咔唑比色法测定果胶含量
咔唑比色法测定掺假蜂蜜中果胶的含量
咔唑比色法测定掺假蜂蜜中果胶的含量任雪梅;胡梅;周传静;王文特;吴裕健【摘要】A method for determination of pectin content in honey was established by carbazole colorimetry. The pectin was extracted by 63 ％hot ethonal to remove the sugar in honey. The results showed that the top grade concentrated sulphurie acid should be used during the experience. And the ethonal, which was used to dilute carbazole, should be pured. The recovery of pectin was 88.2％～ 94.6％ with the detectable limit of 0.15 mg/kg.%建立了咔唑比色法测定蜂蜜中掺假果胶含量的方法.采用63%热乙醇溶液洗除蜂蜜中的糖分,提取试样中的果胶.结果表明,试验过程中试剂要采用优级纯浓硫酸,配制咔唑显色剂的乙醇使用前要进行精制.半乳糖醛酸的加标回收率为88.2%-94.6%,检出限为0.15 mg/kg.【期刊名称】《山东农业科学》【年(卷),期】2011(000)003【总页数】3页(P100-102)【关键词】蜂蜜;果胶;掺假【作者】任雪梅;胡梅;周传静;王文特;吴裕健【作者单位】山东省产品质量监督检验研究院/国家加工食品质量监督检验中心,山东,济南,250100;山东省产品质量监督检验研究院/国家加工食品质量监督检验中心,山东,济南,250100;山东省产品质量监督检验研究院/国家加工食品质量监督检验中心,山东,济南,250100;山东省产品质量监督检验研究院/国家加工食品质量监督检验中心,山东,济南,250100;山东省产品质量监督检验研究院/国家加工食品质量监督检验中心,山东,济南,250100【正文语种】中文【中图分类】O656.31;S896.1蜂蜜是一种营养丰富、组成复杂的天然食品，它不仅能为人类提供各种营养元素以满足正常的生理需要，还有增进食欲、改善肠胃功能、治疗贫血、保护肝脏、提高人体免疫能力等多种功能，因此蜂蜜成为消费者青睐的营养保健品。
可溶性果胶检测试剂盒(咔唑比色法)
可溶性果胶(SP)检测试剂盒(咔唑比色法)简介：天然果胶类物质以原果胶、果胶(Pectin)、果胶酸的形态广泛存在于植物的果实、根、茎、叶中，是细胞壁的一种组成成分，它们伴随纤维素而存在，构成相邻细胞中间层粘结物，使植物组织细胞紧紧黏结在一起。
原果胶是不溶于水的物质，但可在酸、碱、盐等化学试剂及酶的作用下，加水分解转变成水溶性果胶。
果胶(Pectin)又称多聚半乳糖醛酸，是由D-半乳糖醛酸以α-1,4糖苷键连接形成的直链状聚合物，本质上是一种线形的多糖聚合物，含有数百至约1000个脱水半乳糖醛酸残基，其相应的平均相对分子质量为50000~150000。
Leagene 可溶性果胶(SP)检测试剂盒(咔唑比色法)检测原理是果胶物质水解生成半乳糖醛酸，后者在硫酸溶液中咔唑进行缩合反应形成紫红色的化合物，该化合物呈色强度与半乳糖醛酸浓度成正比，该化合物颜色在反应1-2h 内呈色最深，当反应液颜色最深时在波长530nm 处测定吸光度，通过与标准曲线比较，计算出样品中果胶含量。
该试剂盒主要用于定量检测植物组织或果实中果胶含量。
该25T 试剂盒可以检测25-30左右个样本。
该试盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：自备材料：1、 蒸馏水2、 浓硫酸3、 实验材料：桃子、李子、苹果、杏等果实或其他植物组织4、 研钵或匀浆器5、 试管6、 离心机7、 水浴锅8、 比色杯9、 分光光度计 编号 名称 TC2113 25T Storage 试剂(A): 果胶标准(1mg/ml) 1ml 4℃ 避光 试剂(B): SP Lysis buffer 2×500ml RT 试剂(C): SP Assay buffer 3ml 4℃ 避光 使用说明书 1份操作步骤(仅供参考)：1、可溶性果胶提取：①取果实或其他植物组织，洗净，擦干，称取剪碎的新鲜样品0.2g，置于研钵或匀浆器。
