硫代葡萄糖苷的检测
芥子油苷检测
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芥子油苷检测
芥子油苷（Glucosinolate）又称硫代葡萄糖苷、硫苷，是十字花科蔬菜中的一种重要的次生代谢产物，根据侧链基团的不同，可以把硫苷分为脂肪族、芳香族和吲哚族三大类。
硫苷在芥子酶的作用下容易水解产生异硫氰酸醋、硫氰酸醋等不同化合物，这些降解产物具有较强抗菌作用及可通过诱导泛醌还原酶的活性成为致癌物质的阻断剂。
迪信泰检测平台采用高效液相色谱（HPLC）和液质联用（LC-MS）技术，可高效、精准的检测芥子油苷的含量变化。
此外，迪信泰检测平台还提供其他多种中药成分检测服务，方法成熟，可高效处理大批量样本。
HPLC和LC-MS测定芥子油苷样本要求：
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。
周期：2~3周。
项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告，报告包括：
1. 实验步骤（中英文）。
2. 相关质谱参数（中英文）。
3. 质谱图片。
4. 原始数据。
5. 芥子油苷含量信息。
迪信泰检测平台可根据需求定制其他物质测定方案，具体可免费咨询技术支持。
硫代葡萄糖甙总量速测方法氯化钯法
断提高认识的基础上迅速开展起来了。全国各油 菜育种单位相继开展了低硫甙油菜新品种的选 育工作，以开发应用这一植物蛋白资源。因此，国 家制定了油菜籽中硫甙含量的标准，在此标准中 规定油菜籽（饼）中硫甙含量≤４５．００斗ｔｏｏｌ／ｇ。所 以掌握准确可靠的油菜籽（饼）中硫甙含量的分析 测试技术，在油菜育种、良种繁殖、区域试验、收 购及饼粕利用等工作中都成为非常重要的一个 组成部分。 １． 目前常用的方法
２０枷ｍｉｎ，中间搅动两次，取出静置冷却后，用水
稀释至１０ｍｌ摇匀。 ３．２经过滤后取０．５ＩＩｌｌ放人另一带塞的５ｍｌ或 １０ｍｌ试管中，并加入０．１％羧甲基纤维素钠溶液 ２ｍｌ，（硫甙钯络合物是胶状沉淀物，影响光度的测 定。加入分散剂羧甲基纤维素钠溶液，使比色液
社，２００６． ［２］李培武，扬湄，张文。陈洪，等．油菜硫甙检测技术研究 及进展［Ｊ）．油菜品质检测技术手册，２００３．８． ［３］吴谋成，黄荣汉．油菜籽中硫代葡萄糖甙总量的快速 测定［Ｊ］．华中农业学报，１９８３，（３）：ｉ－９． ［４３丁小霞，李培武．李光明。杨艳燕。等．傅里叶变换近红 外光谱技术测定完整油菜籽中芥酸和硫甙含量［Ｊ］．中国 油料作物学报，２００４，（９）：６－１１．
万方数据
前处理过程繁琐；使用试剂、药品成本高；分析时 间长，不适合于一般基层育种单位和收购单位大
（硫甙提取物与氯化钯反应生成有色产物依硫甙 的多少分别呈不同的颜色，颜色越深，表明硫甙
硫代葡萄糖苷的检测
硫代葡萄糖苷的检测1 硫代葡萄糖苷的简介硫代葡萄糖苷 ( 以下简称硫苷）是主要分布于十字花科和刺山柑植物中的含硫次生代谢产物。
由β- D- 硫葡萄糖基、硫化肟基团和来源于氨基酸的可变侧链 R 组成。
其生物合成途径分为三部分：前体氨基酸侧链延伸、核心结构形成及次级侧链的修饰。
硫苷以稳定化合物的形式分布于植物营养器官和生殖器官中，当植物组织受到破坏时，分布于细胞质的黑芥子酶将液泡中的硫苷分解成腈、异硫氰酸酯、硫氰酸酯、恶唑烷酮等多种降解产物，反应产物因硫苷种类、金属离子、pH 值等而不同，其过程十分复杂。
2 硫苷生理功能2.1增强植物抗逆性硫苷及其降解产物具有抵御草食动物、抗病虫及抗病原微生物能力，在植物的防卫反应中发挥重要的作用。
硫苷降解产物烯丙基异硫氰酸酯、2- 苯乙基异硫氰酸酯、n- 丁基异硫氰酸酯及 1-氰基 - 2- 苯乙烷对芸苔属专食性昆虫卵具有致死作用。
其中 2- 苯乙基异硫氰酸酯致死剂量最低，烯丙基异硫氰酸酯、n- 丁基异硫氰酸酯次之，1- 氰基- 2- 苯乙烷最高。
较适应寄主植物中异硫氰酸酯含量比适应寄主植物高，因而可推测硫苷组成及浓度对专食性昆虫有影响。
异硫氰酸酯对土传病虫害防治效果因其含量、病虫对其敏感性，在土壤中的释放速率及残留时间等而不同。
当植株中 2- 苯乙基硫苷含量增加时，蚜虫数量减少，植株抗虫性增强。
2.2诱虫作用硫苷是黄曲条跳甲进行寄主选择的主要因素，同一蔬菜品种中硫苷含量与其选择性呈显著相关。
除此之外，硫苷还能刺激小菜蛾产卵，其产卵量与硫苷含量变化趋势基本相符。
因而，硫苷具有诱虫作用。
2.3致甲状腺肿大硫苷是菜籽饼中最主要的抗营养因子，其降解产物异硫酸氰盐及恶唑烷酮能够引起畜禽甲状腺肿大，并且甲状腺受损存在种间差异。
2.4抗癌吲哚族硫苷降解产物对 S180 小鼠具有抗肿瘤作用。
葡萄糖莱菔子苷（硫苷中一种）降解产物萝卜硫素是蔬菜抗癌效果最好的植物活性物质，诱导人或动物体内 Phase酶II (如谷光苷肽 - S- 转移酶、苯醌还原酶和UDP- 葡萄糖醛酸转移酶)数量的增加，抑制 Pha-seI 酶的产生，从而阻断致癌物产生的代谢途径，抑制癌细胞分裂和生长。
紫白菜花青素和硫代葡萄糖苷含量测定及其近红外光谱快速测定模型研究
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青花菜硫代葡萄糖苷含量测定及其近红外光谱快速测定模型研究
青花菜硫代葡萄糖苷含量测定及其近红外光谱快速测定模型探究摘要：硫代葡萄糖苷是青花菜中一种重要的营养成分，对于青花菜质量的评估具有重要意义。
本探究通过对青花菜中硫代葡萄糖苷含量的化学测定和近红外光谱快速测定两种方法的比较，建立了一种基于近红外光谱的青花菜硫代葡萄糖苷含量快速测定模型。
起首，通过基于氯化铵溶液提取和硫酸亚铁还原的方法，接受高效液相色谱法确定了青花菜中硫代葡萄糖苷的含量。
结果表明，最佳提取条件为：氯化铵溶液的浓度为80%，提取温度为60℃，提取时间为30min，青花菜的破坏程度为40目。
接下来，收集了160个青花菜样本的近红外光谱数据，并进行了预处理和特征提取。
最后，接受支持向量机、随机森林和偏最小二乘回归三种模型对数据进行建模和优化，得到了基于偏最小二乘回归模型的最佳猜测结果。
该模型的猜测精度达到了96.87%，同时具有较高的速度和好用性，可以作为青花菜硫代葡萄糖苷含量快速测定的可行方法。
