几种杀菌剂对马铃薯疮痂病菌的室内毒力_张笑宇

第30卷　第4期2009年12月内蒙古农业大学学报

Journal of I nner Mongolia Agricultural University

Vol.30　No.4

Dec.2009

几种杀菌剂对马铃薯疮痂病菌的室内毒力3

张笑宇,　胡　俊3,　安智慧

(内蒙古农业大学农学院,呼和浩特　010019)

摘要:　采用纸碟法进行室内毒力测定,比较了12种(商品名)杀菌剂对马铃薯疮痂病菌的抑制效果。其中5种杀菌剂有一定效果,25%比佳可湿性粉剂效果最好,其次是53.8%氢氧化铜干悬浮剂(可杀得2000),15%细菌先锋可湿性粉剂、72%农用链霉素可溶性粉剂、30%蓝金可湿性粉剂抑制效果较差。通过显微观察被杀菌剂抑制的马铃薯疮痂病菌形态变化发现,25%比佳可湿性粉剂能使病原菌孢子变形,可杀得2000使病原菌气生菌丝断裂,扭曲变形。

关键词:　马铃薯疮痂病菌;　杀菌剂;　毒力

中图分类号:　S435.32 文献标识码:　A 文章编号:1009-3575(2009)04-0047-04

COMPAR I SON T O V IRULENCE O F SEVERAL

BACTER I C I D ES ON I NH I B I TI NG STREPT OM YCES SPP.

IN P OT AT O IN ROO M EXPER I ME NT

Z HANG Xiao-yu,　HU Jun3,　AN Zhi-hui

(A grono m y College of,InnerM ongolia A gricultural U niversity,Huhhot010019,China)

Ab s tra c t:　It was compared that the inhibiti on of12bactericides t o S trepto m yces s pp.in potat o by paper p late method in r oom experi2 ment.Among5effective bactericides,the highest inhibiti on t o the pathogen was caused by25%B ijia wettable powder,the second was Kocide2000.15%Bacteria vanguard wettable powder,72%Agricultural strep t omycin s oluble powder and30%Lanjin wettable powder was bad in inhibiting the pathogen.Observing with m icr oscope showed that the s pores of pathogen was defor med after used25%bijia wp,mycelial was t w isted,inflated and defor med after used Kocide2000.

Key wo rd s:　S trepto m yces s pp.in potat o;Bactericides;V irulence

马铃薯疮痂病是由植物病原链霉菌(S trepto m y2 ces scabies,S trepto m yces acidiscabies及S trepto m yces tur2 gidiscabies等)引起的1种病害[1],是1种世界性病害,在北美,亚洲,欧洲各国均有疮痂病危害的报道[2～5]。此病在我国马铃薯主产区也普遍存在,尤其生产脱毒微型种薯过程中对栽培基质重复使用时薯块发病较为普遍,发病率达30%～60%[6],有的地区高达90%[7],严重影响微型种薯的质量和销售,威胁微型种薯的生产。有的大田地块发病率也高达33%左右[8]。内蒙古是我国马铃薯主产区,近几年马铃薯播种面积逐年增加,2008年突破67.2万h m2,跃居全区各种农作物播种面积的第2位,已经逐步成为内蒙古农业的重要支柱产业[9],但是由于近几年连年干旱,马铃薯连作,偏碱性土壤,使马铃薯疮痂病发生较为严重,在四子王旗、武川县和呼市郊区发病率为10%～50%左右,而且有逐年加重的趋势,已经成为生产上的主要病害。

目前对于马铃薯疮痂病的防治主要采取轮作、改良土壤以及选用健康抗病品种等措施,这些措施又往往受到条件的限制,因此选择新的防治方法已成为亟待解决的问题。药剂防治方法简单快捷,但是目前关于此病药剂防治的研究尚少,田间试验的几种药剂都不能从根本上控制此病[7,10～12]。因此有必要筛选防治马铃薯疮痂病的高效、低毒、低残留的化学药剂,为此笔者进行了12种(包括同种不同厂家或不同批次)杀菌剂对马铃薯疮痂病菌的室内毒力测定,试筛选出最佳防治药剂及其使用浓度,为生产用药提供依据。

3收稿日期:　2009-10-28

作者简介:　张笑宇(1974-),女,讲师,博士研究生,主要从事植物病理学研究.

