吸光光度法测定酸碱指示剂离解常数及酸度分布曲线的计算机数据处理
实验2 分光光度法测BPB的电离平衡常数
分光光度法测BPB的电离平衡常数【摘要】本文采用分光光度法测量了溴酚蓝溶液在同一浓度不同pH 值下的最大吸收值，利用在某组分的最大吸收峰波长下，测定该最大波长对该组分的不同吸收来确定体系中该组分的含量，从而求算溴酚蓝的电离平衡常数。
【关键字】溴酚蓝分光光度法贝尔—郎比定律电离平衡常数1、引言每种物质对于通过它的单色光的吸收具有选择性，分光光度法是基于这种物质对光的选择吸收性而建立的，这一特性不仅是研究物质内部结构的基础，也是定量分析的基础。
弱酸、弱碱的电离平衡常数是重要的物化参数，一定 pH 值的缓冲溶液的选择、酸碱指示剂的选择等都需用到弱酸、弱碱的电离平衡常数。
溴酚蓝是一种酸碱指示剂，本身带有颜色且在有机溶剂中电离度很小，用一般的化学分析法或其他物理化学方法很难测定其电离平衡常数。
因此可以采用分光光度法来不同波长对其组分的不同吸收来确定体系中组分的含量，从而求算溴酚蓝的电离平衡常数。
2、实验部分实验原理：波长为λ的单色光通过任何均匀而透明的介质时，由于物质对光的吸收作用而使透射光的强度（I）比入射光的强度（I0）要弱，其减弱的程度与所用的波长（λ）有关。
又因分子结构不相同的物质，对光的吸收有选择性，因此不同的物质在吸收光谱上所出现的吸收峰的位置及其形状，以及在某一波长范围内的吸收峰的数目和峰高都与物质的特性有关。
分光光度法是根据物质对光的选择性吸收的特性而建立的，这一特性不仅是研究物质内部结构的基础，也是定性分性、定量分析的基础。
根据贝尔—郎比定律，溶液对于单色光的吸收，遵守下列关系式：DIIK l C==⋅⋅lg0(6－1)式中，D－消光（或光密度）；I/I0－透光率；K－摩尔消光系数，它是溶液的特性常数；l－被测溶液的厚度（即吸收槽的长度）；C－溶液浓度。
在分光光度分析中，将每一种单色光，分别、依次地通过某一溶液，测定溶液对每一种光波的消光。
以消光（D ）对波长（λ）作图，就可以得到该物质的分光光度曲线，或吸收光谱曲线，如图6－1所示。
物理化学实验报告-分光光度法测溴酚蓝的电离平衡常数
实验六分光光度法测溴酚蓝的电离平衡常数摘要：本实验以利用分光光度法通过测量不同pH条件下溶液的吸光度，从而得到吸光度和pH的关系曲线，然后通过线性拟合间接的计算出溴酚蓝（BPB）溶液的电离平衡常数。
关键词：分光光度法溴酚蓝（BPB）电离平衡常数贝尔-朗比定律The Determination of balance constant of ionization of Bromphenalblue(BPB) by SpectrophotometerAbstract：In this experiment, we used Spectrophotometer to measure the absorbency of the B.P.B with different pH, according to the relationship of absorbency and pH,we determine the ionization equilibrium constant of B.P.B indirectly.Key words ：Spectrophotometry Bromphenalblue (BPB) equilibrium constant of Ionization Lambert-Beer’s Law1. 序言弱酸、弱碱的电离平衡常数是重要的物化参数，一定pH值的缓冲溶液的选择、酸碱指示剂的选择等都需用到弱酸、弱碱的电离平衡常数。
