放线菌形态观察方法
微生物实验放线菌的形态观察
实验一：丝状微生物的鉴定实验目的：1、观察常见放线菌的基本形态特征。
2、观察镰刀菌与木霉的基本形态。
3、掌握埋片培养法培养放线菌。
4、掌握载片培养法培养丝状真菌。
5、学会用显微镜观察未染色样品。
实验原理：放线菌的菌落早期绒状同细菌菌落月牙状相似，后期形成孢子菌落呈粉状、干燥，有各种颜色呈同心圆放射状。
放线菌一般由分枝状菌丝组成，它的菌丝可分为基内菌丝(营养菌丝)、气生菌丝或有孢子丝三种。
放线菌生长到一定阶段，大部分气生菌丝分化成孢子丝，通过横割分列的方式产生成串的分生孢子。
孢子丝形态多样，有直、波曲、钩状、螺旋状、轮生等多种形态。
孢子也有球形、椭圆形、杆状和瓜子状等等。
它们的形态构造都是放线菌分类鉴定的重要依据。
真菌的菌丝较放线菌粗，菌落疏松，主要用肉眼观察，必要时借助放大镜或显微镜。
利用显微镜主要观察孢子的着生状态，孢子形状及菌丝有无横隔等。
3材料3.1菌种链霉菌（Streptomyces sp.）；诺卡氏菌（Nocardia sp.）；尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)；绿色木霉（Trichoderma viride）3.2培养基高氏1号培养基，PDA培养基。
3.3器皿培养皿，载玻片、盖玻片、无菌滴管、镊子、接种环、小刀(或刀片)、水浴锅，显微镜，超净工作台，恒温培养箱。
4流程4.1埋片培养法: 倒琼脂→切槽→接种→埋片→培养→镜检→记录绘图。
4.2载片培养法：滴琼脂→凝固→边缘接种→盖盖玻片→培养→镜检→记录绘图。
5步骤埋片培养法：1 向每个培养皿倒约20毫升高氏一号琼脂培养基，待凝固。
2 用无菌手术刀在琼脂平板上平行开两条槽，取出其中的琼脂培养基。
3 在槽的外侧边缘接种待鉴定的放线菌菌株。
4 将无菌载玻片呈与槽垂直的方向盖在平板上面，用镊子轻轻压下，使载玻片与琼脂平板接触。
5 放于28℃培养3天。
6 将载玻片从平板上取下，直接在显微镜下观察。
载片培养法：1 将无菌载玻片放于洁净工作台。
微生物学 实验3 放线菌的形态观察
3 、染色及干燥。滴加适量番红染液，染色 1 min ；水 洗至流出液为无色； 在酒精灯高处加热干燥。
4 、镜检。先用低倍镜寻找视野，然后用油镜进行观察。 注意区分气生菌丝、孢子丝和孢子的形态及排列方式。
五、观察与绘图
1.描述放线菌5406的菌落特征（大小、形 状、颜色、边缘情况等特征）。 2.绘制观察到的放线菌气生菌丝及孢子丝 形态。
3、孢子丝——有些气生菌丝分化成各种孢子丝，呈螺 旋状、波浪形或分枝状等，着生形式有丛生、互生和轮 生三种。
孢子的表面光滑或粗糙，圆或椭圆和线菌的重要依据。
分生孢子形态
三、材料
1、菌种：“5406”放线菌培养72 h的 平板培养物； 2、染料：蕃红； 3、器材：载玻片、盖玻片、酒精灯、镊 子、接种针、接种铲等。
四、方法及步骤
1、印片。取2片干净的载玻片，用解剖刀无菌挖取一块 放线菌的菌落（注：带培养基切下），放在一块载玻 片的中央（注：菌落面朝上）；用另一干净的载玻片 盖在这一菌落上轻轻按压，再小心取下这块载玻片 （注：不要使菌落移动）。 2、干燥固定。将取下的上面的载玻片在酒精灯火焰高 处烘烤干燥（注：有菌落的面朝上）；然后迅速通过 火焰2～3次，加热固定。
细黄链霉菌(Streptomyces microflavus)
显微形态：单细胞菌丝体，菌丝内一般无隔膜。
