口蹄疫免疫
提高生猪口蹄疫群体免疫效果的建议
提高生猪口蹄疫群体免疫效果的建议口蹄疫是一种让养殖业受到严重威胁的病毒性疾病,能够影响到猪的生长和健康。
为了预防口蹄疫的发生,需要在全国范围内进行口蹄疫群体免疫。
然而,在实施免疫时,为了有效提高免疫效果,必须采取一些有效的措施。
以下是提高生猪口蹄疫群体免疫效果的建议:1. 建立完善的监测系统在免疫之前需要建立完善的口蹄疫监测系统,通过对疾病的监测,及时发现疫情,为下一步的免疫提供有力支持。
2. 选择合适的疫苗选择合适和优质的口蹄疫疫苗是预防口蹄疫的重点。
在选择疫苗时,要根据疫苗可靠性和疫苗效果进行评估。
3. 严格的疫苗冷链管理疫苗的安全性和有效性与其储存和运输条件有关。
疫苗必须通过严格的冷链管理来保证疫苗的有效性。
4. 合理的免疫程序在制定免疫程序时,需要考虑疫苗接种的时间、方法以及次数等因素。
要定期对猪群进行免疫,并在猪群中做好免疫工作的记录。
5. 加强养殖管理科学的养殖管理可在一定程度上预防疾病的发生。
在日常养猪过程中,应加强环境卫生和卫生防疫工作,合理安排饲喂和运动,并加强疫情监测和报告工作。
同时,要防止猪群囤积过多,以减少疾病传播的风险,提高免疫效果。
6. 提供科学的饮食和保健产品提供健康的饮食和保健产品,对于增强猪群的抵抗力和提高疾病免疫效果非常重要。
注意给猪提供足够的饮用水和清洁水,以及足量的蛋白质、维生素和矿物质等营养物质。
总之,对于口蹄疫的预防,需要采取综合性措施,从疫苗选择、冷链管理、免疫程序、猪群养殖管理以及科学饮食和保健产品等方面进行全面考虑,以提高口蹄疫免疫的效果。
猪口蹄疫免疫注意事项
1 疫苗选择
口蹄疫病毒是一个容易发生变异 的病毒,虽然可以使用疫苗提前进行免 疫防控,但是也不是什么时候都可以保 证不会发病的。因为只有免疫相同毒 株的疫苗,才对相应口蹄疫病毒有效, 例如只免疫 O 型疫苗对 A 型口蹄疫是 没有保护效果的。同时选用疫苗时,不 仅要求血清型一致,还要保证疫苗的毒 株必须与流行毒株相匹配。如果我们 按照科学的程序免疫接种后,猪群仍然 发生口蹄疫疾病,就有可能存在流行毒 株发生变异或变化的情况。
3 正确使用疫苗
首先需要选用经国家批准生产和 注册、由各级动物卫生监督机构逐级 供应的口蹄疫灭活疫苗。严格按照疫 苗运输和保存说明进行妥善保管,以 免发生疫苗失效情况。在使用疫苗前 认真检查疫苗瓶口的胶盖是否封闭严 实,记录好疫苗的生产厂家、生产日 期、生产批号、包装规格和失效日期等。 在使用过程中应按说明书要求的方法 和用量来进行。对所使用的器具要进 行彻底消毒,否则会污染疫苗,引起继 发感染。最好应注射一头猪更换一个 针头 [3]。
应选用与流行毒株最为匹配的疫 苗来进行免疫。虽然猪口蹄疫疫苗有 20 多种,但是随着病毒毒株变异,猪群 发生口蹄疫后仍然存在使用疫苗与流 行毒株不匹配的情况,引起免疫失败或 临床保护效果不良的情况,致使常有猪 群发病,给养殖业造成很大损失。因此 在实际养猪生产中,应及时检测并掌握 病毒特性及当地流行口蹄疫病毒毒株, 选用相应的疫苗免疫接种,才能获取理 想的保护效果,保证猪群的健康状况。 例如果发生的口蹄疫属于 A/Sea-97/G2 毒株 A 型的,就要选用猪口蹄疫 O 型、 A 型二价灭活疫苗,这是才是最匹配的 口蹄疫疫苗 [1]。
参考文献:
[1] 甘一波, 李汝, 张红云. 玉林市口蹄疫 免疫水平监测与免疫效果分析 [J]. 广西畜牧兽 医, 2011(6): 33.
奶牛场口蹄疫免疫程序
奶牛场口蹄疫免疫程序
奶牛场的口蹄疫免疫程序通常包括以下步骤:
1. 每年5月或10月全牛群进行一次无毒炭疽芽孢菌的免疫注射。
2. 全牛群每年进行2~3次口蹄疫疫苗的免疫注射。
3. 犊牛到成年奶牛的免疫程序:口蹄疫疫苗一年注射两次,分春、秋两季各一次或按免疫时间注射。
成年牛3-5ml/次,犊牛2ml/只,肌肉注射,瘦弱、病牛、临产前1.5个月、怀孕初期(3个月内)、4月龄以下牛禁用。
近两年发生过口蹄疫的地区实行每年四次免疫,每次免疫一个月后再注射一次加强免疫,推广使用浓缩的口蹄疫疫苗。
口蹄疫免疫接种工作中经常出现的问题及改进措施
问 题
给 牛 注 射 疫 苗 时 . 最 好 选 择 早 晨 注 苗 , 以便 有 足 够 时 间 观 察 ,若 出 现
过 敏 反 应 .要 立 即 处 理 。可 皮 下 注 射
针 头 消 毒 不 严 格 .或 针 头 大 小 型
11 对 口蹄 疫 防控 工作 认 识 不到 位 . 由 于 农 牧 团 场 的 特 殊 性 .每 一 次
1 . 过 敏 反 应 .4 2
首 先 , 利 用 各 种 方 式 大 力 宣 传
《 物防 疫法 》 动 ,同 时 要 做 好 与 基 层 主
要 领 导 的 沟 通 协 调 作 .多 了 解 养 殖
户 的 想 法 ,努 力 做 到 “ 防 群 控 ” 群 ;其
次 对 于 那 些 拒 绝 免 疫 的 “ 防 户 ”.可 拒
号选择不对 ,导致注射部位 出现脓肿 ,
肾 上 腺 素 ,2 %葡 萄糖 、安 钠 咖 、维 生 5 素 C、青 霉 素 进 行 静 脉 注 射 。
23 正 确 使 用 口蹄 疫 疫 苗 .
