高效氯氰菊酯在柑橘中的残留及降解动态研究

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氯氰菊酯在甘蓝上的残留动态及室内清洗效果的研究

氯氰菊酯在甘蓝上的残留动态及室内清洗效果的研究付建涛;黄日林;王世英;李梓豪;张志祥【摘要】研究了3.2％甲维盐·氯氰菊酯微乳剂中氯氰菊酯在甘蓝上的消解动态、残留以及室内清洗的去除效果,为甘蓝的安全食用提供理论依据.检测得到2013年氯氰菊酯在广东、广西、湖北三地甘蓝上的残留动态以及不同时间、不同温度清洗对高效氯氰菊酯残留量的影响.氯氰菊酯在甘蓝中降解速率较快,半衰期为2.14 ～2.56 d,消解动态符合一级动力学方程.残留量与氯氰菊酯施药量、施药次数有关,氯氰菊酯在甘蓝中的残留量随着施药量增多而略有增高,施药次数越多残留量也越高.最终残留量的检测表明在国家规定的安全间隔期内即其在施药后的第3天采收氯氰菊酯的残留量均低于国家规定的最大残留限量(5 mg/kg).另外,在室内清洗过程中水温越高、洗涤浸泡时间越长,供试农药的去除率越高,基本可以保证甘蓝的放心安全使用.实验证明在安全间隔期内采收甘蓝经过室内常规清洗程序处理后食用是相对安全的.【期刊名称】《西南农业学报》【年(卷),期】2016(029)010【总页数】4页(P2388-2391)【关键词】氯氰菊酯;甘蓝;残留;清洗【作者】付建涛;黄日林;王世英;李梓豪;张志祥【作者单位】华南农业大学天然农药与化学生物学教育部重点实验室,广东广州510642;广州甘蔗糖业研究所广东省甘蔗改良与生物炼制重点实验室,广东广州510316;华南农业大学天然农药与化学生物学教育部重点实验室,广东广州510642;华南农业大学天然农药与化学生物学教育部重点实验室,广东广州510642;华南农业大学天然农药与化学生物学教育部重点实验室,广东广州510642;华南农业大学天然农药与化学生物学教育部重点实验室,广东广州510642【正文语种】中文【中图分类】X592甘蓝在我国各地普遍栽培，是东北、西北、华北等地区春、夏、秋季的主要蔬菜之一，具有易贮耐运、产量高和品质好等特点[1]。

气相色谱法检测柑橘中的腈菌唑残留

气相色谱法检测柑橘中的腈菌唑残留Abstracts: A method for the determination of myclobutanil residue in orange was established by gas chromatography with nitrogen phosphorus detector(GC-NPD). Myelobutanil residue was extracted from orange by acetonitrile, and cleaned up by ProElut Carb/NH2 SPE and detected by GC with NPD. The detection limit was 0.008 mg/kg, the average recoveries of myclobutanil in orange peel, pulp and whole orange at the spiked amounts of 0.10,0.50, 1.00 mg/kg were 89.4%~98.0%, 90.0%~108.2% and 94.0%~101.0%, respectively, and the relative standard deviations were 9.65%~14.97%, 1.10%~13.78% and 6.27%~16.15%, respectively. The results showed that this method was suitable for detecting myclobutanil in orange.Key words: gas chromatography; myclobutanil; orange; determination; residue腈菌唑是美国罗姆-哈斯公司1982年开发的一种广谱杀菌剂,又名叶斑清[1],英文名为myclobutanil,化学名称为2-(4-氯苯基)-2-(1H-1,2,4-三唑-1-甲基)乙腈,分子式:C15H17ClN4｡腈菌唑属三唑类杀菌剂,是甾醇脱甲基化抑制剂,具有内吸､保护和治疗性｡其原药为淡黄色固体,熔点69 ℃,纯品为无色针状结晶,沸点202~208 ℃,25 ℃蒸汽压213 MPa,25 ℃水中溶解度142 mg/L,溶于醇､芳烃､酯､酮(50~100 g/L),不溶于脂族烃,日光下其水溶液易降解[1,2]｡近年来,在我国农业生产中大量使用腈菌唑农药,用于防治水果叶斑病､黑星病等,被认为是一种前景较好的杀菌剂[2,3]｡目前仅有小麦和毛豆中腈菌唑残留量分析技术的报道[1-5],而腈菌唑在柑橘中残留量的分析技术尚未见报道｡本研究建立了柑橘中腈菌唑残留的气相色谱分析方法,以期为我国柑橘中腈菌唑残留量检测提供技术参考｡1材料与方法1.1材料柑橘分别采自于武汉和贵州等地的某柑橘种植基地,采收后,分别取果皮､果肉､全果均质分装,储存于-18 ℃冰箱中待用｡1.2试剂分析纯乙腈､正己烷､甲苯,均购于Mallinckrodt Baker公司;分析纯氯化钠购于国药试剂公司,在140 ℃下烘烤4 h备用｡腈菌唑标准溶液,准确称取腈菌唑标样(来源于农业部环境保护科研监测所)(纯度>95%),以丙酮定容至10 mL,置于-18 ℃冰箱待用,使用前依所需浓度准确吸取适量体积注入容量瓶中并以丙酮定容,配制标准工作溶液｡1.3仪器及条件GC-2010气相色谱仪,带氮磷检测器NPD(岛津,日本),毛细管柱(Rtx-1,30 m×0.25 mm×0.25 μm);AB204/01型分析天平和PL2002/01型电子顶载天平(梅特勒-托利多,瑞士);FJ-200型高速分散均质机(上海标本模型厂,中国)｡1.4方法1.4.1腈菌唑提取分别称取10 g搅碎混匀的柑橘果皮､果肉､全果试样,置于100 mL具塞量筒中,加入20 mL乙腈,匀浆2 min｡再加入3~5 g氯化钠,匀浆1 min,盖上塞子,3 500 r/min离心5 min,使乙腈和水相分层｡1.4.2石墨化炭黑柱/氨基柱组合净化从100 mL具塞量筒中吸取10 mL乙腈相溶液(上层)放入150 mL烧杯中[6],将烧杯放在水浴锅(65 ℃)上加热,将乙腈蒸发近干｡用1 mL乙腈-甲苯(体积比3∶1)溶液溶解烧杯中的试样残渣,全部转入石墨化炭黑柱-氨基柱｡再用1 mL乙腈-甲苯(体积比3∶1)清洗烧杯,并入上述石墨化炭黑柱-氨基柱[7],弃去全部流出液｡用10 mL乙腈-甲苯(体积比3∶2)洗脱石墨化炭黑柱-氨基柱,接收全部洗脱液｡于水浴锅中蒸发近干取出,加入丙酮-正己烷(体积比2∶8)定容至5 mL,供气相色谱分析｡1.4.3气相色谱分析升温程序:100 ℃保持1 min,然后以20 ℃/min升温至180 ℃;再以10 ℃/min升温至300 ℃;保持6 min｡进口温度:260 ℃,进样量:1 μL,载气:氮气(≥99.999%),流速为 1.0 mL/min;氢气:1.5 mL/min;空气:145 mL/min;NPD温度:300 ℃;进样方式:不分流进样,0.75 min后打开分流阀和隔垫吹扫阀｡2结果与分析2.1提取方法的选择乙腈是农残分析中常用的提取溶剂[8-10],能与水互溶,加入氯化钠后可与水分层,可避免糖类､脂肪､蛋白质等杂质干扰,对腈菌唑提取回收率较好｡本研究比较了甲醇､乙腈的提取效果,将样品用甲醇萃取,加入氯化钠水溶液,使用二氯甲烷萃取,净化后再用丙酮定容上机｡通过对不同提取方法的摸索,确定使用乙腈提取法,实验结果表明,采用乙腈提取的基质干扰小,回收率较高｡2.2净化方法的选择比较了不同的净化方法,首先采用乙腈-甲苯(体积比3∶1)直接洗脱,效果不理想｡再考察了直接用乙腈-甲苯(体积比3∶2)洗脱,也存在干扰,通过对不同的净化方法的摸索,确定使用乙腈-甲苯(体积比3∶1)上样､淋洗,弃去淋洗液,再收集用乙腈-甲苯(体积比3∶2)洗脱的溶液,回收效果好｡2.3色谱分析条件的选择经过多次实验,确定采用本方法的程序升温,使用Rtx-1毛细管色谱柱进行分离可得到较好的分离结果,本方法可将腈菌唑和样品中杂质完全分离｡依照上述实验条件,腈菌唑保留时间约为12.4 min,以峰面积作为定量指标,标准色谱图(见图1)及柑橘全果的空白及添加0.1 mg/kg标样色谱图(见图2)如下:2.4线性范围腈菌唑在水果中的限量标准为0.20~1.00 mg/kg[11,12],因此本方法以0.01~1.00 mg/kg作为标准曲线的范围,分别配制了0.01 ､0.05､0.10､0.50､1.00 mg/L标准工作液,取1.00 μL进行测定,外标法定量｡以腈菌唑质量浓度X(mg/L)为横坐标,以相应的峰面积Y为纵坐标绘制工作曲线(图3),回归方程为Y=496 761X-2 982.4,R=0.999 7｡2.5回收率及方法精密度分别在10 g柑橘果肉､全果､果皮样品中加入不同量的标准溶液,按照样品处理步骤进行添加回收实验,每个添加浓度重复5次,结果见表1｡从表1中可以看出,0.10､0.50､1.00 mg/kg 3个添加水平在果皮､果肉､全果中的回收率分别为89.4%~98.0%､90.0%~108.2%､94.0%~101.0%,相对标准偏差(RSD)分别为9.65%~14.97%､1.10%~13.78%､6.27%~16.15%,方法的重现性较好｡2.6方法检出限当称样量为10 g,定容体积为5 mL,进样量为1 μL时,以3倍信噪比计算检出限,结果为0.008 mg/kg｡2.7样品测定利用该方法对在武汉､贵州等地的柑橘部分试验样品的全果进行腈菌唑残留检测,典型色谱图如图4所示｡采用外标法测定目标化合物的含量,其结果见表2｡3结论本研究的柑橘中腈菌唑残留量检测方法表明,供检样品经乙腈提取,石墨化碳柱/氨基柱净化,使用乙腈-甲苯(体积比3∶1)上样､淋洗,弃去淋洗液,再收集用乙腈-甲苯(体积比3∶2)洗脱的溶液,蒸近干,加入丙酮-正己烷(体积比2∶8)定容至 5 mL,采用GC-NPD测定技术方法,具有方法快速､准确､重复性好等特点,同时还具备高灵敏度的特征,对腈菌唑的检出限达到0.008 mg/kg,各项技术指标均符合农药残留量分析要求,可用于柑橘中腈菌唑的残留量的检测分析｡参考文献:[1] 陈丽萍,林志平. 毛豆中腈菌唑残留量的气相色谱法测定[J]. 亚热带植物科学,2006,35(3):48-50.[2] 郭桂文,李皓,史记,等. 12.5%腈菌唑乳油防治香蕉叶斑病试验研究[J]. 农药,2000, 39(9):31.[3] 王璧生,刘景梅,彭埃天,等.腈菌唑防治香蕉黑星病药效试验[J]. 广东农业科学,2004(3):38-39.[4] 夏昕,吴剑英,王立东,等. 腈菌唑在小麦､土壤上残留与降解的动态研究[J]. 农药,1996,35(10):29-31.[5] 施翠娥,陈枥乙,王军,等. 12.5%腈菌唑乳油在梨和土壤中的残留分析方法及残留动态研究[J]. 安徽农业科学,2008,36(16):6850-6852.[6] SN/T 1624-2009进出口食品中嘧霉胺､嘧菌胺､腈菌唑､嘧菌酯残留量的检测方法气相色谱质谱法[S].[7] 刘锦霞,王美玲,黄志强,等. 高效液相色谱-串联质谱法测定猪肉中10种苯甲酰脲类杀虫剂[J]. 分析试验室,2010,29(9):39-43.[8] GB/T 19648-2005水果和蔬菜中446种农药多残留测定方法气相色谱-质谱和液相色谱-串联质谱法[S].[9] 王连珠,杨明智,王瑞龙,等. 气相色谱-质谱法测定生姜中丙炔氟草胺残留量[J]. 食品科学,2006,27(10):461-463.[10] ZHI Y Z, XIAN J L, XIANG Y Y, et al. Pesticide residues in the spring cabbage(Brassica oleracea L. var. capitata) grown in open field [J]. Food Control, 2006(4):1-8.[11] DB31/T 262.2-2001 安全卫生优质水果生产技术操作规范[S].[12] 赵雁冰,庞国芳,范春林,等. 气相色谱-串联质谱法快速测定禽蛋中203种农药及化学污染物残留[J]. 分析试验室,2011,30(5):8-21.。

