白质相互作用的技术包括A ．标签蛋白沉淀B ．酵母双杂交C ．凝胶阻滞实验D ．噬菌体显示筛选系统E ． DNA 印迹14 ．基因治疗的基本程序包括A ．治疗性基因的选择B ．基因载体的选择C ．靶细胞的选择D ．基因转移E ．回输体内15 ．目前可用作基因治疗的基因载体包括A ．腺病毒相关病毒B ．噬菌体C ．腺病毒D ．逆转录病毒E ．粘粒二、是非题1 ． Southern blot 主要用于 RNA 的定性和定量分析。
分子生物学题库(附参考答案)
分子生物学题库（附参考答案）一、单选题（共100题，每题1分，共100分）1.关于切口平移法下述不正确的是A、可标记线性 DNAB、可标记松散螺旋 DNAC、可标记超螺旋 DNAD、可标记存在缺口的双链 DNAE、可标记随机引物正确答案：E2.在 pH 为下述何种范围时，Tm 值变化不明显A、pH 为 5~9B、pH 为 3~5C、pH 为 5~6D、pH 为 8~11E、pH 为 4~5正确答案：A3.关于SYBR Green Ⅰ 的描述，不正确的是A、荧光染料的成本低B、适用于任何反应体系C、操作亦比较简单D、特异性强E、不需要对引物或探针进行预先特殊的荧光标记正确答案：D4.PCR 反应过程中，退火温度通常比引物的Tm 值A、低5℃B、低15℃C、高5℃D、高15℃E、相等正确答案：A5.以下关于原癌基因说法不正确的是A、普遍存在于人类或其他动物细胞基因组中的一类基因B、在生物进化过程中不稳定C、在控制细胞生长和分化中起重要作用D、容易在多种因素作用下激活成活性形式的癌基因E、活性形式的癌基因才引起细胞癌变正确答案：B6.关于真菌，以下描述正确的是A、真菌种类繁多，其中大多数对人类有害B、浅部真菌感染对治疗有顽固性，对机体的影响相对较小C、近年真菌病的发病率有明显下降趋势D、病原性真菌根据其入侵组织部位深浅的不同分为浅部真菌和内部真菌E、真菌感染对人体的危害不大正确答案：B7.标记的参与杂交反应的核酸分子称为A、变性B、探针C、杂交D、复性E、复杂性正确答案：B8.不符合分子诊断特点的是A、灵敏度高B、特异性强C、样品获取便利D、检测对象为自体基因E、易于早期诊断正确答案：D9.在下列何种情况下可考虑进行基因连锁检测方法进行基因诊断A、基因结构变化未知B、点突变C、基因片段缺失D、表达异常E、基因片段插入正确答案：A10.关于抑癌基因的说法正确的是A、呈隐性作用方式B、抑癌基因又称为肿瘤分化抑制基因C、可以使细胞丧失生长控制和正性调控功能D、是一类可编码对肿瘤形成起促进作用的蛋白质的基因E、正常情况下促进细胞增殖、抑制细胞分化正确答案：A11.变性梯度凝胶电泳的描述中错误的是A、使 DNA 双链分子局部变性B、采用梯度变性凝胶C、变性难易由核苷酸组成决定D、突变检测率高E、可确定突变位置正确答案：E12.DNA 自动化测序技术中，不正确的荧光标记方法A、用荧光染料标记引物5’端B、用荧光染料标记引物3’-OHC、用荧光染料标记终止物D、使用一种或四种不同荧光染料标记E、使荧光染料标记的核苷酸渗入到新合成的 DNA 链中正确答案：B13.PCR 中的脱氧核苷三磷酸不包括A、dATPB、dTTPC、dCTPD、dGTPE、dUTP正确答案：E14.一种标记核酸与另一种核酸单链进行配对形成异源核酸分子的双链，这一过程称A、变性B、复杂性C、探针D、复性E、杂交正确答案：E15.珠蛋白生成障碍性贫血的主要原因是A、珠蛋白链合成速率降低B、珠蛋白基因突变导致氨基酸序列改变C、血红蛋白破坏加速D、出现异常血红蛋白 SE、铁代谢异常正确答案：A16.众多肿瘤中遗传因素最突出的一种肿瘤是A、肺癌B、肝癌C、乳腺癌D、结直肠癌E、前列腺癌正确答案：D17.为封闭非特异性杂交位点，可在预杂交液中加入A、ssDNAB、1 ×SSCC、10×SSCD、5×TBECE、50×TAE正确答案：A18.不属于脆性 X 综合征分子诊断人群的是A、有 FraX 体格或性格阳性征象者B、发育迟缓或自闭症的患者C、没有 FraX 家族史D、已明确母亲为携带者的婴儿E、未诊断的 MR 家族史正确答案：C19.病毒的遗传物质是A、DNAB、RNA 和蛋白质C、DNA 或 RNAD、RNA 和 DNAE、DNA 和蛋白质正确答案：C20.Alu家族属于A、可变数目串联重复序列B、短串联重复序列C、长散在核原件D、短散在核原件E、DNA 转座子正确答案：D21.检测融合基因、确定染色体易位的首选方法是A、FISHB、RT-PCRC、实时定量 PCRD、PCRE、DNA 芯片正确答案：D22.母亲血浆中的胎儿 DNAA、占母亲血浆总 DNA 的 50%以上B、可用于检测胎儿从母亲遗传而来的线粒体 DNA 突变C、确定RhD 阳性孕妇所怀胎儿的RhD 情况D、确定胎儿是否从母亲遗传了X 连锁的基因突变E、血友病 A 的产前诊断正确答案：C23.关于人工合成的寡核苷酸探针，下列描述不正确的是A、特异性高B、可依赖氨基酸序列推测其序列C、分子量小D、可用于相似基因顺序差异性分析E、可用末端转移酶进行5’端标记正确答案：E24.以下哪种方法是检测耐药基因突变的金标准 ( )A、PCR 技术B、荧光定量 PCR 技术C、PCR-RFLP 技术D、PCR-SSCPE、DNA 测序技术正确答案：E25.5’-末端的 DNA 探针标记主要依靠的酶是A、T4 多聚核苷酸激酶B、末端转移酶C、AKPD、DNA pol ⅠE、DNA pol正确答案：A26.第三代测序技术测定人全基因组的目标：A、30 分钟的测序时间及 5 万美元的测序价格B、3 小时的测序时间及 5 千美元的测序价格C、30 分钟的测序时间及 5 千美元的测序价格D、3 分钟的测序时间及 5 千美元的测序价格E、3 小时的测序时间及 5 万美元的测序价格正确答案：D27.GeneXpert 全自动结核杆菌检测技术现可进行哪种药物的耐药检测A、乙胺丁醇B、利福平C、链霉素D、异烟肼E、吡嗪酰胺正确答案：B28.不是自动 DNA 测序仪主要系统之一的是A、测序反应系统B、电泳系统C、荧光检测系统D、探针荧光标记系统E、电脑分析系统正确答案：D29.下列哪一种病毒的遗传物质为 RNA ( )A、乙肝病毒B、乳头瘤状病毒C、疱疹病毒D、人类免疫缺陷病毒E、腺病毒正确答案：D30.关于 TaqMan 探针技术的描述，不正确的是A、R 基团与Q 基团相距较远，淬灭不彻底，本底较高B、易受到Taq DNA 聚合酶5’→3’核酸外切酶活性的影响C、操作亦比较简单D、不需要进行寡核苷酸熔解曲线分析，减少了实验时间E、解决了荧光染料技术非特异性的缺点正确答案：C31.下列属于抑癌基因的是 ( )A、sisB、rasC、c-erb-2D、mycE、p53正确答案：E32.荧光定量 PCR 反应中，Mg2+的浓度对 Taq 酶的活性是至关重要，以 DNA 或 cDNA 为模板的 PCR 反应中最好的 Mg2+浓度是A、0.2~0.5mMB、1~2mMC、2~5mMD、6~8mME、0.5~2mM正确答案：C33.有关 HPV 描述错误的是A、核酸类型为 DNAB、结构蛋白 L1 和 L2 是包膜上的主要和次要蛋白C、HPV 对皮肤和黏膜上皮细胞具有高度亲嗜性D、病毒核酸合成主要发生在棘层和颗粒层E、大多数宫颈癌组织中病毒以整合状态存在正确答案：B34.K-ras 基因最常见的激活方式是A、插入突变B、点突变C、缺失突变D、基因扩增E、染色体重排正确答案：B35.下列 DNA 序列中的胞嘧啶易发生甲基化修饰的是A、5’-CCCCCT-3’B、5’-GGGGCC-3’C、5’-CGCGCG-3’D、5’-GCACAC-3’E、5’-CTCTCCC-3’正确答案：C36.下列哪种病毒在复制过程中可产生 RNA-DNA 杂交体A、HIVB、HPVC、HBVD、HCVE、流感病毒正确答案：A37.绝大多数β-地中海贫血系由位于第 11 号染色体上的β-珠蛋白基因中的基因突变所致，下列方法中不能用于分子生物学检验的技术是A、PCR-ASOB、PCR-RDBC、基因芯片D、多重 PCRE、MOEA-PCR正确答案：D38.多基因家族的特点描述错误的是 ( )A、由某一祖先基因经过重复和变异所产生的一组基因B、通常由于突变而失活C、假基因与有功能的基因是同源的D、所有成员均产生有功能的基因产物E、可以位于同一条染色体上正确答案：D39.关于 DNA 芯片原位合成法的描述错误的是：A、也称在片合成B、直接在芯片上用四种核苷酸合成所需探针C、包括光导原位合成法D、包括原位喷印合成法E、包括直接点样法正确答案：E40.下列方法中不能分辨野生型和突变型基因的是A、PCR-SSCPB、变性梯度凝胶电泳C、熔解曲线分析D、逆转录 PCR正确答案：D41.下列哪些技术不适用于鉴定菌种亲缘性：A、随机扩增DNA 多态性分析B、连接酶链反应C、PCR-RFLPD、多位点测序分型E、DNA 测序技术正确答案：B42.下列不是目前用于 O157：H7 型大肠埃希菌分子生物学检验方法的是A、常规 PCRB、多重 PCRC、荧光定量 PCRD、基因芯片技术E、DNA 测序正确答案：E43.未知突变的检测，下列最准确的方法是A、PCRB、RFLPC、核酸杂交D、序列测定E、ASO正确答案：D44.任意引物 PCR 的特点描述错误的是A、需预知靶基因的核苷酸序列B、通过随机引物与模板序列随机互补C、扩增后可直接得到靶基因的多态性指纹图谱D、可用于基因组 DNA 图谱构建E、可用于临床致病菌的流行病学检测、分型正确答案：A45.巢式 PCR 错误的是A、是对靶 DNA 进行二次扩增B、第二次扩增所用的模板为第一次扩增的产物C、巢式 PCR 可提高反应的灵敏度和特异性D、常用于靶基因的质和 (或) 量较低时E、第二对引物在靶序列上的位置应设计在第一对引物的外侧正确答案：E46.下列不是细菌感染性疾病分子生物学检验技术的是A、PCR-SSCPB、real-time PCRC、ELISAD、PFGEE、PAPD正确答案：C47.通过酶联级联反应检测每次核苷酸聚合所产生的ppi 的测序方法是A、化学降解法B、寡连测序C、焦磷酸测序D、边合成边测序E、双脱氧终止法正确答案：C48.以 SDA 技术检测结核杆菌时扩增靶点是A、SDAB、IS6110 和 18SrRNAC、IS6110 和 5SrRNAD、IS6110 和 16SrRNAE、IS6110 和 15SrRNA正确答案：D49.STR 法医鉴定的基础是A、基因多态性B、碱基配对原则C、蛋白质空间结构D、孟德尔遗传定律E、基因扩增技术正确答案：D50.