溴酚蓝是一种酸碱指示剂，本身带有颜色且在有机溶剂中电离度很小，用一般的化学分析法或其他物理化学方法很难测定其电离平衡常数。
而分光光度法可以利用不同波长对其组分的不同吸收来确定体系中组分的含量，从而求算溴酚蓝的电离平衡常数。
BPB溶液在pH≤3.1时，溶液呈黄色，主要由HA产生；在pH≥4.6时，溶液呈蓝色，是由A—产生的。
实验证明，被A—最大吸收的蓝色单色光不被黄色的HA吸收，即消光为0或很小，据此我们可以在A—的最大吸收波长下通过测量不同pH值下溶液的吸光度，确定溶液中A—组分的浓度，进而得到BPB的电离平衡常数。
武汉大学分析化学第五版第10章：吸光光度法
而且颜色深浅与浓度有关
吸光光度法
定义：是基于被测物质对光具有选择性吸收的特性而
建立的分析方法。 包括：比色法、可见及紫外吸光光度法、红外光谱法
等。本章我们重点讨论可见光区的吸光光度法。
特点
• 灵敏度高 最低浓度一般可达1-10-3%的微量组分。对 固体试样一般可测到10-4%。如果对被测组分事先加以 富集，灵敏度还可以提高1-2个数量级。 • 准确度较高 相对误差为2-5%，但对微量成分来说， 还是比较满意的，因为在这种情况下，滴定分析法和重 量法也不够准确了，甚至无法进行测定。
/
A 0.19 ε= —— = = 1.1×104L· -1· -1 mol cm bc 2×8.95 ×10-6
5.桑德尔灵敏度S
当光度检测器的检测极限为A=0.001时，单位截面 积光程内所能检测出来的吸光物质最低含量（ 单位： μg/cm2 ）。
0.001 A =0.001 =ε· c b· cb= —— ε 0.001 M 3 = —— (μg/cm2) S= ——— ×M ×10 ε ε mol cm 所以上式中的灵敏度： ε单位：L· -1· -1 M 55.85 S = — = ———— = 0.005μg/cm2 ε 1.1×104
3.影响ε值大小的因素
(1)入射光波长 (2)与被测物质有关 (FeSCN ， ε=200 ； 4 Fe phen 1.1 ×10 ) (3)温度，酸度，介质，有色物结构 (4)ε不随 c或A值变化
4.ε值的计算
小结：
a，ε与c或A无关
εmax≥104L• mol-1 • cm-1 用光度法测定具有较高
(4)不同物质的吸收曲线形状不同，决定了 物质的结构分析的依据 ，即定性依据 (5)若选择在λmax处测量A，则灵敏度高 (6)从吸收光谱曲线得出结论：c愈大，颜色 愈深，吸收光愈强，Ia愈大，透光It愈弱；c愈小 ，则相反 c增大 A增加 T减小 ε值不变 λmax不变
3甲基红的酸离解平衡常数的测定
3甲基红的酸离解平衡常数的测定1. 引言3甲基红是一种酸碱指示剂，它在乙醇水溶液中显红色，PH在5-6时呈紫色，PH6以上则呈黄色。
它是一种三价酸（H3MR）的磷酸盐，它可以与酸或碱反应形成相应的盐。
当酸度较弱时，3甲基红可以与酸反应，形成酸性盐：H3MR + H+ → H2MR+H2O当酸度逐渐增强时，3甲基红可以再次反应，形成还原态：在碱性溶液中，3甲基红会形成碱性盐，而在强碱性溶液中，3甲基红会失去H+离子，形成最强的还原态：在这个实验中，我们将使用比较不同浓度溶液的吸收光谱，根据比色法测定3甲基红溶液的酸离解平衡常数。
在这个实验中，我们也会讨论氢离子对3甲基红溶液吸收光谱的影响，以及如何避免这种影响。
2. 实验设计2.1 材料和设备3甲基红，浓盐酸，NaOH，乙醇，超纯水，分光光度计，移液管，比色皿。
1. 用乙醇水溶液稀释不同浓度的3甲基红溶液，使其浓度分别为1×10-5，2×10-5，3×10-5，4×10-5，5×10-5mol/L。