高效氯氟氰菊酯的微生物降解研究进展

化学与生物工程２０２０,V o l ．３７N o ．０３㊀w w w．h x y s w gc ．c o㊀C h e m i s t r y &B i o e n g i n e e r i n g基金项目:山西省重点研发计划项目(２０１８０３D ２２１００２Ｇ１)收稿日期:２０１９Ｇ１１Ｇ２８作者简介:王晓慧(１９９３－),女,山西吕梁人,硕士研究生,研究方向:高效氯氟氰菊酯的微生物降解,E Ｇm a i l :１１０３７５２３２８＠q q．c o m ;通讯作者:徐宏英,博士,E Ｇm a i l :４２０９４５３９６＠q q ．c o m ;张智清,硕士研究生,E Ｇm a i l :６０５６７３１２７＠q q．c o m .d o i :１０．３９６９/j．i s s n ．１６７２－５４２５．２０２０．０３．００２王晓慧,商文贤,徐宏英,等．高效氯氟氰菊酯的微生物降解研究进展[J ]．化学与生物工程,２０２０,３７(３):７Ｇ１４．WA N G X H ,S HA N G W X ,X U H Y ,e t a l ．R e s e a r c h p r o g r e s s i nm i c r o b i a l d e g r a d a t i o no f l a m b d a c y h a l o t h r i n [J ]．C h e m i s t r y &Bi o Ｇe n g i n e e r i n g,２０２０,３７(３):７Ｇ１４．高效氯氟氰菊酯的微生物降解研究进展王晓慧,商文贤,徐宏英∗,张智清∗(太原科技大学环境与安全学院,山西太原０３００２４)摘㊀要:简介了高效氯氟氰菊酯的性质特征,综述了其在土壤和农作物中的残留现状以及降解该农药的微生物㊁降解酶㊁降解基因㊁降解机理和途径等,提出了寻求超强降解的微生物资源㊁提高微生物酶的稳定性和降解效率将是今后微生物降解高效氯氟氰菊酯的重点研究方向.关键词:高效氯氟氰菊酯;微生物降解;降解酶;降解基因;降解机理中图分类号:T Q ４５０．２㊀㊀㊀㊀文献标识码:A㊀㊀㊀㊀文章编号:１６７２Ｇ５４２５(２０２０)０３Ｇ０００７Ｇ０８R e s e a r c hP r o g r e s s i n M i c r o b i a lD e g r a d a t i o no f l a m b d a C yh a l o t h r i n W A N GX i a o h u i ,S H A N G W e n x i a n ,X U H o n g y i n g ∗,Z H A N GZ h i q i n g∗(C o l l e g e o f E n v i r o n m e n t a n dS a f e t y ,T a i y u a nU n i v e r s i t y o f S c i e n c e a n dT e c h n o l o g y ,T a i yu a n ０３００２４,C h i n a )A b s t r a c t :W eb r i e f l y i n t r o d u c e t h ec h a r a c t e r i s t i c so f l a m b d a c yh a l o t h r i n ,a n dr e v i e wt h ec u r r e n t s t a t u so f r e s i d u e s i n c o n t a m i n a t e d s o i l a n d c r o p s ,a n dm i c r o o r g a n i s m ,e n z y m e ,g e n e ,d e g r a d a t i o nm e c h a n i s ma n d p a t h w a yf o r d eg r a d i n g l a m b d a c yh a l o t h ri n ．F u r t h e r m o r e ,w e f i n a l l yp u t f o r w a r d t h ek e y r e s e a r c hd i r e c t i o n so fm i c r o b i a l d e g r a d a t i o no f l a m b d a c y h a l o t h r i n i n t h e f u t u r e ,w h i c ha r e t o s e e k f o r s u p e r d e gr a d a t i o no fm i c r o b i a l r e s o u r c e s a n d i m p r o v e t h e s t a b i l i t y a n dd e g r a d a t i o ne f f i c i e n c y o fm i c r o b i a l e n z ym e s ．K e y w o r d s :l a m b d a c y h a l o t h r i n ;m i c r o b i a ld e g r a d a t i o n ;d e g r a d a t i o ne n z y m e ;d e g r a d a t i o n g e n e ;d e g r a d a t i o n m e c h a n i s m㊀㊀拟除虫菊酯是天然除虫菊素的衍生化合物,因其较低的毒性㊁良好的稳定性,杀虫谱广,对哺乳动物安全性高,被广泛应用于公共卫生和农业领域.拟除虫菊酯进入环境后会在固相㊁液相㊁气相中循环,过度使用会污染陆地和水生环境,也会对非目标生物造成影响[１Ｇ２].其中,高效氯氟氰菊酯是新一代Ⅱ型广谱高效拟除虫菊酯杀虫剂,毒性更强,药效更快.它具有神经毒性,通过干扰钠通道作用于昆虫的神经系统,并破坏神经元而达到除虫效果[３].高效氯氟氰菊酯过去被认为具有对非靶标生物具有低毒㊁易被人体内氧化酶系统降解㊁不积累㊁低毒等特点.但研究表明,高效氯氟氰菊脂具有脂溶性,含有αＧ氰基Ｇ３Ｇ苯氧基苯甲醇和含有卤素基团羧酸部分,吸入后很容易从呼吸道吸收,口服后也容易在胃肠道吸收[４].频繁过量地使用高效氯氟氰菊酯会增加非靶标生物的环境风险,会对生物的运动系统㊁生殖系统㊁呼吸系统㊁免疫系统等造成损害[５Ｇ７].高效氯氟氰菊酯在自然光照射下具有光稳定性,并且对植物和微粒有很强的吸附亲和力[８],容易在环境中大量残留.微生物降解效率高,成本低,生态恢复良好,环境友好,无二次污染,在农药降解方面有很王晓慧,等:高效氯氟氰菊酯的微生物降解研究进展/２０２０年第３期好的前景和优势[９Ｇ１０],是修复高效氯氟氰菊酯残留的主要方法[１１].作者综述了高效氯氟氰菊酯在土壤和农作物中的残留现状及其微生物降解的研究进展.１㊀高效氯氟氰菊酯的残留现状１．１㊀高效氯氟氰菊酯在土壤中的残留动态高效氯氟氰菊酯在土壤中的高疏水性和持久性,使其在土壤中迁移和大量残留,会对土壤的生态功能㊁菌群结构㊁生态平衡造成影响.郑钊等[１２]研究了功夫菊酯在海南沙土和壤土的残留动态:好氧条件下,在沙土中的半衰期(T１/２)为１１５．５２d,壤土中的T１/２为９９．０２d;厌氧条件下,沙土中的T１/２为４９．５１d,壤土中的T１/２为３０．１３d,表明高效氯氟氰菊酯在壤土中的降解较好,且厌氧条件下降解速度比好氧条件下快.杜红霞等[１３]以济南㊁太原及杭州三地为试验点,测定了高效氯氟氰菊酯在梨园土壤中的T１/２㊁安全施用剂量:在土壤中的T１/２为２．６~２３．１d,太原点和杭州点低于济南点,且２．５％的高效氯氟氰菊酯的安全施用剂量为１２．５g a．i． h m－２.李宏宇等[１４]研究了杭州㊁乌鲁木齐安宁渠的高效氯氟氰菊酯在大白菜土壤中的残留动态:T１/２为９．０~１１．９d,乌鲁木齐安宁渠的土壤残留量稍低于杭州.乌鲁木齐安宁渠土壤偏碱性,试验时间在夏季;杭州的土壤偏酸性,试验时间在冬季;表明高效氯氟氰菊酯更易在碱性㊁温度比较高的环境下降解.研究人员[１５Ｇ１７]同时测定了白菜㊁玉米和小麦土壤中高效氯氟氰菊酯的残留,在玉米土壤中的T１/２为１９．６~２８．１d,在小麦土壤中的T１/２为１６．５~１９．３d,而在小白菜土壤中降解迅速,T１/２为８．３~１３．４d,发现高效氯氟氰菊酯在玉米土壤中降解较慢.可见,土壤的类型㊁酸碱度㊁通气量㊁温度㊁时间㊁农作物种类等均会影响高效氯氟氰菊酯在土壤中的降解.１．２㊀高效氯氟氰菊酯在蔬菜㊁水果及农作物中的残留动态㊀㊀高效氯氟氰菊酯可有效防治蔬菜㊁水果及农作物上多种害虫,但大量或不规范的施用,会造成农药在果蔬和农作物中的残留,最终通过食物链在人体内累积,威胁人类健康.山西韭菜农残检测显示,农药总检出率为８０％,其中高效氯氟氰菊酯检出率为１６．７％[１８];广西荔枝主产区农残现状的调查表明,高效氯氟氰菊酯的检出率为２０．４％,超标率为０．０２％[１９];北京市蔬菜农残状况调查显示,高效氯氟氰菊酯超标率为０．２％,韭菜根部农药残留明显[２０];杭州市蔬菜农残现状表明,拟除虫菊酯类农药的总检出率为１２．６％,总超标率为２．１％,高效氯氟氰菊酯的检出率最高[２１];李琰等[２２]对上海市闵行区市场果蔬农残情况作了分析,高效氯氟氰菊酯检出率最高,其残留量最高的蔬菜㊁水果分别为鸡毛菜和苹果;王冬群等[２３]对蔬菜中拟除虫菊酯的残留情况进行了调查,其中豌豆中高效氯氟氰菊酯的超标率为２５％;徐晶等[２４]抽检了哈尔滨市的１７家超市蔬菜样品,发现菊酯类农药总检出率为１２．６７％,超标率为２．９８％,高效氯氟氰菊酯检出率为１２．５％,叶类蔬菜问题最多.郝宁等[２５]调查了２０１０~２０１３年邯郸市蔬菜中的拟除虫菊酯残留,８种拟除虫菊酯的总检出率为１８．６２％,高效氯氟氰菊酯的检出率最高,农药主要集中在鳞茎类㊁叶茎类㊁豆类蔬菜中.综上,我国高效氯氟氰菊酯的残留和超标现象较为普遍,由于其对光和热的稳定性,在环境中有很长的半衰期,它引起的一些生物慢性毒性㊁致癌致突变性严重威胁人类健康[２６Ｇ２８].２㊀高效氯氟氰菊酯降解菌我国是一个生物资源大国,微生物物种㊁代谢和生态类型丰富多样,自然环境中存在着大量的细菌㊁放线菌㊁真菌及藻类等微生物,为菌株的筛选提供了充足的资源.从长期高浓度农药污染土壤中筛选高效降解菌株,再与土著微生物群落共同作用降解农药残留,是修复污染土壤的有效途径[２９],微生物功能的生物修复是国际土壤修复科学中的热点内容[３０].目前,研究人员已经分离到大量的拟除虫菊酯类农药降解菌株,见表１[３１Ｇ３９].有关高效氯氟氰菊酯降解菌的研究也不少,见表２.王彦辉等[４０]筛选到一株高效降解真菌,经鉴定为青霉菌(P e n i c i l l i u m s p．),菌株在p H＝７．０㊁３０ħ㊁底物浓度为５０m g L－１时降解效果最好,在此条件下培养７d,功夫菊酯降解率可达到８３．９０％.刘珍[４１]分离筛选到两株真菌,为棘孢曲霉(A s p e r g i l l u s a c u l e a t u s)和草酸青霉(P e n i c i l l i u mo x a l i c u m),在２８ħ㊁接种量为５％的条件下培养５d后,两株真菌对１００m g L－１功夫菊酯的降解率分别为６９．８９％和８４．８３％.张建等[４２]分离到一株对功夫菊酯有高效降解作用的细菌,鉴定为芽孢杆菌属(B a c i l l u s s p．),它的最适生长温度㊁p H值分别为３０ħ㊁７,底物浓度为１００m g L－１时,３d对功夫菊酯的降解率为８５％.徐莲等[４３]分离到一株三氟氯氰菊酯高效降解细菌,为芽孢杆菌属(B a c i l l u s s p．),该菌株最适生长温度㊁p H值分别为３０ħ㊁８~９,具有耐盐性,底物浓度为１００m g L－１时,１d降解率可达到９８．４％,且对三氟氯氰菊酯的耐受性极强,可以达到６００m g L－１.翟逸[４４]分离到一株人苍白杆菌(O c h r o b a c t r u ma n t h r o p i),菌株在３０ħ㊁王晓慧,等:高效氯氟氰菊酯的微生物降解研究进展/２０２０年第３期表１㊀降解拟除虫菊酯的微生物类群T a b．１㊀T h em i c r o b e g r o u p f o r d e g r a d i n gp y r e t h r i o d s属名分离来源可降解农药参考文献寡养单胞菌属(S t e n o t r o p h o m o n a s)农药厂污染淤泥中毒死蜱和联苯菊酯[３１]芽孢杆菌属(B a c i l l u s C o h n)茶园土壤氯氰菊酯[３２]苍白杆菌属(O c h r o b a c t r u m)拟除虫菊酯污染土壤顺式和反式氯氰菊酯[３３]沙雷氏菌属(S e r r a t i a B i z i o)溴氰菊酯污染土壤溴氰菊酯㊁高效氯氰菊酯㊁氯氰菊酯[３４Ｇ３５]不动杆菌属(A c i n e t o b a c t e r s p．)农药厂附近的地表土壤三氟氯氰菊酯㊁联苯菊酯㊁溴氰菊酯㊁氯氰菊酯[３６]产碱菌属(A l c a l i g e n e s)三氟氯氰菊酯㊁甲氰菊酯㊁溴氰菊酯㊁氯氰菊酯㊁氯菊酯[３７]曲霉属(A s p e r g i l l u s)污水处理厂排污口高效氯氰菊酯[３８]链轮丝菌属(S t r e p t o v e r t i c i l l i u m)使用氯氰菊酯的蔬菜大棚氯氰菊酯[３９]链霉菌属(S t r e p t o m y c e s)使用氯氰菊酯的蔬菜大棚氯氰菊酯[３９]诺卡氏菌属(N o c a r d i a)使用氯氰菊酯的蔬菜大棚氯氰菊酯[３９]表２㊀降解高效氯氟氰菊酯的微生物类群T a b．２㊀T h em i c r o b e g r o u p f o r d e g r a d i n g l a m b d aＧc y h a l o t h r i n属名分离来源菌株名称参考文献青霉属(P e n i c i l l i u m)农药厂污水处理口青霉菌(P e n i c i l l i u m s p．)[４０]青霉属(P e n i c i l l i u m)农药厂生化处理池草酸青霉(P e n i c i l l i u mo x a l i c u m)[４１]曲霉属(A s p e r g i l l u s)农药厂生化处理池棘孢曲霉(A s p e r g i l l u s a c u l e a t u s)[４１]芽孢杆菌属(B a c i l l u s s p．)农药厂废水处理池G FＧ１菌株[４２]芽孢杆菌属(B a c i l l u s s p．)农药厂废水排放口G FＧ３菌株[４３]苍白杆菌属(O c h r o b a c t r u m)拟除虫菊酯生产厂废水处理系统人苍白杆菌(O c h r o b a c t r u ma n t h r o p i)[４４]鞘氨醇杆菌属(S p h i n g o m o n a s s p．)农药厂排污口的污泥鞘氨醇杆菌(S p h i n g o b a c t e r i u m s p．)[４５]不动杆菌属(A c i n e t o b a c t e r s p．)农药厂排污口不动杆菌(A c i n e t o b a c t e r s p．)[４６]产碱菌属(A l c a l i g e n e s)农药厂废水排污口Y F１１菌株(未知种)[４７]肠杆菌属(E n t e r o b a c t e r)农药长期污染土样阴沟肠杆菌(E n t e r o b a c t e r c l o a c a e)[４８]p H＝７．０㊁２．０％接种量㊁高效氯氟氰菊酯浓度５０m g L－１时,降解率为８４％,耐受能力强,对高效氯氟氰菊酯耐受浓度可达到４００m g L－１,且该菌株对其中间代谢产物３Ｇ苯氧基苯甲酸能有效降解,使残留被彻底清除.王琨[４９]筛选到３株高效氯氟氰菊酯降解菌,菌株B EＧ１降解率最高,在３０ħ㊁p H值７．０㊁初始浓度为１００m g L－１时,降解率为４９．６％.吴浩豪等[４５]筛选到一株鞘氨醇杆菌属(S p h i n g o b a c t e r i u m s p．),对氯氟氰菊酯有降解作用,该菌株的最适温度㊁p H值分别为３０ħ㊁７．０,菌株有很宽的p H值适用范围,在p H 值５~９的条件下,对氯氟氰菊酯的降解率都可以达到５０％以上,底物浓度为２００m g L－１时,７d降解率可以达到７７．２％.肖红利[４６]分离得到一株不动杆菌(A c i n e t o b a c t e r s p．),最适温度㊁p H值分别为２８ħ㊁７．０,具有广谱性,能以拟除虫菊酯㊁有机磷等多种农药为碳源,且对农药的耐受浓度高达５００m g L－１,菌株在２８ħ㊁１８０r m i n－１培养１０８h,对２００m g L－１三氟氯氰菊酯降解率为７７．８％.虞云龙等[４７]分离到一株产碱菌属(A l c a l i g e n e s)的一个未知种,该菌株最适温度㊁p H值分别为３０ħ㊁７．０~７．５,该菌株具有广谱性,对三氟氯氰菊酯有降解作用,５０m g L－１的三氟氯氰菊酯降解速率为３．０４μm o l L－１ h－１.目前筛选到的能降解高效氯氟氰菊酯菌株降解能力强,有广谱性,大多是细菌,少量为真菌,很少筛到放线菌.细菌对环境适应能力强,在高浓度农药的作用下,易发生突变,在农药的微生物降解中起主导作用[５０].３㊀高效氯氟氰菊酯的降解酶和降解基因农药降解酶主要来自于微生物.微生物的降解实质是酶促反应,是微生物通过物理或化学方法,产生水解酶和各类氧化酶将农药分解转化的过程.酯酶在拟除虫菊酯的降解中具有重要的调节作用[５１].降解酶王晓慧,等:高效氯氟氰菊酯的微生物降解研究进展/２０２０年第３期通常比降解菌更能忍耐极端环境,不受温度㊁p H值㊁土著微生物吞噬㊁农药浓度等外部环境的影响,环保安全,降解谱广,降解效率高.当前拟除虫菊酯降解酶的研究主要集中在提取㊁纯化粗酶液以及酶学性质方面.林淦[４８,５２]从阴沟肠杆菌WＧ１中提取的粗酶液,可以水解氯氟氰菊酯,反应速率最大为６３．９３n m o l m L－１ m i n－１,氯氟氰菊酯在浓度为２０m g L－１㊁３５ħ㊁p H值７．５时,粗酶液在１h的降解率可以达到８３％,且该粗酶液的胞内酶表现出降解底物的活性.解开治等[５３]从恶臭假单胞菌X P１２中提取粗酶液,在p H值６．５~８．０㊁２５~４０ħ时对高效氯氟氰菊酯㊁高效氯氰菊酯和溴氰菊酯的降解率均在７０％左右,将粗酶液用于叶类蔬菜上,其对高效氯氟氰菊酯降解率可达到８３．５％,起催化降解作用的是胞内酶.虞云龙等[５４]从广谱性产碱菌中提取了粗酶液,该粗酶液在p H值５．０~１０．５范围内均有较好的降解活性,有广谱性,能降解部分拟除虫菊酯,降解三氟氯氰菊酯的最适p H值为７．５,米氏常数为８．６７m m o l L－１,最适温度为３２．５ħ,胞内酶对拟除虫菊酯农药起降解作用.拟除虫菊酯农药酶促降解的研究表明,降解酶具有更高的降解率,且对温度和p H值有更宽的适应性,在实际应用中有很好的前景,对农药降解起主要作用的是胞内酶.也有研究人员发现,胞外酶对降解拟除虫菊酯农药起作用,徐莲等[４３]从能高效降解三氟氯氰菊酯的芽孢杆菌中提取能降解三氟氯氰菊酯的粗酶液,酶的定域试验和底物诱导试验表明,该降解酶为组成型胞外酶,粗酶液反应温度为３０~６０ħ,在温度和p H值分别为４０ħ㊁９．０时有最高降解活性,６０ħ时酶的活性保持在５０％左右;且发现其降解基因在染色体的D N A上,不在质粒上.郭鹏[５５]对一株能高效降解甲氰菊酯的范氏鞘酯菌J ZＧ２进行深入研究,并且通过硫酸铵沉淀㊁凝胶层切和切胶回收电洗脱等纯化粗酶液,获得了一个新的菊酯水解酶P y t H,该酶属组成型胞内酶,在温度为２５~５０ħ㊁p H值为６．０~８．５时,均对酶的活性没有影响,该酶的最大降解速率和米氏常数分别为７．５３６n m o l m i n－１㊁０．０５n m o l m L－１,纯化的水解酶有广谱性,对其它拟除虫菊酯也有水解作用.从筛选到的高效降解菌株中分离到的酶含量低,且酶的分离纯化费时㊁费力㊁成本高.通过克隆酶的降解基因并进行异源表达可以提高酶的产量.关于拟除虫菊酯克隆基因的报道还很少,仅克隆到几个降解基因,即e s t P水解酶基因(克雷伯氏菌Z D１１２)㊁p y t H水解酶基因(鞘酯菌J ZＧ１)㊁p y e３水解酶基因[５６Ｇ５８].肖红利[４６]从不动杆菌属菌中克隆了氯氰菊酯降解酶片段(约５k b),并在大肠杆菌E．c o l i B L２１中进行了表达,应用分子生物学技术构建了４ＧD菌株基因组文库,从中得到的重组质粒对高效氯氰菊酯和三氟氯氰菊酯有良好降解性,重组质粒中可能有拟除虫菊酯降解基因,有待进一步的研究.翟逸[４４]构建了人苍白杆菌Y ZＧ１的基因组文库,从中克隆了一个新型的酯酶基因p y t Z,它与已知的几个拟除虫菊酯水解基因序列相似性极低,p y t Z有一个６０６b p的开放阅读框,用来编码拟除虫菊酯水解羧酸酯酶;转入大肠杆菌系统中诱导纯化获得的P y t Z蛋白,在温度２０~４５ħ和p H值６．０~８．０范围内均可以降解高效氯氟氰菊酯,P y t Z底物特异性广泛㊁酶活性高㊁稳定性好,为微生物降解拟除虫菊酯提供了有利资源.通过基因改良技术将降解酶基因转入易于繁殖的宿主中获得高表达,可增大酶产量,提高降解效率,也避免了直接使用微生物菌株存在的问题.通过基因组文库的成功构建,为高效氯氟氰菊酯降解基因的提取提供了有利条件.４㊀高效氯氟氰菊酯的降解机理和途径拟除虫菊酯类农药种类繁多,代谢途径也较为复杂,这类农药的化学式中都有酯键,其微生物降解失去神经毒素的关键就是酯键的断裂[５９].由菌株对高效氯氰菊酯㊁溴氰菊酯㊁联苯菊酯降解途径(图１~３)发现,其降解的第一步就是酯键的断裂.目前对高效氯氟氰菊酯的微生物降解机理研究较少.