Neuropilin-1在小鼠黑色素瘤细胞增殖中的作用
两种黑色素瘤B16细胞肺转移小鼠模型的构建和比较_李佳悦
?基础论著? 两种黑色素瘤B16细胞肺转移小鼠模型的 构建和比较 李佳悦朱欣凯王萍钮利喜 【摘要】 目的 采用尾静脉接种法建立C57BL/6小鼠和KM小鼠两种黑色素瘤B16细胞肺转移 动物模型，观察小鼠肺部成瘤过程，并对两种模型进行比较。制作肿瘤切片，通过HE染色分析两种 肿瘤模型的组织病理学特征。方法培养B16黑色素瘤细胞至对数生长期时收集细胞，用生理盐水 调整浓度为5×106/ml备用。将备好的B16细胞通过尾静脉接种小鼠，每只注射0.2 ml。接种后，两种 小鼠每隔一定时间随机各取一只小鼠处死，解剖取肺，观察成瘤情况，计数肺表面的瘤结节数，测 量瘤结节大小。以出现瘤结节开始计时，记录小鼠荷瘤时间。形成稳定的肿瘤模型后，制作肿瘤组 织切片，HE染色进行病理学观察分析。结果B16细胞尾静脉接种C57BL/6小鼠和KM小鼠，均能形 成肺转移模型，但两种小鼠成瘤情况差异较大。KM小鼠的荷瘤时间比C57BL/6小鼠荷瘤时间长。HE 染色结果显示黑色素瘤B16细胞在两种小鼠的肺组织中均形成巢团状的转移瘤，且两种模型肺转移 瘤均多分布在支气管周围。结论通过对C57BL/6小鼠和KM小鼠两种黑色素瘤B16细胞肺转移小鼠 模型的成瘤特点的分析比较，可以看出KM小鼠更适合用于研究新的肺肿瘤治疗药物，为研究黑色素 瘤的发生发展提供依据。 【关键词】 B16细胞；肺转移小鼠模型；尾静脉 Establishment and comparison of two kinds of lung metastasis mouse models Li Jiayue, Zhu Xinkai, Wang Ping, Niu Lixi. Institute of Biotechnology, Shanxi University, Taiyuan 030006, China Corresponding author: Niu Lixi, Email: nlx@https://www.360docs.net/doc/5015220745.html, 【Abstract】 Objective To observe the tumorigenic process, two pulmonary metastatic models of melanoma B16 cells were established and compared using C57BL/6 and KM mice, respectively. Methods Tail intravenous injection of 1×106 melanoma B16 cells/mouse resulted in macroscopic disease by 4-9 days and a randomly selected mouse was sacrificed in a certain interval to survey the morphologic characteristics of melanoma. The number of tumor nodules in the lung surface was counted and the size of tumor nodules was measured. The tumor-burdened time of mice was recorded and the tumor sections were made for pathological observation and analysis. Results HE staining showed that each mouse in the B16 cell injection groups had nest-shape metastatic foci distributed around the bronchi in the lung, but the tumor-burdened time was significantly different which was longer in KM mice than in C57BL/6 mice. Conclusion By comparing the characteristics of two pulmonary metastatic models of C57BL/6 mice and KM mice, we can concluded that the B16 melanoma models in KM mice were ideal tumor models which were suitable for researching the new drugs in lung cancer treatment. Our research would provide evidence for the occurrence and development of melanoma. 【Key words】 B16 cells; Pulmonary metastatic mouse model; Tail vein 肺肿瘤又叫支气管肺癌（lung carcinoma）是常见的恶性肿瘤之一，近年来肺癌的发病率和死亡 DOI:10.3877/cma.j.issn.1674-0785.2015.19.022 基金项目：山西省青年基金资助项目（2011021035-5） 作者单位：030006 太原，山西大学生物技术研究所 通讯作者：钮利喜，Email: nlx@https://www.360docs.net/doc/5015220745.html, 率都有明显增高的趋势，已成为人类因癌症死亡的主要原因[1-2]。但其发病机制目前尚未完全阐明，目前治疗方法以化疗和放疗为主，治疗带来的不良反应给患者造成极大的痛苦，治疗效果亦不尽人意。新的有效的肺肿瘤治疗的方法一直在探索中。肿瘤模型是研究恶性肿瘤病因、发展过程和探索肿瘤治
