血清总胆红素和结合胆红素测定
血清总胆红素及结合胆红素测定PPT优秀课件
【试剂】
1．0.1mol/LTris-HCl缓冲液(pH8.2) 称取三羟甲基氨基甲烷 (Tris)1.211g，胆酸钠172.3mg,十二烷基硫酸钠(SDS)432.6mg， 溶于去离子水90ml中，在室温(25～30℃)用1mol/L盐酸调节pH至 8.2(约用6ml)，再加蒸馏水至100ml，置冰箱保存，此液含 4mmol/L胆酸钠、15mmol/L SDS。
4．总胆红素标准液(342μmol/L) 按胆红素测定J-G法中方法配制，或 市售合乎要求的标准液。
5．结合胆红素标准液 将DTB配于胆红素浓度可忽略不计的人血清中， 或用冻干品按说明书要求重建。配制后分装于聚丙烯管内，－70℃保 存，可稳定6个月。冻干品未重建前置低温中，至少稳定1年。
【操作步骤】
• (3) 新生儿溶血症 血清胆红素有助于了解疾病严重程度。
• (4) 再生障碍性贫血及数种继发性贫血(主要见于癌或慢性 肾炎引起)，血清总胆红素减少。
【临床意义】
2．血清结合胆红素测定的意义 结合胆红素 与总胆红素的比值可用于鉴别黄疸类型。
• (1) 比值＜20% 溶血性黄疸，阵发性血红 蛋白尿，恶性贫血，红细胞增多症等。
2．0.2mol/L磷酸盐缓冲液(pH4.5)。
3．BOD溶液 如系冻干品，按说明书要求复溶，但复溶后冰箱保存不宜 过长(约可保存1周)，如系液体(可能含有甘油)，置4℃冰箱可保存较 长时间，BOD贮存溶液的酶活性一般在数千至1万～2万U/L，BOD 工作液酶活性可按反应液中BOD终浓度达0.3～1.0U/ml计算。
•
【操作步骤】 1.样品的测定 取3支试管，按下表程序操作.
混匀后，波长600nm，对照管调零，读取吸 光度，在标准曲线上查出相应的胆红素浓度。
检验科肝功能检验操作规程作业指导书
检验科肝功能检验操作规程作业指导书
1.血清总胆红素TBIL和结合胆红素DBIL测定
2.改良JG法
3.试剂
1.参照书刊文献如《全国临床检验操作规程》第二
版自配配制标准液的胆红素应符合如下标准纯
胆红素的氯仿溶液在25℃当光径1000±0001Cm
波长453nm条件下其摩尔吸光系数应在60700±
1600范围内偶氮胆红素的摩尔吸光系数应在
74380±866范围内配制标准液的稀释剂须含白
蛋白可用牛血清白蛋白或人血清代替人血清白
蛋白标准液应贮於棕色瓶中避光保存在市售试
剂中以含碱性酒石酸的灵敏度特异性高。
血清总胆红素(TBIL)—生化检测项目
血清总胆红素（TBIL）
一、检测原理
在PH2.9左右时，钒酸盐可将胆红素氧化成胆绿素，在去污剂和钒酸盐的共同作用下，游离胆红素和结合胆红素均发生氧化，发生氧化后，胆红素在黄光波段的特异性吸光度会出现明显下降，在451或545nm波长处检测胆红素时，胆红素的吸光度降低程度与样品中的总胆红素浓度成正比，而求出总胆红素的浓度。
二、参考区间
血清：5—22umol/L
三、临床意义
1、血清TBIL增高主要见于：病毒性肝炎、中毒性肝炎、肝内或肝外胆道阻塞、溶血性疾病、新生儿生理性溶血等
2、测定血清TBIL和直接胆红素（DBIL）鉴别黄疸类型有较大意义：
①溶血性黄疸：TBIL增高，DBIL正常或稍升高。
②肝细胞性黄疸：TBIL和DBIL均升高。
③阻塞性黄疸：TBIL和DBIL均升高，但以DBIL升高为主。
血清总胆红素和结合胆红素测定
感谢您的观看
THANKS
病理因素
肝病
肝炎、肝硬化等肝病可能导致血 清总胆红素水平升高。
胆道疾病
胆结石、胆囊炎等胆道疾病可能导 致血清总胆红素水平升高。
其他疾病
如溶血性贫血、急性胰腺炎等也可 能导致血清总胆红素水平升高。
药物因素
抗生素
长期使用某些抗生素如红霉素、 氯霉素等可能导致血清总胆红素
水平升高。
抗结核药
抗结核药物如利福平、异烟肼等 可能导致血清总胆红素水平升高。
抗肿瘤药
抗肿瘤药物如顺铂、阿霉素等可 能导致血清总胆红素水平升高。
05
血清总胆红素和结合胆红 素测定的注意事项
标本采集注意事项
空腹采集
为避免食物中色素对血清总胆红素和 结合胆红素测定的干扰，采集标本前 应确保受检者空腹至少8小时。
避免溶血
避免使用止血带
使用止血带会阻断静脉回流，导致血 液浓缩，影响测定结果。
正常值范围
成人
0-6.8μmol/L（0-0.3mg/dl）
新生儿
2.5-10μmol/L（0.1-0.4mg/dl）
03
血清总胆红素和结合胆红 素测定的临床意义
鉴别黄疸的类型
鉴别黄疸类型
血清总胆红素和结合胆红素测定可以 鉴别黄疸的类型，如溶血性黄疸、肝 细胞性黄疸和梗阻性黄疸。
判断黄疸程度
通过测定血清总胆红素和结合胆红素 水平，可以判断黄疸的严重程度，为 后续治疗提供依据。
采血时应避免采血部位发生溶血，因 为红细胞中的胆红素会干扰测定结果。
测定过程中的注意事项
仪器校准
为确保测定结果的准确性，应定期对测定仪器进 行校准。
避免试剂污染
