香豆素类成分分析.ppt
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香豆素类成分分析.ppt
荧光法
荧光法是利用羟基香豆素大多能产生荧 光，可直接观察提取溶液的荧光，也可观 察薄层荧光斑点
薄层色谱法（首选）
薄层色谱法也是利用香豆素大多具有荧 光用薄层色谱法进行鉴别。（PS：不具荧 光或荧光强度较弱的香豆素，可用喷显色 剂或喷碱溶液以增强荧光再进行鉴识）
香豆素鉴别举例
课本P148 例15 七宝美髯颗粒中补骨脂素，异补骨脂素的 鉴别就是利用薄层色谱法供试品溶液和对 照品溶液显相同颜色而进行鉴别。
理化性质
荧光反应
（1）香豆素母核无荧光，呋喃香豆素荧光弱 （2）羟基香豆素成蓝色荧光，7-OH荧光最强 （3）加OH-，羟基香豆素荧光增强 （4）7-OH香豆素，6或8位有取代，荧光减弱 （5）7-OH香豆素醚化、酯化、酰化，荧光减弱
理化性质
光谱特征（紫外）
➢母核上无含氧官能团取代时 274nm——苯环 311nm——α，β-不饱和内酯
异香豆素 有取代的香豆素 二聚体和三聚体
结构类型
七叶内酯 （简单香豆素）
结构类型
呋喃香豆素
吡喃香豆素
结构类型
其他香豆素 仙鹤草内酯（异香豆素）
异七叶内酯（二聚体） 双香豆素
理化性质
➢ 一、物理性质 ➢ 二、化学性质 ➢ 三、荧光特征 ➢ 四、光谱特征
物理性质
性状： ➢ 游离香豆素多有完好的结晶、固定的熔
香豆素类成分分析
王林艳（043007121） 黄 宏（043007122） 徐艺铨（043007123） 梅 琪（043007124） 贡 磊（043007125）
香豆素定义
香豆素是一类具有苯骈α-吡喃酮环结构 的化合物，从结构上可看作是由顺式邻羟 基桂皮酸脱水缩合而成的内酯。
香豆素的分布
香豆素的分类与结构PPT
香豆素是邻羟基桂皮酸内酯类成分的总
称，具有芳香甜味。
香豆素在植物体内以游离状态或与糖结
合成苷的形式存在，苷酶解可环合成游离的
内酯状态。 它的母核为
8 7
1
OO
2
6 5
3 4
OH6 5
1
OO
2
3 4
• 目前香豆素分类方法有两种 ：一种是根据香豆素中含氧 取代基的数量和位置进行分 类，另一种是按生源途径所 形成的基本骨架进行分类。 本书采用后一种方法
基成某一结构单位相连。连接位置也 不近相同，但较多的是一个香豆素的 C-8与另一个香豆素C-3、C-5、C-8直 接相连。
按成环后与母体稠合的位置不同分为线型和角型两种 。
1】线型（6O,7-呋喃骈香豆素型O),补骨脂O内酯型
补骨脂内酯
2】角型（7,8-呋喃骈香豆素型）白芷内酯型
O
OO
白芷内酯
香豆素母核上碳6位或碳8位的异戊烯基与邻 酚羟基环合成2,2-二甲基-a-吡喃环结构
1】线型（6,7吡喃骈香豆素
O
OO
花椒内酯
2】角型（7,8吡喃骈香豆素）
O
O
O
邪蒿内酯
指a-吡喃酮环上有取代基的香豆素。碳3、碳 4位常有苯环、羟基异戊烯基等取代。
• 是香豆素的异构体，在植物体内往往是二氢香豆 素的衍生物。
O O
异香豆素
• 是香豆素的二聚体和三聚体
双香豆素（二聚体）
双香豆素(二聚体类)
• 连接方式 • 可以直接相连，也可以通过氧、亚甲
• 香豆素类在结构上应与异香豆素类 相区分，异香豆素分子中虽也有苯 并吡喃酮结构，但它可看做是邻羧 基苯乙烯醇所成的酯。
香豆素成分的结构分类
称，具有芳香甜味。
香豆素在植物体内以游离状态或与糖结
合成苷的形式存在，苷酶解可环合成游离的
内酯状态。 它的母核为
8 7
1
OO
2
6 5
3 4
OH6 5
1
OO
2
3 4
• 目前香豆素分类方法有两种 ：一种是根据香豆素中含氧 取代基的数量和位置进行分 类，另一种是按生源途径所 形成的基本骨架进行分类。 本书采用后一种方法
基成某一结构单位相连。连接位置也 不近相同，但较多的是一个香豆素的 C-8与另一个香豆素C-3、C-5、C-8直 接相连。
按成环后与母体稠合的位置不同分为线型和角型两种 。
1】线型（6O,7-呋喃骈香豆素型O),补骨脂O内酯型
补骨脂内酯
2】角型（7,8-呋喃骈香豆素型）白芷内酯型
O
OO
白芷内酯
香豆素母核上碳6位或碳8位的异戊烯基与邻 酚羟基环合成2,2-二甲基-a-吡喃环结构
1】线型（6,7吡喃骈香豆素
O
OO
花椒内酯
2】角型（7,8吡喃骈香豆素）
O
O
O
邪蒿内酯
指a-吡喃酮环上有取代基的香豆素。碳3、碳 4位常有苯环、羟基异戊烯基等取代。
• 是香豆素的异构体，在植物体内往往是二氢香豆 素的衍生物。
O O
异香豆素
• 是香豆素的二聚体和三聚体
双香豆素（二聚体）
双香豆素(二聚体类)
• 连接方式 • 可以直接相连，也可以通过氧、亚甲
• 香豆素类在结构上应与异香豆素类 相区分，异香豆素分子中虽也有苯 并吡喃酮结构，但它可看做是邻羧 基苯乙烯醇所成的酯。