《减数分裂和受精作用》教学设计
《减数分裂和受精作用》教学设计 一、教材分析： 1.教材的地位与作用： 本节课的教学内容是以精子形成过程为例学习减数分裂过程，由此总结减数分裂的基本概念。这节课的内容是学生学习了细胞的基础知识。学生已经初步掌握了动植物细胞的结构和功能，明确了有性生殖的重要意义，理解了有性生殖是生物界普遍存在的一种生殖方式，对于生物的遗传、变异具有十分重要的意义。减数分裂这一内容还与以后学习遗传学知识密切相关，特别是与生物的遗传规律、变异中的基因重组以及染色体组、多倍体、单倍体等内容都有非常密切的联系。由于本节课的内容既是对有丝分裂知识的延伸和扩展，也是学习遗传学知识的基础，因此有着承前启后的作用。 2.教学的重点与难点： （1）教学重点：减数分裂的过程和概念。这是生殖细胞形成的基础，又是遗传和变异的细胞学基础。 （2）教学难点：同源染色体，四分体的概念，以及染色体行为的变化规律。其中染色体行为的变化规律既是重点又是难点，它是学生理解减数分裂的关键。 二、教学目标分析： 1.知识与技能： （1）通过本节课的学习要求学生理解减数分裂的基本概念、过程和特点，明确减数分裂是生殖细胞形成过程中的一种特殊的有丝分裂； （2）掌握同源染色体的基本概念； （3）理解和掌握减数分裂的两次分裂过程中染色体行为特征，特别是染色体数目、染色单体数目和DNA含量的变化规律。 2.过程与方法： 通过对比减数分裂和有丝分裂、精子和卵细胞形成过程的异同点，培养学生比较、分析问题并认识事物实质的思维能力；通过对减数分裂过程中染色体和DNA变化规律的认识，培养学生观察、分析、综合等方面的思维能力；通过分析讨论、巩固练习，培养学生解决问题的能力。 3.情感态度与价值观： 通过减数分裂过程中染色体和DNA变化规律的认识，使学生明确减数分裂和受精作用，是维持亲、子代之间体细胞染色体数目一致，保证物种稳定的重要条件；减数分裂产生遗传内容不同的配子，是有性生殖后代具有丰富变异性的重要原因。从而明确有性生殖在生物的生殖方式上有着更高级的进化地位。 三、学情分析： 1. 学生学习本课内容的基础： 根据本节课的知识体系、重点难点和学生的认识水平，采用“启发与探究”的教学模式实施教学，即：目标→观察→思考→总结→应用，根据教学目标设疑，引导学生观察和思考，通过归纳和总结来解决问题并形成知识体系。然后加以应用，目的在于培养学生的思维能力。教学过程尽量体现以教师为主导，学生为主体的教学原则。 2. 学生学习本课内容的能力： 借助多媒体辅助教学，增加教学的直观性、科学性和课堂内容容量。以此来突出本节课的重点，突破难点。
黑色素瘤相关知识
皮肤 表皮：细胞分为两大类，一类是角质形成细胞，占表皮细胞的绝大多数；另一类是非角质形成细胞，散在于角质形成细胞之间，包括黑色素细胞、朗格汉斯细胞和梅克尔细胞。 表皮的分层和角化： 手掌和足底的表皮结构，从基底到表面可分为基底层、棘层、颗粒层、透明层和角层五层。薄皮的表皮，颗粒层和透明层不明显，并且角质层较薄。
1、基底层：附着于基膜上，由一层矮柱状的基底细胞组成。胞质内因有丰富的游离核糖体而呈嗜碱性，有散在或成束的角蛋白丝。 2、棘层 由4-10层多边形、体积较大的棘细胞组成。细胞表面有许多短小的棘状突起。相邻细胞的突起镶嵌，并以大量的桥粒相连。胞质呈弱嗜碱性。 3、颗粒层 由3-5层梭形细胞组成。颗粒层细胞的核与细胞器已退化，胞质内板层颗粒增多，出现许多形状不规则、强嗜碱性的透明角质颗粒。 4、透明层 由2-3层扁平细胞组成。细胞界限清楚，本层强嗜酸性。 5、角质层 由多层扁平的角质细胞组成。细胞完全角化，干硬，嗜酸性。 非角质形成细胞 1、黑素细胞 是生成黑色素的细胞。包体多分散在基底细胞之间，其突起伸入基底细胞和棘细胞之间。HE染色胞体呈圆形，核深染而胞质透明，突起不能辨认。 2、朗格汉斯细胞 散在与棘层浅部，HE染色呈圆形、核深染、胞质清亮。 真皮 1、乳头层 是紧靠表皮的薄层疏松结缔组织，向表皮突出形成真皮乳头。含有丰富的毛细血管和游离神经末梢，在手指掌侧的真皮乳头内含较多触觉小体。
2、网织层 为乳头层下放较厚的致密结缔组织，内有粗大的胶原纤维束交织成网，并有许多弹性纤维，。此层内有较多血管、淋巴管和神经，深部常可见环层小体。
原位恶性黑色素瘤 1、恶性雀斑 表皮基底层色素细胞增多，可呈单排或大小不等巢状增生。增生细胞有不同程度的异型性。异型性细胞单个或成群侵及表皮，特别是单个异型性黑色素细胞侵及表皮浅层具有诊断意义。增生黑色素细胞呈梭形、多角形、上皮样，有多形性、多为梭形，胞浆大多透明，内常可见多少不等色素。在表皮内细胞团与其周表皮界限不清，呈浸润性，胞核较大，深染，形状不规则，极向紊乱。
细胞增殖和受精作用有丝分裂专题练习
