总可溶性酚和木质素含量的测定
木素中酚羟基和总羟基的定量测定
任务名称：木素中酚羟基和总羟基的定量测定引言木素是一类存在于植物细胞壁中的天然高分子化合物，它的主要组成部分是木质素。
木质素是由苯丙基醇类化合物聚合而成的大分子聚合物，其中包含了酚羟基和其他羟基。
对木素中酚羟基和总羟基的定量测定可以帮助我们了解植物的细胞壁的化学组成和性质，对于材料科学、生物学、农业等领域具有重要意义。
二级标题：酚羟基和总羟基的定义和特性酚羟基的定义和特性酚羟基是指木质素分子中的苯环上带有一个羟基的基团。
羟基是一个氧原子连着一个氢原子的基团，它具有亲水性和反应活性。
在木素中，酚羟基的数量和分布情况会影响木素的性质和功能。
总羟基的定义和特性总羟基是指木质素分子中所有带有羟基的基团的总和。
它包括了酚羟基以及其他可能存在的羟基，比如苯环上的多个羟基基团。
总羟基的数量可以反映木素的羟基含量，并间接反映出木素的分子结构和化学性质。
二级标题：酚羟基和总羟基的定量测定方法一般原理酚羟基和总羟基的定量测定可以采用化学分析方法或光谱分析方法。
化学分析方法常用的是滴定法，光谱分析方法常用的是紫外-可见光谱法和红外光谱法。
这些方法都是通过测定木素样品中的羟基与特定试剂或光源的反应来进行定量测定。
滴定法滴定法是通过向木素样品中滴加标准溶液来测定其中羟基的含量。
常用的滴定试剂有氢氧化钠溶液、硫酸、碘酸钾溶液等。
这些试剂与羟基发生反应后，可以产生有色物质或反应产物，通过测定溶液颜色的变化或者标定曲线，就可以得到样品中羟基的含量。
光谱法光谱法是通过测定木素样品在紫外或红外光谱区域的吸收或发射来测定其中羟基的含量。
紫外-可见光谱法常用的波长范围是200-800纳米，可以通过样品吸收或发射的光信号来确定羟基的浓度。
红外光谱法则是通过测定木素样品在红外光谱区域的吸收或发射的频率来确定羟基的含量。
二级标题：酚羟基和总羟基的应用和意义材料科学木质素是一种重要的材料，在材料科学领域有广泛的应用。
对木素中酚羟基和总羟基的定量测定可以帮助我们了解木质素的分子结构和化学性质，从而为材料的设计和制备提供依据。
饲料中木质素含量的测定
饲料中木质素含量的测定
时间：2014-03-05 11:47:59 来源：作者：
(一)原理
木质素(1ignin)构成覆盖在植物细胞壁纤维结晶上的包被或网状组织的高分子芳香族聚合物，又名木素。
它在细胞壁内与纤维素、半纤维素结合成强有力的化学键，是一组对植物起支撑作用的化学官能团，也是基本上不能被动物消化吸收的有机物。
(二)测定
常规饲料分析方法中木质素分别存在于粗纤维及无氮浸出物的含量中，是由碳氢氧组成，但与碳水化合物的结构完全不同，测定方法有浓硫酸(72％)法、发烟盐酸(40％～42％)法、酶-硫酸水解法及酸性洗涤剂法等。
因测定方法不同，凡在“木质素”前冠以状语者，系指在特定条件下测出的含量。
如“浓硫酸木质素”、“胃蛋白酶水解木质素”、“发烟盐酸木质素”、“酸
性洗涤木质素”等。
各自的内在质量均不同，无可比性。
是一组极少能被动物消化的抗营养因子或称为“非营养性物质” (nonnutritional matter，NNM)。
云杉、桉木原本木质素和分离木质素中酚羟基含量的测定研究
云杉、桉木原本木质素和分离木质素中酚羟基含量的测定研究
云杉和桉木是两种常见的木材材料，它们的木质素和分离木质素中的酚羟基含量的测定研究可以用于了解这两种木材的化学性质和应用潜力。
木质素是木材主要的非糖类聚合物，由苯丙烯类化合物聚合而成，是木材中的主要成分之一。
酚羟基是木质素分子中的一个主要官能团，具有重要的化学反应性质。
测定木质素和分离木质素中酚羟基含量有助于了解木材的结构特征、生理性质和加工性能等方面的信息。
测定木质素和分离木质素中酚羟基含量通常采用以下几种方法：
1. 元素分析法：该方法通过测定样品中的含氧量来间接估算酚羟基的含量。
首先通过元素分析仪测定样品中的总氧含量，然后根据木质素的化学结构和已知的氧含量，计算出酚羟基的含量。
2. 紫外-可见光谱法：木质素和分离木质素中的酚羟基会吸收
一定范围内的紫外-可见光，可以通过测定吸光度来间接估算
酚羟基的含量。
该方法需要制备样品的溶液或提取物，然后使用紫外-可见光谱仪测量其吸光度，最后使用标准曲线或计算
公式将吸光度转化为酚羟基的含量。
3. 气相色谱法：木质素和分离木质素中的酚羟基可以通过衍生化反应转化为易于气相色谱分析的产物，然后使用气相色谱仪测定其峰面积或峰高来估算酚羟基的含量。
这种方法需要在样
品处理过程中使用酰化试剂或醚化试剂对酚羟基进行衍生化处理。
以上是常用的几种方法，当然也可以根据研究的需要选择其他适用的方法。
最终的目的是获得云杉和桉木木质素和分离木质素中酚羟基含量的定量数据，为材料特性和应用研究提供基础数据支持。
木质素的测定方法
木质素的测定方法
木质素的测定方法有很多种，以下是常用的几种方法：
1. 元素分析：使用元素分析仪测定木质素中的碳、氢、氧等元素的含量，从而间接测定木质素的含量。
2. 紫外-可见吸收光谱：木质素在紫外-可见光波段有一定的吸收特性，可以利用紫外-可见分光光度计测定木质素溶液的吸光度，然后通过标准曲线计算木质素的含量。