2. 向每个比色皿中加入2.0mL 3甲基红溶液和2.0mL盐酸溶液，混合均匀。
3. 向其中一个比色皿中加入2.0mL NaOH溶液，使其pH值达到7。
4. 在分光光度计中，将红色滤光片插入，并调节波长至520nm。
5. 用移液管将各个比色皿中的溶液转移到离合器中，将离合器插入分光光度计中，记录吸光度值。
6. 重复步骤2-5，但将NaOH溶液加入另一个比色皿中，以使溶液的pH值为8、9、10、11、12。
7. 根据记录的吸光度值，绘制3甲基红吸光度随pH值变化的曲线。
3. 实验结果和讨论在这个实验中，我们通过比色法记录了3甲基红溶液在不同pH值下的吸光度值，并绘制了吸光度随pH值变化的曲线（图1）。
我们发现，在pH值在5-10之间，3甲基红吸光度值呈现出一个明显的谷，在pH值为6附近达到最小值。
在pH值小于6和大于10的范围内，吸光度值趋于稳定，没有明显的变化。
分析吸光度实验数据处理
分析吸光度实验数据处理引言：吸光度实验是化学和生物学实验中常用的一种实验手段，通过测定物质溶液中的吸光度来推断溶液中物质的浓度或者其他相关参数。
吸光度实验数据处理是实验结果的重要环节，本文将通过分析吸光度实验数据处理的方法和步骤，帮助读者更好地理解和运用吸光度实验数据。
一、实验数据获取和准备在进行吸光度实验之前，需要准备好实验所需的仪器设备和试剂。
实验中使用的仪器主要是分光光度计，其接收一定波长范围内的光信号，并且可以测量该波长范围内的光强度。
试剂的选择需要根据实验目的和具体物质的性质来确定。
实验数据一般可以通过分光光度计上的显示屏读取。
确保实验设备和试剂的质量良好和正确使用能够保证实验数据的准确性。
二、吸光度实验数据处理步骤1. 清洗和调零在进行吸光度实验之前，需要进行清洗和调零操作。
首先，需要用纯水进行冲洗，以确保试样槽或光学系统的无污染。
接下来，进行调零操作，将分光光度计的显示调整为零值，以消除仪器本身的误差。
2. 统计实验数据在进行吸光度实验时，需要按照一定的时间间隔记录实验数据，通常选择每隔固定时间记录一次数据。
实验数据包括时间和吸光度值。
3. 值的处理吸光度值处理是吸光度实验数据处理中的核心步骤。
吸光度值是测量的光强度与实验操作、试剂和仪器的相关参数有关的。
通常，我们通过计算差值法、标准曲线法或其他线性回归法来计算吸光度值。
差值法即计算不同时间点之间吸光度的差值，可以用于研究物质浓度随时间变化的趋势。
标准曲线法则需要事先制备一系列不同浓度的标准溶液，通过测定吸光度和浓度之间的关系建立一条标准曲线，然后根据曲线来计算未知样品的浓度。
4. 数据分析和结果展示经过吸光度值处理后，可以进行数据分析和结果展示。
在数据分析方面，可以计算出浓度随时间的变化率、定量测量目标物质的浓度等。
在结果展示方面，可以通过绘制曲线图、柱状图或其他图形来展示实验结果。
这样可以更直观地观察和理解实验数据。
三、吸光度实验数据处理的注意事项1. 实验设备的选择和操作要准确，以保证实验数据的可靠性和准确性。
酸碱指示剂pKa值的分光光度测定法
酸碱指示剂pKa值的分光光度测定法
刘红鸣;陈莲惠
【期刊名称】《川北医学院学报》
【年(卷),期】2000(015)002
【摘要】@@ 1 实验方法rn在一般教材上均给出了一些常用的酸碱指示剂的pKa值,以此作为指示剂的理论变色点.酸碱指示剂本身是一种有机弱酸或弱碱,通常是采用酸度计先测定其电离常数,再由电离常数换算成pKa值[1],该法繁琐,步骤较多,测定误差较大.我们采用分光光度法测定了部分酸碱指示剂的PKa值,其结果均与文献值十分接近.该法准确、简便,具有实用价值.
