生物化学实验课件概要
《生物化学大实验》课件
分子生物学基本概念
深入探究DNA和RNA的功能及其在遗传学中的 应用，以及基因转录和翻译的分子机制。
蛋白质的结构和功能
探究蛋白质的三级结构，以及它们在细胞代谢过 程中所扮演的角色和功能。
样本制备
1
样本收集
收集到分离它们所需要细胞结构。
2 个人在实验中的收获
分享个人在实验中收获的方面，包括技能和知识的提高以及更广泛的收获。
3 对未来实验的展望
展望未来实验中可能遇到的挑战，提供有效的解决方案。
生物化学大实验
欢迎来到《生物化学大实验》PPT课件。本课程将介绍生物化学和分子生物 学的概念，酶的作用及机制，以及蛋白质的结构和功能。我们还将深入了解 实验过程并分享实验的结果和分析。
知识点介绍
生物化学基本概念
了解生物大分子，如蛋白质、核酸等的组成和结 构，以及它们在生命活动过程中的作用。
酶的作用及机制
细胞破碎液制备
2
将细胞破碎并加入含有缓冲液的溶液中。
3
离心和裂解
使用高速离心机离心裂。
利用生物化学技术从混合物中纯化蛋白 质。
蛋白质检测
Lowry方法
利用此化学方法可测定样品中蛋 白的含量。
Bradford方法
此方法是结合了蛋白质与染料结 合的测量方法。
BCA法
BCA法是利用氢氧化物还原双烷 基四氯化钴为蓝色络合物，来测 定蛋白质的含量。
酶活性测定
酶促反应原理
明白酶对催化反应的影响以及如何准确测定酶的含量。
酶活性的测定方法
学习测量酶活性的几种标准方法，并了解如何选择最佳方法。
酶的特定测量
生物化学试验基础PPT课件
（3）吸收曲线可以提供物质的结构信息，并作为 学习设计或验证一个试(实)验的基本思路，掌握各个实验的基本原理，学会严密地组织自己的实验，合理地安排实验步骤和时间。
以λ~A作图 最常用的目视比色法是标准系列法:
5 实验须知
实验前应作好预习，认真阅读实验指导。明 确实验目标，能简述实验内容及主要的操作 步骤。
实验过程中，应根据实验指导及老师的要求， 认真操作，细心观察，如实记录。严禁捏造 实验数据，提倡实事求是的科学态度，实验 做错应要求重做，反对弄虚作假。
实验结束后，要认真书写实验报告，及时交 老师批阅。
当一束平行单色光通过含有吸光物质的稀溶液时溶液的吸光度与吸光吸光物质的稀溶液时溶液的吸光度与吸光物质浓度液层厚度乘积成正比即物质浓度液层厚度乘积成正比即式中比例常数式中比例常数kk吸光系数吸光系数与吸光物质的本与吸光物质的本性入射光波长性入射光波长单色光纯度单色光纯度及温度等因素有及温度等因素有c为吸光物质浓度为吸光物质浓度ll为透光液层厚度
•测定方法 吸收入射光中特定波长的光而产生的吸收光谱。
值日生要负责打扫实验室的卫生，整理实验室。 去离子水不是没有离子的水，而是经过离子交换得到的没有干扰离子，PH值中性的水，干扰离子一般指钙、镁、碳酸根、硫酸根等， 但是去离子水一般含有的有机物质是不能去除的。
通过测定被测物质对不同波长的光的吸收强度（吸光度），以波长为横坐标，吸光度为纵坐标作图，得出该物质在测定波长范围的吸 收曲线。 在吸收曲线中，通常选用最大吸收波长λmax进行物质含量的测定。
图示
吸收曲线的讨论：
（1）一种吸光物质对不同波长的光吸收程度不同。
《生物化学实验指导》课件
实验操作问题
实验设备使用不当，导致设备损 坏或实验失败。
解决方法
加强实验材料管理，确保学生正 确使用和管理实验材料。
实验操作问题
实验材料管理不善，导致实验结 果受影响。
解决方法
提供设备使用说明和注意事项， 确保学生正确使用设备。
实验结果异常分析与处理
异常分析
01 实验结果与预期不符，可能存
在误差或错误。
01
02
03
实验技术原理
介绍实验所涉及的基本原 理，包括生物学、化学和 物理学原理等。
实验步骤
详细描述实验的操作流程 ，包括实验前的准备、实 验操作步骤、实验后处理 等。
注意事项
提醒实验中需要注意的事 项，以确保实验的准确性 和安全性。
实验数据分析与处理
数据收集
说明如何收集实验数据， 包括仪器的使用和数据的 记录等。
按照指导老师的安排进行实验 操作，不得擅自更改实验步骤
或使用未经批准的试剂
爱护实验室设备和器材，保持 实验室卫生整洁
02
生物化学实验基本操作
实验器材介绍与使用
实验器材
介绍生物化学实验中常用的实验 器材，如烧杯、量筒、滴管、离 心管等，并说明其用途和特点。
使用方法