关于 APC 基因说法不正确的是A、是一种抑癌基因B、定位于染色体 5q21 上C、通过编码 APC 蛋白发挥作用D、APC 蛋白在细胞周期进程、细胞生长调控及维持自身稳定中起着重要作用E、APC 蛋白在肿瘤发生发展的全过程中并不稳定正确答案：E51.Northern 印迹杂交可以用于A、快速确定是否存在目的基因B、不仅可以检测 DNA 样品中是否存在某一特定的基因，而且还可以获得基因片段的大小及酶切位点分布的信息C、检测靶分子是 RNAD、用于基因定位分析E、用于阳性菌落的筛选正确答案：C52.描述 PCR-RFLP 技术在耐药突变检测方面错误的是：A、分型时间短B、技术简便C、突变要存在限制性内切酶酶切位点D、目前被广泛应用于耐药监测E、只能检测特定的突变位点正确答案：D53.单基因遗传病分子诊断的主要应用是A、产前诊断B、携带者筛查C、携带者诊断D、症状前诊断E、耐药基因检测正确答案：A54.结核分支杆菌的基因组特征是A、单链 DNAB、双链 DNAC、单正链 RNAD、单正链 RNA 双聚体E、单负链 RNA正确答案：B55.下列关于细菌感染性疾病的分子生物学检验说法错误的是A、可以检测不能或不易培养、生长缓慢的病原菌B、可以实现对感染细菌的广谱快速检测C、可以对细菌进行基因分型D、可以检测病原菌耐药基因E、其检验技术都是 PCR 及其衍生技术正确答案：E56.最早应用于 HLA 基因分型的方法是A、RFLP 分型技术B、PCR-SSCP 技术C、测序技术D、PCR-SSO 技术E、PCR-SSP 技术正确答案：A57.编码 HIV 衣壳蛋白的是A、gag 基因B、vif 基因C、pol 基因D、tat 基因E、env 基因正确答案：A58.关于核酸探针的种类下列不正确的是A、cDNA 探针B、寡核苷酸探针C、基因组 DNA 探针D、RNA 探针E、双链 DNA 探针正确答案：E59.下列关于引物设计的原则中，错误的是A、两条引物的Tm 值相差尽量大B、G+C 的含量应在 45%~55%之间C、尽量避免引物二聚体的出现D、反应体系中引物的浓度一般在0.1~0.2μmol/L 之间E、5’端可加修饰基团正确答案：A60.多重 PCR 的描述中正确的是：A、同一个模板，多种不同的引物B、相同的引物，多种不同的模板C、多个模板，多种引物D、引物的Tm 值、反应时间和温度、反应缓冲液等尽量不一致以区分不同产物E、同一反应内各扩增产物片段的大小应尽可能相同或接近正确答案：A61.PCR 反应体系的描述错误的是A、模板B、一条引物C、dNTPD、DNA 聚合酶E、缓冲液正确答案：B62.关于 FISH 在白血病的应用中说法正确的是A、主要用于白血病的初诊和复发的检测B、只适用于体液、组织切片标本C、FISH 只能检测处于分裂中期的细胞D、FISH 的灵敏度高于 PCRE、FISH 是检测融合基因、确定染色体易位的首选方法正确答案：A63.mtDNA 中基因数目为A、39 个B、27 个C、22 个D、37 个E、13 个正确答案：D64.硝酸纤维素膜最大的优点是( )A、本底低B、高结合力C、共价键结合D、非共价键结合E、脆性大正确答案：A65.要制订一个能够简洁准确的 DNA 测序方案，首先应考虑A、DNA 片段大小B、测序方法C、实验条件D、测序目的E、测序时间正确答案：E66.寡核苷酸探针的最大的优势是A、易分解B、易标记C、杂化分子稳定D、可以区分仅仅一个碱基差别的靶序列E、易合成正确答案：D67.关于支原体的描述错误的是A、支原体是一类在无生命培养基中能独立生长繁殖的最小原核细胞微生物B、支原体有一个环状双链 DNAC、以二分裂方式进行繁殖D、其分裂与 DNA 复制同步E、解脲脲原体、人型支原体和生殖器支原体均可引起泌尿生殖道感染正确答案：D68.下列几种 DNA 分子的碱基组成比例，哪一种的Tm 值最高 ( )A、A+T=15%B、G+C=25%C、G+C=40%D、A+T=80%E、G+C=60%正确答案：A69.PCR 反应必需的成分是A、BSAB、DTTC、Tween20D、明胶E、Mg2+正确答案：E70.Southern 印迹杂交的描述正确的是A、不仅可以检测 DNA 样品中是否存在某一特定的基因，而且还可以获得基因片段的大小及酶切位点分布的信息B、检测靶分子是 RNAC、用于基因定位分析D、用于阳性菌落的筛选E、用于蛋白水平的检测正确答案：A71.关于非放射性探针标记，下列描述不正确的是A、对人体危害小B、可长时间使用C、酶促显色检测最常使用的酶是碱性磷酸酶和辣根过氧化物酶D、灵敏度不如放射性探针E、目前应用的非放射性标志物都是抗原正确答案：E72.作为芯片固相载体的材料描述正确的是A、主要有玻片、硅片等实性材料B、不使用硝酸纤维素膜、尼龙膜及聚丙烯膜等膜性材料C、这些载体材料不需要处理，其表面存在活性基团 (如羟基或者氨基)D、可以直接固定已经合成的寡核苷酸探针E、不需要对介质表面进行化学预处理--活化正确答案：A73.检测靶序列是 DNA 的技术是：A、Southern 杂交B、Western 杂交C、Northern 杂交D、Eastern 杂交E、杂交淋巴瘤正确答案：A74.目前的 DNA 自动化测序技术可以一次性读取的序列长度约A、50bpB、100bpC、500bpD、1000bpE、2000bp正确答案：D75.在人类基因组 DNA 序列中，DNA 甲基化主要发生在A、腺嘌呤的 N-6 位B、胞嘧啶的 N-4 位C、鸟嘌呤的 N-7 位D、胞嘧啶的 C-5 位E、鸟嘌呤的 C-5 位正确答案：D76.有关微卫星的描述正确的是A、散在重复序列的一种B、10~100bp 组成的重复单位C、主要存在于着丝粒区域，通常不被转录D、形式为 (CA) n/ (TG) n、 (AG) n、 (CAG) n 等E、又称为可变数目串联重复序列 (VNTR)正确答案：D77.关于逆转录 PCR 的描述，不正确的是A、首先应将 RNA 转化为 cDNA 才能进行 PCRB、除了使用DNA 聚合酶外，还应使用逆转录酶C、模板为 RNAD、oligo-d (T) 理论上可以将所有的 mRNA 进行逆转录反应E、逆转录酶不需要引物进行逆转录反应正确答案：E78.以下不是原癌基因的特点的是A、广泛存在于生物界，是细胞生长必不可少的B、在进化过程中，基因序列呈高度保守性C、通过表达产物 DNA 来实现功能D、在某些因素的作用下会形成能够致瘤的癌基因E、对正常细胞不仅无害，而且是细胞发育、组织再生、创伤愈合等所必需正确答案：C79.PCR-ASO 描述错误的是A、需要寡核苷酸探针B、检测点突变的技术C、PCR 产物必须电泳分离D、需正常和异常两种探针E、需严格控制杂交条件正确答案：C80.下列不是片段性突变引起原因的是A、基因重排B、碱基插入C、碱基缺失D、碱基扩增E、转录异常正确答案：E81.在核酸检测体系中加入内质控，其作用不是监控的是A、试剂失效或 Taq 酶活性降低所致的假阴性B、标本中抑制物或干扰物所致的假阴性C、样本吸取错误所致的假阴性D、仪器故障如扩增仪孔间温度差异所致的假阴性E、核酸提取效率太低所致的假阴性正确答案：C82.第一代 DNA 测序技术的核心技术是A、Sanger 的双脱氧链终止法B、Maxam 和 Gilbert 的化学降解法C、荧光标记技术D、PCR 技术E、DNA 自动分析技术正确答案：A83.目前测序读长最大的测序反应：A、边合成边测序B、化学裂解法C、双脱氧终止法D、连接测序E、焦磷酸测序正确答案：C84.以下对镰刀状红细胞贫血症叙述正确的是 ( )A、血红蛋白的β链第 6 位由谷氨酸残基变成缬氨酸残基B、血红蛋白的β链第 6 位由谷氨酸残基变成苯丙氨酸残基C、血红蛋白的β链第 6 位由谷氨酸残基变成丝氨酸残基D、血红蛋白的β链第 6 位由谷氨酸残基变成异亮氨酸残基E、血红蛋白的β链第 6 位由谷氨酸残基变成甘氨酸残基正确答案：A85.转录依赖扩增系统与其他 PCR 技术的区别是A、模板是 RNAB、模板是 DNAC、引物是 RNAD、模板和产物都是 RNAE、需要热循环正确答案：D86.HBV DNA 中最大的一个开放阅读框是A、P 基因区B、S 基因区C、X 基因区D、前 S1 基因区E、C 基因区正确答案：A87.HCV 的核酸是A、+ssRNAB、dsRNAC、dsDNAE、-ssRNA正确答案：A88.第二代测序技术一般不用到A、双脱氧链终止法B、文库接头C、高通量的并行 PCRD、高通量的并行测序反应E、高性能计算机对测序数据进行拼接和分析正确答案：A89.硝酸纤维素和PVDF 膜结合蛋白主要靠( )A、疏水作用B、氢键作用C、离子键作用D、盐键作用E、酯键作用正确答案：A90.关于梅毒螺旋体的实验室检测，下列描述正确的是A、分子生物学方法是耐药基因分析和流行学研究的首选方法B、镜检法简便，特异性高，但不能用于皮肤黏膜损害的早期诊断C、诊断梅毒的传统方法是体外培养D、血清学检查普遍用于梅毒的筛查、疗效观察和流行病学检查，对早期梅毒诊断敏感E、分子生物学方法不能早期诊断梅毒感染正确答案：A91.纯 DNA 的 A260/A280 比值为 1.8，可使比值降低的是 ( ) ：B、牛血清白蛋白C、RNAD、氯仿E、Mg2+正确答案：A92.能发出γ-射线的放射性核素是A、3HB、14CC、32PD、35SE、125I正确答案：E93.定点诱发突变可以通过以下哪个过程获得：A、PCRB、LCRC、RT-PCRD、SSCPE、ASO正确答案：A94.在人类基因组中，编码序列占的比例为A、3%B、21%C、5%D、23%E、1.5%正确答案：E95.当标本核酸量非常低难以扩增时，可采用的 PCR 技术是A、逆转录 PCRB、转录介导扩增C、原位 PCRD、巢式 PCRE、荧光 PCR正确答案：D96.聚合酶链式反应是一种A、体外特异转录 RNA 的过程B、体外翻译蛋白质的过程C、体外特异转录 DNA 的过程D、体外特异复制 DNA 的过程E、体内特异复制 DNA 的过程正确答案：C97.下列方法中能同时检测几种疟原虫混合感染的是A、竞争 PCRB、巢式 PCRC、多重 PCRD、普通 PCRE、PCR-RFLP正确答案：C98.唯一一个在结肠上皮增殖过程中起看门作用的基因是A、MCC 基因B、DCC 基因C、APC 基因D、p53 基因E、HNPCC 基因正确答案：C99.线粒体基因组与核基因组之间，下面描述不正确的是A、线粒体基因组与核基因组分别在不同的位置进行自主复制和转录，之间互不影响B、mtDNA 突变可引起编码蛋白功能障碍，影响细胞呼吸、氧化功能，进而影响核 DNA 的表达C、mtDNA 自主性复制，但复制所需的酶、调控因子等由核基因编码D、二者虽在地理位置上独立，但二者之间关系十分密切E、线粒体基因组与核基因组之间存在“交叉对话” ，相互影响，相互协调正确答案：A100.下列属于抑癌基因的是 ( )A、rasB、mycC、c-erb-2D、sisE、Rb正确答案：E。