在操作过程中，应避免试剂被污染，以免影响测 定结果。
临床医学检验技术(师)：肝胆疾病的实验室检查考试试题一
临床医学检验技术(师)：肝胆疾病的实验室检查考试试题一1、单选胆道梗阻性病变时，血清胆汁酸改变正确的是（）A.CA和CDCA浓度增加，但以CDCA为主，CA/CDCA<1B.CA和CDCA浓度增加，但以C（江南博哥）A为主，CA/CDCA>1C.CA和CDCA浓度增加，但以CA为主，CA/CDCA<1D.CA和CDCA浓度增加，但以CDCA为主，CA/CDCA>1E.CA和CDCA浓度减少，但以CDCA为主，CA/CDCA>1正确答案：B2、单选肝脏严重受损时，血中蛋白质的主要改变是（）A.清蛋白含量升高B.球蛋白含量下降C.清蛋白含量升高，球蛋白含量下降D.清蛋白含量下降，球蛋白含量升高或相对升高E.清蛋白和球蛋白含量都正常正确答案：D参考解析：肝脏的一个重要功能是合成与分泌血浆蛋白质，免疫球蛋白，几乎所有的血蛋白质均来自肝脏。
肝功能受损时，由于清蛋白的合成减少，血清清蛋白浓度下降，可致A/G比值下降，甚至发生倒置。
3、单选血氨水平下降的是（）A.贫血B.尿毒症C.消化道出血D.肝炎E.肝癌正确答案：A4、配伍题尿中出现的胆红素是（）正常人血清中的胆红素主要是（）细胞内胆红素的主要存在形式是（）结合胆红素是（）A.结合胆红素B.胆红素-Y蛋白C.未结合胆红素D.胆红素葡萄糖醛酸酯E.胆绿素正确答案：A,C,B,D5、单选微粒体乙醇氧化体系的辅酶为（）A.NAD+B.NADHC.NADPHD.NADP+E.CoA正确答案：C参考解析：NADPH是一种辅酶，叫还原型辅酶Ⅱ，学名烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸，亦写作[H]。
在很多生物体内的化学反应中起递氢体的作用，具有重要的意义。
NADPH通常作为生物合成的还原剂，并不能直接进入呼吸链接受氧化。
只是在特殊的酶的作用下，NADPH上的H被转移到NAD+上，然后由NADH进入呼吸链。
6、单选δ胆红素是一种与蛋白质紧密结合的胆红素，它与重氮试剂作用的特点是（）A.在甲醇存在下显紫红色B.在水溶液中直接作用呈紫红色C.必须去蛋白后才显紫红色反应D.在酒精溶液中与重氮试剂作用可显色E.在咖啡因作用下与重氮试剂作用可显色正确答案：B7、单选以下不在肝脏合成的血浆蛋白质是（）.A.前清蛋白B.免疫球蛋白C.凝血酶原D.清蛋白E.纤维蛋白原正确答案：B参考解析：免疫球蛋白是由B细胞合成的，而不是在肝脏合成。
总胆红素36.7结合胆红素11.9
在本篇文章中，我将以更深入的方式来探讨关于总胆红素36.7结合胆红素11.9的主题。
通过全面的评估和深度的阐述，希望能够让您对这个主题有一个更深刻的理解。
1. 总胆红素36.7结合胆红素11.9的基本概念总胆红素和结合胆红素是人体内的两种重要的血胆红素代谢产物。
总胆红素是血液中所有胆红素的总和，它主要来自于血红蛋白的降解。
而结合胆红素是指与葡萄糖醛酸或谷胱甘肽结合的胆红素，这种形式的胆红素对人体来说是相对稳定的。
36.7和11.9分别指的是其在血液中的浓度。
2. 对总胆红素36.7结合胆红素11.9的深入解读总胆红素36.7结合胆红素11.9的数值代表了人体内胆红素的含量，而这一数值的偏高或偏低可能会反映出身体内部的某些变化或疾病情况。
在医学上，这一数值常常被用来帮助诊断和判断肝胆系统的疾病，如肝功能异常、胆管梗阻、溶血性贫血等。
对于这一数值的测定和解读在临床诊断中具有重要的意义。
3. 应对总胆红素36.7结合胆红素11.9偏高或偏低的问题当总胆红素36.7结合胆红素11.9偏高时，可能暗示着肝脏功能异常、溶血性贫血或胆管梗阻等问题。
而当这一数值偏低时，则可能跟肝脏合成胆红素的能力不足有关。
对于这些情况，及时寻求医学建议和治疗是非常重要的。
通过调整饮食、药物治疗或手术治疗等方式，可以有效地控制总胆红素36.7结合胆红素11.9的数值，从而改善相关的疾病状况。
4. 个人观点和理解总胆红素36.7结合胆红素11.9的数值是一个重要的生物学指标，在临床医学中有着广泛的应用。
尤其对于肝胆系统疾病的诊断和治疗具有重要的意义。
我认为，了解和理解这一指标的意义和影响，不仅可以帮助我们关注自身健康状况，还可以及时发现潜在的健康问题并做出相应的调整和治疗。
通过这篇文章，希望能够使您对总胆红素36.7结合胆红素11.9有一个更全面、深刻的了解。
因为了解和理解这一主题对于我们的健康具有非常重要的意义，希望您能够关注并重视自身的健康情况，并在有需要时及时进行相关的检查和治疗。
肝功能中各检测项目的测定方法【精选】
肝功能中各检测项目的测定方法、测定原理和临床意义1、血清总胆汁酸TBA ：（1）测定方法：A 、酶循环法，B 、3a-HDS 法（3-a 羟类固醇脱氧酶）（2）测定原理方法A ：胆汁酸被3α羟基类固醇脱氢酶（3a-HSDH ）及口-硫代烟酰胺嘌呤二核苷酸氧化型特异性的氧化，生成3酮类固醇及}硫代烟酰胺嘌呤二核苷酸还原型。