②加入SP Lysis buffer，充分研磨或匀浆后转入10ml试管中。
果胶的检测技术
3 果胶的检测技术在对果胶的研究中，通常以含量、酯化度、相对分子质量、凝胶度等作为评价指标。
3.1 果胶含量的测定目前，测定果胶含量的方法主要有：质量法、咔唑比色法、果胶酸钙滴定法和蒸馏滴定法。
果胶酸钙滴定法较适于纯果胶的测定，对于例如柑橘果皮这种有色样品，不易确定滴定终点；而蒸馏滴定法在蒸馏的时候部分糠醛会发生分解，影响回收率，故而运用较少。
所以，果胶含量的测定一般采用质量法和咔唑比色法。
近年来新的果胶含量检测方法——离子交换色谱法（Ion ex-change chromatogram，IEC）引起了人们的关注，其常用的色谱柱和检测器见表3。
吴玉萍等[1]研究了用高效液相色谱法测定烟草中果胶含量。
烟草中的果胶先采用盐酸水解，水解产生的半乳糖醛酸以Waters Sugar-Pak1钙型阳离子交换柱为固定相，0.05g/L EDTA钙钠水溶液为流动相，示差折光仪为检测器测定半乳糖醛酸含量，由半乳糖醛酸含量换算为果胶含量。
B.M. Yapo等[2]以高效阴离子色谱-脉冲安培检测（HPAEC-PAD）技术测定果胶含量。
采用脉冲安培检测器，离子色谱以CarboPacPA-100柱（250mm×4 mm i.d.）为固定相，流动相为0.1 mol/L NaOH 和0.17 M NaOAc，流速为1 mL/min；柱温30℃，测表3：检测果胶含量的离子交换色谱法3.2 果胶酯化度的测定自然界果实中天然存在的果胶都是高酯果胶，经酸或碱处理高酯果胶降低酯化度后可获得低酯果胶。
果胶中含甲氧基的最大理论值为16.3％，若该值以酯化度来表示是100％，则甲氧基含量与酯化度的转换计算式应是：酯化度= 甲氧基含量/16.3%。
果胶酯化度的检测技术由最早的比色法、滴定法发展到80年代的高效液相和气相、90年代的核磁共振和红外光谱等方法。
而近几年，拉曼光谱分析果胶的酯化度的方法也有报导。
Synytya等[4]用拉曼谱不仅可测定甲酯化程度，而且还可测定乙酰化程度。
咔唑比色法测定剑麻果胶含量.kdh
UV2102 PCS 紫外可见分光光度计：上海尤尼科
基金项目：广西科技攻关项目（No.0480005） 作者简介：丁建东（1983—），女（汉），硕士，研究方向：天然产物的开 发与研究。 * 通信作者：林翠梧(1958—)，女（汉），教授，博士生导师。
仪器有限公司；HHS11-2 电热恒温水浴锅：上海医疗 器械五厂；AL204 型电子分析天平：上海梅特勒-托利 多称重设备有限公司。
平均含量值/% 67.8
相对标准偏差/% 1.69
吸光度
显色时间/min 图 6 显色时间的影响 Fig.6 Effect of color Time
吸光度达到最大且基本稳定，试验选择显色时间为 30 min。 综上所述，最佳的显色条件是咔唑溶液用量
0.5 mL，显色时间 30 min。 2.4 标准曲线的绘制
测定 6 次，结果见表 2。
表 2 回收率试验 (n=6) Table 2 Recovery experiments (n=6)
样品含量/μg 24.62 31.59
加入量/μg 29.90 29.90
测得总量/μg 54.31 62.94
回收率/% 99.6 102.2
试验回收率在 99.6 %~102.2 %之间，表明本方法 准确度良好，符合测定要求。
水解时间 /min 图 4 水解时间的影响 Fig.4 Effect of hydrolytic time Absorbance
如图 4 所示加热时间 20 min 时吸光度最大，之后 便降低，其原因可能是水解时间太长会破坏半乳糖醛 酸的结构。试验中水解时间选择 20 min。
综上所述，果胶粉水解的适宜条件为：浓硫酸加 入量为 6.0 mL，水解温度为 70 ℃，水解时间为 20 min。 2.3 显色条件的选择 2.3.1 咔唑溶液用量对吸光度的影响
咔唑比色法测定造纸法再造烟叶中的果胶含量_杨海健
。 果胶是亲水胶体物质， 通