菌丝体分为三部分： 1、基内菌丝—深入培养基中的营养型一级菌丝 （较透明、颜色浅色）。一般无隔膜，直径 0.2～0.8 µ m，可产生各种色素。 2、气生菌丝—由基内菌丝从培养基向上伸展的 二级菌丝（颜色较深），直径1～1.4 µ m。
实验三 放线菌的形态观察
一、实验的目的
1、学会用”印片法” 法制作标本片。 2、观察放线菌的群体形态及个体形态 特征。
实验五 放线菌形态观察
4、培养：在平皿的滤纸上滴加3mL以上（4滴管）灭菌的20%甘 油（保湿），28℃培养24小时。
精品课件
五、实验结果
绘图紫色链霉菌和灰色链霉菌基内 菌丝、气生菌丝和孢子丝。
精品课件
四、实验步骤
放线菌的插片培养
接种位置
1
2
3
4
5
6
7
8
9
插片并接种的顺序
精品课件
插片培养法：倒平板（将融化的高氏合成1号培养
基无菌操作倒平板）
插片（将无菌的盖玻片
以大约45°角插入培养基中（9片/皿/组）
接种（无菌操作取灰色链霉菌或紫色链霉菌的孢
子划线接种于插片和培养基接触处）
培养
（将插片平板倒置，28℃培养3~5天）
实验五 放线菌的 插片培养和形态
观察
精品课件
一、实验目的:
1.了解放线菌的特点并观察其形态特征 2.学习掌握放线菌观察的基本方法
精品课件
二、实验原理
放线菌：由不同长短的纤细的菌丝形成
单细胞的菌丝体，革兰氏阳性细菌。 菌丝体分为两部分，即潜入培养基中的营养
菌丝（或称基内菌丝）和生长在培养基表面的气 生菌丝。有些气生菌丝分化成孢子丝，呈螺旋形、 波浪形或分枝状等，其着生形式有丛生、互生和 轮生。孢子常呈圆形、椭圆形或杆状。
① 酵母菌一般以出芽方式进行无性繁殖。 ② 酵母菌的个体大小比细菌大几倍甚至十
几倍，在高倍镜下即可观察到。而一般细 菌必须在油镜下才能观察到。
精品课件
如何区别酵母菌的营养细胞和释放出子囊 外的子囊孢子？p44，2
放线菌的形态观察
4、观察：在载玻片中央滴一滴染液，小心用镊 子将盖玻片抽出，带菌面朝下，覆盖于染色 液上，浸泡2min后，用吸水纸将多余染色液 吸干，镜检。低-高-油
五、实验结果
菌名
培养法
菌丝形态 形态特征
六、思考题 用插片法制备放线菌标本的优点
基内菌丝、气生菌丝和孢子丝三类。
基内菌丝：伸入培养基内的菌丝，具有吸收 营养的功能
该种菌丝无隔，直径较细，有的无色，有的 产生色素，呈现不同的颜色
气生菌丝：基内菌丝向空间生长的菌丝。直径较 基内菌丝粗，呈直形或弯曲形。产生的色素较深
孢子丝：气生菌丝发育到 一定阶段，其顶端可分化 形成孢子。这种形成孢子 的菌丝称孢子丝。孢子成 熟后，可从孢子丝中逸出 飞散
孢子丝的形状、着生方式， 螺旋方向（左旋还是右 旋）、数目、疏密程度以 及形态特征是鉴定放线菌 的重要依据
放线菌孢子丝形态
孢子 --孢子是孢子丝成熟后，分化产生出的繁殖 细胞
孢子的形状多样，球、椭圆、杆状等；
表面结构不一样，光滑、疣刺、毛发状等；
孢子常有色素，单个无色透明，聚集表现；
孢子抗干燥能力强，抗热性不及芽孢，强于营养细 胞。
三、实验材料 菌种：链霉菌 染色液：0.1%美兰 培养基：马铃薯培养基 器皿：显微镜、载玻片、盖玻片、接种环、
酒精灯、镊子等
四、方法与步骤
1、倒平板：将马铃薯培养基
2、插片：用无菌镊子取无菌盖玻片，插在平板 培养基上（40°-50°插入）
实验四 放线菌的形态观察
一、实验目的 1、学会用插片培养法培养放线菌的制片方法 2、观察放线菌的菌落特征、个体形态特征
二、实验原理
微生实验报告 2012.10.24 实验三 放线菌的形态观察