3. 高效液相色谱-紫外检测法（HPLC-UV）：利用高效液相色谱仪分离并检测木质素化合物，根据各个组分的峰面积或峰高，计算木质素的含量。
4. 核磁共振（NMR）：利用核磁共振技术对木质素分子进行结构分析，并可以通过积分谱计算出木质素的含量。
5. 毛细管电泳：通过毛细管电泳技术对木质素化合物进行分离和检测，根据各个组分的峰面积或峰高，计算木质素的含量。
需要注意的是，不同的测定方法适用于不同类型的木质素化合物，选择合适的方法需要根据具体的研究需求和样品特点进行评估。
木素中酚羟基和总羟基的定量测定
木素中酚羟基和总羟基的定量测定简介木素是一类常见的天然产物，广泛存在于植物细胞壁中。
它的结构包含酚羟基和总羟基，这些官能团对于木素的性质和应用起着重要作用。
准确测定木素中酚羟基和总羟基的含量对于研究木素的性质和应用具有重要意义。
本文将介绍一种常用的方法，即通过化学反应将酚羟基和总羟基转化为可定量测定的产物，并使用分析仪器对其进行检测。
该方法具有灵敏度高、准确度高、操作简便等优点。
实验步骤1. 样品制备首先需要从样品中提取木素，并将其转化为可测定的形式。
以下是一种常用的方法：•将样品粉碎成细粉。
•将细粉加入抽提溶剂（如乙酸乙酯）中，在适当温度下进行抽提。
•将抽提液过滤，去除杂质。
•使用旋转蒸发仪将溶剂蒸发，得到木素提取物。
2. 酚羟基和总羟基的转化为了方便测定，需要将酚羟基和总羟基转化为可定量测定的产物。
以下是一种常用的方法：•将木素提取物溶解在适当的溶剂中（如氢氧化钠溶液）。
•加入适量的试剂（如硝酸钠），进行化学反应。
•根据反应条件，控制反应时间和温度。
•反应结束后，通过过滤或其他方法去除产生的沉淀。
3. 反应产物的测定得到可测定的产物后，可以使用分析仪器对其进行测定。
以下是一种常用的方法：•使用紫外可见分光光度计或高效液相色谱仪等仪器进行测定。
•根据反应产物的特征吸收峰或色谱峰，确定所需测定的酚羟基或总羟基含量。
•通过与已知浓度标准溶液比较，计算样品中酚羟基或总羟基的含量。
结果分析经过上述步骤，我们可以得到样品中酚羟基和总羟基的含量。
这些数据对于研究木素的性质和应用具有重要意义。
通过对不同样品的测定，可以比较它们之间的差异，进一步了解木素的特性。
通过调整反应条件和使用不同的试剂，我们还可以对酚羟基和总羟基进行选择性测定。
这有助于进一步研究木素中不同官能团的分布和含量，从而深入理解其结构和功能。
结论通过上述方法，我们可以准确测定木素中酚羟基和总羟基的含量。
这种方法具有灵敏度高、准确度高、操作简便等优点，适用于对木素进行定量分析。
木质素含量测定
3.1.2.2木质素含量测定用紫外分光光度法测定木质素含量，10天幼苗木质素提取方法，参照Syros等方法[153,154]并略作修改。
如下：1．0.5g鲜样用95%的乙醇研磨成匀浆，4500rpm离心10 min后收集沉淀。
2．用95%乙醇冲洗沉淀3次，再用乙醇：正已烷=1:1（V/V）冲洗3次，收集沉淀并干燥。
3．干燥物用0.5 ml 25%溴乙酰(冰乙酸配置)溶解，70℃水浴加塞保温30 min，然后加0.9 ml 2 mol/L NaOH终止反应，加5 ml冰乙酸和0.1 ml 7.5 mol/L盐酸羟胺,混匀后；4．4500rpm离心5 min，吸取上清液0.1 ml，加3.0 ml冰乙酸稀释5．测定A280nm，以A280nm·mg protein-1表示木质素的含量。
成熟植株与幼苗含量不同，提取及处理方法不同：1．剪取拟南芥的主茎，用液氮速冻处理后冷冻干燥（过夜），将样品研磨成粉（<20目）。
2．称取10~15 mg样品放入20 ml带刻度试管，加入10 ml去离子水，在65℃烘箱加热1 h，每隔10 min振荡一次。
3．每个样品用GF/A玻璃纤维滤纸过滤，残渣依次用水、乙醇、丙酮、乙醚各漂洗3次，每次1~2分钟。
4.将滤纸置于20 ml闪烁瓶（不加盖）内，在70℃烘箱中加热过夜。
5.在每个闪烁瓶中加入2.5 ml 25%溴乙酰-乙酸溶液，置于50℃烘箱加热2 h （加盖），不时摇动。
6．预备50 ml容量瓶，加入10 ml 2 mol/L NaOH溶液及12 ml冰乙酸。
7．将样品置于冰箱冷却后转移入容量瓶，用冰乙酸漂洗滤纸后定容至50 ml。
静置1 h（最好过夜）。
8．测量280 nm处吸光率。
木质素的含量按公式3.1计算：Abs Lignin%= (Abs×liters×100% )/(W sample×A standard)式中，Lignin%为木质素的含量，Abs为样品溶液在280nm处吸光率，liters为样品溶液定容时的体积(L)，Wsample为样品的绝干重量(g)，Astandard为拟南芥木质素标准吸光率，Astandard=17.2。
木质素含量的测定
试剂 蒸馏水
-2-
邮箱：bestbio@
电话：021-33921235
本产品仅供科学研究使用！请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途！
