二++培养基及讲义其制备
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优点:简单、设备少、时间短
缺点:设备易腐蚀、要耐高温高压,有 副反应;淀粉粒小、浓度不能太高。 水解条件:第19页 2.酶解法:淀粉酶,包括液化(α-淀粉酶) 和糖化(糖化酶)两步
水解条件:第20页
双酶水解法制葡萄糖的优点 :
(1)淀粉水解是在酶的作用下进行的,酶解的反应条件 比较温和。
(2)酶作用的专一性强,淀粉的水解副反应少,因而水 解糖液纯度高,淀粉的转化率高。
在淀粉的酸水解过程中,水解生成的葡萄糖受酸和 热的影响,葡萄糖分子之间通过糖苷键相聚合,生成二 糖、三糖及其他低聚糖。
影响复合反应的因素:
1)淀粉浓度的影响:淀粉乳浓度高,水解所得葡萄糖浓 度也高,复合反应也强。 2)酸的影响:酸浓度高,复合反应强;盐酸>硫酸>草酸
3、葡萄糖的分解反应及其影响因素
3.酸酶结合法
①酸酶法:先将淀粉酸水解为糊精或低聚 糖,再用糖化酶水解为葡萄糖。
应用:玉米、小麦等谷类淀粉,坚实。 ②酶酸法:先用ɑ-淀粉酶液化,再用酸水 解为葡萄糖。
应用:碎米淀粉等,酸水解不均匀。
不同糖化工艺所得糖化液 质量比较
醛
二、淀粉酸水解理论基础
淀粉水解成葡萄糖的反应过程中同时发生:水解 反应、复合反应、分解反应;其中水解反应是主要的。
二++培养基及其制备
精品jing
第一节 培养基的原材料
一、培养基的营养成分及用途
微生物的养料来源
光
光能自养
Ⅰ.能源
氢、硫、氨 亚硝酸盐、亚铁盐 化能自养 碳水化合物等有机物
石油天然气和石油化工产品
自养菌 异养菌
功能:生长、繁殖需要;
碳酸气 Ⅱ.碳源 淀粉水解糖、糖蜜、亚硫酸盐纸浆废液等
石油、正构石蜡、天然气 醋酸、甲醇、乙醇等石油化工产品
土豆葡萄糖琼脂培养基
土豆 500g 葡萄糖 20.0g 琼脂 20.0g
称取500克土豆,去皮切成丁,立即加入 1000ml水,充分煮沸,用棉布过滤。滤 液用水定容至1000ml,再加入其它成分。 高压灭菌:115℃,20分钟。
三、发酵培养基的选择
发酵培养基的用途与要求、成分、 配比经实验确定,配制时兼顾原料来源、 成本及工艺管理;
功能பைடு நூலகம்提供能量、构成菌体、代谢产物的物质基础;
豆饼或蚕蛹水解液、味精废液 Ⅲ.氮源 玉米浆、酒糟水等有机氮
尿素、硫酸铵、氨水、硝酸盐等无机氮、气态氮
功能:构成菌体、含氮代谢物;
磷酸盐、钾盐、钙盐等矿物盐 Ⅳ.无机盐
铁、锰、钴等微量元素
功能:构成菌体,参与酶的组成,维持酶活性,调节渗 透压,调节pH值,维持氧化还原电位;
淀粉α-1,4;1,6葡萄糖苷酶,又称为糖化酶, 可以水解淀粉分子的α-1,4;或α-1,6葡萄糖 苷健,其作用特点是,淀粉的分子链越短水解速 度越快,水解产物为葡萄糖。
酸的种类:盐酸>硫酸>磷酸
酸水解主要因素
酸浓度:高利于水解,但应适当 水解温度:温度加速水解
2、葡萄糖的复合反应及其影响因素
复合反应:葡萄糖分子间经1-6糖苷键结合成龙胆 二糖(有苦味)、异麦芽糖和其他低聚糖(合称复合低 聚糖)。
