LD50的测定方法
半数致死量的测定
4、精确配制一号药液
应取原液的量：
40＊5％＝x＊25％ x＝8ml
取原液8ml加入32ml水（一号药液） 从中取出每组药液量供一组使用， 在加入等量生理盐水，从中取出每 组药液量供二组使用，依此类推。
四、试验
［方法］ 一、预试
快速找出0%和100%估计致死量（Dn，Dm）
首先用原液尼克刹米（25%）10倍稀释
液的一系列药液以不同容量各试4鼠，进而 2ml / 10g ＝6ml。
动物：小鼠，体重18－22g ，雌雄各半 将一定浓度的药物按一定剂量比值给小鼠腹腔注射，记录小鼠的死亡情况，计算药物的半数致死量。
半数致死量的测定
半数致死量（LD50）测定 [Bliss法]
(综合性实验)
[目的]
1.掌握药物半数致死量（LD50）测定的基本步骤 2.掌握用Bliss法计算药物的半数致死量。
[原理]
将一定浓度的药物按一定剂量比值给小鼠腹腔 注射，记录小鼠的死亡情况，计算药物的半数致 死量。
[材料]
动物：小鼠，体重18－22g ，雌雄各半 药物：25%尼克刹米、生理盐水 器材：注射器、量筒、烧杯、鼠笼、 电子天平
则可逐渐递增或递减剂量，找到4/4和0/4剂 将一定浓度的药物按一定剂量比值给小鼠腹腔注射，记录小鼠的死亡情况，计算药物的半数致死量。
＝每组药液量／（1－K） 器材：注射器、量筒、烧杯、鼠笼、 电子天平
量即（Dm，Dn）。（0.2X0.7=0.14ml， ＝10＊30g＊ 0.
快速找出0%和100%估计致死量（Dn，Dm）
1、每组均取10只小鼠，腹腔注射尼克刹米按照不况。（40分）
实验2 LD50的测定
半数致死量的意义
测定药物的LD50是药物急性毒性实验的重 要内容。 LD50是恒量药物急性毒性的重要指标。
LD50的测定
一、测定LD50的常用方法：
1. 改良冠氏法：方法简单，计算简便。 2. 序贯法（上下法）：使用动物少，费时多， 不适于作用慢的药物 3. Biss法：设计严谨，结果可靠，是目前公认 的最佳方法，但计算复杂，一般需借助于计 算机或计算器才能进行计算。
100个自然数的随机排列
1 0 10 20 30 40 50 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9
Back
60
70 80 90
26 23 49 51 04 00 58 15 70 64
03 08 34 52 53 27 83 90 63 88
86 20 97 47 98 40 78 57 67 59
37 36 66 83 43 29 23 95 32 64
19 54 65 28 63 05 04 20 89 00
62 81 78 59 48 17 52 68 15 79
47 30 84 92 94 26 71 99 02 08
10 55 61 13 85 33 88 69 87 97
16 86 53 56 80 06 74 67 90 22
86 19 34 69 13 54 26 99 30 22
09 94 96 60 77 01 47 50 55 23
48 73 15 98 06 40 18 88 21 16
53 92 95 85 11 29 58 25 78 83
63 59 28 02 91 42 41 71 56 33
66 00 85 67 76 17 90 14 51 46
药物急性毒性试验LD50的方法
精品文档药物急性毒性试验LD 50的方法对全新结构的药物或中草药复方，先通过小批量动物的摸索，找出0%和100%估计致死量（即Dmin和Dmax），再求出i值。
（1）用10倍稀释的药物浓度系列，用少量动物（每组2~3只），找出大致死亡范围。
如:上述结果提示，大致死亡范围为：50~500 mg/kg。
（2）再用1、2、4、8……等2倍稀释的药物浓度系列，每组4只，找出Dmin和Dmax。
如：Dmax :当出现4/4死亡时，如其前一组为3/4死亡，则取4/4组的剂量为Dmax ;如前一组为1/4或2/4死亡，考虑到4/4组的剂量在正式实验中可能的死亡率低于70%，为慎重起见，可将4/4组的剂量乘以2作为Dmax。
Dmax=400 X 70% X 2=560 mg/kgDmin :当出现0/4死亡时，如其后一组为1/4死亡，则取0/4组的剂量为Dmin ;如后一组大于1/4，考虑到0/4组的剂量在正式实验中可能的死亡率高于70%，为慎重起见，可将0/4组的剂量除以2作为Dmin。
Dmin=50 十70% 十2~ 35 mg/kg（3）本法用较少的动物和药物，寻找出正式实验时最高死亡率不低于70%，最低死亡率不高于30%点剂量范围在确定了Dmax和Dmin以后，可求得组间距（i值）：lg Dmax-lgDmini= ------------------------------n-1（4）以Dmin的对数为起点，向上退出n组动物的各组剂量的对数值，求出反对数即可得出各组的剂量值。
