Waters e2695高效液相色谱仪操作规程

Waters e2695高效液相色谱仪操作规程

1 目的

指导和规范Waters e 2695高效液相色谱仪的操作。

2适用范围

该操作规程适用于Water e 2695高效液相色谱仪的操作。

3职责

检验员应按操作规程进行仪器操作，质量监督员负责监督该操作规程的正确执行。

4操作

4.1仪器组成和开机

4.1.1仪器组成

本仪器由Waters e 2695分离单元、Waters 2998二极管阵列检测器、Waters ELSD 2424 蒸发光散射检测器、Empower3色谱工作站和打印机组成。

Waters e2695分离单元包括四元梯度洗脱的溶剂输送系统，四通道在线真空脱气，可

容纳120个样品瓶的自动分离单元，柱温箱，内置的柱塞杆密封垫清洗系统，溶剂瓶托盘；显示器，键盘用户界面。

4.1.2开机

4.1.2.1依次接通Waters e 2695分离单元、检测器、计算机和打印机的电源。

4.1.2.2接通Waters e2695分离单元后，约20s仪器开始自检，约3mn内各部件的

初始化完成，待主屏幕上方标题区出现“Idle”时，仪器进入待命状态。

4.2溶剂管路系统的准备

4.2.1流动相脱气

确认所有溶剂管路都充满溶剂，按[Menu／Status】，进入“Status(1)”屏幕，光标选“Degasser”，按[Enter】。

4.2.2灌注

当色谱仪流路没有溶剂或系统中有空气时，需进行干灌注(DryPrime)，注入流动相。

否则，进行湿灌注(Wet Prime)以驱除气泡。干灌注：按主机面板上[Menu／Status】，进入“Status(1)”显示，按[Direct Function】，选择“Dry Prime”，选溶剂通道，如Open A，选“DurationIIi按数字键输入5分钟，按”COntinue”，待限定时间结束后，重复操作，使所需的溶剂通道注满流动相。湿灌注：进入“Status(1)”显示，选溶剂通道，输入100％，按[Direct Function]，选“Wet Prime”，按【OK】，根据面板提示设置流速及时间(默认流速为7．5ml ／min，一般不用更改，时间可设置为5min)，按【0K】。

4.3样品管理系统的准备

4.3.1冲洗自动进样器

在“status(1)”，屏幕下，光标选“Composition”，输入流动相的组成。按【Direct Function]，光标选“Purge Injector”，按【Enter]，显示“Purge Injector”屏幕，输入“Sample Loop Volumes 6．0”，光标下移“Compression Check”，按任意数字键，按【OK]。

4.3.2冲洗进样针

在主屏幕下，按【Diag]，显示“Diagnostics”屏幕，按【Prime Ndl Wash】，显示“Prime Needle Wash”屏幕，按[Start]，30s内应见溶剂从废液排放口流出。按【Close】、【Exit】。4.3.3冲洗柱塞杆密封垫

在主屏幕下，按【Diag]，显示”Diagnostics”屏幕，按【Prime Seal Wash】，显示“Prime Seal Wash”屏幕，按[Start]，30s内应见溶剂从废液排放口流出。按【Close】、【Exit】。待排放口有水流出，按【Half】、【Close】、【Exit】。

4.3.4装入样品与转盘

打开样品舱门，显示"Door is Open"屏幕，将样品盘取出，把样品瓶插入样品盘后，装入样品盘，按【Next】直至所有样品盘装毕，关好舱门。

4.4色谱柱平衡

换上检验所需的色谱柱和流动相，进入"Status(1)”显示，选择流路、设定流速、柱温，按【Enter】开始注入流动相，通常情况下约1 5～30分钟色谱柱可达到平衡，可以开始进样，采集数据。

5 Empower 3软件的应用

5.1 建数据采集方法

5.1.1双击电脑屏幕上的"Empower"快捷图标，出现Empower登录界面，输入用户名

和密码。

5.1.2单击高级键，选择用户类型和QuickStart界面。

5.1.3选择QuickStart界面，点击“确定”，然后选择选定的操作项目以及色谱系统(仅

查看数据可选择色谱系统中的“没有系统”)，单击“确定”。

5.1.4登录Empower的QuickStarlt界面。

5.2 编辑仪器方法和方法组（以e2695_2998为例）。

5.2.1．采集栏单击“方法组编辑向导”：

5.2.2选择“新建”选项。

5.2.3弹出仪器方法编辑器。

5.2.4单击“2695”，弹出2695编辑界面。

5.2.4.1 Aliance系统(包括2695、2795和2695D)通用编辑页面中，可选择“单次输送

体积”，请针对不同的流速选定适当的单次输送体积，以确保最佳的流速精度与准度。

5.2.4.2查看脱气选项，确认设置正确。

5.2.4.3流量选项中设置“泵模式”、“总流量”以及流动相配比。

5.2.5单击2998，弹出2998编辑界面。

5.2.5.1 3D数据采集：在通用栏中选择启用3D数据，输入检测波长的范围；

5.2.5.2采集2D数据，点击“2D通道”，最多可同时采集8个不同波长的通道的数据。5.2.6点击“文件”，选择“另存为”：输入仪器方法名称，点击“保存”；点击“文件”，选择“退出”。

5.2.7在被选项中选择所需的仪器方法名称，点击“下一步(N)”。

5.2.8在下拉菜单中选择所需的处理方法和报告方法（如果没有合适的方法选择“无处理”、“无报告”)，点击下一步。

5.2.9输入方法组名称，单击“完成”。

5.3进样

点击进入“平衡系统／监视基线”界面，选择相应的仪器方法，点击“平衡／监视器，在监视窗口监视基线至系统平衡，停止系统监视状态，点击“进样”。

5.3.1．单进样：点击，进入“定义单进样参数”编辑界面，输入样品名、功能、方法组等参数，点击“进样”。

5.3.2使用向导建立样品组和样品组方法。

5.3.2.1选择“运行样品”，然后单击“样品队列”，进入样品列表。

5.3.2.2单击“新建样品组向导”，建立样品组。

5.3.2.3选择创建样品组方法类型为“Lc或PDA”，然后点击“定义样品板”。

5.3.2.4在“选择标准进样在那里开始”中选择合适的选项。检查开始加载样品瓶的位置是否正确，点击“下一步”。