林淦等[４８]研究了阴沟肠杆菌对高效氯氟氰菊酯的降解途径,在粗酶液作用下,水解生成αＧ氰基Ｇ３Ｇ苯氧基苄醇和２,２Ｇ二甲基Ｇ３Ｇ(２Ｇ氯Ｇ３,３,３Ｇ三氟Ｇ１Ｇ丙烯基)环丙烷羧酸(图４).C h e n等[６０]分析了苏云金芽孢杆菌对氯氟氰菊酯的降解途径,该菌株通过酯键和芳基键的断裂,产生了６种代谢产物:αＧ羟基Ｇ３Ｇ苯氧基苯甲酰基乙腈㊁３Ｇ苯氧基苯基乙腈㊁NＧ(２Ｇ异丙氧基苯基)Ｇ４Ｇ苯氧基苯甲酰胺㊁３Ｇ苯氧基苯甲醛㊁３Ｇ苯氧基苯甲酸酯和苯酚.B iＧr o l l i等[６１]分析了海洋真菌对(ʃ)Ｇ氯氟氰菊酯的降解途径,首先被羧酸酯酶水解,酯键断裂,产生２Ｇ羟基Ｇ２Ｇ(３Ｇ苯氧基苯基)乙腈和２,２Ｇ二甲基Ｇ３Ｇ(２Ｇ氯Ｇ３,３,３Ｇ三氟Ｇ１Ｇ丙烯基)环丙烷羟酸,２Ｇ羟基Ｇ２Ｇ(３Ｇ苯氧苯基)乙腈可以通过一种氧化腈酶(将氰醇转化为醛的酶)生成３Ｇ苯氧基苯甲醛,氰醛通过氧化生成３Ｇ苯氧基苯甲酸,最后生成３Ｇ(羟基苯氧基)苯甲酸(图５).作为拟除虫菊酯的主要中间代谢产物３Ｇ苯氧基苯甲酸(３ＧP B A)比母体农药更具流动性和持久性,毒性更强,它对环境及人体有潜在危害[６２].微生物对农药的降解过程中存在污染物的不完全降解,会带来二次污染,造成被修复王晓慧,等:高效氯氟氰菊酯的微生物降解研究进展/２０２０年第３期土壤的毒性作用增强,所以研究菌株对高效氯氟氰菊酯的降解途径是很有必要的.图１㊀枯草芽孢杆菌对氯氰菊酯的降解途径F i g ．１㊀D e g r a d a t i o n p a t h w a y o f b e t a Ｇc y p e r m e t h r i nb y Ba c i l l u s s ub t i l is 图２㊀无色杆菌对溴氰菊酯的降解途径F i g ．２㊀D e g r a d a t i o n p a t h w a y o f d e l t a m e t h r i nb yC h r o m a t i c b a c t e r ia图３㊀醋酸钙不动杆菌对联苯菊酯的降解途径F i g ．３㊀D e g r a d a t i o n p a t h w a y of b i f e n t h r i n b y Ac i n e t o b a c t e r a c e t a te 图４㊀阴沟肠杆菌对高效氯氟氰菊酯的降解途径F i g ．４㊀D e g r a d a t i o n p a t h w a y o f l a m b d a Ｇc y h a l o t h r i nb yE n t e r o b a c t e r c l o a c ae图５㊀海洋真菌对(ʃ)氯氟氰菊酯的降解途径F i g ．５㊀D e g r a d a t i o n p a t h w a y o f (ʃ)l a m b d a Ｇc yh a l o t h r i n b y m a r i n e d e r i v e d f u n gi王晓慧,等:高效氯氟氰菊酯的微生物降解研究进展/２０２０年第３期５㊀结语目前对高效氯氟氰菊酯降解菌的筛选工作,仅限于实验室条件下单一菌株的培养和降解,而从实验室到自然环境中,受到各因素的制约,实际效果不太理想,同时菌株的安全性评价有待进一步考察.筛选高效广谱㊁适应性强及环境友好的高效氯氟氰菊酯降解菌株,用分子生物学和基因工程等技术对降解酶基因资源进行克隆,构建高效工程降解菌,制备多菌株复合系,是解决上述问题的根本方法.很多情况下微生物并不能将农药完全降解矿化,某些中间代谢产物的毒性大于母体化合物毒性,通过质谱等手段分析高效氯氟氰菊酯降解的中间代谢产物以推断降解途径,并深入研究菌株的降解途径对提高微生物的修复有重要作用.关于高效氯氟氰菊酯降解酶的分离纯化和固定化研究相对较少.天然的分离菌株其产酶量较低,且酶在土壤中的活动性较差,而纯化的降解酶更能忍受异常环境,因此对降解酶进行纯化和固定化可以提高酶的稳定性和适应力,应该大力加强这方面的研究.参考文献:[１]㊀T 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e c a m e t h r i n,a s y n t h e t i c p y r e t h r o i d i n s e c t i c i d e[J]．J o u r n a l o fE n v i r o n m e n t a l P a t h o l o g y a n dT o x i c o l o g y,１９７９,２(３):７５１Ｇ７６５．[５]㊀B OWN I KA,K OWA L C Z Y K M M,B A N C Z E R OW S K I J．L a m b d aＧc y h a l o t h r i na f f e c t s s w i m m i n g a c t i v i t y a nd p h y s i o l o g i c a l re s p o n s e so f d a p h n i am a g n a[J]．C h e m o s p h e r e,２０１８,２１６:８０５Ｇ８１１．[６]㊀H A R A T Y MＧM A JA．H e m a t o l o g i c a l a l t e r n a t i o n sa f t e r p y r e t h r o i d s p o i s o n i n g i nm i c e[J]．A n n a l so fA g r i c u l t u r a l a n dE n v i r o n m e n t a lM e d i c i n e,２００２,９(２):１９９Ｇ２０６．[７]㊀L IH T,F A N GY H,N I CB,e t a l．L a m b d aＧc y h a l o t h r i n d e l a y s p uＧb e r t a l l e y d i gc e l lde v e l o p m e n t i nr a t s[J]．E n v i r o n m e n t a lP o l l uＧt i o n,２０１８,２４２:７０９Ｇ７１７．[８]㊀MA U DS J,HAM E RJ,WA R I T O NJ S,e t a l．A q u a t i c e c o t o x i c o lＧo g y o ft h e p y r e t h r o i di n s e c t i c i d el a m b d aＧc y h a l o t h r i n:c o n s i d e r aＧt i o n f o r h i g h e r t i e r a q u a t i c r i s ka s s e s s m e n t[J]．P e s tM a n a g e m e n t S c i e n c e,１９９８,５４(４):４０８Ｇ４１７．[９]㊀Z HA N G X,G A O Y,Z A N G P,e ta l．S t u d y o nt h es i m u l t a n e o u sd e g r a d a t i o no ff i v e p e s t i c i d e sb y P a e n i b a c i l l u s p o l y m y x a f r o mP a n a x g i n s e n g a n dt h ec h a r a c t e r i s t i c so f t h e i r p r o d u c t s[J]．E c oＧt o x i c o l o g y a n dE n v i r o n m e n t a l S a f e t y,２０１８,１６８:４１５４２２．[１０]㊀T O P PE,Z HU H,N O U RS M,e t a l．C h a r a c t e r i z a t i o no f a na tＧr a z i n eＧd e g r a d i n g P s e u d a m i n o b a c t e r s p．i s o l a t e df r o m C a n a d i a na n dF r e n c ha g r i c u l t u r a l s o i l s[J]．A p p l i e d a n dE n v i r o n m e n t a lM iＧc r o b i o l o g y,２０００,６６(７):２７７３Ｇ２７８２．[１１]㊀C H E NSH,Y A N G L,HU M Y,e t a l．B i o d e g r a d a t i o no f a n d３Ｇp h e n o x y b e n z o i c a c i db y an o v e l S t e n o t r o p h o m o n a s s p．s t r a i nZ SＧSＧ０１a n d i t s u s e i nb i o r e m e d i a t i o no f c o n t a m i n a t e ds o i l s[J]．A pＧp l i e d M i c r o b i o l o g y a n dB i o t e c h n o l o g y,２０１１,９０(２０):７５５Ｇ７６７．[１２]㊀郑钊,许佳彬,王威,等．３种拟除虫菊酯农药在海南土壤中的降解特性[J]．热带生物学报,２０１９,１０(３):２４３Ｇ２４８．Z H E N GZ,X UJB,WA N G W,e t a l．D e g r a d a t i o nc h a r a c t e r i s t i c s o f t h r e e d i f f e r e n t p y r e t h r o i d p e s t i c i d e s i n s o i l i nH a i n a n[J]．J o u rＧn a l o fT r o p i c a l B l o l o g y,２０１９,１０(３):２４３Ｇ２４８．[１３]㊀杜红霞,李慧冬,官帅,等．氯氟氰菊酯在梨和土壤中的残留和降解行为研究[J]．山东农业科学,２０１８,５０(１２):１１９Ｇ１２２．D U H X,L IH D,G U A NS,e t a l．R e s i d u e s a n dd e g r a d a t i o nb eＧh a v i o r o f c y f l u t h r i n i n t h e p e a r a n d s o i l[J]．S h a n d o n g A g r i c u l t u rＧa l S c i e n c e,２０１８,５０(１２):１１９Ｇ１２２．[１４]㊀李宏宇,蔺彩霞,韩青,等．高效氯氟氰菊酯在大白菜和土壤上的消解动态[J]．农村科技,２０１３(６):４５Ｇ４６．L IH Y,L I NCX,H A N Q,e t a l．D i g e s t i o nd y n a m i c s o f l a m b d aＧc y h a l o t h r i n i n c a b b a g e a nd s o i l[J]．R u r a l S c ie n c e a n dT e c h n o l oＧg y,２０１３(６):４５Ｇ４６．[１５]㊀马婧玮,张军锋,吴绪金,等．高效氯氟氰菊酯在小白菜及土壤中的残留动态[J]．农药,２００９,４８(４):２７８Ｇ２８１．MAJW,Z H A N GJ F,WUXJ,e t a l．R e s i d u e d y n a m i c s o f l a m bＧd aＧc y h a l o t h r i n i n p a k c h o i a n ds o i l[J]．A g r o c he m i c a l s,２００９,４８(４):２７８Ｇ２８１．[１６]㊀李慧冬,张海松,陈子雷,等．高效氯氟氰菊酯在玉米和土壤中的残留及消解动态[J]．生态环境学报,２０１０,１９(５):１１０３Ｇ１１０７．L IH D,Z HA N G H S,C H E N ZL,e t a l．R e s i d u e s a n dd e g r a d aＧt i o no f l a m b d aＧc y h a l o t h r i n i n Z e am a y s L．a n ds o i l[J]．E c o l o g ya n dE n v i r o n m e n t a l S c i e n c e s,２０１０,１９(５):１１０３Ｇ１１０７．[１７]㊀陈国峰,李雪茹,刘峰,等．高效氯氟氰菊酯㊁噻虫嗪及其代谢物噻虫胺在小麦中的残留及消解动态分析[J]．麦类作物学报,２０１８,３８(１):１１９Ｇ１２５．C H E N GF,L IX R,L I U F,e t a l．R e s i d u ea n dd e g r a d a t i o nd yＧn a m i co f l a m b d aＧc y h a l o t h r i n,t h i a m e t h o x a m a n dc l o t h i a n i d i ni nw h e a t[J]．J o u r n a l o fT r i t i c e a eC r o p s,２０１８,３８(１):１１９Ｇ１２５．[１８]㊀郭丽丽,花锦．Q u E c h E R S法动态监测及评价山西省韭菜中１２种农残[J]．中国蔬菜,２０１８(４):６４Ｇ７０．G U O LL,HU AJ．D y n a m i cm o n i t o r i n g a n d e v a l u a t i o n o f１２p e sＧt i c i d er e s i d u e si nl e e k f r o m S h a n x i P r o v i n c e b y Q u E C h E R Sm e t h o d[J]．C h i n aV e g e t a b l e s,２０１８(４):６４Ｇ７０．[１９]㊀王运儒,邓有展,陈永森,等．广西荔枝农残现状及膳食风险评估[J]．南方农业学报,２０１８,４９(９):１８０４Ｇ１８１０．王晓慧,等:高效氯氟氰菊酯的微生物降解研究进展/２０２０年第３期WA N G Y R,D E N G YZ,C H E N YS,e t a l．S t a t e a n dd i e t a r y i nＧt a k e r i s ka s s e s s m e n t o f p e s t i c i d e r e s i d u e i n l i t c h i i nG u a n g x i[J]．J o u r n a l o f S o u t h e r nA g r i c u l t u r e,２０１８,４９(９):１８０４Ｇ１８１０．[２０]㊀李安,王北洪,潘立刚．北京市蔬菜中农残现状及慢性膳食暴露评估[J]．食品安全质量检测学报,２０１６,７(３):１１６４Ｇ１１６９．L IA,WA N GBH,P A NLG．P r e s e n t s i t u a t i o n a n d c h r o n i c d i e tＧa r y e x p o s u r ea s s e s s m e n to f p e s t i c i d er e s i d u e si nv e g e t ab l e si nB e i j i n g[J]．J o u r n a l o f F o o dS a f e t y a n dQ u a l i t y,２０１６,７(３):１１６４Ｇ１１６９．[２１]㊀张力群,王姝婷,金铨．杭州市市售蔬菜拟除虫菊酯类农药残留现状调查分析[J]．中国卫生检验杂志,２０１３,２３(１７):３４２３Ｇ３４２４．WA N GLQ,WA N GST,J I N Q．I n v e s t i g a t i o no n t h e p y r e t h r i n p e s t i c i d e r e s i d u e s i nv e g e t a b l e si n H a n g z h o u C i t y[J]．C h i n e s e J o u r n a l o fH e a l t hL a b o r a t o r y T e c h n o l o g y,２０１３,２３(１７):３４２３Ｇ３４２４．[２２]㊀李琰,蔡跃,杨胜琴,等．上海市闵行区蔬菜和水果中有机磷类和氨基甲酸酯类农药残留调查[J]．环境与健康杂志,２０１１,２８(１):７４Ｇ７６．[２３]㊀王冬群,沈群超．蔬菜中拟除虫菊酯类农药残留情况调查[J]．浙江农业科学,２００４(６):５１Ｇ５３．WA N G D Q,S H E N Q C．I n v e s t i g a t i o no fr e s i d u a l q u a n t i t y o f p y r e t h r o i d i n s e c t i c i d e s i nv e g e t a b l e s[J]．J o u r n a l o fZ h e j i a n g A gＧr i c u l t u r a l S c i e n c e s,２００４(６):５１Ｇ５３．[２４]㊀徐晶,杨静,张海霞,等．蔬菜中拟除虫菊酯类农药残留调查[J]．北方园艺,２０１２(１５):１４２Ｇ１４４．X UJ,Y A N GJ,Z H A N G H X,e t a l．I n v e s t i g a t i o no n s i t u a t i o no f p y r e t h r o i d s p e s t i c i d e s r e s i d u e s o f v e g e t a b l e s[J]．N o r t h e r nH o r t iＧc u l t u r e,２０１２(１５):１４２Ｇ１４４．[２５]㊀郝宁,李伟昊．２０１０~２０１３年邯郸市蔬菜中拟除虫菊酯类农药残留调查[J]．职业与健康,２０１４,３０(１９):２７３６Ｇ２７３７．H A O N,L I W H．I n v e s t i g a t i o no f p y r e t h r o i d p e s t i c i d er e s i d u e si nv e g e t a b l e s i n H a n d a nC i t y f r o m２０１０－２０１３[J]．O c c u p a t i o na n dH e a l t h,２０１４,３０(１９):２７３６Ｇ２７３７．[２６]㊀T HA T H E Y U S A J,S E L V AM A DJ．S y n t h e t i c p y r e t h r o i d s: t o x i c i t y a n db i o d e g r a d a t i o n[J]．A p p l i e d E c o l o g y a n d E n v i r o nＧm e n t a l S c i e n c e s,２０１３,１(３):３３Ｇ３６．[２７]㊀T S U J I R,Y AMA D AT,K AWAMU R AS．M a m m a l t o x i c o l o g y o f s y n t h e t i c p y r e t h r o i d s[J]．T o p i c s i n C u r r e n tC h e m i s t r y,２０１２,３１４:８３Ｇ１１１．[２８]㊀A LＧAM O U D IW M．T o x i c e f f e c t so f l a m b d aＧc y h a l o t h r i n,o n t h e r a tt h y r o i d:i n v o l v e m e n t o f o x i d a t i v e s t r e s s a n d a m e l i o r a t i v ee f f e c t o f g i n g e re x t r a c t[J]．T o x i c o l o g y R e p o r t s,２０１８,５:７２８Ｇ７３６．[２９]㊀L I A O M,Z HA N G HJ,MA A L,e t a l．S t u d y o nd e g r a d i n gp e rＧf o r m a n c e o f t w oe f f i c i e n tm i x e ds t r a i n s f o rs y n t h e t i c p y r e t h r o i di n s e c t i c i d e sd e g r a d a t i o n[J]．C h i n e s eJ o u r n a lo fP e s t i c i d eS c iＧe n c e,２００９,１１(４):４７２Ｇ４７９．[３０]㊀骆永明,腾应,过园．土壤修复新兴的土壤科学分支学科[J]．土壤,２００５,３７(３):２３０Ｇ２３５．L U O Y M,T E N G Y,G U O Y．S o i l r e m e d i a t i o n:an e w b r a n c hd i s c i p l i ne of s o i l s c i e n c e[J]．S o i l s,２００５,３７(３):２３０Ｇ２３５．[３１]㊀张群,马晨,张月,等．一株可同时降解毒死蜱和联苯菊酯降解菌的筛选鉴定及其降解特性初探[J]．农药,２０１７,５６(１０):７３３Ｇ７３８．Z H A N G Q,MAC,Z H A N G Y,e t a l．I s o l a t i o n,i d e n t i f i c a t i o na n dd e g r a d a t i o n c h a r a c t e r i s t i c s o f S t e n o t r o p h o m o n a s s p．s t r a i n a b l e t os i m u l t a n e o u s d e g r a d e c h l o r p y r i f o s a n d b i f e n t h r i n[J]．A g r o c h e m iＧc a l s,２０１７,５６(１０):７３３Ｇ７３８．