详细介绍各种实验器材的使用方 法和注意事项，确保学生正确使 用，避免因操作不当造成实验误 差或安全事故。
04
生物化学实验案例分析
案例一：DNA提取与鉴定
总结词
基础实验，了解DNA提取与鉴定的基本原理和操作步骤。
详细描述
本案例介绍了DNA提取与鉴定的基本原理、实验材料、操作步骤、注意事项和 实验结果分析，旨在让学生了解DNA提取与鉴定的基本过程，掌握相关的实验 技能。
《生物化学实验》PPT课件
完整版课件ppt
24
四.几种常见电泳的比较
类型
优点
缺点
纸电泳
设备操作简单
分辨率差，电渗现 象
醋酸纤维薄膜电 设备操作简单，样品
泳
用量少
分辨率差
琼脂糖凝胶电泳 快速，分辨率高
电渗现象严重
聚丙烯酰胺凝胶 电泳
可调节凝胶孔径，样 品用量少分辨率高，
无电渗现象
高浓度凝胶难剥离
完整版课件ppt
25
五.聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳原理
A.凝胶层的不连续性
浓缩胶T=2.8％ C=20%；分离胶T=7％ C=2.5%
B.缓冲液成分的不连续性：
凝胶缓冲液Tris-HCl,含Cl－，电极缓冲液Tris-Gly,Gly
－
C.pH的不连续性：
浓缩胶pH6.7,分离胶pH8.9，电极缓冲液pH8.3
D.电位梯度的不连续性
完整版课件ppt
30
五. 盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳原理 （2）盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳的三种效应
样品的浓缩效应
电荷效应
分子筛效应
完整版课件ppt
31
A. 样品的浓缩效应
缓冲液成分及pH的不连续性 浓缩胶pH6.7 缓冲液 浓缩胶Tris-HCl, 电极缓冲液Tris-Gly
解离度 ：Cl> 蛋> Gly mcl cl>m蛋 蛋>m Gly Gly 凝胶中Cl－为快离子， Gly－为慢离子，
蛋白质从“－”极向“＋”极移 动，从浓缩胶进入分离胶，速 度变慢，堆积浓缩。
完整版课件ppt
缓冲 液
浓缩胶 分离胶
40
B.电荷效应
蛋白质样品进入分离胶后 pH增大(pH 8.9)，Gly－解离度增 大，不存在快、慢离子之分， 蛋白质样品在均一电场强度和 pH条件下泳动。
《医学生物化学实验教学课件》
氨基酸与肽的分离与鉴定实验
1
离心列管分离样品
使用离心列管从生物样品中分离出氨
薄层层析法鉴定氨基酸
2
基酸和肽。
讲解薄层层析法如何鉴定单一氨基酸。
3
氨基酸序列分析
利用比色法、高效液相色谱和质谱等 技术鉴定氨基酸序列。
糖代谢实验——酶学测定葡萄糖含量
建立标准曲线
演示如何利用葡萄糖溶液 建立标准曲线。
测定实验组织样品
详细介绍如何利用酶学方 法测定组织中的葡萄糖含 量。
数据处理
演示如何使用图表依据标 准曲线计算实验组织样品 的葡萄糖含量。
酶促反应实验——测定酶速率
酶促反应实验
讲解如何利用不同浓度的酶测 定其有效分子数、活性和相对 速率。
图像识别处理
利用Python编程语言和人工智 能技术，分析实验结果和清晰 图像。
医学生物化学实验教学课 件
本课程将介绍医用生物化学实验的基本概念、常见的实验技术及器材，并详 细讲解每项实验的步骤和注意事项。
实验器材与操作流程
精密仪器
讲解实验中所使用的精密仪器 和其操作方法。
实验器材
介绍实验中常见的器材及其使 用。
笔记技巧
给出笔记时需要注意的几个技 巧，帮助学生高效记录实验过 程。
免疫学实验——蛋白质印迹法测定蛋白质 的表达
1
制备SDS-PAGE胶及渍液
演示如何制备SDS-PAGE胶及渍液。
电泳采样及印迹法膜制备
2
详细讲解如何进行电泳采样以及如何
制备和激发印迹法膜。介绍如何进行探针标记、杂交检测以 及如何成像和定量分析实验结果。
蛋白质结构分析实验——SDS-PAGE
分析实验结果
解释实验数据的数值含义，让 学生深入理解酶的活性变化规 律。
《生物化学实验教案》课件
《生物化学实验教案》课件第一章：生物化学实验基本原理1.1 实验目的了解生物化学实验的基本原理和方法，掌握实验操作技巧。
1.2 实验原理介绍生物化学实验的基本原理，如光谱原理、色谱原理、电泳原理等。
1.3 实验材料与仪器列出实验所需的材料和仪器，并进行详细介绍。