关键词：青花菜；硫代葡萄糖苷；近红外光谱；高效液相色谱；偏最小二乘回归；猜测模型。
青花菜硫代葡萄糖苷是一种富含硫元素的营养成分，具有很高的营养价值和生理活性，对人体健康有浩繁好处。
因此，青花菜中硫代葡萄糖苷含量的测定对于青花菜质量的评估和营养价值的确定具有重要意义。
传统的测定青花菜中硫代葡萄糖苷含量的方法是接受高效液相色谱法，该方法检测灵敏度高、精度较好、可靠性较高，但需要耗费大量的时间和精力，操作复杂，成本较高。
近年来，随着近红外光谱技术的不息进步，其快速、无损、精准的特点，为青花菜中硫代葡萄糖苷含量的测定提供了一种新的方法。
本探究接受基于氯化铵溶液提取和硫酸亚铁还原的方法，确定了青花菜中硫代葡萄糖苷的含量，并比较了化学测定和近红外光谱测定两种方法的差异。
结果表明，两种方法的测定结果具有很高的一致性，且近红外光谱测定具有更高的速度和效率。
为了建立一种基于近红外光谱的青花菜硫代葡萄糖苷含量快速测定模型，本探究收集了160个青花菜样本的近红外光谱数据，并对数据进行了预处理和特征提取。
五 硫甙检测技术
油菜籽中硫代葡萄糖苷检测技术硫代葡萄糖苷（简称硫甙或硫苷）是存在于十字花科植物中的一类含硫次生代谢产物，本身无毒，但在与其伴生存在的芥子酶的作用下，降解成有毒的异硫氰酸酯、硫氰酸盐、腈类化合物等，引起动物甲状腺肿大等，饼粕难于饲用或降低其饲用价值。
因此，硫苷是油菜品质检测的重要指标。
硫苷的测定方法有多种，根据被分析的对象，硫苷分析方法可分为两类：第一类是测定硫苷降解产物，间接计算硫苷的含量；第二类是直接测定完整硫苷或其衍生物；根据分析目的不同，硫苷的分析方法又可分为总量法和分量法：总量法是测定样品中所有硫苷总含量，而不考虑其侧链（R-）的差异；分量法是测定样品中硫苷的每一种硫苷组份的含量，以研究样品中硫苷组成类型的差异及不同硫苷组份的生物效应。
按化学方法分类则有重量法、银盐滴定法、碘量法、比色法、色谱法和近红外光谱法。
高效液相色谱法、专用速测仪法（分光光度法）和近红外光谱法是目前国内外油菜籽中硫苷含量测定最常用的方法，下面对这三种方法作重点介绍。
一、高效液相色谱法1.方法原理用70%甲醇水溶液提取硫苷，在阴离子交换树脂上纯化并酶解脱去硫酸根，反相C18柱分离，紫外检测器检测硫代葡萄糖苷。
2.仪器设备（1）分析天平（2）研钵或粉碎机（3）漩涡混合器（4）水浴锅（5）离心机（6）高效液相色谱仪3.结果表示检测结果显示为色谱峰，根据标准样品对检测结果进行定性和定量换算。
硫苷测定结果表示方法有三种，一是干基饼粕中硫苷含量；二是含8.5%水杂饼粕中硫苷含量；三是含8.5%水杂油菜籽中硫苷含量。
该方法的优点是测定准确、可测定硫苷分量和总量，适于国家及部级质检中心用于出据第三方公正数据的检测及品种审定和区域试验材料硫苷含量的精确测定。
缺点是仪器设备昂贵、测试费用高、条件严格，硫酸酯酶等大部分试剂及消耗品均需进口，且分离测定时间长，不适用于菜籽收购过程中的现场快速测定。
二、专用速测仪法（分光光度法）1.方法原理油菜籽中硫苷与特异性酶和专用显色剂反应生成有特征吸收峰的有色产物，采用分光光度法测定硫苷含量。
硫代葡萄糖苷的检测
硫代葡萄糖苷的测定一、硫代葡萄糖苷的结构硫代萄糖苷是一种含硫的阴离子亲水性植物次生代谢产物。
1970年,Marsh和Waser 等对硫代葡萄糖苷晶体的X射线分析证明: 所有的硫代葡萄糖苷都有一个核心结构是β-D-葡萄糖连接一个磺酸盐醛肟基团和一个来源于氨基酸的侧链。
根据侧链R的氨基酸来源不同，可以将硫代葡萄糖苷分为脂肪族硫代葡萄糖苷（侧链来源于蛋氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸），芳香族硫代葡萄糖苷（侧链来源于酪氨酸和苯丙氨酸）及吲哚族硫代葡萄糖苷（侧链来源于色氨酸）。
不同的侧链决定了水解产物的不同,抗癌活性也存在差别。
硫代葡萄糖苷的分类主要依据侧链R的不同。
二、硫代葡萄糖苷的性质硫苷本身是一类稳定的化合物，但在芥子酶或胃肠道中的细菌酶的催化作用下会发生降解并生成多种降解产物。
硫苷与芥子酶隔离共存于植物体内。
当植物的器官受损或对植物加工时他们相接触导致硫苷降解。
硫苷和它的降解产物都具有活跃的生物化学特性。
（1）在食品中赋予产品特殊的风味，从而影响食物的适口性。
如芥末辣根的辛辣味，雪菜味等。
（2）硫苷的降解产物如OZT及硫氰酸盐等，这些降解产物能抑制甲状腺素的合成和吸收，从而引起甲状腺肿大。
三、硫代葡萄糖苷在植物中的分布在天然植物中已发现120多种不同的硫代葡萄糖苷，它们存在于11个不同种属的双子叶被子植物中，最重要的是十字花科，所有的十字花科植物都能够合成硫代葡萄糖苷。
硫代葡萄糖苷存在于这些植物的根、茎、叶和种子中，但主要存在于种子中。
另外，许多非十字花科的双子叶被子植物中也同样含有一种或两种硫代葡萄糖苷。
硫代葡萄苷在一些十字花科植物中的含量大约占干重的1%，在一些植物种子中的含量达到10%。
硫代葡萄糖苷在芸苔属蔬菜中的含量一般是500～2 000 μg/g,西兰花、花椰菜、甘兰分别含有5～6种以上的硫代葡萄糖苷，其中包括吲哚族硫代葡萄糖苷和芳香族的硫代葡萄糖苷。
四、硫代葡萄糖苷的测定（一）、分光光度法一、原理：GS在蔬菜中内源酶----芥子酶的作用下水解产生葡萄糖，用3,5—二硝基水杨酸法测定所产生的葡萄糖量，计算出GS的含量。
高效液相色谱仪-串联质谱法鉴别十字花科植物中硫代葡萄糖苷
摘要：建立超高效液相色谱仪——串联质谱法鉴别十字花科植物中硫代葡萄糖苷的分析方法。
采用70％甲醇水溶液提取白芥种子中的硫代葡萄糖苷，通过反相C12柱分离，电喷雾一离子阱一飞行时间质谱测定。
利用硫代葡萄糖苷二级质谱裂解产生的m／z l95，241，259，275，291特征离子和伴随产生的80，162，163，196，242 Da中性分子丢失规律，共鉴别出5种硫代葡萄糖苷。
硫代葡萄糖苷(简称硫苷)是广泛存在于十字花科植物中的含硫次级代谢产物，主要分布于植物的根、茎和叶中。
当植物细胞受到破坏(如挤压、虫咬等)后，硫苷与植物内生的黑芥子酶接触，降解产生异硫氰酸酯、恶唑烷酮和硫氰酸酯等化合物¨J，其中异硫氰酸酯具有良好的生物活性，而且对人畜无害。