香豆素成分的结构分类
最新香豆素ppt课件
（二）醚键开裂
含乙烯醚（即烯醇醚）香豆素
H＋ 水 解
香豆素
M e O
+ M e O H OO H O OO
+e O HM O
O
OO
东 茛 菪 内 酯
(三）双键加水反应
酸接触下可使双键加水，如：黄曲霉素。
O M e O O H O H H O O O + H O H O O O M e O
黄 曲 霉 素 B 1 高 毒 性
3.Gibb’s 反应
Gibb’s 试剂是2，6-二氯（溴）苯醌 氯亚胺，其在弱的碱性条件下与酚对位活泼 氢缩合成兰色物。 有游离酚-OH,且-OH对位无取代者（+） 取代者（-）。
4.Emerson反应
Emerson试剂为4-氨基安替匹林-铁氰化钾，与酚对位 活泼氢反应呈阳性反应: 酚羟基对位无取代基（+）红色 有取代基（-） Gibb’s，Emerson反应常用来判断C6位是否有取代基存 在。因为内酯环能水解开环形成一个新的酚羟基:
O H
黄 曲 霉 素 B 2 a 无 毒 性
五.C3、C4双键性质和加成反应
由于香豆素的C3、C4双键与羰基和苯环形成共 轭体系，不易被氢化。
共 轭 苯 环 共 轭
导 致 双 键 性 较 弱 ， 而 不 易 加 成 。
O O
羰 基
控制条件下氢化顺序：
侧链不饱和键>吡喃环或呋喃环上的双键>C3、C4双 键
岩白菜素
5.双香豆素
是香豆素的二聚体或三聚体。为白色或 乳白色结晶性粉末；味苦略具香味；几不 溶于水、乙醇、乙醚微溶于氯仿，溶于强 碱溶液。化学结构与维生素k相似，具有抗 凝效果。
紫苜蓿酚
《天然药物化学》香豆素 ppt课件
ppt课件
34
理化性质
6显色反应
(3)Gibbs试剂反应与Emerson试剂反应 反应原理：特定试剂与酚羟基（内酯在碱性条件下
水解产生）对位（香豆素的C6位）的活泼氢 （香豆素C6位上无取代基时碳上的氢）缩合生 成有色缩合物。 内在反应条件相同：有游离酚羟基，C6位上无取 代。（溶液为碱性）。 即：香豆素结构中酚羟基对位无取代（C6位上没 有取代时），该反应发生。
1 性状 多数游离香豆素呈晶体，有一定熔点，且多有香味
（游离香豆素多有香味），小分子量的具有挥 发性和升华性，香豆素苷无此性质。 2 溶解性 游离香豆素极性小，不溶于水，易溶于甲醇、乙醇、 氯仿、乙醚、苯等有机溶剂，香豆素苷极性大， 能溶于水、甲醇、乙醇，难溶于其它极性小的 有机溶剂。
ppt课件
23
失。
ppt课件
28
理化性质
4 荧光性
如七叶内酯（6 ,7-二羟基香豆素）荧光较弱，白瑞 香素（７,８-二羟基香豆素）荧光消失。并不是 羟基越多，则荧光越强。
HO
5
4 3
HO
8
12
O
O
七叶内酯
5
4
3
HO 8
12
OO
OH
白瑞香素
ppt课件
29
理化性质
5与酸的作用
香豆素中的异戊烯基易与邻酚羟基环合。 在实验条件下，较温和的酸几乎可定量地使异戊烯
其煎剂具有解热、镇痛与抗炎作用。 存在于白芷、补骨脂、牛尾独活中。
O
OO
白芷内酯
O
O O
OO
1
茴芹内酯
ppt课件
18
结构分类
3 吡喃香豆素
天然药物化学 第四章 香豆素与木脂素类ppt课件
药物化学教研室
可编辑课件PPT
1
概述
定义：天然化学成分中由苯环和3个直键碳连在一起为 单 位 ， 以 一 个 或 几 个 C6-C3 构 成 的 化 合 物 统 称 为 苯丙素类。
构成苯丙素类成分有：苯丙烯、苯丙醇、苯丙酸及其 缩酯、香豆素、木脂素、黄酮和木质素等。
生物合成途径：
香豆素类
葡萄糖代谢 莽草酸 桂皮酸途径
10
㈤ 其它香豆素类
是指α-吡喃酮环3，4位上有取代基的香豆素， 一般取代基有苯基、羟基、异戊烯基等。
H 3 CO
O
O
HO
可编辑课件PPT
11
两个或三个香豆素基本母核通过碳-碳键或醚氧 键相连而成的为聚香豆素。
HO H3CO
O
O
O
O
O
O
OO
O
OH
OH
可编辑课件PPT
12
二、 理化性质
㈠性 状
㈡ 溶解性
31
生物活性
1.抗肿瘤作用：小檗科鬼臼属的各种鬼臼毒素类木质素，
均有较强的细胞毒活性，能抑制癌细胞的增殖。
2.肝保护作用: 五味子中的多种五味子醇均能保护肝脏和
降低血清ALT水平。
3.中枢神经系统的作用：五味子素木脂素类具有明显的中
枢安定作用。
4.抗病毒作用：鬼臼毒素类木脂素对麻疹和Ⅰ型单纯疱
疹有对抗作用。
6
OCH3
可编辑课件PPT
8
2. 7、8吡喃香豆素（角型）以邪蒿内酯为代表，如前
胡香豆素A等。
8
O
O
O
7
OH
O
O
O
O
O
OCH 3
OCH 3
可编辑课件PPT
1
概述
定义：天然化学成分中由苯环和3个直键碳连在一起为 单 位 ， 以 一 个 或 几 个 C6-C3 构 成 的 化 合 物 统 称 为 苯丙素类。