微生实验报告姓名：王晶晖专业年级：2011级生物技术学号：040312011032实验六放线菌的形态观察一、实验目的（1）用玻璃纸琼脂透析培养法及斜插片培养法观察放线菌的自然生长形态；（2）用染色法观察放线菌菌丝体二、实验原理放线菌是一类主要呈丝状生长和以孢子形式进行繁殖的革兰式阳性细菌，放线菌大多数能形成菌丝体，紧贴培养基表面或渗入培养基生长的叫基内菌丝，基内菌丝生长到一定阶段还向空气中生长出气生菌丝，气生菌丝可进一步分化产生孢子丝和孢子。
孢子丝依种类的不同，有直形、波曲、螺旋形。
放线菌的孢子有球形、椭球形、杆状或柱状等。
放线菌自然生长的个体形态观察多用玻璃纸琼脂透析培养法。
玻璃纸具有半透膜特性，其透光性与载玻片基本相同，采用玻璃纸琼脂平板透析培养法，能使放线菌生长在玻璃纸上，然后将长菌的玻璃纸剪取小片，贴放在载玻片上，用显微镜镜检可观察到自然生长的放线菌个体形态。
采用斜插片培养法也能观察放线菌的个体形态。
将放线菌接种在琼脂平板上，插上灭菌盖玻片后培养，使放线菌菌丝沿着培养基表面与盖玻片的交接处生长而附着在盖玻片上。
观察时，轻轻取出盖玻片，置于玻片上直接镜检，可以观察到放线菌自然生长状态下的形态特征。
三、实验器材1．菌种：培养5~7d的5406放线菌（细黄链霉菌）（Streptomyces microflavus）的斜面菌种与平板培养物，小单孢菌（Micromonos）斜面菌种。
2．培养基：高氏一号琼脂培养基。
3．试剂及器材：无菌平皿，玻璃纸，9mL无菌水若干只，酒精灯，火柴，接种铲，接种环，镊子，玻璃涂布棒，1mL无菌吸管，剪刀，载玻片，石炭酸复红染色液，双层瓶，显微镜。
四、实验方法（一）玻璃纸培养法1．将玻璃纸剪成培养皿大小，用旧报纸隔层叠好后灭菌。
2．将放线菌斜面菌种制成103/mL的孢子悬液。
3．将高氏一号琼脂培养基融化后在火焰旁倒入无菌培养皿内，每皿倒入15mL左右，待培养基凝固后，在无菌操作下用镊子将无菌玻璃纸覆盖在琼脂平板上即制成玻璃纸琼脂平板培养基。
放线菌形态观察课件
颜色
生长环境
主要生长在土壤、植物根际等环境中 ，对植物病害具有一定的拮抗作用。
菌落较小，颜色多为白色、黄色或橙 色。
诺卡菌属
特征描述
诺卡菌属的菌丝体发达，呈网状 或束状，革兰氏染色呈阳性。
颜色
基内菌丝和气生菌丝的颜色多为黄 色、橙色或褐色。
生长环境
主要生长在土壤、木材、植物残体 等环境中，对植物病害具有一定的 拮抗作用。
培养观察法
总结词
通过培养观察放线菌的生长特性和形 态变化
详细描述
将放线菌接种在适宜的培养基上，观 察其生长速度、菌落形态、色素分泌 等特性，以及在显微镜下观察其形态 变化，有助于深入了解放线菌的生物 学特征。
03
放线菌的形态特征
链状放线菌
链状放线菌是一种常见的放线菌 类型，其菌落呈圆形或椭圆形的 颗粒状，表面干燥、粗糙，有时
05
放线菌的应用与价值
在医药领域的应用
抗生素生产
放线菌是抗生素的主要生产者， 如青霉素、头孢菌素等。
药物筛选
放线菌可用于发现新的药物，如 抗癌药物、免疫抑制剂等。
疾病治疗
某些放线菌具有抗菌、抗炎和抗 肿瘤活性，可用于疾病治疗。
在农业领域的应用
生物防治
孢子
放线菌的孢子有多种形状，光滑或具刺，有的能抗酸。
03
菌落
放线菌的菌落一般圆形、隆起、表面光滑，有的菌落与培养基连接处产
生放线状或放射状排列的气生菌丝。
放线菌的分类
01
02
03
链霉菌属
基内菌丝不断裂，气生菌 丝通常发育良好，形成长 链状孢子丝，在固体培养 基上形成致密的菌苔。
小单孢菌属
只含有一个孢子的分生孢 子梗，常气生，有时伸长 达5～6cm并产生大量基 内菌丝体。
放线菌酵母和霉菌形态的观察
放线菌酵母和霉菌形态的观察由于给出的题目是"放线菌、酵母和霉菌形态的观察"，我们将分别观察这三类微生物的形态特征。
