土壤硝态氮铵态氮的测定
土壤无机N---铵态氮硝态氮测量方法
土壤无机N---铵态氮硝态氮测量方法铵态氮和硝态氮测定方法铵态氮测量方法（2mol ?L -1KCl 浸提—靛酚蓝比色法）1）方法原理2mol ?L -1KCl 溶液浸提土壤，把吸附在土壤胶体上的NH4+及水溶性NH4+浸提出来。
土壤浸提液中的铵态氮在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚蓝，溶液的颜色很稳定。
在含氮0.05～0.5mol ?L -1的范围内，吸光度与铵态氮含量成正比，可用比色法测定。
2）试剂（1）2mol ?L -1KCl 溶液称取149.1g KCl ，化学纯）溶于水中，稀释至1L 。
（2）苯酚溶液称取苯酚（C6H5OH ，化学纯）10g 和硝基铁氰化钠[Na2Fe(CN)5NO 2H 2O]100mg稀释至1L 。
此试剂不稳定，须贮于棕色瓶中，在4℃冰箱中保存。
（3）次氯酸钠碱性溶液称取氢氧化钠（化学纯）10g 、磷酸氢二钠（Na 2HPO 4?7H 2O ，化学纯）7.06g 、磷酸钠（Na 3PO 4?12H 2O ，化学纯）31.8g 和52.5g ?L -1次氯酸钠(NaOCl，化学纯，即含10%有效氯的漂白粉溶液)5mL 溶于水中，稀释至1L ，贮于棕色瓶中，在4℃冰箱中保存。
（4）掩蔽剂将400g ?L -1的酒石酸钾钠（KNaC 4H 4O 6?4H 2O ，化学纯）与100g ?L -1的EDTA 二钠盐溶液等体积混合。
每100mL 混合液中加入10 mol?L -1氢氧化钠0.5mL 。
（5）2.5μg ?mL –1铵态氮（NH4+—N; 100ppm）标准溶液称取干燥的硫酸铵[(NH4)2SO 4，分析纯0.4717g 溶于水中，洗入容量瓶后定容至1L ，制备成含铵态氮（N ）100μg ?mL –1的贮存溶液；使用前将其加水稀释20倍，即配制成含铵态氮（N ）2.5μg ?mL –1的标准溶液备用。
3）仪器与设备：往复式振荡机、分光光度计。
土壤中有效氮的测定计算公式
土壤中有效氮的测定计算公式
土壤中有效氮的测定计算公式是评估土壤氮素含量的重要方法之一。
有效氮是指土壤中植物可直接吸收利用的氮的总和，包括铵态氮和硝态氮两种形态。
通过准确测定土壤中有效氮的含量，可以为作物的生长提供充足的养分支持，从而提高作物产量和品质。
测定土壤中有效氮的常用方法是采用凯氏试剂法。
该方法通过将土壤样品与凯氏试剂进行反应，将土壤中的氨氮和硝态氮转化为氨氮，并利用蒸馏-滴定的方法进行测定。
测定的结果以毫克/千克或者以克/亩为单位，反映了土壤中有效氮的含量。
计算有效氮的测定结果时，可以使用以下简单的计算公式：有效氮含量（mg/kg）= V×C×N/ W。
其中，V为滴定体积（mL），C为标准硝酸铵溶液的浓度（mol/L），N为硝态氮的当量因子（1 mol硝态氮对应14g氮），W为土壤样品的质量（g）。
通过上述公式，可以将实验室测定得到的有效氮含量转化为标准单位，方便进行比较和分析。
在实际应用中，还可以根据土壤类型、作物需求等因素，确定合适的有效氮含量范围，指导农民科学施肥，提高作物产量。
除了凯氏试剂法外，还有其他方法可以测定土壤中的有效氮含量，如气相色谱法、光谱法等。
不同的方法适用于不同的土壤类型和实验条件，选择合适的方法进行测定是十分重要的。
总的来说，土壤中有效氮的测定是农业生产中的重要环节，可以帮助农民科学施肥，提高作物产量和品质。
通过合适的实验方法和计算公式，可以准确地测定土壤中有效氮的含量，为农业生产提供科学依据。
希望本文介绍的内容对读者有所启发，对土壤养分管理有所帮助。
铵态氮和硝态氮的计算
土壤中铵态氮（NH₄⁺-N）和硝态氮（NO₃⁻-N）的计算通常涉及以下几个步骤：
1.样品采集与处理：
o收集代表性的土壤样本并按照特定方法进行处理，比如使用CaCl₂溶液或其他浸提剂提取土壤中的铵态氮和硝态氮。
2.提取过程：
o对于铵态氮，常常采用碱性过硫酸钾或微碱性环境下的蒸馏法进行提取，然后通过滴定或比色法测定氨的生成量。
o对于硝态氮，可能采用氯化钾溶液提取后，利用紫外可见光谱法、分光光度法（如磺胺比色法或镉还原-磺胺比色法）、或者更先进的如
气相分子吸收光谱法等进行测定。
3.浓度计算：
o计算铵态氮或硝态氮的浓度时，通常是基于测得的吸光度或者其他检测信号与标准曲线的关系，将检测值转化为相应的浓度单位，如
mg/L（毫克每升）。
4.转换为土壤中的含量：
o若测定的是土壤浸提液中氮的浓度，需将其换算为土壤中的含量，即g/kg（克每千克）。
例如，假设测得的硝态氮浓度为c mg/L，浸提
液体积为V mL，土壤样品质量为m g，则土壤中硝态氮含量（以
g/kg计）可以通过以下公式计算：
Code
1硝态氮含量（g/kg） = (c × V × 1000) / m
o其中，需要考虑土壤样品的实际干重以及可能存在的干湿重比修正。
5.实际应用中：
o在实验室分析报告中，往往会提供具体的计算步骤和转换因子，确保数据准确反映土壤中铵态氮和硝态氮的真实含量。
需要注意的是，实际操作中应严格按照所使用的测定方法提供的标准程序来进行，并且考虑到不同土壤类型的差异性和测定条件的影响。
土壤可溶性有机氮,硝态氮,铵态氮和微生物量氮测定
土壤可溶性有机氮、硝态氮、铵态氮、微生物量氮最方便最简单的测定方法1.母液制样：称取新鲜土壤（30.0g）于放置烧杯中，加约等于田间持水量60%水在25℃下培养7~15d。