高氯酸，浓硫酸
产品说明书
使用方法：
使用注意事项： 试剂 A 有毒性，请操作时做好防护措施，加热前必须用封口膜密封，以防气体溢出。 加热过程中有剧烈反应，震荡时轻摇，以免压力过大喷出造成人生伤害。 试剂 C 具有强刺激性，建议操作过程全部在通风橱子操作。 正式测定之前可选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。
注意事项： 1. 正式实验前请选取几个样本做预实验，以优化实验条件，取得最佳实验效果。 2. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，
避免开盖时试剂损失。 3. 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。 4. 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。 5. 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并
三、 Lignin 含量计算公式 标准曲线：y = 0.02776x+0.0068，R2=0.9889 Lignin（mg/g 干重）= (ΔA-0.0068)÷0.02776×V 反总×10-3÷W×T
= 0.0735×(ΔA-0.0068) ÷W×T
2、 按下表加样。加样表（以 1000ul 体系为例）
单位：
空白管
测定管
样本（mg）
5
试剂 A（ul）
1000
1000
高氯酸（ul）
40
40
于 10mL 玻璃试管中，用封口膜密封，充分混匀，80℃水浴 40min，每
木质素成分的测定原理
木质素成分的测定原理在进行木质素成分的测定之前，我们需要先了解木质素的基本构成及特性。
木质素是一类水不溶性的天然有机化合物，主要存在于植物细胞壁中。
它是植物体内的第二大有机成分，仅次于纤维素。
木质素是由苯丙基醇类化合物聚合而成，其主要特点是具有高度芳香性和稳定性。
在自然环境中，它在植物体内起到支撑植物结构、抵抗细菌、真菌和昆虫侵袭的作用。
木质素有多种不同结构的衍生物，主要包括纤维素和非纤维素类木质素。
纤维素是由葡萄糖分子聚合而成，是主要的结构性成分。
非纤维素类木质素则是由苯丙基醇衍生物形成的，主要是由苯丙素、桥酮、羟基苯丙素等组成。
在测定木质素成分时，可以采用多种方法，常见的方法有纤维素分析、酸碱法分析、气相色谱法和质谱法等。
纤维素分析是通过分解纤维素来进行测定的。
首先，将纤维素样品经过一系列的预处理，去除非纤维素类木质素等杂质。
然后，用浓烷酸或浓碱溶液进行纤维素的水解，得到葡萄糖。
最后，通过测定葡萄糖的含量，计算出纤维素的含量。
这种方法需要耗费较多的时间和试剂，但可以较准确地测定纤维素的含量。
酸碱法分析是根据纤维素和非纤维素类木质素对酸碱溶液的反应性差异进行测定的。
首先，将样品分别与酸和碱进行处理，得到酸洗液和碱洗液。
然后，通过测定洗液中木质素的含量，并与样品的总质量进行比较，计算出木质素的含量。
这种方法简单易行，但由于木质素的结构多样性，不同类型的木质素对酸碱溶液的反应性也不完全相同，因此对不同类型的木质素可能存在一定的测定误差。
气相色谱法是通过将样品中的木质素分离出来，并通过气相色谱仪进行测定的。
首先，将样品提取得到木质素的混合物。
然后，使用气相色谱法将这些木质素成分进行分离，并通过检测器进行检测。
根据不同木质素成分的保留时间和峰面积，可以计算出各个成分的含量。
这种方法需要仪器设备的支持，对操作人员的技术要求较高，但可以同时测定多种木质素成分，并具有较高的准确性和灵敏度。
质谱法是通过用质谱仪对样品进行分析来测定木质素成分的。
木质素的化学分析及其植物含量的研究
木质素的化学分析及其植物含量的研究木质素是植物中含量极高的一种有机化合物，其化学分析和植物含量的研究一直备受关注。
木质素被广泛应用于生产工业、医药和农业领域，因此对木质素的深入研究具有重要的理论和实践意义。
一、木质素的化学分析木质素是一种多聚物，主要由三种单体组成：对羟基苯甲醛（H），双对羟基苯乙烷（G）和对羟基环戊烷酚（S）。
其中，G单体是最常见的一种，占据了木质素总含量的50%-60%。
不同的木本植物在化学结构上存在差异，如锥树属的木质素结构中S单体含量较高，而桦树属的木质素结构中G单体含量较高。
现代科技手段主要用于测定木质素单体的种类和含量，其方法包括高效液相色谱（HPLC）、液相色谱-质谱联用（LC-MS）、傅里叶变换红外光谱（FTIR）等。
其中，HPLC方法被广泛应用于测定木质素单体结构和含量，可以快速、准确地获得结果，是目前使用最为广泛的测定技术之一。
而LC-MS技术则能够更加精确地确定木质素的单体结构，并进一步探究木质素在物质转化过程中的变化。
二、木质素的植物含量研究随着对木质素的深入研究，人们逐渐意识到木质素在植物生长发育过程中的重要性。
在一些研究中发现，木质素不仅具有支撑植物的机械强度和稳定性的作用，还对植物的光合作用、水分平衡和抗逆性等方面产生重要影响。