此外，生成的3酮类固醇在3α羟基类固醇脱氢酶及β硫代烟酰胺嘌呤二核苷酸还原型存在下，生成胆汁酸及β烟酰胺嘌呤二核苷酸氧化型。
以上依据循环酶而放大量的胆汁酸测定生成的β-硫代烟酰胺嘌呤二核苷酸还原型的吸光度，计算血清中胆汁酸的量。
方法B ：在3-a 羟类固醇脱氧酶作用下，各种胆汁酸C3上α位的羟基脱氧形成羰基，同时氧化型NAD 还原成NADH 随后NADH 上的氢由黄递酶催化转移给硝基四氮唑蓝（NTB ）产生甲替,用磷酸中止反应,甲替的产量与总胆汁酸成正比，在波长540nm 比色,与同样处理的标准品比较，计算其含量。
（3）临床意义1.测定血清中胆汁酸可提供肝胆系统是否正常，肝、胆疾病时周围血循环中的胆汁酸水平明显升高。
急性肝炎早期和肝外阻塞性黄疸时可增至正常值的100 倍以上。
对肝胆系统疾病的诊断具有特异性。
2．可敏感地反映肝胆系统疾病的病变过程。
肝胆疾病时血清胆汁酸浓度的升高与其他肝功能试验及肝组织学变化极为吻合，在肝细胞仅有轻微坏死时，血清胆汁酸的升高，常比其他检查更为灵敏。
据报道，急性肝炎、肝硬化、原发性肝癌、急性肝内胆汁郁滞、原发性胆汁性肝硬化以及肝外阻塞性黄疸，其血清胆汁酸均100 ％出现异常。
上述疾病时均有血清胆汁酸含量的增高。
2、丙氨酸氨基转移酶ALT（1）测定方法：酶偶联法，赖氏法，连续监测法（2）测定原理：L-丙氨酸 + α-酮戊二酸---ALT ----L-丙酮酸 + L-谷氨酸 丙酮酸 +NADH+H +---------LD -------L--乳酸+NAD +4 11 201628（3）临床意义：谷丙转氨酶升高临床意义就在于对急性乙型肝炎、慢性肝炎、HBV 携带者、重型肝炎以及肝硬化、肝癌等一系列病毒性肝炎的诊断和分析，ALT 的升高只表示肝脏可能受到了损害。
临床医学检验技师初级师临床化学肝胆疾病的实验室检查-试卷1_真题(含答案与解析)-交互
临床医学检验技师初级（师）临床化学（肝胆疾病的实验室检查）-试卷1 (总分52, 做题时间90分钟)1. A1型题1.溶血性黄疸的特点是SSS_SINGLE_SELA 血中结合胆红素含量增高B 血中胆素原剧减C 尿中胆红素增加D 未结合胆红素浓度增高E 粪便颜色变浅分值: 2答案:D解析：溶血性黄疸时，血中游离胆红素明显增高，尿胆素原和粪胆素原增加。
2.阻塞性黄疸时，重氮反应为SSS_SINGLE_SELA 直接反应阴性B 直接反应阳性C 直接反应阴性，间接反应强阳性D 双相反应阴性E 双相反应阳性分值: 2答案:B解析：结合胆红素可与重氮试剂作用迅速产生颜色反应，称直接反应阳性。
阻塞性黄疸时因结合胆红素增加，故直接反应阳性。
3.下列叙述错误的是SSS_SINGLE_SELA 肝脏是脂肪酸p-氧化的主要器官B 肝脏可合成VLDLC 肝脏是利用酮体的主要器官D 肝脏可将胆固醇转化为胆汁酸E 肝脏可生成HDL分值: 2答案:C解析：本题主要考查肝脏与脂的关系。
肝细胞具有丰富的酶，可以合成大量的蛋白质，因而是脂的重要器官。
且肝脏是游离胆红素与血脂肪酸p·氧化的主要器官，可合成VLDL及HDL，将胆固醇转化为胆汁酸。
肝脏是生成酮体的器官，但不能使酮体进一步氧化分解，在长期饥饿或某些疾病情况下，由于葡萄糖供应不足，心、脑等器官也可转变来利用酮体氧化分解供能。
4.下列有关胆汁酸的描述，错误的是SSS_SINGLE_SELA 初级胆汁酸在肝脏合成B 次级胆汁酸在小肠合成C 与甘氨酸或牛磺酸结合称为结合型胆汁酸D 人胆汁中结合型胆汁酸以牛磺酸结合物为主E 人胆汁中几乎不含游离型胆汁酸分值: 2答案:D解析：人胆汁中结合型胆汁酸以甘氨酸结合物为主。
蛋白结合，不能通过肾小球而随尿排出，所以尿胆红素呈阴性。
5.在微粒体中使血红素氧化成胆绿素的酶是SSS_SINGLE_SELA 血红素加单氧酶B 胆绿素还原酶C 葡萄糖醛酸转移酶D 细胞色素氧化酶E 过氧化物酶分值: 2答案:A解析：血红素加单氧酶氧化血红素形成胆绿素。
常用肝功能指标都有哪些
常用肝功能指标（1）反映肝细胞蛋白合成代谢功能的指标：总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、前白蛋白（PA）、胆碱酯酶（CHE）、凝血酶原时间（PT）。
由于它们都是由肝脏合成的，一旦肝脏合成功能下降，以上指标在血液中浓度随之降低，其降低程度与肝脏合成功能损害程度呈正相关。
（2）反映肝细胞有无受损及严重程度的指标：谷丙转氨酶ALT（GPT）、谷草转氨酶AST（GOT）、腺苷脱氨酶（ADA）、胆碱酯酶（CHE）、乳酸脱氢酶（LDH）等。
以上各项酶在肝细胞中均有存在，当肝细胞膜受损或细胞坏死时，这些酶进入血清便增多。
通过测定血清或血浆中酶的活性，即可反映肝细胞受损情况及损伤程度。
（3）反映肝脏胆排泄、分泌及解毒功能的指标：总胆红素（TBIL）、直接胆红素（DBIL）、总胆酸（TBA）、血氨（NH3）。