取15.0g土于烧杯，置于真空干燥器中，同时内放一装有用100ml精制氯仿的小烧杯，密封真空干燥器，密封好的真空干燥器连到真空泵上，抽真空至氯仿沸腾5分钟，静置5分钟，再抽滤5分钟，同样操作三次。
干燥器放入25℃培养箱中24小时后，抽真空15-30分钟以除尽土壤吸附的氯仿。
按照土：0.5M K2SO4=1:4(烘干土算，一般就是湿土：0.5M K2SO4=1：2)，加入0.5M K2SO4溶液（未熏蒸为空白直接称取15.0g土，加同样比例0.5M K2SO4溶液）震荡30分钟，过滤。
其中熏蒸后的土壤过滤液为A母液，未熏蒸的土壤过滤液为B母液。
母液要是不及时测定，需立即在-15℃以下保存2.测定可溶性有机氮=可溶性全氮-（铵态氮+硝态氮）要是有流动分析仪器还有TOC的话可以利用A母液测得碳氮减去B母液的碳氮含量根据公式计算得出微生物碳氮，可以用B母液测的铵态氮、硝态氮和可溶性全氮，是很方便的。
以下的是用传统的方法测定以上指标，经过852个土壤样品试验结果还是很好的。
土壤可溶性全氮测定氧化剂:将6g NaOH 和30g K2S2O8溶于蒸馏水中并定容至1L(K2S2O8 比较难溶，在低于60℃得瑟水浴中溶解，高于60℃配置的溶液至其氧化性失效，NaOH制成溶液，致其温度达到常温后与K2S2O8溶液混合定容至1L)测定：移取A母液10ml至消化试管，加入10ml氧化剂，水浴中加热，温度升高到120℃后保持90min，使用紫外分光光度计测定A220和A275，空白需加入1ml氧化剂并同时作水浴处理。
（Tips：农化上母液与氧化剂各取25ml，此处取其比例为1:1。
）标准曲线：0.7218g硝酸钾溶于水中，转入1000ml容量瓶中定容摇匀，制得浓度为100mg/L的氮标准贮存液。
土壤硝态氮及铵态氮的取样测定
土壤硝态氮和铵态氮的取样测定1．田间取样与保存根据小区面积，随机选2～3个样点，采样地点应避开边行以及头尾。
在行间取样，以30cm为一层，取样深度可以是0-90cm或0-210cm或更深，分层取样，等层混合。
新鲜土样须田间将土壤样品立即放入冰盒，没有冰盒者应将土样放置阴凉处，避免阳光直接照射，并尽快带回室内处理。
2．土样的处理在田间采样后，立即将土样放置在冰盒中，低温保存。
返回实验室后，如果样品数量较多，则放置于冰箱中4℃保存。
也可以直接进行土样处理：土壤过3-5cm筛，测定土壤的水分含量，同时作浸提。
3．土样的浸提称取混匀好的新鲜土壤样品24.00g，放入振荡瓶，加100 ml 1mol/L 优级纯KCl浸提液，充分混匀后放入振荡机振荡1个小时，用定性滤纸过滤（注意：国内好多滤纸含有铵态氮，需选择那些无铵滤纸）到小烧杯或胶卷盒中，留滤液约20ml备用，每批样做3个空白。
若样品不能及时测定，应放入贮藏瓶中冷冻保存。
同时称取20-30 g鲜土放入铝盒中105℃下烘干测定土壤水分。
剩余土样自然风干后保存。
4．土壤硝态氮、铵态氮测定测定前先解冻贮藏瓶盒中的滤液，并保持滤液均匀（注意：解冻后的样品有时有KCl 析出，必须等KCl溶解后，液体完全均匀后再测定），上流动分析测定溶液中的铵态氮和硝态氮含量（专门的试验人员负责）。
所用标准溶液必须是用1mol/L KCl浸提液配制。
有时样品浓度超出了机器的测定范围，需对样品进行稀释（注意：应以最低稀释倍数把样品测定出来，且不可放大稀释倍数，这样会引起很大误差）。
流动分析测定的是溶液中的铵态氮和硝态氮浓度，单位是mg/L，必须根据土壤样品含水量和土壤干重换算成mg N/kg。
如果要换算成kg N/ha，可以通过下列公式：土壤硝态氮或铵态氮（kg N/ha）=土壤硝态氮或铵态氮（mg N/kg）* 采样层次（30cm或20cm）* 土壤容重/ 10。
土壤硝态氮和铵态氮的测定方法
一、原理：过滤后的样品经过一个开放的镀铜镉还原器通道后，硝酸根被还原成亚硝酸根，亚硝酸根通过磺胺处理后，与N-(1-萘基)-乙二胺二盐酸盐偶联，形成深红色的偶氮染料，然后在550nm或者520nm比色分析。
二、样品处理土壤鲜样采取四分法处理，根据实验用量进行过筛（比目大小视样品含水量而定）。
过筛后的土样，取出5g土样放入离心管，加入25ml 氯化钾提取液（2moL/L），震荡2小时后进行离心（8000 g ，15min），静置后过滤，取上清液测定。
若不能及时测定，放入4℃冰箱保存。
三、试剂配制：试剂用水：蒸馏水或去离子水。
（1）显色试剂：（棕色玻璃瓶，避光保存）150ml水，加入25ml浓磷酸▲，冷却至室温后，加入10g磺胺，再加入0.5g N-(1-萘基)-乙二胺二盐酸盐溶解。
用水定容至250ml。
加入浓缩探针清洗液（表面活性剂）。
（2）氯化铵-EDTA缓冲液（ammonium chloride-EDTA）：把85g氯化铵和0.1g 乙二胺四乙酸二钠盐（EDTA-Na2）溶解于水，定容至1L。
用浓氨水▲调节PH至。
（3）硝化组件缓冲液：{用来清洗OTCR(镀铜镉还原器通道)}取100ml的氯化铵-EDTA缓冲液，稀释至1L。
调节PH至。
（4）2%硫酸铜：10g 五水硫酸铜（）溶于水，定容至500ml。
（5）5mol/L盐酸：小心慢慢加入浓盐酸▲于水中，冷却后定容至100ml。
（6）硝酸盐存储溶液(1g/L)：（溶液6个月内有效）7.218g硝酸钾溶于水，定容至1L，加入1ml氯仿▲（防腐剂）。
（7）比色管清洗液：（定容时缓慢，防止出现泡沫，室温保存,两个月内有效）取50ml比色管清洗液，加水定容至1L。
（8）进样针清洗液：（定容时缓慢，防止出现泡沫，室温保存，两个月内有效。
