大鼠脂肪肝 文档
脂肪肝模型动物及建立方法汇总
1.中药药理与临床2007标题：大鼠高血脂及脂肪肝模型的建立（本实验选用高脂饲料诱导大鼠高血脂、脂肪肝，为预防脂肪肝药物的筛选提供实验模型。
）目的：建立大鼠高血脂及脂肪肝模型。
方法：SD大鼠随机分为2组，分别接受正常饲料、高脂饲料，连续3周，测定大鼠血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL—C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL—C)、极低密度脂蛋白(VLDL—C)。
1．1动物：SD大鼠，SPF级，20只，雌雄各半，体重180—220g, 实验动物质量合格证明号：2006A1．2高脂饲料：高脂饲料由猪油(12％自制)、胆固醇(2％)、丙硫氧嘧啶(0.2％)、3号胆盐(0.5％)、普通混合饲料粉(85.3％)组成，将以上各物先人工充分混匀，再经搅拌，压成圆条状颗粒，真空包装后，经”co辐照消毒备用，由南方医科大学实验动物中心制作。
1．3方法：将大鼠随机分为正常对照组(10只)、高脂模型组(10只)，雌雄各半。
正常对照组投喂普通颗粒饲料，高脂模型组以高脂饲料替代普通饲料投喂，平均每天每只约20克左右。
动物造模3周，实验结束前1天晚上禁食，不禁水，次日上午麻醉后，腹主动脉采血，分离血清，送南方医科大学附属南方医院医学检验中心检测血脂五项。
取肝脏，称肝湿重，计算肝指数，并在肝右叶离边缘1cm处，横切一块肝组织用10％中性福尔马林固定，常规脱水，HE染色。
讨论：本文用高脂饲料成功地复制了大鼠高脂血症及脂肪肝模型，严重的肝细胞的变性可导致部分动物出现不同程度的肝细胞坏死。
高脂模型组大鼠肝脏体积增大，重量增加，质软切面油腻为奶黄色。
高脂模型组大鼠血清TG、TC、LDL—c、VLD含量都非常显著升高。
对于HDL—c所占Tc的百分率，正常对照组非常显著高于高脂模型组，虽然高脂模型组HDL —C含量明显高于正常对照组，但由于正常对照组TC含量远远低于模型对照组，故HDL —C含量必然低于模型对照组。
大鼠酒精性脂肪肝模型的建立
ｃｕ ｉ ｎ Ａｌｏ ｏｉ ａｔ ｉｅ ｄ ｌｉ ａ ｓｓ ｃ ｅ ｓｕｌ ｓ ｂ ｉｈ ｄ ｂ ｃ ｈ ｌｇ ｒ ｇ ｎ ｉｈ ｆ ｔ ｉｔ ｌ ｓｏ ｃ ｈ ｌ ｆ ｔ ｌ ｒｍｏ ｅ ｎ ｒ ｔ ｃ ｙ ｖ ｗａ ｕ ｃ ｓ ｆ ｌ ｅ ｔ ｌ ｅ ｙ ａ ｏ ｏ ａ ａ ｅ ａ ｄ ｈ ｇ ａ ｅ ． ｙ ａ ｓ ｌ ｄ
ｈ ｍｏ ｅ ａ ｅ ｅ ｅ ｍｅ ｕ ｅ ｙ ｓ ｅ ｔ ｐ ｏｏ ｔ ． ｈ Ｇ ｏ ｔ ｎ ｎ ｌ ｅ ｓｕ ａ ｅｅ ｍｉ ｅ ｙ ｓ ｅ ｔ ｐ ｏｏ ｔ ． ｓ ｌ Ａｔｔ ｅ ｏ ｇ ｎ ｔ ｓｗ ｒ ａ ｒ ｄ ｂ ｐ ｃｒ ｈ ｔｍｅ ｒ Ｔ ｅ Ｔ ｃ ｎ ｅ ｔ ｉ ｒｔ ｓ ｅ ｗ ｓ ｄ ｔｒ ｎ ｄ ｂ ｐ ｃ ｒ ｈ ｔｍｅｒ Ｒｅ ｕ ｔ ｓ ｏ ｙ ｉ ｖ ｉ ｏ ｙ ｓ ｈ