[３２]㊀张梦梅,胡露,赖文,等．地衣芽孢杆菌分批培养降解氯氰菊酯动力学研究[J]．食品科学,２０１６,３７(１７):１３９Ｇ１４４．Z H A N G M M,HUL,L A IW,e t a l．K i n e t i cm o d e l s f o r b a t c h f e rＧm e n t a t i o n o f B a c i l l u sl i c h e n i f o r m i s a n d c o n s e q u e n t c y p e rＧm e t h r i nd e g r a d a t i o n[J]．F o o dS c i e n c e,２０１６,３７(１７):１３９Ｇ１４４．[３３]㊀WA N GBZ,MA Y,Z H O U W Y,e ta l．B i o d e g r a d a t i o no f s y nＧt h e t i c p y r e t h r o i d s b y O c h r o b a c t r u m t r i t i c i s t r a i n p y dＧ１[J]．W o r l dJ o u r n a lo f M i c r o b i o l o g y B i o t e c h n o l o g y,２０１１,２７(１０):２３１５Ｇ２３２４．[３４]㊀C Y C O N M,Z M I J OW S K A A,P I O T R OW S K AＧS E G E T Z．E nＧh a n c e m e n t o f d e l t a m e t h r i nd e g r a d a t i o nb y s o i l b i o a u g m e n t a t i o nw i t h t w o d i f f e r e n t s t r a i n s o f S e r r a t i am a r c e s c e n s[J]．I n t e r n a t i o nＧa l J o u r n a lo fE n v i r o n m e n t a lS c i e n c ea n d T e c h n o l o g y,２０１４,１１(５):１３０５Ｇ１３１６．[３５]㊀P R A S H A RP．I s o l a t i o n a n d i d e n t i f i c a t i o n o f c y p e r m e t h r i n d e g r a d i n g S e r r a t i a n e m a t o d i p h i l a f r o mc a u l i f l o w e rr h i z o s p h e r e[J]．I n t e rＧn a t i o n a l J o u r n a l o f P h a r m t e c hR e s e a r c h,２０１５,１２(３):２１７Ｇ２３０．[３６]㊀刘婷婷,董昆明,缪莉,等．联苯菊酯降解菌的筛选㊁鉴定及降解特性研究[J]．农业环境科学学报,２０１２,３１(６):１１４７Ｇ１１５２．L I U T T,D O N G K M,M I A O L,e ta l．I s o l a t i o n,i d e n t i f i c a t i o na n db i o d e g r a d a t i o nc h a r a c t e r i s t i c s o f a b a c t e r i a l s t r a i n a b l e t od eＧg r a d e b i f e n t h r i n[J]．J o u r n a l o fA g r oＧE n v i r o n m e n t S c i e n c e,２０１２,３１(６):１１４７Ｇ１１５２．[３７]㊀A K B A RS,S U L T A NS,K E R T E S Z M．D e t e r m i n a t i o no f c y p e rＧm e t h r i nd e g r a d a t i o n p o t e n t i a lo fs o i lb a c t e r i aa l o n g w i t h p l a n tg r o w t hＧp r o m o t i n g c h a r a c t e r i s t i c s[J]．C u r r e n t M i c r o b i o l o g y,２０１５,７０(１):７５Ｇ８４．[３８]㊀L I A N G W Q,WA N GZ Y,L IH,e t a l．P u r i f i c a t i o na n dc h a r a cＧt e r i z a t i o no f a n o v e l p y r e t h r o i d h y d r o l a s e f r o m A s p e r g i l l u s n i g e rZ D１１[J]．J o u r n a l o fA g r i c u l t u r a l a n dF o o dC h e m i s t r y,２００５,５３(１９):７４１５Ｇ７４２０．[３９]㊀张玲玲,崔德杰,洪永聪,等．氯氰菊酯降解放线菌的分离与筛选[J]．青岛农业大学学报(自然科学版),２００８,２５(４):２８０Ｇ２８４．Z H A N GLL,C U I DJ,H O N GYC,e t a l．I s o l a t i o n a n d s c r e e n i n g o fc y p e r m e t h r i n d e g r a d i n gＧa c t i n o m y c e ss t r a i n s[J]．J o u r n a lo f Q i n g d a o A g r i c u l t u r a l U n i v e r s i t y(N a t u r a l S c i e n c e E d i t i o n),２００８,２５(４):２８０Ｇ２８４．[４０]㊀王彦辉,杜良伟,李红红,等．功夫菊酯高效降解菌的筛选㊁鉴定及降解特性研究[J]．西南农业学报,２０１６,２９(８):１８７９Ｇ１８８３．WA N G Y H,D U L W,L IH H,e ta l．S c r e e n i n g,i d e n t i f i c a t i o na n d c h a r a c t e r i s t i c so f l a mb d aＧc y h a l o t h r i nde g r a d i n gf u ng u s[J]．S o u t h w e s tC h i n a J o u r n a l o fA g r i c u l t u r a l S c i e n c e s,２０１６,２９(８):１８７９Ｇ１８８３．[４１]㊀刘珍．拟除虫菊酯类农药的降解研究[D]．南宁:广西大学,２０１７．L I UZ．S t u d y o nt h ed e g r a d a t i o no f p y r e t h r o i d p e s t i c i d e s[D]．N a n n i n g:G u a n g x iU n i v e r s i t y,２０１７．[４２]㊀张建,张振华,黄星,等．功夫菊酯降解菌G FＧ１的分离鉴定及其王晓慧,等:高效氯氟氰菊酯的微生物降解研究进展/２０２０年第３期降解特性研究[J]．土壤,２００９,４１(３):４５４Ｇ４５８．Z HA N GJ,Z HA N GZH,HU A N GX,e t a l．I s o l a t i o n a n d c h a r a cＧt e r i s t i c so fl a m b d aＧc y h a l o t h r i nＧd e g r a d i n g b a c t e r i u m G FＧ１[J]．S o i l s,２００９,４１(３):４５４Ｇ４５８．[４３]㊀徐莲,张丽萍,刘怡辰,等．功夫菊酯降解菌G FＧ３的筛选鉴定及其降解特性研究[J]．农业环境科学学报,２００９,２８(７):２１５Ｇ２２１．X U L,Z H A N GLP,L I U Y C,e t a l．I s o l a t i o n,i d e n t i f i c a t i o na n dc h a r a c t e r i s t i c so fac y h a l o t h r i nＧde g r a d i n g b a c t e r i u m G FＧ３[J]．J o u r n a l o fA g r oＧE n v i r o n m e n t S c i e n c e,２００９,２８(７):２１５Ｇ２２１．[４４]㊀翟逸．拟除虫菊酯降解酶基因的克隆及酶学性质研究[D]．北京:中国农业科学院,２０１２．Z HA IY．C l o n i n g a n de n z y m a t i c c h a r a c t e r i a t i o no f an o v e l p y r eＧt h r o i dd e g r a d i n gg e n e[D]．B e i j i n g:C h i n e s eA c a d e m y o fA g r i c u lＧt u r a l S c i e n c e s,２０１２．[４５]㊀吴浩豪,呼世斌,陈小翠,等．氯氟氰菊酯降解菌的分离和培养条件研究[J]．中国土壤与肥料,２００９(３):７１Ｇ７４．WU H H,HUSB,C H E NXC,e t a l．S t u d y o n i s o l a t i o n a n d c u lＧt u r e c o n d i t i o n s o f c y b a l o t h r i nd e g r a d i n g b a c t e r i u m[J]．S o i l s a n dF e r t i l i z e r s S c i e n c e s i nC h i n a,２００９(３):７１Ｇ７４．[４６]㊀肖红利．拟除虫菊酯降解菌株分离及生化分子基础研究[D]．北京:中国农业科学院,２００５．X I A O HL．I s o l a t i o n a n d t h e b a s i c r e l a t i v e s t u d y o n b i o c h e m i c a l, m o l e c u l a r b i o l o g y o f p r e t h r o i dＧd e g r e d i n g s t r a i n[D]．B e i j i n g:C h iＧn e s eA c a d e m y o fA g r i c u l t u r a l S c i e n c e s,２００５．[４７]㊀虞云龙,宋凤鸣,郑重,等．一株广谱性农药降解菌(A l c a l i g e n e s s p．)的分离与鉴定[J]．浙江农业大学学报,１９９７,２３(２):１１１Ｇ１１５．Y U YL,S O N G F M,Z H E N G Z,e ta l．I s o l a t i o na n d i d e n t i f i c aＧt i o no fab r o a dＧs p e c t r u m b a c t e r i a ls t r a i n(A l c a l i g e n e s s p．)d eＧg r a d i n gp e s t i c i d e s[J]．J o u r n a l o f Z h e j i a n g A g r i c u l t u r a lU n i v e r s iＧt y,１９９７,２３(２):１１１Ｇ１１５．[４８]㊀林淦,姚威．阴沟肠杆菌wＧ１粗酶液对氯氟氰菊酯的降解效果及其作用机理[J]．江苏农业科学,２００６(３):１９１Ｇ１９２．L I N G,Y A O W．D e g r a d a t i o ne f f e c ta n df u n c t i o n a r y m e c h a n i s mo f c r u d ee n z y m ee x t r a c t e d f r o m E n t e r o b a c t e r c l o a c a e s t r a i nwＧ１o n c y h a l o t h r i n[J]．J i a n g s u A g r i c u l t u r a lS c i e n c e s,２００６(３):１９１Ｇ１９２．[４９]㊀王琨．高效氯氟氰菊酯降解菌的分离及其降解特性[D]．南京:南京理工大学,２００８．WA N G K．T h e i s o l a t i o no f l a m b d aＧc y h a l o t h r i nd e g r e d i n g b a c t eＧr i a a n d t h e r e s e a r c ho f i t sd e g r a d a t i o nc h a r a c t e r i s t i c s[D]．N a nＧj i n g:N a n j i n g U n i v e r s i t y o f S c i e n c e a n dT e c h n o l o g y,２００８．[５０]㊀L A LR．I n s e c t i c i d eM i c r o b i o l o g y[M]．S p r i n g e rＧV e r l a g,１９８４．[５１]㊀B HA T TP,B H A T T K,HU A N G Y,e t a l．E s t e r a s e i s a p o w e r f u l t o o l f o r t h e b i o d e g r a d a t i o no f p y r e t h r o i d i n s e c t i c i d e s[J]．C h e m oＧs p h e r e,２０１９,２４４．[５２]㊀林淦．阴沟肠杆菌w１０j１５中拟除虫菊酯类杀虫剂降解酶的酶学性质研究[D]．福州:福建农林大学,２００４．L I N G．S t u d i e so nt h ec h a r a c t e r i s t i c so f p y r e t h r o i d sd e g r a d i n ge n z y m ef r o m E n t e r o b a c t e rc l o a c a e w１０j１５[D]．F u z h o u:F u j i a nA g r i c u l t u r e a n dF o r e s t r y U n i v e r s i t y,２００４．[５３]㊀解开治,徐培智,陈建生,等．恶臭假单胞菌X P１２对拟除虫菊酯类农药的酶促降解特性及其应用研究[J]．广东农业科学,２００９(１２):１５６Ｇ１６０．X I EKZ,X UPZ,C H E NJ S,e t a l．P s e u d o m o n a s p u t i d a X P１２＇se n z y m a t i c d e g r a d a t i o n i n p y r e t h r o i d p e s t i c i d e s a n d i t s a p p l i c a t i o ns t u d y[J]．G u a n g d o n g A g r i c u l t u r a l S c i e n c e s,２００９(１２):１５６Ｇ１６０．[５４]㊀虞云龙,陈鹤鑫,樊德方,等．拟除虫菊酯类杀虫剂的酶促降解[J]．环境科学,１９９８(３):６８Ｇ７１．Y U YL,C H E N H X,F A N DF,e t a l．E n z y m a t i cd e g r a d a t i o no f s y n t h e t i c p y r e t h r o i d i n s e c t i c i d e s[J]．E n v i r o n m e n t a l S c i e n c e,１９９８(３):６８Ｇ７１．[５５]㊀郭鹏．拟除虫菊酯降解菌J ZＧ２的分离鉴定㊁降解特性及菊酯水解酶的纯化和特性研究[D]．南京:南京农业大学,２００９．G U O P．I s o l a t i o n a n d c h a r a c t e r i z a t i o n o f p y r e t h r o i d d e g r a d i n gs t r a i n,p u r i f i c a t i o na n dc h a r a c t e r i s t i c so fa p y r e t h r o i dh y d r o l a s e[D]．N a n j i n g:N a n j i n g A g r i c u l t u r a lU n i v e r s i t y,２００９．[５６]㊀WUPC,L I U Y H,W A N G ZY,e t a l．M o l e c u l a r c l o n i n g,p u r i f i f i c aＧt i o n,a n db i o c h e m i c a lc h a r a c t e r i z a t i o no fan o v e l p y r e t h r o i dＧh yＧd r o l y z i n ge s t e r a s ef r o m K l e b s i e l l a s p．s t r a i nZ D１１２[J]．J o u r n a lo fA g r i c u l t u r a l a n dF o o dC h e m i s t r y,２００６,５４:８３６Ｇ８４２．[５７]㊀WA N GBZ,G U OP,H A N GBJ,e t a l．C l o n i n g o f an o v e l p y r eＧt h r o i dＧh y d r o l y z i n g c a r b o x y l e s t e r a s e g e n e f r o m S p h i n g o b i u m s p．J ZＧ１a n dc h a r a c t e r i z a t i o no f t h e g e n e p r o d u c t[J]．A p p l i e da n dE n v i r o n m e n t a lM i c r o b i o l o g y,２００９,７５(１７):５４９６Ｇ５５００．[５８]㊀L IG,WA N G K,L I U Y H,M o l e c u l a r c l o n i n g a n dc h a r a c t e r i z aＧt i o no f an o v e l p y r e t h r o i dＧh y d r o l y z i n g e s t e r a s eo r i g i n a t i n g f r o mt h em e t a g e n o m e[J]．M i c r o b i a l C e l l F a c t o r i e s,２００８,７:３８．[５９]㊀王保战．拟除虫菊酯水解酶的基因克隆㊁表达和酶学特性研究[D]．南京:南京农业大学,２０１０．WA N G BZ．M o l e c u l a r c l o n i n g,e x p r e s s i o n,a n dc h a r a c t e r i z a t i o n o f an o v e l p y r e t h r o i dh y d r o l y z i n g e n z y m e[D]．N a n j i n g:N a n j i n gA g r i c u l t u r a lU n i v e r s i t y,２０１０．[６０]㊀C H E NSH,D E N GYY,C H A N GCQ．e t a l．P a t h w a y a n d k i n e tＧi c s o fc y h a l o t h r i nb i o d e g r a d a t i o nb y４４８B a c i l l u s t h u r i n g i e n s i ss t r a i nZ SＧ１９[J]．S c i e n t i f i cR e p o r t s,２０１５,５:８７８４．[６１]㊀B I R O L L IW G,V A C O N D I OB,A L V A R E N G A N．e t a l．E n a nＧt i o s e l e c t i v e b i o d e g r a d a t i o no f t h e p y r e t h r o i d(ʃ)Ｇl a m b d aＧc y h a l oＧt h r i nb y m a r i n eＧd e r i v e d f u n g i[J]．C h e m o s p h e r e,２０１８,１９７:６５１Ｇ６６０．[６２]㊀X I E W J,Z H O UJ M,WA N G H Y,e t a l．E f f e c to f n i t r o g e no n t h ed e g r a d a t i o no fc y p e r m e t h r i na n di t s m e t a b o l i t e３Ｇp h e n o x yＧb e n z o ic a c id i n s o i l[J]．Pe d o s p h e r e,２００８,１８(５):６３８Ｇ６４４．。

