【学习课件】第十四章-长期毒性作用及其试验方法
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长期毒性作用及其试验方法演示文稿
☆在吸入给药时，猴是首先推荐的动物，因为它在 呼吸系统的解剖学和生理学方面比其它动物更接 近人类。
☆如研究计划生育用药，应选择猴或其他大动物。
Beagle犬：原产英国，纯种小猎兔犬 Beagle犬的特点：体型小,毛短,性情温和,亲人,抗病力强
缺点：价格昂贵
二、实验动物
2. 起始月(周)龄 一般选择较年轻的或正处于生长发育阶段的动物。
长期毒性作用及其试验方 法演示文稿
第一节 基本概念和目的 第二节 试验设计原则及方法
第一节
基本概念和目的
一、定义
长期毒性试验是指试验动物连续多日接触较大 剂量的药物所引起的中毒效应，为观察这种中毒效 应而设计的毒理学试验称之为长期(慢性)毒性试验。
急性毒性试验
是为观察和评价急性毒性的有害作用或中毒反应 而设计的一种毒理学试验。研究药物一次或24小 时内多次给予受试药物后，一定时间内所产生的 毒性反应。
一、一般原则和要求
总体原则 选用两种实验动物 三个剂量 给药途径应与临床拟用途径相同
一、一般原则和要求
总体原则 选用两种实验动物
至少在两种动物体上进行，兼顾雌雄性别。
一、一般原则和要求
总体原则
三个剂量
剂量至少分为高、中、低三个档次。 高剂量组应能充分反映药物的毒性， 低剂量组不出现毒性反应。 同时设一溶剂 ( 或赋形剂 ) 对照组或 已知药物毒性对照组。
第二节
试验设计原则及方法
一、一般原则和要求
基本原则 全面、严谨、合理 整体性 随机、对照、重复
一、一般原则和要求
基本原则 整体性
长期毒性试验不能与药效学、药代动 力性和其他毒理学研究割裂，试验设 计应充分考虑其他药理毒理研究的试 验设计和研究结果。长期毒性试验的 结果应该力求与其他药理毒理试验结 果互为印证、说明和补充。
☆如研究计划生育用药，应选择猴或其他大动物。
Beagle犬：原产英国，纯种小猎兔犬 Beagle犬的特点：体型小,毛短,性情温和,亲人,抗病力强
缺点：价格昂贵
二、实验动物
2. 起始月(周)龄 一般选择较年轻的或正处于生长发育阶段的动物。
长期毒性作用及其试验方 法演示文稿
第一节 基本概念和目的 第二节 试验设计原则及方法
第一节
基本概念和目的
一、定义
长期毒性试验是指试验动物连续多日接触较大 剂量的药物所引起的中毒效应，为观察这种中毒效 应而设计的毒理学试验称之为长期(慢性)毒性试验。
急性毒性试验
是为观察和评价急性毒性的有害作用或中毒反应 而设计的一种毒理学试验。研究药物一次或24小 时内多次给予受试药物后，一定时间内所产生的 毒性反应。
一、一般原则和要求
总体原则 选用两种实验动物 三个剂量 给药途径应与临床拟用途径相同
一、一般原则和要求
总体原则 选用两种实验动物
至少在两种动物体上进行，兼顾雌雄性别。
一、一般原则和要求
总体原则
三个剂量
剂量至少分为高、中、低三个档次。 高剂量组应能充分反映药物的毒性， 低剂量组不出现毒性反应。 同时设一溶剂 ( 或赋形剂 ) 对照组或 已知药物毒性对照组。
第二节
试验设计原则及方法
一、一般原则和要求
基本原则 全面、严谨、合理 整体性 随机、对照、重复
一、一般原则和要求
基本原则 整体性
长期毒性试验不能与药效学、药代动 力性和其他毒理学研究割裂，试验设 计应充分考虑其他药理毒理研究的试 验设计和研究结果。长期毒性试验的 结果应该力求与其他药理毒理试验结 果互为印证、说明和补充。
长期毒性作用及其试验方法
超过 90 天的试验 啮齿类动物每组至少 40 只（雌雄各 20 只）； 非啮齿类每组 8~10 只（雌雄各 4~5 只）。
2020/5/7
34
二、实验动物
3. 性别及数量
（2）数量
90 天以内的试验 啮齿类动物每组至少20只（雌雄各 10 只）；
《非啮指齿导类原每组则4》~6 ：只（一雌般雄大各鼠2~为3只雌）、；雄各30只，
环境因素
酮症酸中毒
室内温度 湿度 光照 通风条件 饮水质量
饲料或饲料配方
2020/5/7
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二、实验动物
4. 饲养管理
环境因素
酮症酸中毒
啮齿类动物
适宜温度室为内1温8~度27 ℃ 。 相对湿度为湿40%~7度0%。 光照宜持续光12 小时明照亮，12 小时黑暗。 通风条件良通好。风条件 所用饲料饮应符水合质动量物的营养标准。 雌饲雄动料物或应饲分料开配饲养方，每笼不宜超过 5只
一类新药：Beagle犬 二类新药：杂种狗
2020/5/7
23
二、实验动物
1.种类及品系
☆我国药政部门规定的基本原则是选用两种动物, 一 种为啮齿类，首选大白鼠；另一种为非啮齿类， 首选狗。
☆在吸入给药时，猴是首先推荐的动物，因为它在 呼吸系统的解剖学和生理学方面比其它动物更接 近人类。
☆如研究计划生育用药，应选择猴或其他大动物。
原因： 1 长期毒性试验的给药期限较长；
处于生长发育阶段的动物对药物 2 的毒性反应较敏感； 3 年龄较大的动物反应性降低, 存 3 在许多发性疾病干扰试验结果。