有丝分裂练习题 例1：用洋葱为材料，观察植物细胞的有丝分裂： （1）洋葱根培养时，由于没有经常换水，结果出现烂根现象，其原因是 。 （2）制作装片时，某学生用1％盐酸在300C下把根尖解离15分钟，然后漂洗、染色、压片，结果观察时发现装片内细胞没有分开，其原因是。 （3）观察装片时，生长点细胞中处于什么时期的细胞最多? ； （4）如果在培养根尖时，用适当浓度的秋水仙素处理，然后按实验步骤操作，就能发现这些细胞有丝分裂期与正常细胞不同，这些细胞的变化是。 例2：在细胞有丝分裂的分裂期开始时，如果它的染色体数为N，DNA含量为Q，则该细胞分裂后，每个子细胞中的染色体数和DNA含量分别是 A．N和Q B．N／2和Q／2 C．N和Q／2 D．N／2和Q 例3：马蛔虫体细胞中有4条染色体，用显微镜观察其受精卵卵裂装片，请回答： （1）若马蛔虫受精卵细胞中DNA含量在细胞周期即将开始时为a，则在 一个细胞周期中核内DNA含量变化的规律是→→。 （2）光镜下，观察到某一处在分裂状态的细胞，其染色体数目为8条， 对此的解释是 （3）马蛔虫的受精卵连续分裂四次后，每个细胞中有染色体条。 （4）画出马蛔虫细胞有丝分裂后期示意图，并注明各部分名称。 例4；如右下图是两个细胞有丝分裂的图示，请据图回答； （1）A图示细胞有丝分裂，B图示 细胞的有丝分裂，判断的依据是。 （2）A图示有丝分裂期，主要特点是 （3）B图示有丝分裂的期，其主要特点是 。 一、选择题； 1．用某种物质强烈抑制肿瘤细胞的DNA复制，这些细胞将会停留在细胞周期的A．间期B．前期C．中期D．末期 2．一般情况下，下列有细胞周期的是 ①根毛细胞②叶肉细胞③生发层细胞④分生区细胞：⑤神经细胞⑥茎的形成层细胞 ⑦口腔上皮细胞⑧洋葱表皮细胞 A．①②③B．③④⑥C．④⑤⑦D．⑥⑦⑧ 3．下列关于细胞有丝分裂的叙述中不正确的是 A．间期染色体复制后，每个细胞中的染色体就增加一倍 B．分裂前期和分裂中期时，细胞中的染色体数目是相同的 C．分裂前期和分裂中期的每个染色体都含有两个姐妹染色单体 D．后期的细胞中的染色体不含有染色单体 4．洋葱体细胞中含有8对同源染色体，可观察到32条染色体的细胞是 A．根毛区细胞B．根尖分生区细胞C．种子的胚乳细胞D．花粉粒5．连续分裂的细胞，相邻的两周期可表示为下图，对此不正确的叙述是 A．a+b是一个细胞周期B．a段的主要变化是DNA的复制及有关蛋白质的合成C．b+c是一个细胞周期D．d段主要完成遗传物质的平均分配 6．下列关于动、植物细胞有丝分裂的区别，其中正确的是 A．分裂前期染色体的活动不同B．着丝点的分裂和纺锤体的形成方式不同C．着丝点的分裂和细胞质的形成方式不同D．纺锤体的形成和细胞质的分裂方式不同7．下列关于动、植物细胞有丝分裂过程基本相同的叙述中，错误的是 A．间期进行染色体的复制B．中期形成纺锤体 C．后期染色单体分离D．末期染色体平均分配到两个子细胞中去8．保证两个子细胞中染色体的形态和数目与母细胞完全相同的机制是 A．染色体复制B．着丝点的分裂C．纺锤丝的牵引D．A、B、C三项均起作用9．用高倍镜观察洋葱表皮细胞装片时，能清楚地看到细胞核，但看不到染色体。主要原因是A．洋葱表皮细胞结构不完整B．洋葱表皮细胞处于分裂期 C．洋葱表皮细胞不分裂D．洋葱表皮层数太多 10．人体小块擦伤的皮肤能重新长好，主要是由于发生层细胞能进行 A．无丝分裂B．减数分裂C．有丝分裂D．减数分裂和有丝分裂11．右图是下列那种细胞处于何时期的分裂图。 ①肝细胞②茎形成层细胞③蓝藻④有丝分裂前期 ⑤有丝分裂后期⑥有丝分裂末期 A．①④ B．③⑥ C．②⑤ D．②④ 12．有丝分裂前期所发生的最重要的变化 A．出现染色体B．出现纺锤体C．核膜解体D．核仁消失 13．一般来说参与植物细胞有丝分裂这一生理过程的细胞器有 ①线粒体②核糖体③高尔基体④中心体⑤内质网 A．①②③B．②③④C．③④⑤D．①③⑤ 14．在显微镜下能看到细胞核的是 A．洋葱根尖细胞有丝分裂的中期B．洋葱根尖细胞有丝分裂的后期 C．洋葱根尖中刚分裂形成的两个子细胞D．正在分裂的细胞 15．无丝分裂与有丝分裂的最主要区别是 A．无染色体的变化和纺锤体的出现B．无染色体的复制 C．形成的子细胞染色体数目减少D．形成的两个子细胞大小不同
中国黑色素瘤诊断治疗共识
《中国黑色素瘤诊断治疗共识》 恶性黑色素瘤(MM)是恶性程度较高,临床预后较差的恶性肿瘤。在西方国家属于发病率前5位而死亡率第1位的恶性肿瘤。在我国,由于以前MM发病率较低,未引起人们足够重视,近年来其发病率增长迅速,而临床医生对其诊断和治疗与其它恶性肿瘤相比较为生疏。在MM的规范化诊断治疗方面,与西方国家也存在较大差距。 为宣传普及黑色素瘤知识并促进中国MM诊断治疗的规范化,2007年5月,在解放军南京八一医院秦书逵教授及北京肿瘤医院郭军教授的倡导下,CSCO黑色素瘤专家委员会正式成立,并先后在杭州、南京等地召开了专家组会议。小组十几位专家教授以循证医学证据为基础,综合分析评价了国内外相关资料, 于2008年8月正式发布第一版《中国黑色素瘤诊断治疗共识》,并希望通过循证医学证据的不断补充,最终制定出适合中国患者的黑色素瘤诊治指南,为国内临床医生提供实用的临床实践工具。 1. 概述 MM是皮肤肿瘤的一种,由位于表皮基底部的黑色素细胞恶变而成,多由痣或色素斑发展而来,一旦进入快速生长期,则预后差、死亡率高。90%的MM发生于皮肤,最常见于背部、胸腹部和腿部,可见于足底、指趾、甲下和头皮,少数发生于外阴、消化道和眼内。MM与鳞癌和基底细胞癌不同,后两种起源于表皮的角质细胞,预后较好。 早期MM经外科扩大切除后95%-100%可治愈。因此,早期发现与早期诊断非常重要。皮肤MM的早期临床表现为痣或色素斑迅速增大、隆起、破溃不愈、边缘不整或有切迹和锯齿、颜色改变、局部形成水疱、瘙痒、刺痛等。进而可出现卫星灶、局部淋巴结肿大、移行转移(经由淋巴管在原发病灶与区域引流淋巴结之间形成皮下结节)和远处转移。