肝细胞损害时，其排泄、分泌、运输及解毒功能出现障碍，造成血液中TBIL、DBIL、TBA和NH3浓度升高。
（4）对诊断胆汁淤积指示酶（包括同工酶）有帮助的酶指标有：碱性磷酸酶（ALP）；r谷氨酸转肽酶（GGT）、5′－核苷酸酶（5′－NT）等，以AKP及γ－GT应用较多。
这些酶在肝内胆管上皮层的浓度较高。
当上皮层受损及胆管内压力增高时，便有这些酶增多进入血清中。
（5）反映肝脏间质成分增生（肝纤维化和肝硬化）的指标：胶原或其末端多肽——Ⅲ型前胶原氨基端肽（PⅢP）、Ⅲ型原胶原（PCⅢ）、Ⅳ型胶原C端原肽（Ⅳ/PC）；糖蛋白——层黏蛋白（LN）；蛋白聚糖——透明质酸（HA）。
（6）对肝肿瘤诊断有意义的血清标志物：甲胎蛋白（AFP）。
肝功能指标及其临床意义（一）肝功能异常的原因很多，不要把肝功能异常都认为是病毒性肝炎。
引起肝功能异常的原因有：病毒性肝炎、酒精性肝炎、寄生虫病、药物性肝损害、其他内科疾病等引起的肝功损害。
当然，一旦化验结果提示肝功异常，需要重视并仔细检查肝功能异常的原因。
下面介绍常见的肝功能化验指标及其临床意义。
临床医学检验技术(士)：肝胆疾病的实验室检查真题一
临床医学检验技术(士)：肝胆疾病的实验室检查真题一1、单选会导致尿胆素原排泄减少的是（）A.肠梗阻B.溶血C.碱中毒D.胆道梗阻E.肝细胞性黄疸正确答案：A参考解析：在肠道中的葡萄糖醛酸胆红素在肠菌的作用下（江南博哥）生成胆素原，20%～30%的胆素原被肠黏膜细胞重吸收，经门静脉入肝。
其中大部分随胆汁排入肠道，形成胆素原的肠肝循环。
只有少量经血循环入肾并排出。
肠道阻塞使肠道中胆红素生成的胆素原减少，故尿胆素原排泄也减少。
2、单选结合胆红素是（）A.胆红素-白蛋白B.胆红素葡萄糖醛酸酯C.胆红素-Y蛋白D.胆素原（尿胆原）E.胆红素阴离子正确答案：B参考解析：在血循环中胆红素主要以胆红素-白蛋白复合物的形式存在和运输。
肝细胞对胆红素的转化在滑面内质网上进行，在胆红素-尿嘧啶核苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶的催化下，胆红素被转化为单、双葡萄糖醛酸结合胆红素，形成水溶性的结合胆红素，结合胆红素随胆汁排泄至肠管后，在回肠末端至结肠部位，在肠道菌的作用下大部分被水解而脱下葡萄糖醛酸，还原成尿胆原。
Y蛋白和Z蛋白是肝细胞内的两种色素受体蛋白，Y蛋白是肝细胞主要的胆红素转运蛋白。
3、单选患者女性，有偏食习惯，因高热、头晕、嗜睡、月经血量过多就诊。
实验室检查：WBC15.7×109/L，RBC3.0×1012/L，Hb85g/L，PLT87×109/L，ESR27mm/h，Ret0.07，血涂片显示明显核左移现象，可见成熟红细胞大小不均及点彩红细胞。
该患者最可能的诊断（）A.溶血性黄疸B.肝细胞性黄疸C.阻塞性黄疸D.肝硬化E.急性胰腺炎正确答案：C4、单选不能反映肝内或肝外胆汁淤积的实验是（）A.血清γ-GTB.血清AST及其同工酶C.血清总胆红素测定D.血清1分钟胆红素测定E.血清总胆固醇测定正确答案：E参考解析：除E外，其余实验均能反映肝内或肝外胆汁淤积。
5、单选患者女性，有偏食习惯，因高热、头晕、嗜睡、月经血量过多就诊。
实验十八 血清胆红素测定(改良J-G法)
实验十六血清胆红素测定（改良J-G法）【目的】1.熟悉血清胆红素测定的原理和方法；２.掌握胆红素测定的正常参考范围及临床意义。
【原理】血清中结合胆红素可直接与重氮试剂反应，生成偶氮胆红素；未结合胆红素需要在加速剂（咖啡因-苯甲酸钠）作用下，分子内氢键破坏后，才能与重氮试剂反应生成偶氮胆红素。
醋酸钠缓冲液保持反应的pH，反应完成后加入终止试剂（叠氮钠）以破坏重氮试剂，最后加入碱性酒石酸钠溶液，使颜色不稳定的紫红色偶氮胆红素在咖啡因存在下转化为稳定的蓝色偶氮胆红素，在600nm波长比色，从标准曲线查找总胆红素和结合胆红素含量。
【器材】试管及试管架、吸管、恒温水浴箱、分光光度计、秒表。
【试剂】1．咖啡因试剂称取无水水醋酸钠41.0g，苯甲酸钠38.0g，乙二胺四乙酸二钠（EDTA-Na2）0.5g，溶于约500ml去离子水中，再加入咖啡因25.0g，搅拌使溶解（加入咖啡因后不能加热溶解），用去离子水补足至1L，混匀。
过滤后置棕色瓶，室温保存。
2．碱性酒石酸钠溶液称取氢氧化钠75.0g，酒石酸钠（Na2C4H4O6·2H2O）263.0g，用去离子水溶解并补足至1L，混匀。
置塑料瓶中，室温保存。
3．5g/L亚硝酸钠溶液称取亚硝酸钠0.5g，用去离子水溶解并定容至100ml，混匀，置棕色瓶，冰箱保存，稳定期不少于2周。
若发现溶液呈淡黄色，应废弃重配。
4．5g/L 对氨基苯磺酸溶液称取对氨基苯磺酸（NH2C6H4SO3H·H2O）5.0g，溶于800ml去离子水中，加入浓盐酸15ml，用去离子水补足至1L。
5．重氮试剂临用前取上述亚硝酸钠溶液0.5ml和对氨基苯磺酸溶液20ml，混匀即成。