2020/5/7
29
二、实验动物
2. 起始月(周)龄
啮齿类动物最好在断奶后不久即开始给药
优选长期毒性作用及其试验方法
原因： 1 长期毒性试验的给药期限较长；
处于生长发育阶段的动物对药物 2 的毒性反应较敏感； 3 年龄较大的动物反应性降低, 存 3 在许多发性疾病干扰试验结果。
2020/9/27
29
二、实验动物
2. 起始月(周)龄
啮齿类动物最好在断奶后不久即开始给药
大鼠起始周龄要求在 6 ~8周龄； 如果试验周期超过3个月以上，则将起始周龄降至
2020/9/27
7
蓄积作用的表现形式
作用量积蓄 功能性蓄积
2020/9/27
8
长期毒性试验与急性毒性试验 的根本差别
1
给药的期限不同
2
给药的剂量范围不同
3
观察的毒效应不同
290/20/9/27
9
二、目的与意义
2020/9/27
10
长期毒性试验的目的
1 预测受试物可能引起的临床不良反应
2 判断受试物反复给药的毒性靶器官或组织
2020/9/27
4
长期毒性试验与急性毒性试验 的根本差别
1
给药的期限不同
2
3
250/20/9/27
5
长期毒性试验与急性毒性试验 的根本差别
1
给药的期限不同
2
给药的剂量范围不同
3
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6
蓄积作用 (accumulation action)
当较长时间连续、反复给药时，如果给药的时 间间隔和剂量超过机体消除药物的能力，就会出 现药物进入机体的速度 (或总量) ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ过排除的速度 (或总量) 的现象，此时药物就有可能在体内逐渐 增加并贮存起来，即蓄积作用。
2020/9/27
24
优选长期毒性作用及其试验方法
2
给药的剂量范围不同
3
260/20/10/6
6
蓄积作用 (accumulation action)
当较长时间连续、反复给药时，如果给药的时 间间隔和剂量超过机体消除药物的能力，就会出 现药物进入机体的速度 (或总量) 超过排除的速度 (或总量) 的现象，此时药物就有可能在体内逐渐 增加并贮存起来，即蓄积作用。
优选长期毒性作用及其试验方法
第一节 基本概念和目的 第二节 试验设计原则及方法
2020/10/6
2
第一节
基本概念和目的
2020/10/6
3
一、定义
长期毒性试验是指试验动物连续多日接触较大 剂量的药物所引起的中毒效应，为观察这种中毒效 应而设计的毒理学试验称之为长期(慢性)毒性试验。
急性毒性试验
一类新药：Beagle犬 二类新药：杂种狗
2020/10/6
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二、实验动物
1.种类及品系
☆我国药政部门规定的基本原则是选用两种动物, 一 种为啮齿类，首选大白鼠；另一种为非啮齿类， 首选狗。
☆在吸入给药时，猴是首先推荐的动物，因为它在 呼吸系统的解剖学和生理学方面比其它动物更接 近人类。
☆如研究计划生育用药，应选择猴或其他大动物。
3 推测临床试验的起始剂量和重复用药的安全剂量范围
4 提示临床试验中需重点监测的指标
5 为临床试验中的解毒或解救措施提供参考
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长期毒性试验的意义
了解实验动物能耐受的最大剂量，找出完
全无毒的安全界量，这个界量是判断一个待选 新药是否有进一步开发研究的价值以及能否过 渡到临床试用的重要依据，同时，也可为其它 毒性实验和临床初始剂量的选择提供依据。因 此长期毒性试验是临床前安全性评价的主要内 容，它与急性毒性试验、生殖毒性以及致癌性 等毒理学研究有着密切的联系，是新药报批临 床时重点审评项目之一，是药物从药学研究进 入临床试验的重要环节。
毒理学 长期毒性试验
蓄积毒性作用
药物进入机体后，经过生物转化以代谢产物或化学物原型排出体外。但是，当化学毒物
反复多次给动物染毒，化学毒物进入机体的速度(或总量)超过代谢转化的速度和排泄的速度
(或总量)时，化学毒物或其代谢产物就有可能在机体内逐渐增加并贮留，这种现象称为化学
毒物的蓄积作用 (accumulation) 。
三、长期毒性试验与急性毒性试验的根本差异
1.给药的期限不同
急性毒性试验为一次性给药或 24h 内多次给药。
长期毒性试验为连续多日接触一定剂量给药，给药期限可以从数天至终生甚至数代，一
般为临床用药的 3-4 倍。
表 3-1 常用实验动物的平均寿命及长期毒性试验给药期限
试验动物 平均寿命（年） 亚慢性试验给药期限（月） 慢性试验给药期限（月）
使用本方法时要注意染毒期间定期(每 4 天一次)给动物称重，按实测体重，调整化学毒 物的染毒绝对量。 3.剂量固定的 20 天蓄积法：
通常采用经口灌胃染毒方式，将动物随机分为 5 个组，包括阴性对照组和 1/20 LD50、 l/10 LD50、1/5 LD50 和 1/2 LD50 四个剂量组，每组动物数 10 只，雌雄各半。每日染毒一次， 连续染毒 20 天。观察每组雌雄合计的死亡动物数量。