注意：①LD50测定中剂量组数的设计，除符合统计学要求外，还应根据预试验所提供的药物的毒性情况而定。
②一般而言，在实际工作中，设4~5个剂量组，组距以0.65~0.85为宜。
③小鼠每组10只（雌雄各半），大鼠不应少于6~8只。
ld50的测定方法的实验报告思考题
ld50的测定方法的实验报告思考题【引言】在进行科学研究或毒理学评估时，LD50（半数致死剂量）的测定是一项重要的实验。
LD50是指能够致死一半受试动物的剂量，它是评估某种物质毒性的指标。
本文章将探讨LD50的意义和测定方法，并思考在实验报告中应该包含哪些重要的内容。
【LD50的意义】在毒理学研究中，确定物质的毒性是至关重要的。
而LD50作为一种实验评估指标，可以帮助我们判断物质的毒性程度和剂量效应。
通过测定一种物质在动物体内的LD50，可以进行危险品分类、毒物识别和毒性研究等领域的工作。
【LD50的测定方法】要测定一种物质的LD50，我们需要进行一系列的实验。
下面是常见的几种测定方法：1. 最常用的方法：经典Litchfield-Wilcoxon法（Up-and-Down 法）。
该方法是在动物（如小鼠、大鼠）体内逐渐增加剂量，直到对半数动物产生死亡为止。
根据每个动物的反应调整下一个动物的剂量，以便更接近于LD50。
最后通过计算不同剂量的死亡率，确定LD50。
2. 毒性分类法：根据测定的数据，将物质分为毒性类别。
这种方法是根据动物对不同剂量物质的反应，将物质分为五个毒性类别：非常毒、有毒、有限毒、少量毒和微毒。
这种分类法便于在实验中确定剂量的范围，并提供定量和定性的信息。
3. 统计学分析法：使用统计学方法来计算LD50。
这种方法是将实验测定得到的数据进行统计学分析，通过计算得到近似的LD50值，并给出统计上的置信区间以反映结果的可靠性。
统计学方法可以帮助我们更准确地评估LD50和预测剂量效应。
【实验报告的重要内容】实验报告是对实验进行总结和回顾的重要文件，对于展示和传达实验结果至关重要。
当涉及到LD50的测定时，以下是应该包含在实验报告中的重要内容：1. 实验目的和背景：简要介绍LD50的测定方法背后的科学原理和意义。
2. 实验设计和材料：详细描述实验所使用的动物种类、药物剂量、实验环境等。
3. 实验步骤：清晰地描述每个实验步骤，包括剂量递增、动物反应观察等。
实验二 经口急性毒性LD50测定
实验二经口急性毒性LD50测定实验二经口急性毒性LD50测定一、试验目的1. 熟悉急性毒性LD50测定的剂量设计2. 掌握小鼠灌胃技术3. 掌握改进寇氏法计算LD50的方法二、试验原理选择健康的实验动物，依据LD50计算的设计原则，将实验动物随机分成数个染毒组和一个阴性对照组。
一次或24小时内多次给予实验组受试物后，观察动物所产生的急性毒性反应及其严重程度，中毒死亡的特征以及可能的死亡原因。
根据受试物毒性反应与剂量的关系，求出半数致死剂量(LD50)，并根据LD50值将受试物进行急性毒性分级。
三、材料和试剂1. 实验动物:健康成年小鼠60只，雌雄各半2. 器材:灌胃针(小鼠适用)、注射器、吸管、容量瓶、烧杯、滴管、分析天平、台秤、外科手术剪、镊子3. 受试物:(敌百虫或克佰威)4. 染色剂:苦味酸酒精饱和溶液、0.5%品红溶液四、实验内容1. 实验动物称重、编号和随机分组2. 染毒剂量设计及试剂配制3. 小鼠灌胃染毒技术4. 毒性反应的观察及LD50计算五、试验方法(一)预实验1. 探索剂量范围先找出100%与0%的致死量(或阳性反应的剂量)为实验的上、下限剂量(Dmax和Dmin)。
据经验或文献定出一个估计量，取动物若干，每4只一组，按估计量给药，如出现4/4死亡时，下一组剂量降低，当出现3/4死亡时，则上一剂量为Dmax;如降低一档剂量出现的死亡率2/4或1/4时，应考虑到4/4死亡剂量组在正式实验时可能出现死亡率低于70%，为慎重起见可将4/4死亡剂量乘以1.4倍，作为Dmax。
以次类推，找出Dmin。
2. 剂量分组一般染毒组数(G)以5-8组为宜，组间剂量比值为r。
在确定组数后，按下列公式计算r。
1/(G-1)r = (Dmax/Dmin) 3. 受试物溶液的配制配制等比浓度的敌百虫溶液，并使每只动物在给药容量上相等(如0.5ml/20g)。
剂量按等比级数增减，相邻两剂量比值1:0.6,0.9，设5个剂量组。
实验普鲁卡因半数致死量(LD50)的测定
DJY
2
测定LD50的方法很多 本实验用的是简化机率单位法
y = a+bx
机 率 单 位 y
对数剂量x
DJY 3
药物的剂量与效应关系
死 亡 数 累 积 死 亡 率
剂量
累 积 死 亡 率 对数剂量
DJY
剂量 机 率 单 位 对数剂量
4
测定药物LD50的设计方法 1.预实验：摸索接近100%和0%死亡的剂量 2.按比例设5-7个剂量组（0.65~0.90） 3.随机分组，动物数不少于10只（小鼠） 4.实验条件均应相等
【注意事项】
1.动物应随机分组
2.各小组的动物标记要统一
3.剂量由小到大，注射量要准。
DJY
9
思考题
1.什么是LD50?
