柴胡中柴胡皂苷a提取条件探讨

朱兰1，黄东萍1，宋英2

1成都中医药大学药学院，四川成都 （610075）

2成都中医药大学附属医院，四川成都（610072）

E-mail：zhuzhu3227◎

摘要：目的：考察柴胡中柴胡皂苷a提取率的影响因素。方法：考察提取溶媒，提取时间，粉碎程度等对柴胡皂苷a提取率的影响。结果：提取溶媒的影响最大。结论：柴胡皂苷a结构中的氧环易断裂，但采用碱醇提取能抑止其断裂，提取率高。

关键词：柴胡 柴胡皂苷a 提取

中图分类号：R28

1.引言

柴胡为伞形科植物柴胡(Bupleurum chinense DC.)和狭叶柴胡(B.scorzonerifoliunz Willd.)干燥根，具有疏散退热，疏肝解郁，升阳举陷之功效。柴胡皂苷a、d被认为是柴胡的主要药效成分，对整个药物的疗效起着举足轻重的作用。所以，在含有柴胡制剂的工艺研究过程中，应该以柴胡皂苷的含量为指标，找出影响其提取率的主要因素，确保制剂疗效，提高药材的利用度。

柴胡皂苷a、d具有13，28－氧环的结构，氧环不稳定，在酸的作用下醚键可能会断裂生成人工产物异环或同环双烯结构。所以，在柴胡皂苷a、d在提取过程中，受植物体内酸性成分的影响，转变为柴胡皂苷b1、b2[1]。又有人认为加热提取时间对柴胡皂苷a的含量影响较大，水提加热提取8h柴胡皂甙A已损失殆尽[2]。故笔者针对这些因素，对柴胡的提取工艺进行了考察。

2.材料和仪器

2.1试药与试剂

乙腈（色谱纯），甲醇（色谱纯），重蒸馏水，其余试剂均为分析纯。柴胡皂苷a对照品，纯度>98％，由江西本草天工科技有限责任公司提供。

2.2 仪器

HP1100型高效液相色谱仪(美国惠普公司)，二极管阵列检测器。

3.柴胡皂苷a的含量测定

3.1色谱条件

色谱柱，Diamond C18柱(5μm,4.6×250mm)流动相：乙腈：水：甲醇（40：45：15），流速

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图1 柴胡皂苷a对照品（A）、柴胡药材样品（B）

3.2标准曲线及线性范围

准确称取柴胡皂a标准品约5mg.分别置于10m1容量瓶中.用甲醇溶解后稀释至刻度。混匀后分别进样2u1、5u1、10u1、15u1、20u1，按上述色谱条件作HPLC分析。以对照品含量对峰面积积分值作图，得到一条直线。结果表明，1.10 ~10.96µg范围内，线形关系良好，回归方程为：3.4215×105＋2.0532×106（r＝0.9999）。

4提取条件探讨

4.1提取溶剂的考察

称取柴胡粗粉3份（每份20g），分别以水、70％乙醇、70％乙醇（1‰Na2CO3）回流提取2次，每次1.5h，滤过，合并滤液。取上述滤液各10ml，60～70℃水浴挥干溶剂，残渣加甲醇溶解并定容到5ml。临用前过0. 45 µm滤膜，作供试品溶液，测定柴胡皂苷a，计算提取率，见表1。结果表明加了1‰Na2CO3的70％乙醇溶液提取率最高。