【总页数】2页(P76-77)
【作者】刘红鸣;陈莲惠
【作者单位】川北医学院化学教研室,四川南充 637000;川北医学院化学教研室,四川南充 637000
【正文语种】中文
【中图分类】R34
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4.利用紫外分光光度法测定罗格列酮游离碱的pKa值 [J], 吴禄春;甘勇军;方大树;
王施韦;胡湘南
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酸碱指示剂pka值的分光光度测定法
酸碱指示剂pka值的分光光度测定法
酸碱指示剂是一种能够根据其酸碱性质而发生颜色变化的物质。
pKa值是指该物质的酸性离解常数，即当其处于弱酸或弱碱状
态时，去质子或接质子的平衡常数。
测定酸碱指示剂的pKa
值可通过分光光度法进行，以下是相关参考内容：
实验原理：
酸碱指示剂在不同pH条件下的吸收光谱有所差异，因此可通
过测量其吸收光谱来确定pKa值。
在实验中，需要选取两种
波长，一种为指示剂酸性形态的最大吸收波长（λmax1），另
一种为碱性形态的最大吸收波长（λmax2），然后利用洛峰公
式计算pKa值。
实验步骤：
1. 选择合适的酸碱指示剂，浓度应在10^-5~10^-4 mol/L之间；
2. 在pH值为3左右的缓冲液中，测量指示剂的吸收光谱；
3. 在pH值为10左右的缓冲液中，测量指示剂的吸收光谱；
4. 计算指示剂在两种不同pH条件下的吸收比值，根据洛峰公
式计算pKa值。
注意事项：
1. 确保测量的溶液中不含有杂质，否则会影响测量结果；
2. 测量过程需控制温度和时间，尽量避免光线对样品的影响；
3. 计算pKa值时，需选取合适的洛峰公式，例如Henderson-Hasselbalch公式或者荧光比值法等。
吸光光度法测定甲基红平衡常数实验
实验2 甲基红平衡常数的测定一、 实验目的：（1） 学会用分光光度法测定溶液各组分浓度，并由此求出甲基红离解平衡常数。
（2） 掌握可见光分光光度计的原理和使用方法。
（3） 掌握PH 计的原理和使用、 二、 实验原理：1.根据朗伯比尔定律，溶液对于单色光的吸收，遵守下列关系在分光光度分析中，将每一种单色光，依次地通过某一溶液，测定溶液对每一种光波的吸光度，以吸光度义对波长A 作图，就可以得到该物质的吸收光谱曲线。
2.溶液中各组分含量的测定本实验是用分光光度法测定弱电解质(甲基红)的电离常数。
由于甲基红本身带颜色，而且在有机溶剂中电离度很小，所以用一般的化学分析方法或其他物理化学方法进行测定都有困难。
但用分光光度法可不必将其分离，且能同时测定两组分的浓度。
甲基红在溶液中存在离解平衡：N H 3H 3CN H-O 2CN H 3CH 3CN N-O2C+H +酸式（红色） 碱式（黄色） 上式可以简写为：HMR(酸式) MR -(碱式)+H 酸性溶液中，甲基红基本上以HMR 存在，在碱性中基本上以MR +-存在。
可在不同波长下测定HMR 和MR -的吸光度，作出二者的吸收曲线。
在波长520nm 处，HMR 对光有最大吸收，碱式吸收较小；在430nm 处MR -波长520nm,430nm 时，甲基红溶液的吸光度为：对光有最大吸收，HMR 吸收较小。
一定波长下，甲基红溶液的吸光度等于酸式和碱式两者的吸光度之和。
式①②表示混合物在波长λ520及λ430测定的吸光度，是两种物质吸光度的简单加和。
根据朗伯比尔定律，上两式可改写为：3.甲基红酸式指示剂pK值的测定4.pH计：PH计由三个部件电路中测量出微小的电位差。
个参比电池能维持一个恒定的点位，作为偏离电位的对照。
玻璃电极建立一个对所测溶液的氢离子浓度发生变化的电位差。
把对pH敏感的电极和参比电极放在同一溶液中，就组成一个原电池，其点位岁待测溶液pH而变化。