构成苯丙素类成分有：苯丙烯、苯丙醇、苯丙酸及其 缩酯、香豆素、木脂素、黄酮和木质素等。
生物合成途径：
香豆素类
葡萄糖代谢 莽草酸 桂皮酸途径
10
㈤ 其它香豆素类
是指α-吡喃酮环3，4位上有取代基的香豆素， 一般取代基有苯基、羟基、异戊烯基等。
H 3 CO
O
O
HO
可编辑课件PPT
11
两个或三个香豆素基本母核通过碳-碳键或醚氧 键相连而成的为聚香豆素。
HO H3CO
O
O
O
O
O
O
OO
O
OH
OH
可编辑课件PPT
12
二、 理化性质
㈠性 状
㈡ 溶解性
31
生物活性
1.抗肿瘤作用：小檗科鬼臼属的各种鬼臼毒素类木质素，
均有较强的细胞毒活性，能抑制癌细胞的增殖。
2.肝保护作用: 五味子中的多种五味子醇均能保护肝脏和
降低血清ALT水平。
3.中枢神经系统的作用：五味子素木脂素类具有明显的中
枢安定作用。
4.抗病毒作用：鬼臼毒素类木脂素对麻疹和Ⅰ型单纯疱
疹有对抗作用。
6
OCH3
可编辑课件PPT
8
2. 7、8吡喃香豆素（角型）以邪蒿内酯为代表，如前
胡香豆素A等。
8
O
O
O
7
OH
O
O
O
O
O
OCH 3
OCH 3
最新香豆素ppt课件
三、香豆素的功能
（1）抗肿瘤作用：从中药补骨脂中提取的补骨脂素、8-甲氧 基补骨脂素和异补骨脂素具有抗氧活性。补骨脂素类香豆素 对人粘液表皮样癌MEC-1细胞系、白血病细胞株（HL-60， Raji，K564）、宫颈鳞癌Hela细胞系、乳腺癌细胞株MCF7等均有抑制和杀灭作用。 （2）抗HIV作用：从胡桐属植物中分离得到的香豆素具有抑 制HIV逆转录酶活性，同时能够保护人类T淋巴细胞不受攻 击，并且具有抗耐药性。 （3）对心血管系统的作用 ①抗高血压：前胡丙素Praeruptorin C具有扩张血管、 Ca2＋丙素拮抗作用，因此可以将血压。
三、 生理活性
（1） 植物生长调节剂：低浓度刺激植物发芽、生 长；高浓度抑制植物发芽、生长。 （2） 光敏作用：治疗白斑病。 （3） 抗菌、抗病毒作用：秦皮中的七叶内酯及其 苷治疗痢疾；蛇床子中的奥斯脑可抑制乙肝表面 抗原。 （4） 平滑肌松弛作用：冠状动脉扩张和解痉利胆。 （5） 抗凝血作用：防止血栓形成。 （6） 肝毒性：黄曲霉素致肝癌。
黄檀内酯
蟛蜞菊内酯
第三节 理化性质
一、性状
游离的香豆素多有完好的结晶形状，为白色晶体，有一 定的熔点，熔点为69℃，大多有香味。分子量小的有挥发 性，能随水蒸汽蒸出，具升华性。 香豆素苷无挥发性，也不能升华。
二、 溶解
游离香豆素——不溶于冷水，溶于沸水，易溶于甲醇、乙醇、 氯仿、乙醚等有机溶剂。 香豆素苷——溶于水、甲醇、乙醇，难溶于氯仿、乙醚。
（5)抗氧化作用：7-二甲氧基香豆素具有抗极 性肾功能衰竭的作用，其作用机制之一就 是通过防止氧自由基的生成以及清除已生 成的氧自由基来改善极性肾功能衰竭。 （6）光敏作用：大多数香豆素对各种波长的 光都有强的吸收作用，因此可作为光敏剂 引起皮肤光敏作用。如，杭白芷总香豆素 能提高皮肤对紫外线的敏感性。
香豆素PPT课件
不良反应及禁忌
• 凝血酶原时间应控制在25~20秒（正常值12秒），过量易发生出血。 可用维生素K对抗，必要时输新鲜血浆或全血以补充凝血因子。禁 忌症同肝素。
生物活性
• • • • • • • 毒性 抗病毒作用 抗肿瘤作用 抗骨质疏松作用 抗凝血作用 对心血管系统的作用 光敏作用
性质与稳定性
• 香豆素是顺式邻位羟基肉桂酸的内酯。能发生卤化、硝化、磺化、 氢化等反应。 • 有毒，大鼠经口LD5029注射LD50220mg/kg。工作场所应有良好的通风，设备应密闭， 操作人员应穿戴防护用具。 • 存在于白肋烟烟叶中。 • 天然存在于黑香豆、香荚兰豆、薰衣草油、肉桂油、香茅油、秘鲁 香脂中
• 治流行性腮腺炎：车前草30~60克（干品15~30克），水煎服。 • 治疗细菌性痢疾：用100%鲜车前草叶煎剂，每日服60~120毫 升，多可至200毫升，每日3次或4小时1次，连续服7~10日。 • 治疗慢性支气管炎：车前草30克，百部15克，水煎服。 • 治疗急性肾小球肾炎：车前草（带种籽）15克，玉米须15克， 墨旱莲15克，小蓟15克，每日1剂，水煎服。 • 治疗小儿遗尿症：车前草、当归各60克，麻黄10克。浓煎至 200毫升。14岁以下服100毫升，15岁以上服200毫升。每晚睡前1 小时服，7日为1疗程。
•
治疗肾盂肾炎：车前草30克,金银花、黄连、黄柏、紫花地丁 各12克，蒲公英、鱼腥草各20克，甘草6克。每日1剂，水煎，早晚 各服1次。 • 治疗肾绞痛：车前草50克，金钱草30克，甘草15克，白芍30 克，赤芍15克，当归15克，木香10克。水煎分3次服，每天1剂。 • 治久病肾结石、肾积水：车前草30克，车前子15克，黄芪60克， 党参45克，金钱草30克，鸡内金10克，石苇15克，冬葵子20克。 水煎分2次服，每日1剂，20天为1个疗程。