对烟叶的吸湿性和弹性起一 过渗透作用吸收水分， 定的作用。烟草中的果胶质含量过高时会使烟草 在燃吸时不完全， 并产生甲醇， 对烟草吸味及安全 性不利。因此， 烟草中果胶含量的测定已成为烟草 品质的重要指标之一 法
［5 ］ ［、 高效液相色谱法
Study on pectin content in papermaking reconstituted tobacco with carbazole spectrophotometric determination method YANG Haijian，DING Hongying，YU Guodong，LI Huayu and WANG Wenling * （ Henan Cigarette Industry Tobacco Sheet Co． Ltd． ，Xuchang 461100 ） ， Fenxi Shiyanshi， 2012 ， 31 （ 6 ） ： 100 ～ 102 Abstract ： A method was described for the determination of pectin content in papermaking reconstituted tobacco by carbazole and sulphuric acid spectrophotometric method． With the systemic experimental investigation and optimization，the optimized conditions were determined as follows： 6． 0 mL of sulphuric acid， 85 ℃ and 15 min for the hydrolytic process， 0． 2 mL of 0. 15% carbazole ethanol solution， 25 ℃ and 2h for the reaction process． The precision and spike recovery of the method were also investigated and good results were obtained． The method can be applied successfully to the determination of actual samples． Keywords： Pectin； Papermaking reconstituted tobacco； Carbazole； Spectrophotometry
咔唑比色法测定苹果渣提取液果胶含量的研究
通讯作者 ： 仇农学 ， 陕西师范大学食 品工程 系，１０２ ｍ ｉ ｏｘ ＿３ １ ２． ｍ ７０６． ａ＇ ｕｉ ８０＠１６ ｏ ｏ ｇ Ｌ ｙ ｎ ｃ
ａ ｔ ａ ａ ｌ ｓａ ｄ ｓ ｔ ｆ ｃｏ ｙ ｒｓ ｌ ｒ ｂ ａｎ ｄ ｃ ｕ ｌ ｍｐ ｅ ａ ｉ ａ ｔｒ ｅ ｕ ｔ ｗｅ ｏ ｔ ｉ ｅ ． ｓ ｎ ｓ ｓ ｅ
Ｋｅ ｗｏ ｄ ： ｅ ｔ ； ｌａ ｔ ｒ ｎｃ ａ ｉ ； ｐ ｃｒ ｐ ｏ ｏ ｔ ｃｄ ｔｒ ｎ ｔ ｎ Ｃａ ｂ ｚ ｌ ； ｕ ｐ ｕ ｉ ｃ ｄ ｙ ｒ ｓ Ｐ ｃｉ Ｇａ ｃｕ ｏ ｉ ｃｄ Ｓ ｎ ｅ ｔ ｈ ｔ ｍｅ ｒ ｅｅ ｍｉ ａ ｏ ｏ ｉ ｉ； ｒ ａ ｏｅ Ｓ ｌ ｈ ｒ ａ ｉ ｃ
Ａｂ ｔ ａ ｔ Ａ ｔ ｏ Ｓ ｄ ｓ ｒ ｅ ｏ ｅ ｓｕ ｙ ｏ ｅ ｔ ｏ ｔ ｎ ｎ ａ ｐ ｅ ｐ ｍａ ｅ ｂ ａ ｂ ｚ ｌ ｎ ｕ ｐ ｕ ｉ ｃ ｄ ｓｒ ｃ ： ｍｅｈ ｄ Ｗａ ｅ ｃ ｉ ｄ ｆ ｒ ｔ ｔ ｄ ｎ ｐ ｃ ｉ ｃ ｎ ｅ ｔ ｉ ｐ ｌ ｏ ｃ ｙ ｃ ｒ ａ ｏ ｅ ａ ｄ ｓ ｌ ｈ ｒｃ ａ ｉ ｂ ｈ ｎ
Ｓ ｅ ｔ ｏ ｈ ｔ ｍ ｅ ｒｃＤｅｅ ｍ ｉ ａ ｉ ｎ Ｍ ｅｈ ｄ ｐ ｃ ｒ ｐ ｏ ｏ ｔｉ ｔｒ ｎ ｔｏ ｔ ｏ
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（ ｏｄＳ ｉｎｅａ ｄＥ ￣ｎ ｅ ｎ ｅ ａｔ ｅｔＳａ ｘ ｏｍａ ｎｖｒｉ Ｆ Ｆｏ ｃｅｃ ｎ ｎ ｅｄ ｇＤ ｐ ｒｍ ｎ，ｈｎ ｉ ｒ ｌＵ ｉ ｓｔ Ｘ ＡＮ １０ ２ Ｎ ｅ ｙ ７０ ６ ）