①供试药物在体内的生物蓄积作用：测定有关的蓄积参数，有助于了解药物的蓄积性。 对于高蓄积性药物应适当减少剂量； ②供试药物是否有可能被特殊的酶所“解毒”或“活化增毒”，而这些酶又是否易被供 试药物本身所诱导或抑制。例如，某些药物如果抑制与其本身代谢或解毒有关的酶，则 该药物的给药剂量应酌情减少。 ③供试物在消化道中的稳定性，与胃肠道内容物有亲和性的药物，应酌情增加剂量。
功，是其它实验动物不可替代的。
长期毒性作用及其试验方法演示文稿
原因： 1 长期毒性试验的给药期限较长；
处于生长发育阶段的动物对药物 2 的毒性反应较敏感； 3 年龄较大的动物反应性降低, 存 3 在许多发性疾病干扰试验结果。
2020/11/26
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二、实验动物
2. 起始月(周)龄
啮齿类动物最好在断奶后不久即开始给药
大鼠起始周龄要求在 6 ~8周龄； 如果试验周期超过3个月以上，则将起始周龄降至
2020/11/26
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一、一般原则和要求
总体原则
给药途径应与临床拟用途径相同
口服给药大鼠一般常用灌胃，灌胃的容量为 每天1~2ml/100g，也可将受试药物混在饲料或水 中给予，但要保证每只动物按规定剂量在一定时 间内服入，静脉注射大鼠时可采用腹腔代替，各 剂量组采用等容量不等浓16
一、一般原则和要求
总体原则 选用两种实验动物 三个剂量 给药途径应与临床拟用途径相同
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一、一般原则和要求
总体原则 选用两种实验动物
至少在两种动物体上进行，兼顾雌雄性别。
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一、一般原则和要求
总体原则
三个剂量
剂量至少分为高、中、低三个档次。 高剂量组应能充分反映药物的毒性， 低剂量组不出现毒性反应。 同时设一溶剂 ( 或赋形剂 ) 对照组或 已知药物毒性对照组。
长期毒性作用及其试验方法演示 文稿
优选长期毒性作用及其试验方法
第一节 基本概念和目的 第二节 试验设计原则及方法
2020/11/26
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第一节
基本概念和目的
2020/11/26
4
一、定义
长期毒性试验是指试验动物连续多日接触较大 剂量的药物所引起的中毒效应，为观察这种中毒效 应而设计的毒理学试验称之为长期(慢性)毒性试验。
长期毒性--精品医学课件
长毒剂量设计方法（2）
MBS（Metabolic Body Size）推算 －以最大有效浓度为低剂量，中、高剂量分 别往上增加若干倍
拟用临床剂量ACD推算 - 低剂量为临床剂量10～20倍 - 中剂量为临床剂量30～50倍 - 高剂量为临床剂量50～100倍
长毒剂量设计方法（3）
LD50
1/10 1/50 1/100
1～3d
14d
1w
1m
4w
3m
≥1m
6m
duration ≥3m ad. 6 day weekly(mon. to sat. )
基本内容和要求 ---- 剂量及分组
三个给药组, 单位: mg(ml,IU) /kg 或 /m2 以不等浓度等容量给药 低剂量组--高于有效剂量，不出现毒性反应 中剂量组--产生轻微或中等度毒性反应 高剂量组--产生明显或严重的毒性反应，或个
长期毒性试验
长期毒性试验
反复多次给药于动物，观察药物对动物的 毒性反应，一般指连续给药14天以上
有些国家将长期毒性试验进一步分为 - 亚急性毒性试验（28d） - 亚慢性毒性试验（90d） - 慢性毒性试验（>6m）
目的意义
预测受试物可能引起的临床不良反应 判断反复给药的毒性靶器官 推测临床试验的起始剂量和重复用药的安全
预测新药可能的毒性反应
从新药药效作用或其他药理作用特点推测 根据新药的化学结构推测 从急性毒性试验和其他研究结果推测
基本内容和要求 ---- 检测时间
能反映动态变化 一般行为活动宜每天观察记录 食量宜每天称重 大鼠体重宜每天一次，按体重给药 大动物心电图用II导联，至少给药前、给药 期间、给药后及停药结束各测一次 发现有阳性指标应加大观察密度
关于一般药理急性毒性和长期毒性研课件
03
毒理研究的目的和 意义
为药物研发提供依据
在药物研发过程中，急性毒性研究是 初步评估药物安全性的重要步骤，可 以为后续的药物开发提供依据。
通过急性毒性研究，可以了解药物对 机体的影响程度，为药物剂量的选择 和临床试验的设计提供参考。
为药物安全性评价提供数据支持
长期毒性研究能够评估药物在长期使 用过程中对机体的影响，为药物安全 性评价提供数据支持。
细胞培养
利用细胞培养技术评估药物对细胞生长、增 殖和功能的影响。
临床试验
在人体上进行长期用药观察，评估药物在人 体内的长期安全性。
基因组学和蛋白质组学
利用基因组学和蛋白质组学技术，研究药物 对机体基因和蛋白质表达的影响。
长期毒性评价标准