电流计将原电池的点位放大若干倍，通过电表显示出来，测得相应的pH值构成。
报告示例：实验三__醋酸解离度和解离常数的测定
山东轻工业学院实验报告成绩课程名称 基础化学实验1 指导教师 周磊 实验日期 院（系） 专业班级 实验地点 实验楼A 座412 学生姓名 学号 同组人 实验项目名称 醋酸解离度和解离常数的测定 一、实验目的1. 学习正确使用酸度计。
2. 进一步练习溶液的配制与酸碱滴定的基本操作。
3. 用 pH 法测定醋酸的解离度和解离常数。
二、实验原理HAc 为一元弱酸，在水溶液中存在如下解离平衡：HAc ＝ H + ＋ Ac - K a起始浓度 (mol ⋅L -1) c 0 0 平衡浓度 (mol ⋅L -1) c –c α c α c αK a 表示 HAc 的解离常数 , α 为解离度 , c 为起始浓度。
根据定义：醋酸溶液总浓度 c 可以用 NaOH 标准溶液滴定测定。
配制一系列已知浓度的醋酸溶液，在一定温度下，用酸度计测出其 pH 值，求出对应的 [H + ]，再由上述公式计算出该温度下一系列对应的 α 和K a 值。
取所得的一系列K a 值的平均值，即为该温度下醋酸的解离常数。
三、主要仪器和试剂仪器 ：酸度计, 碱式滴定管 (50mL), 锥形瓶 (250mL), 移液管 (25mL), 吸量管 (5mL), 容量瓶(50mL), 烧杯 (50mL)试剂：HAc 溶液， NaOH 标准溶液, 酚酞 四、实验步骤（用简洁的文字、箭头或框图等表示） 1. 醋酸溶液浓度的测定2. 配制不同浓度的醋酸溶液2[H ]1a c K c θααα+==-3. 不同浓度醋酸溶液pH 值的测定五、结果记录及数据处理表1 醋酸溶液浓度的测定表2HAc解离度和解离常数的测定。
第十章 吸光光度法
Cd2+ :的浓度为：
A=-lgT=-Lg0.445=0.35
κ=-1·cm-1
=1.4×10-3 μg·cm-2
16.钴和镍与某显色剂的络合物有如下数据：
λ/nm 510 656 KCo/L×mol-1×cm-1 3.64×104 1.24×103 KNi/L×mol-1×cm-1 5.52×103 1.75×104 将0.376g土壤试样溶解后配成50.00ml溶液，取25.00ml溶液进行处理，以除去干扰物质，然后加入先色剂，将体积调至50.00ml.此溶液在510nm处吸光度为0.467，在656nm处吸光度为0.374，吸收池厚度为1cm。计算钴镍在土壤中的含量（以μg·g-1表示）。
解：根据题意得
由图得k=4.200
硅的质量百分数
≈1.24%
答：试样中硅的质量百分数为1.24%。
19．钢样0.500g溶解后在容量瓶中配成100ml溶液。分取20.00ml该溶液于50ml容量瓶中，其中的Mn2+氧化成MnO4-后，稀释定容。然后在λ=525nm处，用b=2cm的比色皿测得A=0.60。已知k525=2.3×103L·mol-1·cm-1,计算钢样中Mn的质量分数(﹪)。
4.摩尔吸收系数κ在光度分析中有什么意义？如何求出κ值？κ值受什么因素的影响？
答：⑴摩尔吸光系数κ在光度分析中的意义：当吸光物质的浓度为1mol/L和吸收层厚度为
1cm时，吸光物质对某波长光的吸光度。
(2)在适宜的低浓度时，测其吸光度A，然后根据计算而求得。
(3) κ值受入射光的波长，吸光物质的性质、溶剂、温度、溶液的组成、仪器灵敏度等因素的影响。
答：确定前提为：①入射光为平行单色光且垂直照射;② 吸光物质为均匀非散射体系;③吸光质点之间无相互作用;④辐射与物质之间的作用仅限于光吸收过程,无荧光和化学现象发生。
测指示剂-溴酚蓝-离解常数
4 3.8
1.40 mL
四、实验步骤
2）将波长固定在碱式的最大吸收波长处，用光度测量方式 以蒸馏水作 参比，用1cm的比色皿测量各溶液的吸光度D。由于此时， HA不 产生吸收，所以溶液的D是不同浓度的A-产生的。