第十一讲-香豆素类分析
注意：用于开环的苛性碱浓度一般小于1％。与浓 碱共沸则发生母核降解，生成酚类或酚酸。
香豆素类化合物的理化性质
酸性及内酯性质
香豆素内酯环开环后如长时间与碱接触并加热、或 开环时所用碱浓度过大、或长时间与紫外线接触， 开环生成的顺式邻羟基桂皮酸盐可转变为稳定的反 式邻羟基桂皮酸盐，此时加酸酸化只能产生邻羟基 桂皮酸，不能再发生环合作用生成原香豆素母核。
CH2OH OH O OH OH O O
O
MeO HO
茵陈炔内酯
治疗急慢性肝炎
仙鹤草内酯
岩白菜素
止咳作用，治疗慢性支气管炎
香豆素类化合物结构与分类
香豆素类化合物分类
OH OH
5.其他：
CH2OH COCH3
O
OO
HO
O
O
亮菌甲素
OH
O
紫苜蓿酚
双香豆素类，抗维生素 K预防血液凝固
OMe
O
O
蟛蜞菊内酯
7 8
O 1
3 2 O
香豆素类化合物的鉴别
鉴别 - 2.显色反应
Cl Br O Br
Gibb’s反应 pH=9~10 －HCl
HO
H
＋
N
2,6-二溴苯醌氯亚胺
Br -O N Br O
O N Br O Br
蓝色
取样品乙醇溶液1mL，加0.5% 2,6-二溴（或氯）苯醌-4-氯 亚胺乙醇溶 液2～3滴，加碳酸钠水溶液调pH至9～9.6,呈 蓝色或蓝绿色，表示C6位无取代的香豆素或酚羟基对位无取
香豆素类化合物的提取与分离
提取分离实例－秦皮
秦皮为木犀科多种白蜡树属植物的杆皮或枝皮 ，主要有效成分为七叶内酯和七叶苷，具有抗 菌、镇痛、止咳去痰等功效。
香豆素和木脂素PPT课件
❖3.Gibbs反应 2，6-二氯（溴）苯醌氯亚胺，在弱 碱性条件下可与酚羟基对位的活泼氢缩合成蓝色 化合物。
❖4.Emerson反应 氨基安替比林和铁氰化钾，可与 酚羟基对位活泼氢生成红色缩合物。
❖ 3、4都要求香豆素分子中必须有游离的酚羟基， 且酚羟基对位没有取代基时才呈阳性反应。
❖ 荧光特征
❖ 化学法
取本品粗粉约1g加水10ml，浸渍10min，时时振摇，滤过， 滤液浓缩至2~3ml，加5倍量的乙醇，强烈振摇5min，滤 过，滤液挥去乙醇，加水稀释至10ml，加活性炭少量，振 摇后滤过。取滤液2ml，加氢氧化钠试液中和后，加硫酸 汞试液1滴，煮沸，滤过，滤液加高锰酸钾试液1滴，紫红 色即消失，并发生白色沉淀。
3.显色反应 bat reaction :鉴定 No
Image
5%没食子酸溶液+浓H2SO4，呈绿色（+）。 2. Emerson reaction:酚羟基对位无取代基
3.Gibb’s reaction:判断-OH对位有无取代基。 Gibb’s 试剂是2，6-二氯（溴）苯醌氯亚胺， 其在弱的碱性条件下与酚对位活泼氢缩合成 兰色物。
例 护肝五味子，猪胆粉，绿豆
【含量测定】HPLC法
固定相 流动相
C18 甲醇-水（63:37）
检测波长 250nm
对照品 五味子醇甲
供试液 乙酸乙酯加热回流，蒸干，甲醇
溶解残渣
第二节 香豆素
香豆素是邻羟桂皮酸内酯，具芳香甜味。其结构母核为：
O
65
有游离酚-OH, 且-OH对位无取代者（+） 对位有取代者（-）。
多用来判断C6位是否有取代基存在。
4. 异羟肟酸铁反应： 碱性条件下，内酯开环，与盐酸羟胺中的羟基 缩合生成异羟肟酸，然后在酸性条件下与三价 铁盐络合而显红色。
最新天然药化第七章香豆素PPT课件
补骨脂内酯: 有增加皮肤黑色素的作用，适用于白癜风。此外，尚可用于斑秃及
牛皮癣。
8
㈢ 吡喃香豆素类 (线型和角型)
香豆素异戊烯基C6或C8与邻酚羟基环合而成 2,2-二甲基-α-吡喃环结构，形成吡喃香豆素。这
一类天然产物并不多见。
四、异香豆素类
• 为香豆素的异构体
五、其他香豆素
指α-吡喃酮环上有取代基的香豆素类。还包括二聚 体和三聚体。C3、C4上常有取代基：苯基、羟基、异戊
13
结束语
谢谢大家聆听！！！
14
烯基等。
黄檀内酯
rutaculin
Kotamin(二聚体)
11
第三节、理化性质
• 一、性状 • 香豆素化合物多为无色或浅黄色结晶 • 多数天然游离香豆素具有香味，分子量较小的还
具有挥发性和升华性 • 二、溶解性 • 游离香豆素不溶或难溶于冷水，可溶于沸水，易
溶于苯，乙醚，三氯甲烷，甲醇和乙醇。
三、 碱水解反应（内酯性质）
• 香豆素类化合物具有芳香气味，因最早从豆科植 物香豆中提取出而得名。
• 其分布广泛，在伞形科，芸香科，豆科，菊科， 兰科，茄科，木犀科，瑞香科等植物和微生物代 谢产物中多见。
补骨脂，一味中草药，为豆科植物补骨脂 的干燥成熟 果实。性味辛、苦，温；归肾、脾经
第五章苯并素类化合物香豆素详解演示文稿
第十三页，共56页。
➢ 羟基香豆素的羟基经甲醚化或非羟基
取代荧光也减弱,色调变紫.