常见的远处转移部位包括远处皮肤、淋巴结、肺、脑、肝、骨等。 MM预后与患者性别、年龄、肿瘤部位、厚度、淋巴结转移个数及乳酸脱氢酶(LDH)等相关。通常,女性患者预后好于男性;发生于四肢的MM预后最好,躯干其次,头颈部最差;分期较早者预后较好;LDH较低者预后较好,LDH<0.8正常值者生存期较长;有1个淋巴结转移者5年生存率为75%,有3个转移者为15%;浸润深度<1 mm者10年生存率>90%,浸润深度>4.5 mm者10年生存率为30%。 2. 流行病学与病因学 MM是所有恶性肿瘤中发病率增长最快的肿瘤,年增长率约3%-5%。MM平均发病年龄为45岁,50岁以后发病率随年龄增长而升高。 白种人发病率高于其他肤色人种。英国近5年来MM男性发病率增加了28%,女性增加了12%。美国2007年估计MM新发病例59940人,死亡约8110人。澳大利亚昆士兰和美国的南亚利桑那州为MM高发地区,发病率分别为40例/10万和30例/10万。中国和日本等亚洲国家发病率较低,但增长迅猛。北京市八城区统计资料显示,2000年MM发病率为0.2例/10万,2004年已达1例/10万。 MM的病因学在白种人中研究较多,主要认为其与日照相关。日光中的紫外线灼伤皮肤诱导DNA突变。紫外线中的UV A和UVB均可诱导MM的发生,但UVB在破坏黑色素细胞的某种基因并诱导MM发病中起主要作用。研究已证实,位于9号染色体短臂的p16或CDKN2A的基因突变是造成黑色素瘤高遗传易感性的主要原因。 亚洲和非洲地区的MM患者原发病灶多位于足跟、手掌、指趾和甲下等接触紫外线极少的地方,其病因尚不明确。不恰当的处理有可能诱导黑色素瘤的迅速生长,如刀割、绳勒、盐腌、激光和冷冻等。内分泌、化学、物理因素对MM的发生是否有影响尚不清楚。 3. 病理类型 MM常见病理类型有浅表扩散型、结节型、恶性雀斑样和肢端雀斑样;少见类型有促纤
恶性黑素瘤——病理改变
【病理改变】恶性黑素瘤的典型病理特征是在真皮表皮交界处不不典型的黑素细胞增生，且瘤细胞侵犯表皮和真皮。瘤细胞呈双相分化，上皮细胞型与梭形细胞型。细胞核呈显著异形性，核形怪异。还可见单核、双核或多核，常见核分裂象。恶黑的组织病理形态因不同类型而不尽相同。 1.恶性雀斑样痣黑素瘤：表皮萎缩，基底层有较多不典型黑素细胞，并向下侵袭真皮，瘤细胞内或细胞间质中噬色素细胞含有相当多的黑素。 2.浅表扩散性黑素瘤：表皮突向下不规则增生，真皮表皮交界处和真皮内可见不典型的痣细胞巢，除上皮细胞型与梭形细胞型的黑素细胞外，有时表皮上部还可见少数paget样黑素细胞。真皮炎症细胞浸润明显。 3.结节性黑素瘤：不典型黑素细胞垂直向下增生侵入真皮，而不向表皮侵犯。上皮细胞型的黑色素细胞常排成腺泡状；梭形细胞型则类似成纤维细胞，有时作束状排列。 4.肢端雀斑样痣黑素瘤：表皮增厚，含大量色素的不典型黑素细胞巢位于表皮下部，常见梭形黑素细胞。表皮上部也可见paget样的黑素细胞，真皮乳头可见噬色素细胞。无黑素性恶性黑素瘤的细胞形态结构具备恶黑特点，HE染色中无明显黑素，用多巴（Dopa）试验可呈阳性反应，银染色可显示少量黑素。对恶黑的组织学诊断除了确诊、分型外，还应观察其侵袭程度，瘤细胞侵犯愈深则预后愈差。通常采用Clork深度和Breslow厚度两个主要参数来表示。（1）Clork分级：Ⅰ级：瘤细胞限于表皮内；Ⅱ级：侵入真皮乳头；Ⅲ级：充满真皮乳头；Ⅳ级：侵入真皮网状层；Ⅴ级：侵入皮下脂肪层。从Ⅰ级到Ⅴ级的5年存活率依次为99%，95%，90%，65%和25%。（2）Breslow测定法是用目镜测微器测量肿瘤厚度。肿瘤厚度与患者5年存活率的关系为：厚度小于0.85mm为98%；0.8～1.69mm为90%；1.7～3.59mm为70%；大于3.6mm为45%。
对小鼠黑色素瘤细胞肺转移的抑制作用mGM
对小鼠黑色素瘤细胞肺转移的抑制作用mGM 作者：田蓉，程绍辉，于继云，李巍，刘玉峰 【关键词】黑色素瘤 Inhibition of lung metastasis of B16 melanoma cells transfected with murine granulocytemacrophage colonystimulating factor in mice 【Abstract】AIM: To investigate the inhibition of lung metastasis of melanoma by a tumor vaccine of B16 melanoma cells transfected with murine granulocytemacrophage colonystimulating factor (mGMCSF). METHODS: The murine melanoma cell line B16 was transfected with the recombinant plasmid containing mGMCSF. A cell line stably expressing mGMCSF was obtained by G418 selection. The Balb/c mice were administered i.v. with B16 cells transfected with or without mGMCSF respectively and the lung metastasis was examined 2 weeks later. RESULTS: The recombinant cell line B16TR was established after mGMCSF tranfection and the expression of mGMCSF was confirmed by RTPCR. The number of lung metastatic lesions of mice treated