5、测量7种溶液的pH值 用pH为4.003和6.864的标准缓冲溶液校正PB-10 pH计
二、基本原理
。
根据Lambert-Beer定律，溶液对于单色光的吸收， 遵守下列关系式：
I/I0 a
透光率D lg I0 alc
(1)
摩尔吸光系I 数
比色皿的厚度（cm）
lc
溶液的摩尔浓度
D
吸光度
在分光光度分析中，将每一种单色光，分别依次地
通过某一溶液，测定溶液对每一种光波的吸收。以 吸光度（D）对波长（λ）作图，就可以得到该物质 的吸收光谱曲线。用最大吸收波长的入射光通过该 溶液就有着最佳的灵敏度。
可由作图法求得。例如，首先配制具有各种浓度的溴
酚蓝
A
酸式溶液，将在波长 分别测定的各溶液吸光aA,H度A 对浓
度作图，得到一条直线，由直线斜率可求得
值，
其余摩尔吸光系数求法类同，从而求出 [A- ]与[HA]的
相对量，再测得溶液pH值最后按（2）式求出pKa值。
七、附录---解方程组法
若比色皿厚度相同，则
由HA（酸式）引起呈黄色；当pH≥4.6时，溶液的 颜色主要由A-（碱式）引起，呈蓝紫色。实验表明， 对蓝紫色产生最大吸收的单色光的波长对黄色不产
生吸收，在其最大吸收波长处，黄色的吸光度为零 或很小。因此，本实验我们可用对A- 产生最大吸收 波长的单色光测定离解后的混合溶液的吸光度， 可
求出A-的浓度。令 A- 在显色物质中所占的量分数 为X，则HA所占的量分数为1-X， 所以
(分析化学)第七章：吸光光度法
(2)当 c=mol/L时：b=cm； K=ε=L·mol-1·cm-1
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Analytical chemistry
ε 表示物质的浓度为1mol/L,液层厚度为1cm时溶液 的吸光度。单位： (L•mol-1 •cm-1)
影响ε值大小的因素 (1)入射光波长 (2)与被测物质有关 (3)温度，酸度，介质，有色物结构， (4)ε不随 c或b值变化
显色反应快且稳定；显色反应快但不稳定；
显色反应慢，稳定需时间；显色反应慢但不稳定
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4、 显色反应温度
Analytical chemistry
加热可加快反应速度，导致显色剂或产物分解 5、溶剂
有机溶剂，提高灵敏度、显色反应速率 6、干扰离子
消除办法： 改变酸度，加入隐蔽剂，改变价态 选择合适参比 选择适当波长
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Analytical chemistry
(Tln T) '1ln T0
T=0.368，A=0.434 测量误差最小
为了减少测量误差，控制溶液的吸光度范围
A = 0.2 ~ 0.8
T = 65 ~ 15 %
五、参比溶液的选择： 选合适的参比溶液，调仪器A =0，T=100%
(1)当试液，显色液，在此波段无吸收，可用纯水 作参比；
(4)不同物质的吸收曲线形状不同，决定了物质的结 构分析的依据
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Analytical chemistry
Cr2O72- MnO4-
(5)若选择在λmax处测量A，则灵敏度高 2、物质的颜色
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Analytical chemistry
武汉大学2017学年度第一学期《分析化学》期末考试试卷及答案1
