《生物显微技术》教学大纲

《生物显微技术》教学大纲

Biological Microscope

课程编码：27A11701 学分： 2.5 课程类别：专业任选课

计划学时：56 其中讲课：24 实验：32

适用专业：生物技术

推荐教材：王庆亚，《生物显微技术》，中国农业出版社，2010。

参考书目： 1. 康莲娣，《生物电子显微技术》，中国科学技术大学出版社，2003。

2. 杨星宇，《生物科学显微技术》，华中科技大学出版社，2010。

3. 张耘生，陈铭德，杨克合《生物学技术［M］》，高等教育出版社，1994。

4. 黄承芬，《生物显微制片技术》，北京科学技术出版1991。

5. 郑国昌，《生物显微技术［M］》，人民教育出版社，1978。

课程的教学目的与任务

生物制片技术已经成为研究生物组织和细胞结构的一种重要方法，是从事生物、农、林、牧、医科研人员应掌握的一项基本技能。在大学和中学，学生学习生物时，也常用生物制片技术和生物玻片标本。因而生物制片技术在教学和科研领域被广泛使用。通过本课程的学习，使学生了解生物制片技术的一般原理和程序，知道制片方法的分类，掌握生物制片技术的方法。综合运用所学知识、分析和解决今后学习、实验过程中遇到的多种问题。

课程的基本要求

本课程以动物显微制片技术为主，重点讲授常用的动物显微制片的方法和步骤（以石蜡切片为主），使学生具体掌握临时装片法、整体封固法、离析法、压片法、徒手切片法、石蜡切片法等动物制片的方法和步骤；能正确使用实验室常用的几种光学显微镜，对相关实验结果进行观察、分析；让学生了解激光共聚焦显微镜及其它特殊显微镜的基本知识；为学生今后从事相关工作奠定技术基础。

各章节授课内容、教学方法及学时分配建议（含课内实验）

第一章：概论建议学时：2 [教学目的与要求] 通过本章教学使学生了解：生物显微技术的内容、应用、发展史。

[教学重点与难点] 生物显微技术的内容。

[授课方法] 以课堂讲授为主，课堂讨论和课下自学为辅。

[授课内容]

§1.1 制片的目的和任务

§1.2 制片技术的发展概况

§1.3 生物制片的分类。

第二章：生物显微镜建议学时：2 [教学目的与要求] 通过本章教学使学生掌握使用光学显微镜的成像原理、基本结构。全面了解光学显微镜在生命科学中的应用。能够正确的对显微镜进行操作。

[教学重点与难点] 重点：各种光学显微镜的成像原理、基本结构。难点：各种光学显微镜的规范使用。

[授课方法] 以课堂讲授为主，课堂讨论和课下自学为辅。

[授课内容]

§2.1 显微镜的发展简史与部件

§2.2 显微镜的安装与使用

§2.3 倒置显微镜、荧光显微镜、相差显微镜、暗视野显微镜、荧光显微镜、激光共聚焦显微镜的成像原理、性能、使用方法。

第三章：生物制片的基本原理建议学时：4 [教学目的与要求] 通过本章学习，使学生掌握显微制片技术的基本原理，掌握操作中的注意事项和要点。

[教学重点与难点] 生物制片中各操作的原理。

[授课方法] 以课堂讲授为主，课堂讨论和课下自学为辅。

[授课内容]

§3.1 标本的选择：1.标本选择的原则；2.材料的分割

§3.2 材料固定：1.固定的目的；2.理想固定剂应具备的条件；3.常用固定剂的种类和性能四.固定材料时应注意的事项

§3.3 材料的冲洗与保存：1.冲洗目的及冲洗剂的选择；2.冲洗方法；3.材料保存

§3.4 材料脱水：1.脱水的目的；2.脱水剂及脱水方法

§ 3.5 染色：1.染色的目的；2.染料的分类；3.染色原理；4.制片中常用的染料；5.常用染色液的配方及其染色方法

§ 3.6 透明：1.透明的目的；2.透明剂的种类和透明方法

§ 3.7 封藏：1.封藏的目的；2.封藏剂；3.封藏方法及注意事项。

第四章：常用生物制片的基本方法建议学时：4 [教学目的与要求] 通过本章学习，了解显微制片的分类。掌握各种切片制片技术。

[教学重点与难点] 重点：生物制片的分类，各种制片方法的原理，优缺点。难点：石蜡切片制作的一般方法和步骤，及制作过程注意事项。

[授课方法] 以课堂讲授为主，课堂讨论和课下自学为辅。

[授课内容]

§4.1 非切片法

临时装片法：1.临时装片制作的一般方法和步骤；2.临时装片制作实例

整体封固法：1.整体封片制作的一般方法和步骤；2.整体封片制作实例

离析法：1.离析装片制作的一般方法和步骤；2.离析装片制作实例

压片法：1.压片法的一般方法和步骤；2.几种常用的压片方法及实例。

§4.2 切片法

徒手切片法：1.徒手切片制作的一般方法和步骤；2.徒手切片制作实例

石蜡切片法：1.石蜡切片机（转动切片机）的构造和使用；2.石蜡切片制作的一般方法和步骤：取材、固定、冲洗、脱水、透明、渗蜡、包埋、切片、粘片、脱蜡、染色、透明和封藏。

第五章：电子显微技术建议学时：4 [教学目的与要求] 通过本章教学使学生掌握使用电子显微镜及其制片的基本理论、基本知识和基本技术，以及电镜样品制备原理技术。

[教学重点与难点] 重点：电镜工作原理、成像原理及样品制备技术。难点：电镜样品制备技术。

[授课方法] 以课堂讲授为主，课堂讨论和课下自学为辅。

[授课内容]

§5.1 电子显微镜的基本结构与工作原理

透射电镜的成像原理、放大原理、结构

扫描电镜的工作原理

光镜、透射电镜、扫描电镜的异同

扫描电镜的结构、工作原理、放大原理

透射电镜照像应注意的问题。

§.2 电镜样品制备技术

电镜标本取样要求

透射电镜标本的制备

负染色原理及应用范围

冷冻蚀刻制样及应用范围

放射自显影技术及应用范围。

第六章：生物显微化学建议学时：4 [教学目的与要求] 掌握组织化学的基本概念，组织化学技术的基本要求。学习了解生物显微化学的研究内容、方法，掌握常见有机物、无机物的鉴定方法。

[教学重点与难点] 掌握高碘酸Schiff(PAS)反应、DNA和RNA的显示、碱性磷酸酶、酸性磷酸酶等的显示法。

[授课方法] 以课堂讲授为主，课堂讨论和课下自学为辅。

[授课内容]

§6.1

组织化学的定义、组织化学与细胞学、组织学和生物化学的关系、组织化学的基本原理

组织化学的发展简史

组织化学技术的基本要求。

§6.2

显示多糖的高碘酸Schiff(PAS)反应

显示DNA的福尔根反应，显示DNA和RNA的甲绿派若宁法

醛复红染色法