在观察时，我们将使用显微镜和培养基。
首先，我们来观察放线菌的形态特征。
放线菌是一类细菌，属于革兰氏阳性菌。
它们可以在土壤、水域和空气中找到。
放线菌的形态较为特殊，通常呈现为长而细长的细丝状。
在观察时，我们可以直接在透明的玻璃片上加一两滴放线菌的培养基，并用显微镜观察。
放线菌的细丝状形状通常呈现为分支，并且长达数毫米。
这些细丝状的细胞聚集在一起，形成放线菌的菌落。
接下来，我们来观察酵母菌的形态特征。
酵母菌是一类单细胞真菌，广泛存在于天然环境中，如土壤、水体和植物表面。
酵母菌的形态特征较为简单。
在观察酵母菌时，我们可以将一小滴酵母菌液滴在玻璃片上，并用显微镜观察。
酵母菌呈球状或卵圆状，直径通常在5-10微米之间。
酵母菌的表面有光滑的外观，并且通常排列成链，形成了菌落。
最后，我们观察霉菌的形态特征。
霉菌是一类多细胞真菌，包括许多不同种类的真菌。
观察霉菌时，可以将一小段霉菌菌丝插入玻璃片上并加一滴水，使其在显微镜下观察。
霉菌的菌丝通常是多细胞结构，由许多细胞组成。
霉菌的菌丝通常呈现为分支和交叉的形态，并且具有特定的菌丝色素，例如黑色霉菌的孢子呈现黑色。
霉菌的菌丝可以形成大型的菌丝网络，形成一个菌丝块。
总结起来，放线菌通常呈现为长而细长的细丝状，酵母菌呈球状或卵圆状，霉菌的菌丝通常呈分支和交叉的形态。
这些形态特征可以通过显微镜观察得到。
这些微生物的观察有助于我们更好地了解它们的生物学特性和生态角色，在微生物的研究和应用中起着重要的作用。
实验五放线菌、霉菌及真菌的形态观察
对实验结果的理解与思考
• 通过本次实验，我们观察到了放线菌、霉菌及真菌的形态特征， 了解了它们在形态学上的差异。这些微生物在自然界中广泛分 布，对环境和生物体产生重要影响。例如，某些放线菌可以产 生抗生素，对人类医疗和农业具有重要意义；而某些霉菌可以 引起食品和物品的霉变，对人类生活造成困扰。因此，对微生 物形态学的深入了解有助于我们更好地认识和利用这些微生物 资源。
放线菌
放线菌是一种呈辐射状排列的细菌，其菌落形态通常为圆形或不规则形，表面粗糙、干燥 ，颜色多样。放线菌的细胞壁厚，呈革兰氏阳性。
霉菌
霉菌的菌落形态通常为绒毛状、絮状或蜘蛛网状，颜色多样，包括白色、灰色、褐色等。 霉菌的菌丝体非常发达，且具有分支。
真菌
真菌的形态多种多样，包括酵母、霉菌和大型真菌。真菌的菌落形态通常为圆形或椭圆形 ，表面光滑、湿润，颜色多样。真菌细胞壁薄，呈革兰氏阳性或阴性。
04 结果分析
放线菌形态分析
01
02
放线菌的形态多样，包 括链状、球状和杆状等。
放线菌的菌落形态也较 为多样，有的呈圆形， 有的呈不规则形状。
03
放线菌的菌落表面粗糙 或光滑，颜色各异，有 的呈白色，有的呈黄色 或橙色。
04
放线菌的细胞壁通常较 厚，具有分枝的菌丝， 有利于在各种环境中的 生存和繁殖。
03 实验步骤
样品采集与制备
样品采集
从不同环境（土壤、水体、空气 等）中采集放线菌、霉菌及真菌 的样本。
样品制备
将采集的样本进行分离、纯化， 制备成适合显微镜观察的样品。
显微镜观察
显微镜选择
选择适合观察放线菌、霉菌及真菌的 显微镜，如光学显微镜或电子显微镜 。
观察方法
将制备好的样品放置在显微镜下，观 察放线菌、霉菌及真菌的形态特征， 如菌丝、孢子等。
实验5-放线菌形态观察
实验六放线菌的形态观察；霉菌子实体、分生孢子及菌落形态观察Ⅰ放线菌的形态观察一、目的要求1、学习并掌握观察放线菌的操作方法。
2、巩固掌握放线菌的形态特征。