分解反应:葡萄糖→5‘-羟甲基糠醛→有机酸 (乙酰丙酸、蚁酸)、色素等。
影响因素: (1)浓度:表2-9、葡萄糖浓度高, 5‘-羟甲 基糠醛生成量大; (2)pH值:表2-11、pH为3时5‘-羟甲基糠醛 生成量最小; (3)反应时间:表2-10、时间延长,5‘-羟甲 基糠醛生成量增大;
Ⅴ.特殊生长因子:硫胺素、生物素、对氨基苯甲酸、肌 醇等 功能:酶的辅助部分,维持生命活动;
Ⅵ.水分 功能:生化反应均在水溶液中进行
二、培养基的类型 1.依营养物质的来源分类
①天然培养基;(麦芽汁、玉米粉、麸皮、锯末等) ②合成培养基; (高氏培养基、察氏培养基等 ) ③半合成培养基; (牛肉膏蛋白胨、土豆葡萄糖培养基)
在淀粉糖化过程中,这三种化学反应的关系如下:
淀粉 水解 盐酸
葡萄糖 分解
复合二糖
5‘-羟甲基糠醛
复合低聚糖
有机酸、有色物质等
1、淀粉的水解反应及其影响因素
淀粉:直链(a-1,4键缩合)、支链(a-1,6 键缩合),聚合度高
α-淀粉酶 :又称为淀粉液化酶,只作用于淀粉 α-1,4葡萄糖苷健,其作用特点是可以快速将 长链的淀粉水解成短链糊精;
(3)可在较高淀粉浓度下水解(40%比酸水解高一倍)。
(4)由于微生物酶制剂中菌体细胞的自溶,糖液的营养 物质较丰富,发酵培养基的组成可简化。
(5)用酶法制得的糖液颜色浅、较纯净、无苦味、质量 高,有利于糖液的精制。
双酶水解法制葡萄糖的缺点:
时间长(2-3天)、设备多、条件(适合酶水解)较多、 过滤困难
蛋白胨 10克
氯化钠 5克
2、制法:
(1)于1000毫升水中,加入上述成分,混合加热溶 解。
(2)用1mol氢氧化钠矫正pH7.2~7.6,煮沸3~5分 钟。用滤纸滤过,补足失掉的水分。
(3)分装于烧瓶或试管中,瓶口或管口塞好棉塞包 装后,高压蒸气灭菌,121℃灭菌20分钟。
(4)灭菌后放于阴凉处,或放冷后存于冰箱中备用。
2.依培养基制成的形式分:
①液体培养基; ②固体培养基;
3.依培养基主要成分和使用目的来分
①基础培养基 ②完全培养基
③鉴别培养基(pH指示剂:不同微生物颜色) ④选择培养基(如加抗生素)
4.根据生产工艺来分
①孢子培养基 ②种子培养基 ③发酵培养基
附:培养基配方举例
肉汤培养基
1、成份:牛肉膏 5克
工业上确定发酵培养基的方法:
1、了解菌种的营养要求; 2、了解菌种的培养条件; 3、先进行小试验,摸索菌种对碳源和氮源的 利用情况。
四、原料转换及意义
发酵培养基中所用原材料,大部分属于粮食、 油脂、蛋白质和农用肥料,其中山芋粉、玉米粉、 淀粉、糊精、麦芽糖等都是可供人畜食用的粮食、 油料或以粮食为原料的产品;我国人口众多,发 酵产品的品种和产量与日俱增,每年都要消耗大 量粮食、油料和蛋白质原料。
原则:以废代好(废糖蜜、农业废料等)
以可再生代替不可再生(野生植物 淀粉、纤维水解物)
节约原料:使发酵稳定、高产
第二节 淀粉水解糖的制备
多数微生物不能直接利用淀粉 淀粉水解糖已应用于谷氨酸发酵等
工业 淀粉水解后的糖液主要是葡萄糖,
少量二糖、低聚糖等 提高出糖率、糖的质量