1.4 实验步骤详细描述实验操作步骤，包括样品处理、实验过程和结果分析。
1.5 实验注意事项提醒实验过程中需要特别注意的事项，以确保实验顺利进行。
第二章：蛋白质实验2.1 实验目的学习蛋白质的提取、分离和纯化，了解蛋白质的性质。
2.2 实验原理介绍蛋白质提取、分离和纯化的原理，如盐析、凝胶色谱等。
2.3 实验材料与仪器列出实验所需的材料和仪器，并进行详细介绍。
2.4 实验步骤详细描述实验操作步骤，包括样品处理、实验过程和结果分析。
2.5 实验注意事项第三章：酶实验3.1 实验目的学习酶的活力测定和性质研究，了解酶的作用机制。
3.2 实验原理介绍酶活力测定和性质研究的基本原理，如动力学方法、抑制剂作用等。
3.3 实验材料与仪器列出实验所需的材料和仪器，并进行详细介绍。
3.4 实验步骤详细描述实验操作步骤，包括样品处理、实验过程和结果分析。
3.5 实验注意事项提醒实验过程中需要特别注意的事项，以确保实验顺利进行。
第四章：糖类实验4.1 实验目的学习糖类的提取、分离和鉴定，了解糖类的性质和功能。
4.2 实验原理介绍糖类提取、分离和鉴定的原理，如糖的降解、糖醇的鉴定等。
4.3 实验材料与仪器列出实验所需的材料和仪器，并进行详细介绍。
4.4 实验步骤详细描述实验操作步骤，包括样品处理、实验过程和结果分析。
4.5 实验注意事项第五章：脂质实验5.1 实验目的学习脂质的提取、分离和鉴定，了解脂质的性质和功能。
5.2 实验原理介绍脂质提取、分离和鉴定的原理，如脂质的水解、脂肪酸的鉴定等。
5.3 实验材料与仪器列出实验所需的材料和仪器，并进行详细介绍。
5.4 实验步骤详细描述实验操作步骤，包括样品处理、实验过程和结果分析。
生物化学试验课件
目录
实验一 氨基酸的分离鉴定——纸层析法 (操作性) 4学时 实验二 考马斯亮蓝结合法测定蛋白质浓度 (操作性) 3学时 实验三 血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳 (验证性) 5学时 实验四 动物肝肝脏DNA的分离与鉴定 (操作性) 3学时 实验五 血液中葡萄糖的测定 (操作性) 3学时 实验六 血清中总胆固醇的测定 (操作性) 4学时 实验七 唾液淀粉酶活性的观察 (综合性) 4学时 实验八 维生素C的定量测定 (操作性) 4学时 实验九 脂肪酸的β-氧化 (操作性) 4学时
【注意事项】
1．醋酸纤维素薄膜的质量对结果影响很大，最好选用 同一批号、薄膜厚度均匀、质量良好的醋酸纤维素薄膜。 2．血清或其他电泳样品应新鲜。 3．点样应细窄、均匀、集中。点样量不宜过多，点样 位置要合适。 4．盐桥要放置平整，保证电场均匀。 5．电泳槽盖应密封，盖内空间不宜过大。 6．较低温度下电泳一般能获得较好的图谱，故室温不 宜过高。 7．选择合适的缓冲液离子强度。
【实验步骤】
1．薄膜准备 2．点样
3．电泳
4．染色和漂洗 +
白蛋白(A)
α2
β
γ
α1
5．薄膜和透明
6．定量
（1）洗脱法
每种蛋白占总蛋白量的
百分数（%）
该种蛋白管光密度读数 各管光密度读数之和
100 %
注意！白蛋白因加入NaOH的量比其他管多，其光密度值 应乘以稀释倍数，得到数值再代入上式中计算。
8．两电泳槽内缓冲液面应在同一水平。 9．要控制好电流，电压和电泳时间。 10．电泳槽内缓冲液可以多次使用。但操作时应尽量减 少缓冲液的污染、水分蒸发、pH及离子强度的改变， 并应防止霉菌的滋长。 11．染色、漂洗及洗脱时间要控制好，才能获得重复性 良好的定量结果。
临床生物化学检验实验课件
实验室评估指标体系建立
评估指标的选择
根据实验室工作特点和质量控制要求，选择具有代表性的指标，如实验结果的准确性、精 密度、可比性等。
评估方法的确定
采用定量和定性相结合的方法，对各项指标进行客观、公正的评价。例如，通过计算标准 差、变异系数等统计量来评价实验结果的精密度；通过比对实验、方法学评价等手段来评 价实验结果的准确性。
排除检测误差、个体差异等因素， 确认结果是否真实异常。
分析异常原因
结合患者临床表现、病史等信息， 分析异常结果的可能原因。
进一步检查建议
根据异常结果及其可能原因，提 出进一步检查以明确诊断的建议。
临床案例讨论
案例选择
选择具有代表性的临床案例，涉及不同疾病类型、不同生化指标异 常等。
案例讨论
分析案例中的异常生化指标，讨论其可能原因、诊断意义及治疗方 案。