）取进样针清洗液，加水定容至1L。
四、测定方法：土壤硝态氮测定采用SmartChem全自动间断化学分析仪。
一、样品处理土壤鲜样采取四分法处理，根据实验用量进行过筛（比目大小视样品含水量而定）。
土壤硝态氮的测定
土壤硝态氮的测定（紫外分光光度法）（一）方法提要土壤浸出液中的N03-，在紫外分光光度计波长210nm处有较高的吸光度，而浸出液中的其他物质，除OH-、CO32-、HCO3-、NO2-和有机质等外，吸光度均很小。
将浸出液加酸中和酸化，即可消除OH-、CO32-卜、HCO3-的干扰，NO2-一般含量极少，也很容易消除。
因此，紫外分光光度法直接测定N03-的含量。
待测液酸化后，分别在2l0nm和275mm处测定吸光度。
A210是NO3-和以有机质为主的杂质的吸光度；A275只是有机质的吸光度，因为NO3-在275nm处已无吸收。
但有机质在275nm处的吸光度比在210nm处的吸光度要小R倍，故将A275校正为有机质在210nm处应有的吸光度后，从A210中减去，即得NO3-在210nm处的吸光度(△A)。
（二）适用范围本方法适用于各类土壤硝态氮含量的测定。
（三）主要仪器设备1、紫外可见分光光度计。
2、石英比色皿。
3、往复式或旋转式振荡机，满足180 r．min-1±20r．min-1的振荡频率或达到相同效果。
4、塑料瓶：200mL。
（四）试剂1、H2SO4溶液(1：9)：取10mI浓硫酸缓缓加入90mL水中。
2、氯化钙浸提剂[c(CaCl2·6H20)=0.01mol·L-1]：称取2.2g氯化钙(CaCL2·6H20)溶于水中，稀释至l L。
3、硝态氮标准贮备液[p(N)=100 ug·mL-1]：称取0.7217g经105～110℃烘2h 的硝酸钾(KNO3，优级纯)溶于水，定容至1 L，存放于冰箱中。
4、硝态氮标准溶液[p (N)=10 ug·mL-1]：测定当天吸取10．00mL硝态氮标准贮备液于100mL容量瓶中，用水定容。
（五）操作步骤称取10.00g土壤样品放入200mL塑料瓶中，加入50.0mI氯化钙浸提剂，盖严瓶盖，摇匀，在振荡机上于20～25℃振荡30min(振荡频率：180r·min-1±20r·min-1)，干过滤。
硝态氮测定
土壤铵、硝态氮的测定（1）待测滤液的制备（水：土=10：1）称取10g待测样品准确到0.01g，置于大白瓶中，加入100ml 0.01mol/l的CaCl2溶液，以200 r/min 25℃振荡30min，取出静置5-10min后将悬液的上部清液用干滤纸（定性滤纸）过滤，得待测滤液。
（2）硝态氮—紫外分光光度法取上述滤液5.00 ml于50 ml容量瓶，用重蒸水定容，得待测液（一般不需要稀释，浸提液过滤后直接测定即可，但是刚施完肥的土壤硝态氮含量较高，建议取2-3样品做直接上机测定一下，标线5mg/L对应读数为1.05-1.1左右，然后决定稀释倍数）。
用标线0调零，测定此待测液在220nm和275nm处吸光度A220和A275。
按照下式计算校正吸光度A：A= A220-2A275。
绘制硝态氮标准曲线：分别取100mg/L硝酸盐(NO3--N)标准溶液0.00、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00mL 于100mL容量瓶,若直接测定则用浸提剂（0.01mol/l的CaCl2）定容摇匀（用蒸馏水定容即可，蒸馏水与CaCl2吸光值无差异），即分别配成0、1、2、3、4、5 mg/L 的标准系列溶液。
用标线0调零，分别用石英比色皿在220nm和275nm处测定标曲吸光度。
用公式：A= A220 -2A275求得校正吸光度，以氮浓度为纵坐标，A （A= A220-2A275）为横坐标绘制得标准曲线。
注:标准曲线要先进行配置，并且在配置前先把紫外分光光度计打开预热30min，以节约时间。
标曲根据土壤中硝态氮含量配制，标线最大值做到5，R2可达0.999以上，一般做到6/7/8即可，R2仅0.99，线性相关不好，标线要重新配置，标线275nm读数一般为0。
（3）铵态氮—靛酚蓝比色法取步骤（1）中的滤液10.00 ml（一般吸取土壤浸出液5或10ml，具体吸取量要考虑施肥时期）于50mL容量瓶中，再加入苯酚溶液5.00 ml和次氯酸钠碱性溶液5.00mL，摇匀。
土壤铵氮、硝氮、TOC的测定
药品的准备1M kcl溶液：称取74.6g kcl，稀释至1L。
苯酚溶液：称取苯酚（分析纯）10g和硝基铁氰化钠（硝普钠，有剧毒）100mg，稀释至1L。
此试剂不稳定，须贮于棕色瓶中，在4℃冰箱中保存。
次氯酸钠碱性溶液：称取氢氧化钠（分析纯）10g、磷酸氢二钠（Na2HPO4﹒7H2O）7.06g、磷酸钠（Na3PO4﹒12H2O）31.8g和52.5 g﹒L-1次氯酸钠（即含5%有效率的漂白粉溶液10mL 溶于水中，稀释至1L，贮于棕色瓶中，在4℃冰箱中保存。
1M HCL:43ML HCL溶于水，稀释至1L0.8%氨基磺酸：称取氨基磺酸8g溶于水，稀释至1L铵态氮储存溶液：准确称取干燥的硫酸铵[（NH4）2SO4,分析纯]0.4717g溶于水中，定容至1L。
即配制成含铵态氮（N）100μg.mL-1的贮存溶液；硝态氮储存溶液：准确称取硝酸钾0.7221溶于水，定容至1L，即100μg.mL-1 的储存溶液。
TOC的测定1.取样品土壤10g装入5Oml离心管，加入20ml蒸馏水提取，摇床摇1h。
2.取出离心（配平！）,8000r,5min。
