显微镜测微尺标准操作规程

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山西维康堂中药饮片有限公司

题目:显微镜测微尺标准操作规程文件编号:SOP-ZL-006-01 制订人:审核人:批准人:

起草日期:审核日期:批准日期:

编制依据:《中国药典(2010版)》一部

颁发部门:质量部制作备份:2

分发部门:质量部实施日期:

1.目的:建立显微测微尺标准操作规程,确保显微镜测微尺操作符合规定要求。

2.范围:本标准适用于显微镜测微尺使用的管理。

3.职责:

3.1质量部QC负责该设备的日常使用和维护。

3.2 质量部QA负责监督检查本标准的实施情况。

4.内容:

4.1目的

使用目镜测微尺和镜台测微尺在显微镜下观察目标物的细胞和后含物,测量其直径、长短。

4.2 原理

(1)目镜测微尺:是一块圆形玻片,在玻片中央把Nmm长度刻成N×10等分。根据需要可以选用C-2,C-3,C-4,C-5,C-6 ,C-7型号。

(2)镜台测微尺:是中央部分刻有等分线的载玻片,将1mm等分为100格,每格长10µm,专门校正目镜测微尺。在镜台测微尺上得到的读数就是目标物细胞的真实大小。本实验室用C-1型号。

4.3操作步骤

(1)目镜测微尺的校正

将目镜测微尺装入目镜筒内的隔板上,使刻度朝下(字体呈正面)。把镜台测微尺置于载物台

上,使刻度朝上,并对准光源。先用低倍镜找到镜台测微尺的刻度,改用高倍镜观察,当看清镜台测微尺的刻度后,转动目镜,使目镜测微尺与镜台测微尺的刻度平行,移动推动器,使目镜测微尺的“0”点与镜台测微尺的某一刻度重合,然后,仔细寻找两尺第2个完全重合的刻度。计数两重合刻度之间目镜测微尺的格数和镜台测微尺的格数。

(2)计算公式

因为镜台测微尺刻度每格长10µm,所以由(1)公式计算出所校正的目镜测微尺每格所代表的长度。

镜台测微尺格数×10

目镜测微尺的每格长度(µm)= (1)

目镜测微尺格数

例如:目镜测微尺20小格等于镜台测微尺3小格,镜台测微尺每格10µm,则3小格的宽度为3×10=30µm,那么,相应地在目镜测微尺上每小格大小为:

3×10

= 1.5µm

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(3) 注意事项

(3.1)目标物的测量重复4次,取平均值;

(3.2)先低倍再高倍;

(3.3)重叠线格数越多误差越小;

(3.4)当更换不同放大倍数的目镜或物镜时,必须校正目镜测微尺每一格所代表的长度。

(4) 目标物大小的测定

取下镜台测微尺,将目标物制片置于载物台上,先在低倍镜和高倍镜下找到目的物。然

后在高倍镜下用目镜测微尺测量标本的长和直径。

测定目标物时,测量10个。用最大和最小的数值来表示目标物大小的范围。

4.4实验结果

(1)分别求出使用低倍镜(10X),高倍镜(40X)时目镜测微尺每格代表的长度:低倍镜:目镜测微尺每格代表的长度= ×10(μm)= μm

高倍镜:目镜测微尺每格代表的长度= ×10(μm)= μm

(2)测量10个目标物的大小并记录:

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