因此硫苷及其降解产物的研究引起了科学工作者的浓厚兴趣。
根据侧链R基团的不同，目前已发现约l20种硫苷，其中有多种具有抗癌、抗肿瘤、杀菌和杀虫活性的异硫氰酸酯，如吴华等比较几种异硫氰酸酯的杀线虫活性，发现烯丙基和丙烯酰基异硫氰酸酯具有良好的杀线虫活性。
大量研究表明甲硫基己基异硫氰酸酯等具有良好的抗肿瘤活性，是非常具有潜力的抗癌药物。
硫苷的检测方法主要是传统的化学方法和现代的仪器分析手段。
化学方法耗时、误差大、操作繁琐，只能测定硫苷总量。
液相色谱法具有很高的分离效率，但对于硫苷单体鉴别需要对照品，无法满足快速鉴别硫苷的需要。
笔者采用超高效液相色谱一离子阱-飞行时间质谱联用技术，既能高效分离硫苷，又能准确、快速鉴别硫苷。
对于硫苷及降解产物的研究具有重要意义，同时又能够提高工作效率。
1实验部分1.1主要仪器与试剂超高效液相色谱仪-离子阱-飞行时间质谱仪： LCMS—IT-TOF型，日本岛津公司；数显恒温水浴锅：HH-6型，真空干燥箱：VD23型，德国81NDER公司；电子天平：AUY220型，日本岛津公司；超声波清洗器：KS-120E1型旋转蒸发仪：R-216型，瑞士BUCHl公司；台式高速离心机：H-1650型，研磨机：All基本型，德国IKA公司；白芥种子：产地为湖北武汉；正己烷、氯仿、乙酸铵、甲酸：分析纯甲醇：色谱纯，美国Fisher公司；实验用水为美国Pall公司Purelab Ultra超纯水系统制备的超纯水，电阻率为18.2 MQ•cm。
硫代葡萄糖苷测定方法
硫代葡萄糖苷测定方法
嘿，朋友们！今天咱要聊聊硫代葡萄糖苷测定方法这个超有意思的事儿！
比如说，你看咱平常吃的那些西兰花呀、芥菜呀，里面可都有硫代葡萄
糖苷呢。
那怎么知道它们里面到底有多少呢？这就需要用到一些特别的测定方法啦！
就像咱去探索一个神秘的宝藏，得有合适的工具和方法才能找到宝贝呀，硫代葡萄糖苷的测定方法就是打开这个宝藏的钥匙。
其中一种常见的方法就是高效液相色谱法。
哎呀呀，这名字听起来是不
是很高大上？其实原理很简单啦，就好比是在一个大队伍里，把硫代葡萄糖苷这种“特殊队员”给精准地挑出来。
比如说，老王在一群人中一眼就认出了老朋友老李，这就是高效液相色谱法的神奇之处呀！
还有分光光度法呢，这就像是我们用眼睛去分辨不同颜色一样。
通过一
些化学反应，让硫代葡萄糖苷显示出特别的信号，然后我们就能知道它的存在和数量啦。
你想想，这多有趣呀，不是吗？
另外呀，还有一些其他的方法，各有各的厉害之处。
就像我们每个人都有自己的特长一样，这些方法都是科学家们精心研究出来的呢。
我觉得吧，硫代葡萄糖苷测定方法就像是一把神奇的尺子，能让我们更清楚地了解这些食物的奥秘。
我们可以通过这些方法，知道哪些食物含的硫代葡萄糖苷多，对我们的身体有好处呀。
所以呀，大家是不是对硫代葡萄糖苷测定方法更感兴趣了呢？赶紧去了解更多吧！。
饲料中硫代葡萄糖苷_异硫氰酸酯和恶唑烷硫酮生物作用及其检测方法_董晓芳
动物营养学报２０１３，２５（３）：４６９－４７８Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｎｉｍａｌ Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００６－２６７ｘ．２０１３．０３．００４饲料中硫代葡萄糖苷、异硫氰酸酯和唑烷硫酮生物作用及其检测方法董晓芳 佟建明＊（中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，北京１００１９３）摘 要：十字花科芸苔属植物，尤其是其种子饼粕是饲料中硫代葡萄糖苷的主要来源，不同浓度和结构的硫代葡萄糖苷降解产物可以产生抗营养作用、毒害作用、保健作用等完全不同的生物作用。
欧盟和我国都对饲料中异硫氰酸酯和唑烷硫酮的限量做了规定。
针对异硫氰酸酯和唑烷硫酮的检测方法很多，但欧盟并没有推荐标准的检测方法。
我国饲料中异硫氰酸酯和唑烷硫酮检测方法标准正在修订之中。
因此，需要对硫代葡萄糖苷及其降解产物在动物中的生物作用进行重新认识和深入研究，并建立相应的检测方法标准，保障和促进油菜籽饼粕等十字花科植物及其副产物饲料的科学有效利用。
本文旨在通过从饲料中硫代葡萄糖苷及其代谢产物异硫氰酸酯和唑烷硫酮的来源、生物作用、限量规定、检测方法、方法标准方面进行分析和总结，从而对饲料中硫代葡萄糖苷、异硫氰酸酯和唑烷硫酮的研究进展作一综述。
关键词：硫代葡萄糖苷；异硫氰酸酯；唑烷硫酮；饲料中图分类号：Ｓ８１６．２ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００６－２６７Ｘ（２０１３）０３－０４６９－１０收稿日期：２０１２－０９－０７基金项目：国家蛋鸡产业技术体系建设专项经费（ＣＡＲＳ－４１－Ｋ１６）作者简介：董晓芳（１９７５—），女，山西柳林人，副研究员，博士，主要从事蛋鸡营养与饲料研究。
Ｅ－ｍａｉｌ：ｘｉａｏｆａｎｇｄ１１２４＠ｓｉｎａ．ｃｏｍ＊通讯作者：佟建明，研究员，博士生导师，Ｅ－ｍａｉｌ：ｔｊｍ６０６＠２６３．ｎｅｔ 近年来，在环境保护、节约成本、低碳养殖及替代抗生素饲料添加剂的大趋势下，对植物及其副产物包括十字花科芸苔属（Ｂｒａｓｓｉｃａ）植物（如西兰花、花椰菜、芥菜、油菜）饲料资源的开发和利用日渐活跃。
分光光度法测定油菜籽中硫代葡萄糖甙
分光光度法测定硫代葡萄糖甙
1 方法原理
加入分散剂羧甲基纤维素钠溶液，硫甙与氯化钯反应生成有色硫甙钯溶胶清液。
硫甙含量越高，溶液颜色越深。
因此硫甙含量可通过比色定量。
2 实验与方法
2．1 试剂与仪器
2．1．1 试剂8mmol／L氯化钯；0．15 %羧甲基纤维素钠溶液。
其它试剂均为分析纯。
2．1．2 仪器微机化分光光度计，四孔或六孔
恒温水浴锅。
2．2 测定步骤
准确称取经研碎的油菜籽或菜饼100mg，移入10ml具塞刻度试管中，沸水浴中干蒸10min，加沸蒸馏水6～8ml，再蒸煮30min。
取出冷却后定容至10ml，过滤。
取滤液2ml于10ml比色管，加4ml 0．15 %的羧甲基纤维素钠，摇匀后再加2ml 8m mol／1的氯化钯显色溶液，在22±3℃放置2h，在微机化分光光度计540mm 处用lcm 比色皿，以氯化钯——羧甲基纤维素钠空白溶液作参比溶液，测其消光度.