3.离心后用0.45um微孔膜抽滤上清液，滤液用pvc小管装好，储存。
4.1到2个月内样品上toc测定。
铵态氮和硝态氮的测定1.样品土壤取5g，用25ml 1mol/l kcl 提取，摇床摇1h2.用折好的滤纸过滤大概10ml滤液3.标曲的配置：铵态氮：用移液管取储存液2.5ml,定容至100ml，配成2.5ug/ml的标准液。
分别用移液管取0,1,2,3,4,5,6,7,8ml装入25ml比色管硝态氮：用移液管取储存液4ml,定容至100ml，配成4ug/ml的标准液。
分别用移液管取0,0.5,1,1.5,2,2.5,3,4,5ml装入10ml 比色管4.取样品，加入显色剂：（提前半小时打开分光光度计！！！）铵态氮：取2.5ml滤液，加入2.5ml苯酚溶液，2.5ml碱性次氯酸钠，摇匀定容。
土壤铵态氮的测定方法土壤铵态氮等测定
土壤铵态氮的测定方法土壤铵态氮等测定方法原理:用2mol/L KCl溶液浸提土壤，把吸附在土壤胶体上的NH+4及水溶性NH+4浸提出来。
土壤浸出液中的铵态氮在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚蓝，溶液的颜色很稳定。
在含氮0.05~0.5mg/L的范围内，吸光度与铵态氮含量成正比，可用比色法测定。
实验步骤：（1）称取10.00g新鲜土样（精确到0.01g），置于200ml 三角瓶中，加入KCl溶液100ml，在摇床里振荡30min，取出静置后，取上清液过滤；（2）吸取浸提液5ml放入50ml容量瓶中，后加入KCl 溶液10ml、苯酚溶液5ml、次氯酸钠碱性溶液5ml,摇匀；（3）在25℃左右室温下放置1小时后，加入掩蔽剂1ml,然后用水定容至刻度，在625nm波长处进行比色。
工作曲线绘制：分别取0.00 ，0.50 ，1.00 ，2.00 ，3.00 ，4.00 ，5.00ml 铵态氮标准溶液于50ml容量瓶中，各加入10ml KCl溶液,然后同(2) (3)步骤进行。
试剂配制：【2mol/L KCl溶液】: 称取149.1g KCl(分析纯)溶入水中，稀释至1L。
【苯酚溶液】：称取苯酚（分析纯）10g、NaOH （分析纯）5g和消极铁氰化钠(分析纯)0.1g稀释至1L。
（此试剂不稳定，须贮于棕色瓶中，在冰箱中4℃保存，使用时用酸调节PH酸性）【次氯酸钠碱性溶液】：称取NaOH（分析纯）10g、磷酸氢二钠（分析纯）7.06g、磷酸钠（分析纯）31.8g和52.5g/L 次氯酸钠（分析纯，即含5%有效氯的漂白粉溶液）10mL 溶于水中，稀释至1L.(贮于棕色瓶中，在冰箱中4℃保存，使用时放置至室温)【掩蔽剂】: 将400g/L的酒石酸钾钠（分析纯）与100g/L 的EDTA二钠盐溶液等体积混合。
每100ml混合液中加入10mol/L NaOH溶液0.5ml。
【铵态氮标准溶液】：称取0.4717g于105℃烘2小时的(NH4)2SO4(分析纯)溶于水，定容至1L。
土壤中氨氮硝氮测定
硝态氮提取：2MKCl震荡提取土样30分钟后，提取液中硝氮测定同水中硝氮测定。
水中硝态氮的测定（紫外分光光度法）♦主要试剂：(1)0.100mg/ml硝酸盐氮标准储备液(购置或自配)：称取0．7218g硝酸钾(经105—110℃烘4小时)溶于水中，移至1000毫升容量瓶中用水稀释至标线。
(2)盐酸溶液：C (HCI) =lmol／L(盐酸系优级纯)♦标准曲线的绘制向6支100ml容量瓶中依次加0．100mg／ml硝酸钾标准溶液0、0.50、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00ml，用新鲜去离子水稀释到100ml(其相应浓度为0、0.50、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00mg／L)。
按水样测定相同步骤测量吸光度。
根据220nm与二倍275nm波长吸光度值之差对浓度作图，绘制标准曲线。
♦水样的测定在盛有水样的比色管中加1.0mol/L的盐酸溶液，用1cm石英比色皿在紫外分光光度计上，用新鲜去离子水50ml加l.0mol／L盐酸溶液作参比，测定水样在220nm及275nm波长处的吸光度。
♦结果计算校正吸光度计算：Ar=A220nm -2A275nm式中：Ar——校正吸光度；A220nm——220nm波长处测得的吸光度；A275nm——275nm波长处测得的吸光度由标准曲线算出相应水样硝态氮含量。
氨态氮2 mol·L-1KCl浸提—蒸馏法方法原理用2mol·L-1KCl浸提土壤，把吸附在土壤胶体上的NH4+及水溶性NH4+浸提出来。
取一份浸出液在半微量定氮蒸馏器中加MgO（MgO是弱碱，有防止浸出液中酰铵有机氮水解的可能）蒸馏。
蒸出的氨以H3BO3吸收，用标准酸溶液滴定，计算土壤中的NH4+—N含量。
主要仪器振荡器、半微量定氮蒸馏器、半微量滴定管（5mL）。
试剂（1）20g·L -1硼酸—指示剂。
20gH3BO3（化学纯）溶于1L水中，每升H3BO3溶液中加入甲基红—溴甲酚绿混合指示剂5mL并用稀酸或稀碱调节至微紫红色，此时该溶液的pH为4.8。
测定土壤养分消煮和浸提
铵态氮、硝态氮浸提：鲜土10g，2mol/L KCl 100ml浸提，振荡1h，过滤，稀释，测定
消煮：
全N土壤：称取过0.149mm筛的土样1.00g于消煮管中，加2g 催化剂（硫酸钾：硫酸铜：硒粉（有毒，戴口罩）=100:10:1；过0.25mm筛）和5ml浓硫酸；摇匀，管口放弯颈小漏斗，放电炉上加热（初始温度200度左右），10-15分钟后逐渐升高温度（380度左右）；待消煮液和土粒变为灰白稍带绿色后，再煮1小时。