因此，研究木质素在不同植物种类中的含量变化以及其与植物生长发育之间的关系，对了解植物生命活动的机理具有重要意义。
一些研究表明，木质素含量的高低与植物的生长发育和生产力密切相关。
例如，在植物舒张背压试验中，高木质素含量的植物在承受较高压力时能够保持更好的生长状况。
而在一个多年生的苹果林中，木质素含量与果树生长情况、产量、质量等指标均有相关性。
这些研究表明，木质素的含量不仅是植物内生生长因子的体现，同时也是植物生长发育和产量的关键因素之一。
此外，不同植物在木质素含量的变化上存在差异。
例如，在禾本科植物中，木质素含量随生长时间的延长而逐渐升高。
生物质中三种主要化学成分含量的测定实验
生物质中三种主要化学成分含量的测定实验实验题目：生物质中三种主要化学成分含量的测定实验实验目的1.掌握生物质中主要化学成分含量的经典分析方法和原理。
2.了解纤维素、半纤维素以及木质素这三种主要化学成分在生物质热裂解中的作用。
实验原理植物的主要化学成分是纤维素、半纤维素和木质素这三部分。
它们是构成植物细胞壁的主要组分。
其中，纤维素组成微细纤维，构成纤维细胞壁的网状骨架，而半纤维素和木质素是填充在纤维和微细纤维之间的“粘合剂”和“填充剂”。
1.纤维素生物制粉末在加热的情况下用醋酸和硝酸的混合液处理，在这种情况下，细胞间的物质被溶解，纤维素也分解成单个的纤维，木质素、半纤维素和其它的物质也被除去。
淀粉、多缩戊糖和其它物质受到了水解。
用水洗涤除去杂质以后，纤维素在硫酸存在下被重铬酸钾氧化成二氧化碳和水。
C6H10O5 + 4K2Cr2O7 + 16H2SO4 = 6CO2 + 4Cr2(SO4)3 + 4K2SO4 + 21H2O过剩的重铬酸钾用硫酸亚铁铵溶液滴定，再用硫酸亚铁铵滴定同量的但是未与纤维素反应的重铬酸钾，根据差值可以求得纤维素的含量。
2.半纤维素用沸腾的80％硝酸钙溶液使淀粉溶解，同时将干扰测定半纤维素的溶于水的其它碳水化合物除掉。
将沉淀用蒸馏水冲洗以后，用较高浓度的盐酸，大大缩短半纤维素的水解时间，水解得到的糖溶液，稀释到一定体积，用氢氧化钠溶液中和，其中的总糖量用铜碘法测定。
铜碘法原理：半纤维素水解后生成的糖在碱性环境和加热的情况下将二价铜还原成一价铜，一价铜以Cu2O的形式沉淀出来。
用碘量法测定Cu2O的量，从而计算出半纤维素的含量。
测定还原性糖的铜碱试剂中含有KIO3和KI，它们在酸性条件下会发生反应，也不会干扰糖和铜离子的反应。
加入酸以后，会发生反应释放出碘：KIO3 + 5KI +3H2SO4 = 3I2 + 3K2SO4 +3H2O加入草酸以后，碘与氧化亚铜发生反应：Cu2O + I2 + H2C2O4 = CuC2O4 + CuI2 + H2O过剩的碘用Na2S2O3溶液滴定：2Na2S2O3 + I2 = Na2S4O6 + 2NaI3.木质素用1％的醋酸处理以分离出糖、有机酸和其它可溶性化合物。
木质素测定方法 标准
木质素测定方法标准木质素是一种重要的天然高分子化合物，广泛存在于植物细胞壁中，对于研究植物生长发育和木材性质具有重要意义。
因此，木质素的测定方法也备受关注。
下面将介绍一种常用的木质素测定方法及其标准。
一、木质素测定方法1. 试剂准备（1）2% NaOH溶液：将2g NaOH加入100ml去离子水中，搅拌至溶解。
（2）1% HCl溶液：将1ml浓盐酸加入100ml去离子水中，搅拌至溶解。
（3）乙醇：取绝对乙醇。
（4）酚：取纯酚。
2. 样品制备将待测样品粉碎成粉末，称取0.5g样品，加入50ml 2% NaOH溶液中，放置于80℃水浴中加热2h，然后过滤，滤液收集于100ml烧杯中。
3. 木质素测定（1）加入1ml 1% HCl溶液，搅拌均匀。
（2）加入10ml乙醇，搅拌均匀。
（3）加入1ml酚，搅拌均匀。
（4）加入1ml 1% HCl溶液，搅拌均匀。
（5）加入10ml乙醇，搅拌均匀。
（6）用去离子水定容至100ml，搅拌均匀。
（7）用紫外分光光度计在280nm处测定吸光度值。
二、木质素测定标准根据GB/T 2677.8-1994《木材化学分析方法第8部分：木质素含量的测定》标准，木质素测定应符合以下要求：1. 试剂应符合国家标准或行业标准的规定。
2. 样品应随机取样，样品数量应符合统计学要求。
3. 试验室应保持干燥、通风、无污染的环境。
4. 试验过程中应注意安全，避免试剂溅入眼睛或皮肤。
5. 试验结果应进行统计分析，计算出平均值和标准差。
6. 试验结果应报告测定值和相应的误差范围。
7. 试验结果应与同类样品进行比较，评估样品的木质素含量。
总之，木质素测定方法及其标准对于研究植物生长发育和木材性质具有重要意义，应严格按照标准操作，确保测定结果的准确性和可靠性。
橡胶树树皮和木质部淀粉和可溶性糖含量测定