武汉大学2017学年度第一学期《分析化学》期末考试试卷及答案一.填空（每空1分，共26分，写在试卷上）1. 将0.20mol/LSO42-和0.10mol/LBa2+等体积混合，欲通过加动物胶（p K a1=2.0, p K a2=8.5）促其凝聚，这时沉淀溶液的pH值应为____________。
2. 检验两组结果是否存在显著性差异采用检验法，检验两组数据的精密度是否存在显著性差异采用检验法。
3. EDTA (即Na2H2Y)水溶液的质子条件式为。
4. 含有Zn2+和Al3+的酸性缓冲溶液，欲在pH=5～5.5的条件下，用EDTA标准溶液滴定其中的Zn2+，加入一定量六亚甲基四胺的作用是；加入NH4F的作用是。
5. 已知EºFe(III)/Fe(II)=0.77 V, EºSn(IV)/Sn(II)=0.14 V,则用Fe滴定Sn时,计量点的电位为V。
6. 某含EDTA、Zn2+和Ca2+的氨缓冲溶液中，lgαY(H+)=0.45, lgαY(Ca2+)=4.7, lgαZn(NH3)=2.5,而lg K ZnY=16.5,故lg K ZnY´= 。
7. 某酸碱指示剂HIn的变色范围为5.8至7.8,其p K a= ；在pH=6时络合指示剂与Zn2+的络合物的条件稳定常数lg K´ZnIn=8.9,则变色点时的p[Zn]= 。
8.吸光光度法中测量条件的选择应注意,, 等几点。
9. 吸光光度法中,采用的空白(参比)溶液主要有: , 和。
10. 吸光光度法中,吸光度读数为,浓度测量误差最小,此时透光率为。
11.特殊的吸光光度法主要有, ,。
12.衡量薄层色谱和纸色谱分离物质情况的参数是。
13.根据试样的用量和操作规模,分析方法分为, , ,。
二、回答问题（每题6分，共42分，写试卷纸上）1.已知某NaOH标准溶液吸收了二氧化碳，有部分NaOH变成了Na2CO3。
吸光光度法2
BaCrO4
饱和溶液中
2− Ba 2+ + CrO4
cCr = cs
Ax 0.200 = 2.00 × = 0.91mg.L−1 As 0.440
2− s = [ Ba 2+ ] = [CrO4 ]=
cCr 0.91×10−3 = = 1.75 ×10−5 mol.L−1 M Cr 52
2− K sp = [ Ba 2+ ][CrO4 ] = (1.75 ×10−5 ) 2 = 3.06 × 10−10
17、某有色溶液以试剂空白作参比测得T=0.08，已知ε=1.1×10 L・mol ・cm ，若用示差 法测得上述溶液，要使测量的相对误差最小，参比溶液的浓度为多少？ 解：以试剂空白为参比： T = 0.08
4 -1 -1
A = -lg T = − lg 0.08 = 1.10
示差法时，要使测量的相对误差最小，即 A相对 =Ax − As = 0.434
3
λ = 450nm时,
58.3
−3 10−5 ×1.2 × 10−3 2 1.2 × 10 K a + 6.33 × 10 × = 0.311 (2) 10−5 + K a 10−5 + K a
-5
pKa=4.92 解（1）得：Ka=1.2×10 -6 解（2）得：Ka=5.4×10 pKa=5.27 平均值 pKa=5.09 所以，指示剂的理论变色点 pH=pKa=5.09 14、为测定有机胺的摩尔质量，长将其转变为 1：1 的苦味酸胺的加合物，现称取 0.0500g 某加合物，溶于乙醇中制成 1L 溶液，以 1cm 的比色皿，在最大吸收波长 380nm 处测得吸光 4 -1 -1 度为 0.750，求有机胺的摩尔质量（已知 M 苦味酸=229，ε=1.0×10 L・mol ・cm ） 解： c =
吸光光度法测定酸碱指示剂离解常数及酸度分布曲线的计算机数据处理
下面介绍光吸收定律，也是二者之间的联系所在
以下介绍具体的表格制作（求出解离常数Ka）
如图制作出甲基橙的解离常数与pH的关系，从而求出pKa
2. 酸度同理
解联立方程得