6．5.g/L叠氮钠溶液7．胆红素标准液（1）目前一般用未结合胆红素配制标准液，此标准品须用含白蛋白的溶剂配制，常用人混合血清，对此血清的要求如下：收集无溶血、无黄疸、无脂浊的新鲜血清，混合，必要时可用过滤器过滤。
血液透析患者血清总胆红素结合胆红素比值检测及临床意义
结果展示与解读
结果展示
通过表格、图表等形式展示血清总胆红素和结合胆红素 的检测结果，以及相关性分析和回归分析的结果。
结果解读
根据统计结果，分析血清总胆红素和结合胆红素之间的 关系，探讨其在血液透析患者中的临床意义。例如，高 血清总胆红素水平可能提示患者存在肝功能异常或胆汁 淤积等问题，而高结合胆红素水平则可能与溶血性疾病 或肝细胞损伤有关。通过监测这些指标的变化，可以及 时了解患者的病情变化和治疗效果，为临床诊断和治疗 提供有力支持。
血液透析过程
将患者的血液引出体外，通过透析器 与透析液进行物质交换，清除体内的 代谢废物、维持电解质和酸碱平衡； 同时清除体内过多的水分，并将经过 净化的血液回输。
血液透析对患者胆红素的影响机制
血液透析对胆红素的清除
血液透析可以清除血液中的小分子物质，包括胆红素。在透析过程中，胆红素 通过透析膜与透析液中的成分进行交换，从而降低血清中的胆红素水平。
该比值能够反映血液透析患者的肝功能状态，对于评估患 者的病情和预后具有重要意义。
要点二
探讨该比值在血液透析患者中的 临床意义
通过检测血清总胆红素和结合胆红素的比值，可以及时发 现血液透析患者可能出现的肝功能异常，为临床诊断和治 疗提供依据。
血液透析患者现状
血液透析患者数量不断增加
随着人口老龄化和慢性肾脏病发病率的上升，需要进行血液透析治疗的患者数量也在不断 增加。
调整透析方案
根据该比值的动态变化，医生可及时调整 透析方案，如增加透析频率、调整透析液 成分等，以提高透析治疗效果和患者生活 质量。
指导临床治疗策略调整
个体化治疗
血清总胆红素结合胆红素比值可为血液透析 患者的个体化治疗提供指导。针对不同患者 的具体情况，医生可制定针对性的治疗方案 ，如调整药物剂量、选择更合适的透析方式 等。
胆红素
在各种重氮试剂法中，改良J-G法为推荐方
法，其灵敏度、准确度和特异性均较高。
改良J-G法
原理： 血清中结合胆红素可直接与重氮试剂反应产生偶
氮胆红素，所以称为直胆，非结合胆红素测定时 要以咖啡因-苯甲酸钠-醋酸钠为加速剂破坏胆红 素分子内氢键再与重氮试剂反应，叠氮钠破坏剩 余重氮试剂，加入碱性酒石酸钠使最大吸光度由 530nm转到600nm，非胆红素的黄色色素及其它 红色与棕色色素产生的吸光度降至可忽略不计， 使灵敏度和特异性升高，最后形成的绿色是由兰 色的碱性偶氮胆红素和咖啡因与对氨基苯磺酸之 间形成的黄色色素混合而成。
0.2 40
0.3 0.2
0.2 60
0.4 0.1
0.2 80
பைடு நூலகம்0.2 /
0.2 100
相当于胆红素浓度 （μmol/L）
改良J-G法操作步骤
加入物（ml） H2 O 对照管 0.2 总胆红素管 / 结合胆红素管 /
血清
咖啡因苯甲酸钠试剂 对氨基苯磺酸溶液 重氮试剂
/
1.6 0.4 /
0.2
1.6 / 0.4
分，包括非结合胆红素（Bu）、胆红素单 葡萄醛酸酯（mBc）、胆红素双葡萄醛酸 酯（dBc）、δ胆红素（Bδ）、以及光照射 后产生的光胆红素，并加以准确定量。 该法灵敏度高、特异性强，是目前胆红素 测定的最可靠方法。 但该法仪器昂贵，技术要求高。
直接分光光度法是专用于新生儿血清总胆
红素测定，采用双波长比色避免溶血干扰， 方法简单，不需要样品空白，但该法不适 合自动化大批量分析。
0.2
/ / 0.4
每加一种试剂后混匀，置37℃10分钟
叠氮钠溶液
咖啡因苯甲酸钠试剂 碱性酒石酸钠溶液
肝脏功能的测定方法和指标
肝脏功能的测定方法和指标肝脏是人体最大的脏器之一，承担着许多重要的生理功能。
肝脏的血液循环、免疫排毒、代谢调节等功能对人体正常生理和病理平衡的维持至关重要。
不过，许多疾病、饮食和生活方式等因素都会影响肝脏功能的正常运作，因此在日常生活中，定期测定肝脏功能成为了预防和治疗一系列肝脏疾病的必要手段。
肝脏功能测定的指标常见有血清谷草转氨酶（AST）、血清谷丙转氨酶（ALT）、总胆红素（TBIL）、直接胆红素（DBIL）等。
血液中这些指标的变化可以反映肝脏功能的产生异常，有助于医生对肝脏病情的判断与治疗。
首先，血清谷草转氨酶（AST）和血清谷丙转氨酶（ALT）是肝功能常见指标。
它们两者都是常见的血清酶类蛋白，一般被称作转氨酶，其主要功能是参与氨基酸代谢。
肝脏受到损伤或疾病的时候，这些酶类蛋白会释放到血液中，从而血液内测得的AST、ALT值将出现不同程度的升高。
正常情况下，AST值为10-40IU/L，ALT为5-45IU/L。
当AST、ALT值大幅度升高时，会暗示着肝细胞受到严重损害，常见的如肝炎病毒、脂肪肝、酒精肝等疾病。