非 结 构 性 碳 水 化 合 物（non-structural carbohydrates， NSC）是光合作用的主要产物， 包括可溶性 糖（如 蔗 糖 、 葡 萄 糖 、 果 糖 等）， 以 及 储 藏 的 淀 粉 和 脂 类。 一旦被同化， 非结构性碳水化合物被分配用于 植物本身代谢、 新组织生长、 产生保护性化合物， 或 者 储 存 以 备 后 用 。 ［１－２］ 当 植 物 对 碳 水 化 合 物 的 需 要超过光合作用的供应后， 储藏的 ＮＳＣ 将会提供必 要的缓冲， 这种情况例如， 在夜间无光合作用时，
② 魏 芳（１９８０～）， 博士， 助理研究员； Ｅ－ｍａｉｌ： ｗｆａｎｇ５４５＠１６３．ｃｏｍ。 ③ 通讯作者： 校现周， 博士生导师； Ｅ－ｍａｉｌ： ｘｉａｏｘｉａｎｚｈｏｕ８０＠１６３．ｃｏｍ
－９－
２０１４ 年 ４ 月
热带农业科学
第 ３４ 卷第 ４ 期
扰 的 压 力 所 形 成 的 ［７］。 巴西橡胶树是一种具有重要经济价值、 依靠结
配 置 ８０％乙 醇 溶 液 及 浓 度 为 １ ｍｇ／ｍＬ的 葡 萄 糖 （还原性糖）和蔗糖（非还原性糖）溶液； １５０ ｍｇ 蒽酮溶于 １００ ｍＬ稀硫酸（７０ ｍＬ 浓硫酸加 ３０ ｍＬ 水）配制成蒽酮试剂。 蔗糖与葡萄糖溶液按比例混合（混合比例如下表）， 混合 液 １００ μＬ 加入 ３ ｍＬ蒽酮试剂， ９０℃保温 １５ ｍｉｎ， 冷 却至室温后在 ３００～９００ ｎｍ 扫描光吸收。 １．２．５ 可溶性糖和淀粉标准曲线测定
休眠季节或者环境压力和面对伤害时［３］。 成年树木 包括大量 ＮＳＣ［４］， 数量是可以 顶盖植物叶 子重新生 长的几倍之多 ， ［５－６］ 传统观点认为， ＮＳＣ 的储藏是一 个被动的过程， 认为在这个过程中满足植物需求之 后多余的碳 源才会被储 藏［１］。 然而， ＮＳＣ 的储 藏也 可以看做是一个主动的过程， 这个过程中， ＮＳＣ 根 据生长价值进行分配， 这也是一种进化适应， 这种 适应是长期应对不同的气候、 疾病或者其他外界打
木质素含量测定方法
木质素含量测定方法
森林作物的木质素含量测定是评价森林作物品质的重要指标，在科学管理森林作物时也有重要的作用。
木质素含量测定采用的方法有多种，主要有重量法和容量法。
1、重量法
重量法是最常用的木质素含量测定方法，其测定原理是利用重量比，即已知样品中木质素的重量比和总重量比，可以推算出样品中木质素的重量。
该方法测定步骤如下：
Step1：将二氧化碳法制样的样品（约10g）装入直径为30mm的重量罐内。
Step2：将重量罐放入干燥箱，在105℃±2℃的温度下烘干，并在每隔两小时消耗50g的二氧化碳，直至样品重量不变。
Step3：取放入重量罐内的干燥样品重量，记为A。
Step4：将烘干的样品取出，用火焰焚烧，烧至弹棉，再将烧结物再放入重量罐内，重新烘干，烘至样品不减重。
Step5：取放入重量罐内的烧结物重量，记为B。
Step6：计算样品中木质素含量：木质素含量＝（A-B）/A × 100%。
2、容量法
容量法是采用干重法检测样品中的木质素含量，它比重量法简单，耗时短，容量稳定性高，但容量法的结果受木质素的表面粗糙度影响较大，不适用于检测木质素含量较低的样品，它的检测步骤如下：
Step1：将样品分装于两个容量瓶中。
总酚含量测定
7总酚含量测定参考韩富根的方法,略有改动,样品处理：取鲜叶0.5g,加3ml 95%乙醇研磨成匀浆状, 再加5ml 95%乙醇过滤,用95%乙醇定容至25ml;以儿茶酚作标准曲线;样品测定：取2 ml待测液于10ml离心管中,再加入2 ml福林试剂,摇匀,3min后加入10%碳酸钠2 ml振荡;静置1 h后700 nm处比色测定,以2ml蒸馏水代替待测液作为空白;根据标准曲线计算总酚含量;七种与小麦近缘的野生植物对禾谷缢管蚜抗性的生化机制试剂配制①福林试剂：将钨酸钠25g、磷钼酸5g,磷酸12．5ml同蒸馏水188ml一道回流煮沸2h,冷却后用蒸馏水定容至1L;②10%碳酸钠溶液：用无水碳酸钠配制,冬季气温低时会析出碳酸钠结晶,可在温水浴上加热溶解后使用;③酚标准溶液：先配制成100ml含儿茶酚60mg的溶液,再依次配制成100ml中含儿茶酚不同浓度临用时再配;10mg/100ml为母液标准系列的配置8 单宁的测定参考范璐的方法,①干样品去除杂质,将样品粉碎并全部通过1.0mm孔径的筛网;②精确称取试样1g于100ml三角瓶中,加75%二甲基甲酰胺溶液50ml,加塞,室温振荡提取60min,双层滤纸过滤,滤液备用;③准确吸取提取液于试管中,准确加入水、8gL35ml/L氨溶液,摇匀,自加氨溶液后计时,10min 后以525nm为测定波长,水作空白测定样液的吸光度值;④准确吸取提取液于试管中, 准确加入水、3.5g/L柠檬酸铁铵溶液、氨溶液,摇匀,自加氨溶液后计时,10min后,以525nm为测定波长,水作空白,测定样液的吸光度值;两次测得吸光度值之差为样品中单宁的吸光度值;⑤配制单宁酸含量为0、、、、、ml 标准系列,分别吸取标准溶液,准确加入5.0m水、柠檬酸铁铵溶液、氨溶液,摇匀,自加氨溶液后计时,10min 后以525nm 为测定波长,水作空白测定标准溶液的吸光度值9 可溶性蛋白质的测定样品处理：小麦分蘖初期,称取各供试品种剪碎叶片0．