2.测定LD50的根据和意义何在?
DJY
10
【结果与统计】
对数剂量 动物数 死亡率 机率单位 死亡数 (mg/kg) (x) (n) (%) (y) 剂量 1 2 110.8 147.7 2.0445 2.1694
3 4
5
196.9 262.5
350.0
2.2942 2.4191
2.5441
y = a+bx
用直线回归法求 a, b, r
DJY 8
DJY
5
测定LD50的用药设计方法 同一浓度 不同浓度 不同剂量 同一剂量
DJY
6
【方法与步骤】
1.分组：随机分成5个剂量组，每组2只小白鼠。
2.给药：采用不同浓度,同一剂量的方法
0.20ml/10g,腹腔注射，涂上标记
3.观察：用药1小时后,观察小白鼠死亡情况,并记
录各组动物的鲁卡因半数致死量(LD50)的测定
普鲁卡因半数致死量(LD50)的测定和计算
3．观察试验结果：给药后即观察小鼠活动改变情况和死亡数，存活者一般都在15~20分 钟内恢复常态，故观察30分钟内的死亡率。
4．计算LD50及其95%可信限：
LD50计算方法有多种，这里介绍最常用的加权直线回归法(Bliss法)。此法虽计算步骤稍 繁，但结果较精确，实际应用时可借助于计算机。
首先，用较大的剂量间距确定致死剂量的范围，进而在此范围内设定若干剂量组，剂量按 等比方式设计，相邻两个剂量间距比例在0.65~0.85之间，给药后观察7~14天内动物一般情况 和死亡数，根据死亡率计算LD50。请注意：若死亡率为100%和0%的数据，其机率单位为+∞ 和-∞，数据可列于表格中，但不能用于计算。现用下述例子具体说明计算方法。
（4）LD50及其95%可信限：6.1532g/kg(5.4373－6.9634g/kg)
结果 1．报告实验日期，药品批号，生产厂名，小鼠的性别和体重范围，给药途径,给药后的中毒 症状；并将剂量(单位体重所用药量，mg/kg)，死亡率等LD50的计算数据归纳简明的表格（参照 表11-6），报告LD50及其95%可信限主要计算过程和计算结果。 2．如实验失败或结果不理想，可按同样要求对下述练习题中的一个进行计算和报告。 练习题 1．将某种中药制剂给小白鼠灌胃后，48小时内各剂量组的死亡数如下，求该药的LD50及 其95%可信限。 灌胃剂量（g/kg）： 5.12 6.40 8.00 10.0 12.5 死亡数/实验动物数： 1/10 2/10 4/10 7/10 9/10 2．小鼠皮下注射有机磷制剂对硫磷(1605) 1.8mg/kg，立即腹腔注射不同剂量的氯磷定进行抢救，观察生存率（即氯磷定的有效率）如下： 氯磷定剂量（mg/kg）: 12.8 16.0 20.0 生存数/实验动物数： 1/10 6/10 9/10 求氯磷定的ED50及其95%可信限；如果氯磷定的LD50为173.6mg/kg,那么它的治疗指数 （TI）为多少？
药物半数致死量(LD50)的测定
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实验 药物半数致死量（LD50） 的测定——序贯法
实验目的
1. 掌握测定药物LD50的药理学意义、序贯法 的实验方法和计算方法；
2.熟悉盐酸普鲁卡因的毒性作用。
实验动物与实验器材
4. 实验结mg/kg C＝∑（R·logD）
R＝剂量组的动物只数
logD＝剂量D的对数值；
N＝实验动物总数＝∑R
注意事项
1. 对实验动物进行随机化分组； 2.各组药物浓度不能混淆； 3.给药剂量及部位要准确,进针的深浅一致；
1. 实验动物： 小白鼠（18-22g），雌雄各半 2.实验器材：
仪器：注射器、鼠笼、函数型计算器 药品：2％普鲁卡因、苦味酸溶液
实验步骤
1. 实验前按表3-6拟定实验的药物剂量，相邻两剂 量按等比安排。相邻两剂量对数差为0.046。
2.每实验组取取小鼠10只，雌雄各半，称重后用 苦味酸标记；
浓度
剂量D （mg/kg）
r＝ 0.046
2.22 ％
2％
1.8 ％
1.62 ％
1.45 ％
合计
表3-6 小鼠半数致死量实验结果
LogD
实验结果
R
R·log D
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
2.347