3通讯作者:　E mail:hujun6202@126.co m

1　材料和方法

1.1　供试菌种

马铃薯疮痂病菌(S trepto m yces s pp.):从呼和浩特市武川县取马铃薯病薯分离得到的马铃薯疮痂病病菌,经致病性测定,保存于内蒙古农业大学植物病理实验室。

1.2　供试培养基

燕麦琼脂培养基(OMA):燕麦粉20g,琼脂10 g,燕麦粉加入水中煮成稀粥,经3层纱布过滤趁热补水至1000m l,再加入琼脂溶化,pH7.2,121℃高温灭菌20m in。

1.3　供试药剂

15%细菌先锋超微可湿性粉剂(山东省植物保护总站服务部)

53.8%氢氧化铜干悬浮剂(可杀得2000)(美国固信公司)

72%农用链霉素可溶性粉剂(石家庄通泰生化总厂)

4%春雷霉素可湿性粉剂(延边春雷生物药业有限公司)

60%真菌细菌一遍净可湿性粉剂(广东海南市里水化工有限公司)

25%比佳可湿性粉剂(威海韩孚生化有限公司)

30%条斑角斑细菌净可湿性粉剂(黑龙江省齐齐哈尔丰华工厂)

20%比森可湿性粉剂(北京威而廉生物科技有限公司)

72%链霉素可溶性粉剂(细菌特克)(成都普惠生物工程有限公司)

30%琥胶肥酸铜可湿性粉剂(蓝金)(江阴市利港化工厂)

30%硝基腐植酸铜可湿性粉剂(菌必克)(齐齐哈尔市华丰化工厂)

20%噻枯唑可湿性粉剂(猛克菌)(禾益农化有限公司)

注:括号内为生产厂家,药剂是未超过使用期的,使用说明中标有对细菌病害有效的不同批次、不同厂家的药剂。

1.4　测定方法

1.4.1　药剂抑菌效果的测定　采用纸碟法测定。将供试菌株在OMA斜面上28℃培养10d,用无菌水配成浓度为108～109cfu/mL的菌悬液,取0.1m l均匀涂抹在燕麦琼脂培养基平板上。用无菌水将供试药剂分别配成300倍、500倍、700倍、900倍、1100倍5种浓度,用移液器取20μl滴于直径5.0mm的无菌滤纸片上,使滤纸片完全浸湿,置于涂有病原菌的平板中央,每皿1片。在28℃培养5d后,用十字交叉法测量抑菌圈的直径。以药剂浓度的对数为自变量,抑菌圈的平均直径为因变量,求出毒力回归方程,并以使抑菌圈直径达到一定值(本文以5mm为基准)时的药剂有效浓度进行毒力比较。每个处理重复3次,以无菌水为对照。

1.4.2　杀菌剂对马铃薯疮痂病菌抑制作用的显微观察　采用插片法测定。将供试菌株在OMA斜面上28℃培养10d,用无菌水配成浓度为108cfu/mL～109cfu/mL的菌悬液,取0.1m l均匀涂抹在燕麦琼脂培养基平板上。用无菌水将25%比佳可湿性粉剂和可杀得2000配成300倍液,用移液器取20μl滴于直径5.0mm的无菌滤纸片上,使滤纸片完全浸湿,置于涂有病原菌的平板中央,每皿1片。在距离滤纸片2mm处插入多个灭菌的盖玻片,将盖玻片以45°插入培养基中,盖玻片插入深度为1/2或1/3,于28℃培养2d后,菌丝生长在培养基及盖玻片上,小心用镊子将盖玻片取出,擦去较差一面的菌丝体,用结晶紫染色,放在载玻片上(菌丝体覆盖在载玻片上,不能滑动),在显微镜下观察病原菌生长情况,连续观察7d。

2　结果分析

2.1　不同杀菌剂对马铃薯疮痂病菌的抑制作用

通过室内毒力测定,供试杀菌剂12种中有5种对马铃薯疮痂病菌有抑制作用,其他7种无抑制作用,结果见表1。由表1可见,25%比佳可湿性粉剂、15%细菌先锋可湿性粉剂、可杀得2000、72%农用链霉素可溶性粉剂、蓝金5种杀菌剂对马铃薯疮痂病菌有抑制作用,其中25%比佳可湿性粉剂抑制效果最好,稀释700倍,有效成分浓度为768.6μg/ mL时,抑菌圈直径达12.16mm,当抑菌圈直径达5 mm时,所需有效成分的浓度为113.8μg/mL。

2.2　杀菌剂对马铃薯疮痂病菌抑制作用的显微

观察

显微镜下观察被两种杀菌剂25%比佳可湿性粉剂和可杀得2000抑制的马铃薯疮痂病菌的形态特征。结果见图,从图1、图2可见,可杀得2000处理后马铃薯疮痂病菌的气生菌丝扭曲变形,有很多断裂,有的菌丝变粗;从图2可见,25%比佳可湿性粉剂处理后分生孢子形状发生变化,变长变粗。

84内蒙古农业大学学报 2009年