二、实验原理放线菌是单细胞原核微生物。
菌丝无隔、分枝、纤细，分为生长于培养基内或匍匐于培养基表面的、从培养基吸取营养物质的基内菌丝，以及伸出培养基表面的气生菌丝。
气生菌丝的上部分化出孢子丝，呈螺旋状、波纹状，或分枝状等，孢子丝的着生方式因种而。
放线菌多可产生色素，菌丝呈各种颜色，有的放线菌能产生水溶性色素分泌至培养基中使培养基变色。
孢子丝长出各种形态的孢子，孢子有不同的颜色。
放线菌的菌落在培养基上着生牢固，与基质结合紧密，难以用接种针挑起。
而且由于有大量孢子存在，因而表面呈干粉状，使得易于与其他类型的微生物相区别。
放线菌的形态特征是其菌种鉴定与分类的重要依据。
三、实验器材1、菌种未鉴定放线菌菌株；2、仪器显微镜；3、材料玻璃纸、载玻片、盖玻片，镊子、盖玻片、接种环、香柏油、二甲苯。
4、染料石炭酸复红染色液。
四、操作步骤1、观察自然生长状态的放线菌用镊子小心取出用插片法培养的放线菌培养皿中的一张盖玻片，将其背面附着的菌丝体擦净。
然后将长有菌的一面向上放在洁净的载玻片上，用低倍镜、高倍镜观察。
找出3类菌丝及其分生孢子，并绘图。
注意放线菌的基内菌丝、气生菌丝的粗细和色泽差异。
2、水封片观察取石炭酸复红染色液一滴滴于载玻片中央，从培养皿中取出插片法培养放线菌的盖玻片，将无菌或菌较少的一面以擦镜纸擦净，并将有菌面朝下，放在载玻片上，浸在染色液中，制成水封片，用高倍镜观察其单个分生孢子及其基内菌丝，并绘图。
五、注意事项1、培养放线菌中要注意，放线菌的生长速度较慢，培养期较长，在操作中应特别注意无菌操作，严防杂菌污染。
并控制培养时间。
2、在镜检观察时，要仔细观察放线菌的营养菌丝、气生菌丝和孢子丝等。
六、实验报告1、绘图绘出观察的放线菌基内菌丝、气生菌丝和孢子丝的形态。
放线菌结构形态观察
（2）印片法
（3）插片法
片时不能错动， 以免影响孢子 丝的自然排列 状态。
五、实验报告
1、绘图：金色链霉菌和灰色链霉菌的气生菌
丝、孢子丝及孢子的形状。
2、放线菌与细菌菌落最显著的差异是什么？
实
验
四
放线菌结构形态观察
一、实验目的
1、学习放线菌形态结构的观察方法。
2、观察放线菌的菌落特征、个体形态及其繁殖 方式。
二、实验原理
1、放线菌形态结构特征：
基内菌丝（营养菌丝） 气生菌丝 2、放线菌菌落特征： 孢子丝（繁殖菌丝）
放线菌菌落特征：干燥、不透明、表面呈致密的丝 3、放线菌个体形态及繁殖方式 绒状，上有一薄层彩色的“干粉”；菌落和培养基 放线菌个体形态：丝状体 的连接紧密，难以挑取；菌落正反面颜色不一致， 放线菌繁殖方式：孢子 菌丝片段 菌落边缘的琼脂平面有变形的现象。
三、实验材料
1、菌种：金色ogenes ）和灰色链霉菌 （Streptomyces griseus）培养物。 2、其他物品：载片及盖片、0.1%美蓝染液。
四、实验步骤
1、放线菌菌落特征观察： 2、个体形态观察： （1）直接观察法
注意事项：印 选择菌丝和孢子生长较薄的部位直接置于低倍和 高倍显微镜下观察。
微生物实验-放线菌、霉菌、酵母菌的形态观察
毛霉与根霉的比较
①两者皆有假根，但根霉属有匍匐枝，毛霉属无。 ②根霉属有囊托，毛霉属无。③两者皆具囊轴④ 毛霉属孢子囊梗单株从菌丝上发生，分枝或不分 枝，根霉无分支。
二、实验原理
酵母
酵母菌是单细胞真核微生物。
酵母菌细胞的形态通常有球形、
卵圆形、腊肠形、椭圆形、柠檬
形或藕节形等。比细菌的单细胞 个体要大得多，一般为1~5微米 ′5~30微米。酵母菌无鞭毛，不 能游动。
毛霉
毛霉又叫黑霉、长毛霉。
菌丝无隔、多核、分枝状，在基物内外能 广泛蔓延，有假根，无匍匐菌丝。