注 射 深 度 不 够 , 疫 苗 从 皮 肤 溢 出 使 注
射 剂量 不 足 等 。 注 射 部 位 不 准 确 ,为 了 操 作 方 便 . 防 疫 人 员 经 常 会 在 肩 胛 、后 腿 等 非 最
者 ,全 身 抽 搐 、粪 尿 失 禁 ,腹 下 、 四 肢 、 肛 门 、 阴 户 、 可 视 粘 膜 等 部 位 发
采 取 上 级 动 物 防 疫 监 督 机 构 ( 团 场 本 没 有 此 机 构 ) 和 本 团 的 综 合 治 理 部 门
联 合 执 法 . 为 防 疫 T 作 创 造 良 好 的 社 会 环 境 :再 则 ,与 防 疫 人 员 签 订 重 大
口蹄疫免疫接种注意事项及综合防控
措 施 。但 口蹄疫 病毒 型 多易变 , 主 宿 广 泛 ,致 病 性 强 ,而 免 疫 原 性 又 相 对 较 弱 ,该 病 传播 方 式 和 传 播 途 径 多而 复 杂 ,康 复 动 物 可 长 期 带 毒 排
毒 ,致 使 口蹄 疫 的 防 控 工 作 十 分 困 难 ,免 疫 接 种 尤 为 重 要 。 另 外 , 口 蹄 疫 疫 苗 在 免 疫 接 种 过 程 中有 免 疫 不 良反 应 ,严 重 的可 造 成牲 畜死 亡 ,
提 高 动 物 抵 抗 力 的 三 大措 施 都 遇 到
了前所未 有 的挑战 。 因此 , 口蹄 疫 的 防 控 和 免 疫 接 种 工 作 ,不 能 只 靠 兽 医界 的 力 量 就 能 完成 ,必 须依 法 防 治 ,群 防群 控 ,
放 弃 本 能 的 抵 抗 ,总 是 与 人 类 的 发
周 边 接 壤 的 国 家 一 直 都 有 口蹄 疫 暴 有 偶 然性 。世 界 各 国 对 该 病 非 常 重
展 相 抗 衡 。 以 口蹄 疫 为 例 ,尽 管 早 发 的报 道,所 以 口蹄疫的发生不具
在 14 5 6年就 有 了关于 口蹄 疫的描 述 ,
口蹄疫 的发 生 。
0~ 1 0k 以 外 ,这 在 F 0 m MD 2 .口蹄 疫 危 害 大 。 E蹄 疫 一 旦 移 动 5 l
另外临床康复动物的持续带毒根据vanbekkam1959年描述牛羊等反刍动物感染fmd病毒后28或更长时间仍可由咽喉部检出病毒称为持续感染其动物称健康带毒者带毒时间因动物种类品种而有差异水牛5年黄牛3绵羊9月山羊4个月野生反刍动物时间较短自然界群体带毒可达20年以上病毒的主要存在部位为反刍动物咽喉部fmdv传播途径难以切断
口蹄疫免疫程序及注意事项 - 猪病防冶
口蹄疫免疫程序及注意事项-猪病防冶口蹄疫被认为是强制免疫病的一种,易感染猪、羊等偶蹄类动物,由于其致死率高、传染性强、发病急促等原因,一直是我业内人士关心和讨论的主题之一。
本文就口蹄疫的免疫程序和相关的注意事项加以探讨分析,旨在更好的预防口蹄疫的发生。
我国为预防、控制严重危害人体健康和养殖生产的大型动物疫病的发生和发展,实施动物强制免疫这一管理措施。
为了更好的保护人体健康,促进我国养殖畜牧业的发展,因此加大对动物疫病的免疫工作力度显得非常重要,特别是在动物疫病与人之间互相传染和病毒快速变异的时候,做好动物疫病的免疫工作,与社会的安定团结及人类的生存发展是密不可分的。
在我国,动物疫病主要有四种,分别是口蹄疫、猪瘟、高致病性的猪蓝耳病和禽流感,现笔者针对口蹄疫病的免疫程序和相学习意事项加以阐述,内容如下。
一、口蹄疫的免疫1.疫苗的选择综合分析我国引发口蹄疫病[1]的病原体的流行特点,结果发现,易感染口蹄疫的动物如猪、羊、牛等在春季和秋季两季易感染口蹄疫,因此每年的春、秋两季是防控的重要时期。
依据中国农业部颁发的《口蹄疫防治技术规定》中规定,对易感口蹄疫病的动物选择O 型灭活疫苗进行集中的强制免疫,所有的疫苗应选择已被农业部批准的产品,且是由动物的防疫监督机构进行统一组织、统一供应分配的。
一年两次免疫。
保证在两次免疫之间,对新生、补检或者漏检的动物进行补充免疫。
2.免疫程序2.1新生家畜的免疫对于羔羊和猪仔,在其出生的30-45天内,对其进行初次免疫,注射剂量为1ml/只(头)。
所有的新生家畜得到初次免疫以后,时隔一个月以后进行再次的强化免疫,在这之后,每隔4个月就要免疫一次,剂量等要求与初次免疫一样。
具体情况具体分析,可以根据动物的抗体的监测结果对免疫程序进行稍许的改变。
2.2母畜的免疫对于不同时期的母畜,免疫时间不同。
配种之前,母畜应予以一个月一次的强制免疫;处于孕期的母畜应注意,在配种后的一个月以及产前的两个月以内,严禁免疫,这样做的目的是减少因免疫接种而造成的一些不良的应激反应。
简述口蹄疫免疫抗体监测的方法及意义
一、检测方法特异性抗体检测在疫病诊断、传染病流行病学调查及评价疫苗免疫效果评价具有重要的参考意义。
现阶段,抗体检测的方法较多,除传统的沉淀反应,凝集试验,补体结合试验外,标记免疫测定已成为主要的免疫抗体测定技术(如酶联免疫测定、放射免疫测定、荧光免疫测定、发光免疫测定等),而酶联免疫测定是目前应用最为广泛的方法之一。
1.中和抗体中和抗体是当病原微生物侵入机体时产生的相应的抗体。
病原微生物入侵细胞时需要依赖病原体自身表达的特定分子与细胞上的受体结合,才能感染细胞,并进一步扩增。
中和抗体是B淋巴细胞产生的某些抗体,中和抗体的作用机制是改变病毒表面构型,阻止病毒吸附于易感细胞,使病毒不能穿入胞内进行增殖;病毒与中和抗体形成的免疫复合物,易被巨噬细胞吞噬清除;有包膜的病毒表面抗原与中和抗体结合后,激活补体,可导致病毒的溶解。
病毒中和试验是世界动物卫生组织推荐的标准方法,抗体与口蹄疫病毒特异性中和作用使病毒失丧失感染力,需要培养病毒敏感细胞;所需的病毒必须为活病毒,具有感染性。
2、结构蛋白抗体在原则上来说,只要是异己蛋白质进入机体,就会被免疫系统识别,然后产生相应抗体。
灭活疫苗的本质是一种抗原,只不过它通过改造已经没有了病毒的毒性。