咔唑比色法测定豆腐柴叶果胶含量的研究_徐汶
基金项目:湖北省教育厅科学研究计划2001年重大项目(2001Z20005)作者简介:徐汶(1966-),男,武汉科技大学化工与资源环境学院高级实验师。
E 2m ai:l j azzyx @126.co m 通信作者:王存文收稿日期:2006-04-01第22卷第3期2006年5月Vol .22,No .3M ay,2006咔唑比色法测定豆腐柴叶果胶含量的研究De te r m i n a ti o n o f p rem na m i c rophy l l a pe c ti n con t e n t by ca rba zo l espe c tropho t om e tri c m e thod 徐 汶1,2XU We n1,2王光辉1W A NG Guang 2hu i1王存文2W A NG Cun 2we n2陈亚琴2C HE N Y a 2qi n2王为国2W A NG Wei 2guo2张俊峰2Z HA NG Jun 2fe ng2(1.武汉科技大学化工与资源环境学院,湖北武汉 430081;2.武汉化工学院化工与制药学院,湖北武汉 430074)(1.C olle ge o f Che m ica l E ngineer i ng,Res ources a nd Envi ron m ent ,Wuhan Univ ersity of Science and Technolo gy ,Wuha n ,Hubei 430081,Chi na;2.School of Che m ica l Eng i neering and P ha r ma cy ,Wuhan Institute o f Che m ica l Technolo gy ,Wuha n ,Hubei 430073,China )摘要:介绍了采用咔唑硫酸分光光度法测定豆腐柴叶果胶粉果胶含量的方法,对其测定条件作了详细的试验,获得了较佳的测定条件:浓硫酸用量为5.0mL ,水解温度为75e ,水解时间为15m i n ,0.15%咔唑无水乙醇溶液用量为0.2mL ,显色温度为25e 左右,显色时间为2h 。
咔唑比色法测定剑麻果胶含量
咔唑比色法测定剑麻果胶含量
丁建东;张雪红;姚先超;黄艳伟;林翠梧
【期刊名称】《食品研究与开发》
【年(卷),期】2010(031)011
【摘要】采用咔唑比色法测定剑麻果胶粉中果胶含量的方法,对其测定条件作了详细的试验,获得了较佳的测定条件:浓硫酸用量为6.0mL,水解温度为70℃,水解时间为20min,0.15%咔唑无水乙醇溶液用量为0.5 mL,在室温下显色,显色时间为
30min.用于实际样品的测定时,结果较为满意.
【总页数】3页(P138-140)
【作者】丁建东;张雪红;姚先超;黄艳伟;林翠梧
【作者单位】广西大学化学化工学院,广西,南宁,530004;广西大学化学化工学院,广西,南宁,530004;广西师范学院,化学与生命科学学院,广西,南宁,530001;广西大学化学化工学院,广西,南宁,530004;广西大学化学化工学院,广西,南宁,530004;广西大学化学化工学院,广西,南宁,530004
【正文语种】中文
【相关文献】
1.咔唑比色法测定苹果渣提取液果胶含量的研究 [J], 游新侠;仇农学
2.咔唑比色法测定豆腐柴叶果胶含量的研究 [J], 徐汶;王光辉;王存文;陈亚琴;王为国;张俊峰
3.咔唑比色法测定掺假蜂蜜中果胶的含量 [J], 任雪梅;胡梅;周传静;王文特;吴裕健
4.咔唑硫酸比色法测定皖南山区豆腐柴叶中果胶含量的研究 [J], 陶阿丽;张国升
5.咔唑-半乳糖醛酸比色法测定蜂蜜中果胶含量 [J], 李岩
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咔唑比色法测定果胶物质的含量？
咔唑比色法测定果胶物质的含量曹健康,姜微波编著.果蔬采后生理生化实验指导。
2007,9:84-87一原理：果胶（多聚半乳糖醛酸），由d-半乳糖醛酸以α-1,4-糖苷键连接形成的直链聚合物,部分d-半乳糖醛酸上的羧基被甲醇酯化而形成甲酯。
半乳糖醛酸，在硫酸溶液中与咔唑进行缩合反应，形成紫红色化合物，颜色与浓度成正比。
反应1-2h后最深。