分子生物期末试题答案
分子生物期末试题答案一、选择题1. 在分子生物学中，DNA复制的主要功能是什么？A. 细胞分裂B. 基因表达C. 蛋白质合成D. 遗传信息传递答案：D2. 下列哪种酶在DNA复制过程中负责解旋双链？A. DNA聚合酶B. 解旋酶C. 连接酶D. 核酸酶答案：B3. 在转录过程中，哪种分子作为mRNA的前体？A. rRNAB. tRNAC. snRNAD. hnRNA答案：D4. 真核生物的基因组中，内含子和外显子在mRNA中的比例通常是怎样的？A. 内含子多于外显子B. 外显子多于内含子C. 内含子和外显子数量相等D. 无法确定答案：A5. 蛋白质合成的第一步是什么？A. 肽链的折叠B. 核糖体的组装C. 起始密码子的识别D. 氨基酸的激活答案：D二、填空题1. DNA的双螺旋结构是由________和________两条链组成的。
答案：脱氧核糖磷酸2. 在分子生物学中，________是指DNA分子上的一段特定序列，它能够控制一个或多个基因的表达。
答案：启动子3. 真核生物mRNA的5'端具有一个特殊的结构称为________。
答案：帽结构4. 蛋白质合成过程中，tRNA的主要功能是识别mRNA上的________并运送相应的________。
答案：密码子氨基酸5. CRISPR-Cas9是一种革命性的基因编辑技术，其中Cas9是一种________酶。
答案：核酸内切三、简答题1. 简述PCR技术的原理及其在分子生物学中的应用。
答：聚合酶链式反应（PCR）是一种在体外快速扩增特定DNA片段的技术。
它利用DNA聚合酶反复进行热循环，包括变性、退火和延伸三个步骤，从而大量复制目标DNA。
PCR技术在基因克隆、遗传疾病诊断、法医学以及古生物学研究等领域有广泛应用。
2. 描述RNA干扰（RNAi）现象及其在生物学研究和治疗中的潜在应用。
答：RNA干扰（RNAi）是一种在生物体内发生的基因沉默机制，通过特异性的小干扰RNA（siRNA）或微小RNA（miRNA）与目标mRNA结合，导致该mRNA降解或翻译抑制。
分子生物学技术原理
分子生物学技术原理分子生物学技术是一种应用于生物学研究和实践的方法和工具，可以帮助科学家在分子水平上探究细胞和生物体的结构、功能和相互作用。
以下是一些常见的分子生物学技术和它们的原理：1. 聚合酶链式反应（PCR）: PCR是一种重要的分子生物学技术，用于扩增特定DNA片段。
其原理基于DNA的双链结构和酶的功能。
PCR反应中，DNA样品被加热至变性温度，使其双链解旋成两条单链DNA。
然后，引物与目标序列的两端结合，酶通过DNA合成，合成新的DNA链。
反复循环这个过程可以扩增目标DNA片段。
2. 蛋白质电泳：蛋白质电泳是一种用于分离和分析蛋白质的技术。
其原理基于蛋白质的电荷和大小差异。
蛋白质样品在凝胶中电泳，根据电荷的不同，蛋白质会向正极或负极移动。
最终，蛋白质在凝胶上形成带状图案，可以用于蛋白质的鉴定和定量。
3. DNA测序：DNA测序是确定DNA序列的技术。
其原理基于DNA的核酸碱基配对原则和荧光标记。
DNA测序反应中，DNA模板被复制，并与荧光标记的核酸碱基一起加入到反应中。
DNA合成酶以荧光信号的形式将碱基添加到新合成的DNA链上，形成一个能够表示DNA序列的信号序列。
通过测量荧光信号的强度和颜色，可以确定DNA的碱基序列。
4. 基因克隆：基因克隆是将DNA片段从一个生物体中复制并插入到另一个生物体中的过程。
其原理基于DNA的切割、黏合和重组。
基因克隆通常包括将目标DNA和载体DNA用限制性内切酶切割，然后用DNA连接酶黏合两端，形成重组DNA。
将重组DNA转化到宿主细胞中进行复制和表达，最终获得目标DNA在新生物体中的表达。
以上只是一些常见的分子生物学技术及其原理，分子生物学领域还有许多其他的技术，如原位杂交、PCR定量、南方和北方杂交等。
这些技术的应用广泛，可以帮助科学家揭示生物学的奥秘。
(完整版)[医学]分子生物学习题集
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(完整版)[医学]分子生物学习题集分子生物学学习题集分子生物学是研究生物分子结构、功能和互作关系的学科领域。
它涉及到DNA、RNA、蛋白质等生物大分子的结构与功能，以及其在细胞机制和生物过程中的作用。
下面是一些关于分子生物学的学习题集，希望能对你的学习有所帮助。
1. DNA是什么？它有什么样的结构？2. RNA有哪些类型？它们在生物中起到什么作用？3. 什么是转录？转录的过程是如何进行的？4. 在DNA复制的过程中，酶有哪些作用？请解释它们在复制中的具体功能。
5. 编写一个简短的DNA序列，并标识出其中的碱基对。
6. 什么是启动子序列？它在基因调控中起什么作用？7. 蛋白质是由什么组成的？它们在细胞中扮演什么样的角色？8. 如何在实验室中检测蛋白质的表达？9. 请解释DNA突变是如何发生的，以及它可能对细胞和生物产生的影响。
10. 什么是PCR技术？它在科学研究和医学诊断中有何应用？11. 请简要解释RNA干扰技术及其在基因沉默中的作用。
12. 请简要描述克隆技术的原理和应用。
13. DNA测序是如何进行的？请解释测序的主要原理。
14. 什么是基因组学？它在生物学研究中有何重要性？15. 在基因表达调控中，转录因子起到什么作用？请举例说明。
16. 如何用分子生物学技术鉴定和研究疾病的遗传基础？17. 解释细胞凋亡及其在生物发育和疾病中的作用。
18. 请解释基因突变在遗传病中的作用，并举例说明。
19. 什么是免疫反应？请解释它在免疫系统中的作用。
20. 病毒是如何感染细胞的？请解释感染的机制。
以上是一些关于分子生物学的学习题集。
希望通过回答这些问题，你能更好地理解分子生物学的基本概念和原理，为今后的学习和研究打下坚实基础。
祝你学习顺利！。
生物化学与分子生物学：常用分子生物学技术的原理及其应用
含了某一生物体全部DNA序DNA的 信息（包括所有的编码区和非编码区）以DNA 片段形式贮存的克隆群体。
基因芯片(gene chip) 是指将许多特定的DNA片段有规律地紧密排
列固定于单位面积的支持物上，然后与待测的荧 光标记样品进行杂交，杂交后用荧光检测系统等 对芯片进行扫描，通过计算机系统对每一位点的 荧光信号做出检测、比较和分析，从而迅速得出 定性和定量的结果。该技术亦被称作DNA微阵列 (DNA microarray)。
常用分子生物学技术的 原理及应用
The Principle and Application of Common Used Techniques in Molecular Biology
目录
分子杂交与印迹技术
Molecular Hybridization and Blotting Technique
析
分层聚类(Hierarchical clustering)
聚
K-均值聚类(k-means clustering )
类
分
析 (聚类软件cluster、Spss、TreeView)
自组织图 (Self-organizing map,SOM)
基因数据库、基因表达与功能关系
主成分分析 （Principal components analysis,PCA)
• 正常的（N）的ASO探针： 5´-ACT CCT GAG GAG AAG TCT GC-3´
• 突变的（M）的ASO探针： 5´-ACT CCT GTG GAG GAAG TCT GC-3´
目录
目录
镰状红细胞贫血患者ASO杂交法检测
N-ASO
M-ASO
正常 突变 突变 纯合子 杂合子 纯合子
生化常用分子生物学技术的原理及应用
与DNA和RNA印迹相似之处
首先将混合蛋白质用PAGE按分子大小 分开，再将蛋白质转移到NC膜上，蛋白质 的位置可保持在胶中的原位上。
与DNA和RNA印迹不同之处
蛋白质的转移只有靠电转移
蛋白质的检测以抗体作探针
用碱性磷酸酶（ALP）、辣根过氧化酶（ HRP）标记第二抗体，底物显色来检测蛋 白区带的信号，底物亦可与化学发光剂结 合以提高敏感度。
探针（probe）
是指经过特殊标记的已知序列核苷酸片 段，可以用来检测某一特定核苷酸序列或基 因序列的DNA或RNA片段。
探针的种类
寡核苷酸 基因组DNA cDNA片段
RNA片段
标记物
放射性同位素 生物素 荧光染料
Southern印迹杂交的基本步骤
待测DNA样品的限制性内切酶消化 酶切DNA样品的电泳分离 凝胶中DNA的变性和Southern转移 探针的制备 Southern杂交 杂交结果的检测
二、蛋白质芯片 (protein chip)
又称蛋白质阵列 (protein array)
将高度密集排列的蛋白分子作为探 针点阵固定在固相支持物上，当与待测 蛋白样品反应时，可捕获样品中的靶蛋 白，再经检测系统对靶蛋白进行定性和 定量分析的一种技术。
基本原理：
蛋白质与蛋白质分子之间在空间构象上能特 异性的相互识别和相互结合。如抗体与抗原或 受体与配体之间的特异性结合。
内切酶
1 2M
基因组DNA
重物
纸巾
10×SSC 转 移缓冲液
500g
支持物
DNA酶切片段
玻璃板 Whatman滤纸 NC膜或尼龙膜 凝胶 Whatman滤纸
12
NC或尼龙膜
与探针同源杂交的 基因DNA片段
吉林省-《生物化学》电子教案——分子生物学常用技术(人卫版)
第十二章分子生物学常用技术及应用【授课时间】3学时【目的要求】1．掌握基因工程与重组DNA技术相关概念，核酸分子杂交、探针、PCR、DNA芯片技术、基因诊断和基因治疗的概念。
2．熟悉重组DNA技术、PCR的基本原理及基本反应步骤。
3．了解基因工程在医学中的应用，PCR 的主要用途。
4．了解DNA芯片技术的原理与方法，基因诊断与基因治疗的应用。
【教学内容】1．一般介绍：基因工程2．一般介绍：核酸分子杂交技术3．一般介绍：聚合酶链反应4．一般介绍：DNA芯片技术5．一般介绍：基因诊断与基因治疗【授课学时】3学时第十二章分子生物学常用技术及应用第一节基因工程第二节核酸分子杂交技术第三节聚合酶链反应第四节 DNA芯片技术第五节基因诊断与基因治疗第一节基因工程35ˊpBR322质粒，长度为4.3kb，含有氨苄青霉素（ampr）、卡那霉素（kanr）和四环素（tetr）的抗性基因。