尤其是ALT，一旦出现增高，很大程度上与肝炎病毒感染有关。
因此在医学检查中，AST、ALT值的变化被视为判断肝脏健康的重要标准，有利于帮助医生确定病情并选择治疗方案。
其次，总胆红素（TBIL）和直接胆红素（DBIL）也是常见的肝功能指标。
胆红素在正常情况下是被肝脏排出体外的代谢产物。
当肝脏受到损害时，可能会出现无法正常排出胆红素的情况，从而胆红素水平就会升高。
TBIL是反映机体总体胆红素水平变化的信息，通常其水平不应超过21μmoI/L。
如果超标，很可能导致黄疸的出现，严重时还会使胆色素沉积在皮肤、眼睛等部位，形成显著的黄疸表现。
而DBIL则是胆红素当中能够直接与血浆蛋白结合的一部分，通常其水平不应超过7μmol/L。
正常情况下，DBIL的含量应该占总胆红素的20%。
在胆红素水平的测定方面，酶促法和直接法是两种常用的测定方法。
胆红素测定方法
胆红素测定方法胆红素是人体内一种重要的生化物质，它是红细胞分解代谢产物，对于人体健康具有重要的生理功能。
因此，准确测定胆红素水平对于临床诊断和治疗具有重要意义。
下面将介绍几种常见的胆红素测定方法。
一、直接胆红素测定法。
直接胆红素测定法是通过直接测定血清中的胆红素水平来判断胆红素代谢情况的一种方法。
该方法操作简单，结果准确可靠，是临床常用的一种测定方法。
二、间接胆红素测定法。
间接胆红素测定法是通过间接测定血清中的胆红素水平来判断胆红素代谢情况的一种方法。
该方法操作简单，结果准确可靠，是临床常用的一种测定方法。
三、总胆红素测定法。
总胆红素测定法是通过测定血清中的总胆红素水平来判断胆红素代谢情况的一种方法。
该方法操作简单，结果准确可靠，是临床常用的一种测定方法。
四、高效液相色谱法。
高效液相色谱法是通过高效液相色谱仪来测定血清中的胆红素水平的一种方法。
该方法操作简单，结果准确可靠，是临床常用的一种测定方法。
五、光度法。
光度法是通过光度计来测定血清中的胆红素水平的一种方法。
该方法操作简单，结果准确可靠，是临床常用的一种测定方法。
六、比色法。
比色法是通过比色计来测定血清中的胆红素水平的一种方法。
该方法操作简单，结果准确可靠，是临床常用的一种测定方法。
七、电化学法。
电化学法是通过电化学分析仪来测定血清中的胆红素水平的一种方法。
该方法操作简单，结果准确可靠，是临床常用的一种测定方法。
总结。
以上所述即为胆红素测定的几种常见方法，每种方法都有其特点和适用范围，临床医生可根据具体情况选择合适的方法进行胆红素测定。
希望本文所述内容能对相关工作者有所帮助。
常见的肝功能化验指标及其临床意义
常见的肝功能化验指标及其临床意义肝功能异常的原因很多，不要把肝功能异常都认为是病毒性肝炎。
引起肝功能异常的原因有：病毒性肝炎、酒精性肝炎、寄生虫病、药物性肝损害、其他内科疾病等引起的肝功损害。
当然，一旦化验结果提示肝功异常，需要重视并仔细检查肝功能异常的原因。
下面介绍常见的肝功能化验指标及其临床意义。
一、肝脏血清酶学的检测指标(一)转氨酶转氨酶又称氨基转移酶。
临床最常用的是丙氨酸转氨酶(ALT)和门冬氨酸转氨酶(AST)，它们的正常值由于各医院检测方法不同而有差别。
血清转氨酶活性降低的临床意义不大，具有临床意义是酶活性升高。
各种肝脏疾病病人和一些肝外疾病病人，其血清转氨酶活性均可升高。
ALT活性增高提示肝细胞破坏、细胞膜通透性增强；AST活性增高常提示线粒体损伤。
二者是监测病毒性肝炎的敏感指标。
常在临床症状出现之前血清转氨酶活性已经增高，故检测ALT、AST可以发现早期的急性肝炎和隐性肝炎病毒感染，是目前诊断肝病应用最普遍的酶学检查项目。
血清转氨酶活性的高低与肝细胞受损的程度一致，故有助于病情估计、疗效观察和预后判断：ALT显著增高，见于各种肝炎急性期、药物性肝损害；中度增高，见于肝癌、肝硬化、慢性肝炎、酒精性肝病及心肌梗死；轻度增高，见于脂肪肝、阻塞性黄疸及胆道炎症。
AST显著增高，可见于心肌梗死急性发作、各种严重的病毒性肝炎、药物性肝损害及酒精性肝病；中度升高，见于肝癌、肝硬化、慢性肝炎、心肌炎；轻度升高，可见于轻度慢性肝炎。
患有重型肝炎时，若出现胆红素迅速升高，转氨酶反而下降，称为酶胆分离，提示预后不良。
血清转氨酶活性测定反映肝细胞损害及其程度，对肝病的病因鉴别诊断意义不大。
ALT存在于肝细胞胞浆水溶性部分，AST存在于细胞浆水溶性部分及线粒体中。
肝细胞损害严重者，AST不仅胞浆中的酶释放出来，而且线粒体中的酶也释放出来，故测定AST/ALT比值可用于判断肝细胞损害程度和肝病类型。
急性肝炎或轻型慢性肝炎病人，ALT＞AST；酒精性肝病、重型肝炎病人通常AST＞ALT。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
1
血清总胆红素和结合胆红素测定
改良J-G法测定血清总胆红素和结合胆红 素 胆红素氧化酶法测定总胆红素和结合胆 红素
2
改良J-G法测定血清总胆红素和结合胆红素