R1
R2
O
O
R1=OH R2=OH 七叶内酯 R1=OCH3 R2=OCH3 七叶内酯二甲醚
七叶内酯
二甲醚
➢多烷基取代的呋喃香豆素类一般呈 现黄绿色或褐色荧光
第十四页，共56页。
2.显色反应* 香豆素的结构特点:
内酯结构,酚羟基
H+ Fe3+
酸性
第十七页，共56页。
C NH
OH O O
显红色
Fe/3
2.2 酚羟基反应
A 三氯化铁试剂 络合 要求: 具有酚羟基
绿色至墨绿色
B 重氮化试剂
要求: 取代酚羟基的邻对位无取代
生成红色至紫红色的偶氮染料。
第十八页，共56页。
2.3 Gibb’s反应
试剂:2,6—二氯(溴)苯醌氯亚胺，
条件:弱碱性(pH9.4)
位置:酚羟基对位的活泼氢缩合，生 成蓝色化合物.
OH
+
Cl N
pH=9 N
Br
Br
H
O
O-
第十九页，共56页。
Br O
Br
Br
N
O-
Br
O
说明:
6
HO
O
O
如果香豆素对位(C-6位)无取代基存在,可 与Gibb’s试剂反应产生蓝色
应用:香豆素分子中C-6位是否有取代基。
第二十页，共56页。
[3‘(S)-羟基, 4’(R)-当归酰氧基-线型二氢 吡喃香豆素 [3‘(S)-hydroxy, 4’(R)-angeloyloxy) linear dihydropyranocoumarin]
➢ 羟基香豆素的羟基经甲醚化或非羟基
取代荧光也减弱,色调变紫.
R1
R2
O
O
R1=OH R2=OH 七叶内酯 R1=OCH3 R2=OCH3 七叶内酯二甲醚
七叶内酯
二甲醚
➢多烷基取代的呋喃香豆素类一般呈 现黄绿色或褐色荧光
第十四页，共56页。
2.显色反应* 香豆素的结构特点:
内酯结构,酚羟基
H+ Fe3+
酸性
第十七页，共56页。
C NH
OH O O
显红色
Fe/3
2.2 酚羟基反应
A 三氯化铁试剂 络合 要求: 具有酚羟基
绿色至墨绿色
B 重氮化试剂
要求: 取代酚羟基的邻对位无取代
生成红色至紫红色的偶氮染料。
第十八页，共56页。
2.3 Gibb’s反应
试剂:2,6—二氯(溴)苯醌氯亚胺，
条件:弱碱性(pH9.4)
位置:酚羟基对位的活泼氢缩合，生 成蓝色化合物.
OH
+
Cl N
pH=9 N
Br
Br
H
O
O-
第十九页，共56页。
Br O
Br
Br
N
O-
Br
O
说明:
6
HO
O
O
如果香豆素对位(C-6位)无取代基存在,可 与Gibb’s试剂反应产生蓝色
应用:香豆素分子中C-6位是否有取代基。
第二十页，共56页。
[3‘(S)-羟基, 4’(R)-当归酰氧基-线型二氢 吡喃香豆素 [3‘(S)-hydroxy, 4’(R)-angeloyloxy) linear dihydropyranocoumarin]
中药化学香豆素类化学成分的提取分离技术资料PPT讲义
残留物
黄色粗品 甲醇－水重结晶
七叶内酯
实训 秦皮中七叶苷和七叶内酯的提取、分离和鉴定
• 【实训目的】 1.能够运用回流和连续回流法、减压浓缩 法对秦皮中七叶苷和七叶内酯进行提取和精制。 2.会用显色反应、色谱法进行香豆素类成分的检识。
• 【化学成分概述】秦皮为木樨科植物白蜡树、苦枥白蜡树、 尖叶白蜡树、宿柱白蜡树的干燥枝皮或干皮。秦皮主要含 七叶内酯、七叶苷、秦皮素、秦皮苷等，结构见前述。
进一步分离
香豆素苷类
单体（亲脂性香豆素）
2、水蒸气蒸馏法
某些小分子的香豆素类具挥发性可用蒸馏法与不 挥发性成分分离，常用于纯化过程。
3、碱溶酸沉法
此系经典方法。 1.具酚羟基的香豆素类溶于碱液加酸后可析出。 2.香豆素的内酯环性质，于碱液中皂化成盐而加酸后恢复成内
酯析出。
碱液加热开环时，要注意碱液 的浓度和加热时间，否则将引起降 解反应而使香豆素破坏，或者使香 豆素开环而不能合环。 对酸碱敏感 的香豆素用此法可能得到次生产物。
香豆素内酯环发生碱水解的速度主要与 C7位取代基的性质有关。
（四）荧光性
香豆素母体本身即无取代的香豆素并无荧光。羟 基香豆素类化合物在紫外光下大多显蓝色或蓝绿色荧 光，在碱液中更加显著，尤其是C7羟基香豆素，甚至 在日光下也可辨认。若在C8或C6再引入羟基，则荧光 减弱。引入甲氧基后荧光也将减弱，颜色转变为紫色。
C4上常有苯基、羟基、异戊烯基等取代。 C3苯代香豆素生源同黄酮。
茵陈蒿
生理活性
1.毒性：肝毒性 。必要结构：呋喃环上的双键和不饱和
内酯环。
2. 抗菌作用：秦皮中的七叶内酯和七叶内酯苷具抑制痢疾
杆菌的作用。补骨脂内酯具抗真菌及抗结核活性。
黄色粗品 甲醇－水重结晶
七叶内酯