在530nm波长处测定吸光值。
二材料，仪器及试剂柑橘，分光光度计，天平，研钵，容量瓶（100ml），具塞刻度管（25ml），移液管，三角瓶（1000ml），水浴锅，计时器，离心机，刻度离心管（50 ml）。
1.5g/l咔唑-乙醇溶液称取0.15g咔唑加入无水乙醇溶解并稀释至100ml100μg/ml半乳糖醛酸标准液称取10mg半乳糖醛酸，用蒸馏水溶解，定容至100ml浓硫酸（分析纯）多重蒸馏95%乙醇0.5mol/L硫酸溶液三实验步骤：1.制作标准曲线取6支25ml具刻度试管，编号，按照表14加入半乳糖醛酸标准液，然后小心地沿管壁加入6.0ml浓硫酸，在沸水浴中加热20min。
取出冷却至室温，各加入0.2ml 1.5g/L咔唑-乙醇溶液，摇匀。
在暗处放置30min 后，测定反应液在波长530nm处的吸光度值。
以半乳糖醛酸质量（μg）为横坐标，吸光值为纵坐标，绘制标准曲线，求得线性回归方程。
项目管号0 1 2 3 4 5100μg/ml半乳糖醛酸标准液/ml 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 蒸馏水/ml 1.0 0.8 0.6 0.4 0.2 0 相当于半乳糖醛酸质量/μg 0 20 40 60 80 1002.可溶性果胶的提取称取1g果树组织样品，置于研钵中磨成匀浆，转入到50ml刻度离心管中，加入25ml95%乙醇，在沸水浴中加热31min，以去除样品中糖分及其它物质。
注意补加乙醇。
取出冷却至室温后，在8000r/min离心15min,弃去上清液。
再加95%乙醇，在沸水浴中加热。
咔唑比色法测定玉米种皮中的果胶含量_李春明
作者单位:哈尔滨医科大学公共卫生学院卫生检验学教研室,哈尔滨150001作者简介:李春明(1977-),男,吉林九台人,硕士在读,主要从事膳食纤维营养学研究。
文章编号:1001-0580(2004)04-0490-01 中图分类号:R115 文献标识码:B检验技术咔唑比色法测定玉米种皮中的果胶含量李春明,管春梅果胶是半乳糖醛酸的聚合多糖,对其测定的方法主要有重量法、容量法和比色法 1 ,其中比色法是通过测定样品中半乳糖醛酸的含量,再换算成果胶的含量。
本实验对比色法进行优化,确定最佳实验条件。
1 仪器与试剂1 1 仪器 721型分光光度计(上海第三分析仪器厂);电动离心机;恒温水浴箱。
试剂半乳糖醛酸标准溶液:称取半乳糖醛酸(1个结晶水,理论分子量212 16)54 64mg ,用重蒸馏水溶解,加入0 25ml 1mol/L N aOH 并定容至50ml,其浓度为1mg/ml,用时逐级稀释;咔唑(试剂级):0 1%咔唑乙醇溶液,将0 1g 经升华提纯的咔唑溶解于精制乙醇中,并稀释至100ml;5% -荼酚溶液:1 5g -萘酚用精制乙醇溶解并定容至30ml 。
2 方法2 1 条件实验 取1ml 60 g/ml 半乳糖醛酸标准溶液于10ml 比色管中,加入0 5ml 0 1%咔唑乙醇溶液及6ml 浓硫酸,混匀,立刻放入85 水浴5min,再冷却15min,于525nm 处测量A 值。
2 2 样品处理 10g 玉米种皮原料与50ml pH =2的HCl 溶液混合,在87~90 水浴锅中水浴1h,真空抽滤,得滤液44ml,用氨水调至pH =5,取3ml 滤液于比色管中,加入75 的95%乙醇溶液5ml,在75~85 水浴中加热12min,充分搅拌,移入10ml 离心管中,再加入95%乙醇定容至10ml,离心15min,弃去上清波,用63%乙醇将离心管中的沉淀洗入比色管中,定容至10ml,在85 水浴中加热10min,移入离心管,离心15min,弃去上清液,用63%乙醇反复洗涤沉淀、加热、离心,直至上清液穆立虚反应阴性,然后将制备的果胶沉淀用蒸馏水洗入20ml 比色管中,加入1ml 1mol/L 的NaOH 溶液,并用蒸馏水稀释至刻度,混匀,至少放置15min,并不时振荡,过滤后,滤液用于比色测定。
实验1 果胶的提取及含量测定
2、仪器
① 分光光度计。 ② 25mL比色管。
3、试剂