柑橘及土壤中高效氯氟氰菊酯残留分析方法研究

柑橘及土壤中高效氯氟氰菊酯残留分析方法研究杨玉霞;莫仁甫;王天顺;周其峰【期刊名称】《南方农业学报》【年(卷),期】2012(043)001【摘要】[目的]建立快速、实用的测定柑橘及土壤中高效氯氟氰菊酯残留的方法.[方法]样品经甲醇提取、弗罗里硅土柱净化、浓缩、定容后,用带μ-ECD检测器的气相色谱仪进行测定.[结果]高效氯氟氰菊酯在0.005～1.000 μg/mL范围内线性良好,线性相关系数r=0.9996.该方法对高效氯氟氰菊酯标样的最小检出限为1.0×10-12 g,对橘皮、橘肉和土壤的最低检出浓度均为0.001 mg/kg,样品平均回收率为90.96％～104.21％,相对标准偏差为2.73％～10.45％.[结论]建立的GC-μECD检测方法具有分离效果好、回收率高、经济快速、准确度和灵敏度高的特点,适用于柑橘及土壤中高效氯氟氰菊酯的残留检测.【总页数】4页(P38-41)【作者】杨玉霞;莫仁甫;王天顺;周其峰【作者单位】广西农业科学院植物保护研究所,南宁530007;广西农业科学院植物保护研究所,南宁530007;中国农业科学院甘蔗研究中心/广西农业科学院甘蔗研究所,南宁530007;广西农业科学院植物保护研究所,南宁530007【正文语种】中文【中图分类】S481.8【相关文献】1.柑橘和土壤中吡草醚残留分析方法研究 [J], 胡秀卿;吴珉;赵华;朱亚红;徐浩;平立凤;李振2.杀扑磷在柑橘和土壤中的残留分析方法研究 [J], 金铨;吴慧明;朱国念3.柑橘及土壤中高效氯氟氰菊酯残留分析方法研究 [J], 杨玉霞;莫仁甫;王天顺;周其峰4.苯醚甲环唑在柑橘和土壤中的残留分析方法研究 [J], 郑海香5.联苯肼酯在柑橘及其土壤中的残留分析方法 [J], 戴魏;李晓刚;陈力华;聂思桥;任竞;梁骥;付启明;张贵群;刘义珂;刘金胜;刘力因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

柑橘黄龙病防治研究现状概述

柑橘黄龙病防治研究现状概述作者：张文辉刘洁余冠学陈绪杨韦杰来源：《广西农学报》2022年第02期摘要：黄龙病被称为柑橘“癌症”，严重损害果农效益，阻碍柑橘产业的高质量发展。

概述柑橘黄龙病在农业综合防治、化学药物防治、生物防治、物理防治、生态防治五个方面的研究现状，从中看出，国内外研究都从不同的角度进行黄龙病防控策略的研究，最多研究的是化学药物的防治策略，是主要的研究方向;其次是物理防治和生物防治，也有较多研究;最少研究的是生态防治。

这些防治策略也存在缺陷，建议从财政保障、管理执行、技术应用三方面开展柑橘黄龙病防控，加强技术应用研究，关注生态防治的研究探索，促进生态防治技术的进步。

关键词：柑橘;黄龙病;研究;防控中图分类号：S436.66 文献标识号：A 文章编号：1003-4374（2022）02-0079-05Overview of Research Status on Control of Citrus Huanglong DiseaseZhang Wen-hui， Liu Jie， Yu Guan-xue， Chen Xu-yang， Wei Jie *（college of Agriculture， Guangxi University， Nanning， Guangxi 530003， China）Abstract： Huanglong disease is known as citrus' cancer'， which seriously damages the benefit of fruit growers and prevents the high-quality development of citrus industry. The research status of citrus Huanglong disease from five aspecs in agricultural integrated control， chemical pesticide control， biological control， physical control and ecological control were summarized， it shows that the research botn at home and abroad has carried out the research on the prevention and control strategies of Huanglong disease from different perspectives， and the most research is the prevention and control strategy of chemical pesticide， which is the main research direction. Second is physical control and biological control， which also has many stuchies， the least research is ecological control， which also existing defects. It is suggested to carry out the prevention and control of citrus Huanglong disease from three aspects of financial support， management implementation and technical application， strengthen technical application research， pay attention to the research and exploration of ecological control， and promote the progress of ecological control technology.Key words： citrus， Huanglong disease， research， prevention and control黃龙病被称为柑橘“癌症”，是世界上为害柑橘生产最具有严重的破坏性的病害之一，近几十年来对我国乃至世界范围内都造成了不可估量的重大损失，根据全国农业技术服务中心的预测，我国柑橘黄龙病发生面积达14.7万公顷，主要发生在华南、江南南部等地区，部分地区可能存在较为严重的暴发，并且染上黄龙病的病株，幼苗期存在矮小化、抽梢困难、叶片斑驳黄化明显的现象，成熟期果实果肉苦涩、红鼻子果、果皮绿化，严重破坏柑橘的价值，使得果农的多年辛苦经营功亏一篑。

亚洲柑橘木虱响应高效氯氰菊酯胁迫的转录组分析

·829·亚洲柑橘木虱响应高效氯氰菊酯胁迫的转录组分析宋晓兵，崔一平，凌金锋，黄峰，陈霞，彭埃天*（广东省农业科学院植物保护研究所/农业农村部华南果蔬绿色防控重点实验室/广东省植物保护新技术重点实验室，广东广州510640）摘要：【目的】筛选高效氯氰菊酯胁迫下的柑橘木虱抗药性相关基因及其网络，探讨柑橘木虱应对拟除虫菊酯类杀虫剂的抗性机制，为柑橘木虱的抗药性治理提供科学依据。

【方法】采用Illumina NovaSeq 6000测序系统对高效氯氰菊酯和空白对照处理的柑橘木虱成虫进行转录组测序，采用生物信息学软件Hisat2、DESeq2和clusterProfiler 等对差异表达基因（Differentially expressed genes ，DEGs ）进行功能注释、分类以及参与的信号通路分析。

【结果】从所检测的柑橘木虱转录组数据中筛选到显著DEGs 4596个，其中显著上调表达基因2900个、显著下调表达基因1696个。

DEGs 中有624个富集到KEGG 的103条代谢通路，富集的通路主要涉及Hippo 信号通路、核糖体、吞噬体、药物代谢、嘌呤代谢、硫胺素代谢和细胞凋亡等与昆虫抗药性紧密相关的7条代谢通路。

与昆虫抗药性相关的DEGs 38个，涉及细胞色素P450、谷胱甘肽转移酶、钠离子通道、三磷酸腺苷合酶、细胞色素b 、酸性磷酸酯酶、钙粘蛋白、糖基转移酶、脱羧酶和ABC 转运蛋白等多个代谢抗性和靶标抗性基因。

【结论】挖掘获得大量的柑橘木虱响应拟除虫菊酯类杀虫剂的抗药性相关基因，显著富集的通路主要涉及Hippo 信号通路、核糖体、吞噬体和硫胺素代谢等与昆虫抗药性紧密相关的代谢通路，为研究柑橘木虱的抗药机制以及进行抗药性治理提供了丰富的数据基础。

关键词：柑橘木虱；高效氯氰菊酯；抗药性；转录组中图分类号：S436.661.2文献标志码：A文章编号：2095-1191（2023）03-0829-10收稿日期：2022-05-11基金项目：“十四五”广东省农业科技创新十大主攻方向“揭榜挂帅”项目（2022SDZG06）；广东省现代农业产业技术体系建设专项（2022KJ108）通讯作者：彭埃天（1962-），https:///0000-0002-8568-7459，研究员，主要从事南方果树病虫害综合防控研究工作，E-mail ：***************第一作者：宋晓兵（1980-），https:///0000-0003-0526-2272，博士，副研究员，主要从事柑橘病虫害防控研究工作，E-mail ：**************Transcriptome analysis of Diaphorina citri Kuwayamain response to beta-cypermethrin stressSONG Xiao-bing ，CUI Yi-ping ，LING Jin-feng ，HUANG Feng ，CHEN Xia ，PENG Ai-tian*（Institute of Plant Protection ，Guangdong Academy of Agricultural Sciences/Key Laboratory of Green Prevention andControl on Fruits and Vegetables in South China ，Ministry of Agriculture and Rural Affairs/Guangdong Provincial KeyLaboratory of High Technology for Plant Protection ，Guangzhou ，Guangdong 510640，China ）Abstract ：【Objective 】To screen Diaphorina citri Kuwayama resistance genes and their network regulation under thestress of beta-cypermethrin ，and explore the resistance mechanism of D.citri to pyrethroid insecticides.【Method 】The Illu-mina NovaSeq 6000sequencing system was used to sequence the transcriptome of the adult citrus psyllids treated with beta-cypermethrin and blank control.The differentially expressed genes （DEGs ）were functionally annotated and classi-fied using bioinformatics softwares such as HISAT2，DESeq2and clusterProfiler ，as well as the signal pathways analysis involved.【Result 】A total of 4596significant DEGs genes were screened in the citrus psyllid transcriptome data ，in which 2900were significantly up-regulated and 1696were significantly down-regulated.Among the DEGs ，624were enriched in 103different metabolic pathways in KEGG.Seven enriched pathways of insect resistance mainly involved Hippo sig-54卷南方农业学报·830·0引言【研究意义】亚洲柑橘木虱（Diaphorina citri Kuwayama）属半翅目（Hemiptera）扁木虱科（Liviidae），是毁灭性病害柑橘黄龙病（Huanglongbing）的重要传播虫媒，目前已扩散到美洲和非洲（江宏燕等，2018），其引发的柑橘黄龙病暴发成灾造成严重的经济损失。

高效氯氰菊酯降解菌的分离、鉴定及特性研究的开题报告

高效氯氰菊酯降解菌的分离、鉴定及特性研究的开题报告
一、研究背景
氯氰菊酯是广泛使用的一种杀虫剂，其具有高效、快速、持久的优点，但也存在着对非靶生物的毒性和对环境的污染等问题。

因此，寻找高效的降解菌对氯氰菊酯进行降解成为一种有效的处理方式。

通过研究氯氰菊酯降解菌的分离、鉴定及特性，能够为环境治理提供科学依据。

二、研究内容
1.收集土壤样本并筛选出潜在的氯氰菊酯降解菌；
2.通过形态学和生理特征初步鉴定降解菌的种属；
3.应用16S rRNA序列分析技术对菌株进行精确鉴定；
4.研究菌株的生长特性和降解能力；
5.对菌株的代谢产物进行分析。

三、研究意义
1.为寻找高效的氯氰菊酯降解菌提供参考；
2.为深入研究氯氰菊酯的降解机理提供先导；
3.作为一种生物降解技术，具有环保意义。

四、研究方法
1.采集土壤样本；
2.分离培养降解菌；
3.通过形态学和生理特征初步鉴定菌株；
4.利用16S rRNA序列分析技术对菌株精确鉴定；
5.研究菌株的生长特性和降解能力；
6.对菌株的代谢产物进行分析。

五、研究预期成果
1.得到一种或多种具有高效降解氯氰菊酯的菌株；
2.通过对菌株的研究，了解其生长特性和代谢能力；
3.对降解氯氰菊酯的机理进行探讨；
4.为生物降解技术在环境治理中的应用提供基础研究数据。

高效氯氟氰菊酯和氯氰菊酯在苹果中的残留降解动态及其去除方法

收稿日期!"#&?#"?#5 基金项目自治区公益性科研院所基本科研业务经费" gi!"#@!## 作者简介虞游毅"#66#(# !女!四川乐山人!硕士!主要从事干旱区环境演变及林果产品品质分析) B?CD<E$ 1111G1JG1<I#5%-4JC "通信作者!杨璐!B?CD<E$ #@!$%@&>6#I^^-4JC
摘K要采用模拟实验与气相色谱法!研究不同储藏条件下苹果中高效氯氟氰菊酯和氯氰菊酯的降解动态!
以及家庭日常清洗方式对二者的去除效果) 结果表明!在实验条件下!苹果中高效氯氟氰菊酯和氯氰菊酯主
要残留于果皮中) 二者的降解动态均符合一级动力学方程!前期降解较快!后期渐趋稳定) 室温 % "!@ n
!#m&或冷藏"> m#条件下!苹果中高效氯氟氰菊酯和氯氰菊酯的半衰期均以果皮最短) 用配制的洗洁精溶
液*食盐溶液*食醋溶液*小苏打溶液或清水清洗苹果!均能不同程度地去除苹果高效氯氟氰菊酯和氯氰菊酯
残留) 为了避免洗洁精清洗造成二次污染!建议选择 #"b" 质量分数# 食盐水溶液清洗!效果较好)
关键词农药残留'农产品安全'降解动态
中图分类号P>$# l-$
文献标志码A
文章编号#"">?#@!>"!"#$#"$?#%&5?"5
我国是世界上苹果种植面积最大*总产量最高的国家!!"#5 年!我国的苹果产量约为 > %$" 万 )) 施用化学农药是苹果生长过程中防治病虫的重要措施!但由于使用不规范*不科学!市场上部分果品农残超标!直接威胁人体健康) 在生活中!大多数果蔬在采摘后并不是立即食用! 都会经历贮藏与加工过程!如冷藏*清洗*去皮*干燥等%6 '#!& !这些都会对食品中农药残留水平产生不同程度的影响%#% '#>& '因此!在进行农残分析时应该充分考虑这些因素的影响!以便更加直观真实地反映农药残留状况* 更准确地评估人体膳食风险)