当疫苗注入到机体之后,由于病毒抗原含有多种不同的蛋白,因此机体会产生不同的抗体。
然而,并非所有的结构抗体都有抗病毒的作用。
中华人民共和国农业农村部规定的口蹄疫免疫抗体评价的方法分别为液相阻断E L I S A抗体检测试验、正向间接血凝试验、V P1结构蛋白抗体检测试验。
2.1液相阻断ELISA抗体检测试验(国际贸易指定法)我国目前采取以免疫为主的综合防控措施进行口蹄疫防控,免疫抗体检测是衡量疫苗免疫效果的重要指标。
目前,国际粮农组织(FAO)和世界动物卫生组织推荐液相阻断ELISA来对口蹄疫免疫效果进行评价。
硏究表明口蹄疫液相阻断ELISA抗体检测技术具有良好的敏感性、快速诊断性和可重复性,与攻毒保护有很好的相关性,现被广泛应用于口蹄疫免疫抗体水平的监测。
猪口蹄疫疫苗免疫时间,什么时候打,怎么打
猪口蹄疫疫苗免疫时间,什么时候打,怎么打注射完口蹄疫疫苗后,需要14-15天左右的时间才能生效,免疫持续期6个月。
育肥猪:一般在出生后30-40天内进行注射。
种公猪:在每年的9月和12月份时进行接种。
种母猪:在分娩前1.5个月左右接种。
乳猪:断奶后首免,50-60日龄二免,70-80日龄三免。
一、猪口蹄疫疫苗免疫时间,什么时候打1、一般情况下,注射完口蹄疫疫苗后,需要14-15天左右的时间,猪才会产生抗体发挥作用,在注射后,免疫持续期6个月。
2、如果是育肥猪,一般在出生后30-40天的时候进行首免,注射方法为肌肉注射,后海穴注射;出生后60-70天左右进行二免,注射方法为肌肉注射,后海穴注射。
3、如果是种公猪,每年接种2次,分别在每年的9月和12月份时进行接种。
4、如果是种母猪,一般在分娩前1.5个月左右接种,需注意母猪临产前半个月和怀孕前一个月不能注射。
5、如果是乳猪,断奶后,进行猪瘟和口蹄疫的首次接种;50-60日龄,进行猪瘟和口蹄疫的二免;70-80日龄,进行口蹄疫三免。
二、猪口蹄疫怎么打1、对于体重在10-25kg的猪,每头猪在耳根后肌肉注射1ml的猪O型口蹄疫灭活疫苗。
2、对于体重在25-50kg的猪,每头猪在耳根后肌肉注射2ml的猪O型口蹄疫灭活疫苗。
3、对于体重在50kg以上的猪,每头猪在耳根后肌肉注射3ml 的猪O型口蹄疫灭活疫苗。
4、如果是2-4周龄的猪应使用2.5cm长的16号针头,4周龄以上的猪使用4cm长的18号针头。
5、在注射前,对于针头和注射器,需要使用湿热方法高压灭菌或用洁净水加热煮沸消毒法消毒至少15分钟。
接种时,一个针头接种一头猪,不可以一个针头接种多头猪。
6、注射时,注射部位需要剪毛,剪毛后使用70-75%的酒精棉或碘酊擦净消毒,然后用挤干的酒精棉擦干消毒部位,注射时疫苗必须注入肌肉内,不能过浅。
7招对抗口蹄疫免疫应激
7招对抗口蹄疫免疫应激1、晴天:陈老师好,我的猪场口蹄疫疫苗以前就打一次,这样能起到保护效果吗?陈老师回复:口蹄疫只免疫一次是不行的。
因为口蹄疫疫苗是灭活苗必须做好基础免疫,即免疫两次(首免和加强免疫),是指为使机体能够有效地产生高水平的中和抗体,首次免疫某种疫苗(灭活疫苗)应采取的免疫方法。
大部分疫苗的基础免疫需要间隔一个月接种2次后才能达到满意的免疫效果,即完成疫苗的首免和加强免疫。
首免是指机体初次接触疫苗抗原所进行的特异性免疫应答,疫苗初次免疫后产生中和抗体水平较低,维持时间较短,故首免的主要目的是识别疫苗抗原,致敏免疫系统,产生记忆淋巴细胞。
加强免疫: 即首免后一个月进行再次免疫,首免后免疫系统产生免疫记忆效应,活化的记忆淋巴细胞再次接受同一抗原刺激之后能够产生更快、更强的应答反应,产生高水平的中和抗体,使机体产生更持久的免疫力。
防控好口蹄疫必须做好口蹄疫基础免疫然后进入正规免疫程序;正规免疫程序指根据疫病情况、动物体内抗体变化状况以及现有疫苗的特性,选用适当的疫苗,为使动物机体获得稳定免疫力而制定的合理免疫程序。
2、蒿子:陈老师好,我的猪场口蹄疫发病为什么喜欢从肥猪开始?陈老师回复:这几年大家肥猪喂得比较大,已超过口蹄疫疫苗抗体保护时间,口蹄疫疫苗抗体保护时间为4-6个月,现实情况下只能做4个月考虑。
国家每年对宰场猪O型血清抗体抽检:合格率2010年40.5%;2011年45.1%;2012年64.3%;2013年64.5%;年63.2%;都没有达标。
故要想防控好肥猪口蹄疫建议大家做好育肥猪口蹄疫疫苗免疫;以下育肥猪免疫程序供规模猪场参考:8--12周首免1-2ml/头;二免12-16周2ml/头;三免175日龄视情况决定。
3、吕晶晶:问陈老师,您好,口蹄疫病的流行跟以前相比,现在没有了季节性吗?陈老师回复:因为口蹄疫血清型多,有7个主型65个亚型(65个亚型是97年的数据,目前有80多个亚型),我国主要流行O型,该型有9个亚型。
口蹄疫免疫实例效果分析
269 日龄 结 果 分 析 见 表 5 . 0 。
表 59 0日龄 免 疫 结 果 分 析
O D值< . 阴性 , D值> . 阳性 . D值> 04为 O 04为 O
06为 可 以保 护 。 . 222 . 5日龄 结果 分析 见表 2
说明2 5日龄母 源 抗 体 在 仔 猪 体 内起 保 护 作
1临 床 症 状 .
所 好转 , 欲 略增 、 食 腹泻 减 轻 , 改 善 时 间不 长 , 但 病 情 又 重新加 重 ,即使原 本 未见 两 耳发 紫 的也 开 始
发紫了, 以至全 身发 紫直至 死亡 。 33如果 被误 诊 为蓝 耳 病 , 蓝耳 病 活苗 做 紧 ‘ 用 急 预防接种 后 , 反而 会使病情 加重 。
W A. x z. m VN gm s o z t
E malx y 1 6c m — Jrms@ .o j 2
麓模 彝 猪
口蹄 疫免 疫 实例 效 果分 析
姜 杰 ,张 永力 , 昆腾 余 ( 南省黄 泛 区鑫欣 牧业 有 限公 司 , 河 河南 西华 4 6 3 6 6 2)
1材 料 和 方 法
11试 验 动 物 .