毛霉
毛霉显微结构
根霉
根霉(Rhizopus)属于毛霉目 根霉在自然界分布很广，用途广泛，其淀粉酶活性很强，
是酿造工业中常用糖化菌。我国最早利用根霉糖化淀粉 （即阿明诺法）生产酒精。
根霉显微形态
实验四 放线菌、霉菌、 酵母菌的形态观察
实验四 放线菌、霉菌、酵母菌的形态观察
一、实验目的
1、学习掌握观察放线菌、霉菌标本片形态特征。
2、学习掌握观察酵母菌标本片形态特征。
二、实验原理---放线菌
放线菌 因菌落呈放线状而的得名
二、实验原理
放线菌
放线菌的形态比细菌复杂些， 但仍属于单细胞。在显微镜 下，放线菌呈分枝丝状
七、下一个实验
实验五 微生物数量的测定
酵母菌具有典型的真核细胞
结构,有细胞壁、细胞膜、细胞核、
细胞质、液泡、线粒体等，有的
还具有微体。
啤酒酵母的菌落
红酵母的菌落
各种酵母菌的菌落
酵母菌和霉菌的培养对比
电镜下的酵母
三、实验器材
1、菌种：根霉、青霉、曲霉、放线菌、酵 母等标本片
放线菌的构造和形态观察：形态构造、繁殖、菌落特征
一、放线菌的形态构造
１ 放线菌的概述
➢ 放线菌的应用： a.能产生大量的、种类繁多的抗生素，到目前为止，已分离得到的放线菌产生
的抗生素达4000种以上； b.生产维生素和酶； c.进行甾体转化、烃类发酵和污水处理；
一、放线菌的形态构造
一、放线菌的形态构造
2 形态构造
➢ 菌丝（根据形态和功能不同分为）：基内菌丝（营养菌丝）：产色素，吸收营养 气生菌丝：可分化出繁殖结构，即孢子丝 孢子丝：繁殖，直、波曲、螺旋，丛生、轮生
一、放线菌的形态构造
2 形态构造
➢ 放线菌孢子丝类型：直、波曲、螺旋，丛生、轮生
单轮生
螺旋状
项目二 放线菌的构造和形态观察
小单孢菌属（Micromonospora）：可产生多种 抗生素，如庆大霉素、利福霉素等
放线菌属（Actinomyces) ： 多为致病菌
一、放线菌的形态构造
2 形态构造 ➢ 大部分放线菌由分枝状的菌丝组成，菌丝大多无隔膜，属单细胞，G+。菌丝的 粗细与细菌中的杆菌宽度相近（1μm左右）。细胞壁含胞壁酸、二氨基庚二酸， 不含几丁质、纤维素。
微生物学基础
原核微生物的构造和形态观察
项目二 放线菌的构造和形态观察
一、放线菌的形态构造
１ 放线菌的概述 ➢ 介于细菌和真菌之间的单细胞G+原核生物，细胞构造和细胞壁的化学组成与细 菌相似；由分枝状的菌丝组成，以外生孢子的形式繁殖,这些特征又与霉菌相似； 放线菌菌落中的菌丝常从一个中心向四周辐射状生长,因此叫放线菌。
4 横隔孢子
➢ 基内菌丝或气生菌丝横隔分裂形成，孢子常为球杆状，体积大小相似，又称节孢 子或粉孢子。
放线菌的形态观察
【实验题目】放线菌的形态观察【实验目的】1、掌握放线菌观察方法—插片法2、了解放线菌的基本形态【实验器材】1、菌种：青色链霉菌、弗氏链霉菌2、培养基：灭菌的高氏Ⅰ号琼脂培养基3、仪器和用具：显微镜、酒精灯、载玻片、盖玻片、接种环、镊子、培养皿等【实验原理】1．高氏I号培养基高氏I号培养基是用来培养和观察放线菌形态特征的合成培养基。
此合成培养基的主要特点是含有多种化学成分已知的无机盐，这些无机盐可能相互作用而产生沉淀。
因此，在混合培养基成分时，一般是按配方的顺序依次溶解各成分，甚至有时还需要将二种或多种成分分别灭菌，使用时再按比例混合。
此外，合成培养基有的还要补加微量元素，如高氏I号培养基中，需要加入FeSO4。
2．放线菌放线菌是指能形成分枝丝状体或菌丝体的一类革兰氏阳性细菌。
常见放线菌大多能形成菌丝体，紧贴培养基表面或深入培养基内生长的叫基内菌丝，基丝生长到一定阶段还能向空气中生长出气生菌丝，并进一步分化产生孢子丝及孢子。