不同微环境下黑色素瘤细胞三维结构差异4.26
不同微环境下黑色素瘤细胞三维结构差异癌症是一种衰老的疾病。从临床来看，老年癌症患者的预后往往比年轻人差。这可能是由于细胞损伤累积、适应性免疫下降和慢性炎症。然而，老年微环境对肿瘤进展的影响在很大程度上尚未被探索。由于真皮成纤维细胞对黑色素瘤进展有深远的影响，研究了真皮成纤维细胞的年龄相关变化是否可以驱动黑色素瘤转移和靶向治疗的反应。 目前关于老化的微环境对黑色瘤的发展，其中是否对黑色素瘤的三维结构差异效果未知，因此我们设计此实验达到如下两个目的： （1）不同肿瘤微环境下对黑色瘤的三维结构变化产生的影响 （2）尝试寻找老化微环境下对黑色瘤的作用机制，通过哪条通路上关键基因进而调控一系列基因表达变化起保护作用。 Part I. 老化微环境黑色瘤细胞模型构建 利用2个黑色素瘤细胞系（WM35和WM793）、年轻（<35岁）或衰老（>55岁）的成纤维细胞系构建了器官型皮肤重建。 （1）WM35+年轻（<35岁）成纤维细胞系 （2）WM35+衰老（>55岁）成纤维细胞系 （3）WM793+年轻（<35岁）成纤维细胞系 （4）WM793+衰老（>55岁）成纤维细胞系 测定指标： a. CCK8 测增殖（不同组分） b. 检测MDA、SOD 及ROS 含量的变化 C. 黑色瘤细胞形态变化 Part II. 不同微环境下黑色瘤动物模型构建及三维结构变化 实验材料：实验室构建小鼠黑色瘤模型（依据“Dankort, D. et al. BrafV600E cooperates with Pten loss to induce metastatic melanoma. Nature Genet. 41, 544–552 (2009).”) 实验分组：每组尽量多做生物学重复，减少个体误差。 Yumm1.7细胞来自于Braf V600E /Cdkn2a - / - /Pten - / - 小鼠黑色素瘤模型 （1）8周龄小鼠（幼龄）（注射Yumm1.7）
版高三生物二轮复习 第1部分 专题3 第1讲 细胞的增殖和受精作用(含解析)新人教版
版高三生物二轮复习第1部分专题3 第1讲细胞的增殖和受 精作用（含解析）新人教版 第1讲细胞的增殖和受精作用 (对应学生用书第27页) (对应学生用书第27页) 维度1——善归纳·基础回扣
细胞周期 1.细胞周期的表示方法(如图) 甲 乙 丙 (1)上述图示中一个完整的细胞周期可表示为：甲：A →B →C →A ；乙：a ＋b 或c ＋d ；丙：a ＋b ＋c ＋d ＋e 。 (2)下列细胞分别对应丙图的何种分裂时期？ ①对应d ；②对应c ；③对应b 。 2．判断下列图示细胞是否均有细胞周期 图示细胞有细胞周期的是：(3)。 有丝分裂 1.解读有丝分裂的记忆口诀： 前期：两失两现一散乱????? 两失：核膜核仁消失两现：染色体、纺锤丝出现
中期：形态数目清晰现????? 观察染色体最好的时期着丝点整齐地排列在赤道板上 后期：点裂数增均两极????? 点裂：着丝点分裂数增：染色体数目加倍 末期：两消两现新壁建????? 两消：染色体、纺锤体消失两现：核膜、核仁重新出现 2．比较高等动、植物有丝分裂的异同 ①染色体要经过复制 ②有无中心体的复制 ③染色体平均分配 ④纺锤体的形成方式 ⑤末期细胞分开的方式 (1)相同点：①③； (2)不同点：②④⑤。 注意：低等植物细胞与动物细胞纺锤体的形成方式相同。 减数分裂 1.减数分裂图像鉴别 (1)将上述图像进行排序：③→④→⑥→①→⑤→②； (2)②、⑥中一定属于雌性动物分裂图像的是b 、d ；不能确定性别的图像是：a ，此细胞可能为第一极体或次级精母细胞。 (3)基因重组发生于③和⑥； (4)不含同源染色体的图像是①、②、⑤。 2．精子与卵细胞形成过程的区别 项目 精子 卵细胞 细胞质分裂分配情况 均等分裂 减数第一次分裂不均等分裂，减数第二次分裂既有不均等分裂也有均等分裂
参一胶囊Rg3诱导小鼠黑色素瘤细胞凋亡
文章编号：１００７－４２８７（２０１０）０４－０５２６－０２ 参一胶囊（Ｒｇ３）诱导小鼠黑色素瘤细胞凋亡 孙宝胜１，张 矛２，刘林林２，孙 晶３，侯吉光４ （１．吉林省肿瘤医院放疗三科，吉林长春１３００２１；２．吉林大学第二医院肿瘤生物治疗科； ３．吉林大学第二医院药剂科；４畅吉林大学第二医院放疗科） 摘要：目的 探讨参一胶囊（Ｒｇ３）对小鼠黑色素瘤细胞的生长抑制及其诱导凋亡的作用。方法 ＭＴＴ法检测参一胶囊（Ｒｇ３）对黑色素瘤细胞生长的影响；流式细胞仪检测细胞凋亡。结果 参一胶囊（Ｒｇ３）对小鼠黑色素瘤细胞生长有显著的抑制作用，并能显著诱导细胞发生凋亡，其作用呈明显的量效和时间依赖性关系。结论 参一胶囊（Ｒｇ３）诱导小鼠Ｂ１６－４Ａ５黑色素瘤细胞凋亡，抑制细胞增殖。 关键词：参一胶囊；黑色素瘤细胞；细胞凋亡 中图分类号：Ｒ９６５文献标识码：Ａ ＭｅｌａｎｏｍａｃｅｌｌａｐｏｐｔｏｓｉｓｉｎｄｕｃｅｄｗｉｔｈＲｇ３ ＳＵＮＢａｏ－ｓｈｅｎｇ１，ＺＨＡＮＧＭａｏ２，ＬＩＵＬｉｎ－ｌｉｎ２，ｅｔａｌ．（１．ＪｉｌｉｎＰｒｏｖｉｎｃｉａｌＴｕｍｏｒＨｏｓ－ｐｉｔａｌ，Ｃｈａｎｇｃｈｕｎ１３００１２，Ｃｈｉｎａ；２．ＴｈｅＳｅｃｏｎｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＪｉｌｉｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ ＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆＲｇ３ｏｎｔｈｅａｐｏｐｔｏｓｉｓｏｆｍｅｌａｎｏｍａＢ１６－４Ａ５ｃｅｌｌｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ＴｈｅｃｅｌｌｇｒｏｗｔｈａｎｄａｐｏｐｔｏｓｉｓｗｅｒｅａｓｓｅｓｓｅｄｗｉｔｈＭＴＴｍｅｔｈｏｄａｎｄｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｒｇ３ｈａｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｅｆｆｅｃｔｏｎＢ１６－４Ａ５ｃｅｌｌｇｒｏｗｔｈ，ａｎｄｉｎｄｕｃｅｄｔｈｅａｐｏｐｔｏｓｉｓｗｉｔｈａｄｏｓｅ－ａｎｄｔｉｍｅ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔｍａｎｎｅｒ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｒｇ３ｃａｎｉｎｈｉｂｉｔＢ１６－４Ａ５ｃｅｌｌｇｒｏｗｔｈａｎｄｉｎｄｕｃｅａｐｏｐｔｏｓｉｓ． Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｒｇ３；ｍｅｌａｎｏｍａｃｅｌｌ；ａｐｏｔｏｓｉｓ （ＣｈｉｎＪＬａｂＤｉａｇｎ，２０１０，１４：０５２６） 人参皂苷Ｒｇ３是从人参中提取的有效单体成分。研究证明，人参皂苷Ｒｇ３可通过抑制肿瘤血管形成，阻断肿瘤的浸润和转移［１，２］；提高肿瘤病人免疫力，抑制转移，并降低肿瘤病人放、化疗后毒副作用［３］。本文通过观察人参皂苷Ｒｇ３对黑色素瘤细胞的存活率及细胞凋亡的变化，为其临床应用提供重要的实验依据。 １ 材料与方法 １．１ 试剂 细胞培养液、小牛血清、青霉素、链霉素、谷氨酰胺、胰酶和磷酸盐缓冲液均购自Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ公司（Ｐａｉｓｌｅｙ，Ｓｃｏｔｌａｎｄ，ＵＫ）。Ｔａｕｒｏｌｉｄｉｎｅ（Ｔａｕｒｏｌｉｎ）溶剂由ＧｅｉｓｔｌｉｃｈＰｈａｒｍＡＧ（Ｗｏｌｈｕｓｅｎ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）赠送。其他的化学试剂均购于ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ公司（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）。 １．２ 细胞及培养 小鼠黑色瘤细胞（Ｂ１６－４Ａ５）购于美国细胞库（Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ）。Ｂ１６－４Ａ细胞均在含有１０％小牛血清、青霉素（１００Ｕ?ｍｌ－１）和谷氨酰胺（２ｍｍｏｌ?Ｌ－１）的ＤＭＥＭ培养液培养，并在３７℃、５％ＣＯ２孵箱中贴壁生长。１×１０５?ｍｌ－１。将Ｂ１６－４Ａ５细胞种植在９６孔培养板（１００μｌ?ｗｅｌｌ－１）２４ｈ后，分别给予不同浓度的ｔａｕｒｏｌｉ－ ｄｉｎｅ，并确定最终浓度分别为０、１０、２５、５０、１００和２００μｍｏｌ?Ｌ－１。５％的ＰＶＰ作为空白对照组。Ｂ１６－４Ａ５细胞在３７℃、ＣＯ２孵箱中培养２４和４８ｈ后，给予１００μｌＭＴＴ（５．０ｇ?Ｌ－１），３７℃继续培养３ｈ，终止培养，吸去上清，每孔加入１５０μＬ二甲基亚砜，振荡１０ｍｉｎ在酶联免疫吸附仪上测量各孔光吸收值（ＣＰＭ）。细胞生长抑制率（％）＝（１－实验组ＣＰＭ值／对照组ＣＰＭ值）×１００％。 １．４ 流式细胞术检测细胞凋亡 待Ｂ１６－４Ａ５细胞接近对数生长期，常规消化细胞，制成２．５×１０５?ｍＬ－１细胞悬液，接种于６孔培养板中。２４ｈ后，实验组给予上述不同浓度的ｔａｕｒｏｌｉ－ｄｉｎｅ。５％的ＰＶＰ作为空白对照组。Ｂ１６－４Ａ５细胞在３７℃，ＣＯ２孵箱中培养２４和４８ｈ后，将贴壁及悬浮的细胞离心，收集后震荡、混匀，在碘化丙啶（ＰＩ）混合溶液中（５０ｍｇ?Ｌ－１ＰＩ，３．４ｍｍｏｌ?Ｌ－１ｓｏｄｉｕｍｃｉｔ－ｒａｔｅ，１．０ｍｍｏｌ?Ｌ－１Ｔｒｉｓ，０．１ｍｍｏｌ?Ｌ－１ＥＤＴＡ，０．１％ＴｒｉｔｏｎＸ－１００），并在４℃环境中避光培养４－６ｈ。流式细胞仪（ＢＤｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，ＭｏｕｎｔａｉｎＶｉｅｗ，ＣＡ）进行 — ６２５ —ＣｈｉｎＪＬａｂＤｉａｇｎ，Ａｐｒｉｌ，２０１０，Ｖｏｌ１４，Ｎｏ．４
减数分裂与受精作用习题--含答案