实验室安全是实验工作的重要保障， 必须严格遵守实验室安全规定，注意 防火、防爆、防毒、防辐射等安全事 项。
实验过程中应穿戴实验服和防护用品， 避免直接接触有毒有害物质，注意个 人卫生和实验废弃物的处理。
实验前应认真检查实验仪器和试剂是 否完好，熟悉实验操作流程和注意事 项，确保实验过程的安全和顺利进行。
05 实验结果解读与临床应用
正常参考范围及意义
正常参考范围的确定
基于大量健康人群的检测数据，采用统计学方法确定。
正常参考范围的意义
为临床诊断和治疗提供依据，帮助医生判断患者生化指标是否正常。
注意事项
不同实验室、不同检测方法可能有不同的正常参考范围，需结合具 体情况进行解读。
异常结果分析思路
确认异常结果
根据实验需求选择合适的 样本类型，如血液、尿液、 组织液等。
生物化学实验课件
通过转氨基作用形成的氨基酸可通过展层层析检测。氨基酸的纸层析属 于分配层析，滤纸为支持介质，滤纸上所吸附的水为固定相，有机溶剂
为流动相。把混合氨基酸样品点于滤纸上，使流动相经样品点移动，混 合氨基酸在两相溶剂间进行分配，在固定相中分配比例较大的氨基酸， 随流动相移动的速度慢；在流动相中分配比例较大的氨基酸，随流动相 移动的速度快。由于各种氨基酸的分配系数不同，在一定时间内，逐渐 集中于滤纸上不同的部位，而彼此分离。层析完毕后显色，使氨基酸显 色形成斑点。
18
3.仪器、试剂和材料 4. 操作步骤
具体参见实验指导书
19
5. 结果处理
根据所测样品提取液吸光值，在标准曲线上查得 相应的蛋白质含量（μg），按下式计算：
样品蛋白 (g质 /鲜 g含 )重 查 样 量得 品(的 鲜 g)测 蛋 重( 定 白 g )提 时 质取 取 含液 用 量((m 总 提 m )ll体 取 ) 积 液
6. 注意事项
比色应在出现蓝色后2min~1h内完成。
20
7. 思考题
1）考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量的 原理是什么？
2）如何正确使用分光光度计？
3）测定蛋白质含量还有哪些方法，测定原理 有哪些不同？
21
酶的基本性质
1.目的 酶是生物催化剂，是具有催化功能的蛋白质，
生物体内的化学反应基本上都是在酶催化下 进行的。通过本实验了解酶催化的高效性、 特异性以及pH、温度、抑制剂和激活剂对 酶力的影响，对于进一步掌握代谢反应及其 调控机理具有十分重要的意义。
5
2.1氨基酸的两性解离和等电点
2.1.1 氨基酸的两性解离
H 3 N + C RC HO K 1H O ' 3 N + C R H C H-O K 2H ' 2 O N C RC H-O
《生物化学实验技术》PPT课件
哪些？
（2）盐析的影响因素
蛋白质的浓度 、盐浓度、 pH 值、温度等。
本实验球蛋白在半饱和硫酸铵溶液 中沉淀而清蛋白溶解，γ-球蛋白在 33%浓度的硫酸铵溶液中沉淀。
2.层析：
待分离蛋白质溶液（流动相）经过一个固态物质（固定相） 时，根据溶液中待分离的蛋白质颗粒大小、电荷多少及 亲和力等，使待分离的蛋白质组分在两相中反复分配， 并以不同速度流经固定相而达到分离蛋白质的目的。
3．染色：2-5 min； 4. 脱色：直至背景漂净为止。
【实验结果】
根据电泳区带出现的位置和条数判 断是何种血清蛋白，如果只是一条 γ-蛋白说明上个实验分离纯化的较 好。
【实验注意事项】
1．不要用手触摸纤维素膜； 2．注意区分醋酸纤维素薄膜的光面和毛
面； 3．点样位置要在1.5厘米以内，不要距边缘
2.无蛋白血滤液的制备原理
COOH
2R
+ H2WO4
NH2
COOH
R
WO4
NH2 2
此方法是生物碱沉淀蛋白质
沉淀蛋白质 的方法还有
哪些？
3.利用吴宪氏法测定血糖的原理
G + Cu2+ OH-
△
Cu2O
+糖氧化物
3Cu2O +3H3PO4.2MO3.12H2O
6CuO +
3H3PO4.2MO2O3.12H2O
【注意事项】
• 1．本实验所用各种玻璃仪器必须洗净烤干后备用。 • 2．各种试剂的加入量要准确。 • 3．严格掌握加入酶液后的保温时间，否则会影响其
产物量的准确度
【思考题】
• 1．为何可以酶活性单位代表酶促反应速度？ • 2．酶促反应的影响因素有哪些？ • 3．何为Km值？如何测定一个酶的Km值？
生物化学实验课件ppt课件