【原理】 血清中结合胆红素可直接与重氮试 剂反应，产生偶氮胆红素；非结合胆红 素须有加速剂咖啡因-苯甲酸钠-醋酸钠 作用，其分子内氢键破坏后才能与重氮 试剂反应，也产生偶氮胆红素。本法重 氮反应pH6.5，最后加入碱性酒石酸钠使 紫色偶氮胆红素(吸收峰530nm)转变成蓝 色偶氮胆红素，在600nm波长比色，使检 测灵敏度提高。
3
改良J-G法测定血清总胆红素和结合胆红素 【试剂】
1．咖啡因-苯甲酸钠试剂 称取无水醋酸钠41.0g，苯甲酸钠38.0g， 乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na2)0.5g，溶于约500ml去离子水中， 再加入咖啡因25.0g，搅拌使溶解(加入咖啡因后不能加热溶解)， 用去离子水补足至1L,混匀。滤纸过滤，置棕色瓶，室温保存。 2．碱性酒石酸钠溶液 称取氢氧化钠75.0g，酒石酸钠 (Na2C4H4O6?2H2O)263.0g，用去离子水溶解并补足至1L，混匀。 置塑料瓶中，室温保存。 3．72.5mmol/L亚硝酸钠溶液 称取亚硝酸钠5.0g，用去离子水溶解 并定容至100ml，混匀，置棕色瓶，冰箱保存，稳定期不少于3个 月。作10倍稀释成72.5mmol/L，冰箱保存，稳定期不少于2周。 4．28.9mmol/L对氨基苯磺酸溶液 称取对氨基苯磺酸 (NH2C6H4SO3H?H2O)5.0g，溶于800ml去离子水中，加入浓盐酸 15ml，用去离子水补足至1L。 5．重氮试剂 临用前取上述亚硝酸钠溶液0.5ml和对氨基苯磺酸溶 液20ml，混匀即成。 6．5.0g/L叠氮钠溶液。
改良J-G法测定血清总胆红素和结合胆红素
【操作步骤】
混匀后，波长600nm，对照管调零，读取吸光度， 在标准曲线上查出相应的胆红素浓度。 6
改良J-G法测定血清总胆红素和结合胆红素
标准曲线制作
混匀(不可产生气泡)，按总胆红素测定法操作。 每一浓度作3个平行管，并分别做标准对照管，用各自 的标准对照管调零，读取标准管的吸光度。配制标准 液用的溶剂血清中尚有少量胆红素，同样测定后得一 吸光度值。每个标准管的吸光度值均应减去此吸光度， 7 然后与相应胆红素浓度绘制标准曲线
【注意事项】 1．BOD浓度的选择 文献报道BOD在反应液中 终浓度为0.18～1.14U/ml。国内有些厂家 的试剂盒，BOD在反应液中终浓度按标示值 计算很高，但反应速度很慢。 2.选择BOD浓度时，可根据所用制品在测定高 胆红素血清标本或342μmol/L标准液的反 应速度，即能否在5min反应完全而确定。 由于测定结合胆红素时反应液pH偏离BOD的 最适范围，因此要求BOD有较高的浓度，一 般使反应液中终浓度不低于0.5U/ml。
4．本法灵敏度高，且可避免其它有色物质的干扰，是测定 血清总胆红素的参考方法，但不能自动化分析是其缺点。 现有些商品试剂盒称咖啡因法或J-G法，但不加碱性酒石 酸，即不在碱性条件下显色，其灵敏度和特异性不如上述 方法。
13
胆红素氧化酶法测定总胆红素和结合胆红素
【原理】 胆红素呈黄色，在450nm附近有最大吸收峰。胆红素氧 化酶(BOD)催化胆红素氧化，随着胆红素被氧化， A450nm下降，下降程度与胆红素被氧化的量相关。在 pH8.0条件下，未结合胆红素及结合胆红素均被氧化， 因而检测450nm吸光度的下降值可反映总胆红素含量； 加入SDS及胆酸钠等阴离子表面活性剂可促进其氧化。 在pH3.7～4.5缓冲液中，BOD催化单葡萄糖醛酸胆红素 (mBc)、双葡萄糖醛酸胆红素(dBc)及大部分δ胆红素 氧化，非结合胆红素(Bu)在此pH条件下不被氧化。用 配制于人血清中的二牛磺酸胆红素(ditaurobilirubin， DTB)作标准品，检测此条件下450nm吸光度的下降值可 反映结合胆红素的含量。
19
胆红素氧化酶法测定总胆红素和结合胆红素
【注意事项】 3．Hb在1.0g/L以下时，对结果影响不大。每升血清中分别 加入维生素C 0.1g、半胱氨酸0.5g、谷胱苷肽0.5g、尿素 0.5g、尿酸0.5g、葡萄糖10g、乙碘醋酸1g、白蛋白40g对 总胆红素及结合胆红素测定几乎无干扰。每升血清中加L多巴0.15g、α-甲基多巴0.15g使结果偏低约10%。 4．BOD的最适pH 在pH7.3～9.0之间酶活性的pH曲线变化幅 度不大，但最适pH为8.0～8.2。但在测定结合胆红素时， 为防止Bu反应，选择pH为4.5，这时样本中mBc、dBc及大 部分δ胆红素被氧化；pH低于4.0时，血清样本易发生混 浊，严重干扰测定结果；郭健等报道，用枸橼酸盐、磷酸 盐、硼酸盐和碳酸盐缓冲液比较时，枸橼酸盐缓冲液 (0.1mol/L，pH5.0)效果最好。
10
改良J-G法测定血清总胆红素和结合胆红素
【注意事项】