2.301
2.255
2.209
2.163
3. 先取小鼠1只，腹腔注射第一个剂量即2.2％普鲁 卡因0.1ml/10g，若第一只小鼠用药后未出现死亡， 下一只动物则用高一剂量，如出现死亡，下一只 动物应用低一剂量。在表中记录时，动物死亡用 “＋”表示，未死亡用“－”表示。若在同一剂量中 连续出现“－”两次，则下一次实验结束，最后一 只动物不做实验，但在表格中占一个，用E表示。
ld50的测定实验报告
ld50的测定实验报告LD50的测定实验报告概述：LD50是一种常用的毒性测定指标，用于衡量某种物质对于生物体的毒性程度。
本实验旨在通过测定某种化学物质对小白鼠的LD50值，评估其毒性，并为毒性研究提供参考。
实验材料与方法：实验所需材料包括小白鼠、待测物质、标准饲料、饮水、实验器材等。
按照以下步骤进行实验：1. 实验组织与分组：将小白鼠随机分为若干组，每组10只。
其中一组为对照组，其余组为实验组。
2. 毒性物质的制备：待测物质按照一定浓度配制成溶液。
3. 毒性物质的给药：将待测物质溶液按照一定剂量注射到小白鼠体内，对照组注射生理盐水。
4. 观察与记录：观察小白鼠在给药后的行为、食欲、体重等变化，并记录观察结果。
5. LD50的计算：根据实验数据，利用统计学方法计算出LD50值。
实验结果与分析：根据实验数据统计，不同剂量的待测物质对小白鼠产生了不同程度的毒性反应。
观察到高剂量组小白鼠出现明显的行为异常、食欲减退、体重减轻等现象，而低剂量组则没有明显异常。
LD50值是指在给定时间内，使一半实验动物死亡的物质剂量。
通过计算LD50值，可以评估待测物质的毒性程度。
LD50值越小，表示物质对生物体的毒性越高。
实验的结果显示，待测物质的LD50值为X mg/kg。
根据国际毒理学标准，该物质被归类为高毒性物质。
这意味着在相同剂量下，该物质对生物体的毒性较强，需谨慎使用。
实验的局限性与改进：本实验仅使用小白鼠作为实验对象，其生物体特征与人类存在差异，因此对于人体的毒性评估仍需谨慎。
此外，实验中仅测定了一种待测物质，结果无法推广到其他物质。
为了提高实验的准确性和可靠性，可以考虑以下改进措施：1. 使用多种动物模型，如小鼠、大鼠、兔子等，以更全面地评估待测物质的毒性。
2. 增加实验组数和样本量，以提高统计学分析的可靠性。
3. 结合其他毒性指标，如生化指标、组织病理学等，对待测物质的毒性进行更全面的评估。
结论：LD50测定实验是一种常用的毒性测定方法，通过计算LD50值可以评估待测物质的毒性程度。
ld50测定的实验报告
ld50测定的实验报告LD50测定的实验报告引言：药物的安全性评价是药物研发过程中至关重要的一环。
在药物研发的早期阶段，需要进行一系列的实验来评估药物的毒性。
其中，LD50测定是评估药物毒性的重要方法之一。
本实验旨在通过LD50测定，评估某药物对实验动物的毒性，为进一步的药物研发提供参考。
材料与方法：1. 实验动物：选取同龄、同种、同性别的小鼠作为实验动物。
2. 药物制备：将待测药物按照一定比例配制成不同浓度的溶液。
3. 实验组设置：将小鼠随机分为若干组，每组6只，其中一组作为对照组，其余组分别注射不同浓度的药物溶液。
4. LD50测定：将药物溶液通过静脉注射的方式给予小鼠，记录注射后小鼠的行为、体重变化、呼吸等生理指标。
5. 数据处理：根据实验结果，计算出药物的LD50值。
结果与讨论：在实验过程中，观察到小鼠在注射药物后出现了一系列的生理反应。
随着药物浓度的增加，小鼠的行为异常、体重减轻、呼吸困难等现象逐渐加重。
通过对实验数据的统计分析，可以得出药物的LD50值。
LD50值是指将药物给予实验动物后，导致50%的动物死亡所需的药物剂量。
LD50值越小，说明药物的毒性越大；LD50值越大，说明药物的毒性越小。
通过LD50测定，可以初步评估药物的毒性，并为药物的安全性评价提供参考。
然而，需要注意的是，LD50测定只是评估药物毒性的初步方法，其结果并不能完全代表药物的毒性水平。
在实际的药物研发过程中，还需要进行更加全面、细致的毒性评价，包括长期毒性、亚慢性毒性和慢性毒性等实验。
此外，LD50测定也存在一定的局限性。
由于药物对不同物种的毒性可能存在差异，所以LD50值只能作为初步参考，不能直接推广到人体。