（9）如有突发事件（起火、试剂腐蚀伤人）发生，不要惊 慌失措，应妥善处置（使用灭火机、关闭电源等）。
实验一 糖类的性质实验
ppt课件
9
糖类的重要鉴别方法是 Ｍｏｌｉｓｈ反应和Ｓｅｌｉ ｗａｎｏｆｆ反应。糖类、苷类及其他含糖物质与α 萘酚和 浓硫酸呈紫红色的环的反应称为 Ｍｏｌｉｓｈ反应，该反应 可用于糖类和非糖物质的鉴别。酮糖糖加入间苯二酚和６ｍ ｏｌ／Ｌ盐酸能产生红色的反应称为Ｓｅｌｉｗａｎｏｆｆ 反应，该反应可用于酮糖和醛糖的鉴别。如己酮糖加入间苯 二酚和浓盐酸，加热后迅速产生红色，而同样条件下己醛糖 的反应速度要慢得多。
ppt课件
17
四、实验步骤
1、α-萘酚反应
1%葡萄溶液
观
1%果糖溶液 各加1ml
★各加2滴
★各加1ml
察
5
记
1%蔗糖溶液
支
莫氏试剂 混
浓硫酸
录
试
各
1%淀粉溶液
管
匀
管
0.1%糠醛溶液
颜 色
ppt课件
18
Molisch反应（-萘酚反应）
界面：显色------鉴定：所有的糖类均可显色
浓H2SO4
糖 α -萘酚+酒精
ppt课件
11
一、实验目的：
1、了解糖类某些颜色反应的原理； 2、学习应用糖的颜色反应鉴别糖类的方法； 3、学习几种常用的鉴定糖类还原性的方法及
其原理。
ppt课件
12
二、实验原理
(一)颜色反应
1. α-萘酚反应
糖在浓无机酸（硫酸或盐酸）作用下，脱水生
生物化学实验设计PPT课件(初中科学)
。
实战演练：
（09杭州）某同学将生长状况类似的A、B二盆蚕豆幼苗分别置于
两个暗箱中，在B盆蚕豆幼苗的暗箱右侧开一小窗口，并在窗口外
侧装一个固定光源，保持其它环境条件适宜并相同。一星期后，
A,B两盆蚕豆幼苗的生长状况如图所示。请回答下列问题：
(1)该同学设计这一实验的目的是为了探究
单侧光对蚕豆幼苗生长的影响
（3）每组为什么要选用较多数量的胚 减少由于种子死亡 ？
或遗传差异带来的误差
实战演练：
(4）小芳同学认为叶绿素的合成除了需要镁等矿物质 元素外，还需要其他的一些环境条件。她设计了如下 表的方案。
分析小芳同学的实验设计，你认为她要研究的问题
是 叶绿素的合成是否需要光
。
根据实验设计方案提出研究问题的技能是:
。
化学实验设计和评价
❖ 化学实验设计题和实验评价题是对学生进行实验综合能力考 查的题型之一，是当前课程改革和中考所关注的热点。其命 题方式通常有：①设计反应原理 ②设计实验装置 ③设计操 作程序 ④侧重于某一要求的综合设计并含定量设计要求⑥以 批评的思想方法对所提供的实验方案进行评价。
❖ 解答实验设计题时，必须遵循“四性”：科学性、可行性、 规律性、创新性。即原理正确、操作简便、现象明显、药品 经济、结论可信、有创新意识。解答实验评价题时，要环绕 题目提供的多种方案，从原理是否科学合理、操作是否简单 可行、所用试剂是否经济、实验现象是否明显、是否体现 “绿色化学”等方面进行评价。
不同浓度的重金属污染液中的种子萌发率都比
蒸馏水中的低，幼苗根长也较短。随着重金属浓度 的升高，种子萌发率降低，幼苗根长也缩短。
活动二：
设计一份实验记录单
培养皿
污染液 浓度 萌发率
生物化学实验课件讲解
⽣物化学实验课件讲解实验⼀⼆硝基⽔杨酸⽐⾊法测定总糖含量（4学时）⼀、实验⽬的（1）掌握⼆硝基⽔杨酸⽐⾊法测定总糖的原理。
（2）学习分光光度计的使⽤⽅法。
（3）掌握⽐⾊定糖法操作技术。
⼆、实验原理在碱性条件下，还原糖与3，5-⼆硝基⽔杨酸共热，3，5-⼆硝基⽔杨酸被还原为3-氨基-5硝基⽔杨酸（棕红⾊物质），还原糖则被氧化成糖酸及其他产物，在⼀定范围内，还原糖的量与棕红⾊物质颜⾊深浅的程度成⼀定⽐例关系，在540nm波长下测定棕红⾊物质的吸光度，查对标准曲线并计算，便可分别求出样品中还原糖的含量。
总糖可在强酸条件下⽔解，得到还原糖，从⽽间接求出样品中总糖的含量。
三、实验仪器（1）刻度试管：25 mL；（2）烧杯：100 mL；（3）三⾓瓶：100 mL；（4）容量瓶：100 mL；（5）刻度吸管：1 mL，2 mL，10mL；（6）恒温⽔浴；（7）沸⽔浴；（8）离⼼机（过滤法不⽤此设备），离⼼管或玻璃漏⽃，电⼦天平，分光光度计。
四、实验试剂（1）1 mg/mL葡萄糖标准液：准确称取0.250 g分析纯葡萄糖（预先80℃烘⾄恒重），置于⼩烧杯中，⽤少量蒸馏⽔溶解后，定量转移到250 mL容量瓶中，以蒸馏⽔定容⾄刻度，摇匀，冰箱中保存备⽤。