完毕后，冷却，定容，测全氮（连续流动分析仪）。
全N、P、K植株：称取磨细烘干的植物样0.100-0.200g，（过0.25-0.5mm筛）于消煮管中，加水润湿；加5ml浓硫酸；摇匀，管口放弯颈小漏斗（放置过夜），放电炉上加热（初始温度190度左右），10-15分钟后（冒白烟）逐渐升高温度（380度左右）；当溶液全部呈棕黑色时取下，稍冷，加10滴300g/L H2O2，并摇动消煮管，继续放电炉上煮，10-15分钟后取下，加H2O2，如此反复2-3次，直至消煮液呈无色或清亮色后，再加热5-10分钟。
冷却；定容50ml；测定。
土壤硝态氮铵态氮的测定
（二）土壤硝态氮的测定1、酚二磺酸比色法1）方法原理土壤用饱和CaSO4 2H2O溶液浸提，在微碱性条件下蒸发至干，土壤浸提液中的NO3－—N在无水的条件下能与酚二磺酸试剂作用，生成硝基酚二磺酸。
C6H3OH(HSO3)2+HN→6H2OH(HSO3)2 NO2+H2O2，4- 酚二磺酸6-硝基酚-2 ，4-二磺酸此反应必须在无水条件下才能迅速完成，反应产物在酸性介质中无色，碱化后则为稳定的黄色溶液，黄色的深浅与NO3－—N含量在一定范围内成正相关，可在400～425nm处（或用蓝色滤光片）比色测定。
酚二磺酸法的灵敏度很高，可测出溶液中0.1mg?L-1 NO3－—N，测定范围为0.1 ～2mg?L-1 。
2）主要仪器分光光度计、水浴锅、瓷蒸发皿3）试剂（1）酚二磺酸试剂：称取白色苯酚（C6H5O，H分析纯）25.0g 置于500mL三角瓶中，以150mL纯浓H2SO4 溶解，再加入发烟H2SO475m并L 置于沸水中加热2h，可得酚二磺酸溶液，储于棕色瓶中保存。
使用时须注意其强烈的腐蚀性。
如无发烟H2SO，4 可用酚25.0g ，加浓H2SO4225m，L沸水加热6h 配成。
试剂冷后可能析出结晶，用时须重新加热溶解，但不可加水，试剂必须贮于密闭的玻塞棕色瓶中，严防吸湿。
（2）10μg?m-L1 NO3－—N标准溶液：准确称取KNO（3 二级）0.7221g 溶于水，定容1L，此为100μg?m-L1 NO3－—N 溶液，将此液准确稀释10倍，即为10μg?m-L1 NO3－—N标准溶液。
（3）CaSO4?2H2（O分析纯、粉状）、（4）CaCO（3 分析纯、粉状）、（5）1:1 NH4OH、（6）活性碳（不含NO3－），用以除去有机质的颜色。
（7）Ag2SO4（分析纯、粉状）、Ca（OH）2（分析纯、粉状）和MgCO（3 分析纯、粉状），用以消除Cl-1 的干扰。
4）操作步骤（1）浸提：称取新鲜土样（注1）50g（风干土样25g）放在500mL三角瓶中，加入CaSO4?2H2O 0.5g （注2）［凝聚剂的作用，使滤液不混浊而澄清］和250.00mL蒸馏水，盖塞后，用振荡机振荡10min。
铵态氮硝态氮测量方法
铵态氮硝态氮测量方法铵态氮和硝态氮是土壤中两种重要的氮素形态，对于土壤的肥力状况和施肥管理具有重要意义。
因此，准确测量土壤中的铵态氮和硝态氮含量对于合理的施肥和农田管理具有重要的意义。
本文将介绍几种常用的测量土壤中铵态氮和硝态氮的方法。
1.常用的颜色反应法：该法通过将土壤样品与钠氢氧化或钾氢氧化的碱性溶液分离，使土壤中的铵态氮转化为氨气，再经过蒸馏和缩水，使氨气转化为氨溶液，进而用酸与碱反应形成氨盐，并通过比色法测定氨盐的含量来间接测定土壤中的铵态氮含量。
2.氨蒸馏法：该方法通过加热土壤样品和钠氢氧化之后，将产生的氨气蒸馏出来，然后通过捕捉装置和滴定方法来间接测定土壤中的铵态氮含量。
3.电导比浓度法：该方法通过测定土壤浆液中的电导率，根据土壤的铵态氮含量和电导率之间的关系，间接推算出土壤中的铵态氮含量。
1.亚硝态氮还原法（蓝色素法）：该方法通过将土壤样品与酸性溶液、硫酸亚铁和草酸反应，将硝态氮还原为亚硝态氮，并与硫酸胍反应生成蓝色化合物。
然后，通过比色法测定反应产物的吸光度，来间接测定土壤中的硝态氮含量。
2.钴硝酸法：该方法通过将土壤样品与硝酸钴反应，在酸性条件下，硝态氮与硝酸钴形成红色络合物。
然后，通过比色法测定络合物的吸光度，来间接测定土壤中的硝态氮含量。
3. 紫外分光光度法：该方法通过利用硝态氮的特征吸收峰（220-225nm），采用紫外分光光度计，直接测定土壤中硝态氮的含量。
综上所述，测量土壤中的铵态氮和硝态氮含量的常用方法包括常用的颜色反应法、氨蒸馏法、电导比浓度法、亚硝态氮还原法、钴硝酸法和紫外分光光度法等。
每种方法都有其特点和适用范围，使用时需根据实际需要选择合适的方法进行测量。
土壤硝态氮测定
硝态氮测定（紫外分光光度校正因数法）双波长紫外比色法1.浸提：称取20.00g 1mm风干土，加入氯化钾溶液100ml，在振荡机上振荡1h，过滤。
2mol/l氯化钾溶液：称取149.1g氯化钾，溶于水中，稀释至1L。
10μg/ml NO3-—N标准溶液：准确称取硝酸钾0.7221g溶于水，定容1L，此为100μg/ml NO3-—N标准溶液，将此液准确稀释10倍，即为10 NO3-—N标准溶液。
2.约测：吸取水样（土壤浸提液）注入1cm光径石英比色杯中，以浸提剂为参比，在210nm波长处约测吸收值。
根据约测结果，测定浸出液应予稀释的倍数，使吸收溶液吸收值在0.1~0.8之间。
3.测定：水样（浸出液）稀释一定倍数后，吸取25ml放入50ml三角瓶中，加入1.00ml 1：9硫酸溶液（防止铵态氮转化为硝态氮），摇匀。