遗传的细胞基础---减数分裂和受精作用习题 一、选择题（每小题2分，共40分） 1.在显微镜下观察动物组织切片，发现细胞内的染色体数目有的是体细胞的一半，有的是体细胞的2倍，该切片取自（ D ） A．人的小肠小皮B．家兔胚胎 C．绵羊肝脏D．牛卵巢 2.仅考虑“核”DNA，下列人体细胞中染色体数可能相同，而DNA含量一定不同的是（D） A．初级精母细胞和精细胞 B．精原细胞和次级精母细胞 @ C．卵原细胞和卵细胞 D．初级卵母细胞和次级卵母细胞 3.下图为某生物细胞处于不同分裂时期的示意图，下列叙述正确的是( )。 A．甲、乙、丙中都有同源染色体 B．卵巢中不可能同时出现这三种细胞 C．能够出现基因重组的是乙 D．丙的子细胞是精细胞 ^ 4、下列关于同源染色体概念的叙述中正确的是( ) A．一条染色体经复制后形成的两条染色体 B．一条来自父方、一条来父方、一条来自母方的染色体 C．在减数分裂中能联会的两条染色体 D．形状和大小一般都相同的两条染色体 5、动物的1个精原细胞在减数分裂中形成4个四分体，则在减数第二次分裂的中期可能有的染色体数、染色单体数分别是( ) A．2条、4条 B．4条、8条 C．8条、0条 D．8条、16条 ~ 6、下列关于DNA分子和染色体数目的叙述，正确的是( ) A.有丝分裂间期细胞中染色体数目因DNA复制而加倍 B．有丝分裂后期细胞中DNA分子数目因染色体着丝点分裂而加倍 C．减数第一次分裂后，细胞中染色体数目因同源染色体分离而减半
D.减数第二次分裂过程中细胞中染色体与DNA分子数目始终不变 7、某二倍体动物的某细胞内含10条染色体、10个DNA分子，且细胞膜开始缢缩，则该细胞（） A．处于有丝分裂中期 B．正在发生基因自由组合 C．将形成配子 D．正在发生DNA复制 , 8、若下图为某细胞减数第一次分裂后期图，则该细胞处于减数第二次分裂中期的图像应为（） 9．(2011·无锡模拟)下图甲、乙、丙、丁分别表示某哺乳动物细胞(2N)进行减数分裂的不同时期，其中a表示细胞数目。请判断b、c、d依次代表( ) A．DNA分子数、染色体数、染色单体数 B．染色体数、DNA分子数、染色单体数 C．DNA分子数、染色单体数、染色体数 D．染色单体数、染色体数、DNA分子数 ' 10．人类精子发生过程中，下列说法不正确的是( ) A．细胞中染色单体数最多可达92条 B．姐妹染色单体携带的遗传信息可能是不同的 C．染色单体交叉互换发生在同源染色体分离之前 D．一个精原细胞产生两个相同精子的概率最大为1/223 11．从配子形成和受精作用的角度分析，下列关于遗传具有多样性和稳定性的原因的叙述，正确的是(多选)( ) A．减数分裂过程中，非同源染色体的自由组合是形成配子多样性的重要原因之一
一个七十多岁黑色素瘤病人的真实经历
一个七十多岁黑色素瘤病人的真实经历 黑色素瘤是一种恶性程度相当高的恶性肿瘤，又称恶性黑瘤，大多原发于皮肤，也可起源于眼、鼻腔等处，早期可发生转移，转移部位多见肺、脑。那么得了黑色素瘤怎么办呢？手术后应该如何预防复发呢？我们来看下一个七十多岁黑色素瘤病人的真实经历：今年七十多岁的刘老爷子，在2010年年末检查出腿上、腹股沟上有黑色素瘤，术后疼痛，服用过各种药物，均没有很好的效果。2011年3月份查出有淋巴转移，老爷子在四月初再次动了黑色素瘤手术，切除了周围淋巴。 因为当时老爷子刚拆完线，怕还有淋巴转移，人参皂苷Rh2有抗转移功效，所以建议加量服用。一个月以后，淋巴上原来的三个点都已经不见了。得了黑色素瘤后，老爷子除了服用人参皂苷Rh2外，还在吃虫草和注射胸腺肽。自己感觉一天比一天好。 本来腿上和胳膊上有几个小包，腿上那个还挺大，有疼痛感，现在已经消失了，小一点那个会活动，不痛。胳膊上有三个，本来有疼痛感，现在也不是很痛了，也会活动了七月份的时候专家会诊，肺部和淋巴的瘤子都基本控制住了。肺部原来有几个瘤子，现在只剩三个了。现在精神、食欲、睡眠都很好。现在老爷子又开始在外面奔波了，自我感觉情况很稳定。本来是腹股沟、肺上、淋巴上都有转移，现在不仅没有增大，数量上也已经减少。 和老爷子通电话，他说前几天沈阳电视台来了一个专家，说人参不能抗癌，但是人参皂苷Rh2可以抗抗癌，而且剂量和疗效成正比。老爷子现在还到处跑，去北京做工作，忙忙碌碌的感觉让他感觉很充实！ 恶性肿瘤的侵袭和转移特性是最终导致患者死亡的主要原因。肿瘤转移是一个复杂的过程,而肿瘤细胞侵袭基底膜是其中的一个重要的环节。在体外重组基底膜的实验中观察到20(R)-人参皂苷Rh2可显著降低B16黑色素瘤细胞的侵袭能力，20(R)-人参皂苷Rh2的研究与开发为人类抗击癌症开辟一条新途径。
第一节 减数分裂和受精作用公开课教案
第二章基因和染色体的关系 一、教材分析 《减数分裂和受精作用》这一课题是在高中生物必修2第二章第一节的内容。这部分内容不仅是第二章的重点内容，也是整本书的重点内容之一。它以学过的细胞学知识、染色体知识、有丝分裂知识、生殖类型知识为基础。通过学习，使学生全面认识细胞分裂的种类、实质和意义，为后面学习遗传和变异，生物的进化奠定细胞学基础。 二、教学目标 1、知识与技能： （1）阐明细胞的减数分裂过程，掌握减数分裂的概念。 （2）举例说明精子的形成过程。 （3）举例说明受精作用的概念、过程； （4）理解减数分裂和受精作用的意义。 2、过程与方法： 通过观察减数分裂过程中染色体的行为变化，培养学生识图、绘图能力以及比较分析和归纳总结的能力。 3、情感态度价值观： 通过学习减数分裂和受精作用的意义，加深对事物自身变化规律性的认识，培养对立统一和发展变化的观点。 三、教学重点、难点 1、教学重点： 减数分裂概念和过程。这是生殖细胞形成的基础，又是遗传和变异和细胞学基础。 2、教学难点： 同源染色体、四分体的概念以及染色体行为的变化规律，其中染色体行为的变化规律既是难点又是重点。初学者对此缺乏感性认识，较难抓住本质。 四、学情分析 高一级学生，生物基础较薄弱，课文阅读和读图分析能力较低，减数分裂是有丝分裂的延续，学生对有丝分裂中染色体行为和数目的变化已有一定知识基础以此作为新知识的桥梁，让学生从感性认识的基础上抓住减数分裂的本质，通过图像分析、推理、归纳总结等，教师适时地引导学生思考，指导学生进行总结和评价。 五、教材处理 根据教材的重难点、学生的实际情况以及多媒体课件传递信息量有的特点，这部分内容我安排1个课时学习减数分裂概念和精子的形成过程。 这里主要说明第一课时的教学方法和教学过程。 六、教学方法设计 利用多媒体课件，创设形象生动的教学氛围，同时应用讲述法、谈话法、比较法、指导读书法等，引导学生思考一系列问题，使他们积极主动参与到教学中，在获取知识的同时，培养学生观察、比较和总结的能力。在获取知 识的同时，培养学生观察、比较和总结的能力。