5g,加入2ml蒸馏水研磨后倒入10ml离心管中,再向残渣中加入6ml蒸馏水分两次冲洗,洗涤液转入离心管,放置半小时,摇匀悬浮后离心20分钟,取上清液,然后定容10ml容量瓶;样品测定：测定时,取上清液加蒸馏水,加5ml考马斯亮蓝G一250蛋白质试剂混匀,显色后在595nm波长下测定光密度;用牛血清蛋白绘制标准曲线;蛋白质含量测定公式：样品中蛋白质含量mg／g=查得的蛋白质含量岭×提取液总体积m1／样品鲜重g×测定时取用提取液体积m1;标曲的制备：0~1 000μg／mL 标准曲线的制作：另取6 支10mL 具塞试管,按表取样;盖塞后,将各试管中溶液纵向倒转混合,放置2min 后用1cm 光经的比色杯在595nm 波长下比色,记录各管测定的光密度OD595nm,做出蛋白质浓度为0~1 000μg／mL 的标准曲线;表2 高浓度标准曲线制作试剂配制：1牛血清白蛋白标准溶液的配制：准确称取100mg 牛血清白蛋白,溶于100mL 蒸馏水中,即为1 000μg／mL 的原液;2蛋白试剂考马斯亮蓝G-250 的配制：称取100mg 考马斯亮蓝G-250,溶于50mL90％乙醇中,加入85％W／V的磷酸100mL,最后用蒸馏水定容到1 000mL;此溶液在常温下可放置一个月;。
常用样品分析方法--可溶性糖、淀粉、酚类和叶绿素含量的测定
常用样品分析方法——可溶性糖、淀粉、酚类和叶绿素含量测定一、可溶性糖和淀粉含量的测定方法可溶性糖和淀粉含量的测定方法为硫酸---蒽酮比色法。
测定原理为：淀粉是由葡萄糖残基组成的一类多糖物质，在酸性条件下加热可使其水解成单糖葡萄糖，然后在浓硫酸的作用下，单糖葡萄糖可以脱水生成糠醛或羟甲基糠醛类化合物，然后利用蒽酮试剂与糠醛化合物反应生成蓝绿色糠醛衍生物，在一定范围内，颜色的深浅与糖的含量成正比，即可比色进行定量测定。
测定步骤如下:1. 标准曲线的制作1.1 100ug/ml葡萄糖标准液的配制将分析纯葡萄糖在80℃下烘干，用0.0001g分析天平精确称取1g葡萄糖，转入50ml烧杯中，然后加入少量蒸馏水搅拌溶解，接着将溶解液转入100ml容量瓶，然后再往烧杯中加入少量蒸馏水润洗，最后将润洗液转入上述100ml容量瓶，重复上述润洗操作三次(注意溶解液和三次润洗液的体积总和控制在80ml 以内，以免超过容量瓶量程)，然后定容至容量瓶刻度线，塞上塞子，上下颠倒5次以，得到10mg/ml的葡萄糖溶液｡用移液枪吸取1ml葡萄糖标准液转入100ml 容量瓶，定容至刻度线，所得溶液即为100ug/ml的葡萄糖标准溶液。
1.2蒽酮乙酸乙酯试剂的配制用0.0001g分析天平精确称取分析纯蒽酮1g溶于50ml乙酸乙酯试剂中，贮藏于棕色瓶中，置于黑暗中保存｡1.3标准曲线制作编号0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 1112100ug/ml葡萄糖溶液(ml) 00.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2蒸馏水ml 2 1.8 1.6 1.4 1.2 1.0 0.8稀释液葡萄糖浓度（ug/ml）010 20 30 40 50 60注:1 2为一个重复，以此类推｡取13支20ml试管并分别编号为0-12，按照上表加好相应体积的葡萄糖溶液与蒸馏水并混匀后，再依次向每支试管中分别加入0.5ml蒽酮乙酸乙酯试剂和5ml浓硫酸，加入浓硫酸时要缓慢以免反应过快液体飞溅，然后小心震荡，将试管放入沸水浴(100℃)1min，取出后自然冷却至室温，以编号为0的试管为空白对照，于620nm波长处测定吸光值，然后以葡萄糖浓度为横坐标，吸光值（OD 值）为纵坐标，绘制葡萄糖标准曲线，并拟合出方程（R2=0.99）。
木质素含量测定方法
木质素含量测定方法一、结构性质木质素是由4种醇单体(对香豆醇、松柏醇、5-羟基松柏醇、芥子醇)形成的一种复杂酚类聚合物，它是包围于管胞、导管及木纤维等纤维束细胞及厚壁细胞外并使这些细胞具有特定显色反应(加间苯三酚溶液一滴,待片刻,再加盐酸一滴,即显红色)的物质。
根据木质素的性质,测定木质素的方法有直接浓酸水解分离测定法、光度法、红外光谱法、氧化还原反应滴定法等,对花生壳的木质素采用氧化还原滴定法进行含量测定。
二、反应原理木质素在醋酸的作用下，易溶于乙醇和乙醚的混合液，在硫酸介质中用重铬酸钾氧化为二氧化碳和水,反应方程式如下:C6H10O5+4K2Cr2O7+16H2SO4=4Cr2(SO4)3+4K2SO4+6CO2+21H2OCr2O72-+14H++6I-2+2Cr3++7H2OCr3+为亮绿色2S2O32-+I24O62-+2I-遇浓硫酸有红色针状晶体铬酸酐析出，对其加热则分解放出氧气，生成硫酸铬，使溶液的颜色由橙色变成绿色。
稍溶于冷水，水溶液呈酸性，属强氧化剂过量的重铬酸钾用硫代硫酸钠回滴，淀粉KI溶液为指示剂。
其中加氯化钡溶液的作用是让溶出的木质素和硫酸钡(硫酸与氯化钡反应)一起沉淀。
三、试剂准备1.1%醋酸（质量分数）：15mL；1mL36%的乙酸，加水定容到36mL2.V乙醇：V乙醚=1:1:20mL；3. 72%硫酸：3 mL ；72%硫酸密度：1.634g/cm 3,98%硫酸密度：1.84 g/cm 3.量取652mL98%硫酸加水定容到1000mL，即为72%硫酸。