蔬菜中高效氯氰菊酯等农药残留分析方法

蔬菜中高效氯氰菊酯等农药残留分析方法殷春杭;钱允辉;王志强【摘要】采用乙腈同时提取蔬菜中的高效氯氰菊酯和氰戊菊酯,用安捷伦的弗罗里硅土柱(500mg;6mL)进行净化,气相色谱法(μECD检测器)进行测定,高效氯氰菊酯的回收率在70.1%～110%,变异系数在1.35%～5.42%,最低检出限为0.001mg/kg.氰戊菊酯的回收率在84.99%～103.68%,变异系数在5.13%～7.15%,最低检出限为0.001mg/kg.【期刊名称】《中国测试》【年(卷),期】2007(033)004【总页数】3页(P118-120)【关键词】蔬菜;高效氯氰菊酯;农药残留【作者】殷春杭;钱允辉;王志强【作者单位】江苏省南通市农产品质量检验测试中心,江苏,南通,226006;江苏省南通市农产品质量检验测试中心,江苏,南通,226006;江苏省南通市农产品质量检验测试中心,江苏,南通,226006【正文语种】中文【中图分类】工业技术第 33 卷第 4 期中国测试技术 2007 年 7 月 CfflNAMEASUREMENT TECHNOLOGY V01.33No.4July.2007蔬菜中高效氯氰菊酯等农药残留分析方法殷春杭，钱允辉，王志强 (江苏省南通市农产品质量检验测试中心，江苏南通 226006)摘要：采用乙腈同时提取蔬菜中的高效氯氰菊酯和氰戊菊酯，用安捷伦的弗罗里硅土柱(500mg;6mL) 进行净化，气相色谱法（ vECD 检测器）进行测定，高效氯氰菊醑的回收率在 70.1% —110% ．变异系数在 1.35% —5.42% ，最低检出限为 O.OOlmg／ kg 。

氰戊菊酯的回收率在 84.99%-103.68% ，变异系数在 5.13% —7.15% ，最低检出限为 O.OOlmg/kg 。

关键词：蔬菜；高效氯氰菊酯；农药残留中圈分类号： TQ450.2+63文献标识码：A文章编号：1672-4984(2007)04-0118-03 Determinationofhigheffectcypermethrinandfenvalerateinvegetables YINChun-hang,QIANYun-hui,WANGZhi-qiang (Nantong SupervisionandTestinSCenterforAgriculturalProductQuality,Nantong226006,China) Abstract: High effect cypennethrinandfenvalerateinvegetableswereextractedwithacetonitrile simultaneously.Extractwa8purifiedwithAgilentflorisilcolumn(500mg;6ml),andanaISrzedbyga schromatography(yECDdetector).Theseresults showedthat recoveriesof higheffect cypermethrinandfenvaleratewere70.1% 一110%and84.99%~103.68%,coefficienLsofvariationwerel.35%~5.42%and5.1 3%~7.15%,andthelowestdetectionlimiLswereO.OOlny;lkgandO.OOlmg/kgrespectively. Keywords:Vegetables;Beta-cypermerthrin; Pesticides residues l 引言高效氯氰菊酯是目前应用最为广泛的菊酯类杀虫剂，与传统的有机磷类农药相比，其有着对环境安全，效果更好，亩投入成本低的优势。

高效氯氰菊酯在柑橘中的残留及降解动态研究

高效氯氰菊酯在柑橘中的残留及降解动态研究高效氯氰菊酯，英文通用名：beta cypermethrin，化学名称：2,2-二甲基-3-（2 ,2-二氯乙烯基）环丙烷羧酸-α-氰基-（3-苯氧基）-苄酯，其结构式见图1。

高效氯氰菊酯是一种广谱杀虫剂，对许多虫害，如蚜虫、甜菜夜蛾、棉铃虫、潜叶蛾、菜青虫、蚜虫等具有良好的防治效果 [1-6]。

关于高效氯氰菊酯在蔬菜、水果等作物[7-12]上的残留研究国内外已有诸多报道，多采用GC、GC-MS、HPLC、HPLC-MS/MS等方法，本研究在 * 的基础上进行方法优化，结合GC-ECD，测定了高效氯氰菊酯在柑橘和土壤中的残留量，并对其降解规律进行了研究，为高效氯氰菊酯在柑橘上的膳食风险评估及残留监测提供了科学依据。

1.1 试剂与仪器1.1.1 药剂及试剂99%高效氯氰菊酯标准品（Dr.Ehrenstorfer GmbH）；2%高效氯氰菊酯乳油（EC），本实验室研制。

二氯甲烷、正己烷、乙腈、丙酮（美国天地公司）、无水硫酸钠、氯化钠（上海国药集团）。

1.1.2 仪器设备xx气相色谱仪（ECD，岛津公司），IKAT-25高速组织分散器（德国IKA公司），高速冷冻离心机H2050R-1（长沙湘仪有限公司），AB204-E型电子天平（瑞士梅特勒公司）。

1.2 田间试验设计田间试验于xx和2018年在桂林市、长沙市和厦门市进行。

按农药残留试验准则要求，设5个处理小区，重复3次，每小区2棵树，另设对照小区。

2%高效氯氰菊酯EC防治柑橘虫害。

降解动态试验：柑橘一半大小时施药，剂量为20 mg/kg，施药后2 h、1 d、2d、3 d、5 d、7 d、14 d、21 d、30 d、35 d采样，处理重复3次，处理间设保护隔离区，另设空白对照。

土壤样品：施药和采样方法参照植株样品。

所有样品均装入样品袋中，贴好标签，保存于-20 ℃冰箱中待测。

最终残留试验：按照20 mg/kg浓度药液施药2次、20 mg/kg浓度药液施药3 次、13.3 mg/kg浓度药液施药2 次、13.3 mg/kg浓度药液施药3次、空白对照五个处理顺序施药。

氯氰菊酯降解菌的分离鉴定及其降解特性研究(一)

氯氰菊酯降解菌的分离鉴定及其降解特性研究(一)【摘要】目的分离得到能高效降解氯氰菊酯的菌株。

方法采用选择性培养基从农药厂的污泥中进行富集和分离筛选高效菌株，并且用16SrDNA序列分析法和其生理生化特征对其进行鉴定。

结果该菌株鉴定为克雷伯氏菌属(Klebsiellasp.)，命名为（登录号为AY989899），菌株能以氯氰菊酯为唯一碳源进行生长，降解氯氰菊酯的最适温度是35℃,最佳pH是7.0。

结论菌株是一株能高效降解氯氰菊酯的菌株。

【关键词】氯氰菊酯；克雷伯氏菌；生物降解gradingstrainfromthesamplesandidentifyingthestrainbyusingthe16SrDNAsequenceanalysisanditstgrowwithcypermethrinassolesourceofcarbon.TheoptimaltemperatureandpHofcypermethrindegra dationbytheorganismwere35℃and7.0.Conclusionmethrin.Keywords:cypermethrin；；biodegradation随着20世纪80年代无机盐农药和有机氯农药的相继禁用，菊酯类农药已发展为我国现阶段使用最广泛的农药之一，由于具有广谱、内吸、触杀等高效杀虫特性，因此广受农业生产者欢迎。

但是，大量使用引起的农药残留不仅造成环境与食品的污染，而且影响农产品的质量及人们的身体健康。

农药残留及其废水的降解主要有微生物降解、化学降解和光降解等方式。

与其他的降解方式相比，微生物降解具有操作简单、降解彻底、无二次污染等优点。

因此利用微生物技术处理农药残留，并对受污染的土壤与水体进行生物修复是一种行之有效的方法。

目前对有机磷和有机氯等农药的微生物降解的研究比较多，而关于菊酯类农药的降解研究较少。

本文从农药厂的污泥中采集土壤样品，筛选分离到一株能高效降解氯氰菊酯的菌株（），并对其进行筛选、鉴定及降解性能的初步研究〔〕。

高效氯氟氰菊酯在茶叶和土壤中的残留及环境行为研究的开题报告

高效氯氟氰菊酯在茶叶和土壤中的残留及环境行为研究的
开题报告
1. 研究背景和意义
高效氯氟氰菊酯是一种广泛使用的杀虫剂，特别是在茶叶种植和防治茶叶害虫中应用广泛。

然而，高效氯氟氰菊酯在茶叶和土壤中的残留和对环境的影响尚不完全了解。

因此，本研究将重点研究高效氯氟氰菊酯在茶叶和土壤中的残留和环境行为，以评估其对环境和公共健康的影响，为保障茶叶产品的安全提供科学依据。

2. 研究内容和方法
（1）样品采集：通过在茶叶和土壤中添加高效氯氟氰菊酯，采集不同时间、不同深度、不同处理的样品。

（2）样品处理：采用高效液相色谱法和质谱法对样品进行提取和分析，并对样品中的高效氯氟氰菊酯含量进行测定和分析。

（3）环境行为研究：通过模拟环境条件，研究高效氯氟氰菊酯在茶叶和土壤中的迁移、转化和分解过程，进一步评估其在环境中的行为和影响。

3. 预期成果和意义
（1）确定高效氯氟氰菊酯在茶叶和土壤中的残留程度和分布规律，并评估其对人体健康的风险和危害；
（2）揭示高效氯氟氰菊酯在环境中的行为和影响，为茶叶种植和环境保护提出科学建议和措施；
（3）为完善相关法规和标准提供科学依据，保障茶叶产品的质量和安全。

农产品中菊酯类农药残留降解动态研究进展

作者简介周刚（1976-），男，贵州六盘水人，硕士，讲师，从事天然产物农药开发与农药合成研究。

通讯作者，Eail ：dwing818@ 。

收稿日期2007-10-19拟除虫菊酯是继有机氯、有机磷和氨基甲酸酯之后具有生物活性优异、环境相容性较好的一类广谱性杀虫剂，在国际农药市场中占19%的份额，在防治卫生害虫和农作物害虫中占有重要地位。

具有性质稳定，不易光解，无特殊臭味及安全系数高，使用浓度低，击倒作用强，用药量少，毒性相对低，药效快等优点。

目前，人工合成的拟除虫菊酯类化合物己占世界农药市场的1/4[1]。

拟除虫菊酯类杀虫剂广泛使用的同时也带来了环境污染和食品安全等问题[2-3]。

我国相关部门对此予以高度重视，并采取一些积极应对措施，提出了物理、化学、生物等处理方法，对遏制农药残留起到了一定作用。

1物理方法去除农产品中菊酯类残留农药1.1储藏、去壳、剥皮农产品采收后，仍能继续进行呼吸和新陈代谢活动，在贮藏期间，空气中的氧气等活性物质对残留农药可进一步氧化分解。

另外，菊酯类农药大多数直接使用于作物的表面，无内吸性，残留农药基本上在农产品外表皮，对一些有皮的瓜类、块茎类作物，去壳、剥皮后农药残留量大大降低。

1.2洗涤菊酯类农药易被蔬菜表皮的蜡质层所固定，不溶于水，张晓红用2%白猫洗涤剂浸洗蔬菜，去除氰戊菊酯效果达33.56%~52.83%[4]。

张俊亭用自己研制的蔬果专用清洗剂对黄瓜、苹果和梨子上的残留氯氰菊酯进行去除试验，结果表明，去除效果分别为67.85%、78.33%、71.05%[5]。

1.3高温分解菊酯类农药随着温度的升高分解会加快，残留农药会有不同程度消解。

张晓红研究表明，用电炉水煮方法处理蔬菜对氰戊菊酯的去除率可达35.80%，高温热处理会使残留菊酯类农药去除得比较彻底[4]。

1.4超声波洗涤超声波最初应用于水污染控制，超声波震荡具有振荡频率高、强度大的特点，加速了农药分子的运动，增加农药分子溶出的机率，可被用于农产品中残留农药的消解，该方法解决了常规浸泡农药溶出慢、耗时长的问题。

土壤中高效氟氯氰菊酯对映体选择性降解的研究

土壤中高效氟氯氰菊酯对映体选择性降解的研究
土壤中高效氟氯氰菊酯对映体选择性降解的研究
高效氟氯氰菊酯是一种常用的拟除虫菊酯杀虫剂,含有氟氯氰菊酯的一个顺式和一个反式异构体,每个顺反异构体又含有一对对映体,因此共4个对映体.为了更深入地了解和阐释高效氟氯氰菊酯及相关拟除虫菊酯化合物在环境中的转化与归趋,并对其环境风险进行更有效的评价,采用室内避光培养方法,研究了土壤中高效氟氯氰菊酯对映体选择降解情况.结果表明,在华北碱性黄土中,高效氟氯氰菊酯的降解存在一定的异构体转化现象,并且反式体的降解快于顺式体.进一步的手性测定表明降解存在明显的对映体选择性,4个对映体的降解半衰期分别为17.16、28.41、8.74和12.67 d,顺式体和反式体的的对映体浓度比值(ER值)分别从实验开始的0.99和1.03减小为实验结束的0.64和0.48,反式体对映体的选择性要高于顺式体.
作者：李朝阳张智超张玲冷连 LI Zhao-yang ZHANG Zhi-chao ZHANG Ling LENG Lian 作者单位：李朝阳,LI Zhao-yang(河北科技大学理学院化学系,河北,石家庄,050018)
张智超,张玲,冷连,ZHANG Zhi-chao,ZHANG Ling,LENG Lian(南开大学元素有机化学研究所,天津,300071)
刊名：农业环境科学学报ISTIC PKU英文刊名：JOURNAL OF AGRO-ENVIRONMENT SCIENCE 年，卷(期)：2006 25(6) 分类号：X592 关键词：高效氟氯氰菊酯降解对映体选择性土壤对映体浓度比值。

气相色谱法同时检测柑橘中毒死蜱和氯氰菊酯残留量的方法研究

第43卷第3期世界农药2021年3月World Pesticide ·47·技术创新气相色谱法同时检测柑橘中毒死蜱和氯氰菊酯残留量的方法研究邢平1，徐艳飞1，王灿灿1，来祺2(1.南京红太阳股份有限公司，江苏南京 211300；2.南京农业大学，江苏南京 210014)摘要：采用GC-ECD建立了同时测定柑橘中毒死蜱和氯氰菊酯的残留分析方法，以期为快速测定柑橘中的农药残留提供技术支撑。

用含0.1%乙酸的乙腈提取柑橘全果、果肉样本中毒死蜱和氯氰菊酯，用气相色谱仪(ECD)进行同时检测。

结果表明，毒死蜱和氯氰菊酯浓度在0.01~5 mg/kg时此方法线性良好，毒死蜱和氯氰菊酯在柑橘全果和果肉中的平均回收率为76.3%~101.2%，相对标准偏差为1.4%~11.7%，最低检测浓度为0.02 mg/kg。

该方法具有较高的准确度和精密度，可适于柑橘中毒死蜱和氯氰菊酯残留检测。

关键词：毒死蜱；氯氰菊酯；柑橘；气相色谱；残留分析中图分类号：TQ453 文献标志码：A 文章编号：1009-6485(2021)03-0047-05DOI：10.16201/10-1660/tq.2021.03.07Simultaneous determination of chlorpyrifos and cypermethrinresidues in citrus by GC-ECDXING ping1, XU Yanfei1, WANG Cancan1, LAI Qi2(1.Nanjing Red Sun Co., Ltd., Nanjing 211300, China;2. Nanjing Agricultural University, Nanjing 210014, China)Abstract:A method for detecting simultaneously chlorpyrifos and cypermethrin residue in citrus fruit was established in order to provide the basis for the rapid detection of pesticide in citrus. Chlorpyrifos and cypermethrin were extracted from whole orange fruit and pulp samples with acetonitrile containing 0.1% acetic acid and detected simultaneously by gas chromatography with electronic capture detector (ECD). The results showed that there existed a good linear relationship between the concentrations of chlorpyrifos or cypermethrin and peak areas within the concentration of 0.01~5 mg/kg, the average recovery was 76.3%~101.2%, and the relative standard deviation (RSD) was 1.4%~11.7%, the minimum detection concentration was 0.02 mg/kg. This method has high accuracy and precision, and can meet the requirements of the pesticide residue detection in the citrus.Keywords: chlorpyrifos; cypermethrin; citrus; gas chromatography; residue analysis作者简介：邢平(1975-)，男，江苏南京人，硕士，高级工程师，研究方向：质量管理、应用技术研究、产品注册等。