毒性反应的可逆性
评估毒性反应是否可逆，以及 恢复的时间。
剂量-反应关系
发中的应用
新药临床前安全性评价
评估药物在动物体内的急性毒性
通过观察动物在短时间内接受大剂量药物后的反应，了解药物的毒性作用和致死剂量，为后续的安全 性评价提供依据。
检测药物对生殖和发育的影响
研究药物对动物生殖系统、胚胎和胎儿发育的影响，以评估药物在妊娠期和哺乳期使用的安全性。
药物再评价和新药注册
长期毒性研究
长期毒性定义
01
长期毒性是指药物在连续给药过 程中对机体产生的毒性作用，通 常在给药时间较长时出现，可能 涉及多个器官和系统。
02
长期毒性研究旨在评估药物在长 期使用过程中可能对机体产生的 潜在危害，为药物的安全性和有 效性提供科学依据。
长期毒性测试方法
动物实验
通过给动物连续用药一定时间，观察其毒性 反应，评估药物的长期安全性。
根据急性毒性测试结果，可以将化学物质分为不同的毒性 等级。例如，根据世界卫生组织的标准，可以将化学物质 分为剧毒、高毒、中等毒、低毒和微毒五个等级。
【学习课件】第十四章-长期毒性作用及其试验方法
2021/7/6
51
在选择适宜的剂量时还应考虑到： ①药物在体内的生物蓄积作用。对于高蓄 积性药物应适当减少其剂量，否那么在长期毒 性试验完毕时各剂量均有可能出现毒性作用； ②药物是否有可能被特殊的酶所“解毒〞或 “活化增毒〞，而这些酶又是否易被药物本身 所诱导或抑制。 ③药物在消化道中的稳定性。与胃肠道内容 物有亲和性的药物，那么应酌情增加剂量。
为说明毒性作用的量—效关系，在上述 两个剂量之间插入一个(或多个)中间剂 量。
2021/7/6
49
亚慢性毒性试验根底
最大剂量：选择90天试验中体重增长不到10%的剂量； 中剂量：1/4最大剂量； 低剂量：1/8最大剂量。
2021/7/6
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最高剂量组的根本要求
仅出现轻度毒性，不改变试验动物的正常寿命， 或至少在给药的前四分之一时间内不影响动物的体 质，外观无异常，可有血清酶活力的改变或轻度体重 增长抑制〔＜10%〕。
2021/7/6
46
我国药政部门关于一般药物重复给药毒性试验期限的规定
临床拟用 给药时间
﹤5天 ﹤2周
毒性试验期限
啮齿类动物
非啮齿类动物
2周
2周
1月
1月
2-4周
3月
3月
1-3月
﹥3月
6月 6月
6月 9月
2021/7/6
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我国药政部门关于一般药物重复给药毒性试验期限的规定
临床拟用 给药时间
﹤5天 ﹤2周
原因： 1 长期毒性试验的给药期限较长；
处于生长发育阶段的动物对药物 2 的毒性反应较敏感；
年龄较大的动物反应性降低, 存在 3 许多自发性疾病干扰试验结果。
2021/7/6
关于一般药理、急性毒性和长期毒性研ppt课件
指标包括一般指标、死亡、体重变化等
急性毒性试验
•观察时间及指标 记录所有死亡、临床症状，临床症状开始
的时间、严重程度、持续时间、是否可逆
对于所有的动物均应进行大体解剖
任何器官出现体积、颜色、纹理改变时，
均应记录并进行组织病理学检查
急性毒性试验
•数据分析及评价
判断每种反应的量效关系及随时间的变化 判断各种反应可能涉及的器官、组织或系统等，根据病理
其它研究
o
潜在的依赖性、免疫功能、内分泌功能
一般药理学
•核心组合试验 心血管、中枢神经系统、呼吸系统
o重视药品潜在的心室复极化延迟作用（QT间期
延长)的评价 : 抗精神病、抗组胺类、抗心率失 常类、消化系统药物、氟喹诺酮类药物
ICH：评价人用药品潜在致心室复极化延迟作用
（QT间期延长）的安全药理学研究（S7B）
o药物的安全性评价研究必须执行《药物非临床研究质量管理规范》
（GLP）
o为什么？规范，统一，真实、完全、可靠
属于安全性评价的范畴，原则上须执行GLP 核心组合实验应执行GLP 追加的或/和补充的安全药理学研究应尽可能的遵循GLP oQT间期试验
一般药理学
•2005年发布：
•《中药、天然药物一般药理学研究技术指导原则》
合理性”
急性毒性试验
•动物种属
啮齿类与非啮齿类对药物的敏感性明显不同 研究证实非啮齿类与人体的相关性一般更好
从代谢的角度考虑，非啮齿类可能为更敏感动物，且从反映
药品安全性特点角度考虑非啮齿类可能更敏感
国外在急性毒性试验前往往已完成了非啮齿类动物数日（3-
5日）重复给药的剂量探索试验。即已反映了非啮齿类的急 性毒性。而从我国实际情况来看，还有些差距
急性毒性试验
•观察时间及指标 记录所有死亡、临床症状，临床症状开始
的时间、严重程度、持续时间、是否可逆
对于所有的动物均应进行大体解剖
任何器官出现体积、颜色、纹理改变时，
均应记录并进行组织病理学检查
急性毒性试验
•数据分析及评价
判断每种反应的量效关系及随时间的变化 判断各种反应可能涉及的器官、组织或系统等，根据病理
其它研究
o
潜在的依赖性、免疫功能、内分泌功能
一般药理学
•核心组合试验 心血管、中枢神经系统、呼吸系统
o重视药品潜在的心室复极化延迟作用（QT间期