4.10%氯化钡（质量分数）：0.5mL；取1g定容到10mL.5. 10%硫酸（质量分数）：10 mL ；10%硫酸密度：1.07 g/cm 3，量取593.4 mL98%硫酸加水定容到1000mL，即为10%硫酸.6.0.025mol/L重铬酸钾：10 mL；先经过120℃烘干2小时，称取1.225g加水定容到1000mL，避光，棕色瓶保存。
总酚的提取和测定方法
总酚的提取和测定方法嘿，朋友们！今天咱就来唠唠总酚的提取和测定方法。
这可真是个有趣又重要的事儿呢！你想啊，总酚就像是一群藏在各种材料里的小精灵，咱得想办法把它们给揪出来，还得知道有多少。
这就好比在一个大宝藏里找宝贝，得有合适的工具和方法才行。
先说提取吧。
就好像我们要从一堆杂物里挑出我们想要的东西一样，得有耐心和技巧。
可以用各种溶剂去泡一泡那些含有总酚的材料，让总酚们乖乖地跑到溶剂里去。
这就像给它们洗了个舒服的澡，它们就乐意出来啦！不同的材料可能需要不同的溶剂，这可得好好琢磨琢磨，就像给不同性格的人准备不同的礼物一样。
然后就是测定啦。
这就像是给我们找到的小精灵们称称重量，看看有多少。
有好多方法可以用呢，比如什么比色法啦、滴定法啦。
比色法就像是给小精灵们穿上了不同颜色的衣服，根据颜色的深浅就能知道它们的多少；滴定法呢，就像是一滴一滴地数小精灵，虽然有点麻烦，但也很准确呀！咱举个例子吧，就说从植物里提取和测定总酚。
植物就像一个大宝藏箱子，里面藏着好多总酚小精灵。
咱先选好合适的溶剂，把植物放进去泡一泡，然后用合适的方法去检测泡出来的溶液里总酚的含量。
这过程不就跟我们找宝藏一样刺激嘛！提取和测定总酚可不能马虎，这关系到很多方面呢。
比如说在食品行业，知道了食物里总酚的含量，就能知道这食物有多健康、多有营养。
在科研领域，这更是重要得很呢，能帮助科学家们解开好多谜题。
总之呢，总酚的提取和测定方法就像是一把钥匙，能打开好多知识和应用的大门。
咱可得好好掌握这把钥匙，去探索更多的奥秘呀！这可不是开玩笑的，这真的很重要呢！大家都要认真对待哦，可别小瞧了这些小精灵们的威力。
让我们一起在总酚的世界里愉快地探索吧！。
木质素测定
黄酮测定方法：1. 黄酮的提取：精密称取鲜山楂叶1 g，加入5 mL70%乙醇溶液，充分研磨，定容至25 m L，室温（20℃）浸提4h，然后过滤至具塞试管得滤液体积，此滤液用于黄酮测定，测定时可根据情况进行稀释。
黄酮含量采用亚硝酸钠-氢氧化钠比色法测定，精密称取芦丁对照品20mg，加70%乙醇适量，加热使溶解，用100mL容量瓶定容，摇匀，即得0.2mg/mL标准液。
精密量取对照品溶液0，1，2，3，4，5，6 m L，分别置25 mL量瓶中，各加水至6mL，加5%亚硝酸钠溶液1 mL，摇匀，放置6 min，加10%硝酸铝溶液1mL，摇匀，放置6 min，加4%氢氧化钠溶液10 mL，再加水至刻度，摇匀，放置15 min，以相应试剂为空白，立即用分光光度法，在510 nm的波长处测吸光度（A），以吸光度（A）为纵坐标，质量浓度（C）为横坐标，绘制标准曲线得回归方程: A=12.629C+0.0007 A: 510nm处测得的Abs C: 所测样品溶液黄酮浓度（mg/m L）精密量取待测液2 m L于25 mL具塞试管中，加水至6mL，加5%亚硝酸钠溶液1mL，摇匀，放置6 min，加10%硝酸铝溶液1mL，摇匀，放置6min，加4%氢氧化钠溶液10mL，再加水至刻度，摇匀，放置15 min，以相应试剂为空白，立即按照紫外－可见分光光度法，在510 nm波长处测吸光度值（A），按照回归方程计算含量。
（不同时期山楂叶黄酮含量及抗氧化活性变化向小林）2.样品溶液的制备：准确称取经过干燥和粉碎的急弯棘豆干粉3g，置于150mL的具塞三角瓶中，以料液比为1:14的40%乙醇作提取溶剂超声提取1h，提取温度为30℃，提取2次，过滤，合并滤液，滤液用石油醚3次萃取出叶绿素及可溶性脂类后完全移入100mL容量瓶，用甲醇定容，即得样品溶液。
对照品溶液的制备：准确称取在120℃干燥至恒重的芦丁54.2mg于100mL 容量瓶中，用甲醇溶解定容至刻度线，摇匀，作为对照品溶液（芦丁含量0.542mg/mL）。
木质素的测定
中性洗涤剂:按Van Soest方法配制;2M盐酸溶液:167ml浓盐酸(比重1.19)用蒸馏水定溶至1000ml;72%浓酸溶液: 665mlH2SO4(比重1. 84)加入300ml水中,冷至20℃,补加水至1000ml。
1.3 方法取经80℃3h烘至衡重的三个菌株各5g。
1.3.1 取1.0000g样品置于100ml 碘瓶中,加入70ml中性洗涤剂,之后放入已沸的高压锅, 100℃保温40min,115~121℃保温20min,取出用3号30ml沙芯坩埚过滤至pH 6.5~7.0,依次用95%乙醇、无水乙醇和丙酮洗涤2次,将残渣置真空干燥器中,干燥20min。