减数分裂和受精作用知识点
第1节减数分裂和受精作用一、减数分裂的概念 减数分裂(meiosis) 是进行有性生殖的生物形成生殖细胞过程中所特有的细胞分裂方式。在减数分裂过程中，染色体只复制一次，而细 胞连续分裂两次，新产生的生殖细胞中的染色体数目比体细胞减少一半。（注：体细胞主要通过有丝分裂产生，有丝分裂过程中，染色体复制一次，细胞分裂一次，新产生的细胞中的染色体数目与体细胞相同。） 二、减数分裂的过程 1、精子的形成过程（图1）：精巢（哺乳动物称睾丸） （图1）（图2） 减数第一次分裂（有同源染色体 ．．．．．．）： 间期：染色体复制(包括DNA复制和有关蛋白质的合成)。 前期：同源染色体两两配对（称联会），形成四分体。四分体中非姐妹染色单体之间常常发生对等片段的交叉互换。 中期：同源染色体成对排列在赤道板上（上下两侧）。 后期：同源染色体分离；非同源染色体自由组合。 末期：细胞质分裂，形成2个子细胞。 减数第二次分裂（无同源染色体 ．．．．．．）： 前期：染色体排列散乱分布。 中期：每条染色体的着丝点都排列在细胞中央的赤道板上。 后期：姐妹染色单体分开，成为两条子染色体。并分别移向细胞两极。 末期：细胞质分裂，每个细胞形成2个子细胞，最终共形成4个子细胞。 2、卵细胞的形成过程（图2）：卵巢 三、精子与卵细胞的形成过程的比较 精子的形成卵细胞的形成 不 同 点 形成部位精巢（哺乳动物称睾丸）卵巢 过程有变形期无变形期 子细胞数 细胞质的分配 一个精原细胞形成4个精子 均等分配 一个卵原细胞形成1个卵细胞+3个极体 不均等分配 相同点精子和卵细胞中染色体数目都是体细胞的一半 特点：受精作用是精子和卵细胞相互识别、融合成为受精卵的过程。精子的头部进入卵细胞，尾部留在外面，不久精子的细胞核就和卵细胞的细胞核融合，使受精卵中染色体的数目又恢复到体细胞的数目，其中有一半来自精子，另一半来自卵细胞。 意义：减数分裂和受精作用对于维持生物前后代体细胞中染色体数目的恒定，对于生物的遗传和变异具有重要的作用。 五、注意：（1）同源染色体①形态、大小基本相同；②一条来自父方，一条来自母方。功能： （2）精原细胞和卵原细胞的染色体数目与体细胞相同。因此，它们属于体细胞，通过有丝分裂的方式增殖，但它们又可以进行减数分裂形成生殖细胞。 （3）减数分裂过程中染色体数目减半发生在减数第一次分裂 ．．．．．．．，原因是同源染色体分离并进入不同的子细胞 ．．．．．．．．．．．．．．．．。所以减数 第二次分裂过程中无同源染色体 ．．．．．．。 （4）减数分裂形成子细胞种类： 假设某生物的体细胞中含n对同源染色体，则：它的精（卵）原细胞进行减数分裂可形成2n种精子（卵细胞）；它的1个精原细胞进行减数分裂形成2种精子。它的1个卵原细胞进行减数分裂形成1种卵细胞。 辨析：含有n对同源染色体的一个精母细胞经减数分裂产生2种类型配子，含有n对同源染色体的体细胞经减数分裂产生2n种类型配子。 （5）减数分裂过程中染色体和DNA的变化规律
2020年高考生物二轮专项提升专题5-2 细胞增殖和受精作用(综合提升卷)(含解析)
专题5.2 细胞增殖和受精作用综合提升卷 1.(2019黑龙江双鸭山模拟)细胞增殖严格有序地进行与细胞内的周期蛋白依赖性激酶(简称CDK)密切相关,CDK的活性受周期蛋白(简称cyclin)的调节。CDK在连续分裂的细胞中一直存在,cyclin的含量在细胞周期中呈现有规律的变化,细胞分裂间期积累,分裂期消失。下图表示cyclinB与CDK1活性调节的过程。下列叙述正确的是() A.cyclinB在G2期开始合成 B.CDK1可能具有促进染色质凝缩的作用 C.CDK1持续保持较高活性的细胞,细胞周期会缩短 D.CDK1的活性下降是cyclinB在M期不能合成所致 【答案】B 【解析】cyclinB在S期开始合成,A项错误;CDK1活性在S期开始升高,在G2期后达到最大值,此时正是染色质形成染色体的时期,因此CDK1可能具有促进染色质凝缩的作用,B项正确;CDK1持续保持较高活性的细胞,细胞周期可能会一直处于分裂期,C项错误;CDK1活性下降是因为cyclinB在M期含量逐渐减少,D项错误。 2.(2019山东烟台一模)核DNA被32P标记的精子与未被标记的卵细胞受精后,在不含放射性标记的培养基中连续分裂2次。下列分析正确的是() A.放射性细胞数量与所有细胞数量之比逐代减少 B.放射性DNA分子数与所有细胞总DNA分子数之比逐代减少 C.可以确定含有放射性的细胞数,因为分裂后期姐妹染色单体均分到两极 D.无法确定含有放射性的细胞数,因为分裂后期非同源染色体自由组合 【答案】B 【解析】由于分裂后期分开的姐妹染色单体移向哪一极是随机的,因此在受精卵的前期分裂过程中,带有放射性的细胞比例不一定会逐代减少,A项错误;由于DNA复制方式为半保留复制,因此放射性DNA分子数与所有细胞总DNA分子数之比将逐代减少,B项正确;不能确定含有放射性的细胞数,因为分裂后期分开的姐妹染色单体移向哪一极是随机的,C项错误;受精卵进行的是有丝分裂,不会发生非同源染色体的自由组合,D项错误。