（2）3，5-⼆硝基⽔杨酸试剂：将6.3 g 3，5-⼆硝基⽔杨酸和262 mL 2mol/L的NaOH溶液，加到500 mL含有185 g酒⽯酸钾钠的热⽔溶液中，再加5 g结晶酚和5 g亚硫酸钠，搅拌溶解。
冷却后加蒸馏⽔定容⾄1000 mL，贮于棕⾊瓶中备⽤。
（3）碘-碘化钾溶液：称取5.0 g碘、10 .0g碘化钾，⽤蒸馏⽔溶解⾄100mL。
（4）酚酞指⽰剂：称取0.1 g酚酞溶于70%⼄醇⾄250 mL。
（5）6 mol/L HCl，6 mol/L NaOH。
（6）⼩麦淀粉，⾷⽤⾯粉。
五、实验操作1．制作葡萄糖标准曲线取7⽀刻度试管，按下表操作。
管号0 1 2 3 4 5 6 葡萄糖标准液/mL 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 蒸馏⽔/mL 2.0 1.8 1.6 1.4 1.2 1 0.8 3，5-⼆硝基⽔杨酸/mL 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 将各管内液体混匀，在100 ℃⽔浴中加热5 min，取出冷却⾄27~30 ℃后以蒸馏⽔定容⾄25 mL，将各管摇匀，将分光光度计调⾄540 nm 波长，⽤零号管调零，再读取1~6号管的吸光度，然后将读取的吸光度为纵坐标，葡萄糖mg数为横坐标，绘制出标准曲线。
生物化学实验课件
• 用醋酸和醋酸钠配制成各种不同pH值的缓冲液。向 诸缓冲液中加入酪蛋白后，沉淀出现最多的缓冲液 的pH值即为酪蛋白的等电点。
PPT学习交流
12
二、蛋白质的沉淀反应
• 原理：
• 蛋白质是一类高分子化合物，分子大小已达胶体颗粒范 围（1~100毫微米）,因此蛋白质在水溶液中具有胶体 的性质。维持蛋白质胶体稳定的因素有两个：一是胶体 颗粒所带的电荷，一是与介质水形成的水化膜。这种稳 定性是有条件的、相对的，在一定物理化学因素影响下， 蛋白质颗粒失去电荷、脱水，甚至变性而丧失稳定因素， 从溶液中析出，这种作用称为蛋白质的沉淀反应。
PPT学习交流
18
实验内容
• （一） 血清γ—球蛋白的分离纯化
• 1．硫酸铵盐析 ：注意应缓慢滴入饱和硫酸铵溶液 并边加边摇，避免局部浓度过高。
• 2．透析脱盐：用纳氏试剂检查水中NH4+，直至硫酸 铵全部透析完毕。
• 3．DEAE—纤维素柱层析：装柱、平衡柱床、上样、 洗脱收集。
• 4．检查洗脱液中蛋白质：磺基水杨酸检查，出现白
• 本法多用于测定糖原含量，也可用于测定葡萄糖含 量。
PPT学习交流
4
实验内容与结果
• 1、制作葡萄糖标准曲线 • 2、测定样品含糖量 • 计算100克小麦面粉中总糖含量
PPT学习交流
5
实验二
氨基酸的分离鉴定——纸层析法
实验要求
• 学习分配层析法的原理 • 掌握氨基酸纸上层析的操作技术（包括点样、平衡、
生物化学实验
任课教师：李遂焰
实验一
总糖的测定——蒽酮比色法
实验要求
• 掌握蒽酮比色定糖法的原理和方法 • 掌握72型分光光度计的原理和操作方法 • 学习通过制作标准曲线测定未知物含量的方法
《生物化学实验教案》课件
《生物化学实验教案》PPT课件第一章：生物化学实验基本原理与技能1.1 生物化学实验的目的与意义解释生物化学实验在生物学和医学研究中的重要性强调实验对于理论知识的巩固和应用的作用1.2 生物化学实验的基本原则介绍实验设计的科学性和合理性强调实验操作的准确性和可重复性1.3 生物化学实验的基本技能介绍实验室安全操作规程演示实验室常用仪器的使用方法第二章：生物化学实验数据处理与分析2.1 实验数据的记录与处理讲解实验数据的记录方法和注意事项介绍数据处理的基本原则和方法2.2 实验数据的分析与解读讲解实验结果的统计分析方法强调数据分析在实验结果解释中的重要性第三章：生物化学实验操作技巧与实例3.1 生物化学实验操作技巧讲解实验操作中的注意事项和技巧强调实验操作的精确性和规范性3.2 生物化学实验实例解析介绍经典生物化学实验案例分析实验操作步骤和结果的关联性第四章：生物化学实验常用仪器与设备4.1 生物化学实验常用仪器介绍实验室常用仪器的作用和操作方法强调仪器使用中的注意事项和维护保养4.2 生物化学实验常用设备讲解实验室常用设备的结构与功能强调设备操作的安全性和正确性第五章：生物化学实验安全与环保5.1 生物化学实验安全知识讲解实验室安全的基本原则和措施强调实验操作中的安全意识和风险控制5.2 