延长)的评价 : 抗精神病、抗组胺类、抗心率失 常类、消化系统药物、氟喹诺酮类药物
ICH：评价人用药品潜在致心室复极化延迟作用
（QT间期延长）的安全药理学研究（S7B）
o药物的安全性评价研究必须执行《药物非临床研究质量管理规范》
（GLP）
o为什么？规范，统一，真实、完全、可靠
属于安全性评价的范畴，原则上须执行GLP 核心组合实验应执行GLP 追加的或/和补充的安全药理学研究应尽可能的遵循GLP oQT间期试验
一般药理学
•2005年发布：
•《中药、天然药物一般药理学研究技术指导原则》
合理性”
急性毒性试验
•动物种属
啮齿类与非啮齿类对药物的敏感性明显不同 研究证实非啮齿类与人体的相关性一般更好
从代谢的角度考虑，非啮齿类可能为更敏感动物，且从反映
药品安全性特点角度考虑非啮齿类可能更敏感
国外在急性毒性试验前往往已完成了非啮齿类动物数日（3-
5日）重复给药的剂量探索试验。即已反映了非啮齿类的急 性毒性。而从我国实际情况来看，还有些差距
长期毒性作用及其试验方法 ppt课件
第十五章 长期毒性作用及其试验方法
long-term toxicity impact and test method
2020/8/18
1
第一节 基本概念和目的 第二节 试验设计原则及方法
2020/8/18
2
第一节
基本概念和目的
2020/8/18
3
一、定义
长期毒性试验是指试验动物连续多日接触较大 剂量的药物所引起的中毒效应，为观察这种中毒效 应而设计的毒理学试验称之为长期(慢性)毒性试验。
急性毒性试验
是为观察和评价急性毒性的有害作用或中毒反应 而设计的一种毒理学试验。研究药物一次或24小 时内多次给予受试药物后，一定时间内所产生的 毒性反应。
2020/8/18
4
长期毒性试验与急性毒性试验 的根本差别3
250/20/8/18
5
长期毒性试验与急性毒性试验 的根本差别
2020/8/18
12
第二节
试验设计原则及方法
2020/8/18
13
一、一般原则和要求
基本原则 全面、严谨、合理 整体性 随机、对照、重复
2020/8/18
14
一、一般原则和要求
基本原则 整体性
长期毒性试验不能与药效学、药代动 力性和其他毒理学研究割裂，试验设 计应充分考虑其他药理毒理研究的试 验设计和研究结果。长期毒性试验的 结果应该力求与其他药理毒理试验结 果互为印证、说明和补充。
原因： 1 长期毒性试验的给药期限较长；
处于生长发育阶段的动物对药物 2 的毒性反应较敏感； 3 年龄较大的动物反应性降低, 存 3 在许多发性疾病干扰试验结果。
2020/8/18
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二、实验动物
2. 起始月(周)龄
long-term toxicity impact and test method
2020/8/18
1
第一节 基本概念和目的 第二节 试验设计原则及方法
2020/8/18
2
第一节
基本概念和目的
2020/8/18
3
一、定义
长期毒性试验是指试验动物连续多日接触较大 剂量的药物所引起的中毒效应，为观察这种中毒效 应而设计的毒理学试验称之为长期(慢性)毒性试验。
急性毒性试验
是为观察和评价急性毒性的有害作用或中毒反应 而设计的一种毒理学试验。研究药物一次或24小 时内多次给予受试药物后，一定时间内所产生的 毒性反应。
2020/8/18
4
长期毒性试验与急性毒性试验 的根本差别3
250/20/8/18
5
长期毒性试验与急性毒性试验 的根本差别
2020/8/18
12
第二节
试验设计原则及方法
2020/8/18
13
一、一般原则和要求
基本原则 全面、严谨、合理 整体性 随机、对照、重复
2020/8/18
14
一、一般原则和要求
基本原则 整体性
长期毒性试验不能与药效学、药代动 力性和其他毒理学研究割裂，试验设 计应充分考虑其他药理毒理研究的试 验设计和研究结果。长期毒性试验的 结果应该力求与其他药理毒理试验结 果互为印证、说明和补充。
原因： 1 长期毒性试验的给药期限较长；
处于生长发育阶段的动物对药物 2 的毒性反应较敏感； 3 年龄较大的动物反应性降低, 存 3 在许多发性疾病干扰试验结果。
2020/8/18
29
二、实验动物
2. 起始月(周)龄
《长期毒性试验》课件
展望
• 长期毒性试验应该更好地结合现代科 技手段进行
• 研究方向要更加多样化，应用对象更 加广泛
• 应该探索和建立其他模式，以更全面， 直观，普遍地评估实验物质对健康的 影响
生理、生化和组织学指标的 检测
长期毒性试验中，需要对实验动物 大量检测并比对其生理、生化和组 织学指标的改变，如肝肾功能，血 液流变学，氧化应激水平等。
长期毒性试验的数据分析
线性剂量-反应模型
该模型可以对人体内长期接 触实验物质后的剂量和反应 之间的关系进行分析，并通 过相关曲线将剂量-反应关系 定量化，以为优化剂量和规 范使用提供依据。
长期毒性试验的应用和意义
1 推动药物研发
长期毒性试验可以有效推动新药研发，对待药物的剂量、安全性和合理用药等方面进行 评估，为临床疗效和治疗效果提供重要依据。
2 建立化学物品安全评价体系