在进行LD50测定时，需要选择合适的实验动物，并进行合理的数据分析，以得出准确可靠的结果。
结论：LD50测定是评估药物毒性的重要方法之一。
通过LD50测定，可以初步评估药物的毒性水平，为药物研发提供参考。
药理学的LD50名词解释
药理学的LD50名词解释引言药理学是研究药物对生物体的作用机制和效应的学科，而LD50是药理学中一个重要的指标。
本文将详细解释LD50的含义及其在药理学中的应用。
一、LD50的定义LD50是一种毒性学的指标，即给予实验动物一定剂量药物或化合物后，使50%实验动物死亡所需的剂量。
LD50通常以毫克/千克（mg/kg）为单位，能够评估药物或化合物对动物的毒性程度。
二、LD50的意义1. 评估毒性LD50是评估药物或化合物毒性的标准之一。
通过确定动物在一定时间内摄入药物或化合物的最大耐受剂量，可以推断出毒物的毒性级别。
一般来说，LD50值越低，毒性越高；LD50值越高，毒性越低。
2. 比较药物毒性LD50能够比较不同药物或化合物的毒性，帮助药理学家选择更安全的药物或合理地设计药物剂量。
通过比较不同药物的LD50值，可以选择较低毒性的药物来治疗疾病，减少不良反应的发生。
3. 设定药物剂量根据LD50值，药理学家能够合理设定药物的剂量，避免超剂量使用而引发严重毒性。
在药物研发过程中，通过实验测定不同剂量对动物的LD50值，可以确定临床使用的药物剂量。
三、LD50的确定方法确定LD50值的方法主要有以下几种：1. 经典方法经典方法是最为常用的LD50确定方法。
该方法通常涉及给实验动物（如小鼠、大鼠等）不同剂量的药物，观察一段时间后测定死亡数量，并计算LD50值。
2. 走向实验法走向实验法是利用已知剂量药物中毒的实验动物来间接确定LD50值。
该方法通过给实验动物连续或逐渐增加的剂量，直到观察到明显的中毒症状，从而推测出LD50值。
3. 实际数据法实际数据法是根据临床数据或实际使用情况来确定LD50值。
这种方法可以通过观察生态环境中某个群体的死亡情况得出LD50值，但这种数据相对不太准确。
四、LD50的局限性LD50值虽然在药理学中有一定的应用，但也有其局限性：1. 实验动物的差异性不同品种的动物对不同药物或化合物的反应可能存在差异，因此LD50值的准确性可能会受到动物类型的限制。
ld50测定
实验一、LD50的测定[目的] 通过测定药物LD50的方法、步骤和计算过程，了解急性毒性试验的常规。
[材料] 小鼠50只(体重17－25g，雌雄各半) 注射器及针头1. 探索剂量范围取小鼠8-10只，以2只为一组分成4-5组，选择组距较大的一系列剂量，按腹腔注射哈顿佐剂，观察出现的症状并记录死亡数，找出引起0％及100％死亡率(至少应找出引起20％—80％死亡率)剂量的所在范围。
2. 进行正式试验在预初试验所获得的0％和100％致死量范围内，选用5个剂量按等比级数增减；尽可能使半数组的死亡率都在50％以上，另半数组的死亡率都在50%以下。
每组10只左右，动物的体重和性别要均匀分配。
完成动物分组和剂量计算后按组腹腔注射给药。
最好先从中剂量组开始，以使能从最初几组动物接受药物后的反应来判断两端的剂量是否合适，否则可随时进行调整。
LD50测定中应观察记录的项目：1、实验各要素：实验题目，实验日期，室温，检品的批号、规格、来源、理化性状、配制方法及所用浓度等；动物品系、来源、性别、体重、给药方式及剂量(药物的绝对量与溶液的容量)和给药时间等。
给药后各种反应；潜伏期(从给药到开始出现毒性反应的时间)；中毒现象及出现的先后顺序，开始出现死亡的时间；死亡集中时间；末只死亡时间；死前现象。
逐日记录各组死亡只数。
尸解及病理切片：从给药时开始记时，凡两小时以后死亡的动物，均及时尸解以观察内脏的病变，记录病交情况．若有肉限可见变化的则需进行病理检查．整个实验一般要观察7-14天，观察结束时，对全部存活动物称重，尸解，同样观察内脏病变并与中毒死亡鼠尸解情况相比较。
当发现有病变时，也同样作病理检查，以比较中毒后病理改变及恢复情况。
2、结果计算根据试验设计，采用相应的方法计算LD50，一般采用按Reed－Muench法计算或寇氏改进法karber法。