生物化学实验环保知识介绍实验室废物的分类和处理方法强调实验室环保的重要性和责任意识第六章：蛋白质实验6.1 蛋白质的提取与分离介绍蛋白质提取和分离的基本原理演示蛋白质提取和分离的实验步骤6.2 蛋白质的纯化与鉴定讲解蛋白质纯化方法和技术介绍蛋白质鉴定的方法和原理第七章：酶实验7.1 酶的提取与纯化讲解酶提取和纯化的方法和原理强调酶活性检测的重要性7.2 酶活性的测定与分析介绍酶活性测定的方法和原理讲解酶活性数据分析的方法和技巧第八章：碳水化合物实验8.1 碳水化合物的提取与分析介绍碳水化合物提取和分析的方法强调碳水化合物在生物体中的重要性8.2 碳水化合物的代谢实验讲解碳水化合物代谢的实验方法和原理介绍碳水化合物代谢产物的检测方法第九章：脂质实验9.1 脂质的提取与分析讲解脂质提取和分析的方法强调脂质在生物体中的功能和作用9.2 脂质代谢实验介绍脂质代谢的实验方法和原理讲解脂质代谢产物的检测方法第十章：核酸实验10.1 核酸的提取与纯化介绍核酸提取和纯化的方法和原理强调核酸在生物体中的重要性10.2 核酸的检测与分析讲解核酸检测和分析的方法和原理介绍核酸序列测定和分析的方法重点和难点解析1. 生物化学实验基本原理与技能：理解实验设计的原则和实验操作的准确性是进行生物化学实验的基础。
《医学生物化学实验课件》
准备样品
2
将提取得到的脂类溶解在适当的溶
剂中
3
测定
通过比色或比重法测定脂类的含量 和性质
酶促反应实验
1 选择酶
根据要研究的反应类型选择 合适的酶
2 准备底物
准备反应底物和辅助试剂
3 反应过程
将酶和底物混合，在适当的温度和酸碱条件下进行反应
核酸的提取和分离实验
1 提取
使用试剂将细胞破碎，释放 核酸
常见实验器材和试剂介绍
实验器材
试管、显微镜、离心机、移液器等
常用试剂
酶、蛋白质、核酸、葡萄糖、脂类等
实验前准备工作
实验前的准备工作包括检查实验器材和试剂的完整性和质量，清洗实验用具，配制试剂溶液，准 备实验记录表等。
常用检测方法和技术介绍
• 分光光度法 • 比色法 • 电泳法 • 质谱法
蛋白质的提取和分离实验
蛋白质电泳实验
1
加载样品
2
将待测蛋白质样品加载到凝胶中
3
制பைடு நூலகம்凝胶
根据需要选择不同类型的凝胶，如 SDS-PAGE凝胶
电泳分离
在适当电压下进行电泳分离
进化实验
1
种群选择
通过选择特定的个体进行繁殖，改
测定适应性特征
2
变种群基因频率
观察和测定后代个体的适应性特征
的变化
3
数据分析与结论
分析实验数据并得出有关进化的结 论
生物化学实验的学习目的和意 义
生物化学实验的学习目的是培养学生的实验操作技能，加深对生物化学理论 的理解，并促进科学思维和科研能力的培养。实验的意义在于为医学研究和 临床实践提供重要的实验数据和依据。
实验室安全注意事项
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
7、精密贵重仪器每次使用后应登记姓名 并记录仪器使用情况。要随时保持仪器的清 洁。如发生故障，应立即停止使用并报告指 导教师。
1%果糖溶液
或 ＋ 1%蔗糖溶液 1%麦芽糖溶液
2ml本尼迪克特 1%淀粉溶液
3、实验时应严格按照实验步骤及试剂用量进行 操作，不能任意变更。不熟悉的仪器和设备，应先 请老师讲解后使用，切勿随意乱动。
4、实验进行时，必须随时把观察得到的现象和实验数 据，如实地记录在记录本上，不得记录在其他纸上，要养成 作原始记录的良好习惯。
5、实验时如有问题发生，应首先用自己学过的知识， 独立思考加以解决，培养独立分析问题和解决问题的能力， 如自己不能解决，可与指导老师共同讨论研究，提出解决问 题的办法。
四、实验步骤
1、α-萘酚反应
1%葡萄溶液
观
1%果糖溶液 各加1ml
★各加2滴
★各加1ml
察
5
记
1%蔗糖溶液
支
莫氏试剂 混
浓硫酸
录
试
各
1%淀粉溶液
管
匀
管
0.1%糠醛溶液
颜 色
Molisch反应（-萘酚反应）
界面：显色------鉴定：所有的糖类均可显色
浓H2SO4
糖 α -萘酚+酒精
2. 间苯二酚反应
生物化学实验
实验一 糖类的性质实验（实验一和二） 实验二 氨基酸的分离鉴定--纸层析法（7） 实验三 蛋白质及氨基酸的呈色反应（8） 实验四 酶的特性（18） 实验五 脂肪碘值的测定(5) 实验六 蛋白质的等电点测定和沉淀反应(9) 实验七 米氏常数的测定(20) 实验八 维生素C的定量测定(23)