① 99%乙醇。 ② 70%乙醇。 ③ 0.05 mol/L盐酸溶液。 ④ 0.5 mol/L氢氧化钠。 ⑤ 0.15%咔唑乙醇溶液：称取化学纯咔唑0.15g，溶解于精制乙 醇中并定容到100mL。咔唑溶解缓慢，需加以搅拌。 ⑥精制乙醇：取无水乙醇或95%乙醇1000mL，加入锌粉4g，硫 酸(1:1)4mL，在水浴中回流10h，用全玻璃仪器蒸馏，馏出液 每1000mL加锌粉和氢氧化钾各4g，重新蒸馏一次。 ⑦半乳糖醛酸标准溶液：准确称取半乳糖醛酸10mg，溶于蒸馏 水并定容到100mL，得浓度为0.1mg/mL半乳糖醛酸标准贮备液。 ⑧浓硫酸：优级纯。 ⑨ 5%苯酚水溶液
实验一 果胶的提取及含量测定
张莉莉
2015.10.20
果胶广泛存在于水果和蔬菜中，如苹果中含量 为0.7-1.5%（以湿品计），在蔬菜中以南瓜含量最 多（达7-17%）。
果胶的基本结构是以α-1,4糖苷键连接的聚半乳糖醛酸， 其中部分羧基被甲酯化，其余的羧基与钾、钠、铵离子结 合成盐。
在果蔬中，尤其是未成熟的水果和皮中，果胶 多数以原果胶存在，原果胶通过金属离子桥（如 Ca2+）与多聚半乳糖醛酸中的游离羧基相结合。原 果胶不溶于水，故用酸水解，生成可溶性的果胶， 再进行提取、脱色、沉淀、干燥，即为商品果胶。 从柑橘皮中提取的果胶是高酯化度的果胶（酯化度 在70%以上）。在食品工业中常利用果胶制作果酱、 果冻和糖果，在汁液类食品中作增稠剂、乳化剂。
② 提取果胶 a. 水溶性果胶提取：将预处理过的样品放入250mL
用咔唑比色法测定食品中的果胶实验
2、样品处理时应充分洗涤去除糖分，减少其存在对咔唑的呈色反应的影响。
3、在测定样液和制作样液标准曲线时，应使用相同规格、同批号的浓硫酸，以保证浓度一致，减少硫酸浓度对咔唑的呈色反应的影响。
4、样品提取液的测定
取果胶提取液，用水稀释到适当浓度(含半乳糖醛酸10～70μg/mL)。取2mL稀释液于50mL比色管中，以下按制作标准曲线的方法操作，测定吸光值。从标准曲线上查出半乳糖醛酸的浓度(μg/mL)。
5、计算（略）
四、注意事项
1、本法的测定结果以半乳糖醛酸表示，不同来源的果胶中半乳糖醛酸的含量不同，如甜橙为77．7％，柠檬为94．2％，柑橘为96％，苹果为72％～75％，若把结果换算为果胶的含量，可按上述关系计算换算系数。
果胶经水解可生成半乳糖醛酸，半乳糖醛酸在强酸中可与咔唑试剂发生缩合反应，生成紫红色化合物，该紫红色化合物的呈色强度与半乳糖醛酸含量成正比，故可通过测定吸光值对果胶含量进行定量。
此法适用于各类食品的果胶含量的测定，具有操作简便、快速、准确度高、重现性好等特点。
二、实验仪器：
分光光度计，恒温水浴锅，95%乙醇或无水乙醇等。
三、实验步骤：
1、样品处理（略） 8支50mL比色管，各加入12mL浓硫酸，于冰水浴中边冷却边缓缓依次加入浓度为0、10μg/mL、20μg/mL、30μ/ml、40μ/L、50μg/mL、60μg/mL、70μg/ml的半乳糖醛酸标准溶液2mL，充分混合后，再置于冰水浴中冷却。然后在沸水浴中准确加热10min，迅速冷却到室温，各加入0.15％咔唑试剂1mL。充分混合，室温下放置30min，以半乳糖醛酸含量为0的半乳糖醛酸标准溶液为空白，在530nm波长下测定吸光值，以半乳糖醛酸含量为纵坐标，吸光值为横坐标，绘制标准曲线。
果胶提取检测
黄皮果渣果胶含量的测定方法研究果胶水解之后的生成物是半乳糖醛酸，该物质在强酸溶液中与咔唑试剂作用发生缩合反应，呈现紫红色。
一定波长条件下呈色强度与试样中半乳糖醛酸的含量成正比，可以进行比色定量测定。
试剂1)0.5mol/L硫酸溶液; 2)0.15%咔唑乙醇溶液:称取咔唑0.15g，在少量精制的乙醇溶液中溶解，并定容至l00mL; 3)标准半乳糖醛酸溶液:准确称取半乳糖醛酸l00mg，溶解于水并且定容至l00mL混匀，即浓度为lmg/mL操作2)标准曲线的绘制:准确吸取lmg/mL的半乳糖醛酸标准溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0mL于9个100mL容量瓶中，用蒸馏水定容后，摇匀，即得到一组浓度为10、20、30、40、50、60、70、80、90mg/L的溶液。
取25 ml的比色管10支，用吸管注入浓硫酸各12 ml，置冰水浴中冷却，边冷却边分别徐徐加入上述不同浓度的半乳糖醛酸溶液各2 ml，充分混合后，再置冰浴中冷却。
然后用沸水水浴加热10 min，冷却至室温，加入0.15%咔唑溶液各1 ml，充分混合后室温下放置30 min后，用蒸馏水做空白实验。