具有以下特点：①pBR322的氨苄青霉素抗性基因和复制起始位点(ori)；②大肠杆菌乳糖操纵子的调节基因（lacI）、启动子（Plac）、操纵基因（O）及lac Z′基因片段，在lac Z′基因中加入了多克隆位点。
Lac Z′基因编码β-半乳糖苷酶N端的α-肽，宿主细胞编码β-半乳糖苷酶C端的肽段，两者可形成互补，而各自都没有酶的活性，只有两者融为一体才具有酶的活性，故称为α互补。
(二)噬菌体噬菌体(bacteriophage，phage)是感染细菌的一类病毒，因其寄生在细菌中并能溶解细菌细胞，所以称为噬菌体。
用于感染大肠杆菌的λ噬菌体改造成的载体应用最为广泛。
(三)粘粒粘粒（cosmid）是将λ噬菌体的cos区与质粒组合的装配型载体。
质粒提供了复制的起始点、酶切位点、抗生素抗性基因，而cos区提供了粘粒重组外源DNA大片段后的包装基础。
表达载体(expressing vector)是用来在受体细胞中表达(转录和翻译)外源基因的载体。
生化习题集第十一章分子生物学常用技术及其应用
第十一章分子生物学常用技术及其应用一、名词解释1．DNA重组 2．基因工程3．限制性核酸内切酶 4．基因组DNA文库5．cDNA文库 6．聚合酶链反应（PCR）7．载体 8．转化9．感染 10．核酸分子杂交11．Southern印迹杂交 12．Northern印迹杂交13．斑点印迹 14．原位杂交15．DNA芯片 16．基因诊断17．基因治疗二、选择题A型题：1.限制性核酸内切酶作用特点不包括：A．在对称序列处切开DNA B．DNA两链的切点常不在同一位点C．酶切后产生的DNA片段多半具有粘性互补末端 D．DNA两链的切点常在同一位点E．酶辨认的碱基一般为4～6个2．限制性核酸内切酶：A．可将单链DNA任意切断 B．可将双链DNA序列特异切开C．可将两个DNA分子连接起来 D．不受DNA甲基化影响E．由噬菌体提取而得3．cDNA文库包括该种生物的：A．某些蛋白质的结构基因 B．所有基因组C．结构基因与不表达的调控区 D．内含子和调节区E．内含子和外显子4．下列关于建立cDNA文库的叙述哪项是错误的：A．从特定组织或细胞中提取mRNAB．将特定细胞的DNA用限制性核酸内切酶切割后，克隆到噬菌体或质粒中C．用逆转录酶合成mRNA的对应单股DNAD．用DNA聚合酶，以单股DNA为模板合成双链DNAE．加S-腺苷甲硫氨酸（SAM），以使新生的DNA双链甲基化5．限制性核酸内切酶的通常识别序列是：A．粘性末端 B．RNA聚合酶附着点C．回文对称序列 D．聚腺苷酸E．甲基化“帽”结构6．pUC系列是指：A．经人工改造的大肠杆菌质粒 B．天然的大肠杆菌质粒C．天然的酵母质粒 D．经人工改造的大肠杆菌噬菌体E．经人工改造的酵母质粒7．用于转染哺乳类细胞的常用载体是：A．质粒 B．噬菌体C．逆转录病毒RNA D．结构基因E．乳糖操纵子8．转化常指：A．噬菌体感染 B．基因的转位C．摄取外来DNA，引起细胞生物学类型的改变 D．产生点突变E．产生移码突变9．基因工程的操作程序可简单地概括为：A．载体和目的基因的分离、提纯与鉴定 B．分、切、接、转、筛C．将重组体导入宿主细胞，筛选出含目的基因的菌株 D．将载体和目的基因接合成重组体E．限制性核酸内切酶的应用10．用于基因治疗较为理想的载体是：A．质粒 B．噬菌体C．经改造的逆转录病毒 D．人类DNAE．酵母质粒11．常用质粒有以下特性：A．是线形双链DNA B．插入片段的容量比λ噬菌体DNA大C．含有抗生素抗性基因 D．含有同一限制性核酸内切酶的多个切口E．不随细菌繁殖而进行自我复制12．在重组体中切出插入片段最常用的方法是：A．以重组时所用限制性核酸内切酶将其切出 B．用其它限制性酶将其切出C．用S1核酸酶将其切出 D．用DNA酶将切出E．用多种限制性内切酶将其切出13．利用PCR扩增特异DNA序列主要原理之一是：A．反应体系内存在特异DNA片段 B．反应体系内存在特异RNA片段C．反应体系内存在特异DNA引物 D．反应体系内存在特异RNA引物E．反应体系内存在的TaqDNA聚合酶具有识别特异DNA序列的作用14．表达人类蛋白质的最理想的细胞体系是：A．大肠杆菌表达体系 B．原核表达体系C．酵母表达体系 D．昆虫表达体系E．哺乳类细胞表达体系15．限制性核酸内切酶切割DNA后产生：A．3′-磷酸基末端和5′-羟基末端 B．5′-磷酸基末端和3′-羟基末端C．3′-磷酸基末端和5′-磷酸基末端 D．5′-羟基末端和3′-羟基末端E．3′-羟基末端和5′-羟基末端及磷酸16．下列描述最能确切表达质粒DNA作为克隆载体特性的是：A．小型环状双链DNA分子 B．携带有某些抗生素抗性基因C．在细胞分裂时恒定地传给子代细胞 D．具有自我复制功能E．获得目的基因17．在分子生物学领域分子克隆主要是指：A．DNA的大量复制 B．DNA的大量转录C．DNA的大量剪切 D．RNA的大量剪切E．RNA的大量反转录18．在分子生物学领域重组DNA技术又称：A．酶工程 B．蛋白质工程C．细胞工程 D．发酵工程E．分子克隆技术19．在重组DNA技术中不涉及的酶是：A．限制性核酸内切酶 B．DNA聚合酶C．DNA连接酶 D．反转录酶E．DNA解链酶20．多数限制性核酸内切酶切割后的DNA末端为：A．平端末端 B．3′突出末端C．5′突出末端 D．粘性末端E．缺口末端21．可识别DNA的特异序列，并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类酶为：A．限制性核酸外切酶 B．限制性核酸内切酶C．非限制性核酸外切酶 D．非限制性核酸内切酶E．DNA内切酶22．cDNA是指：A．在体外经反转录合成的与RNA互补的DNA B．在体外经反转录合成的与DNA 互补的DNAC．在体外经转录合成的与DNA互补的RNA D．在体外经反转录合成的与RNA 互补的RNAE．在体外经反转录合成的与DNA互补的RNA23．基因组代表一个细胞或生物体的：A．部分遗传信息 B．整套遗传信息C．可转录基因 D．非转录基因E．可表达基因24．在基因工程中通常所用的质粒存在于：A．细菌染色体 B．酵母染色体C．细菌染色体外 D．酵母染色体外E．病毒DNA外25．就分子结构而论质粒是：A．环状双链DNA分子 B．环状单链DNA分子C．环状双链RNA分子 D．线状双链DNA分子E．线状单链DNA分子26．聚合酶链式反应可表示为：A．PEC B．PERC．PDR D．BCRE．PCR27．在已知序列信息的情况下，获取目的基因的最方便方法是：A．化学合成法 B．基因组文库法C．cDNA文库法 D．PCRE．差异显示法28．重组DNA的基本构建过程是将：A．任意两段DNA接在一起 B．外源DNA接入人体DNA C．外源基因插入宿主基因 D．目的基因接入适当载体E．目的基因接入哺乳类DNA29．EcoRⅠ切割DNA双链产生：A．平端 B．5′突出粘端C．3′突出粘端 D．钝性末端E．配伍末端30．催化PCR的酶是：A．DNA连接酶 B．反转录酶C．末端转移酶 D．碱性磷酸酶E．TaqDNA聚合酶31．将PstⅠ内切酶切割后的目的基因与用相同内切酶切割后的载体DNA连接属：A．同聚物加尾连接 B．人工接头连接C．平端连接 D．粘性末端连接E．非粘性末端连接32．重组DNA技术中实现目的基因与载体DNA拼接的酶是：A．DNA聚合酶 B．RNA聚合酶C．DNA连接酶 D．RNA连接酶E．限制性核酸内切酶33．以质粒为载体，将外源基因导入受体菌的过程称：A．转化 B．转染C．感染 D．转导E．转位34．最常用的筛选转化细菌是否含重组质粒的方法是：A．营养互补筛选 B．抗药性筛选C．免疫化学筛选 D．PCR筛选E．分子杂交筛选35．α互补筛选法属于：A．抗药性标志筛选 B．酶联免疫筛选C．标志补救筛选 D．原位杂交筛选E．免疫化学筛选36．下列常用于原核表达体系的是：A．酵母细胞 B．昆虫细胞C．哺乳类细胞 D．真菌E．大肠杆菌37．在对目的基因和载体DNA进行同聚物加尾时，需采用：A．反转录酶 B．多聚核苷酸激酶C．引物酶 D．RNA聚合酶E．末端转移酶38．在分子生物学领域分子克隆专指：A．细胞克隆 B．RNA克隆C．DNA克隆 D．抗体克隆E．mRNA克隆39．用于重组DNA 的限制性核酸内切酶，识别核苷酸序列的：A．正超螺旋结构 B．负超螺旋结构C．α螺旋结构 D．回文结构E．锌指结构40．在基因工程中通常所用的质粒是：A．细菌染色体DNA B．细菌染色体以外的DNA C．病毒染色体DNA D．病毒染色体以外DNAE．噬菌体DNA41．构建基因组DNA文库时，首先需要分离细胞的：A．染色体DNA B．线粒体DNAC．总mRNA D．tRNAE．rRNA42．DNA连接酶是从T4 噬菌体感染大肠杆菌中分离的，这种连接酶：A．只能催化平末端连接，而不能催化粘性末端连接B．即能催化单链DNA连接又能催化粘性末端双链DNA连接C．双链DNA中不需一条完整的单链D．单链中的切口位点可缺少几个核苷酸E．切口存在相邻的5′-磷酸和3′-羟基末端，使其以磷酸二酯键连接43．末端转移酶是合成酶类：A．作用时不需模板 B．是从小牛胸腺中分离C．能催化单链核苷酸转移到5′-磷酸上 D．需要带有5′-端磷酸的末端的ssDNA E．需要有延伸5′-端磷酸的末端dsDNA44．在基因工程中可用碱性磷酸酶：A．防止DNA的自身环化 B．同多核苷酸激酶一起进行DNA3′-羟基末端标记C．制备突出的3′-末端 D．特异切除DNA或RNA的3′-末端羟基E．水解特异的核苷酸片段45．以下哪种酶作用时需要引物：A．限制性核酸内切酶 B．末端转移酶C．反转录酶 D．DNA连接酶E．碱性磷酸酶46．S1核酸酶的功能是：A．切割双链的DNA B．切割单链的RNA C．切割发夹环 D．切割单链DNA E．以上有两项是正确的47．在cDNA技术中所形成的发夹环可用：A．限制性核酸内切酶切除 B．用3′外切酶切除C．用S1核酸酶切除 D．用5′外切酶切除E．碱性磷酸酶切除48．下面有关限制性内切酶的叙述正确的是：A．限制酶是外切酶而不是内切酶B．限制酶在特异序列（识别位点）对DNA进行切割C．同一种限制酶切割DNA时留下的末端序列总是相同的D．一些限制酶在识别位点稍有不同的点切割双链DNA，产生粘性末端E．一些限制酶在识别位点相同的位置切割双链DNA，产生平末端49．限制性核酸内切酶可以特异识别：A．双链DNA的特定碱基对 B．双链DNA的特定碱基序列C．特定的三联码 D．双链RNA的特定碱基序列E．双链RNA的特定碱基对50．DNA聚合酶的主要用途：A．