如图，便制作好酸度分布曲线图
吸光光度法测定酸碱指示剂离解常数 及酸度分布曲线的计算机数据处理
1. 离解常数与吸光数据的关系 指示剂（以HIn代替）HIn本身是一种弱酸，自然在其溶液中存在 酸碱平衡 HIn↔H++InKa(解离常数） 此实验的课题名称告诉我们该解离常数的测定与溶液的PH值有关， 且用到的方法为“吸光光度法”，那么二者之间的联系是什么呢？
第十二章吸光光度分析法
第⼗⼆章吸光光度分析法第⼗⼆章吸光光度分析法⼀、本章要点1．掌握吸收曲线的绘制⽅法、吸收光谱、最⼤吸收波长的概念。
2. 掌握朗伯-⽐尔定律、吸光度、摩尔吸光系数、透光率的基本概念及相互之间的关系。
3.熟悉偏离朗伯-⽐尔定律的原因。
4. 掌握显⾊反应及其条件的选择、吸光光度分析⽅法及熟悉常⽤仪器的基本原理、主要部件及具体操作。
⼆、⽰例解析1. 已知含Cd 2+浓度为140µg ·L -1的溶液，⽤双硫腙显⾊后，⽤厚度为2cm 的⽐⾊⽫测得 A=0.22，计算此溶液的摩尔吸光系数。
解：查表知Cd 的摩尔质量为112.41g ·mol —1c (Cd 2+)=140×10-6/112.41=1.25×10—6（mol ·L —1） 461088102512220?=??==ε-...bc A （L ·mol -1·cm —1）需要指出的是，上例中的ε值是把被测组分看成是完全转变成有⾊化合物的。
但在实际测定中，因有⾊物质组成不确定或有副反应存在，实际计算出的是表观摩尔吸光系数。
2. 已知吸光度A = 0.474，计算T 及T %解： A = -lg T = 2 - lg T %lg T = -A = -0.474 ， T = 0.336； lg T % = 2-A = 2-0.474 =1.53， T % = 33.63. 准确移取含磷30µg 的标准溶液于25mL 容量瓶中，加⼊5%钼酸铵及其它相关试剂，稀释⾄刻度。
在690nm 处测定吸光度为0.410。
称10.0g 含磷试样，在与标准溶液相同的条件下测得吸光度为0.320。
计算试样中磷的质量分数。
解：ω（P ）=100?mA V c A S X S X =3100.1025410.02530320.0 =0.23 4. 某⼀分光光度计的透光率读数误差为0.005，当测量的百分透光率为9.5%时，测得的浓度相对误差为多少？解：?T = 0.005，T = 0.095，代⼊式（8-6）：095.0lg 095.0005.0434.0??=?c c = -0.022 = -2.2% 5. 测定某样品中Fe 的含量，称样0.2g 测得T =1.0%，若仪器透光率读数误差为0.50%试计算：⑴测量结果的相对误差为多少？⑵欲使测得的A 值为0.434，以提⾼测量的准确度，则应减少称样量或稀释样品多少倍？⑶若不进⾏上⾯的操作，为提⾼测量准确度应选⽤⼏厘⽶的⽐⾊⽫？解：⑴ ?T =0.50%，T = 1.0%，代⼊（8-6）式01.0lg 01.0005.0434.0??=?C C = 0.1085 = 10.85% ⑵原试液T =1.0%，A = 2.00，要使A = 0.434，降低相对误差，则需稀释样品。
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1. 离解常数与吸光数据的关系 指示剂（以HIn代替）HIn本身是一种弱酸，自然在其溶液中存在 酸碱平衡 HIn↔H++InKa(解离常数） 此实验的课题名称告诉我们该解离常数的测定与溶液的PH值有关， 且用到的方法为“吸光光度法”，那么二者之间的联系是什么呢？
下面介绍光吸收定律，也是二者之间的联系所在
以下介绍具体的表格制作（求出解离常数Ka）
如图制作出甲基橙的解离常数与pH的关系，从而求出pKa
2. 酸度分布系数
解联立方程得
如图，便制作好酸度分布曲线图