长期毒性试验为有关部门和机构建立起一个完整的化学物品安全评价体系，于化学危害 性的评估和防控提供重要的参考与依据。
生态流行学分析
该类分析方法从人群的角度 去分析，通过对人群中存续 时间较长的疾病与实验物质 暴露的关系进行分析，以发 现相关规律与相应的救治与 预防的策略。
生物信学分析
通过获取实验样本内某些生 物学物质，如基因、蛋白质、 代谢物等的数据信息，进行 计算、处理，以期发现与实 验物质暴露相关的生物标记， 从而对实验物质进行安全评 估。
《长期毒性试验》PPT课件
欢迎大家来到《长期毒性试验》课程，本课程将为您全面解读长期毒性试验 的定义、目的、方法、数据分析、应用和意义。
长期毒性试验的定义
定义
长期毒性试验是评估、研究 某一化学物质、药物或其他 物质对人体或动物体内长期 使用后的影响的一种生物学 检测手段。
北京大学药物毒理学4药物毒理学-长期毒性试验课件
25倍最低不小于倍最低不小于2倍剂量范围研究rangefindingstudy剂量范围研究设计啮齿类组别剂量mgkg天或ppm动物数实验开始结束时实验室检查大体尸解组织病理学检查实验分组和剂量设计i最高剂量雌5雄5雌5雄5全部存活动物雌5雄5ii高剂量雌5雄5雌5雄5全部存活动物必要时iii中剂量雌5雄5雌5雄5全部存活动物必要时iv低剂量雌5雄5雌5雄5全部存活动物必要时v0溶剂对照雌5雄5雌5雄5全部存活动物雌5雄5剂量范围研究设计非啮齿类组别剂量mgkg天或ppm动物数实验开始试验前和结束时实验室检查大体尸解组织病理学检查i最高剂量雌1雄1雌1雄1全部存活动物雌1雄1实验分组和剂量设计ii高剂量雌1雄1雌1雄1全部存活动物雌1雄1iii中剂量雌1雄1雌1雄1全部存活动物雌1雄1iv低剂量雌1雄1雌1雄1全部存活动物雌1雄1v0溶剂对照雌1雄1雌1雄1全部存活动物雌1雄1给以受试物2周此为常见的和推荐最低的实验周期
北京大学药物毒理学4药物毒理学-长期毒性试验
6
一、实验动物选择和染毒期限 实验动物的选择
一般选择两种实验动物，一种为啮齿类动物， 另一种为非啮齿类动物。
常用的实验动物：大鼠、狗、猴
北京大学药物毒理学4药物毒理学-长期毒性试验
7
实验动物的选择
1-3个月毒性试验
年龄：大鼠80~100g（6-8 周龄） 狗 8~12月 小鼠10~15g
★ 研究受试药物长期损害的可逆性
★ 确定物种间的毒效应的差异，为将毒性研究结果外推到
人提供依据。
北京大学药物毒理学4药物毒理学-长期毒性试验
5
长期毒性试验方法
The Methods of Chronic Toxicity Study
❖ 实验动物的选择和染毒期限 ❖ 染毒途径 ❖ 试验分组和剂量设计 ❖ 观察指标
北京大学药物毒理学4药物毒理学-长期毒性试验
6
一、实验动物选择和染毒期限 实验动物的选择
一般选择两种实验动物，一种为啮齿类动物， 另一种为非啮齿类动物。
常用的实验动物：大鼠、狗、猴
北京大学药物毒理学4药物毒理学-长期毒性试验
7
实验动物的选择
1-3个月毒性试验
年龄：大鼠80~100g（6-8 周龄） 狗 8~12月 小鼠10~15g
★ 研究受试药物长期损害的可逆性
★ 确定物种间的毒效应的差异，为将毒性研究结果外推到
人提供依据。
北京大学药物毒理学4药物毒理学-长期毒性试验
5
长期毒性试验方法
The Methods of Chronic Toxicity Study
❖ 实验动物的选择和染毒期限 ❖ 染毒途径 ❖ 试验分组和剂量设计 ❖ 观察指标
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第十四章 长期毒性作用及其试验方法
long-term toxicity impact and test method
18.11.2020
.
1
第一节 基本概念和目的 第二节 试验设计原则及方法
18.11.2020
.
2
第一节
基本概念和目的
18.11.2020
.
3
一、定义
长期毒性作用是指药物以一定的等级剂量连续 多日给予受试动物所产生的有害作用。为观察这种 有害作用而设计的毒理学试验称之为长期毒性试验。
一类新药：Beagle犬 二类新药：杂种狗
18.11.2020
.
24
二、实验动物
1.种类及品系
☆我国药政部门规定的基本原则是选用两种动物, 一种为啮 齿类，首选大白鼠；另一种为非啮齿类，首选狗。
☆在吸入给药时，猴是首先推荐的动物，因为它在呼吸系统 的解剖学和生理学方面比其它动物更接近人类。
☆如研究计划生育用药，应选择猴或其他大动物。
.
22
二、实验动物
1.种类及品系
☆我国药政部门规定的基本原则是选用两种动物, 一种为啮 齿类，首选大白鼠；另一种为非啮齿类，首选狗。
Wistar大鼠 SD大鼠
18.11.2020
.
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二、实验动物
1.种类及品系
☆我国药政部门规定的基本原则是选用两种动物, 一种为啮 齿类，首选大白鼠；另一种为非啮齿类，首选狗。
.
9
长期毒性试验与急性毒性试验 的根本差别
1
给药的期限不同
2
给药的剂量范围不同
3
18.11.2020
观察的毒效应不同
.