利用它的3′→5′聚合活性，合成ds-DNA第二条链B．对DNA的5′-端进行填补或末端标记C．大肠杆菌DNA聚合酶Ⅲ用于缺口平移，制作DNA标志探针D．DNA聚合酶Ⅱ可用于DNA测序E．TaqDNA聚合酶用于PCR51．反转录酶：A．是依赖于DNA的RNA聚合酶 B．用于真核DNA反转录生成mRNA C．用于RNA探针的制备 D．用于RNA序列测定E．是依赖于RNA的DNA聚合酶52．基因工程中作为载体应具备以下特点：A．能在宿主细胞中复制繁殖 B．容易进入宿主细胞C．具有多克隆位点 D．容易从宿主细胞中分离出来E．以上均是53．下列哪种克隆载体对外源DNA的容载量最大：A．质粒 B．粘粒C．酵母人工染色体 D．λ噬菌体E．cDNA表达载体54．pUC是一种改造型质粒，含有：A．乳糖操纵子调节基因、启动子 B．多克隆位点C．lacZ′基因 D．氨苄青霉素抗性基因E．以上均有55．质粒具有以下特点：A．是位于细菌染色体外的RNA B．不能自主复制C．为单链环形DNA D．大小在2～300kb之间E．以上都不对56．粘粒是一种人工建造的载体不具有以下特点：A．可借cos位点将多个粘粒串联成大环 B．本身约4～6kb之间C．进入受体细胞后可进行复制 D．可克隆DNA大片段E．以上都不是57．下面关于多克隆位点的描述不正确的是：A．仅位于质粒载体中 B．具有多种限制性内切酶识别的位点C．不同酶的识别序列可以重叠 D．一般是人工合成后添加到载体中E．可位于不同载体中58．下列筛选重组体的方法中不属于遗传学方法的是：A．限制性内切酶图谱法 B．PCRC．Northern印迹法 D．Southern印迹法E．抗药性标记基因59．利用基因工程可以进行：A．建立染色体基因文库 B．分析基因的结构与功能C．疾病的发生、发展及治疗的分子机制 D．疾病的诊断和基因治疗E．以上均可以60．Southern印迹的DNA探针杂交：A．只与序列完全相同的RNA片段 B．可与任何含有相同序列的DNA片段C．可与任何含有互补序列的DNA片段 D．可与用某些限制性核酸内切酶切成的DNA片段E．只与含有互补序列的RNA片段61．下列哪个不是Southern印迹法的步骤：A．用限制性核酸内切酶消化DNA B．DNA与载体连接C．用凝胶电泳分离DNA片段 D．DNA片段转移至硝酸纤维素膜上E．用一个标记的探针与膜杂交62．下列哪个不是Northern印迹法的步骤：A．从细胞和组织中提取RNA B．用凝胶电泳分离RNAC．将RNA转移到支持物上 D．与核酸探针进行杂交E．将RNA反转录合成DNA63．原位杂交具有以下特点：A．不需从组织或细胞中提取核酸 B．对靶序列有很高的灵敏度C．可完整保护组织与细胞的形态 D．准确反映出组织细胞的相互关系及功能状态E．以上均是64．下列哪项不是探针的特点：A．要加以标记 B．应是双链DNAC．只与靶核酸序列杂交 D．探针长度可以是十几个碱基到几千个碱基不等E．高灵敏度65．探针的种类包括：A．基因组DNA探针 B．cDNA探针C．寡核苷酸探针 D．RNA探针E．以上均是66．下面哪一步不是获得基因组DNA探针的步骤：A．从基因组文库筛选得到特定基因 B．克隆、扩增C．纯化 D．连入表达载体E．切取插入片段67．RNA探针具有以下特点，但除外：A.采用反转录方法可以得到 B．单链、杂交效率高C．杂交体系稳定 D．不存在高度重复序列E．特异性高68．下面哪一步不是cDNA探针的步骤：A．从相应组织细胞直接中分离特异的cDNA B．从相应组织细胞中分离特异的mRNA C．反转录合成cDNA D．与载体连接E．切割cDNA，分离纯化69．常用的标记物有，但除外：A．放射性核素 B．生物素C．荧光素 D．地高辛E．NTP70．用于标记核酸探针的放射性核素主要有，但除外：A．32P B．35SC．3H D．125IE．14C71．放射性核素标记物具有，但除外：A．检测时间短 B．灵敏度和特异性高C．可检出样品少于1000个分子的核酸量 D．半衰期短，稳定性差E．污染环境72．非放射性核素标记物包括，但除外：A．生物素 B．地高辛C．荧光素 D．酶E．核酸73．非放射性核素标记物具有，但除外：A．灵敏度高于放射性核素 B．稳定C．经济 D．实验周期短E．安全、无污染74．PCR反应体系包括，但除外：A．基因组DNA（模板） B．引物C．dNTP D．TaqDNA聚合酶E．T4DNA连接酶75．PCR技术主要应用于：A．目的基因的克隆 B．基因表达与调控C．DNA微量分析 D．遗传病与传染性疾病的诊断E．以上均可以76．以DNA为模板的PCR反应，具备以下条件：A．反应体系一般选用50-100μl B．引物、TaqDNA聚合酶C．4种dNTP、模板DNA D．缓冲液E．以上均是77．以mRNA为模板的PCR反应，具备以下条件：A．需将mRNA反转录生成cDNA B．反应体系一般选用20μl体积、4种dNTP、引物C．需要RNA酶抑制剂、反转录酶 D．TaqDNA聚合酶E．以上均是78．关于PCR停滞的原因，取决于很多因素，但除外：A．样品模板的拷贝数 B．PCR扩增效率C．DNA酶种类及活性 D．dNTP的大量消耗E．非特异性的竞争因素79．用于核酸分子杂交的探针可以是放射性核素标记的：A．核糖体 B．RNAC．抗体 D．抗原E．以上都不是80．Southern印迹是用DNA探针检测DNA片段，而Northern印迹则是：A．用RNA探针检测DNA片段 B．用RNA探针检测RNA片段C．用DNA探针检测RNA片段 D．用RNA探针检测蛋白片段E．用DNA探针检测蛋白片段81．用免疫化学筛选重组体的原理是：A．根据外源基因的表达 B．根据载体基因的表达C．根据mRNA与DNA的杂交 D．根据DNA与DNA的杂交E．根据RNA与RNA的杂交82．原位杂交包括：A．转膜杂交 B．斑点杂交C．菌落杂交或噬菌斑杂交 D．直接对染色体或组织的杂交83．外源性DNA进入菌体的方式是：A．转化 B．转录C．翻译 D．半保留复制E．以上都不是84．要将无粘性末端的两种平端DNA片段结合在一起，可在：A．两种片段上都接上聚（dT）尾部 B．一种片段接聚（dT）尾部，另一种接聚（dA）尾部C．两种片段都接上聚（dA）尾部 D．反应液中加以T4DNA连接酶E．有两项是对的85．用原核生物表达真核生物的基因存在的问题是：A．大肠细菌只能表达克隆的cDNA B．细菌不能切除原始转录物中相当于内含子的核苷酸序列C．缺乏翻译后加工机制 D．表达的蛋白质常形成不溶性包涵体E．以上都正确86．常用载体有：A．质粒 B．噬菌体C．病毒DNA D．大肠杆菌基因组DNAE．有3项是正确的87．构建cDNA文库时，首先需分离细胞的：A．染色体DNA B．线粒体DNAC．总mRNA D．tRNAE．rRNA88．构建DNA文库时，首先需分离细胞的：A．染色体DNA B．线粒体DNAC．总mRNA D．tRNA89．设计PCR的引物时，应考虑引物与模板的：A．5ˊ端特定序列互补 B．5ˊ端任意序列互补C．3ˊ端特定序列互补 D．3ˊ端任意序列互补E．中间序列互补90．用于鉴定转化子细胞是否含重组DNA的最常用方法是：A．抗药性选择 B．分子杂交选择C．RNA反转录 D．免疫学方法E．体外翻译91．下列哪一步是DNA芯片技术的最关键的环节：A．样品的准备与标记 B．芯片的制备C．信号的检测 D．数据分析处理E．杂交92．基因诊断常用的技术方法有：A．核酸分子杂交 B．单链构象多态性分析C．DNA序列测定 D．DNA芯片技术E．以上均是B型题：A．基因从原来位置转到基因组的另一位置 B．噬菌体或病毒DNA进入细胞中繁殖C．外来DNA引起细胞生物学特性的改变 D．移码突变 E．非移码突变1．感染是指：2．转化是指：3．转位是指：4．结构基因中3个核苷酸的插入或丢失是指：5．结构基因中1个核苷酸的插入或丢失是指：A．抗药性选择 B．分子杂交选择 C．RNA转录 D．免疫学方法 E．体外翻译6．用于鉴定是否有质粒转入受体菌的一般方法是：7．用于鉴定转化子细胞是否含目的基因的常用方法：8．利用目的基因表达产物的特异抗体来筛选含目的基因的转化子细胞的方法是：A．限制性核酸内切酶 B．DNA连接酶 C．反转录酶 D．TaqDNA聚合酶 E．碱性磷酸酶9．识别DNA回文结构并对其双链进行切割的是：10．用于聚合酶链式反应的是：11．将目的基因与载体DNA进行连接的酶是：12．特异切除DNA或RNA5ˊ端磷酸的酶是：13．mRNA转录合成cDNA的酶是：A．支原体 B．衣原体 C．噬菌体 D．细菌 E．酵母14．常用作原核表达体系的是：15．常用作真核表达体系的是：A．基因组文库 B．cDNA文库 C．mRNA文库 D．tRNA文库 E．rRNA 文库16．分离细胞染色体可制备：17．分离细胞总mRNA可制备：A．抗药性选择 B．RNA反转录 C．免疫化学方法 D．体外翻译E．PCR18．对重组体内基因进行直接选择的方法是：19．通过鉴定基因表达产物筛选重组体的方法是：A．RNA聚合酶 B．末端转移酶 C．碱性磷酸酶 D．反转录酶 E．核苷酸酶20．切除DNA末端磷酸基需要用：21．在DNA3′羟基末端进行同聚物加尾需要用：22．合成cDNA需要用：A．同聚物加尾连接 B．人工接头 C．粘性末端连接 D．缺口末端连接 E．平端连接23．外源基因和载体DNA经限制性酶切后的连接属于：24．在外源基因和载体DNA末端添加同聚物序列后再进行连接属于：25．在外源基因和载体DNA末端添加短核苷酸序列，人为制造粘性末端再进行连接属于：26．需用适当的酶将DNA突出末端削平或补齐的连接属于：A．将单链DNA任意切断 B．将双链DNA序列特异切开 C．将两个DNA分子连接起来D．将缺口末端连接 E．切除DNA末端磷酸基团27．限制性内切酶的作用是：28．DNA连接酶作用是：29．碱性磷酸酶作用是：A．某些蛋白质的结构基因 B．所有基因结构 C．不表达的调控区D．内含子和调节区 E．外显子和调节区30．cDNA文库包括：31．DNA文库包括：32．真核mRNA包括：A．DNA聚合酶 B．RNA聚合酶 C．DNA连接酶D．RNA连接酶 E．限制性核酸内切酶33．切除特异DNA片段：34．连接两个DNA片段：35．大量扩增DNA片段：A．反转录酶 B．多聚核苷酸激酶 C．引物酶 D．RNA聚合酶 E．末端转移酶36．催化ATP的磷酸转移到DNA或RNA的5ˊ端羟基上：37．催化单核苷酸转移到DNA的3ˊ端羟基上：38．合成cDNA：C型题：A．将含有目的基因的噬菌体感染细菌 B．将含有目的基因的质粒导入细菌进行表达C．