放线菌形态观察方法

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T151、T2-10的形态鉴定的基本方法。

采用插片法进行培养,并用XSP-BM10A三目生物显微镜观察形态。

步骤:

1、将配制好的培养基倒入培养皿中,待凝固后,用解剖刀或是镊子将培养基挖出

两道小槽。

2、用接种针将待试菌(T151或T2-10)移接在槽边。

3、把灭菌的载玻片盖在两道小槽上。

4、将上述培养皿于28℃保温培养。

5、培养一定时间后,取出玻片,用吕氏美蓝染色,镜检。

吕氏美蓝(染色剂)配置方法:

A液:将0.3 g美蓝(亚甲蓝)溶于30 ml 95%的酒精中。

B液:0.01% KOH水溶液100 ml。

将两种溶液混合备用。

染色方法:

1、固定。将玻片取出后,将有菌的一面向上,迅速通过火焰2-3次,其目的在于

杀死细菌并使菌体蛋白在载玻片上凝固以及改变它对染料的通透性,利于着色,但不要在火焰上烘烤,以免菌体变型。

2、染色。加吕氏美蓝1-2滴与有菌体的玻片上,染色约1 min。

3、水洗。倾去染液,斜置载玻片,用细水流轻轻冲洗至流水变清为止。

4、干燥。自然晾干或用吸水纸从玻片侧面吸去水分,但注意勿将玻片上的菌体擦

掉。晾干后即可镜检。

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