有的放线菌只产生基内菌丝而无气生菌丝。
在显微镜下直接观察时，气生菌丝在上层、基内菌丝在下层，且气生菌丝较暗，基内菌丝较透明。
孢子丝依种类的不同，有直、波曲、各种螺旋形或轮生。
在油镜下观察，放线菌的孢子有球形、椭圆、杆状或柱状。
能否产生菌丝体及由菌丝体分化产生的各种形态特征是放线菌分类鉴定的重要依据。
图1：链霉菌一般形态和构造（模式图）图2：链霉菌属孢子丝的主要类型3． 插片法将放线菌接种在琼脂平板上，插上灭菌盖玻片后培养，使放线菌菌丝沿着培养基表面与盖玻片的交接处生长而附着在盖玻上。
观察时，轻轻取出盖玻片，置于载玻片上直接镜检。
这种方法可观察到放线菌自然生长状态下的特征，而且便于观察不同生长期的形态。
【实验内容及步骤】1、高氏I 号培养基的制备（100ml ）1) 根据配方按照一定比例称取可溶性溶粉、及 其他成分溶解。
2) 待将所有药品溶解后，补充水分到所需的总体积，进行pH 调节到7.2～7.43) 材料灭菌：将所配溶液装在三角烧瓶中并加棉塞，棉塞外包一层牛皮纸，并用麻绳捆好，1-直形，交叉分枝 2-丛生，波曲 3-顶端形成大螺旋 4-松螺旋 5,6-紧螺旋 7-短而直，轮生1-盖玻片 2-琼脂层图3用记号笔标记组号。
放线菌的形态观察
放线菌的形态观察一．实验目的1.学习并掌握放线菌的形态观察法。
2.初步了解放线菌的形态特征。
二．实验原理放线菌菌丝体由基内菌丝、气生菌丝和孢子丝组成，且孢子丝形态、孢子排列及形状是放线菌重要的分类学指标。
制片时不采取涂片法，以免破坏细胞和菌丝体形态。
通常采用插片法或玻璃纸法并结合菌丝体简单染色进行观察。
在插片法中，首先将灭菌盖玻片插入接种有放线菌的平板，使放线菌沿盖玻片和培养基交接处生长而附着在盖玻片上，取出盖玻片可直接在显微镜下观察放线菌在自然生长状态下的形态特征，而且有利于对不同生长时期的放线菌形态进行观察。
三．实验器材1. 菌种青色链霉菌、弗氏链霉菌2. 培养基高氏1号培养基3. 仪器及其他用品培养皿、镊子、盖玻片、载玻片、显微镜、双层瓶、擦镜纸、酒精灯、火柴、接种针、玻璃棒、烧杯等四．实验步骤（一）实验前准备1. 配置200ml高氏1号培养液于锥形瓶中。
2. 将培养皿1包（10个/包）、盖玻片3包（10片/包）、镊子2把、高氏一号培养液放在密闭的高压蒸汽灭菌锅内进行灭菌。
3. 倒平板无菌操作将灭菌高氏一号培养液倒10皿。
（二）放线菌制片----插片法1. 划线接种无菌操作分别由青色链霉菌和弗氏链霉菌高氏1号培养基平板培养物挑取菌种在高氏1号培养基平板上密集划线接种，5板/菌。
2.插片无菌操作用镊子取灭菌盖玻片以约45度角插入平板琼脂接种线上，盖玻片垂直接种线，3片/皿。
3.培养将平板于28°C培养一周。
（三）放线菌形态观察1.用镊子小心取出盖玻片，用纸擦去背面培养物，将有菌面朝下放在载玻片上。
2. 气生菌丝与营养菌丝的比较观察直接用显微镜的低倍镜和高倍镜观察，一般情况是营养菌丝颜色透明，气生菌丝颜色较暗，并比营养菌丝粗二倍左右。
3. 孢子丝的观察用显微镜的油镜观察。
五．实验结果和分析1.放线菌孢子丝照片青色链霉菌 （10x100oil) 弗氏链霉菌(10x100oil) 2. 放线菌形态描述菌名 孢子丝形态 菌落描述 孢子形态 青色链霉菌 螺旋形 青色，表面干燥起皱，圆形，边缘整齐短柱形弗氏链霉菌 直线形 白色，表面干燥起皱，圆形，边缘整齐卵圆形附录高氏1号培养基（培养放线菌用）可溶性淀粉 20gNaCl 0．5gKNO 3 1gK 2HPO 4 0．5gMgSO 4 0．5gFeSO 4 0．01g琼脂 20g水 1000mlpH 7．2—7．4配制时，先用少量冷水，将淀粉调成糊状，倒入煮沸的水中，在火上加热，边搅拌边加入其它成分，溶化后，补足水分至1000mL 。