两者都是 D．两者都不是1．转化：2．感染：A．cDNA文库 B．基因组文库 C．两者都是 D．两者都不是3．含内含子：4．含结构基因：A．将含有目的基因的噬菌体感染细菌 B．将含有目的基因的质粒导入细菌进行表达C．两者都是 D．两者都不是5．转化：6．转位：A．cDNA文库 B．基因组文库 C．两者都是 D．两者都不是7．含转录调控区：8．较易表达：A．cDNA文库 B．基因组文库 C．两者都是 D．两者都不是9．制备目的基因可在真核生物体系中表达：10．几乎含有人的全部基因：A．cDNA文库 B．基因组文库 C．两者都是 D．两者都不是11．具有组织特异性：12．可在原核生物体系中表达：A．光介导原位合成 B．压电打印合成 C．两者都是 D．两者都不是13．原位合成芯片：14．DNA微集阵列：A．喷墨打印 B．针式打印 C．两者都是 D．两者都不是15．原位合成芯片：16．DNA微集阵列：A．光介导原位合成 B．喷墨打印 C．两者都是 D．两者都不是17．原位合成芯片：18．DNA微集阵列：A．压电打印合成 B．针式打印 C．两者都是 D．两者都不是19．原位合成芯片：20．DNA微集阵列：A．DNA序列测定 B．突变分析 C．两者都是 D．两者都不是21．DNA芯片技术可用于：22．PCR技术可用于：A．基因表达 B．DNA的微量分析 C．两者都是 D．两者都不是23．DNA芯片技术可用于：24．PCR技术可用于：A．药物研究 B．基因诊断 C．两者都是 D．两者都不是25．PCR技术可用于：26．核酸分子杂交：A．目的基因克隆 B．基因结构研究 C．两者都是 D．两者都不是27．DNA芯片技术可用于：28．PCR技术可用于：A．DNA与DNA的杂交 B．DNA与RNA杂交 C．两者都是 D．两者都不是29．Southern印迹杂交：30．斑点杂交：A．DNA与RNA杂交 B．DNA与DNA的杂交 C．两者都是 D．两者都不是31．原位杂交：32．Northern杂交：A．遗传性疾病的诊断 B．感染性疾病的诊断 C．两者都是 D．两者都不是33．分子杂交技术可用于：34．PCR技术可用于：A．肿瘤 B．个体鉴别 C．两者都是 D．两者都不是35．PCR技术可用于：36．DNA芯片技术可用于：三、问答题1．简述基因工程的主要过程。
21生物化学习题与解析--常用分子生物学技术的原理及其应用
常用分子生物学技术的原理及其应用一、选择题（一） A 型题1 1 ．分子杂交实验不能用于．分子杂交实验不能用于A A ．单链．单链．单链 DNA DNA DNA 与与 RNA RNA 分子之间的杂交分子之间的杂交分子之间的杂交B B B ．双链．双链．双链 DNA DNA DNA 与与 RNA RNA 分子之间的杂交分子之间的杂交C C ．单链．单链．单链 RNA RNA RNA 分子之间的杂交分子之间的杂交分子之间的杂交D D D ．单链．单链．单链 DNA DNA DNA 分子之间的杂交分子之间的杂交E E ．抗原与抗体分子之间的杂交．抗原与抗体分子之间的杂交2 2 ．关于探针叙述错误的是．关于探针叙述错误的是A A ．带有特殊标记．带有特殊标记．带有特殊标记B B B ．具有特定序列．具有特定序列．具有特定序列C C C ．必须是双链的核酸片段．必须是双链的核酸片段．必须是双链的核酸片段D D D ．可以是．可以是基因组基因组 DNA DNA DNA 片段片段片段E E E ．可以是抗体．可以是抗体3 3 ．下列哪种物质不能用作探针．下列哪种物质不能用作探针A A ．． DNA DNA 片段片段片段B B B ．． cDNAC cDNA C ．蛋白质．蛋白质．蛋白质D D D ．氨基酸．氨基酸．氨基酸E E E ．． RNA RNA 片段片段4 4 ．印迹技术可以分为．印迹技术可以分为A A ．． DNA DNA 印迹印迹印迹B B B ．． RNA RNA 印迹印迹印迹C C C ．蛋白质印迹．蛋白质印迹．蛋白质印迹D D D ．斑点印迹．斑点印迹．斑点印迹E E E ．以上都对．以上都对5 5 ．． PCR PCR 实验延伸温度一般是实验延伸温度一般是A A ．．90 ℃B ．72 ℃C ．80 ℃D ．95 ℃E ．60 ℃6 6 ．． Western blot Western blot 中的探针是中的探针是A A ．． RNAB RNA B ．单链．单链．单链 DNAC DNA C DNA C ．． cDNAD cDNA D ．抗体．抗体．抗体E E E ．双链．双链．双链 DNA DNA7 7 ．． Northern blotting Northern blotting 与与 Southern blotting Southern blotting 不同的是不同的是A A ．基本原理不同．基本原理不同．基本原理不同B B B ．无需进行限制性内切酶消化．无需进行限制性内切酶消化．无需进行限制性内切酶消化C C C ．探针必须是．探针必须是．探针必须是 RNA RNAD D ．探针必须是．探针必须是．探针必须是 DNAE DNA E DNA E ．靠毛细作用进行转移．靠毛细作用进行转移8 8 ．可以不经电泳分离而直接点样在．可以不经电泳分离而直接点样在．可以不经电泳分离而直接点样在 NC NC NC 膜上进行杂交分析的是膜上进行杂交分析的是A A ．斑点印迹．斑点印迹．斑点印迹B B B ．原位杂交．原位杂交．原位杂交C C C ．． RNA RNA 印迹印迹印迹D D D ．． DNA DNA 芯片技术芯片技术E E ．． DNA DNA 印迹印迹9 9 ．下列哪种物质在．下列哪种物质在．下列哪种物质在 PCR PCR PCR 反应中不能作为模板反应中不能作为模板A A ．． RNAB RNA B ．单链．单链．单链 DNAC DNA C DNA C ．． cDNAD cDNA D ．蛋白质．蛋白质．蛋白质E E E ．双链．双链．双链 DNA DNA10 10 ．． RT-PCR RT-PCR 中不涉及的是中不涉及的是A A ．探针．探针．探针B B B ．． cDNAC cDNA C ．逆转录酶．逆转录酶．逆转录酶D D D ．． RNAE RNA E ．． dNTP11 11 ．关于．关于．关于 PCR PCR PCR 的基本成分叙述错误的是的基本成分叙述错误的是A A ．特异性引物．特异性引物．特异性引物B B B ．耐热性．耐热性．耐热性 DNA DNA DNA 聚合酶聚合酶聚合酶C C C ．． dNTPD D ．含有．含有．含有 Zn 2+ Zn 2+ Zn 2+ 的缓冲液的缓冲液的缓冲液E E E ．模板．模板12 12 ．． DNA DNA 链末端合成终止法不需要链末端合成终止法不需要A A ．． ddNTP B ddNTP B ．． dNTP C dNTP C ．引物标记．引物标记．引物标记 D D D ．． DNA DNA 聚合酶聚合酶聚合酶 E E E ．模板．模板13 13 ．． cDNA cDNA 文库构建不需要文库构建不需要A A ．提取．提取．提取 mRNAB mRNA B mRNA B ．限制性内切酶裂解．限制性内切酶裂解．限制性内切酶裂解 mRNAC mRNA C mRNA C ．逆转录合成．逆转录合成．逆转录合成 cDNA cDNAD D ．将．将．将 cDNA cDNA cDNA 克隆入质粒或噬菌体克隆入质粒或噬菌体克隆入质粒或噬菌体E E E ．重组载体转化宿主细胞．重组载体转化宿主细胞14 14 ．标签蛋白沉淀是．标签蛋白沉淀是A A ．研究蛋白质相互作用的技术．研究蛋白质相互作用的技术．研究蛋白质相互作用的技术B B B ．基于亲和色谱原理．基于亲和色谱原理C C ．常用标签是．常用标签是．常用标签是 GSTD GST D GST D ．也可以是．也可以是．也可以是 6 6 6 组氨酸标签组氨酸标签组氨酸标签E E E ．以上都对．以上都对15 15 ．研究蛋白质与．研究蛋白质与．研究蛋白质与 DNA DNA DNA 在染色质环境下相互作用的技术是在染色质环境下相互作用的技术是A A ．标签蛋白沉淀．标签蛋白沉淀．标签蛋白沉淀B B B ．酵母双杂交．酵母双杂交．酵母双杂交C C C ．凝胶迁移变动实验．凝胶迁移变动实验．凝胶迁移变动实验D D D ．染色质免疫沉．染色质免疫沉淀法淀法E E E ．噬菌体显示筛选系统．噬菌体显示筛选系统16 16 ．动物整体克隆技术又称为．动物整体克隆技术又称为A A ．转基因技术．转基因技术．转基因技术 B B B ．基因灭活技术．基因灭活技术．基因灭活技术 C C C ．核转移技术．核转移技术．核转移技术 D D D ．基因剔除技术．基因剔除技术E E ．基因转移技术．基因转移技术．基因转移技术17 17 ．目前主要克隆的致病基因是．目前主要克隆的致病基因是．目前主要克隆的致病基因是A A ．糖尿病致病基因．糖尿病致病基因．糖尿病致病基因B B B ．恶性肿瘤致病基因．恶性肿瘤致病基因．恶性肿瘤致病基因C C C ．单基因致病基因．单基因致病基因．单基因致病基因D D ．多基因致病基因．多基因致病基因．多基因致病基因E E E ．高血压致病基因．高血压致病基因．高血压致病基因18 18 ．基因疫苗主要是指．基因疫苗主要是指．基因疫苗主要是指A A ．． DNA DNA 疫苗疫苗疫苗B B B ．． RNA RNA 疫苗疫苗疫苗C C C ．反义核酸．反义核酸．反义核酸D D D ．核酶．核酶．核酶E E E ．小干扰．小干扰．小干扰 RNA RNA 19 19 ．目前基因治疗中选用最多的基因载体是．目前基因治疗中选用最多的基因载体是．目前基因治疗中选用最多的基因载体是A A ．噬菌体．噬菌体．噬菌体B B B ．脂质体．脂质体．脂质体C C C ．逆转录病毒．逆转录病毒．逆转录病毒D D D ．腺病毒相关病毒．腺病毒相关病毒．腺病毒相关病毒E E E ．腺病毒．腺病毒．腺病毒 20 20 ．目前基因治疗多采用的方法是．目前基因治疗多采用的方法是．目前基因治疗多采用的方法是A A ．基因增补．基因增补．基因增补B B B ．基因置换．基因置换．基因置换C C C ．基因矫正．基因矫正．基因矫正D D D ．基因灭活．基因灭活．基因灭活E E E ．基因疫苗．基因疫苗．基因疫苗（二） B 型题A A ．． Southern blottingB Southern blotting B ．． Northern blottingC C ．． Western blottingD Western blotting D ．． dot blottingE dot blotting E ．． in situ hybridization 1 1 ．