枸杞多糖的提取分离纯化
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枸杞多糖
枸杞多糖是一种水溶性多糖,是枸杞中最主 要的活性成分,相对分子质量为68-200, 成为国内外研究热点。其中又以枸杞多糖 的免疫调节和抗肿瘤作用的研究最多。现 已有很多研究表明枸杞多糖具有促进免疫、 抗衰老、抗肿瘤、清除自由基、抗疲劳、 抗辐射、保肝、生殖功能保护和改善等作 用。
实验研究过程
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成分分析结果
经高效气相色谱分析得出出峰时间表
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气相色谱图
六种单糖的摩尔比为鼠李糖:阿拉伯糖:木糖:甘露糖: 葡萄糖:半乳糖=2.07:2.38:3.11:1.00:1.12: 2.86。
多糖的环境扫描电镜照片
谢谢 再见
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枸杞多糖的分离
酸性亚组分的分离 取WLBP4.0g溶于75mL蒸 馏水中,加入50mL十六烷基三甲基溴化铵,过 夜沉淀12h,然后以4000r/min、4℃离心 20min,收集沉淀。沉淀用10%NaCl溶解后, 加入3倍体积95%乙醇,产生沉淀,4000r/min、 4℃离心20min收集沉淀,蒸馏水溶解并透析3天, 冻干得WLBP。
枸杞多糖的提取
热水提取法:称取150g干燥滤渣加入3000mL蒸馏水, 90℃热水提取2小时,重复2次,合并离心,收集上清液。 利用旋转蒸发仪浓缩至1/4体积,然后加入4倍体积的 95%乙醇,静置过夜。离心,收集沉淀并重复醇沉一次, 即得水提粗糖。
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Sevage法脱蛋白
Sevage法:正丁醇、氯仿混合溶液(正丁醇:氯仿=1: 4或1:5)和样物提取液混合并且振荡,不需要加热利用 离心机离心,直到离液面交界处无白色混悬,也就是蛋白 质介于提取液与试剂交界处 ,然后分别提取。 分别取一定量上述水提粗多糖,用蒸馏水完全溶解,得多 糖水溶液。采用Sevage法脱蛋白,加入多糖水溶液体积 1/5的Sevage试剂(三氯甲烷:正丁醇=4:1),震荡 20min后离心,收集上清液,弃去中间变性蛋白和下层三 氯甲烷,重复操作至中间无变性蛋白层出现。将上清液对 流水透析3天,真空冷冻干燥得水提脱蛋白枸杞多糖 WLBP。
同学们好
枸杞多糖的提取、分离纯化及其 构成
枸杞源自文库
果实含枸杞多糖,甜菜碱、阿托品、天仙子 胺;另含玉蜀黍黄素、酸浆红素、隐黄质、 东莨菪、胡萝卜素、核黄素、烟酸、维生 素B1、 B2及C. 有增强非特异性免疫作用 、延缓衰老作用 、 抗肝损伤 、降血糖 、补肾功能 、保肝功 能 、抗脂肪肝作用 、对血压的作用 、抗 疲劳作用 、抗肿瘤作用 。
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枸杞多糖的纯化 枸杞多糖的纯化釆用SephadexG-150色 谱柱层析法纯化多糖样品。填料为 SephadexG-150葡聚糖凝胶,层析柱规 格为2.5×50cm,用蒸馏水洗脱。选取冻 干后的WLBP组分40mg溶于5mL蒸馏水中, 上SephadexG-150色谱柱,用蒸馏水洗 脱,自动收集每管3mL。用苯酚-硫酸法检 测多糖含量,合并出峰管,浓缩,冻干, 得纯化多糖WLBP-I、WLBP-II
材料预处理及提取方法 Sevage法脱蛋白 枸杞多糖的分离 枸杞多糖的纯化 成分分析结果
材料预处理
(1)粉碎 将枸杞子洗净晾干,再放入烘箱供至干透(烘箱温 度50℃,避免温度过高使之焦糊)。烘干后取出,冷却至 室温,然后用粉碎机将干燥的枸杞子粉碎,备用。 (2)脱脂 将粉碎的枸杞粉末置于大烧杯中,加入4倍体积 95%的乙醇,60℃水浴加热搅拌脱脂2小时,滤去乙醇, 重复脱脂3次,收集滤渣,晾干,装袋备用。