一、淀粉水解糖的制备方法 1.酸解法:以酸为催化剂,高温高压转化
缺点:设备易腐蚀、要耐高温高压,有 副反应;淀粉粒小、浓度不能太高。 水解条件:第19页 2.酶解法:淀粉酶,包括液化(α-淀粉酶) 和糖化(糖化酶)两步
水解条件:第20页
双酶水解法制葡萄糖的优点 :
(1)淀粉水解是在酶的作用下进行的,酶解的反应条件 比较温和。
(2)酶作用的专一性强,淀粉的水解副反应少,因而水 解糖液纯度高,淀粉的转化率高。
在淀粉的酸水解过程中,水解生成的葡萄糖受酸和 热的影响,葡萄糖分子之间通过糖苷键相聚合,生成二 糖、三糖及其他低聚糖。
影响复合反应的因素:
1)淀粉浓度的影响:淀粉乳浓度高,水解所得葡萄糖浓 度也高,复合反应也强。 2)酸的影响:酸浓度高,复合反应强;盐酸>硫酸>草酸
3、葡萄糖的分解反应及其影响因素
3.酸酶结合法
①酸酶法:先将淀粉酸水解为糊精或低聚 糖,再用糖化酶水解为葡萄糖。
应用:玉米、小麦等谷类淀粉,坚实。 ②酶酸法:先用ɑ-淀粉酶液化,再用酸水 解为葡萄糖。
应用:碎米淀粉等,酸水解不均匀。
不同糖化工艺所得糖化液 质量比较
醛
二、淀粉酸水解理论基础
淀粉水解成葡萄糖的反应过程中同时发生:水解 反应、复合反应、分解反应;其中水解反应是主要的。
二++培养基及其制备
精品jing
第一节 培养基的原材料
一、培养基的营养成分及用途
微生物的养料来源
光
光能自养
Ⅰ.能源
氢、硫、氨 亚硝酸盐、亚铁盐 化能自养 碳水化合物等有机物
石油天然气和石油化工产品
自养菌 异养菌
功能:生长、繁殖需要;
碳酸气 Ⅱ.碳源 淀粉水解糖、糖蜜、亚硫酸盐纸浆废液等
石油、正构石蜡、天然气 醋酸、甲醇、乙醇等石油化工产品
土豆葡萄糖琼脂培养基
土豆 500g 葡萄糖 20.0g 琼脂 20.0g
称取500克土豆,去皮切成丁,立即加入 1000ml水,充分煮沸,用棉布过滤。滤 液用水定容至1000ml,再加入其它成分。 高压灭菌:115℃,20分钟。
三、发酵培养基的选择
发酵培养基的用途与要求、成分、 配比经实验确定,配制时兼顾原料来源、 成本及工艺管理;
功能பைடு நூலகம்提供能量、构成菌体、代谢产物的物质基础;
豆饼或蚕蛹水解液、味精废液 Ⅲ.氮源 玉米浆、酒糟水等有机氮
尿素、硫酸铵、氨水、硝酸盐等无机氮、气态氮
功能:构成菌体、含氮代谢物;
磷酸盐、钾盐、钙盐等矿物盐 Ⅳ.无机盐
铁、锰、钴等微量元素
功能:构成菌体,参与酶的组成,维持酶活性,调节渗 透压,调节pH值,维持氧化还原电位;
淀粉α-1,4;1,6葡萄糖苷酶,又称为糖化酶, 可以水解淀粉分子的α-1,4;或α-1,6葡萄糖 苷健,其作用特点是,淀粉的分子链越短水解速 度越快,水解产物为葡萄糖。
酸的种类:盐酸>硫酸>磷酸
酸水解主要因素
酸浓度:高利于水解,但应适当 水解温度:温度加速水解
2、葡萄糖的复合反应及其影响因素
复合反应:葡萄糖分子间经1-6糖苷键结合成龙胆 二糖(有苦味)、异麦芽糖和其他低聚糖(合称复合低 聚糖)。
分解反应:葡萄糖→5‘-羟甲基糠醛→有机酸 (乙酰丙酸、蚁酸)、色素等。