表 1注 射 O 型 口蹄 疫 疫 苗 后 抗 体 检 测 值
从 黄 泛 区鑫 欣 猪 场 分别 取 2 日龄 、2 日龄 、 5 4
7 目龄 、0 日龄 、3 日龄 、5 目龄 六 个 阶 段 的 健 0 9 10 10
康猪 只 , 每个 阶段 1 5头 , 计 9 共 O头进 行试 验 。
如 何 提 高 疫 苗 的 免 疫 效 果 .猪 场 篇
Emalx y 6c m — irms @1 。 : j 2 o
口蹄疫防治技术之疫苗免疫
口蹄疫防治技术之疫苗免疫由于猪口蹄疫的血清型有O型、A型、C型、南非1、2、3型和亚洲1型7个血清型,各主型又分若干亚型,各主型之间无交叉免疫性,再加上我国猪用口蹄疫疫苗正处于发展期,使得疫苗的预防也有一定的局限性。
但是不论从哪个角度考虑,疫苗预防传染病应该说还是最好的办法。
下面就从猪用口蹄疫疫苗的种类,免疫程序及使用方法,注意事项等方面对这一问题作一分析!一. 疫苗的种类及特点1. 疫苗的种类猪用口蹄疫疫苗主要有弱毒苗和灭活苗两种,但前者对猪是不安全的,世界各国均不用于猪。
灭活苗接种后对牛保护力较好,猪的免疫力的产生较弱些,用于猪的灭活苗中的病毒量必须比牛大310倍,且应加相应佐剂如皂素、明矾或油包水型乳剂等。
我国所用的灭活苗为O型BEI(或AEI)灭活苗佐剂苗。
一般认为免疫后7d可测得口蹄疫特异性抗体,21d左右达峰,维持抗病力时间约为24个月,据报道国外同类产品可抗1000ID50强毒攻击,国内浓缩苗可抗 200ID50强毒攻击,普通苗仅可抗20ID50强毒攻击。
2. 特点及不足一是疫苗的剂量低,目前流行的毒株与以前的有80%同源性,仍有保护力。
二是疫苗质量不过关免疫抑制性疾病的存在,免疫力不够。
三是毒株的变异使得免疫效果有局限性。
四是注射疫苗副反应严重,甚至造成死亡二. 免疫程序及使用方法1.猪用口蹄疫疫苗建议免疫程序母猪:每年至少 3 次全场:每3-4个月全场接种一次疫苗后备母猪年轻公猪:配种前免疫一次公猪:每4个月接种一次保育猪:7-8周龄首次免疫小猪:11或12周龄加强免疫一次紧急时:周围猪场爆发需要全场加强免疫一次1. 使用方法猪口蹄疫疫苗的注射方法以肌肉注射为主,但是后海穴免疫比常规肌肉注射用苗量减少一半,不良反应小,产生抗体滴度高一. 注意事项1. 疫苗不是万能的,但是不注射得病后就万万不行拉。
2. 注意正确的使用。
现实中存在以下问题1)、要求体重在25kg注射1次,隔2-3周再注射1次,可是有的猪体重在50kg以上还未进行首免。
口蹄疫免疫接种规程
口蹄疫免疫接种规程
第一、免疫次数要到位但不可过多。
普遍情况下,8月中旬前后首次免疫,30天后进行第2次免疫,第3次免疫可以间隔45-50天,这样即便天气转凉,口蹄疫流行也不可怕,因为抗体保护,发病率微乎其微。
第二、跟胎免疫口蹄疫的猪场,无论种母猪、种公猪,还是育肥猪也要求接种3次或3次以上,以确保口蹄疫病毒不再发生和流行。
第三、疫苗毒株类型的选择。
口蹄疫病毒具有多型性、易变异的特点。
我国的病毒型为A、C、O和亚洲I型。
因此注射口蹄疫疫苗前,需要我们选择疫苗毒株的类型,少走弯路。
第四、把握好注射的剂量。
一般来说,疫苗接种应严格按照说明来进行注射,规模养殖场的口蹄疫免疫程序也可根据本猪场猪群的免疫抗体检测情况进行修改和制定。
有时根据地区或病毒流行性的不同,也有必要适当的加大或减少剂量。
口蹄疫免疫实施方案
口蹄疫免疫实施方案一、规定对全部猪进行O 型口蹄疫强制免疫;对全部牛、羊、骆驼、鹿进行O 型和亚洲 I 型口蹄疫强制免疫;对全部奶牛和种公牛进行 A 型口蹄疫强制免疫。
二、免疫程序规模养殖场按推荐免疫程序进行免疫,散养家畜在春、秋两季各实施一次集中免疫,对新补栏的家畜要及时补免。
1.规模养殖家畜和种畜免疫仔猪、羔羊:28~35 日龄时进行初免。
犊牛:90 日龄左右进行初免。
全部新生家畜初免后,间隔 1 个月后进行一次加强免疫,后来每隔4~6 个月免疫一次。
2.散养家畜免疫春、秋两季对全部易感家畜进行一次集中免疫,每月定时补免。
三、紧急免疫发生疫情时,对疫区、受威胁区域的全部易感家畜进行一次加强免疫。
边境地区受到境外疫情威胁时,要对距边境线 30 公里以内的全部易感家畜进行一次加强免疫。
近来 1 个月内已免疫的家畜能够不进行加强免疫。
四、使用疫苗种类牛、羊、骆驼和鹿:口蹄疫O 型-亚洲 I 型二价灭活疫苗、口蹄疫O 型-A 型二价灭活疫苗和口蹄疫 A 型灭活疫苗。
猪:口蹄疫O 型灭活类疫苗或口蹄疫O 型合成肽疫苗(双抗原)。
空衣壳复合型疫苗在同意范畴内使用。
五、免疫办法多个疫苗免疫接种办法及剂量按有关产品阐明书规定操作。
六、免疫效果监测1.检测办法亚洲 I 型口蹄疫:液相阻断 ELISA;O 型口蹄疫:灭活类疫苗采用正向间接血凝实验、液相阻断 ELISA,合成肽疫苗采用 VP1 构造蛋白 ELISA。
A 型口蹄疫:液相阻断 ELISA。
2.免疫效果鉴定猪免疫 28 天后,其它畜 21 天后,进行免疫效果监测。
亚洲 I 型口蹄疫:液相阻断 ELISA 的抗体效价≥26 鉴定为合格。