实验二、急性毒性试验试验目的：急性毒性试验是在24小时内给药1次或2次（间隔6-8小时），观察动物接受过量的受试药物所产生的急性中毒反应，为多次反复给药的毒性试验设计剂量、分析毒性作用的主要靶器官和观察指标的设计提供参考信息等。
实验三杀虫剂触杀毒力（LD50）测定
实验三 杀虫剂触杀毒力（LD 50）测定（点滴法）目前使用的杀虫剂大多数都具有较强的触杀作用，所以杀虫剂的触杀毒力测定显得特别重要。
触杀毒力测定有药膜法、点滴法、喷雾法、喷粉法和浸液法等。
室内比较精确的触杀毒力测定方法是点滴法和药膜法。
本实验采用点滴法（topical application ）。
是将一定量农药丙酮液点滴在虫体的一定部位上，药剂可能自体壁进入体内。
目的要求通过本实验可以学习到一种比较准确的杀虫剂触杀毒力测定方法，并进行有关毒力数据整理及其可靠性检验。
实验用具容量瓶（10、25、50及100ml ）、微量点滴器或毛细管微量点滴器、吸管、培养皿、烧杯、滤纸、平头镊子、计算纸。
实验材料乙酰甲胺磷，辛硫磷，丙酮，可选用室内人工饲养的粘虫（Mythimna separta Walker ）、玉米螟（Ostrinia furnacalis G ）、棉铃虫（Heliothis armigera Hubner ）或直接采自田间的菜青虫等4龄幼虫，荔枝椿象成虫（Tessaratoma papillosa Drury ）也可根据不同地区或不同季节任选一种试虫。
测试方法（选用玉米螟为实验材料）1) 预备试验 先用丙酮将乙酰甲胺磷配制成若干个不同浓度，选取4龄玉米螟幼虫若干，每个浓度用点滴器（或微量进样器）点滴药液于幼虫的胸部背面，每头虫点滴1ul,每浓度点滴虫数不少于30头，待药液干后，把5－8头虫盛于一皿中，加入少量饲料，盖好培养皿，写好标记，经24小时后检查试虫的生存及死亡头数，计算其死亡率。
从这些浓度中找出适合的浓度，即找出其死亡率在20－90％之间的5－7个不同剂量的等比浓度供下一步试验用。
2) 根据上步预备试验结果，如本实验可用乙酰甲胺磷有如下浓度：500、1000、2000、4000、8000、12000和16000ppm 。
可设7组，每组选择4龄玉米螟幼虫210头，分别放在垫有滤纸的培养皿中（滤纸预先加湿），每皿放10头，每种浓度设有3个重复。
急性毒性试验-LD50的测定
急性毒性试验-LD50的测定急性毒性试验是一种通过给实验动物注射、灌胃或其他途径给予高剂量试验物质来评估其致死或严重的毒性反应的试验。
LD50是一种常用的急性毒性指标，表示半数实验动物在接受单位剂量试验物质后死亡的剂量。
本文将介绍LD50的测定方法和其应用。
一、LD50的测定方法1. 实验动物的选择LD50实验通常使用小鼠、大鼠、兔子和狗等动物进行。
选用实验动物需要秉持道德原则，并考虑到动物的生物学特征、毒物代谢能力等方面的因素。
例如，小鼠和大鼠体型较小、代谢能力较低，适合于测定具有代谢性毒性的化合物的LD50；兔子和狗体型较大，代谢能力较强，适合于测定纯化、非代谢性毒性的化合物的LD50。
2. 给药途径和剂量选择通常使用口服、皮下注射、静脉注射等给药途径。
对于口服试验，需要注意试验物质的水溶性和毒性，对于毒性高的化合物，通常使用灌胃的方式。
实验的剂量需要考虑到实验动物体型、种类、代谢能力等因素，并进行逐步递增以确定LD50。
3. 实验计划设计实验计划设计需要考虑到试验物质的毒性、剂量效应关系和死亡率等因素。
一般采用正反两次递增的方法，进行急性毒性试验评估。
根据试验物质的毒性情况和实验者的安全考虑，同时采取风险预警措施。
4. 数据处理和计算完成实验后，需要统计每个剂量组的死亡率和死亡时间。
按照统计学原理，可以根据实验数据计算出LD50值。
LD50值表示使用单位剂量试验物质对半数实验动物致死的剂量。
该值越小，试验物质的毒性越高。
二、LD50的应用LD50值可以作为急性毒性评估的定量指标，用于比较不同化合物的毒性。
在化学品、药品等领域里进行LD50测定可以帮助人们更好地预测和评估一些原料与产品的安全性，以便于过程优化和产品开发，同时为相关政策制定提供科学依据。
LD50值的应用最为广泛的领域是毒性测试和安全性评估。
在毒理学和环境毒理学领域里，常用LD50为评估的标准；在某些国家的法律法规中，也要求企业对使用的化学品或产品进行毒性测试，以保证工人和消费者的安全。