实验四 放线菌的形态观察
实验四放线菌的形态观察杨明轩生物111班1102040128一、实验目的1、学习观察放线菌形态的基本方法。
2、观察放线菌的个体形态特征。
二、实验原理放线菌是一类丝状原核微生物，因其菌落在固体表面长成放射状生长而得名，放线菌主要存在于土壤中，大部分腐生，少数寄生，也有的与植物共生固氮。
放线菌是最主要的抗生素产生菌，其形态特征是菌种选育和分类的重要依据。
放线菌通常有分枝发达的菌丝体组成，菌丝直径为0.2-1.2μm。
主要由两部分组成，一部分长在培养基内，一般没有横隔，有固定和吸收养分的作用，称为基内菌丝或营养菌丝。
当基内菌丝发育到一定阶段，即可向空中伸展形成气生菌丝（有的菌种没有气生菌丝）。
在显微镜下观察时，气生菌丝颜色较深，并且比基内菌丝粗两倍左右。
有些种的气生菌丝发育到一定阶段，其顶端可形成孢子丝。
孢子丝分直、波曲、螺旋等形状。
孢子丝的着生方式分别为单生、丛生、轮生和互生。
放线菌菌落小，与培养基结合紧密，不易用接种钩挑取，因而难以直接观察。
通常采用玻璃纸培养法和插片法观察。
本次实验采取插片法。
该方法适合进行营养菌丝、气生菌丝和孢子丝的比较观察。
在接种放线菌的培养基一侧，以45°角插入无菌盖玻片，使放线菌沿培养基与盖玻片交界处生长，并附着于盖玻片上，待菌丝生长一段时间后，取下盖玻片进行染色，即可直接观察。
三、实验材料1、菌种：紫色直丝链霉菌（Streptomyces violaoeorectus）、黑化链霉菌（Streptomyces nigrificans）、天蓝色链霉菌（Streptomyces coelicolor）、丰加链霉菌（Streptomyces toyocaensis）2、染色剂：石炭酸复红染液3、培养基：高氏一号培养基4、其他：干净载玻片、盖玻片、无菌水、洗瓶、擦镜纸、吸水纸、二甲苯、香柏油、接种用具四、实验方法1、制备平板：将已融化的高氏一号培养基（冷却到45℃左右）倒入无菌培养皿，每皿15~20ml（厚度约为培养皿高度的一半），凝固后备用。
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T151、T2-10的形态鉴定的基本方法。
采用插片法进行培养，并用XSP-BM10A三目生物显微镜观察形态。
步骤：
1、将配制好的培养基倒入培养皿中，待凝固后，用解剖刀或是镊子将培养基挖出
两道小槽。
2、用接种针将待试菌（T151或T2-10）移接在槽边。
3、把灭菌的载玻片盖在两道小槽上。
4、将上述培养皿于28℃保温培养。
5、培养一定时间后，取出玻片，用吕氏美蓝染色，镜检。
吕氏美蓝(染色剂)配置方法：
A液：将0.3 g美蓝（亚甲蓝）溶于30 ml 95%的酒精中。
B液：0.01% KOH水溶液100 ml。
将两种溶液混合备用。
染色方法：
1、固定。
将玻片取出后，将有菌的一面向上，迅速通过火焰2-3次，其目的在于
杀死细菌并使菌体蛋白在载玻片上凝固以及改变它对染料的通透性，利于着色，但不要在火焰上烘烤，以免菌体变型。
2、染色。
加吕氏美蓝1-2滴与有菌体的玻片上，染色约1 min。
3、水洗。
倾去染液，斜置载玻片，用细水流轻轻冲洗至流水变清为止。
4、干燥。
自然晾干或用吸水纸从玻片侧面吸去水分，但注意勿将玻片上的菌体擦
掉。
晾干后即可镜检。