O 型口蹄疫:灭活类疫苗抗体正向间接血凝实验的抗体效价≥25 鉴定为合格,液相阻断 ELISA 的抗体效价≥26 鉴定为合格,合成肽疫苗 VP1构造蛋白抗体 ELISA 的抗体效价≥25 鉴定为合格。
A 型口蹄疫:液相阻断 ELISA 的抗体效价≥26 鉴定为合格。
猪口蹄疫的免疫与疫苗应用
口蹄疫(foot-and-mouth disease, FMD)是由口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease Virus, FMDV)引起的一种急性、热性、高度接触传染性并可快速远距离传播的动物疫病,世界动物卫生组织(OIE)将其列为必须报告的动物疫病,我国规定为一类动物疫病。
其主要感染偶蹄兽,患病动物的口、舌、唇、蹄、乳房等部位发生水疱,破溃形成烂斑。
1 FMD-畜牧业的大敌猪、牛、羊等主要的家畜均可感染此病,并能形成大规模流行,该病的发病率几乎达100%,犊牛、仔猪以及动物发生恶性病型时,死亡率可达50%~100%。
由于该病传染性极强,对病畜和怀疑处于潜伏期间的同群动物必须紧急处理,对疫点周围的广大范围必须隔离封锁,禁止动物移动和畜产品调运流通。
由此导致该地区甚至该国家的畜产品进出口贸易停止,造成巨大的经济损失和政治影响。
2010年,日本因该病造成直接经济损失10亿美元,韩国11.41亿美元,是发达国家近10年来最严重的疫情。
我国每年因口蹄疫造成的损失平均在110亿~120亿元之间,约占畜牧业平均增加量的17%~18%。
FMDV 宿主广泛,变异性强,危害公共卫生;引起疫源争论,社会秩序混乱,进出口限制,造成不良社会影响;还是国际禁止生物武器核查对象,有一定军事危害。
2 病原口蹄疫病原是口蹄疫病毒,属小RNA 病毒科(Picornaviridae)口蹄疫病毒属(Aphthavirus),病毒粒子直径为20~25nm,呈大致的圆形或六角形,无囊膜。
FMDV 有A、O、C、SAT1、SAT2、SAT3以及Asia 1型7个血清型,猪口蹄疫的免疫与疫苗应用张淑刚,周绪斌(新疆天康畜牧生物技术股份有限公司,乌鲁木齐 830023)每个血清型又包含若干个亚型。
该病毒不仅在各型间没有交叉免疫性,同血清型的各亚型之间也仅有部分交叉免疫性[1]。
口蹄疫病毒在环境中有一定的存活能力,病毒在干燥粪便中存活14 d,泥浆中存活6个月,尿中存活39 d。
猪口蹄疫免疫不良反应救治
使用过期 、 失效疫苗 ; 使用包装 破 损、 疫苗 色泽改变、 疫苗 内有 注射疫苗后
异物 的疫 苗 : 使用 不按 规 定 方法
1 严重反应型 . 1
(— i 患 猪 步 态 蹒 跚 , 吸 3 5rn) a 呼
保存、 运输 的疫苗 ; 注射部位不 准确 ; 注射剂量过大等均可造成
塾照
杨 芳
堕 艚
文章 编 号 10 — 9 4 2 1 ) 10 5 — 2 0 1 8 6 {0 1 1 - 0 1 0
( 贵州 省六 枝特 区农 业局 , 州 六枝 5 4 0 ) 贵 5 3 0
中图分 类号 :8 82 53 ¥ 5 .8 .
文献 标识 码 : C
口蹄疫是 由 口蹄疫病毒 引
1 中毒症 状
稍 肿 ,包膜不 易剥落 ,胃黏膜
充 血 、 血 , 膜 易 脱 落 , 胃 出 黏 瘤
用解磷定 , 2 m / 按 0 g 千克体重溶
于 1%葡 萄糖 注 射 液 50m 中 0 0 L 静 脉 注 射 , 隔 2h重复 静 注 1 每 次。 硫酸 阿托 品和 解 磷 定 要 交
期等证 明 ; 过期失效的 : 包装破
损、色泽改变或疫苗 内有异物 的;疫2 前应置于室温 (2 左右 ) mn 2℃ 3 i 0 左右 ; 并应充分震荡、 摇匀, 使用
过程 中要保持匀质 : 疫苗启封后
郁, 食欲减少或废绝 , 反刍停止,
呆 立不动 ,呻吟 ,呼吸 急促 , 流
肿 , 淋 巴结 肿胀 、 肺 出血 , 吸 呼
道 分 泌 物 增 多 ,气 管 内 有 白色
替 使用 ,直 到病 羊 瞳孔散 大 , 呈 现 视 觉 反 应 ,流 涎 停 止 , 出 汗停 止 ,口腔 干燥 ,呼吸症状 减 轻。 ・ 4 中药解毒 . 2 每 5 千 克体 0 重用 当归、 大黄各 5 g 防风、 0, 白
浅谈家畜口蹄疫强制免疫的注意事项
猪 场 。病 猪 群 为 该 五 家 猪 场 ( 下 简 以
称 试 验 场 )提 供 ,根 据 详 细 询 问 病 历 , 流 行 病 学 ,临 床 症 状 和 病 理 变 化 所 呈
康 发 展 造 成 一 定 危 害 。 为 了 进 一 步 探 讨 对 猪 瘟 的 防 控 方 法 ,为 防 控 提 供 依 据 ,我 们 以 罗 清 生 主 编 的 《 畜 传 染 家
病 学 》 中所 编 导 的 疫 苗 疗 法 作 用 机 理 为依 据 , 采 用 对 发 生 猪 瘟 的 猪 群 全 部 猪 只 实 施 猪 瘟 活 疫 苗 注 射 的 方 法 , 观 察 防控 试 验 效 果 。
1 材 料 与方 法
11 试 验 药 品 .