1.3.2 将残渣连同坩埚置于100ml烧杯中,加入70ml2M盐酸溶液,然后放入已沸的高压锅,100℃保温50min,过滤至中性,依次用95%乙醇、无水乙醇和丙酮洗涤2次,残渣80℃烘至衡重为W1。
1.3.3 将残渣连同坩埚置于150ml烧杯中,加入10ml致冷的72%硫酸,20℃降解4h,后加入90ml蒸馏水,室温过夜,次日用蒸馏水洗残渣至pH 6.5,烘干至衡重为W2,W1-W2为纤维素的含量。
1.3.4 将残渣在550℃马福炉中灰化,干燥器中平衡至衡重为W3,W2-W3即为木质素的含第二种方法：1 纤维素纤维素的测定方法有硫酸与重铬酸钾氧化法、酸性洗涤法与酸碱醇醚处理法和差重法等。
1.1 改进方法1.1.1 预处理称取0.10 g玉米秸秆于刻度试管（容量为15ml）中，加入醋酸和硝酸混合液（体积比1:1）5 ml，盖上盖于沸水浴中加热30 min，全部转至塑料刻度离心管（容量为50ml）中，加蒸馏水稀释至45 ml刻度线，冷却后以8000 转每分的转速离心15min，去除上清液，再加蒸馏水至45ml刻度线然后离心去上清夜，以同样的方法再洗两次后于烘箱80 ℃烘干。
1.1.2 测定取烘干样加入混合液（溶液中硫酸的质量分数为10%；重铬酸钾的浓度为0.1 mol/L）10 ml，摇匀后沸水浴15 min，全部转入干净的三角瓶中冷却后滴定。
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总可溶性酚和木质素含量的测定
1. 试剂配制
①80%甲醇：400 mL 甲醇，用蒸馏水定容至500 mL
② 1 N Folin-酚试剂（Folin and Ciocalteau's Phenol reagent)
③1 mol/L Na2CO3：称取105.99 g Na2CO3，蒸馏水溶解并定容至1000 mL
④邻苯二酚
⑤ 2 N HCl：83.3 mL浓HCl，蒸馏水定容至500 mL
⑥ 1:10比例的巯基乙酸和2 N HCl混合液：30 mL巯基乙酸（硫代乙醇酸），溶于300 mL 2 N HCl
⑦0.5 N NaOH：20.0 g NaOH，用蒸馏水溶解并定容至1000 mL
⑧浓HCl（12 mol/L）
2. 测定方法
酚类物质含量测定：分别在接种前(0 h)和接种后的1、3、5、7 d采集水稻的第3、4片叶，在-80℃下保存备用，用以测定总可溶性酚和木质素的含量。
参照Rodrigues等（2005）的方法。
0.1 g水稻叶片置于预冷研钵中，加入液氮研成粉末，转移到2 mL离心管中，加入1.5 mL的80%甲醇。
用锡纸包裹Eppendorf管，防止光氧化，在25℃下，用摇床150 rpm振荡过夜。
提取物在12000 rpm下离心10 min，上清液转移到1.5 mL离心管中，在-20℃下保存，用于总可溶性酚含量的测定。
沉淀在-20℃下保存，用于木质素含量的测定。
⑴总可溶性酚含量的测定
参考Folin-Ciocaileu比色法
①取上清液（甲醇提取物）150 μL，加入150 μL 1 N Folin-酚试剂（Folin and Ciocalteu's Phenol reagent)，摇匀，室温下保持5 min。
接着加入200 μL的1 mol/L Na2CO3溶液，摇匀，在室温下保持10 min。
向混合物加入1 mL双蒸水，摇匀，室温下（在暗处）保持1 h。
混合物在725 nm(或765 nm)下比色，测定吸光度。
用邻苯二酚（或没食子酸或原儿茶酸）做标准曲线，单位为μg·g-1 FW（或mg·kg-1 FW）。
②标准曲线的制备
准确称取邻苯二酚（M=110.11）0.05 g，蒸馏水溶剂并定容至50 mL，得1 mg/mL 邻苯二酚贮备液，吸取2.5 mL定容至50 mL得50 μg/mL邻苯二酚标准液。
⑵木质素含量的测定
向提取总可溶性酚得到的沉淀加入1.5 mL双蒸水，涡旋摇匀，在离心力为12, 000 g下离心5 min，丢弃上清液，将沉淀在65℃下干燥过夜。
将1.5 mL的1:10比例的巯基乙酸和2 N HCl混合液加入到干燥的沉淀中。
轻轻摇匀，沸水浴4 h后，立即置于冰水中冷却，4℃下保持10 min。
混合物在离心力为12, 000 g下离心10 min，丢弃上清液。
沉淀用1.5 mL双蒸水冲洗，接着在离心力为10,000 g 下离心10 min，离心后丢弃上清液。
沉淀用1.5 mL的0.5 N NaOH溶液重新悬浮，混合物在室温下用摇床(150 rpm)振荡过夜。
混合物在离心力为10,000 g下离心10 min，上清液转移到新的Ependorfg管中。
向上清液加入200 μL浓HCl，将Ependorf管在4℃下保持4h，使木质素-巯基乙酸衍生物（LTGA）充分沉淀。
接着在离心力为10,000 g下离心10 min，丢弃上清液，用2 mL 0.5 N NaOH溶解橙棕色沉淀。
在280 nm下测定溶液吸光度，用木质素标准品(Lignin alkali 2-hydroxypropyl ether)（Sigma-Aldrich, USA）作标准曲线，浓度单位用mg·kg-1 FW表示。