实训 秦皮中七叶苷和七叶内酯的提取、分离和鉴定
• 【实训目的】 1.能够运用回流和连续回流法、减压浓缩 法对秦皮中七叶苷和七叶内酯进行提取和精制。 2.会用显色反应、色谱法进行香豆素类成分的检识。
• 【化学成分概述】秦皮为木樨科植物白蜡树、苦枥白蜡树、 尖叶白蜡树、宿柱白蜡树的干燥枝皮或干皮。秦皮主要含 七叶内酯、七叶苷、秦皮素、秦皮苷等，结构见前述。
进一步分离
香豆素苷类
单体（亲脂性香豆素）
2、水蒸气蒸馏法
某些小分子的香豆素类具挥发性可用蒸馏法与不 挥发性成分分离，常用于纯化过程。
3、碱溶酸沉法
此系经典方法。 1.具酚羟基的香豆素类溶于碱液加酸后可析出。 2.香豆素的内酯环性质，于碱液中皂化成盐而加酸后恢复成内
酯析出。
碱液加热开环时，要注意碱液 的浓度和加热时间，否则将引起降 解反应而使香豆素破坏，或者使香 豆素开环而不能合环。 对酸碱敏感 的香豆素用此法可能得到次生产物。
香豆素内酯环发生碱水解的速度主要与 C7位取代基的性质有关。
（四）荧光性
香豆素母体本身即无取代的香豆素并无荧光。羟 基香豆素类化合物在紫外光下大多显蓝色或蓝绿色荧 光，在碱液中更加显著，尤其是C7羟基香豆素，甚至 在日光下也可辨认。若在C8或C6再引入羟基，则荧光 减弱。引入甲氧基后荧光也将减弱，颜色转变为紫色。
C4上常有苯基、羟基、异戊烯基等取代。 C3苯代香豆素生源同黄酮。
茵陈蒿
生理活性
1.毒性：肝毒性 。必要结构：呋喃环上的双键和不饱和
内酯环。
2. 抗菌作用：秦皮中的七叶内酯和七叶内酯苷具抑制痢疾
杆菌的作用。补骨脂内酯具抗真菌及抗结核活性。
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说明：中药制剂成分复杂，可先用薄层 色谱分离，在紫外灯下荧光定位，找出香 豆素成分，将其吸附层刮下，用适宜溶剂 洗脱，再加入重氮化试剂，进行比色测定。 如健腰丸中补骨脂素、异补骨脂素的测定。 但应同时进行空白试验及净化回收率实验。
荧光光度法
羟基香豆素成分大多能产生强烈荧光， 用荧光光度计进行荧光测定有较高的灵敏 度及选择性。当干扰成分较多时，可先用 色谱法净化。
理化性质
荧光反应
（1）香豆素母核无荧光，呋喃香豆素荧光弱 （2）羟基香豆素成蓝色荧光，7-OH荧光最强 （3）加OH-，羟基香豆素荧光增强 （4）7-OH香豆素，6或8位有取代，荧光减弱 （5）7-OH香豆素醚化、酯化、酰化，荧光减弱
理化性质
光谱特征（紫外）
➢母核上无含氧官能团取代时 274nm——苯环 311nm——α，β-不饱和内酯
香豆素类化合物广泛分布于高等植物中， 特别是伞形科,芸香科等，在生物体内多以 游离形式或苷的形式存在。
香豆素的作用
• 1、消炎 • 2、利胆 • 3、镇咳 • 4、吸收紫外线 • 5、抗辐射
………
➢（一）结构类型 ➢（二）理化性质 ➢（三）鉴别 ➢（四）含量测定
结构类型
简单香豆素 呋喃香豆素 吡喃香豆素 其他香豆素
异香豆素 有取代的香豆素 二聚体和三聚体
结构类型
七叶内酯 （简单香豆素）
结构类型
呋喃香豆素
吡喃香豆素
结构类型
其他香豆素 仙鹤草内酯（异香豆素）
异七叶内酯（二聚体） 双香豆素
理化性质
➢ 一、物理性质 ➢ 二、化学性质 ➢ 三、荧光特征 ➢ 四、光谱特征
物理性质
性状： ➢ 游离香豆素多有完好的结晶、固定的熔
分光光度法
➢利用香豆素类成分的显色反应进行比色测定。 举例：补骨脂素注射液的含量测定，可在样品 中加入重氮化试剂，生成紫色偶氮染料，于 580nm处测定含量。
➢ 利用香豆素类成分都具有紫外吸收，样品较 纯时，也可进行分光光度法测定。 举例：消痔液中补骨脂素的测定，检测波长 246nm。
分光光度法
荧光法
荧光法是利用羟基香豆素大多能产生荧 光，可直接观察提取溶液的荧光，也可观 察薄层荧光斑点
薄层色谱法（首选）
薄层色谱法也是利用香豆素大多具有荧 光用薄层色谱法进行鉴别。（PS：不具荧 光或荧光强度较弱的香豆素，可用喷显色 剂或喷碱溶液以增强荧光再进行鉴识）
香豆素鉴别举例
课本P148 例15 七宝美髯颗粒中补骨脂素，异补骨脂素的 鉴别就是利用薄层色谱法供试品溶液和对 照品溶液显相同颜色而进行鉴别。
七宝美髯颗粒中补骨脂素、异补 骨脂素的鉴别
• 组成：何首乌（制）、当归、补骨脂、枸 杞子等
• 鉴别： （1）供试品制备：取本品10g，研细，加乙
酸乙酯20ml，盐酸0.5ml，超声处理20min， 滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯0.5ml使 溶解，作为供试品溶液。
（2）对照品溶液制备：另取补骨脂素、异补 骨脂素对照品，加乙酸乙酯分别制成每1ml 含2mg的溶液，作为对照品溶液。
香豆素类成分分析
王林艳（043007121） 黄 宏（043007122） 徐艺铨（043007123） 梅 琪（043007124） 贡 磊（043007125）
香豆素定义
香豆素是一类具有苯骈α-吡喃酮环结构 的化合物，从结构上可看作是由顺式邻羟 基桂皮酸脱水缩合而成的内酯。
香豆素的分布
（偶氮染料衍生物’s反应和Emerson反应
条件：有游离酚羟基且对位无取代基 原理：试剂与酚羟基对位活泼氢缩合 试剂： Gibb’s——2,6-二溴（氯）苯醌氯亚胺
Emerson——氨基安替匹林和铁氰化钾 颜色： Gibb’s反应——蓝色
Emerson反应——红色
（3）薄层鉴别：吸取供试品溶液5µl，两种 对照品溶液各1µl，分别点于同一硅胶G薄 层板上，以正己烷-乙酸乙酯（4：1）为展 开剂，展开，取出，晾干，喷以10%氢氧 化钾甲醇溶液，置紫外灯（365nm）下检 识。
（4）结果：在与对照品相应位置上，显相同 颜色的斑点。
香豆素的含量测定
➢（一）分光光度法 ➢（二）荧光光度法 ➢（三）薄层扫描法 ➢（四）高效液相色谱法 ➢（五）气相色谱法
➢有含氧取代 最大吸收红移-OH>-OCH3>-CH3
➢7位有含氧取代 最大吸收峰红移至315-325nm
理化性质
香豆素的鉴别
➢ （一）化学反应法 ➢ （二）荧光法 ➢ （三）薄层色谱法
化学反应法
化学反应法即是利用上述显色方法（如 异羟肟酸铁反应，三氯化铁反应，重氮化 反应等）进行成分显色鉴别。
理化性质
化学性质
与碱反应 异羟肟酸铁反应 三氯化铁反应
显色反应 Gibb’s反应 Emerson反应 重氮化反应
理化性质
与碱反应
理化性质
显色反应
（香1）豆异素羟O肟H-酸开铁环反盐应缩酸合羟胺
异羟肟酸H+ 显红色
Fe3+
（2）三氯化铁反应
酚羟基+FeCl3 络合 兰绿色或棕色
（3）重氮化反应
酚羟基对位无取代+重氮化试剂 红色或紫色
• 常用固定相：十八烷基硅烷键和硅胶 • 常用流动相：不同比例的甲醇-水 • 举例：补骨脂素，欧前胡素，蛇床子素，
白花前胡甲素。
气相色谱法
• 某些相对分子质量小，具有挥发性的香豆 素类成分。可用气相色谱法测定（如蛇床 子素，香柑内素，花椒毒素，花椒毒酚等）
• 常用检测器：SE-30石英毛细管柱，氢火焰 离子化检测器。
点、芳香性气味。小分子游离香豆素尚具 有挥发性和升华性，能随水蒸气蒸馏。 ➢ 香豆素苷类无香味、挥发性和升华性。
理化性质
物理性质
溶解性
游离香豆素多为亲脂性化合物，一般不 溶或难溶于水，易溶于苯、乙醚、三氯甲 烷和甲醇、乙醇等有机溶剂（相对分子量 较小的游离香豆素可溶于沸水）
香豆素苷能溶于水、甲醇、乙醇，难溶 于苯、乙醚等极性小的有机溶剂
薄层扫描法
样品经薄层分离后，于荧光灯下定位， 利用香豆素类成分具有紫外吸收或能产生 荧光的特性，不经显色，直接进行荧光扫 描测定。举例：复方制剂中补骨脂素，异 补骨脂素，白瑞香素，欧前胡素等。
高效液相色谱法
• 由于香豆素类成分含有芳香环及其他共轭 结构，用高效液相色谱法测定，紫外检测 器检测，有较高灵敏度。
荧光光度法
羟基香豆素成分大多能产生强烈荧光， 用荧光光度计进行荧光测定有较高的灵敏 度及选择性。当干扰成分较多时，可先用 色谱法净化。
理化性质
荧光反应
（1）香豆素母核无荧光，呋喃香豆素荧光弱 （2）羟基香豆素成蓝色荧光，7-OH荧光最强 （3）加OH-，羟基香豆素荧光增强 （4）7-OH香豆素，6或8位有取代，荧光减弱 （5）7-OH香豆素醚化、酯化、酰化，荧光减弱
理化性质
光谱特征（紫外）
➢母核上无含氧官能团取代时 274nm——苯环 311nm——α，β-不饱和内酯
香豆素类化合物广泛分布于高等植物中， 特别是伞形科,芸香科等，在生物体内多以 游离形式或苷的形式存在。
香豆素的作用
• 1、消炎 • 2、利胆 • 3、镇咳 • 4、吸收紫外线 • 5、抗辐射
………
➢（一）结构类型 ➢（二）理化性质 ➢（三）鉴别 ➢（四）含量测定
结构类型
简单香豆素 呋喃香豆素 吡喃香豆素 其他香豆素
异香豆素 有取代的香豆素 二聚体和三聚体
结构类型
七叶内酯 （简单香豆素）
结构类型
呋喃香豆素
吡喃香豆素
结构类型
其他香豆素 仙鹤草内酯（异香豆素）
异七叶内酯（二聚体） 双香豆素
理化性质
➢ 一、物理性质 ➢ 二、化学性质 ➢ 三、荧光特征 ➢ 四、光谱特征