10
急性毒性试验是以死亡为观察终点的质反应过程
长期毒性试验重点观察体重、血液生化等量反应
指标（量变→质变）
18.11.2020
.
11
二、目的与意义
18.11.2020
.
12
长期毒性试验的目的
18.11.2020
.
25
Beagle犬：原产英国，纯种小猎兔犬 Beagle犬的特点：体型小,毛短,性情温和,亲人,抗病力强
缺点：价格昂贵
18.11.2020
.
28
二、实验动物
2. 起始月(周)龄
一般选择较年轻的或正处于生长发育阶段的动物。
18.11.2020
.
29
二、实验动物
2. 起始月(周)龄
一般选择较年轻的或正处于生长发育阶段的动物。
原因： 1 长期毒性试验的给药期限较长；
2
处于生长发育阶段的动物对药物 的毒性反应较敏感；
年龄较大的动物反应性降低, 存在 3 许多自发性疾病干扰试验结果。
18.11.2020
.ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
30
二、实验动物
2. 起始月(周)龄 啮齿类动物最好在断奶后不久即开始给药
18.11.2020
.
急性毒性试验 是为观察和评价急性毒性的有害作用或中毒反应 而设计的一种毒理学试验。研究药物一次或24小时内 多次给予受试药物后，一定时间内所产生的毒性反应。
18.11.2020
.
4
长期毒性试验与急性毒性试验 的根本差别
1
给药的期限不同
2
3
18.11.2020
.
5
根据给药期限的长短，可分为：
亚慢性毒性试验——给药期限不超过90天
同时设一溶剂 ( 或赋形剂 ) 对照组或 已知药物毒性对照组。
18.11.2020
.
19
一、一般原则和要求
基本要求 给药途径应与临床拟用途径相同
口服给药大鼠一般常用灌胃，灌胃的容量为每天 1~2ml/100g，也可将受试药物混在饲料或水中给予， 但要保证每只动物按规定剂量在一定时间内服入。
静脉注射大鼠时可采用腹腔或皮下代替，各剂量 组采用等容量不等浓度给药。特殊情况另作说明。
当较长时间连续、反复给药时，或者说给药的时间 间隔和剂量超过机体消除药物的能力，就会出现药 物进入机体的速度 (或总量) 超过排除的速度 (或总 量) 的现象，此时药物就有可能在体内逐渐增加并贮 存起来，即蓄积作用。
18.11.2020
.
8
蓄积作用的表现形式
作用量积蓄 功能性蓄积
18.11.2020
18.11.2020
.
20
二、实验动物
理想动物的标准：
对受试物的生物转化与人体相近； 对受试物敏感； 已有大量历史对照数据。
18.11.2020
.
21
二、实验动物
1.种类及品系
☆我国药政部门规定的基本原则是选用两种动物, 一种为啮 齿类，首选大白鼠；另一种为非啮齿类，首选狗。
18.11.2020
基本要求 选 三 给用个药两 剂 途种 量 径实 应验 与动临物床拟用途径相同
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.
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一、一般原则和要求
基本要求 选用两种实验动物
至少在两种动物体上进行，兼顾雌雄性别。
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18
一、一般原则和要求
基本要求
三个剂量
剂量至少分为高、中、低三个档次。
高剂量组应能充分反映药物的毒性， 低剂量组不出现毒性反应。
18.11.2020
.
15
一、一般原则和要求
基本原则 整体性
长期毒性试验不能与药效学、药代动 力性和其他毒理学研究割裂，试验设 计应充分考虑其他药理毒理研究的试 验设计和研究结果。长期毒性试验的 结果应该力求与其他药理毒理试验结 果互为印证、说明和补充。
18.11.2020
.
16
一、一般原则和要求
1 预测受试物可能引起的临床不良反应
2 判断受试物反复给药的毒性靶器官或组织
3 推测临床试验的起始剂量和重复用药的安全剂量范围
4 提示临床试验中需重点监测的指标
5 为临床试验中的解毒或解救措施提供参考
18.11.2020
.
13
第二节
试验设计原则及方法
18.11.2020
.
14
一、一般原则和要求
基本原则 全面、严谨、合理 整体性 随机、对照、重复
大鼠起始周龄要求在 4~9周龄；
犬的起始月龄为4~9月龄，一般不超过 12 月 龄； 如选用杂种狗，起始年龄可稍大些。
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二、实验动物
2. 起始月(周)龄
起始体重应在体重均值± 20% 的范围内。
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.
32
二、实验动物
3. 性别及数量 （1）性别
☆ 一般来讲是兼用两种性别的动物，每个剂量组中 雌雄性别的动物数必须一致。
或不超过试验动物平均寿命的10%；
慢性毒性试验——给药期限超过90天
或超过试验动物平均寿命的10%；
终生毒性试验
数代毒性试验
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长期毒性试验与急性毒性试验 的根本差别
1
给药的期限不同
2
给药的剂量范围不同
3
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.
