根系活力ttc法
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
根系活力的测定[TTC法] 法 根系活力的测定
制作人: 制作人:刘新 单 位:生命科学学院 植物生理学教研室
一,实验目的
理解植物根系活力的内涵 掌握根系活力测定的原理与方法
合成氨基酸和植物激素 (ABA,CTK,GA等) , , 等
H2O 无机盐
根的生长情况和活力水平直接影响地上部的生长和营养状况及产量 测定根系活力,为植物营养研究提供依据. 测定根系活力,为植物营养研究提供依据.
六,思考题
1.植物的根与地上部分有何关系? 1.植物的根与地上部分有何关系? 植物的根与地上部分有何关系 2.反应中加入硫酸 琥珀酸或延胡羧酸, 反应中加入硫酸, 2.反应中加入硫酸,琥珀酸或延胡羧酸, 苹果酸各起何作用? 苹果酸各起何作用? 3.测定根系活力时最好选择根的哪个部位 测定根系活力时最好选择根的哪个部位? 3.测定根系活力时最好选择根的哪个部位? 为什么? 为什么? 4.为什么要以杀死根系作为空白对照 为什么要以杀死根系作为空白对照? 4.为什么要以杀死根系作为空白对照?
25 50 100 150 200
0.50mL
1.00mL 1.50mL
乙酸乙酯作 参比, 参比 , 测定 485nm下光 下光 密度值, 密度值 , 绘 制标准曲线
2.00mL 吸取0.25mL TTC 加少许 乙酸乙 吸取 加入10mL容量瓶 Na2S2O4 酯定容 加入wk.baidu.com容量瓶
四,实验步骤—测定根系活力
与此同时 做一空白 实验, 实验,先 加硫酸, 加硫酸, 再加根样 品,其他 操作同上
与3～4ml乙酸乙酯和少量 ～ 乙酸乙酯和少量 石英砂在研钵内磨碎 红色提取液移入试管且 用乙酸乙酯定容到10ml 用乙酸乙酯定容到
五,实验结果
四氮唑还原强度 = 根鲜重)/h) (mg/g(根鲜重 ) 根鲜重
四氮唑还原量( ) 四氮唑还原量(mg) [根重(g)×时间 根重( ) 时间(h)] 根重
二,实验原理
氯化三苯基四氮唑( 氯化三苯基四氮唑(TTC)是标准氧化电位为 )是标准氧化电位为80mV的氧化还 的氧化还 原物质,溶于水中成为无色溶液, 原物质 , 溶于水中成为无色溶液, 但还原后即生成红色而不 溶于水的三苯基甲腙 (TTF). )
生成的TTF比较稳定,不会被空气中的氧自动氧化 比较稳定, 生成的 比较稳定
0.5g根尖样品 根尖样品 0.4%TTC和磷酸缓冲液的等量混合液 % 和磷酸缓冲液的等量混合液10ml 和磷酸缓冲液的等量混合液 根充分浸没于溶液中 37℃下暗保温1～3h ℃下暗保温 ～ 加入1mol/L硫酸 硫酸2ml 加入 硫酸 取出根吸 干水分 查标准曲线, 查标准曲线,求 四氮唑还原量 空白试验作参比测 485nm下吸光度 下吸光度
�
根系活力
脱氢酶
琥珀酸 延胡索酸 苹果酸
TTC
(无色,溶于水) 无色,溶于水)
TTF
丙二酸 碘乙酸
(红色,不溶于水) 红色,不溶于水)
促进
抑制
三,实验材料
水培或砂培小麦,玉米等植物根系. 水培或砂培小麦,玉米等植物根系.
四,实验步骤—制作TTC标准曲线
TTC含量(g) 含量( ) 含量 Na2S2O4 乙酸乙酯 0.25mL
制作人: 制作人:刘新 单 位:生命科学学院 植物生理学教研室
一,实验目的
理解植物根系活力的内涵 掌握根系活力测定的原理与方法
合成氨基酸和植物激素 (ABA,CTK,GA等) , , 等
H2O 无机盐
根的生长情况和活力水平直接影响地上部的生长和营养状况及产量 测定根系活力,为植物营养研究提供依据. 测定根系活力,为植物营养研究提供依据.
六,思考题
1.植物的根与地上部分有何关系? 1.植物的根与地上部分有何关系? 植物的根与地上部分有何关系 2.反应中加入硫酸 琥珀酸或延胡羧酸, 反应中加入硫酸, 2.反应中加入硫酸,琥珀酸或延胡羧酸, 苹果酸各起何作用? 苹果酸各起何作用? 3.测定根系活力时最好选择根的哪个部位 测定根系活力时最好选择根的哪个部位? 3.测定根系活力时最好选择根的哪个部位? 为什么? 为什么? 4.为什么要以杀死根系作为空白对照 为什么要以杀死根系作为空白对照? 4.为什么要以杀死根系作为空白对照?
25 50 100 150 200
0.50mL
1.00mL 1.50mL
乙酸乙酯作 参比, 参比 , 测定 485nm下光 下光 密度值, 密度值 , 绘 制标准曲线
2.00mL 吸取0.25mL TTC 加少许 乙酸乙 吸取 加入10mL容量瓶 Na2S2O4 酯定容 加入wk.baidu.com容量瓶
四,实验步骤—测定根系活力
与此同时 做一空白 实验, 实验,先 加硫酸, 加硫酸, 再加根样 品,其他 操作同上
与3～4ml乙酸乙酯和少量 ～ 乙酸乙酯和少量 石英砂在研钵内磨碎 红色提取液移入试管且 用乙酸乙酯定容到10ml 用乙酸乙酯定容到
五,实验结果
四氮唑还原强度 = 根鲜重)/h) (mg/g(根鲜重 ) 根鲜重
四氮唑还原量( ) 四氮唑还原量(mg) [根重(g)×时间 根重( ) 时间(h)] 根重
二,实验原理
氯化三苯基四氮唑( 氯化三苯基四氮唑(TTC)是标准氧化电位为 )是标准氧化电位为80mV的氧化还 的氧化还 原物质,溶于水中成为无色溶液, 原物质 , 溶于水中成为无色溶液, 但还原后即生成红色而不 溶于水的三苯基甲腙 (TTF). )
生成的TTF比较稳定,不会被空气中的氧自动氧化 比较稳定, 生成的 比较稳定
0.5g根尖样品 根尖样品 0.4%TTC和磷酸缓冲液的等量混合液 % 和磷酸缓冲液的等量混合液10ml 和磷酸缓冲液的等量混合液 根充分浸没于溶液中 37℃下暗保温1～3h ℃下暗保温 ～ 加入1mol/L硫酸 硫酸2ml 加入 硫酸 取出根吸 干水分 查标准曲线, 查标准曲线,求 四氮唑还原量 空白试验作参比测 485nm下吸光度 下吸光度
�
根系活力
脱氢酶
琥珀酸 延胡索酸 苹果酸
TTC
(无色,溶于水) 无色,溶于水)
TTF
丙二酸 碘乙酸
(红色,不溶于水) 红色,不溶于水)
促进
抑制
三,实验材料
水培或砂培小麦,玉米等植物根系. 水培或砂培小麦,玉米等植物根系.
四,实验步骤—制作TTC标准曲线
TTC含量(g) 含量( ) 含量 Na2S2O4 乙酸乙酯 0.25mL