1%葡萄糖溶液 1%果糖溶液 1%蔗糖溶液
各加0.5ml
3 支
试 管
各加5ml
赛氏试剂
混
均
同时 置沸 水浴 中
观察 记录 各管 颜色
3、糖与斐林试剂的反应
1）检验试剂：
1ml 斐 林试剂
或
1ml 本
＋ 4ml 蒸 馏 水
1 支 试 管
加 热 煮 沸
观 察 现 象
尼迪克
特试剂
2）实验过程
2ml斐林试剂 1%葡萄糖溶液
（4）滤纸、火柴棒、碎玻璃等应投入废品袋，切勿丢入水 池，以保证下水道畅通。
（5）如用仪器有损坏，立即向指导老师报告，再行登记。
（6）保持实验室的整齐清洁，个人所带与实验无关的东西， 如书包等要放在实验室指定地方，不得乱放在实验桌上。
（7）由学生轮流值日，值日生要负责当天实验室的卫生、 安全和服务性的工作，特别注的原理； 2、学习应用糖的颜色反应鉴别糖类的方法； 3、学习几种常用的鉴定糖类还原性的方法及
其原理。
二、实验原理
(一)颜色反应
1. α-萘酚反应
糖在浓无机酸（硫酸或盐酸）作用下，脱水生
成糠醛及糠醛衍生物，后者能与α-萘酚生成紫红色 物质。
注意：因糠醛及糠醛衍生物对此反应均呈阳性， 不是糖类的特异反应。
非还原性糖在酸存在下，加热水解后产生还原性 的单糖。淀粉的水解是逐步发生的，先水解成紫糊 精，再水解成红糊精、无色糊精、麦芽糖，最终水 解成葡萄糖。用碘液可以检查这种水解过程。完全 水解后，可用Ｂｅｎｅｄｉｃｔ试剂加以证实。
多糖类遇浓硫酸被水解成单糖，单糖被浓硫酸脱 水闭环，形成糠醛类化合物，在浓硫酸存在下与α萘 酚发生酚醛缩合反应，生成紫红色缩合物。
CHO
O
-CH2OH
2. 间苯二酚反应
在酸作用下，酮糖脱水生成羟甲基糠醛， 后者再与间苯二酚作用生成红色物质。
此反应是酮糖的特异反应。因为醛糖在同 样条件下呈色反应缓慢，只有在糖浓度较高 或煮沸时间较长时，才呈微弱的阳性反应。
(二) 还原作用
许多糖类由于其分子中含有自由的或潜在的醛基 或酮基，因此在碱性溶液中能将铜、铁、银等金属离 子还原，同时糖类本身被氧化成糖酸及其他产物。糖 类这种性质常被利用于检测糖的还原性及还原糖的定 量测定。
本实验所用的试剂为斐林试剂和本尼迪克特试剂。它们都是Cu2＋的碱 性溶液，能使还原糖氧化而本身被还原成红色（颗粒大）或黄色（颗粒小） 的Cu2O沉淀。
本尼迪克特试剂是改良的斐林试剂。（见P100,101脚注）
三、器材及试剂
1、器材：试管、试管架、滴管、水浴锅（或电炉）
2、试剂： 1%葡萄糖溶液， 1%果糖溶液， 1%蔗糖溶液， 1%淀粉， 1%麦芽糖溶液， 0.1%糠醛溶液， 浓硫酸， 莫氏试剂， 塞氏试剂， 斐林试剂， 本尼迪克特试剂
8、验中所用得玻璃仪器及其它器皿，应 洗涤干净，桌面、地面要保持清洁有序，实 验完毕后，所用仪器设备应恢复原状。
9、必须遵守实验室规则：
（1）室内不得高声谈笑，保持安静的实验环境。 （2）爱护仪器，不得浪费药品，节省水电，遵守学生守则 及实验室安全、卫生等制度。
（3）公用仪器及试剂瓶用完后应及不要移动原有的位置。 注意瓶塞切勿盖错，以免污染试剂，用毕后立即放回原处。对 于有害药品，应按实验室规定取用。
（8）最后一组实验人员，离开实验室时，检查水、电、门、 窗是否关闭，以保证实验室安全。
（9）如有突发事件（起火、试剂腐蚀伤人）发生，不要惊 慌失措，应妥善处置（使用灭火机、关闭电源等）。
实验一 糖类的性质实验
糖类的重要鉴别方法是 Ｍｏｌｉｓｈ反应和Ｓｅｌｉ ｗａｎｏｆｆ反应。糖类、苷类及其他含糖物质与α 萘酚和 浓硫酸呈紫红色的环的反应称为 Ｍｏｌｉｓｈ反应，该反应 可用于糖类和非糖物质的鉴别。酮糖糖加入间苯二酚和６ｍ ｏｌ／Ｌ盐酸能产生红色的反应称为Ｓｅｌｉｗａｎｏｆｆ 反应，该反应可用于酮糖和醛糖的鉴别。如己酮糖加入间苯 二酚和浓盐酸，加热后迅速产生红色，而同样条件下己醛糖 的反应速度要慢得多。
实验室规则及安全、卫生教育
实验课是提高教学质量的重要环节。通过实验巩 固理论知识，训练基本操作，培养独立工作的能力， 为了保证实验顺利进行，实验前应注意以下几点：
1、每次实验前必须详细预习实验讲义，明确实 验原理及操作步骤，并在记录本上拟出操作时的注 意事项。
2、实验时自觉遵守课堂纪律，严格按操作规程 操作，既要独立操作又要与其他同学配合。