装入1cm光径石英比色杯在紫外分光光度计上分别于210nm和275nm处测定吸光度A210和A275，以同样稀释酸化后的饱和硫酸钙溶液为参比溶液，调节仪器的零点。
4.工作曲线绘制：吸取10mg/LNO3—N标准溶液0.00、1.00、2.00、4.00、6.00、8.00ml于50ml容量瓶中，（加一定体积浸提剂）定容。
即得0.00、0.20、0.40、0.80、1.20、1.60mg/LNO3—N标准溶液。
各取25.00mL于50ml三角瓶中，加1.00ml1：9硫酸溶液，摇匀。
装入1cm光径石英比色杯在紫外分光光度计上分别于210nm和275nm处测定吸光度A210和A275。
5.结果计算：ΔA=A210-A275f其中f为校正因数，在土壤有机质含量小于50g/kg时，f可取2.2，若大于土壤有机质含量大于50g/kg，需重新测定。
硝态氮含量（mg/kg）=c*V*D/m其中c为溶液中硝态氮浓度（mg/L），V为浸提液体积（mL），m为烘干土样质量（g），D为浸出液稀释倍数，不稀释时为1。
土壤铵态氮的测定
土壤铵态氮的测定(靛酚蓝比色法)(一)方法提要土壤浸出液中的NH4+在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚蓝，溶液的蓝色很稳定，在NH4+-N浓度为0.05~0.5u g·mL-1范围内，其深浅与NH4+含量成正比。
反应体系的pH应为10.5～11.7。
硝普钠[硝基铁氰化钠，或称亚硝酰基五氰基合铁(Ⅲ)酸钠，。
Na2Fe(CN)5N0]是此反应的催化剂，能加速显色，增强蓝色及其稳定性。
在20℃左右室温时一般须放置l h后比色，完全显色约需2~3h。
生成的蓝色很稳定，24 h内吸收值无显著变化。
比色时在625nm处测量吸收值。
待测液中如有干扰的金属离子，可用EDTA等螯合剂掩蔽。
（二）适用范围本方法适用于各类土壤铵态氮含量的测定。
（三）主要仪器设备1、分光光度计。
2 、往复式或旋转式振荡机，满足180r·min-1±20r·min-1的振荡频率或达到相同效果。
3、塑料瓶，200mL。
（四）试剂1、酚溶液：10 g苯酚(C6H50H)和100mg硝普钠[Na2Fe(CN)5NO·2H20]溶于1 L水中。
此试剂不稳定，须贮于棕色瓶，存放在4℃冰箱中，用时须温热至室温。
注意硝普钠有剧毒2、次氯酸钠碱性溶液：10g氢氧化钠(NaOH)，7.06g磷酸氢二钠(Na2HP04．7H20)，31.8g 磷酸钠(Na3P04·12H20)和10mL次氯酸钠(w (NaOCl)=5.25％，即含有效氯5%的漂白剂溶液]溶于1L水中。
此试剂应与酚溶液同样保存。
3、掩蔽剂：酒石酸钾钠溶液[p(KNaC4 H406·4H20)=400g·L-1与EDTA二钠溶液[p(C10H1408N2Na2)=100g·L-1]等体积混合，每100mL混合液中加0．5mLNaOH溶液[c(NaOH)=10mol·L-1]，即得清亮的掩蔽剂溶液。
土壤硝态氮和铵态氮的测定方法
一、原理：过滤后的样品经过一个开放的镀铜镉还原器通道后，硝酸根被还原成亚硝酸根，亚硝酸根通过磺胺处理后，与N-(1-萘基)-乙二胺二盐酸盐偶联，形成深红色的偶氮染料，然后在550nm或者520nm比色分析。
二、样品处理土壤鲜样采取四分法处理，根据实验用量进行过筛（比目大小视样品含水量而定）。
过筛后的土样，取出5g土样放入离心管，加入25ml 氯化钾提取液（2moL/L），震荡2小时后进行离心（8000 g ，15min），静置后过滤，取上清液测定。
若不能及时测定，放入4℃冰箱保存。
三、试剂配制：试剂用水：蒸馏水或去离子水。
（1）显色试剂：（棕色玻璃瓶，避光保存）150ml水，加入25ml浓磷酸▲，冷却至室温后，加入10g磺胺，再加入0.5g N-(1-萘基)-乙二胺二盐酸盐溶解。
用水定容至250ml。
加入2.0ml浓缩探针清洗液（表面活性剂）。
（2）氯化铵-EDTA缓冲液（ammonium chloride-EDTA）：把85g氯化铵和0.1g 乙二胺四乙酸二钠盐（EDTA-Na2）溶解于水，定容至1L。
用浓氨水▲调节PH至8.5。
（3）硝化组件缓冲液：{用来清洗OTCR(镀铜镉还原器通道)}取100ml的氯化铵-EDTA缓冲液，稀释至1L。
调节PH至8.5。
（4）2%硫酸铜：10g 五水硫酸铜（CuSO4.5H2O）溶于水，定容至500ml。
（5）5mol/L盐酸：小心慢慢加入50.69ml浓盐酸▲于水中，冷却后定容至100ml。
（6）硝酸盐存储溶液(1g/L)：（溶液6个月内有效）7.218g硝酸钾溶于水，定容至1L，加入1ml氯仿▲（防腐剂）。
（7）比色管清洗液：（定容时缓慢，防止出现泡沫，室温保存,两个月内有效）取50ml比色管清洗液，加水定容至1L。
（8）进样针清洗液：（定容时缓慢，防止出现泡沫，室温保存，两个月内有效。
）取0.5ml进样针清洗液，加水定容至1L。
四、测定方法：土壤硝态氮测定采用SmartChem全自动间断化学分析仪。
一种土壤铵态氮和硝态氮测定方法及其专用装置[发明专利]
![一种土壤铵态氮和硝态氮测定方法及其专用装置[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/e529360f9b89680202d8259d.png)
专利名称：一种土壤铵态氮和硝态氮测定方法及其专用装置专利类型：发明专利