机 制 的 防 卫 机 能 和 迅 速 恢 复 机 体 内部
保 护期 为 6个 月 。 ( ) 规 模 养 猪 场 种 公 猪 :每 年 接 2 种 3次 ,繁 殖 母 猪 :配 种 前 2周 接 种 ;
但 口蹄 疫 病 毒 型 多 易 变 , 致 病 性 强 , 而 且 传 播 方 式 和 传 播 途 径 复 杂 ,康 复 后 的 动 物 可 能 长 期 带 毒 排 毒 ,致 使 口 蹄 疫 的 免 疫 接 种 尤 为 重 要 。 口蹄 疫 疫
号 长 4O m 针 头 : 牛 使 用 1 .e 的 2号 针 头
( )要 求 包 装 完 好 ,防 止 瓶 体 破 2 裂 ,避 免 E光 直 射 和 高 温 。 t ( )疫 苗 入 库 时 作 好 登 记 , 并 采 3
取 “ 进 先 出 ” 的原 则 。 先
2 免 疫 的 程 序
或 标 签不 清 楚 、疫 苗 有异 物 或 变 质 、 有 效 期 已过 等 ,均 不 能使 用 。
口蹄疫免疫方案和措施
口蹄疫免疫方案和措施1. 引言口蹄疫(FMD)是一种严重影响偶蹄动物的病毒性疾病,主要通过空气传播和直接接触传播。
这种疾病对畜牧业造成了巨大威胁,因此,实施免疫方案和措施是预防和控制口蹄疫传播的关键。
本文将讨论口蹄疫免疫方案和措施的重要性,以及一些常用的免疫策略。
2. 口蹄疫免疫方案的重要性在养殖业中,口蹄疫疫情爆发会导致严重的经济损失。
因此,为了保护牲畜的健康和避免疫情的蔓延,制定和实施有效的口蹄疫免疫方案是非常重要的。
免疫方案的目标是通过提供免疫屏障来阻断病毒传播链,有效地控制疾病的传播。
3. 口蹄疫免疫策略针对口蹄疫的免疫策略可以分为主动免疫和被动免疫两种。
3.1 主动免疫主动免疫是通过接种疫苗来激发动物自身的免疫防御机制。
常见的主动免疫策略包括: - 选择合适的疫苗:口蹄疫疫苗的选择应基于病毒株的流行情况和免疫保护的需求。
- 接种时间和频率:根据兽医指导,养殖户应定期接种疫苗,以确保动物持续获得免疫保护。
- 合理的剂量:根据动物的年龄、体重和免疫历史,确定适当的疫苗剂量。
- 采取适当的接种方式:常见的接种方式包括皮下接种和肌肉接种。
- 接种后观察和记录:接种后要密切观察动物的反应并记录下相应的免疫信息。
3.2 被动免疫被动免疫是指通过给予动物抗体来提供临时的免疫保护。
被动免疫主要包括以下措施: - 给予新生动物初乳:初乳中含有丰富的母源性抗体,可以为新生动物提供抗体,帮助它们在抵抗病原体侵袭时获得一定的免疫保护。
- 采用体外抗体:对于暴露在口蹄疫病毒环境中的动物,可以考虑使用体外抗体来提供临时的免疫保护。
4. 口蹄疫免疫措施除了免疫方案外,还需要采取其他措施来最大限度地减少口蹄疫的传播风险。
4.1 隔离措施将可疑感染动物和患病动物与健康动物隔离是控制口蹄疫传播的关键。
隔离措施包括: - 对患病动物进行隔离和治疗; - 对可疑感染动物进行隔离,并进行相应的检测确认; - 对新引入的动物进行隔离观察,以确保它们没有潜在的感染风险。
猪口蹄疫的免疫及免疫失败对策措施
成 肽疫 苗要 在2 ℃ 8 ℃条件 下贮 藏 ,不 能低 于O ℃ ,疫苗 生产 包装 1 . 2 . 4 . 1 严 格按 照疫 苗 要 求 的操 作 规程 进行 对 有病 、瘦 弱 、 后 ,或者送到库房后 ,管理员有可能没有及时放入贮藏室 ,也有 临产 ( 1 0 1 5 d )或吃奶 的,不足月龄的猪不予注射 ,待病猪康 可 能管 理员 误把 疫苗 放入 急冻 室 ,使 疫 苗失效 ; ( 2 ) 贮 藏 室停 电 段 时间 ,贮 藏 室没 有 配备 停 电宝 、发 动 机或 者没 有 及 时送 电 , 复 ,母猪产后或乳猪 断奶后再按规程补 注。接种 生猪应处 于休
射 ;猪体重5 0k g 以上 ,3 m U 头 ,耳后肌 肉注射。 1 . 2 . 4 疫 苗使 用 注意 事项
剂量 1 o r l l 头 ,肌 肉注射 ;猪体重2 5—5 O k g ,2 ml / 头 ,肌 肉注 入库登记和加强管理后备用 ,这一环节 中的疫苗应该相对安全。 疫 苗失效 的原 因 : ( 1 ) 猪 口蹄疫 O 型 浓缩灭 活苗 、猪 口蹄疫O 型合
. 2 . 6 母猪 注射 疫苗 进 行 。并 且 规定 了使 用 疫苗 种 类 、免 疫 接种 方法 及 免 疫效 果 监测 1 方 法 等 。实行 强 制 免疫 ,并 要 求 各个 部 门定 期 监测 抗 体水 平 并逐 时会造 成流 产或
一
每年春秋两季 ,乡镇畜牧站对辖区内的
室 贮藏 后备 用 ; ( 3 )个别 乡镇 畜牧站 由于人员 少 ,条件 差 ,只有 猪全部进行强制 口蹄疫免疫时,财政经费投入要到位 ,宣传的力 个小 的冰箱 ,远 远 不能 够 把领 取 的疫 苗全 部放 入 贮藏 室及 时进 度要够,消除防疫员和养殖户 的后顾之忧和加大对兽 医、防疫员 行 贮藏 ,剩余 的疫 苗 就堆 放 在办 公 室 ,时 间久 了就 疫苗 失 效 了 , 的免疫 培训 。 . 5 . 2 责任 明确 主管部门要加强防疫员责任心的教育 ,树立全 待贮藏室的疫苗用完后 ,又把堆放在办公室的失效疫苗放人贮藏 3 室备用 ; ( 4) 有的乡镇畜牧站条件差 ,位置偏远 ,只有旧冰箱, 心全 意为 人 民服 务 的思 想 ,对各 村 、各 队 、各 户 、各 圈 舍 、每 甚至冰箱坏了也没有及时修理 ,冰箱根本就没有贮藏功能; ( 5 ) 头 生 猪进 行 强 制 免 疫 时 ,对 已 免疫 的养 殖 户 张 贴 免 疫 明 白纸 并 个 别畜 牧站 没有 疫苗 专 门管理 人员 和疫苗 贮藏 专用 空 间 ; ( 6) 冰 公 布 防疫 员名 字 、 电话 ,对 漏 免 的养 殖 户 要 张 贴 漏 免 告 知 书 和 箱停电 ,乡镇畜牧站可能根本没有配备冰箱停电宝 、发动机或者 防疫 员 名 字 、 电话 ,让 养 殖 户第 1 时 间 了解 自己 的生 猪 的 免疫 情 没 有及 时送 电 ,时 间久 了疫苗 也可 能失效 ; ( 7 )有的畜 牧站 由于 况 。 如果 有 应 急反 应 和 漏 免 ,要 及 时联 系 防疫 员 ,更 早 抢 救 和 历 史 原 因工 资一 直 没有 保 障 ,难 免 有个 别 畜牧 站 老职 工有 情 绪 , 补免 。
口蹄疫强制免疫注意事项