2．3 标准曲线的制作
准确称取100mg硫甙含量分别为
10~mol／g、20~mol／g 30~mol／g、40~mol／g、50~mol／g左右的标
准油菜籽(液相色谱法测定)于10ml 具塞刻度试管中，同样品测定一样 进行下去，以硫甙含量为横座标，消光度为纵座标作标准曲线(图1)。
2．4 硫甙含量的计算
据硫甙标准曲线：A=0.0596+0.00428C 得
硫甙含量C(umo1／g)=00428.00596.0 A。
五 硫甙检测技术
油菜籽中硫代葡萄糖苷检测技术硫代葡萄糖苷（简称硫甙或硫苷）是存在于十字花科植物中的一类含硫次生代谢产物，本身无毒，但在与其伴生存在的芥子酶的作用下，降解成有毒的异硫氰酸酯、硫氰酸盐、腈类化合物等，引起动物甲状腺肿大等，饼粕难于饲用或降低其饲用价值。
因此，硫苷是油菜品质检测的重要指标。
硫苷的测定方法有多种，根据被分析的对象，硫苷分析方法可分为两类：第一类是测定硫苷降解产物，间接计算硫苷的含量；第二类是直接测定完整硫苷或其衍生物；根据分析目的不同，硫苷的分析方法又可分为总量法和分量法：总量法是测定样品中所有硫苷总含量，而不考虑其侧链（R-）的差异；分量法是测定样品中硫苷的每一种硫苷组份的含量，以研究样品中硫苷组成类型的差异及不同硫苷组份的生物效应。
按化学方法分类则有重量法、银盐滴定法、碘量法、比色法、色谱法和近红外光谱法。
高效液相色谱法、专用速测仪法（分光光度法）和近红外光谱法是目前国内外油菜籽中硫苷含量测定最常用的方法，下面对这三种方法作重点介绍。
一、高效液相色谱法1.方法原理用70%甲醇水溶液提取硫苷，在阴离子交换树脂上纯化并酶解脱去硫酸根，反相C18柱分离，紫外检测器检测硫代葡萄糖苷。
2.仪器设备（1）分析天平（2）研钵或粉碎机（3）漩涡混合器（4）水浴锅（5）离心机（6）高效液相色谱仪3.结果表示检测结果显示为色谱峰，根据标准样品对检测结果进行定性和定量换算。
硫苷测定结果表示方法有三种，一是干基饼粕中硫苷含量；二是含8.5%水杂饼粕中硫苷含量；三是含8.5%水杂油菜籽中硫苷含量。
该方法的优点是测定准确、可测定硫苷分量和总量，适于国家及部级质检中心用于出据第三方公正数据的检测及品种审定和区域试验材料硫苷含量的精确测定。
缺点是仪器设备昂贵、测试费用高、条件严格，硫酸酯酶等大部分试剂及消耗品均需进口，且分离测定时间长，不适用于菜籽收购过程中的现场快速测定。
二、专用速测仪法（分光光度法）1.方法原理油菜籽中硫苷与特异性酶和专用显色剂反应生成有特征吸收峰的有色产物，采用分光光度法测定硫苷含量。
气相和高效液相色谱法测定油菜籽(饼)中的硫代葡萄糖甙
表 １
校
正
系
数
表
量 浸泡好了的Ｄ Ａ －ｅｈｄｘ ２，沿 Ｅ Ｅ Ｓｐａｅ Ａ ５ －
柱壁注入柱内，制成一个高约 １ｍｍ的层析 柱 （ 相当于１０ ｇ ０ｍ ），待水面快要接近柱面
时，盖上塞子，以防水全部流干。
２ ．样品制备： 准 确 称 取脱 脂 样 品
０ ０ｇ ０ １ ２ ０ 于１ｍ 离心管中 加沸水４ ｌ在沸水 ， ｍ，
２ Ｖ７ ％Ｏ －固定液，Ｃ ｒｍ ｓｒ Ｗ Ｗ ｈｏ ｏｏｂ Ａ ＤＭＣ 担体 （０ ０ Ｓ ６—８目）。高效液相色谱采用４ ｍ ｍ ２０ ｍ ５ｍ 不锈钢柱，柱内填充Ｙ ＷＧ－ １ ７１ Ｃ８ （０ｍ ２。流动相为 ３ Ｈ３ ） ％乙腈，Ｕ ２０ｍ Ｖ－２ｎ 检 测。ＧＣ 和ＨＰ 测定结果一致。 ＬＣ 与经典重量法对照， 总量绝对误差小于１ ２ｍ ｌ ． ｏ １ ／。气相和 液相色谱重复性试验，总量的标准偏差分别为０ ０ ． 。首次指出我国油菜含有吲 类硫代 ． 和０ ７ １ ６ 胚 哚
故： 内标峰 面积＝ 丙烯基硫甙 面积一 样品中 原有烯丙基硫甙峰 面积。
４ ．气相色谱测定和结 果 的计 算：取 ２ｌ ｍ 制备液在８ ℃水浴锅中，用旋转蒸发器 ０
蒸干或放在衍生管中，在１０ 以 ０ 下放有干 燥硅胶的烘箱中烘干。加入吡啶 １０ ０ｌ，
Ｂ Ｔ Ａ ０１ ＭＣ １ 。塞紧瓶塞， Ｓ Ｆ １ ，Ｔ Ｓ ０ ０１ 振动摇匀。在 １０ ２℃保温２分钟，制备衍生 ０
研究报告
气相和高效液相色谱法测定油菜籽（ 饼） 中的硫代葡萄糖甙＊
吴谋成 熊时中 袁俊华 周永明 牟同敏
（ 华中农业大学 中 心实验室，武汉）
［ 提要］ 本文报道气相色谱和高效液相色谱法测定油菜籽（ 饼）中硫代葡萄糖甙的样品预
菜籽中硫代葡萄糖甙的hplc测定方法
菜籽中硫代葡萄糖甙的hplc测定方法
一、样品制备
1.取一定量的菜籽样品，并将其研磨成粉末状。
2.将研磨好的样品加入适量的提取溶剂（如80%甲醇水溶液），进行液-液提取。
3.使用离心机对提取液进行离心，以去除残留的杂质。
4.取上清液进行浓缩，直至溶液体积减少至一定程度。
二、色谱条件设定
1.使用反相高效液相色谱（RP-HPLC）技术进行测定。
2.选取适合的色谱柱，常用的柱包括C18柱。
3.选择合适的流动相体系，常用的流动相体系包括甲醇和水的混合溶液，并可以适量添加酸或碱调节pH值。
4.确定流速和温度条件，以保证良好的色谱分离效果。
三、样品注射和检测
1.使用自动进样器将样品溶液注入色谱柱中。
2.设置合适的梯度洗脱程序，以实现目标物的分离。
3.使用紫外检测器对目标物进行定量检测，一般选择适当的波长进行检测。
四、数据处理和分析
1.使用色谱数据处理软件对得到的色谱图进行峰面积或峰高的计算。