发明人：宇万太,马强,张璐,赵少华
申请号：CN200410021545.7
申请日：20040723
公开号：CN1725008A
公开日：
20060125
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明涉及土壤中铵态氮和硝态氮的测定，具体的说是一种土壤铵态氮和硝态氮的测定方法及其专用装置，具体过程为：1)在蒸馏室中加入待测样品浸提液和MgO，加热促使蒸馏室中的浸提液与MgO发生反应(一般通过导管导入蒸汽实现加温)，反应生成的氨气与水蒸气混合，经导管导出后被冷凝，回收的冷凝液用已知浓度HCl滴定，以确定铵态氮含量；2)向蒸馏室内加入Devarda合金，继续加热，使待测液中的硝态氮被还原成铵态氮，然后生成氨气，进而随蒸汽经导管导出，冷凝，再用已知浓度HCl滴定，得样品中硝态氮含量。
本发明优点为：工艺简单，便于操作，重复性、稳定性好，测定结果准确；装置经久耐用，维护简单，结构及方案设计合理。
申请人：中国科学院沈阳应用生态研究所
地址：110016 辽宁省沈阳市沈河区文化路72号
国籍：CN
代理机构：沈阳科苑专利商标代理有限公司
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（二）土壤硝态氮的测定1、酚二磺酸比色法1）方法原理土壤用饱和CaSO4 2H2O溶液浸提，在微碱性条件下蒸发至干，土壤浸提液中的NO3－—N在无水的条件下能与酚二磺酸试剂作用，生成硝基酚二磺酸。
C6H3OH(HSO3)2+HNO3→C6H2OH(HSO3)2 NO2+H2O2，4-酚二磺酸6-硝基酚-2，4-二磺酸此反应必须在无水条件下才能迅速完成，反应产物在酸性介质中无色，碱化后则为稳定的黄色溶液，黄色的深浅与NO3－—N含量在一定范围内成正相关，可在400～425nm处（或用蓝色滤光片）比色测定。
酚二磺酸法的灵敏度很高，可测出溶液中0.1mg•L-1 NO3－—N，测定范围为0.1～2mg•L-1。
2）主要仪器分光光度计、水浴锅、瓷蒸发皿。
3）试剂（1）酚二磺酸试剂：称取白色苯酚（C6H5OH，分析纯）25.0g置于500mL三角瓶中，以150mL 纯浓H2SO4溶解，再加入发烟H2SO475mL并置于沸水中加热2h，可得酚二磺酸溶液，储于棕色瓶中保存。
使用时须注意其强烈的腐蚀性。
如无发烟H2SO4，可用酚25.0g，加浓H2SO4225mL，沸水加热6h配成。
试剂冷后可能析出结晶，用时须重新加热溶解，但不可加水，试剂必须贮于密闭的玻塞棕色瓶中，严防吸湿。
（2）10µg•mL-1 NO3－—N标准溶液：准确称取KNO3（二级）0.7221g溶于水，定容1L，此为100µg•mL-1 NO3－—N溶液，将此液准确稀释10倍，即为10µg•mL-1 NO3－—N标准溶液。
（3）CaSO4•2H2O（分析纯、粉状）、（4）CaCO3（分析纯、粉状）、（5）1:1 NH4OH、（6）活性碳（不含NO3－），用以除去有机质的颜色。
（7）Ag2SO4（分析纯、粉状）、Ca(OH)2（分析纯、粉状）和MgCO3（分析纯、粉状），用以消除Cl-1的干扰。
4）操作步骤（1）浸提：称取新鲜土样（注1）50g（风干土样25g）放在500mL三角瓶中，加入CaSO4•2H2O 0.5g（注2）[凝聚剂的作用，使滤液不混浊而澄清]和250.00mL蒸馏水，盖塞后，用振荡机振荡10min。
放置5 min后，将悬液的上部清液用干滤纸过滤，澄清的滤液收集地干燥洁净的三角瓶中。
如果滤液因有机质而呈现颜色，可加活性碳除之（注3、4）。
还有NO2-干扰和Cl干扰：（1）同时做空白。
（2）测定吸取清液 25～50mL（含NO3－—N 20～150µg）于瓷蒸发皿中，加CaCO3约0.05g（注5）[调节pH，防止NO3－—N在酸性和中性条件下蒸干分解而损失]，在水浴上蒸干（注6），到达干燥时不应继续加热。
稍冷，迅速加入酚二磺酸试剂1---2 mL，将皿旋转，使试剂接触到所有的蒸干物。
静止10min使其充分作用后，加水20 mL，用玻璃棒搅拌直到蒸干物完全溶解。
冷却后缓缓加入1：1 NH4OH（注7）并不断搅拌混匀，至溶液呈微碱性（溶液显黄色不再加深）再多加2mL，以保证NH4OH试剂过量。
然后将溶液全部转入100mL容量瓶中，加水定容（注8）。
在分光光度计上用光径1cm比色杯在波长420nm 处比色，以空白溶液作参比，调节仪器零点。
（2）同时，NO3－—N工作曲线绘制：分别取10µg•mL-1NO3－—N标准液0、1、2、5、10、15、20mL于蒸发皿中，在水浴上蒸干，与待测液相同操作，进行显色和比色，绘制成标准曲线，或用计算器求出回归方程。
5）结果计算土壤中NO3－—N含量（mg•kg-1）=式中：C(NO3－-N)——从标准曲线上查得（或回归所求）的显色液NO3－-N 质量浓度（µg•mL-1）；V——显色液的体积（mL）；ts——分取倍数；m——风干样品质量，g。
H——风干样品水分质量含量百分数。
注1．硝酸根为阴离子，不为土壤胶体吸附，且易溶于水，很易在土壤内部移动，在土壤剖面上下层移动频繁，因此测定硝态氮时注采样深度。
即不仅要采集表层土壤，而且要采集心土和底土，采样深度可达40cm、60 cm以至120 cm。
试验证明，旱地土壤上分析全剖面的硝态氮含量能更好地反映土壤的供氮水平。
和表层土壤比较，则全剖面的硝态氮含量与生物反应之间有更好的相关性，土壤经风干或烘干易引起NO3－—N变化，故一般都用新鲜土样测定。