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蓄积作用 (accumulation action)
long-term toxicity impact and test method
18.11.2020
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1
第一节 基本概念和目的 第二节 试验设计原则及方法
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第一节
基本概念和目的
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一、定义
长期毒性作用是指药物以一定的等级剂量连续 多日给予受试动物所产生的有害作用。为观察这种 有害作用而设计的毒理学试验称之为长期毒性试验。
一类新药：Beagle犬 二类新药：杂种狗
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二、实验动物
1.种类及品系
☆我国药政部门规定的基本原则是选用两种动物, 一种为啮 齿类，首选大白鼠；另一种为非啮齿类，首选狗。
☆在吸入给药时，猴是首先推荐的动物，因为它在呼吸系统 的解剖学和生理学方面比其它动物更接近人类。
☆如研究计划生育用药，应选择猴或其他大动物。
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二、实验动物
1.种类及品系
☆我国药政部门规定的基本原则是选用两种动物, 一种为啮 齿类，首选大白鼠；另一种为非啮齿类，首选狗。
Wistar大鼠 SD大鼠
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二、实验动物
1.种类及品系
☆我国药政部门规定的基本原则是选用两种动物, 一种为啮 齿类，首选大白鼠；另一种为非啮齿类，首选狗。
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长期毒性试验与急性毒性试验 的根本差别
1
给药的期限不同
2
给药的剂量范围不同
3
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观察的毒效应不同
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急性毒性试验是以死亡为观察终点的质反应过程
长期毒性试验重点观察体重、血液生化等量反应
指标（量变→质变）
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二、目的与意义
18.11.2020
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长期毒性试验的目的
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Beagle犬：原产英国，纯种小猎兔犬 Beagle犬的特点：体型小,毛短,性情温和,亲人,抗病力强
缺点：价格昂贵
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二、实验动物
2. 起始月(周)龄
一般选择较年轻的或正处于生长发育阶段的动物。
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二、实验动物
2. 起始月(周)龄
一般选择较年轻的或正处于生长发育阶段的动物。
原因： 1 长期毒性试验的给药期限较长；
2
处于生长发育阶段的动物对药物 的毒性反应较敏感；
年龄较大的动物反应性降低, 存在 3 许多自发性疾病干扰试验结果。
18.11.2020
.ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
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二、实验动物
2. 起始月(周)龄 啮齿类动物最好在断奶后不久即开始给药
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急性毒性试验 是为观察和评价急性毒性的有害作用或中毒反应 而设计的一种毒理学试验。研究药物一次或24小时内 多次给予受试药物后，一定时间内所产生的毒性反应。
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长期毒性试验与急性毒性试验 的根本差别
1
给药的期限不同
2
3
18.11.2020
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5
根据给药期限的长短，可分为：
亚慢性毒性试验——给药期限不超过90天
同时设一溶剂 ( 或赋形剂 ) 对照组或 已知药物毒性对照组。
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一、一般原则和要求
基本要求 给药途径应与临床拟用途径相同
口服给药大鼠一般常用灌胃，灌胃的容量为每天 1~2ml/100g，也可将受试药物混在饲料或水中给予， 但要保证每只动物按规定剂量在一定时间内服入。
静脉注射大鼠时可采用腹腔或皮下代替，各剂量 组采用等容量不等浓度给药。特殊情况另作说明。
当较长时间连续、反复给药时，或者说给药的时间 间隔和剂量超过机体消除药物的能力，就会出现药 物进入机体的速度 (或总量) 超过排除的速度 (或总 量) 的现象，此时药物就有可能在体内逐渐增加并贮 存起来，即蓄积作用。
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蓄积作用的表现形式
作用量积蓄 功能性蓄积
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二、实验动物
理想动物的标准：
对受试物的生物转化与人体相近； 对受试物敏感； 已有大量历史对照数据。
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二、实验动物
1.种类及品系
☆我国药政部门规定的基本原则是选用两种动物, 一种为啮 齿类，首选大白鼠；另一种为非啮齿类，首选狗。
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基本要求 选 三 给用个药两 剂 途种 量 径实 应验 与动临物床拟用途径相同
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一、一般原则和要求
基本要求 选用两种实验动物
至少在两种动物体上进行，兼顾雌雄性别。
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一、一般原则和要求
基本要求
三个剂量
剂量至少分为高、中、低三个档次。
高剂量组应能充分反映药物的毒性， 低剂量组不出现毒性反应。
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一、一般原则和要求
基本原则 整体性
长期毒性试验不能与药效学、药代动 力性和其他毒理学研究割裂，试验设 计应充分考虑其他药理毒理研究的试 验设计和研究结果。长期毒性试验的 结果应该力求与其他药理毒理试验结 果互为印证、说明和补充。
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一、一般原则和要求
1 预测受试物可能引起的临床不良反应
2 判断受试物反复给药的毒性靶器官或组织
3 推测临床试验的起始剂量和重复用药的安全剂量范围
4 提示临床试验中需重点监测的指标
5 为临床试验中的解毒或解救措施提供参考
18.11.2020
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13
第二节
试验设计原则及方法
18.11.2020
.
14
一、一般原则和要求
基本原则 全面、严谨、合理 整体性 随机、对照、重复
大鼠起始周龄要求在 4~9周龄；
犬的起始月龄为4~9月龄，一般不超过 12 月 龄； 如选用杂种狗，起始年龄可稍大些。
18.11.2020
.
31
二、实验动物
2. 起始月(周)龄
起始体重应在体重均值± 20% 的范围内。
18.11.2020
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32
二、实验动物
3. 性别及数量 （1）性别
☆ 一般来讲是兼用两种性别的动物，每个剂量组中 雌雄性别的动物数必须一致。
或不超过试验动物平均寿命的10%；
慢性毒性试验——给药期限超过90天
或超过试验动物平均寿命的10%；
终生毒性试验
数代毒性试验
18.11.2020
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长期毒性试验与急性毒性试验 的根本差别
1
给药的期限不同
2
给药的剂量范围不同
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蓄积作用 (accumulation action)