不需要电泳、转膜等程序．不需要电泳、转膜等程序．不需要电泳、转膜等程序2 2 ．电泳前不需进行限制性内切酶消化．电泳前不需进行限制性内切酶消化．电泳前不需进行限制性内切酶消化3 3 ．靠电转移完成生物大分子的转移．靠电转移完成生物大分子的转移．靠电转移完成生物大分子的转移4 4 ．直接在组织切片或细胞涂片上进行杂交．直接在组织切片或细胞涂片上进行杂交．直接在组织切片或细胞涂片上进行杂交 A A ．逆转录．逆转录．逆转录 PCR B PCR B PCR B ．原位．原位．原位 PCR C PCR C PCR C ．实时．实时．实时 PCR PCRD D ．多重．多重．多重 PCRE PCR E PCR E ．． RFLP5 5 ．将目的基因扩增与定位相结合．将目的基因扩增与定位相结合．将目的基因扩增与定位相结合6 6 ．能动态检测反应过程中的产物量．能动态检测反应过程中的产物量．能动态检测反应过程中的产物量7 7 ．将．将．将 RNA RNA RNA 的逆转录和的逆转录和的逆转录和 PCR PCR PCR 反应联合应用的一项技术反应联合应用的一项技术反应联合应用的一项技术8 8 ．在同一反应中采取多对引物．在同一反应中采取多对引物．在同一反应中采取多对引物A A ．功能克隆．功能克隆．功能克隆B B B ．定位克隆．定位克隆．定位克隆C C C ．转基因技术．转基因技术．转基因技术D D ．核转移技术．核转移技术．核转移技术E E E ．基因剔除．基因剔除．基因剔除9 9 ．也叫基因靶向灭活．也叫基因靶向灭活．也叫基因靶向灭活10 10 ．该技术中，被导入的目的基因称为转基因．该技术中，被导入的目的基因称为转基因．该技术中，被导入的目的基因称为转基因11 11 ．从对基因编码产物的功能的了解出发克隆致病基因．从对基因编码产物的功能的了解出发克隆致病基因．从对基因编码产物的功能的了解出发克隆致病基因 A A ．基因疫苗．基因疫苗．基因疫苗 B B B ．基因矫正．基因矫正．基因矫正 C C C ．基因置换．基因置换．基因置换D D ．基因增补．基因增补．基因增补E E E ．基因失活．基因失活．基因失活12 12 ．目前基因治疗采用最多的方法是．目前基因治疗采用最多的方法是．目前基因治疗采用最多的方法是13 13 ．将致病基因的异常碱基进行修正的基因治疗方法是．将致病基因的异常碱基进行修正的基因治疗方法是．将致病基因的异常碱基进行修正的基因治疗方法是14 14 ．将正常基因经体内基因同源重组原位替换致病基因的基因治疗方法是．将正常基因经体内基因同源重组原位替换致病基因的基因治疗方法是．将正常基因经体内基因同源重组原位替换致病基因的基因治疗方法是 15 15 ．利用特定的反义核酸阻断变异基因异常表达的基因治疗方法是．利用特定的反义核酸阻断变异基因异常表达的基因治疗方法是．利用特定的反义核酸阻断变异基因异常表达的基因治疗方法是A A ．酵母双杂交技术．酵母双杂交技术．酵母双杂交技术B B B ．标签蛋白沉淀．标签蛋白沉淀．标签蛋白沉淀C C C ．电泳迁移率变动测定．电泳迁移率变动测定．电泳迁移率变动测定D D ．染色质免疫沉淀．染色质免疫沉淀．染色质免疫沉淀E E E ．荧光共振能量转换效应分析．荧光共振能量转换效应分析．荧光共振能量转换效应分析16 16 ．凝胶阻滞实验．凝胶阻滞实验．凝胶阻滞实验17 17 ．需要设计诱饵基因．需要设计诱饵基因．需要设计诱饵基因18 18 ．．近年该技术与芯片技术结合在一起，成为一项鉴定特定核蛋白的成为一项鉴定特定核蛋白的 DNA DNA DNA 结合结合靶点的新技术靶点的新技术（三） X 型题1 1 ．核酸探针可以是．核酸探针可以是．核酸探针可以是A A ．人工合成寡核苷酸片段．人工合成寡核苷酸片段．人工合成寡核苷酸片段B B B ．基因组．基因组．基因组 DNA DNA DNA 片段片段片段C C C ．． RNA RNA 片段片段片段D D ．． cDNA cDNA 全长或部分片段全长或部分片段全长或部分片段E E E ．核苷酸．核苷酸．核苷酸2 2 ．核酸分子杂交可以形成的杂化双链有．核酸分子杂交可以形成的杂化双链有．核酸分子杂交可以形成的杂化双链有A A ．． DNA/DNAB DNA/DNA B ．． RNA/RNAC RNA/RNA C ．． DNA/RNAD DNA/RNA D ．寡核苷酸．寡核苷酸．寡核苷酸 /RNA /RNAE E ．寡核苷酸．寡核苷酸．寡核苷酸 /DNA /DNA3 3 ．． PCR PCR 技术主要用于技术主要用于技术主要用于A A ．．目的基因的克隆目的基因的克隆B B B ．．基因的体外突变基因的体外突变C C C ．． DNA DNA 和和 RNA RNA 的微量分析的微量分析的微量分析D D D ．． DNA 序列测定序列测定E E E ．基因突变分析．基因突变分析．基因突变分析 4 4 ．分子杂交技术的原理涉及．分子杂交技术的原理涉及．分子杂交技术的原理涉及A A ．分子杂交特性．分子杂交特性．分子杂交特性B B B ．基因文库．基因文库．基因文库C C C ．印迹技术．印迹技术．印迹技术D D D ．生物芯片．生物芯片．生物芯片E E E ．探针技术．探针技术．探针技术 5 5 ．关于．关于．关于 DNA DNA DNA 链末端合成终止法正确的是链末端合成终止法正确的是链末端合成终止法正确的是A A ．．需加入的链终止剂需加入的链终止剂 ddNTP ddNTPB B ．． dNTP dNTP 需要标记需要标记需要标记C C C ．．引物也需要标记引物也需要标记D D D ．．又称 Sanger Sanger 法法E E ．． ddNTP ddNTP 缺乏缺乏缺乏 5 ' -OH 5 ' -OH6 6 ．基因组．基因组．基因组 DNA DNA DNA 文库建立需要文库建立需要文库建立需要A A ．基因组进行限制性内切酶消化．基因组进行限制性内切酶消化．基因组进行限制性内切酶消化B B B ．． DNA DNA 片段克隆到相应载体中片段克隆到相应载体中片段克隆到相应载体中C C C ．重组．重组体感染宿主菌体感染宿主菌D D D ．筛选目的基因可以通过核酸分子杂交的方法进行．筛选目的基因可以通过核酸分子杂交的方法进行．筛选目的基因可以通过核酸分子杂交的方法进行E E E ．以．以．以 λ 噬菌体为载体的人基因组噬菌体为载体的人基因组 DNA DNA DNA 文库的克隆数目至少应在文库的克隆数目至少应在文库的克隆数目至少应在 10 6 10 6 10 6 以上以上以上7 7 ．用于构建基因组．用于构建基因组．用于构建基因组 DNA DNA DNA 文库的载体有文库的载体有文库的载体有A A ．酵母人工染色体．酵母人工染色体．酵母人工染色体B B B ．粘粒．粘粒．粘粒C C C ．． λ 噬菌体噬菌体D D D ．腺病毒．腺病毒．腺病毒E E E ．脂质体．脂质体．脂质体 8 8 ．基因诊断较常规诊断其特点有．基因诊断较常规诊断其特点有．基因诊断较常规诊断其特点有A A ．属于病因诊断．属于病因诊断．属于病因诊断B B B ．特异性强．特异性强．特异性强C C C ．适用范围窄．适用范围窄．适用范围窄D D D ．灵敏度高．灵敏度高．灵敏度高E E E ．有放大效．有放大效应9 9 ．基因失活的常用技术包括．基因失活的常用技术包括．基因失活的常用技术包括A A ．基因疫苗．基因疫苗．基因疫苗B B B ．核酶．核酶．核酶C C C ．小干扰．小干扰．小干扰 RNAD RNA D RNA D ．反义核酸．反义核酸．反义核酸E E E ．基因置换．基因置换．基因置换 10 10 ．克隆羊多莉的产生属于．克隆羊多莉的产生属于．克隆羊多莉的产生属于A A ．同种异体细胞转移技术．同种异体细胞转移技术．同种异体细胞转移技术B B B ．同种异体细胞核转移技术．同种异体细胞核转移技术．同种异体细胞核转移技术C C C ．试管内受精．试管内受精．试管内受精D D ．无性繁殖．无性繁殖．无性繁殖E E E ．同种异体细胞转基因技术．同种异体细胞转基因技术．同种异体细胞转基因技术11 11 ．疾病动物模型可用于．疾病动物模型可用于．疾病动物模型可用于A A ．探讨疾病的发生机制．探讨疾病的发生机制．探讨疾病的发生机制B B B ．克隆致病基因．克隆致病基因．克隆致病基因C C C ．新治疗方法的筛选系统．新治疗方法的筛选系统．新治疗方法的筛选系统D D ．新药物的筛选系统．新药物的筛选系统．新药物的筛选系统E E E ．新疾病模型的筛选系统．新疾病模型的筛选系统．新疾病模型的筛选系统 12 12 ．蛋白质芯片主要应用于．蛋白质芯片主要应用于．蛋白质芯片主要应用于 A A ．蛋白质结构的研究．蛋白质结构的研究．蛋白质结构的研究 B B B ．蛋白质表达谱的研究．蛋白质表达谱的研究．蛋白质表达谱的研究 C C C ．蛋白质功能的研究．蛋白质功能的研究．蛋白质功能的研究D D ．蛋白质之间的相互作用研究．蛋白质之间的相互作用研究．蛋白质之间的相互作用研究E E E ．疾病的诊断和新药的筛选．疾病的诊断和新药的筛选．疾病的诊断和新药的筛选13 13 ．研究蛋白质相互作用的技术包括．研究蛋白质相互作用的技术包括．研究蛋白质相互作用的技术包括A A ．标签蛋白沉淀．标签蛋白沉淀．标签蛋白沉淀B B B ．酵母双杂交．酵母双杂交．酵母双杂交C C C ．凝胶阻滞实验．凝胶阻滞实验．凝胶阻滞实验D D ．噬菌体显示筛选系统．噬菌体显示筛选系统．噬菌体显示筛选系统E E E ．． DNA DNA 印迹印迹印迹14 14 ．基因治疗的基本程序包括．基因治疗的基本程序包括．基因治疗的基本程序包括A A ．治疗性基因的选择．治疗性基因的选择．治疗性基因的选择B B B ．基因载体的选择．基因载体的选择．基因载体的选择C C C ．靶细胞的选择．靶细胞的选择．靶细胞的选择D D D ．基因转移．基因转移．基因转移E E ．回输体内．回输体内．回输体内15 15 ．目前可用作基因治疗的基因载体包括．目前可用作基因治疗的基因载体包括．目前可用作基因治疗的基因载体包括A A ．腺病毒相关病毒．腺病毒相关病毒．腺病毒相关病毒B B B ．噬菌体．噬菌体．噬菌体C C C ．腺病毒．腺病毒．腺病毒D D D ．逆转录病毒．逆转录病毒．逆转录病毒E E E ．粘粒．粘粒．粘粒 二、是非题1 1 ．． Southern blot Southern blot 主要用于主要用于主要用于 RNA RNA RNA 的定性和定量分析。