农产品中菊酯类农药残留降解动态研究进展

出了物理、学、物等处理方法，遏制农药残留起到了化生对
一
究表明，右旋反式丙烯菊酯、Ｓ生物丙烯菊酯、旋丙烯富Ｅ一右菊酯３种菊酯类农药在氨灯下的光解均呈一级动力学反应１９］：
光催化消解技术是近２０年来逐渐发展起来的，光催
维普资讯
安徽农业科学．ｕｎｌｆｎｕＡｒＳｉ２０，６５：９９１４ＪｒａｏＡｈｉｇｉｃ０８３（）１３ — ９１ｏ．．
责任编辑张杨林责任校对王森
农产品中菊酯类农药残留降解动态研究进展
周刚，丁伟（南学物护院重０１西大植保学，庆４７）０６
摘要从物理方法、学方法和生物方法几方面介绍了农产品中菊酯类农药残留降解动态研究进展。化
０１— ６２０）５０９９０５７６１（０８０— １３— ３１
ＫｅｒｓＦａｍｒｄｃ；ｙｅｈｏｄｐｅｔｉ；ｓｄｕｙｗｏｄｒｐｏｕｅＰｒｔｒｉｓｉｄｅＲｅｉｃ
拟除虫菊酯是继有机氯、有机磷和氨基甲酸酯之后具有生物活性优异、环境相容性较好的一类广谱性杀虫剂，在国际农药市场中占１９％的份额，防治卫生害虫和农作物在害虫中占有重要地位。有性质稳定，易光解，特殊臭具不无味及安全系数高，使用浓度低，倒作用强，药量少，击用毒性

高效氟氯氰菊酯降解菌的分离与降解特性研究

［Ｍｅｔｈｏｄ］Ｇｒａｄｉｅｎｔｐｒｅｓｓｕｒｅａｃｃｌｉｍａｔｉｏｎｗａｓｕｓｅｄｔｏｅｎｒｉｃｈａｎｄｓｃｒｅｅｎｃａｎｄｉｄａｔｅｓｔｒａｉｎｓｆｏｒｄｅｇｒａｄａｔｉｎｇ β⁃ＣＦｆｒｏｍｓｏｉｌｔｈａｔｈａｄｂｅｅｎｕｓｅｄｐｙ⁃
ｒｅｔｈｒｏｉｄｓ，ａｎｄｔｈｅｔａｘｏｎｏｍｉｃｓｔａｔｕｓｗａｓｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄｂｙｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓａｎｄｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃａｎａｌｙｓｉｓｂａｓｅｄｏｎ１６ＳｒＲＮＡｇｅｎｅｓｅ⁃
虫剂的果园和耕地（２８°５４′１１″Ｎ，１１０°４′１２″Ｅ），共收集土壤样
１０ｍＬ对数生长期菌液，５０００ｒ／ｍｉｎ离心５ｍｉｎ后弃上清，加
１．１．４培养基。ＬＢ液体培养基：蛋白胨１０ｇ、ＮａＣｌ１０ｇ、酵母
存于４ ℃ 备用。
本６份，于无菌袋中密封，－８０ ℃ 冰箱保存备用。
能兼治蜱螨
［７］
。但是Ⅱ型菊酯农药普遍具有光、热稳定等特
点，在环境中半衰期较长，自然环境条件下很难降解，在固
相、液相、气相中的循环易引发环境中农药的残留，２００９—
２０１１年的一份研究报告表明，美国北卡罗来纳州５０名成年
人的７８２份固体食物中氟氯氰菊酯的检出率达６％
。中华人民共和国国家统计
虫菊酯是通过模仿天然除虫菊素化学结构人工合成的一类
杀虫剂
［３－４］
，具有高效、杀虫谱广等特点，在我国西北和华北
等地广泛应用，其产量占据全球农药类总产量的２０％
毒性［１３－１４］等。越来越多的研究证明其对生态环境和人类健

氯氰菊酯降解菌的筛选及其降解特性的初步研究

氯氰菊酯降解菌的筛选及其降解特性的初步研究
刘幽燕;顾宝群;杨克迪;潘丽娇;俸海玉
【期刊名称】《环境科技》
【年(卷),期】2006(019)002
【摘要】以氯氰菊酯为唯一碳源从土壤中分离筛选得到22株氯氰菊酯降解菌,其中G201和G203降解活性较高且稳定性较好,选择这2株菌进一步研究了培养条件对降解率及降解速率的影响.结果表明,2株菌在中性培养液中降解率达到最大;菌株G201当氯氰菊酯的质量浓度不超过200mg·L-1时降解速率与浓度成正比;外加少量碳、氮源如淀粉、葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨淀粉等,可以显著提高菌株的降解能力.
【总页数】3页(P9-11)
【作者】刘幽燕;顾宝群;杨克迪;潘丽娇;俸海玉
【作者单位】广西大学化学与化工学院环境工程系,广西,南宁,530004;广西大学化学与化工学院环境工程系,广西,南宁,530004;广西大学化学与化工学院环境工程系,广西,南宁,530004;广西大学化学与化工学院环境工程系,广西,南宁,530004;广西大学化学与化工学院环境工程系,广西,南宁,530004
【正文语种】中文
【中图分类】X7
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5.多菌灵降解菌的筛选及降解特性初步研究 [J], 王军玲;秦宝福;呼世斌;景岳龙;张守文;徐冯楠
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氯氰菊酯降解菌的分离鉴定及降解特性研究

氯氰菊酯降解菌的分离鉴定及降解特性研究汪琨;詹婕;朱廷恒;王渭霞;崔志峰【摘要】从浙江施用氯氰菊酯的茶园、果园采集的58份土壤样品筛选了1株能以氯氰菊酯为惟一碳源生长并具有降解氯氰菊酯能力的细菌LQK 14.通过生理生化特征和16S rRNA基因序列同源性分析,鉴定该菌株为恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida).菌株LQK-14降解氯氰菊酯的最适温度为25～30℃,最适pH为7,外加氮源显著影响菌株的降解效能,无机氮比有机氮更利于农药降解,在适宜的培养条件下7d内将100 mg/L氯氰菊酯降解了88％,其降解酶定域在胞内.【期刊名称】《浙江工业大学学报》【年(卷),期】2014(042)005【总页数】5页(P523-527)【关键词】氯氰菊酯;生物降解;分离鉴定;恶臭假单胞菌【作者】汪琨;詹婕;朱廷恒;王渭霞;崔志峰【作者单位】浙江工业大学生物与环境工程学院,浙江杭州310014;浙江工业大学生物与环境工程学院,浙江杭州310014;浙江工业大学生物与环境工程学院,浙江杭州310014;中国水稻研究所,浙江杭州310006;浙江工业大学生物与环境工程学院,浙江杭州310014【正文语种】中文【中图分类】X172氯氰菊酯(cypermethrin)作为一种广谱高效的拟除虫菊酯类杀虫剂，因其高效用和低哺乳动物毒性而广泛用于农业病虫害的防治，是茶树、果树、蔬菜等农作物病虫害防治的主要农药之一.研究表明：氯氰菊酯对一些水生生物、蜜蜂等非靶标生物有较大毒性，对人的生殖健康有严重危害[1-4].由于氯氰菊酯稳定性高，半衰期长，在果蔬、食品、环境中残留量大，影响农产品的质量及人类的身体健康.随着人们对生活质量的要求不断提高，解决农药残留，提高食品和环境安全已经成为一个亟待解决的课题.微生物降解是指利用微生物将存在于环境中的毒害污染物降解或转化为其他无害物质，被公认为是一种有效、廉价、无二次污染的方法.同时，利用微生物进行农药降解还具有操作简便、繁殖快、生态恢复性好等优点.有关氯氰菊酯的降解菌主要在假单胞菌属(Pseudomonas sp.)[5-6]、沙雷氏菌属(Serratia sp.)[7]、芽孢杆菌属(Bacillus sp.)[8]等微生物种类中被发现.本研究筛选分离到1株能高效降解氯氰菊酯的恶臭假单胞菌(Pseudomonsa putida)LQK-14，研究其降解特性，并对其降解酶定域，为其在生物修复中的应用提供了实验数据和理论基础.1 材料与方法1.1 实验材料1.1.1 培养基基础培养基(MM)：NaCl 1.0 g，K2HPO41.5 g，NH4NO3 1.0 g，KH2PO4 0.50 g，MgSO4·7H2O 0.1 g，水1 000 mL，pH 7.0～7.2，121 ℃灭菌备用. 筛选培养基：基础培养基中按试验设计要求添加20～800 mg/L的氯氰菊酯作为惟一碳源.氯氰菊酯溶解在少量丙酮中，与灭菌后放置冷却于45 ℃的基础培养基相混合.1.1.2 供试农药与标样95%氯氰菊酯农药原药，南京荣诚化工有限公司；氯氰菊酯标样，北京康林科技有限公司生产，纯度≥98.5%.1.2 实验方法1.2.1 菌种筛选和纯化采集受氯氰菊酯污染的茶园和农药厂废水处理池附近的土壤.称取一定量土壤，制成菌悬液，无菌稀释后涂布含有100 mg/L氯氰菊酯的分离培养基上，30 ℃下培养48～72 h，待长出单菌落后，采用平板划线法分离纯化，纯化时逐步增大培养基中所加的氯氰菊酯质量浓度，直至达到800 mg/L.1.2.2 菌种鉴定及系统发育研究参照文献[9]进行菌株形态观察.挑取氯氰菊酯降解菌的单菌落于20 μL ddH2O中，漩涡混匀后，置于PCR仪中99 ℃，10 min，12 000 r/min离心30 s，上清液直接作为PCR反应的模版.扩增引物为一对通用引物，正向引物F27：5′-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3′，反向引物R1492：5′-TACGGTTACCTTGTTACGACTT-3′，引物由上海生物工程有限公司合成.50 μL反应体系：10×buffer(with 15 mmol/L MgCl2)5 μL，10 mmol/L dNTP 1 μL，5 μmol/L引物各2 μL，基因组DNA模板3 μL，ddH2O 36.5 μL，Taq酶0.5μL.PCR反应条件为95 ℃预变性4 min；95 ℃反应1 min，56 ℃反应30 s，72 ℃反应90 s，循环35次；72 ℃反应5 min.采用PCR产物纯化试剂盒纯化扩增产物后，由上海华大基因公司测序.将测得的基因序列通过NCBI-BLAST进行序列比对分析.菌体形态的电镜观测照片委托浙江大学生物技术研究室电镜中心拍摄.1.2.3 氯氰菊酯的降解试验选取纯化后的单个菌株，以初始接种量OD600≈0.3接种以氯氰菊酯为唯一碳源的基础培养基中，设不接菌为对照，每处理重复3次，于30 ℃，摇床200 r/min，培养7 d.培养液中残留的氯氰菊酯用2倍体积的石油醚抽提，10 000 r/min离心5 min，吸取上层有机相，用HPLC检测.检测条件：高效液相色谱仪型号为Agilent PH1100型(带工作站)，色谱柱Agilent C18柱(4.6 mm×250 mm)，柱温30 ℃，流动相V(乙腈)∶V(水)= 85∶15，流速1 mL/min，检测波长235 nm，进样量20 μL.外标法定量，本检测方法样品中氯氰菊酯的含量以两峰的峰面积总量计.氯氰菊酯降解率计算式为1.2.4 降解条件1) 培养基初始pH对LQK-14降解氯氰菊酯的影响将基础盐培养基的pH值分别调节为为5，6，7，8和9(含100 mg/L氯氰菊酯)，以5%的接种量接种，30 ℃，摇床200 r/min培养7 d，测定其生长状况和农药含量.2) 温度对菌株生长和降解氯氰菊酯的影响以5%的接种量接种于含100 mg/L氯氰菊酯基础培养基，分别于20，25，30，35，40 ℃，摇床200 r/min培养7 d，测定其生长状况和农药含量.3) 碳源种类对氯氰菊酯降解的影响按照0.1%(m/v)的比例在基础培养液中分别添加葡萄糖、果糖、蔗糖、麦芽糖、淀粉和甘油作为外源碳源，以5%的接种量接种后置于30 ℃，200 r/min摇床培养7 d，测定降解率.4) 氮源种类对氯氰菊酯降解的影响按照0.1%(m/v)的比例在MM培养液中分别添加牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素、氯化铵和硫酸铵作为外源氮源，以5%的接种量接种后置于30 ℃，200 r/min摇床培养7 d，测定降解率.5) 氯氰菊酯初始浓度对降解的影响在基础盐培养基中加入氯氰菊酯，使其终质量浓度分别为25，50，100，200，300 mg/L，按5%的接种量接入降解菌种子液，于30 ℃，摇床200 r/min培养7 d，测定其生长状况和农药含量.1.2.5 降解酶的定域应用渗透休克方法进行研究，具体试验方法参见洪源范等[10]，略修改后进行氯氰菊酯降解酶的定域.1.2.6 粗酶液的制备和酶活力的测定将已经培养好的菌液6 000 r/min离心10 min，去上清，具体用20 mmol/L磷酸缓冲液洗涤2次，在冰浴中超声波破碎，12 000 r/min离心5 min，弃沉淀，上清液冻存备用.取20 mmol/L磷酸缓冲液1 800 μL(含甲醇溶解的50 mg/L氯氰菊酯)，200 μL粗酶液，30 ℃条件下反应20 min，用200 μL的6 mol/L HCl 终止反应，加入2倍体积的石油醚，涡旋振荡1 min，于12 000 r/min下离心3 min，取上层有机相进行HPLC检测.通过氯氰菊酯的标准曲线，求得氯氰菊酯的减少量.2 结果与分析2.1 降解菌的分离和菌种鉴定从长期、大量施用拟除虫菊酯农药的杭州茶园土壤中分离获得1株能以氯氰菊酯为惟一碳源生长的细菌，命名为LQK-14.该菌株在LB固体培养基上生长时，菌落呈规则圆形、边缘整齐，菌落白色、略透明、有光泽、较粘稠、略有臭味.取LB培养基上生长至对数期的培养物拍摄电镜照片见图1.图1中菌体呈卵圆形，长约1.2 μm，宽约0.8 μm，单端丛生鞭毛.革兰氏染色阴性，接触酶反应和吲哚试验呈阳性，VP试验、苯丙氨酸脱氨酶试验和甲基红试验均为阴性，不能水解淀粉，能耐受10%氯化钠，生长最适pH为7.0等.图1 氯氰菊酯降解菌LQK-14电镜负染图(30 000×)Fig.1 SEM photo of LQK-14(30 000×)菌株LQK-14 16S rRNA基因序列全长为1 439 bp.将其与已登录的16S rRNA基因序列进行同源性比较，结果发现，与已经报道的恶臭假单胞菌Pseudomonas putida IS82(登陆号FJ596989)和32zhy(登陆号AM411059)等菌株的同源性达到100%.因此，根据上述相似性比较结果，结合菌株的生理生化特性将其鉴定为恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida).图2为应用软件mega 5.0做出的系统发育树. 图2 氯氰菊酯降解菌LQK-14的系统发育树Fig.2 Phylogenetic tree based on 16S rDNA sequence using mega 5.0 software2.2 菌株降解效能的测定2.2.1 降解菌LQK-14的降解曲线降解菌LQK-14以5%的接种量接种到氯氰菊酯起始浓度为100 mg/L的基础培养基中，于30 ℃摇床上200 r/min培养7 d，每隔12 h取样，检测其降解率，结果见图3.图3 降解菌LQK-14对氯氰菊酯的降解曲线Fig.3 The degradation curve of LQK-14 on cypermethrin由图3可看出：在84 h以内，细胞处于积极生长状态，繁殖迅速，菌液的OD460最高达到0.856，同时氯氰菊酯的降解也稳步增加.84 h后LQK-14的生长速度开始变缓，但其降解能力并未降低，仍然保持线性的增长速度，最终于168 h能将100 mg/L的氯氰菊酯降解67%，而对照组的降解率很低，上述结果表明LQK-14菌株对氯氰菊酯具有降解作用.2.2.2 培养基初始pH值对LQK-14降解氯氰菊酯的影响培养基的pH是影响微生物生长繁殖和生理活动的重要因素之一.pH除了对细胞发生直接影响外，还可产生通过改变培养基中营养物质的离子化程度从而抑制微生物对营养物质的吸收等的间接影响.pH的变化对于菌株LQK-14降解性能的影响很显著.在pH5.0～9.0的范围内，氯氰菊酯的降解效率出现先升高后降低的现象，其最大降解率出现在pH7.0，降解率达70.25%，pH上升至8.0时，其降解率仍能维持在62%以上.同时试验证明LQK-14菌株在pH6.0～8.0的范围内生长情况良好，细胞数量多，其生长最适pH为7.0，但在pH≤4的条件下不生长.表明降解菌LQK-14的细胞数量与其降解能力密切相关.2.2.3 温度对LQK-14降解氯氰菊酯的影响温度也是影响微生物生长繁殖和生理活动的重要因素之一.适宜的温度下微生物能快速生长繁殖，低温可导致细胞膜凝固，引起物质运送困难；高温则使蛋白质变性，影响酶活性.在温度为25～35 ℃时，降解菌LQK-14均保持较好的降解能力；当温度升至40 ℃时，降解能力显著下降.通过检测不同温度下其菌液的浑浊度，发现40 ℃时降解菌生长情况较差.30 ℃时菌液的OD460值为0.810，而40 ℃时菌液OD460值为0.055，因此推断可能是由于LQK-14菌株不适应在较高温度下生长造成氯氰菊酯降解率下降.降解菌LQK-14在常温下表现出较好的降解能力，为以后在土壤修复过程中施用提供了有利条件.2.2.4 碳源对LQK-14降解氯氰菊酯的影响添加外源碳源以考察降解菌LQK-14对氯氰菊酯的降解，结果见图4.从图4中可以看出：除了在添加了麦芽糖后，氯氰菊酯降解率提高外，其余的碳源的添加均降低LQK-14对氯氰菊酯的降解.其中，甘油和淀粉对氯氰菊酯的降解影响较大，降解率下降约50%.检测发现LQK-14利用淀粉的能力很弱(生理生化检测)，推测淀粉的添加对LQK-14菌株的生长产生了一定的影响，其生长情况不好，导致其降解氯氰菊酯的能力下降.甘油一般可以作为微生物生长的迟效碳源，且易于获得大量的菌体(和葡萄糖作为碳源相比)，但是甘油的加入，可能导致LQK-14优先利用较易利用的碳源甘油，造成对氯氰菊酯降解率的下降.2.2.5 氮源对LQK-14降解氯氰菊酯的影响土壤中有机质的含量及其肥力情况影响了微生物的种类和分布，故在土壤的生物修复过程中，通过调整土壤的施肥比例可强化其修复过程.氮源对微生物生长和生理活动的影响显著，故添加外源的氮源以考察降解菌LQK-14对氯氰菊酯的降解，结果如图5所示.从图5中可以看出：牛肉膏、蛋白胨和酵母膏的添加减缓了氯氰菊酯的降解，但尿素、氯化铵和硫酸铵的添加促进了氯氰菊酯的降解，尤其是两种无机氮源的添加促使其7 d的降解率均超过了88%.这与李青云等的研究结果不同，其分离获得的Pseudomonas aeruginosa GF31在外加氮源的情况下，其降解氯氰菊酯的效能提高，且有机氮比无机氮更有利于农药降解[11].图4 碳源对降解氯氰菊酯的影响Fig.4 The influence of carbon source on cypermethrin degradation图5 氮源对降解氯氰菊酯的影响Fig.5 The influence of nitrogen source on cypermethrin degradation2.2.6 氯氰菊酯初始质量浓度对LQK-14降解的影响降解菌LQK-14接种到不同氯氰菊酯起始质量浓度的培养基，30 ℃，200 r/min摇床培养7 d后检测其农药降解率.结果表明：随着氯氰菊酯起始浓度从25 mg/L增加到300 mg/L，其降解率呈现降低的趋势.其中，在300 mg/L氯氰菊酯的条件下，降解菌LQK-14生长情况较差，降解率快速降低.推测氯氰菊酯降解过程中产生的中间代谢产物的毒性抑制了降解菌的生长和降解活性.例如，Rhodococcus sp.CDT3降解氯氰菊酯过程中产生的中间代谢产物3-苯氧基苯甲酸(3-PBA)对降解菌CDT3的降解效能产生一定的抑制作用，且其降解速率与3-PBA的浓度呈负相关[12].2.3 降解酶的定域试验应用渗透休克方法获得降解菌LQK-14胞内外和周质空间的粗酶液，测定其酶活力.其中，胞内酶活力最高，可达18.42 μmol/(min·L)，周质空间(1.83μmol/(min·L))次之，胞外的酶活力最低，可能是菌体细胞死亡后的释放，或者胞内酶泄露到周质空间和胞外.由此推定，降解菌LQK-14降解氯氰菊酯的酶属于胞内酶.文献报道氯氰菊酯降解酶多为胞内酶，如Liang等从Aspergillus nigerZD11中纯化得到分子量为56 kDa的胞内酶[13]；Tallur等从Micrococcus sp. CPN1提取到诱导型的胞内酶[14].3 结论从施用氯氰菊酯的土壤中分离获得一株能以氯氰菊酯为惟一碳源生长且能分解氯氰菊酯的细菌LQK-14，根据其生理生化特征结合其16S rDNA相似性比较，鉴定为恶臭假单胞菌(Pseudomonsa putida).该菌株对300 mg/L的氯氰菊酯仍具有一定的降解作用，其降解氯氰菊酯的最适pH值为7.0，最适温度为25～30 ℃，添加适量无机氮源氯化铵和硫酸铵对其降解氯氰菊酯具有促进作用，在7 d内对100 mg/L氯氰菊酯的降解率最高可达88%.酶的定域试验表明，降解酶为胞内酶. 本文得到了浙江工业大学重中之重学科开放研究基金项目(20080104)的资助.参考文献：[1] VAN WIJNGAARDEN R P, BROCK T C, VAN DEN BRINK P J. Threshold levels for effects of insecticides in freshwater ecosystems: areview[J]．Ecotoxicology,2005,14:355-380．[2] COLLINS P, CAPPELLO S. Cypermethrin toxicity to aquatic life: bioassays for the freshwater prawn Palaemonetes argentinus[J]．Archives of Environment Contamination and Toxicologyl,2006,51:79-85．[3] MCCARTHY A R, THOMSON B M, SHAW I C, et al. Estrogenicity of pyrethroid insecticide metabolites[J]．Journal of Environmental Monitoring,2006,8:197-202．[4] WANG Wei, CAI Dao-ji, SHAN Zheng-jun, et al. 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4.5％高效氯氰菊酯乳油防治柑桔潜叶蛾田间药效试验