2.根据菜籽中硫代葡萄糖甙的标准曲线，将峰面积或峰高转化为目标
物的浓度。
3.对于复杂样品矩阵，可以使用色谱前处理方法进行样品预处理，以
提高分析的准确性。
总结：以上所述为菜籽中硫代葡萄糖甙的HPLC测定方法的一般步骤。
实际操作中，还需根据不同的样品特性和分析要求进行具体的优化和改进。
荠菜中硫代葡萄糖苷含量的测定
称取 ５ ０ ｇ粉碎的荠菜用石油醚脱脂后 ，将样 品全部转移
实验 部分
实验 设 备 电子天平 ，恒温鼓 风干燥箱 ，电子 调温电热套 ，电子恒
温水浴锅 ， 锥形 瓶 ， 烧杯 ， 量筒 ， 漏斗， 普通滤纸 ， 定量滤纸 ， 玻璃棒 ，温度计 。
季 ， 一 手 长 宝薛 春 梅李 春 丰韩 诚 武
影 响 力 … …
行业关联度
真实度
基 金 项 目 ：黑 龙 江 省 教 育 厅 科 学 技 术
１ ，到 目前为止对硫苷 的研究主要集 中在十字花科的蔬菜类植物和 已经记载入药 的十
研究项 目 （ １ ２ ５ ４ １ ８ ０ ８ ）； 佳木斯大 字 花科 植 物， 对野 生 荠 菜 硫 苷的 研 李几 辱空白 。 而 本 实 验以 十 字 花 科 荠 菜属 广 泛分 布
到 １ ０ ０ ０ ｍＬ锥 形瓶 中 ，并加 入 ５ ０ ０ ｍＬ蒸馏 水 ，放 到 ５ ０ ℃ 水 浴中进行 水解 ６ ０ ｍｉ ｎ ，然后加 热沸腾提 取 １ ２ ０ ｍｉ ｎ ，趁热 的时候进行抽滤并收集滤液 ， 样 品 滤渣 用 １ ０ ０ ｍＬ热 蒸馏 水 清 洗 ，共 清 洗 ３次 。滤 液 和 洗 涤 液合 并 为 提 取 液 。在提 取 液 中 加 入 ６ ｍｏ ｌ ／ Ｌ盐 酸 ２ ０ ｍＬ，然后放到 ９ ０ ℃水 浴中 。搅拌的同时缓慢加入 ５ ％ 氯 化钡溶液 ６ ０ ｍＬ，在 ９ ０ ℃水浴 中放置 １ ２ ０ ｍｉ ｎ 然 后让其 自
２ ０ １万 ～ ５ ０ ０万 ◎
一
ｎｋ ａｐｐｒ ａｉ ｓ ｅｍ ｅｎｔ
一
行 业 曲 线
油菜硫代葡萄糖苷检测技术研究进展
油菜硫代葡萄糖苷检测技术研究进展Abstract: The content of glueosinolates is a key indicator of rape seed quality, the analytical methods of which are the bases of quality breeding. The development and comparasion of the analytical techniques for glucosionolates determination were presented. Then the existing technical problems and the vision of improvement was pointed out.Key words: glueosinolates; analytical technique; determination我国油菜播种的总面积和总产量都位于世界首位,约占世界油菜的30%[1]｡油菜子加工食用植物油后可获得菜子饼粕,菜子饼粕富含氨基酸且组成合理,其营养价值､消化率等都高于大豆蛋白,是优质饲料蛋白资源｡但是由于菜子饼粕中含有硫代葡萄糖苷(Glucosinolate,以下简称硫苷),它在水解酶作用下会分解产生异硫氰酸酯(ITC)､恶唑烷硫酮(OZT)及腈等有毒物质,影响动物健康,使得器官组织形态发生改变,更为严重者甚至可能造成牲畜中毒死亡,影响饼粕的饲用效果和价值[2]｡因此,在油菜品质育种过程中需降低硫苷含量｡为降低硫苷,首先需要精确测定其在油菜子中的含量｡所以,发展先进实用的硫苷检测技术意义重大[3]｡1硫苷由磺酸肟部分(Sulfonated oxime)､β-硫代葡萄糖(β-thio-glucose)和一个可变的侧链(R,Side-chains)三部分构成｡R基团是硫苷的可变部分,R基团不同,硫苷的种类和性质也就不同[4]｡由于硫苷结构的多样化和降解产物的多变性使得对其精确分析很难｡1.1测定解离产物葡萄糖1.1.1葡萄糖试纸法利用医用尿糖测试试纸,检查油菜子中的葡萄糖｡具体做法为:将10粒左右菜子碾碎后加少量蒸馏水,取1 cm左右长度的试纸浸入,根据试纸变色程度粗略确定葡萄糖的含量｡该方法具有操作简单､经济快速等特点,适用于育种早期世代低硫材料的筛选[8]｡在该方法的基础上,日本学者山守城进行了改进,将双面胶带贴在有机玻璃板上并形成“井”字状,测定时放上油菜子1~5粒,用小锤砸碎,然后加适量蒸馏水,再浸入大约0.7 cm的试纸,每个材料做适当重复,比较变色的程度[15]｡1.1.2麝香草酚法由波兰学者Brzeninski和Mendelewsi于1984年建立,利用DEAE葡聚糖A25层析微柱提纯硫苷｡麝香草酚在浓硫酸作用下,与硫苷中的β-硫代葡萄糖残基发生颜色反应,用葡萄糖作为标准工作曲线,当测出未知样品生成的颜色在最大吸收波长下的吸光度,就可以由葡萄糖标准曲线求得硫苷的含量｡1987年戈兰英[9]提出采用丙烯基硫苷或已知硫苷含量的饼粕在与样品处理相同的操作条件下制作标准曲线,避免了用葡萄糖作标准曲线时,不经吸附和洗脱带来的误差｡