影响因素: (1)浓度:表2-9、葡萄糖浓度高, 5‘-羟甲 基糠醛生成量大; (2)pH值:表2-11、pH为3时5‘-羟甲基糠醛 生成量最小; (3)反应时间:表2-10、时间延长,5‘-羟甲 基糠醛生成量增大;
Ⅴ.特殊生长因子:硫胺素、生物素、对氨基苯甲酸、肌 醇等 功能:酶的辅助部分,维持生命活动;
Ⅵ.水分 功能:生化反应均在水溶液中进行
二、培养基的类型 1.依营养物质的来源分类
①天然培养基;(麦芽汁、玉米粉、麸皮、锯末等) ②合成培养基; (高氏培养基、察氏培养基等 ) ③半合成培养基; (牛肉膏蛋白胨、土豆葡萄糖培养基)
在淀粉糖化过程中,这三种化学反应的关系如下:
淀粉 水解 盐酸
葡萄糖 分解
复合二糖
5‘-羟甲基糠醛
复合低聚糖
有机酸、有色物质等
1、淀粉的水解反应及其影响因素
淀粉:直链(a-1,4键缩合)、支链(a-1,6 键缩合),聚合度高
α-淀粉酶 :又称为淀粉液化酶,只作用于淀粉 α-1,4葡萄糖苷健,其作用特点是可以快速将 长链的淀粉水解成短链糊精;
(3)可在较高淀粉浓度下水解(40%比酸水解高一倍)。
(4)由于微生物酶制剂中菌体细胞的自溶,糖液的营养 物质较丰富,发酵培养基的组成可简化。
(5)用酶法制得的糖液颜色浅、较纯净、无苦味、质量 高,有利于糖液的精制。
双酶水解法制葡萄糖的缺点:
时间长(2-3天)、设备多、条件(适合酶水解)较多、 过滤困难
蛋白胨 10克
氯化钠 5克
2、制法:
(1)于1000毫升水中,加入上述成分,混合加热溶 解。
(2)用1mol氢氧化钠矫正pH7.2~7.6,煮沸3~5分 钟。用滤纸滤过,补足失掉的水分。
(3)分装于烧瓶或试管中,瓶口或管口塞好棉塞包 装后,高压蒸气灭菌,121℃灭菌20分钟。
(4)灭菌后放于阴凉处,或放冷后存于冰箱中备用。
2.依培养基制成的形式分:
①液体培养基; ②固体培养基;
3.依培养基主要成分和使用目的来分
①基础培养基 ②完全培养基
③鉴别培养基(pH指示剂:不同微生物颜色) ④选择培养基(如加抗生素)
4.根据生产工艺来分
①孢子培养基 ②种子培养基 ③发酵培养基
附:培养基配方举例
肉汤培养基
1、成份:牛肉膏 5克
工业上确定发酵培养基的方法:
1、了解菌种的营养要求; 2、了解菌种的培养条件; 3、先进行小试验,摸索菌种对碳源和氮源的 利用情况。
四、原料转换及意义
发酵培养基中所用原材料,大部分属于粮食、 油脂、蛋白质和农用肥料,其中山芋粉、玉米粉、 淀粉、糊精、麦芽糖等都是可供人畜食用的粮食、 油料或以粮食为原料的产品;我国人口众多,发 酵产品的品种和产量与日俱增,每年都要消耗大 量粮食、油料和蛋白质原料。
原则:以废代好(废糖蜜、农业废料等)
以可再生代替不可再生(野生植物 淀粉、纤维水解物)
节约原料:使发酵稳定、高产
第二节 淀粉水解糖的制备
多数微生物不能直接利用淀粉 淀粉水解糖已应用于谷氨酸发酵等
工业 淀粉水解后的糖液主要是葡萄糖,
少量二糖、低聚糖等 提高出糖率、糖的质量
一、淀粉水解糖的制备方法 1.酸解法:以酸为催化剂,高温高压转化