ld50的测定方法的实验报告思考题
导语：LD50是一种常用的毒性测定方法，对于评估一种物质的毒性大小具有重要意义。
通过对动物进行实验观察其逝去率，可以计算出半数致死剂量LD50值，从而判断物质的毒性程度。
本文将围绕LD50测定方法展开探讨，从理论到实践，为你详细解读这一重要的毒性评价方法。
一、LD50的概念与意义LD50代表的是半数致死剂量，通常用于表示一种毒性物质对于生物体的毒性程度。
在毒性评价中，了解LD50值能够帮助我们正确评估和比较不同物质的毒性大小，为毒性监测和风险评估提供重要依据。
二、LD50的测定方法及实验步骤1. 选择实验动物：常用的实验动物包括小鼠、大鼠、家兔等，选择合适的实验动物是确保实验结果准确性的重要保障。
2. 确定给药途径：给药途径可以通过饮水、灌胃、皮下注射等方式进行，不同途径的给药方式会对LD50值产生影响。
3. 确定给药剂量范围：根据前期实验结果或文献调查，确定一系列逐渐递增的给药剂量范围。
4. 观察实验动物逝去情况：记录实验动物在给药后的逝去情况和逝去时间，根据实验结果计算LD50值。
在进行LD50测定方法的实验报告时，需要考虑以下几个要点：1. 实验设计的科学性：实验是否符合科学规范，是否考虑到各种可能的影响因素。
2. 结果的准确性：对实验结果进行综合分析和比较，确保数据的准确性和可靠性。
3. 实验中的伦理道德：对实验动物的使用是否符合伦理原则和动物保护法规。
4. 实验中的安全措施：在实验过程中是否采取了充分的安全防护措施，保障实验人员和实验动物的安全。
四、个人观点与理解LD50测定方法作为一种常用的毒性评价方法，具有重要的指导意义。
在实践中，我们需要充分考虑实验的科学性和伦理道德，确保实验结果的准确性和可信度。
也需要重视实验中的安全问题，在保障实验人员和实验动物的安全的前提下进行实验研究。
总结：LD50测定方法是一种重要的毒性评价方法，对于评估一种物质的毒性大小具有重要意义。
在进行LD50实验报告时，需要充分考虑实验设计的科学性、数据的准确性、伦理道德和安全措施，以确保实验的科学性和可靠性。
测定ld50的方法
测定ld50的方法
LD50的方法是通过给试验动物（通常是小鼠或大鼠）以不同剂量的物质，然后观察其死亡率来确定该物质对生物体的毒性程度。
LD50是指半数致死量（Lethal Dose 50），即致死一半动物所需的剂量。
LD50的测定方法包括以下几种：
1.固体物质方法：将固体物质溶解成适当的溶液，通过灌胃或皮下注射等方式给予小鼠或大鼠不同剂量，然后观察其死亡率。
2.液体物质方法：将液体物质稀释成一系列不同的浓度，然后通过灌胃或静脉注射给予试验动物，观察其死亡率。
3.气体物质方法：将气体物质暴露给试验动物，通常通过密封的容器或特定装置来控制气体浓度和曝光时间，然后观察其死亡率。
4.皮肤接触方法：涂抹或注射测试物质于试验动物的皮肤上，然后观察其死亡率。
测定LD50的实验通常需要一系列的试验动物和剂量，可以通过统计方法计算出剂量-死亡率的关系曲线，从而确定LD50值。
然而，如今在伦理方面的考虑下，使用动物实验来测定LD50已经受到了限制，许多国家已经禁止或限制了这种做
法，并提倡使用替代方法来评估物质的毒性。
LD50的测定
LD50的测定
实验动物：啮齿类小鼠原因：①经济，该实验动物试验经费低且受试药量较低，经济实惠；②易于获得及便于实验室饲养和管理；③毒理学研究背景较多，便于比较。
实验动物要求：健康、年龄和体重应尽量一致，尽量减少因实验动物个体差异对实验的影响。
还有，实验动物应为雌雄各一半。
剂量水平的选择：
在实验前应该先查阅有关文献，找出大致的LD50，而实验时应先进行预实验，先摸索出0％及100％估计致死量的范围。
LD50的计算方法：
LD50计算的统计学原理：剂量与死亡率之间呈偏态分布曲线关系。
实验动物对于药物毒性作用的敏感性存在差异，对药物特别敏感的动物很少，对药物很不敏感的动物也很少，多数实验动物处于中等敏感状态，符合“两头多，中间少”的规律。
以剂量为横坐标，死亡率为纵坐标，则可描绘出偏态分布曲线。
由于剂量与死亡率符合偏态分布，既符合对数正态分布，则可用孙氏改进寇氏法计算LD50.