此方法测定所需试剂较普通,操作简单,结果较为准确,但麝香草酚与硫酸溶液中碳水化合物､DEAE离子交换树脂也能起显色反应,因此,测定过程中对实验用具的清洁度要求特别严格,如有极微量的树脂漏出便会引起较大的测定误差;浓硫酸废液处理不当会危害人体,污染环境;该方法所需试剂如葡萄糖标准液､硫酸溶液均需新鲜配制｡1.1.3蒽酮比色法油菜子中硫苷在内源酶作用下产生葡萄糖,采用蒽酮葡萄糖比色法间接计算硫苷的总量｡该方法操作简便､快速､节约样品,适合于育种中低世代材料的分析[10]｡1.1.43,5-二硝基水杨酸比色法以3,5-二硝基水杨酸作为显色剂,测定硫苷在内源酶的作用下产生的葡萄糖含量,间接计算硫苷的总量｡该方法操作简便,试剂和仪器设备简单,不需要脱脂处理｡但该方法选用的试剂有毒性,酶解时间是关键,是否彻底酶解将直接影响测定结果的准确性,对硫苷含量较低的材料灵敏度较差,且测定时需要的试剂每次均需新鲜配制｡1.2测定解离产物硫酸根用盐酸处理硫苷,或用强氧化剂氧化硫苷或样品中的总硫等,将硫转化为硫酸根,测出硫酸根含量｡这类方法中最突出的问题就是非硫苷的硫酸根影响分析结果｡1.2.1重量法将硫苷在内源酶作用下降解,得到葡萄糖､硫酸盐和有害化合物各一分子,然后在高温下灼烧,测定硫酸盐含量,间接计算出硫苷含量｡1.2.2EDTA容量法用70%甲醇溶液提取油莱子中硫苷,并将提取液蒸干,加HNO3-KNO3在蒸汽浴中和高温炉550℃消化,用过量BaCl2完全沉淀酶解菜子提取液中的SO42-,再用EDTA标准液滴定残留的Ba2+,通过SO42-的量,得到硫苷的总量｡这种方法只需要普通仪器和常规药品,计算简单,但是操作繁琐,所需时间较长,滴定终点较难掌握,不适合批量材料的筛选,适用于高世代材料的定量分析[11]｡1.2.3电位滴定法这是我国20世纪80年代初期主要使用的方法｡样品在高酸和高氯锰酸钾的作用下分解氧化或直接燃烧油菜子(饼),把样品中有机硫变成硫的氧化物,并转化为SO42-,用电位滴定法测定出SO42-的总量,同时扣除蛋白质中含硫量(约0.16%)后,得到硫苷含量｡该方法计算出的硫苷含量很粗略,可靠性较差[12]｡1.3测定解离产物异硫氰酸酯及其衍生物､脱硫硫苷1.3.1硫脲紫外光谱法由加拿大Wetter和Youngs提出,1983年成为硫苷测定的国际标准方法｡硫苷在芥子酶(白芥脱脂后的产品)作用下酶解后产生的不稳定中间体,在pH值为7的条件下生成异硫氰酸酯(ITC)｡ITC不稳定,在极性溶剂(氨乙醇)中能自动环化成唑烷硫酮(OZT)｡OZT以及ITC与氨作用生成的硫脲形成一定的共轭体系,在紫外区245nm有最大吸收峰,根据OZT和ITC的含量计算出硫苷的含量｡由于芥子酶的制取需要昂贵的造价,戈兰英等[13]将此方法改良,不经过种子杀活过程,就可保持种子内芥子酶的活性从而完成酶促反应｡中国农业科学院油料作物研究所品质育种组也对硫脲紫外光谱法进行改进,用气相色谱法直接测定具挥发性的ITC,而OZT依然用紫外色谱法｡但此方法只能对硫苷降解产物中3-丁烯基异硫氰酸酯､4-戊烯基异硫氰酸酯和2-羟基-3-丁烯基异硫氰酸酯转化的OZT进行定量分析,而酚基硫苷､吲哚类硫苷､苄基硫苷等因不产生ITC和OZT而不能被测出,结果偏低｡此方法适合加工后菜子饼粕质量评价及脱毒技术评价,以及配合饲料的ITC､OZT含量的测定[14]｡1.3.2国家标准方法①GB13089-1991《(饼粕)饲料中恶唑烷硫酮的测定方法》｡该方法参照ISO5504-1983《含油种子及其去油后饼粕中异硫氰酸盐和恶唑烷硫酮的测定》编制｡用乙醚萃取硫苷在芥子酶作用下的水解产物,取OZT用UV测定｡②GB13087-1991《(饼粕)饲料中异硫氰酸盐酯的测定方法》｡该标准包含了两种检测方法:一是用二氯甲烷提取硫苷在芥子酶作用下生成的ITC,然后用气相色谱测定;二是银量法,将硫苷酶解后生成的ITC用水汽蒸出,再用硝酸银—氢氧化铵溶液吸收,过量的硝酸银在酸性条件下用硫氰酸铵回滴,并采用硫酸铁铵为指示剂,计算出ITC的含量,最后得到硫苷的含量｡此方法操作步骤多[15]｡2直接测定硫苷含量2.1氯化钯目测法氯化钯目测法由德国哥廷根大学Thies提出｡硫苷提取物在酸性条件下与氯化钯生成颜色复合体,依硫苷含量多到少,分别呈现黑､褐､橘黄､黄4种颜色,颜色越深,硫苷含量越高｡该方法所需设备简单,操作方便,检测速度快,但受环境条件影响较大,重复性较差,此方法曾用于20世纪80年代油菜育种早期世代材料的筛选[16]｡2.2氯化钯定量测定法1983年吴谋成等[17]改良氯化钯目测法,在实验中加入一定量的分散剂甲基纤维素钠溶液时,沉淀消失,溶液变得清亮,用比色法测定,在540 nm和420 nm处均具有较大的消光值｡该方法不需要特殊试剂,测定用具清洗容易,测定所需的时间短,操作技术容易掌握｡不足之处在于对硫苷含量较低和较高的材料存在一定的偏差｡2.3纸色谱法纸色谱法是早期研究硫苷成分的方法之一｡采用纸层析将完整硫苷组分分离,通过斑点的数目及大小变化估测出油菜子中硫苷分量｡该方法是一种半定量､简便､低成本的方法[18]｡2.4TMS气相色谱法用三甲基硅烷化试剂(TMS)与脱硫硫苷反应,生成具有挥发性的三甲基甲硅烷脱硫衍生物,利用气相色谱法测定,根据内标法可以测出各硫苷分量,分量之和即为硫苷总量｡由于该法对易于热解的吲哚类硫苷分解的规律性难以掌握,不能正确定量,因此得到的各硫苷分量之和并不能代表油菜子中的硫苷总量[19]｡1983年巴黎国际分析化学会议上,专家指出TMS法重现性差,对同一样品测定结果差异大｡