注2．用酚二磺酸法测定硝态氮，首先要求浸提液清彻，不能混浊，但是一般中性或碱性土壤滤液不易澄清，且带有机质的颜色，为此在浸提液中应加入凝聚剂。
凝聚剂的种类很多，有CaSO4、CaO、Ca(OH)2、CaCO3、MgCO3、KAl(SO4)2、CuSO4等，其中CuSO4有防止生物转化的作用，但在过滤前必须以氢氧化钙或碳酸镁除去多余的铜，因此以CaSO4法提取较为方便。
注3．如果土壤浸提液由于有机质而有较深的颜色，则可用活性炭除去，但不宜用H2O2，以防最后显色时反常。
土壤中的亚硝酸根和氯离子是本法的主要干扰离子。
亚硝酸和酚二磺酸产生同样的黄色化合物，但一般土壤中亚硝酸含量极少，可忽略不计。
必要时可加少量尿素、硫尿和氨基磺酸（20g•L-1NH2SO3H）以除去之。
例如亚硝酸根如果超出了1µg•mL-1时，一般每10mL待测液中加入20mg尿素，并放置过夜，以破坏亚硝酸根。
检查亚硝酸根的方法：可取待测液5滴于白瓷板上，加入亚硝酸试粉0.1g，用玻璃棒搅拌后，放置10min，如有红色出现，即有1mg•L-1亚硝酸根存在。
如果红色极浅或无色，则可省去破坏亚硝酸根手续。
Cl-对反应的干扰，主要是加酸后生成亚硝酰氯化合物或其它氯的气体。
如果土壤中含氯化合物超过15mg•kg-1，则必须加Ag2SO4除去，方法是每100mL浸出液中加入 Ag2SO4 0.1g (0.1g Ag2SO4 可沉淀22.72mg Cl-)，摇动15min，然后加入Ca(OH)2 0.2g及MgCO3 0.5g，以沉过量的银，摇动5min后过滤，继续按蒸干显色步骤进行。
NO3- + 3Cl- + 4H+ → NOCl + Cl2 + 2H2O亚硝酰氯注5．在蒸干过程中加入碳酸钙是为了防止硝态氮的损失。
因为在酸性和中性条件下蒸干易导致硝酸离子的分解，如果浸出液中含铵盐较多，更易产生负误差。
注6．此反应必须在无水条件下才能完成，因此反应前必须蒸干。
注7．碱化时应用NH4OH，而不用NaOH或KOH，是因为NH3能与Ag+络合成水溶性的[ (NH3)2]+，不致生成Ag2O的黑色沉淀而影响比色。
注8．在蒸干前，显色和转入容量瓶时应防止损失。
作者: guangcaizhang 发布日期: 2008-10-18铵态氮测定：2、2mol•L-1KCl浸提—靛酚蓝比色法1）方法原理2mol•L-1KCl溶液浸提土壤，把吸附在土壤胶体上的NH4+及水溶性NH4+浸提出来。
土壤浸提液中的铵态氮在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚蓝，溶液的颜色很稳定。
在含氮0.05～0.5mol•L-1的范围内，吸光度与铵态氮含量成正比，可用比色法测定。
2）试剂（1）2mol•L-1KCl溶液称取149.1g氯化钾（KCl，化学纯）溶于水中，稀释至1L。
（2）苯酚溶液称取苯酚（C6H5OH，化学纯）10g和硝基铁氰化钠[Na2Fe(CN)5NO2H2O]100mg稀释至1L。
此试剂不稳定，须贮于棕色瓶中，在4℃冰箱中保存。
（3）次氯酸钠碱性溶液称取氢氧化钠（化学纯）10g、磷酸氢二钠（Na2HPO4•7H2O, 化学纯）7.06g、磷酸钠（Na3PO4•12H2O, 化学纯）31.8g和52.5g•L-1次氯酸钠(NaOCl，化学纯，即含5%有效氯的漂白粉溶液)10mL溶于水中，稀释至1L，贮于棕色瓶中，在4℃冰箱中保存。
（4）掩蔽剂将400g•L-1的酒石酸钾钠（KNaC4H4O6•4H2O, 化学纯）与100g•L-1的EDTA二钠盐溶液等体积混合。
每100mL混合液中加入10 mol•L-1氢氧化钠0.5mL。
（5）2.5µg•mL –1铵态氮（NH4+—N）标准溶液称取干燥的硫酸铵[(NH4)2SO4，分析纯]0.4717g溶于水中，洗入容量瓶后定容至1L，制备成含铵态氮（N）100µg•mL –1的贮存溶液；使用前将其加水稀释40倍，即配制成含铵态氮（N）2.5µg•mL –1的标准溶液备用。
3）仪器与设备往复式振荡机、分光光度计。
4）分析步骤（1）浸提称取相当于20.00g干土的新鲜土样（若是风干土，过10号筛）准确到0.01g，置于200mL三角瓶中，加入氯化钾溶液100mL，塞紧塞子，在振荡机上振荡1h。
取出静置，待土壤—氯化钾悬浊液澄清后，吸取一定量上层清液进行分析。
如果不能在24h内进行，用滤纸过滤悬浊液，将滤液储存在冰箱中备用。
（2）比色吸取土壤浸出液2mL～10mL(含NH4+—N2µg～25µg)放入50mL容量瓶中，用氯化钾溶液补充至10mL，然后加入苯酚溶液5mL 和次氯酸钠碱性溶液5mL，摇匀。
在20℃左右的室温下放置1h后（注1），加掩蔽剂1mL以溶解可能产生的沉淀物，然后用水定容至刻度。
用1cm比色槽在625nm波长处（或红色滤光片）进行比色，读取吸光度。
（3）工作曲线分别吸取0.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00mL NH4+—N标准液于50mL容量瓶中，各加10mL氯化钠溶液，同（2）步骤进行比色测定。
5）结果计算土壤中NH4+—（N）含量（mg•kg-1）=式中：ρ——显色液铵态氮的质量浓度(µg•mL –1)；V——显色液的体积(mL)；mts——分取倍数；m——样品质量（g）。
6）注释注1. 显色后在20℃左右放置1h,再加入掩蔽剂.过早加入会使显色反应很慢,蓝色偏弱;加入过晚,则生成的氢氧化物沉淀可能老化而不易溶解.。