孙氏改进寇氏法（点斜法）基本要求：①反应情况应符合或接近对数正态分布；②相邻了、相邻两剂量比值应相等：③各组动物数目相等，一般为10只。
注意：不要求死亡率一定包括0％和100％，但两者之和最好在80％和120％之间。
计算公式：
当最小剂量组的死亡率为0％，最大剂量组的死亡率为100％时可按下式计算：
当最小剂量组的死亡率大于0%而又小于30%。
或最大剂量组的死亡率小雨100%
而又大于70%时，按下式计算：
LD50的标准误按下式计算：，
LD50的95%可信限按下式计算：
●
●。
操作规程——半数致死量(LD50)测定
操作规程——半一、目的小鼠是应用于流感病毒研究常用的动物模型。
半数致死量（LD50）是药物、毒物及病原微生物等毒力水平的一个标志，它表示能使全部实验对象死亡半数的剂量或浓度。
由于生物间存在个体差异性，因此LD50需用一批相当数量的实验对象进行实验方能测得，并且每种药物不同实验对象的 LD50值不相同。
必须遵循以下原则：1. 剂量必须按等比级数（剂量对数按等级数）分组； 2. 各组动物数应相等； 3. “反应”应大致呈正态分布。
最小剂量组的死亡率（Pn）应为 0% ，最大剂量组的死亡率（Pm）应为 100%，如果Pn<20%或Pm>80%需用校正公式计算，如Pn>20%或Pm<80%则不能用此法计算。
本操作规程为规范实验操作、保证样本质量、操作安全而制定。
中国国家流感中心的所有技术人员，必须按照本文件相关的规程进行操作。
二、范围适用于中国国家流感中心所有技术人员进行以小鼠为模型的半数致死量测定。
（一）生物安全要求根据所使用病毒的生物安全条件在ABSL-2、ABSL-3或ABSL-4条件下操作。
病毒融化后不能再次冻存。
（二）材料根据具体实验配制。
（三）实验步骤1．预备实验（1）摸索上下限：即用少量动物逐步摸索出使全部动物死亡的最大剂量（Dm）和一个动物也不死亡的最小剂量（Dn）。
方法是据经验或文献定出一个估计量，观察 2~3 只动物的死亡情况。
如全死，则降低剂量；如全不死，则加大剂量再行摸索，直到找出 Pm =100% 和 Pn =0% 的剂量，此两量分别为上下限。
（2）确定组数，组距及各组剂量1）组数：一般 5~8 组，可根据适宜的组距确定组数，如先确定5组，若组距过大，可再增加组数以缩小组距。
有时也可根据动物死亡情况来决定增减组数。
2）组距：指相邻两组剂量对数之差，常用“d”来表示。
d不宜过大，因过大可使标准误增大；也不宜过小，因过小则组数增多，各组间死亡率重叠造成实验动物的浪费。
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LD50的测定方法
LD50的测定方法有三种:概率单位法(Bliss法)、累计法(Reed-Muench、Karber)、序贯法
概率单位法:
1、进行实验 :死亡率为10%-50%、50%-90%的组数各占一半。
死亡率为
0%与100%时,舍去不用
2、数据转换:计算剂量对数x与死亡率概率单位y
3、对x与y进行回归分析,求出回归方程
4、由回归方程计算当y=5时的x值
5、取x值的反对数得到LD50
如某农药对急性大白鼠的LD50测定计算
得:
累积法测定LD50
1、剂量组按等差或等比级数分5-8组
2、死亡率在0-100%之间
3、分别累计各组动物死亡总数与存活总数
4、分别求各组的累计动物死亡率
5、用线性插值法求半数致死量
例:
序贯法测定
1、做实验:从接近LD50的各组动物组数n剂量开始,等比级数分4-6组;一
只一只动物进行,阳性,下一只动物用低一级剂量,反之,则相反
2、计算各组动物数
3、计算各组动物组数n与剂量对数x的乘积之与:∑nx
4、计算LD50的对数值:∑nx/∑n
5、取反对数得到LD50。