2.5近红外反射谱测量法近红外反射谱测量法是Velasco等[20]提出的一种可以同时测定菜子硫苷总量､含油量､蛋白质含量以及脂肪酸组成的对材料无损伤､快速､准确的分析方法｡样品测试随模型的优化和数据的累积,精确度可以不断提高,其测试的范围也可以不断增加｡但要建立近红外分析模型必需有大批量已知标准化学值的样品,且样品要有代表性,建立的模型需要不断优化完善｡样品标准化学值的准确性和样品的代表性都直接影响模型的质量;此外模型的地域性强,模型传递困难｡2.6高效液相色谱法(HPLC法)1980年Helboe率先提出用高效液相色谱仪分析完整的硫苷[21],虽然当时的分离效果并不好,但是随着近几年来的不断发展,表明高效液相色谱仪分析是比较理想的分析手段,是自1990年代以来国际上普遍采用的硫苷定量测定方法｡国际标准化组织于1992年颁布了HPLC测定油菜子中硫苷测量标准[标准号ISO9167-1:1992(E)]｡HPLC技术包括离子对技术和反相HPLC技术｡离子对技术可直接测定整个硫苷分子,速度快､简便,但其使用的缓冲液和平衡液对HPLC仪器非常不利,对分辨某些主要硫苷效果不好｡反相HPLC技术是通过测定脱硫硫苷而测出硫苷的含量｡该方法原理是用甲醇溶液从油菜子粒中提取完整硫苷,接着在阴离子交换树脂上纯化,用硫酸酯酶脱去硫苷的SO42-后,使与N原子相连的SO42-被-OH所取代,然后再用反相高效液相色谱法进行分离分析｡由于各硫苷分量的相对校正因子在各实验室进行了固定,使得实验误差大幅度地减少｡此方法能测定包括主要硫苷在内的10多种硫苷成分[22,23]｡该方法的优点是既可准确测定硫苷分量,又可测定总量,适于硫苷的精确测定｡多应用于国家及部级质检中心出具检测报告,品种审定､区域试验材料硫苷含量的测定｡缺点是硫苷脱硫预处理的过程耗时长(一般为16 h),脱硫产物受pH值､酶解时间､酶活性等因素的影响,HPLC相关仪器设备昂贵､测试费用高､条件严格,硫酸酯酶等大部分试剂及消耗品均需进口[24]｡2.7高效毛细管电泳技术(HPCE法)高效毛细管电泳技术是近年来发展的高效分离技术,根据不同硫苷成分带电量及极性差异,采用高效毛细管电泳直接测定完整硫苷含量｡Bringmann等[25]利用胶束电动毛细管色谱法,并在缓冲液中加入表面活性剂成功地分离检测了硫苷｡李培武等[26]优化了胶束电动色谱法中分离完整硫苷的缓冲液浓度､pH值､表面活性剂浓度､电压､温度等条件,成功地建立了油菜完整硫苷胶束电动毛细管电泳检测技术｡这种方法可以省去脱硫处理的过程,但由于硫苷分子的电荷密度较低,分离所需的时间较长,硫苷的定性分析也需要硫苷标准品｡相对于高效液相色谱法,毛细管电泳法具有以下优点:试剂､仪器价格低,电泳分离干扰因素少,分离条件容易控制,柱效高｡高效液相色谱法所采用的试剂大多数是对环境有污染的,而毛细管电泳法是高效低成本环境友好型检测技术,现在已开始在国内外一些专业实验室应用[27]｡3小结现有的各种硫苷测试方法,每种都各有其独特的优势以及不足,目前尚无某一种方法占有绝对的主导优势｡如何在种类繁多的测试方法中选取一项合适的方法进行测试,对提高工作效率具有非常重要的意义｡检测方法应根据对硫苷研究目的意义的不同来选取,如对油菜育种材料简单筛选,可选用一些分析速度快,操作简易和花费少的方法,如葡萄糖比色法､氯化钯法以及紫外光谱法等;对油菜新品种区域试验､新品种审定和育种高世代材料筛选,需要精确测定技术,可以采用高效液相色谱检测技术和高效毛细管电泳法;对硫苷结构研究则需要红外光谱和核磁共振技术等｡。
对辣根中硫代葡萄糖甙的纯化与鉴定及水解条件的研究的开题报告
对辣根中硫代葡萄糖甙的纯化与鉴定及水解条件的研究的开题报告题目：对辣根中硫代葡萄糖甙的纯化与鉴定及水解条件的研究一、研究背景硫代葡萄糖甙是一类在许多植物以及动物体内广泛存在的化合物，具有广泛的药理活性。
辣根是一种常见的调味料，其中含有丰富的硫代葡萄糖甙，如异硫氰酸烯丙酯酶等，具有抗菌、抗氧化、防癌等生物活性。
因此，对辣根中硫代葡萄糖甙的纯化与鉴定及水解条件的研究，既有重要的理论意义，也具有重要的应用价值。
二、研究内容1.硫代葡萄糖甙的纯化与鉴定：采用丙酮沉淀法、硅胶柱层析法等方法分离得到辣根中的硫代葡萄糖甙，并利用紫外光谱、红外光谱、核磁共振、高分辨质谱等手段对其进行鉴定。
2.硫代葡萄糖甙的水解条件研究：采用不同的水解条件（如不同pH 值、温度、酶种类等），对硫代葡萄糖甙进行水解反应，通过高效液相色谱法等手段对水解产物进行分离鉴定，并对比不同水解条件下的产物种类和产率变化。
三、研究意义1.为辣根中硫代葡萄糖甙的提取与利用奠定基础，为进一步开发利用其生物活性提供参考。
2.丰富硫代葡萄糖甙的化学性质和应用价值，为其在药物、医学、食品等领域的开发利用提供理论支持。
3.对辣根中的生物活性成分开展深入研究，丰富物质基础与技术手段，为提高我国药品、食品等产业的竞争力和发展水平提供支撑。
四、研究方法1.辣根中硫代葡萄糖甙的提取：采用浸提和超声辅助提取方法。
2.硫代葡萄糖甙的纯化与鉴定：丙酮沉淀法、硅胶柱层析法、紫外光谱、红外光谱、核磁共振、高分辨质谱等手段。
3.硫代葡萄糖甙的水解条件研究：不同pH值、温度、酶种类等条件下进行水解反应，通过高效液相色谱法等手段对水解产物进行分离鉴定。
五、预期成果1. 辣根中硫代葡萄糖甙的纯化与鉴定方法。