表1不同溶媒提取柴胡皂苷a的提取率

提取溶剂水 70％乙醇

70％乙醇（1‰Na2CO3）

柴胡皂苷Amg.g-1 2.99 5.38 7.31 4.2粉碎与否的考察

称取柴胡饮片和粗粉各20g，加入70％乙醇（1‰Na2CO3）回流提取2次，每次1.5小

时h，滤过，合并滤液。取滤液各10ml，60～70℃水浴挥干溶剂，残渣加甲醇溶解并定容

到5ml。临用前过0. 45 µm滤膜，作供试品溶液，测定柴胡皂苷a，计算提取率，见表2。

结果表明柴胡粉碎成粗颗粒后提取率高。

表2不同药材形式柴胡皂苷a的提取率

药材形式饮片粗粉

柴胡皂苷Amg.g-1 2.98 7.31

4.3提取时间的考察

称取柴胡粗粉4份（每份20g），加70％乙醇（1‰Na2CO3）分别提取2小时、3小时、

4小时、6小时。滤过，合并滤液。取上述滤液各10ml，60～70℃水浴挥干溶剂，残渣加甲

醇溶解并定容到5ml。临用前过0. 45 µm滤膜，作供试品溶液，测定柴胡皂苷a，计算提取

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表3不同提取时间柴胡皂苷a的提取率

提取时间2小时3小时4小时6小时

提取率mg/g 6.65 6.23 5.78 5.04

5结论

柴胡采用碱醇的提取率明显高于醇提和水提，且粉碎后能够大大的增加提取率。加热对柴胡皂苷有一定的影响，在本实验中加了碱提的条件下，损失的比文献报道的小的多，故认为对柴胡皂苷a提取率影响最大的是PH值，并不是加热时间。

6讨论

6.1在柴胡皂苷HPLC含量测定流动相的选择中，我们首先选择的是资料中常用的方法，乙腈：水（40：60）[3]。在柴胡的提取溶媒为甲醇时，柴胡皂苷a与其他峰分离度好，但以乙醇溶液或水为提取溶媒时则不能与其他峰分开，经过几番实验，最后选定乙腈：水：甲醇（40：45：15），柴胡皂苷a的峰与其他峰有良好的分离。

6.2柴胡皂苷a、c、d由于有13，28－氧环的结构，在酸性条件下容易出现如下反应：

故在提取过程中，加少量的碱能够中和柴胡中的一些酸性成分，增加此类柴胡皂苷的提取率。据文献道醚键断裂后得到的次生皂苷并不具有原皂苷的一些药理作用[4]，但加碱后是否影响了其他有效成分的提取，提取物是否能保证柴胡的药效，仍然需要药效学实验来证明。6.3实验过程中，我们使用了甲醇为提取溶媒提取柴胡皂苷a，提取效率为4.8mg/g左右，较乙醇提取率低得多，其原因可能是：甲氧基较乙氧基亲核性强，故较易发生如下反应：

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6.4自古以来，临床上多以其不同炮制品入药应用。2005版中国药典柴胡项下收载了生柴胡和醋柴胡。柴胡生品升散作用较强，多用于解表退热：醋炙品其升散之性缓和，疏肝止痛的作用增强。多用于肝郁气滞的胁肋胀痈，腹痛及月经不调等症。如治疗肝气郁结的柴胡疏肝散，治肝郁血虚，月经不调的消遥散[5]。由于柴胡皂苷a等的不稳定性，醋炙以后柴胡皂苷a的含量降低，在此类制剂中，如果仍然采用柴胡皂苷a为工艺控制和质量标准指标，难免有些矛盾。

参考文献

[1] 宋晓凯主编.天然药物化学［M］.北京：化学工业出版社，2004：182;

[2] 张玲时延增徐新刚等. 加热提取时间对柴胡皂甙A含量的影响［J］.中草药，1997，28（4）：212～

214;

[3] 于健东，杨青，王钢力等. HPLC法测定柴胡中柴胡皂苷的含量及皂苷类成分指纹图谱初步研究［J］. 中

国中医药信息杂志.2004，11（2）：137～138;

[4] 杨秀伟主编.中药成分代谢分析［M］.北京：中国医药科技出版社，2009：416；

[5] 龚千锋主编.中药炮制学［M］.北京：中国中医药出版社，2002：199;

Studies on extraction Influence factor of Saikosaponin a

from Bupleurum Chinese

ZHU Lan 1，HUANG Dongping1，SONG Ying 2

1.Chengdu University of T.C.M, Chendu 610072,Sichuan province, China

2.Affiliated Hospital of Chendu University of T.C.M,Chendu 610072,Sichuan province, China

Abstract

OBJECTIVE:To study extraction Influence factor of Saikosaponin a from Bupleurum Chinese.METHODS: The effect of extraction menstruum，extraction time，comminution on Saikosaponin a 's extraction is Studied ed .RESULTS: Extraction menstruum is the biggest Influence factor. CONCLUSION : Saikosaponin a has weak chemic configuration, Use alkali ethanol to extract Saikosaponin a can prevent it's translation.

Keywords: Bupleurum Chinese; Saikosaponin a; extraction.

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