用分光光度计，在波长530 nm下对试剂空白样品分别测定吸光度，以测得的吸光度为纵坐标，每毫升标准溶液中半乳糖醛酸含量为横坐标，制作标准曲线，并计算其线性回归方程。
3)半乳糖醛酸的测定取1 ml稀释一定倍数的果胶溶液，注入容量瓶中，定容到50 ml。
取12 m1浓硫酸于50ml 的具塞比色管中，冰浴缓慢加入2m1的果胶溶液，充分混合，沸水浴加热15 min，冷却，加入1 ml 0.5%的咔唑试剂，充分摇匀，置于室温下放置30 min，于530 nm下测定吸光度。
通过标准曲线计算果胶含量。
(3)计算方法果胶提取率的计算E(%)﹦G×100／WE—提取率G—半乳糖醛酸含量(克)W—向日葵盘中的果胶含量酸法提取材料：黄皮果、盐酸、六偏磷酸钠、仪器：PHS-3C精密酸度计上海精科雷磁、LP1002电子天平常熟市衡器厂、快HH-42速恒温数显水箱常州国华电器有限公司、其他实验室常用设备方法:取5.0g干黄皮果粉，经灭酶、漂洗后加入30倍水充分混合，用盐酸调节溶液pH值为3.5，配制0.8%的六偏磷酸纳溶液，按料液比1:25加入烧杯中。
果胶去除率测试方法
果胶去除率测试方法
果胶去除率的测试方法有多种，以下是其中一种常用的方法：
使用咔唑比色法测定织物果胶含量，具体步骤如下：
1. 称取预先在105℃烘箱中烘至恒重的棉织物10g（精确到），放在以滤纸做成的纸筒中，纸筒置于脂肪萃取器中。
2. 在脂肪萃取器的烧瓶中加入120mL三氯甲烷，并置于恒温水浴中，调节温度，保持溶剂每小时虹吸循环3~4次，萃取6h后冷却。
3. 将萃取前后的织物在105℃烘干1h后，放入干燥器冷却30min后，称重。
4. 通过公式计算果胶去除率：果胶去除率 = $\frac{M_{0} - M_{1}}{M_{0}} \times 100\%$。
其中，$M_{0}$为精练前织物上果胶的量，$M_{1}$为精练后织物上果胶的量。
以上步骤仅供参考，建议咨询专业人士获取准确信息。
咔唑比色法测定掺假蜂蜜中果胶的含量
Ｋｅ ｒ ｓ Ｈｏ ｅ ｙ ｗｏ ｄ ｎ ｙ；Ｐｅ ｔ ｃｉ ｎ；Ａｄ ｔ ｒｔｏ ｕｌ ａｉｎ ｅ
蜂 蜜是一 种营养 丰富 、 组成 复杂 的天然食 品 ，
法 ∞ 和滴定 法等 ， 两 法测 定 的结 果分 别 用果 胶 前 酸钙 和糠 醛 的 回收 率 表示 ， 法直 接得 到 半乳 糖 无
它不仅 能为人 类提供 各种营养 元素 以满 足正 常的
生理 需要 ， 有增 进 食欲 、 善肠 胃功 能 、 还 改 治疗 贫 血 、 护 肝脏 、 高人 体免 疫 能力 等多 种功 能 ， 保 提 因 此蜂蜜 成为消 费者青 睐的营养保 健 品。但掺伪 现
醛酸 的有 关信 息 ， 操作 比较 繁 杂 。滴 定 法适 合 且
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咔唑比色法测定剑麻果胶含量
多称重设 备有限公 司。
结的聚合物 ， 安全无毒 ， 具有 良好 的乳化 、 增稠 、 稳定和 胶凝作用 ， 广泛用于食 品 、 医药 、 化妆品 、 纺织 、 印染 、 冶
金、 烟草等行业 中【】 ｌ。果胶 含量的测定方 法主要有重 － ３ 量法 、 容量法和 比色法 。这些方法 中重 量法和容量 法操作繁琐 ， 且不 能表现果胶 中的半乳糖醛酸的含量 。
色 ， 色时 间 为 ３ ｍｎ 用 于 实 际样 品 的 测 定 时 。 显 ０ ｉ。 结果 较 为 满 意 。
关键 词 ： 咔唑 比 色法 ； 麻 果胶 ； 定 剑 测
Ｄｅｅ ｍｉ ｔｏ ｏ ｉａｌ ｃ ｉ Ｃｏ ｅ ｒ ａ ｏ ｅＣｏｏ ｉ ｔ ｉ ｅｈｏ ｔ ｒ ｎａ ｉｎ ｆＳ ｓ ｔｎ ｎｔｎｔ Ｃａ ｂ ｚ ｌ ｌｒ ｍｅｒ ｃＭ ｔ ｄ Ｐｅ ｂｙ
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咔唑硫酸比色法测定皖南山区豆腐柴叶中果胶含量的研究
标准曲线的绘制：取上述标准溶液各 １ｍｌ 于 ６ 个试管中，加入浓硫酸 １０ｍｌ， 边加边冷却，放于 ８５℃水浴 锅 中 加 热 ２５ｍｉｎ 后 冷 却 至 室 温 ， 加 入 ０．１５％咔唑无水乙醇溶液 ０．８ｍｌ，摇匀，在 ５３０ｎｍ 处 依次测定吸光度，空白试剂为参比，以吸光度为纵 坐标，半乳糖醛酸的浓度为横坐标，绘制标准曲线，