口蹄疫强制免疫注意事项梁琴,杨雪艳,白彦芳(河北省灵寿县畜牧兽医站050500)摘要:为提高易感家畜特异性抵抗力,口蹄疫强制免疫主要做好疫苗的选择、保存与回温,免疫动物的检查,免疫前后环境、药物、饲料的影响,器械准备与消毒,疫苗反应及处理,人员培训方面的工作。
关键词:口蹄疫;免疫;注意事项口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的一种急性、高度接触性传染病,主要感染猪、牛、羊等偶蹄动物。
该病传播速度快、传染性强、危害巨大。
实行强制免疫,提高易感家畜的特异性抵抗力是控制该病的重要措施。
笔者多年在第一线从事畜牧兽医防疫工作,仅就口蹄疫强制免疫提出应注意的几个问题。
1疫苗的选择、保存与回温1.1根据疫情选择疫苗目前口蹄疫表现为O型持续存在,优势毒株为Mya-98;A 型散发流行,优势毒株为Sea-97-G2,其对猪、牛的侵害性均强,2015、2016、2017、2018年猪的发病数明显增加,超过牛的发病数量。
针对目前的发病情况,建议选择针对性强、毒珠匹配性高的O型、A型双价灭活疫苗进行免疫,这是作好免疫工作的保证。
1.2确保疫苗安全保存疫苗需要在2℃~8℃避光保存。
保存时不能紧贴冰箱内壁、以免造成冻结;避免阳光直射,以免疫苗的有效抗原降解;运输疫苗时,应有完善的冷链无缝对接。
1.3疫苗使用前需要回温使用前将疫苗从冰箱取出后于室温下放置,确保疫苗温度为20℃~25℃后再进行免疫接种。
这是因为灭活疫苗在2℃~8℃保存,与动物正常体温相差较大,直接注射容易引起动物冷刺激,进而引起应激反应。
另外,口蹄疫疫苗是油苗,低温时通针性差,注射困难。
1.4使用前进行疫苗检查免疫接种前,应查阅疫苗的生产日期、保质期、疫苗瓶是否有裂损、封口是否严实、瓶中是否有异物等。
正常的口蹄疫疫苗肉眼观察为乳白色或淡粉色均匀乳状液,允许有少量油相析出或乳状液柱分层(不超过1/10),振摇后呈均匀乳剂。
2免疫动物的检查2.1免疫接种前应检查母畜怀孕状况若母畜配种不满30d或一个月内即将分娩,则不要免疫接种疫苗,作好记录,待母畜配种超过一个月或产后再进行补免。
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1.概述口蹄疫(Foot and mouth disease, FMD)是由口蹄疫病毒(Foot and mouth disease virus, FMDV)引起的牛羊猪等家畜严重的急性传染病,由于其传播快,给畜牧业造成了巨大的经济损失,而且严重影响国际贸易,世界动物卫生组织将其列为必须上报的疫病之一。
FMD 血清型众多,包括O、A、Asia1、SAT1、SAT2和SAT3型共7个血清型,血清型间无交叉保护,造成疫病控制难度较大。
截至到2010年12月,全球FMD流行国家达60个,大多集中在亚非拉等发展中国家,给这些国家的畜牧业发展带来消极的影响,而因FMD贸易壁垒造成的畜产品出口损失远远大于疫病本身所带来的动物死亡的损失。
世界各国都通过种种努力实现OIE认定的“无FMD疫区国”地位,发达国家通过扑杀等措施几乎没有FMD的流行,而南美洲一些国家通过免疫接种等措施实现了无FMD疫区或部分地区无疫区。
欧洲上世纪90年代开始实行不免疫策略,在疫情暴发时采用扑杀的手段控制FMD,但英国2001年FMD的爆发给当地经济社会造成巨大的损失,促使相关机构开始修订FMD防控策略,2003年欧盟修订了FMD防控策略,肯定了疫苗免疫在FMD爆发时的作用,随后欧盟多个国家将疫苗免疫作为补充手段用于FMD的控制。
灭活疫苗在欧美等地的FMD防制和根除中发挥了重要的作用,直到今天,灭活疫苗仍然是成功防控FMD的重要措施,经过几十年的发展,FMD灭活疫苗在抗原生产、灭活、浓缩纯化、乳化等方面不断丰富和发展,在动物疫苗生产中已形成具有示范性的工业化生产体系。
目前,世界上FMD灭活疫苗生产和应用的主要有BEI灭活油佐剂疫苗和甲醛灭活铝胶皂素疫苗,对于灭活疫苗的质量控制上,更注重于疫苗的生物安全和免疫效力两个方面,因此,近些年来,FMD研究机构和生产厂家将力量集中到抗原生产工艺、灭活剂选择、浓缩纯化、佐剂以及生产过程疫苗效力的替代检验等关键技术的研究。
2.FMD灭活疫苗历史纵观FMD疫苗的研究和应用历史,FMD疫苗经历了灭活疫苗、活疫苗、灭活疫苗、新型疫苗这一历史进程和发展趋势。
而灭活疫苗从最初的舌皮组织毒经甲醛灭活制成的疫苗到后来的细胞培养病毒经BEI灭活制成疫苗,经历了20年的时间。
FMD病毒抗原生产方式也主要有三种方式: 牛舌皮组织生产的Frenkel培养方法;转瓶BHK21细胞单层培养法;BHK21细胞悬浮培养方法,转瓶单层培养方法是劳动密集型生产方式,生产过程生物安全较难控制,容易散毒,而悬浮培养法属于技术密集型生产方式,制备病毒抗原快速便捷,能很好的保持生产过程生物安全,是目前疫苗的主要生产方式。
截止2011年年初,我国已有两个国家指定口蹄疫疫苗企业采用了悬浮工艺生产口蹄疫疫苗。
该工艺的推行势必会给口蹄疫疫苗的生产甚至动物疫苗的生产的工艺带来巨大革新,也势必会促进我国兽用疫苗质量的巨大提升。
有报道称目前我国的口蹄疫疫苗质量及检验技术已达到世界水准。
2.1组织舌皮毒该方法制造的FMD灭活疫苗最早可追溯到上世纪20年代。
1926年,法国科学家Vallee等发现FMD病毒经甲醛灭活后,仍具有免疫原性,但工艺不好控制,灭活的病毒要么留有残毒,要么失去了免疫原性。
1939年,丹麦科学家Schmidt发现氢氧化铝胶体具有无毒性和免疫刺激的功能。
1937年,德国科学家Waldmann首次将病毒的灭活与乳化引入到FMD疫苗生产中来,获得了符合实际应用的FMD疫苗-铝胶甲醛灭活疫苗。
1947年,Frenkel等首次采用牛舌上皮细胞培养FMDV获得成功,为抗原的大量生产提供了经济、稳定的途径,该疫苗在欧洲FMD防控中发挥了巨大的作用。
但这种疫苗制苗材料来源不易,生产和应用受到限制。
2.2 单层细胞培养毒Frenkel等培养系统建立以后,组织培养学快速发展,原代细胞培养体系也迅速建立起来,1960年,利用转瓶培养体系建立的牛肾细胞原代培养建立起来,紧接着,BHK21传代细胞系得到了应用,传代细胞比原代细胞具有较多的优点。
上个世纪60年代,人们就开始采用转瓶生产病毒,该工艺成熟度高,占地面积小,投资成本小等优点,因此许多国家建立了规模化生产工厂,截至到目前,我国仍然以该工艺为FMD疫苗主要生产方式。