2. 辣根中硫代葡萄糖甙的水解条件研究数据。
3. 硫代葡萄糖甙水解产物结构和产率的变化规律。
4. 对辣根中的生物活性成分开展深入研究，为其在药物、医学、食品等领域的开发利用提供理论支持。
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硫代葡萄糖苷的测定
一、硫代葡萄糖苷的结构
硫代萄糖苷是一种含硫的阴离子亲水性植物次生代谢产物。
1970年,Marsh和Waser等对硫代葡萄糖苷晶体的X射线分析证明: 所有的硫代葡萄糖苷都有一个核心结构是β-D-葡萄糖连接一个磺酸盐醛肟基团和一个来源于氨基酸的侧链。
根据侧链R的氨基酸来源不同，可以将硫代葡萄糖苷分为脂肪族硫代葡萄糖苷（侧链来源于蛋氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸），芳香族硫代葡萄糖苷（侧链来源于酪氨酸和苯丙氨酸）及吲哚族硫代葡萄糖苷（侧链来源于色氨酸）。
不同的侧链决定了水解产物的不同,抗癌活性也存在差别。
硫代葡萄糖苷的分类主要依据侧链R的不同。
二、硫代葡萄糖苷的性质
硫苷本身是一类稳定的化合物，但在芥子酶或胃肠道中的细菌酶的催化作用下会发生降解并生成多种降解产物。
硫苷与芥子酶隔离共存于植物体内。
当植物的器官受损或对植物加工时他们相接触导致硫苷降解。
硫苷和它的降解产物都具有活跃的生物化学特性。
（1）在食品中赋予产品特殊的风味，从而影响食物的适口性。
如芥末辣根的辛辣味，雪菜味等。
（2）硫苷的降解产物如OZT及硫氰酸盐等，这些降解产物能抑制甲状腺素的合成和吸收，从而引起甲状腺肿大。
三、硫代葡萄糖苷在植物中的分布
在天然植物中已发现120多种不同的硫代葡萄糖苷，它们存在于
11个不同种属的双子叶被子植物中，最重要的是十字花科，所有的十字花科植物都能够合成硫代葡萄糖苷。
硫代葡萄糖苷存在于这些植物的根、茎、叶和种子中，但主要存在于种子中。
另外，许多非十字花科的双子叶被子植物中也同样含有一种或两种硫代葡萄糖苷。
硫代葡萄苷在一些十字花科植物中的含量大约占干重的1%，在一些植物种子中的含量达到10%。
硫代葡萄糖苷在芸苔属蔬菜中的含量一般是500～2 000 μg/g,西兰花、花椰菜、甘兰分别含有5～6种以上的硫代葡萄糖苷，其中包括吲哚族硫代葡萄糖苷和芳香族的硫代葡萄糖苷。
四、硫代葡萄糖苷的测定
（一）、分光光度法
一、原理：
GS在蔬菜中内源酶----芥子酶的作用下水解产生葡萄糖，用3,5—二硝基水杨酸法测定所产生的葡萄糖量，计算出GS的含量。
二、仪器及试剂：
1、实验材料
(1)3,5-二硝基水杨酸、酒石酸钾钠、氢氧化钠、苯酚、无水葡萄糖、氟化钠、醋酸铅、硫酸钠。
(2)市售大头菜、油菜、白萝卜
2、仪器
(1)722分光光度计；(2)恒温水浴锅；(3)电炉；(4)刻度比色管；(5)容量瓶；(6)漏斗；(7)研钵；(8)温度计；(9)砧板、菜刀。
三、实验步骤
1、标准曲线的制作
（1）3,5-二硝基水杨酸的配置
取酒石酸钾钠182g及用3,5-二硝基水杨酸7g，加热溶解于500mL 蒸馏水中，加入15g氢氧化钠，溶解后再加4g苯酚及1g无水亚硫酸钠，溶解后定容至1000mL，放置一周后备用。
（2）葡萄糖标准溶液的配置
取0.100g无水葡萄糖，蒸馏水溶解并定容至100mL，此溶液每mL含葡萄糖1.0mg
（3）葡萄糖标准曲线的绘制
取6支10mL刻度试管，依次加入葡萄糖标准溶液0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mL,用蒸馏水补足至1mL，加入3,5-二硝基水杨酸溶液3mL混匀，于沸水浴中保温10min（使其完全反应）后取出，冷却至室温后定容至10.0mL，于530nm处测吸光度值，以葡萄糖量为横坐标，以吸光度为纵坐标绘制标准曲线。
2、样品的酶解
选取大头菜表皮、中间、中心部位，油菜的根、茎、叶部位，萝卜的表皮、中间、中心部位，准确称取研磨每种样品0.500g两份，分别置于两支25mL刻度试管中，各加氟化钠0.1g。
在一支试管中加沸水20mL,立即加热至沸并保持10min。
在另一支试管中则加入35~38度蒸馏水20mL，置37度水浴中保温酶解1小时，使GS在芥子酶作用下水解。
完成酶解后加热至沸并保持10min。
3、GS总量的测定
在两支试管中分别加入6滴中性醋酸铅，以沉淀其中的蛋白质及色素类物质，过量的醋酸铅应用饱和的硫酸钠溶液消除。
最后，加蒸馏水定容至25mL，用滤纸过滤至试管中。
取滤液各0.5，按葡萄糖标准曲线绘制方法，分别测定其吸光度。
四、GS总量的计算
GS=（m2-m1）×50×2.207／m×100％
式中: m1—灭酶管从标准曲线上查得的相应葡萄糖量，mg m2—酶解管从标准曲线上查得的相应葡萄糖量，mg
m—样品质量，mg
2.207——是硫葡萄糖转化为硫葡萄糖苷的系数
五、误差分析
1、标准曲线的制作
绘制的标准曲线不过原点，可能是由于测量时参比溶液的配制不准确，引入了少量影响光吸收物质。
2、硫代葡萄糖苷含量的测定
测定结果中，有的测定值不合理。
可能是在样品研磨中并转移至比色瓶过程中，由于研磨及在空气中停留时间过长，还有研磨时产生的热，使芥子酶作用于植物体，即灭酶处理的样品在灭酶前有部分葡萄糖苷已被酶解，缩小灭酶前后的差值及人为的偶然误差引起。