第 ２８ 卷 第 １１ 期（上） ２０１２ 年 １１ 月
பைடு நூலகம்
赤 峰 学 院 学 报（ 自 然 科 学 版 ） Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｉｆｅｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ｎａｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｅｄｉｔｉｏｎ）
Ｖｏｌ． ２８ Ｎｏ． １１ Ｎｏｖ． ２０１２
咔唑硫酸比色法测定皖南山区豆腐柴叶中果胶含量的研究
关键词：咔 唑 硫 酸 比 色 法 ；豆 腐 柴 果 胶 ；含 量 测 定 中图分类号：Ｒ２８４．２ 文献标识码：Ａ 文章编号：１６７３－ ２６０Ｘ（２０１２）１１－ ０１０８－ ０３
果胶是一种植物胶体，是从植物中提取的一种 复杂的天然高分子聚合物，存在于植物的细胞壁和 细胞内层，是细胞壁的组成成分．果胶分子主要是 由 α－１，４－ 糖苷键联接而成的半乳糖醛酸（Ｇ．Ａ．） 与鼠李糖、阿拉伯糖和半乳糖等中性糖联结而成［１］． 果胶安全无毒，被广泛应用于食品、医药、纺织、化 妆品、冶金、烟草等行业［２－３］．目前国内对其含量的测 定方法主要有重量法［４］、容量法［４］、比色法［５］和滴定法 ［５］等．其中重量法中果胶经皂化生成果胶酸钠，再经 乙酸酸化使之生成果胶酸，加入钙盐则生成果胶酸 钙沉淀，烘干后称量［６］．此法稳定可靠，但操作较烦 琐费时，分析时间较长，不宜普遍推广．比色法是通 过测定半乳糖醛酸的含量来获得果胶的含量，准确 性好，且操作简单，在用于剑麻、苎麻［７］、甜菜［８］、向日 葵［９］、柑橘［１０］等中果胶的含量测定时，都取得了满意 的结果．本实验用咔唑比色法测定豆腐柴中果胶的 含量，并且对果胶的水解条件和半乳糖醛酸的测定 条件做了详细的实验，获得了满意的结果． 1 试验部分 １．１ 试验仪器与主要试剂
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咔唑比色法测定果胶含量-标准曲线的制作
1方法原理
方法基于果胶物质水解，生成半乳糖醛酸在强酸中与咔唑的缩合反应。
然后，对其紫红色呈色溶液进行比色定量。
2试剂
(1)乙醇(化学纯)：无水乙醇和950mL·L-1乙醇。
(2)精制乙醇：取无水乙醇(化学纯)或950mL·L-1乙醇1000mL，加入Zn粉4g和硫酸(1∶1)4mL，置恒温水浴中回流10h后，用全玻璃仪器蒸馏。
馏出液每1000mL加入Zn粉和KOH各4g，进行重蒸馏。
(3) 1.5g·L-1咔唑乙醇溶液：称取化学纯咔唑0.150g，溶解于精制乙醇，并定容至100mL。
(4)标准半乳糖醛酸：以医药公司上海化学试剂采购供应站分装的L.Light出品α-D水解半乳糖醛酸作为标准半乳糖醛酸。
(5)浓硫酸(优级纯)(注2)。
(6)0.05mol·L-1HCl溶液。
3 操作步骤
(1)半乳糖醛酸标准曲线的制作：准确称取α-D-水解半乳糖醛酸100mg，溶解于蒸馏水，并定容至100mL，混合后得1mg·mL-1的半乳糖醛酸原液。
移取上述原液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0mL，分别注入100mL容量瓶中，稀释至刻度，即得一系列浓度为10、20、30、40、50、60、70μg·mL-1的半乳糖醛酸标准溶液。
取30mm×200mm的硬质大试管7支，用吸管注入浓H2SO4各12mL。
置冰水浴中冷却，边冷却边分别沿壁徐徐加入上述不同浓度的半乳糖醛酸标准溶液各2mL，充分混合后，再置冰水浴中冷却。
然后，在沸水浴中加热10min，冷却至室温后，加入1.5g·L-1咔唑溶液各1mL，充分混和。
另以蒸馏水代替半乳糖醛酸标准溶液，依上法同样处理，作为试剂空白。
室温下放置30min后，用721型分光光度计，在波长530nm下，分别测定其吸光度(A)，以测得的吸光度(A)为纵座标，每mL标准溶液中半乳糖醛酸的含量为横座标，制作标准曲线。
2、根据标准曲线计算未知浓度的样品含量。