然而,该系统劳动量大,生产过程难以保证生物安全和疫苗质量批次不稳定等因素,几乎在发达国家停止应用。
1967年,人们利用微载体系统建立起了BHK21细胞悬浮培养体系,在实验室的体系得到了批量化的生产。
尽管如此,微载体由于其成本和系统的复杂性在FMD疫苗的应用上没有得到工业化应用。
2.3悬浮细胞培养毒1962年,人们发现BHK21细胞能全悬浮培养,细胞在此体系中增值速度很快,在较短的时间便可以达到工业化量。
1985年,这种体系被广泛的用在FMD疫苗生产中。
至今,世界上已经有5000L的发酵罐在应用。
细胞在一定浓度的小牛血清和MEM培养基中,密度在2~3d 即可增加到5×106个/ml或更高。
悬浮培养在FMD疫苗生产中处于核心地位。
1965年,生物反应器悬浮培养最早用于口蹄疫疫苗生产,当时的生物反应器容积是30L。
1983年,英国Wellcome公司就已能够利用5000L的细胞罐大规模生产口蹄疫疫苗。
目前,商品化的生物反应器已经可以达到20000L,大大提高了疫苗的生产效率和疫苗的质量,降低生产成本。
悬浮系统的应用,使无血清悬浮培养成为疫苗生产过程的主要工艺之一。
通过用已知人源或动物来源的蛋白或激素代替动物血清进行细胞悬浮培养,能减少后期纯化工作,提高产品质量,在实际生产不仅能够减少生产中污染几率,而且还能避免血清中潜在的一些病原微生物影响细胞培养或者对疫苗使用者造成威胁,也便于在生物反应器中进行代谢流分析,实施在线过程监控,精确投料。
无血清产品更加符合国际GMP要求,对我国FMD疫苗走向国际市场具有重要的现实和长远意义。
3.FMD疫苗生产和使用中的关键要素3.1病毒种子一般来说,一个好的疫苗毒株应该选择流行株,但是流行株不一定能够作为疫苗毒株来使用,首先疫苗毒株必须适应细胞,保持其毒力、抗原性稳定,而且其抗原谱必须广,能够保护大多数流行野毒的攻击。
因此,必须满足上述条件的流行毒株才可以作为疫苗候选毒株。
随着现代分子生物学的发展,基因序列分析在病毒流行病学研究上的具有重要的作用,序列测定在评价疫苗株与流行毒株亲缘关系方面具有重要的参考价值,然而这种方法对筛选疫苗候选毒株作用不大,在疫苗毒株的筛选中,应更多的采用血清中和试验和阻断ELISA方法,r值是评价疫苗株与流行毒株抗原关系的主要指标。
由于FMD容易发生变异,相关机构应定期分析本国或本地区疫苗株与流行毒株的抗原关系,以期选择适合的疫苗去防控FMD。
选定的毒株必须在单层细胞或悬浮细胞上连续传代,以期达到稳定的生长状态,病毒在不同种类和生长状态的细胞适应力是不同的,一般来说,病毒在单层细胞上生长的状态要明显的好于悬浮细胞,这种结果可能与细胞的生长状态有直接的关系,这就要求病毒在制作种子批的时候,应事先在单层上传代,待病毒表现出良好的生长状态时再用传代细胞生长。
然而,在疫苗制造过程中,因传代会导致毒株的变异,因此,应尽量减少病毒的传代次数,在研究和工业化生产中,应建立规范的种子批制度,我国病毒的种子批分为原始种子批、基础种子批和生产用种子批,基础种子批毒种必须经过严格的检验,由基础种子批到疫苗成品的毒种代次应不超过5代。
3.2细胞及用于细胞培养的培养基适应于FMDV生长的细胞除常用的BHK21细胞,还有IBRS细胞。
一般来说,尽管BHK细胞来源于同一种组织,但是根据其传代历史,不同的细胞株对病毒的适应能力是不同的,有的细胞对病毒敏感,有的细胞不敏感。
根据世界疫苗制造工艺的发展趋势,能较好适应悬浮培养,短时间内大量增殖和支持病毒良好生长的悬浮细胞系是FMD工业化生产所必需的。
在细胞培养中培养基的选择优化尤其是血清的类别对细胞的生长和对病毒的敏感性尤为重要,需要具体技术人员不断摸索、不断选择和优化。
4.疫苗生产关键过程控制4.1细胞及病毒培养能够很好的支持病毒生产和稳定传代的细胞是疫苗生产的关键步骤之一,在现代FMD疫苗生产过程中,一般采用BHK21细胞悬浮培养工艺生产FMD疫苗。
通常MOI为0.01即可在20h内使90%的细胞发生细胞病变。
(MOI:感染比即1个感染单位/100个细胞使用)4.2灭活及灭活检验病毒灭活及灭活检验在FMD疫苗生产中是最关键的步骤之一,历史上一些疫病的暴发与FMDV灭活不彻底有直接的关系。
最早,人们采用甲醛灭活FMDV,甲醛通过病毒蛋白交联而灭活病毒,对病毒核酸没有改变,其灭活动力曲线难以确定,难以确定病毒何时灭活完全。
随后,氮丙啶类如AEI被用于病毒灭活,该类灭活剂作用于病毒核酸,抗原蛋白不受破坏,能很好的保持病毒的免疫原性,但毒性较大。
目前,BEI是FMD疫苗生产的主要灭活剂,这种化学试剂灭活病毒能绘制出清晰的病毒灭活曲线,符合一级灭活动力曲线,对病毒安全,能保证病毒的抗原性,而且灭活彻底。
对于不稳定的疫苗株而言,采用甲醛和BEI共同灭活工艺能够显著降低灭活的时间,可由原来的40h 降低到8h左右,而且更加安全。
2008年出版的《OIE陆生动物卫生法典》中建议,FMDV灭活采用0.3mM BEI浓度2次灭活,一般来说,为了彻底的灭活病毒,不使病毒逃逸,在工业生产中,一般要将一个灭活罐倒到另一个灭活罐。
灭活抗原的安全性通过敏感单层细胞或乳鼠传代试验证实。
将灭活的抗原液接种到单层细胞,连续传代2-3代,无CPE;样品接种乳鼠后,连续观察7日,应全部健活。
10000L病毒悬液中的活病毒粒子应少于1个。
4.3抗原浓缩和纯化灭活疫苗刺激有效的免疫应答需要大量的抗原量,而且病毒增殖过程中的副产品如血清蛋白和病毒的非结构蛋白都会造成免疫动物的过敏反应。
因此,通过离心或沉淀等方法去除细胞碎片或者在接种病毒前将含血清培养基换成无血清培养基培养病毒。
4.4乳化乳化是为了提高疫苗的免疫原性,将灭活好的抗原与佐剂以一定比例混合。
一般常用的免疫佐剂有氢氧化铝胶、皂甙和油佐剂。
最早采用的佐剂是氢氧化铝胶佐剂,在抗原中加入氢氧化铝佐剂,氢氧化铝佐剂和皂甙用于FMD疫苗,该类疫苗能显著的保护牛免受FMDV的攻击,但对猪的免疫保护力相对较低,这种疫苗在中东和亚洲部分地区仍在使用。
1945年,油佐剂开始应用于FMD疫苗,油佐剂疫苗对牛和猪均能产生良好的保护力,疫苗的免疫持续期长,并且在其中加入Tween-80,降低疫苗的黏度,黏度小、稳定性好和乳化简便的油佐剂一直在不断的发展和改进,如ISA206以及近些年来发展起来的“即用型”(Ready-to-use)油佐剂,将逐渐取代铝胶和皂甙等传统佐剂。