5．标本对照管的吸光度一般很接近，若遇标本量很少时 可不作标本对照管，参照其他标本对照管的吸光度。 6．胆红素大于342μmol/L的标本可减少标本用量，或用 0.154mmol/L NaCl溶液稀释血清后重测。 7．结合胆红素测定在临床上应用很广，但至今无候选参 考方法，国内也无推荐方法。方法不同，反应时间不 同，结果相差很大。时间短、非结合胆红素参与反应 少，结合胆红素反应也不完全；时间长，结合胆红素 反应较完全，但一部分非结合胆红素也参与反应。这 是一个很难权衡的问题。在没有结合胆红素标准液的 情况下，问题更复杂。
9
改良J-G法测定血清总胆红素和结合胆红素
【注意事项】
1．胆红素对光敏感，标准液及标本均应尽量避光保存。 2．轻度溶血对本法无影响，但严重溶血时可使测定结果 偏低。其原因是血红蛋白与重氮试剂反应形成的产物 可破坏偶氮胆红素，还可被亚硝酸氧化为高铁血红蛋 白而干扰吸光度测定。血脂及脂溶色素对测定有干扰， 应尽量取空腹血。 3．叠氮钠能破坏重氮试剂，终止偶氮反应。凡用叠氮钠 作防腐剂的质控血清，可引起偶氮反应不完全，甚至 不呈色。 4．本法测定血清总胆红素，在10～37℃条件下不受温度 变化的影响。呈色在2h内非常稳定。
改良J-G法测定血清总胆红素和结合胆红素H
【评价】
3．重氮反应法测定胆红素，也可用甲醇(M-E法)或二甲亚砜 等作加速剂，可做成单一试剂，反应pH和显色pH都在酸性， 560nm波长比色，易于自动化。但灵敏度比改良J-G法略低， M-E法摩尔吸光系数为60 500，Hb干扰较明显，Hb＞1g/L 时，需用样品空白校正。
胆红素氧化酶法测定总胆红素和结合胆红素
【计算】 血清总胆红素(μmol/L)＝
×C总胆红素
血清结合胆红素(μmol/L)＝ ×CDTB 【参考范围】 与重氮法相似， 总胆红素为10.26±4.10μmol/L(n=97)， 结合胆红素为2.57±2.56μmol/L(n=95)。
18
பைடு நூலகம்
胆红素氧化酶法测定总胆红素和结合胆红素
8
改良J-G法测定血清总胆红素和结合胆红素 【临床意义】 2．血清结合胆红素测定的意义 结合胆红素 与总胆红素的比值可用于鉴别黄疸类型。 • (1) 比值＜20% 溶血性黄疸，阵发性血红 蛋白尿，恶性贫血，红细胞增多症等。 • (2) 比值40%～60% 肝细胞性黄疸。 • (3) 比值＞60% 阻塞性黄疸。 • 但以上几类黄疸，尤其是(2)、(3)类之间 有重叠。
15
胆红素氧化酶法测定总胆红素和结合胆红素
【操作步骤】 总胆红素和结合胆红素测定分别按表
16
胆红素氧化酶法测定总胆红素和结合胆红素
加入BOD工作液后立即混匀，置37C水浴5min，用 分光光度计，在450nm波长，去离子水调零，读取各 管吸光度(A)。用于对照管的比色杯与非对照管的比 色杯不得混用。 17
11
改良J-G法测定血清总胆红素和结合胆红素H
【评价】 1．灵敏度和线性范围 本法摩尔吸光系数为74 380，标本 中胆红素17.1mol/L时吸光度约0.08(血清用量已达0.2m1)， 正常血清总胆红素多数小于17.1mol/L，手工法测定显得 灵敏度很不够。在病理血清结合胆红素增高在 17.1μmol/L以下时，灵敏度同样不够。线性上限虽可做 到1.7吸光度，但手工法在胆红素超过171μmol/L时，吸 光度已达0.8，应减量操作。分析仪检测灵敏度高得多， 最低吸光度可测至0.02，线性上限可达342μmol/L；但本 法需3次加试剂，一般无法在全自动生化分析仪中使用。 2．精密度 正常浓度时精密度较差，特别是批间CV，据报 道为14%～20%；而胆红素342μmol/L时，精密度佳，批内 CV为0.95%，批间CV5%～10%。 12
4
改良J-G法测定血清总胆红素和结合胆红素 【试剂】
7．胆红素标准液 • (1) 目前一般用游非结合胆红素配制标准液，此标准品须 用含白蛋白的溶剂配制，常用人混合血清，对此血清的要求如下： • 收集无溶血、无黄疽、无脂浊的新鲜血清，混合，必要时 可用滤菌器过滤。取过滤后的血清1ml，加入新鲜0.154mmol/L NaCl溶液24ml，混合。在414nm波长，1cm光径，以0.154mmol/L NaCl溶液调零点，其吸光度应小于0.100；在460nm的吸光度应小 于0.04。 • (2) 配制标准液的胆红素须符合下列标准：纯胆红素的氯仿溶液， 在25℃条件下，光径1.000±0.001cm，波长453nm，摩尔吸光系 数应在60 700±1 600范围内；改良J-G法偶氮胆红素的摩尔吸光 系数应在74 380±866。 • (3) 胆红素标准贮存液(171μmol/L) 准确称取符合要求的胆红 素10mg，加入二甲亚砜1ml，用玻璃棒搅拌，使成混悬液。加入 0.05mol/L碳酸钠溶液2ml，使胆红素完全溶解后，移入100ml容 量瓶中，以稀释用血清洗涤数次并入容量瓶中，缓慢加入 0.1mol/L盐酸2ml，边加边摇(勿用力摇动，以免产生气泡)。最 后以稀释用血清定容。配制过程中应尽量避光，贮存容器用黑纸 包裹，置4℃冰箱3d内有效，但要求配后尽快作标准曲线。 5