4.5％高效氯氰菊酯乳油防治柑桔潜叶蛾田间药效试验
何婷婷
【期刊名称】《农业研究与应用》
【年(卷),期】2013(000)002
【摘要】为探索4.5％高效氯氰菊酯乳油防治柑桔潜叶蛾的效果,以2.5％敌杀死(溴氰菊酯)乳油为对照,进行了田间药效试验.结果表明:4.5％高效氯氰菊酯乳油300倍、600倍、1200倍3种浓度防治柑桔潜叶蛾药后7d平均防效均达80％以上,防治效果比较理想,药后24d保梢效果达76％以上,且对柑桔安全.建议用于防治柑桔潜叶蛾,推荐使用浓度为300～1200倍.
【总页数】2页(P62-63)
【作者】何婷婷
【作者单位】广西扶绥县植保植检站,扶绥532100
【正文语种】中文
【相关文献】
1.4.5%高效氯氰菊酯乳油防治棉铃虫田间药效研究 [J], 方仁祥
2.4.5%高效氯氰菊酯乳油防治十字花科蔬菜菜青虫田间药效试验 [J], 梁彩勤
3.4．5％高效氯氰菊酯乳油防治柑桔潜叶蛾田间药效试验 [J], 何婷婷;
4.4．5％高效氯氰菊酯乳油防治菜青虫田间药效试验 [J], 吉训聪;肖敏;陈绵才;史勇;崔义
5.25%胺酮乳油防治柑桔潜叶蛾田间药效试验 [J], 邹建掬;向延平;易志红
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2019年第14期广东化工第46卷总第400期·63·高效氯氰菊酯在柑橘中的残留及降解动态研究何欢，李素平，熊兴明，刘一平(湖南省农药检定所，湖南长沙410005)Residues and Dissipation Dynamics of Beta Cypermethrin in CitrusHe Huan,Li Suping,Xiong Xingming,Liu Yiping(Hu’nan Institute for the Control of Agrochemicals,Changsha 410005,China)Abstract:The residual dynamics and final residues of beta cypermethrin in citrus and soils samples in supervised field residue trials were determined by GC-ECD.Citrus and soils samples were extract,cleaned up and determined by GC-ECD.Under the fortified level from 0.01to 1.0mg/kg for citrus and soils,the recoveries ranged from 86.52%to 91.52%with the relative standard deviations of 6.2%~15.6%.The LOD was 0.1×10-12g,and the LOQ of the method was 0.01mg/kg for all samples.The results ofdissipation dynamic test showed that the rules consistent with first order kinetics equation,and the half-life of beta cypermethrin was 1.6~6.0days.The final residues of citrus were lower than 0.01mg/kg,and the maximum residue limit was recommended as 0.02mg/kg.Keywords:beta cypermethrin ；citrus ；residue ；dissipation dynamics ；final residues高效氯氰菊酯，英文通用名：beta cypermethrin ，化学名称：2,2-二甲基-3-(2,2-二氯乙烯基)环丙烷羧酸-α-氰基-(3-苯氧基)-苄酯，其结构式见图1。

高效氯氰菊酯是一种广谱杀虫剂，对许多虫害，如蚜虫、甜菜夜蛾、棉铃虫、潜叶蛾、菜青虫、蚜虫等具有良好的防治效果[1-6]。

图1高效氯氰菊酯化学结构式Fig.1The chemical structure of beta cypermethrin关于高效氯氰菊酯在蔬菜、水果等作物[7-12]上的残留研究国内外已有诸多报道，多采用GC 、GC-MS 、HPLC 、HPLC-MS/MS 等方法，本研究在参考文献的基础上进行方法优化，结合GC-ECD ，测定了高效氯氰菊酯在柑橘和土壤中的残留量，并对其降解规律进行了研究，为高效氯氰菊酯在柑橘上的膳食风险评估及残留监测提供了科学依据。

1材料与方法1.1试剂与仪器1.1.1药剂及试剂99%高效氯氰菊酯标准品(Dr.Ehrenstorfer GmbH)；2%高效氯氰菊酯乳油(EC)，本实验室研制。

二氯甲烷、正己烷、乙腈、丙酮(美国天地公司)、无水硫酸钠、氯化钠(上海国药集团)。

1.1.2仪器设备2010气相色谱仪(ECD ，岛津公司)，IKAT-25高速组织分散器(德国IKA 公司)，高速冷冻离心机H2050R-1(长沙湘仪有限公司)，AB204-E 型电子天平(瑞士梅特勒公司)。

1.2田间试验设计田间试验于2017和2018年在桂林市、长沙市和厦门市进行。

按农药残留试验准则要求，设5个处理小区，重复3次，每小区2棵树，另设对照小区。

2%高效氯氰菊酯EC 防治柑橘虫害。

降解动态试验：柑橘一半大小时施药，剂量为20mg/kg ，施药后2h 、1d 、2d 、3d 、5d 、7d 、14d 、21d 、30d 、35d 采样，处理重复3次，处理间设保护隔离区，另设空白对照。

土壤样品：施药和采样方法参照植株样品。

所有样品均装入样品袋中，贴好标签，保存于-20℃冰箱中待测。

最终残留试验：按照20mg/kg 浓度药液施药2次、20mg/kg 浓度药液施药3次、13.3mg/kg 浓度药液施药2次、13.3mg/kg 浓度药液施药3次、空白对照五个处理顺序施药。

按最后一次药后间隔14、21、30、45d ，采用随机方法在每株柑橘的不同方向、不同部位采集果实，四分法取250g 装入聚乙烯塑料密封袋中，所有样品均装入样品袋(瓶)中，贴好标签，保存于-20℃冰箱中待测。

1.3分析方法1.3.1样品前处理称取20g 果皮(果肉、土壤)样品于广口瓶中，加入30mL 丙酮和30mL 石油醚，震荡提取30min ，抽滤，用10mL 丙酮分别洗涤三角瓶和滤渣后，转移到250mL 的容量瓶中，加入100mL 3%氯化钠溶液，充分摇匀静置分层，将下层转移至另一250mL 的分液漏斗中，用2×20mL 的石油醚萃取，合并三次萃取的石油醚层，过无水硫酸钠，经旋转蒸发仪减压浓缩10mL 左右，待净化。

玻璃层析柱中先加入1cm 高的无水硫酸钠，再加入5g 5%水脱活的弗罗里硅土，上层加少量的无水硫酸钠，轻轻敲实，用20mL 石油醚淋洗柱子，弃去淋洗液，柱面要有少量液体，小柱中依次加入5mL 丙酮和正己烷(1∶9，v ∶v)的混合溶液，5mL 的正己烷活化，当液面到达吸附层表面时立即加入待净化溶液，用15mL 的离心管收集洗脱液，用5mL 丙酮和正己烷(1∶9，v ∶v)冲洗烧杯后淋洗弗罗里硅土小柱，再重复一次。

将盛有淋洗液的离心管放在氮吹仪上，在50℃的水浴条件下，浓缩小于5mL ，用正己烷定容至5mL ，装入样品瓶待测。

1.3.2气相色谱条件仪器：岛津2010；色谱柱：RTX-170130m*0.25mm*0.25μm ；检测器：ECD ；载气：高纯氮，2.5mL/min ；检测温度：进样口250℃；检测器280℃；柱温：15℃6℃/min 270℃，保持8min ；进样方式：不分流；进样体积：1μL ；保留时间：27.73/28.08min 。

1.3.3添加回收率在空白柑橘和土壤中添加浓度范围为0.01~1.0mg/kg 的高效氯氰菊酯标准溶液，每个浓度设5个平行，同时设空白对照。

按上述前处理方法进行操作和分析，计算添加回收率和相对标准偏差。

[收稿日期]2019-06-11[基金项目]国家重点研发计划：化肥农药减施增效的环境效应评价(2016YFD0201200)；湖南省研究生科研创新项目(CX2017B351)[作者简介]何欢(1993-)，女，本科，主要从事农药残留检测技术研究。

*为通讯作者：刘一平(1984-)，男，湖南省张家界人，博士，农艺师，主要从事农药残留及环境风险评估研究。

广东化工2019年第14期·64·第46卷总第400期2结果与分析2.1添加回收率和精密度高效氯氰菊酯的添加回收率试验结果(见表1)，当添加水平为0.01~1.0mg/kg时，高效氯氰菊酯在土壤中平均回收率为87.66%~91.52%，相对标准偏差7.3%~10.0%；在果肉中的平均回收率为86.58%~90.65%，相对标准偏差6.2%~11.3%；在果皮中的平均回收率为86.52%~88.98%，相对标准偏差8.1%~15.6%，各样本中的添加回收率和相对标准偏差均在允许范围之内，符合农药残留分析的要求。

由最低添加水平得到最低检测浓度为0.01mg/kg。

高效氯氰菊酯的最小检出量为0.1×10-12g。

表1高效氯氰菊酯在土壤、柑橘中的添加回收率及相对标准偏差(n=5)Tab.1The Recoveries(%)and the relative standard deviation(RSD,%)of beta cypermethrin in citrus and soil(n=5)样品添加浓度/(mg/kg)回收率/%平均回收率/%相对标准偏差/% 12345土壤0.0179.690.278.5103.386.787.6610.0 0.583.989.599.193.580.889.357.3 193.585.396.2103.679.591.529.6果肉0.01100.896.372.088.795.590.6511.3 0.581.187.579.696.7103.589.6610.3 187.389.578.395.783.186.58 6.2果皮0.01107.273.588.376.899.288.9815.6 0.598.187.581.778.396.588.528.8 189.581.781.699.580.386.528.12.2消解动态试验结果采用2%高效氯氰菊酯EC对柑橘树进行喷雾施药，高效氯氰菊酯在柑橘和土壤中的残留量均随着时间的推移而逐渐降低。

高效氯氰菊酯在柑橘和土壤中的降解半衰期分别为3.5~6.0d和1.6~2.5d，高效氯氰菊酯在土壤中降解相对更快。

2.3最终残留试验结果采用2%高效氯氰菊酯EC对柑橘树进行喷雾防治柑橘蚜虫，用药浓度13.3mg/kg和20mg/kg，于柑橘蚜虫初发期施药，兑水喷雾3次，每次间隔7d，末次药后14d柑橘果肉中高效氯氰菊酯的残留量均低于0.01mg/kg；建议高效氯氰菊酯在柑桔中的MRL值为0.02mg/kg。

3结论本文建立了一种用于测定高效氯氰菊酯在柑橘和土壤中残留量的气相色谱分析方法，该方法符合农药残留量分析与检测的技术要求；高效氯氰菊酯在柑橘和土壤中的降解半衰期为1.6~6.0d，属于易降解农药[13]。

收获期柑橘果肉中高效氯氰菊酯的残留量均低于0.01mg/kg；建议高效氯氰菊酯在柑桔中的MRL值为0.02 mg/kg。

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