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常用分子生物学技术的原理及其应用一、选择题（一）A 型题1 ．分子杂交实验不能用于A ．单链DNA 与RNA 分子之间的杂交B ．双链DNA 与RNA 分子之间的杂交C ．单链RNA 分子之间的杂交D ．单链DNA 分子之间的杂交E ．抗原与抗体分子之间的杂交2 ．关于探针叙述错误的是A ．带有特殊标记B ．具有特定序列C ．必须是双链的核酸片段D ．可以是基因组DNA 片段E ．可以是抗体3 ．下列哪种物质不能用作探针A ．DNA 片段B ．cDNAC ．蛋白质D ．氨基酸E ．RNA 片段4 ．印迹技术可以分为A ．DNA 印迹B ．RNA 印迹C ．蛋白质印迹D ．斑点印迹E ．以上都对5 ．PCR 实验延伸温度一般是A ．90 ℃B ．72 ℃C ．80 ℃D ．95 ℃E ．60 ℃6 ．Western blot 中的探针是A ．RNAB ．单链DNAC ．cDNAD ．抗体E ．双链DNA7 ．Northern blotting 与Southern blotting 不同的是A ．基本原理不同B ．无需进行限制性切酶消化C ．探针必须是RNAD ．探针必须是DNAE ．靠毛细作用进行转移8 ．可以不经电泳分离而直接点样在NC 膜上进行杂交分析的是A ．斑点印迹B ．原位杂交C ．RNA 印迹D ．DNA 芯片技术E ．DNA 印迹9 ．下列哪种物质在PCR 反应中不能作为模板A ．RNAB ．单链DNAC ．cDNAD ．蛋白质E ．双链DNA10 ．RT-PCR 中不涉及的是A ．探针B ．cDNAC ．逆转录酶D ．RNAE ．dNTP11 ．关于PCR 的基本成分叙述错误的是A ．特异性引物B ．耐热性DNA 聚合酶C ．dNTPD ．含有Zn 2+ 的缓冲液E ．模板12 ．DNA 链末端合成终止法不需要A ．ddNTPB ．dNTPC ．引物标记D ．DNA 聚合酶E ．模板13 ．cDNA 文库构建不需要A ．提取mRNAB ．限制性切酶裂解mRNAC ．逆转录合成cDNAD ．将cDNA 克隆入质粒或噬菌体E ．重组载体转化宿主细胞14 ．标签蛋白沉淀是A ．研究蛋白质相互作用的技术B ．基于亲和色谱原理C ．常用标签是GSTD ．也可以是6 组氨酸标签E ．以上都对15 ．研究蛋白质与DNA 在染色质环境下相互作用的技术是A ．标签蛋白沉淀B ．酵母双杂交C ．凝胶迁移变动实验D ．染色质免疫沉淀法E ．噬菌体显示筛选系统16 ．动物整体克隆技术又称为A ．转基因技术B ．基因灭活技术C ．核转移技术D ．基因剔除技术E ．基因转移技术17 ．目前主要克隆的致病基因是A ．糖尿病致病基因B ．恶性肿瘤致病基因C ．单基因致病基因D ．多基因致病基因E ．高血压致病基因18 ．基因疫苗主要是指A ．DNA 疫苗B ．RNA 疫苗C ．反义核酸D ．核酶E ．小干扰RNA19 ．目前基因治疗中选用最多的基因载体是A ．噬菌体B ．脂质体C ．逆转录病毒D ．腺病毒相关病毒E ．腺病毒20 ．目前基因治疗多采用的方法是A ．基因增补B ．基因置换C ．基因矫正D ．基因灭活E ．基因疫苗（二）B 型题A ．Southern blottingB ．Northern blottingC ．Western blottingD ．dot blottingE ．in situ hybridization1 ．不需要电泳、转膜等程序2 ．电泳前不需进行限制性切酶消化3 ．靠电转移完成生物大分子的转移4 ．直接在组织切片或细胞涂片上进行杂交A ．逆转录PCRB ．原位PCRC ．实时PCRD ．多重PCRE ．RFLP5 ．将目的基因扩增与定位相结合6 ．能动态检测反应过程中的产物量7 ．将RNA 的逆转录和PCR 反应联合应用的一项技术8 ．在同一反应中采取多对引物A ．功能克隆B ．定位克隆C ．转基因技术D ．核转移技术E ．基因剔除9 ．也叫基因靶向灭活10 ．该技术中，被导入的目的基因称为转基因11 ．从对基因编码产物的功能的了解出发克隆致病基因A ．基因疫苗B ．基因矫正C ．基因置换D ．基因增补E ．基因失活12 ．目前基因治疗采用最多的方法是13 ．将致病基因的异常碱基进行修正的基因治疗方法是14 ．将正常基因经体基因同源重组原位替换致病基因的基因治疗方法是15 ．利用特定的反义核酸阻断变异基因异常表达的基因治疗方法是A ．酵母双杂交技术B ．标签蛋白沉淀C ．电泳迁移率变动测定D ．染色质免疫沉淀E ．荧光共振能量转换效应分析16 ．凝胶阻滞实验17 ．需要设计诱饵基因18 ．近年该技术与芯片技术结合在一起，成为一项鉴定特定核蛋白的DNA 结合靶点的新技术（三）X 型题1 ．核酸探针可以是A ．人工合成寡核苷酸片段B ．基因组DNA 片段C ．RNA 片段D ．cDNA 全长或部分片段E ．核苷酸2 ．核酸分子杂交可以形成的杂化双链有A ．DNA/DNAB ．RNA/RNAC ．DNA/RNAD ．寡核苷酸/RNAE ．寡核苷酸/DNA3 ．PCR 技术主要用于A ．目的基因的克隆B ．基因的体外突变C ．DNA 和RNA 的微量分析D ．DNA 序列测定E ．基因突变分析4 ．分子杂交技术的原理涉及A ．分子杂交特性B ．基因文库C ．印迹技术D ．生物芯片E ．探针技术5 ．关于DNA 链末端合成终止确的是A ．需加入的链终止剂ddNTPB ．dNTP 需要标记C ．引物也需要标记D ．又称Sanger 法E ．ddNTP 缺乏5 ' -OH6 ．基因组DNA 文库建立需要A ．基因组进行限制性切酶消化B ．DNA 片段克隆到相应载体中C ．重组体感染宿主菌D ．筛选目的基因可以通过核酸分子杂交的方法进行E ．以λ 噬菌体为载体的人基因组DNA 文库的克隆数目至少应在10 6 以上7 ．用于构建基因组DNA 文库的载体有A ．酵母人工染色体B ．粘粒C ．λ 噬菌体D ．腺病毒E ．脂质体8 ．基因诊断较常规诊断其特点有A ．属于病因诊断B ．特异性强C ．适用围窄D ．灵敏度高E ．有放大效应9 ．基因失活的常用技术包括A ．基因疫苗B ．核酶C ．小干扰RNAD ．反义核酸E ．基因置换10 ．克隆羊多莉的产生属于A ．同种异体细胞转移技术B ．同种异体细胞核转移技术C ．试管受精D ．无性繁殖E ．同种异体细胞转基因技术11 ．疾病动物模型可用于A ．探讨疾病的发生机制B ．克隆致病基因C ．新治疗方法的筛选系统D ．新药物的筛选系统E ．新疾病模型的筛选系统12 ．蛋白质芯片主要应用于A ．蛋白质结构的研究B ．蛋白质表达谱的研究C ．蛋白质功能的研究D ．蛋白质之间的相互作用研究E ．疾病的诊断和新药的筛选13 ．研究蛋白质相互作用的技术包括A ．标签蛋白沉淀B ．酵母双杂交C ．凝胶阻滞实验D ．噬菌体显示筛选系统E ．DNA 印迹14 ．基因治疗的基本程序包括A ．治疗性基因的选择B ．基因载体的选择C ．靶细胞的选择D ．基因转移E ．回输体15 ．目前可用作基因治疗的基因载体包括A ．腺病毒相关病毒B ．噬菌体C ．腺病毒D ．逆转录病毒E ．粘粒二、是非题1 ．Southern blot 主要用于RNA 的定性和定量分析。
2 ．蛋白质印迹分析技术中蛋白质的转移，可以用电转移，也可以靠毛细作用转移。
3 ．实时PCR 技术与普通PCR 技术相比，它可以动态监测反应过程中产物的量。
4 ．Sanger 法在测定核酸序列时，反应管中加入的dNTP 仅标记一种即可。
5 ．生物芯片可以是DNA 芯片、cDNA 芯片或蛋白质芯片。
6 ．酵母双杂交技术是分析DNA—蛋白质相互作用的一项重要技术。
7 ．核转移技术，是指将动物体细胞核全部导入另一个体去除了胞核的卵细胞，使之发育成个体。
8 ．基因矫正是用正常的基因通过体基因同源重组，替换致病基因来达到治疗目的。
9 ．目前基因治疗多采用基因增补的方式。
10 ．RNA 印迹技术中，RNA 分子在转移前需进行限制性切酶切割。
11 ．PCR 反应中变性主要是使模板DNA 完全变性为单链。
12 ．实时PCR 技术中，TagDNA 聚合酶在链延伸过程中遇到荧光探针，可发挥3 ' →5 ' 核酸外切酶活性。
13 ．酵母双杂交系统可用于证明两种已知基因序列的蛋白质可以相互作用的生物信息学推测。
14 ．转基因技术即动物克隆技术，是无性繁殖。
15 ．源基因结构突变发生在生殖细胞可引起恶性肿瘤。
16 ．基因转移和基因剔除技术在医学中最重要的用途是建立疾病动物模型。
17 ．定位克隆是指从对基因编码产物的功能的了解出发来克隆致病基因。
18 ．目前DNA 序列分析是找出患者有关基因变异所在的最为直接和确切的基因诊断法。
三、填空题1 ．分子杂交是利用DNA 和这一基本性质来进行DNA 或RNA 定性、定量分析的。
2 ．在印迹技术中，将DNA 片段在琼脂糖凝胶中使其成为，利用使胶中的生物大分子转移到膜上，使之成为固相化分子。
3 ．印迹技术的基本流程依次为、、和。
4 ．Southern blotting 主要用于定性和定量分析，亦可用于和的分析。
5 ．Northern blotting 主要用于检测的表达水平，敏感性较PCR ，但其具有和的优点。
6 ．Western blotting 主要用于检测样品中的存在、细胞中以及的相互作用研究等。
7 ．PCR 的基本反应步骤包括、、。
8 ．基因芯片适用于分析不同组织细胞或同一细胞不同状态下的，其原理是基于。
9 ．在转基因技术中，被导入的目的基因称为，目的基因的受体动物称为。
10 ．标签融合蛋白结合实验主要用于证明是否存在直接的物理结合，分析结合的及筛选细胞与融合蛋白相结合的。
11 ．染色质免疫沉淀法是目前可以研究与相互作用的主要方法。
12 ．目前克隆致病相关基因主要有和两大策略。
13 ．根据受体细胞的类型不同，基因治疗分为的基因治疗和的基因治疗两大类。
14 ．目前使用的基因载体有和两大类。
15 ．在人类基因治疗实施中，导入基因的方式有和两大类。
四、名词解释1 ．probe2 ．blotting technologe3 ．gene libary4 ．核转移技术5 ．gene chip6 ．gene therapy7 ．gene diagnosis8 ．基因疫苗9 ．gene inactivation10 ．gene replacement11 ．gene augmentation12 ．PCR13 ．ex vivo五、问答题1 ．简述印迹技术的分类及应用。