物理性质
性状： ➢ 游离香豆素多有完好的结晶、固定的熔
分光光度法
➢利用香豆素类成分的显色反应进行比色测定。 举例：补骨脂素注射液的含量测定，可在样品 中加入重氮化试剂，生成紫色偶氮染料，于 580nm处测定含量。
➢ 利用香豆素类成分都具有紫外吸收，样品较 纯时，也可进行分光光度法测定。 举例：消痔液中补骨脂素的测定，检测波长 246nm。
分光光度法
荧光法
荧光法是利用羟基香豆素大多能产生荧 光，可直接观察提取溶液的荧光，也可观 察薄层荧光斑点
薄层色谱法（首选）
薄层色谱法也是利用香豆素大多具有荧 光用薄层色谱法进行鉴别。（PS：不具荧 光或荧光强度较弱的香豆素，可用喷显色 剂或喷碱溶液以增强荧光再进行鉴识）
香豆素鉴别举例
课本P148 例15 七宝美髯颗粒中补骨脂素，异补骨脂素的 鉴别就是利用薄层色谱法供试品溶液和对 照品溶液显相同颜色而进行鉴别。
七宝美髯颗粒中补骨脂素、异补 骨脂素的鉴别
• 组成：何首乌（制）、当归、补骨脂、枸 杞子等
• 鉴别： （1）供试品制备：取本品10g，研细，加乙
酸乙酯20ml，盐酸0.5ml，超声处理20min， 滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯0.5ml使 溶解，作为供试品溶液。
（2）对照品溶液制备：另取补骨脂素、异补 骨脂素对照品，加乙酸乙酯分别制成每1ml 含2mg的溶液，作为对照品溶液。
香豆素类成分分析
王林艳（043007121） 黄 宏（043007122） 徐艺铨（043007123） 梅 琪（043007124） 贡 磊（043007125）
香豆素定义
香豆素是一类具有苯骈α-吡喃酮环结构 的化合物，从结构上可看作是由顺式邻羟 基桂皮酸脱水缩合而成的内酯。
香豆素的分布
（偶氮染料衍生物’s反应和Emerson反应
条件：有游离酚羟基且对位无取代基 原理：试剂与酚羟基对位活泼氢缩合 试剂： Gibb’s——2,6-二溴（氯）苯醌氯亚胺
Emerson——氨基安替匹林和铁氰化钾 颜色： Gibb’s反应——蓝色
Emerson反应——红色
（3）薄层鉴别：吸取供试品溶液5µl，两种 对照品溶液各1µl，分别点于同一硅胶G薄 层板上，以正己烷-乙酸乙酯（4：1）为展 开剂，展开，取出，晾干，喷以10%氢氧 化钾甲醇溶液，置紫外灯（365nm）下检 识。
（4）结果：在与对照品相应位置上，显相同 颜色的斑点。
香豆素的含量测定
➢（一）分光光度法 ➢（二）荧光光度法 ➢（三）薄层扫描法 ➢（四）高效液相色谱法 ➢（五）气相色谱法
➢有含氧取代 最大吸收红移-OH>-OCH3>-CH3
➢7位有含氧取代 最大吸收峰红移至315-325nm
理化性质
香豆素的鉴别
➢ （一）化学反应法 ➢ （二）荧光法 ➢ （三）薄层色谱法
化学反应法
化学反应法即是利用上述显色方法（如 异羟肟酸铁反应，三氯化铁反应，重氮化 反应等）进行成分显色鉴别。
理化性质
化学性质
与碱反应 异羟肟酸铁反应 三氯化铁反应
显色反应 Gibb’s反应 Emerson反应 重氮化反应
理化性质
与碱反应
理化性质
显色反应
（香1）豆异素羟O肟H-酸开铁环反盐应缩酸合羟胺
异羟肟酸H+ 显红色
Fe3+
（2）三氯化铁反应
酚羟基+FeCl3 络合 兰绿色或棕色
（3）重氮化反应
酚羟基对位无取代+重氮化试剂 红色或紫色
• 常用固定相：十八烷基硅烷键和硅胶 • 常用流动相：不同比例的甲醇-水 • 举例：补骨脂素，欧前胡素，蛇床子素，
白花前胡甲素。
气相色谱法
• 某些相对分子质量小，具有挥发性的香豆 素类成分。可用气相色谱法测定（如蛇床 子素，香柑内素，花椒毒素，花椒毒酚等）
• 常用检测器：SE-30石英毛细管柱，氢火焰 离子化检测器。
点、芳香性气味。小分子游离香豆素尚具 有挥发性和升华性，能随水蒸气蒸馏。 ➢ 香豆素苷类无香味、挥发性和升华性。
理化性质
物理性质
溶解性
游离香豆素多为亲脂性化合物，一般不 溶或难溶于水，易溶于苯、乙醚、三氯甲 烷和甲醇、乙醇等有机溶剂（相对分子量 较小的游离香豆素可溶于沸水）
香豆素苷能溶于水、甲醇、乙醇，难溶 于苯、乙醚等极性小的有机溶剂
薄层扫描法
样品经薄层分离后，于荧光灯下定位， 利用香豆素类成分具有紫外吸收或能产生 荧光的特性，不经显色，直接进行荧光扫 描测定。举例：复方制剂中补骨脂素，异 补骨脂素，白瑞香素，欧前胡素等。
高效液相色谱法
• 由于香豆素类成分含有芳香环及其他共轭 结构，用高效液相色谱法测定，紫外检测 器检测，有较高灵敏度。