１ １ 药 物与试 剂 乙醇 （ ． 分析 纯 ）购 自上海 中试 化工 总公 司， 以蒸馏水 配制成 实验 所需 的浓度 。丙 二醛 （ Ｄ 、 Ｍ Ａ） 超氧 化物歧化酶 （ Ｏ ） 谷胱甘肽过氧化物 酶（ Ｐ ） 考 马斯亮蓝 ＳＤ 、 Ｇｘ 、 蛋 白测定试剂盒 以及组 织甘 油三酯 （ Ｇ） 测试 剂盒购 自南 Ｔ 检
安 徽 医 药
Ａ ｈ ｉ ｄｃｌ ｎ ｈｒ ａｅｔａ ｏｒａ ２ １ ｕ；６ ７ ｎ ｕ Ｍｅ ｉ ｄＰ ａｍ ｃｕｉ ｌ ｕｎｌ ０２Ｊｌ１ （ ） ａａ ｃ Ｊ
‘８ ８ ５・
◇药 学研 究 ◇
大 鼠酒精性脂肪肝模型的建立
张 伟， 洪汝 涛 ， 田图磊
２０ ２ ） ３０ ２ （ 安徽 医科 大学第一附属 医院消化 内科 ， 安徽 省消化疾病重点 实验 室， 安徽 合肥
级 （＞ ５ 肝 细 胞 脂 肪 变 ） ７％ 。
复方中药防治大鼠脂肪肝的实验研究
复方中药防治大鼠脂肪肝的实验研究
苗宇船;李瑞华
【期刊名称】《山西中医学院学报》
【年(卷),期】2003(4)2
【摘要】目的:观察复方中药对复合因素诱发的脂肪肝动物模型的影响.方法:24只Wistar大鼠随机分为3组:正常对照组(n=8)基础饲料喂养;模型组(n=8)高脂饲料喂养;复方中药组(n=8)在高脂饲料喂养的基础上予复方中药煎剂灌胃.观察一般情况及血清肝功能、血脂,并行病理学检查.结果:与模型组相比,复方中药组的肝指数,血清甘油三酯、高密度脂蛋白及谷丙转氨酶均有明显改善,差异有统计学意义;血胆固醇、低密度脂蛋白均呈下降趋势.病理学检查表明肝脏脂肪变性有改善.结论:复方中药可以通过改善实验大鼠体内脂质代谢达到防治脂肪肝的目的.
【总页数】3页(P15-17)
【作者】苗宇船;李瑞华
【作者单位】山西中医学院,山西,太原,030024;太原市卫生学校,山西,太原,030012【正文语种】中文
【中图分类】R285.5
【相关文献】
1.单味中药防治非酒精性脂肪肝的实验研究进展与展望 [J], 何道同;王兵;陈珺明
2.复方首乌降脂通脉颗粒防治大鼠高脂血症和脂肪肝的实验研究 [J], 陈家英;陈姝;梅胜尧;段晓波;滕德义
3.三种中药复方防治实验性大鼠脂肪肝的实验研究 [J], 阎小燕;刘春光;王厚花
4.中药复方脂复康防治大鼠脂肪肝的实验研究 [J], 赵会茹;邹杰
5.中药防治脂肪肝实验研究进展 [J], 苏菁;徐宗佩
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大鼠非酒精性脂肪肝模型的建立
大鼠非酒精性脂肪肝模型的建立杨威;徐闯;陈媛媛;郑家三;张洪友;夏成【摘要】利用不同高脂饲料配方建立大鼠非酒精性脂肪肝病(NAFLD)模型,为非酒精性脂肪肝的研究提供参考依据.大鼠饲喂单纯高脂饲料以及分别含有去氧胆酸、丙基硫氧嘧啶的高脂高胆固醇饲料,经6周的实验周期.结果显示,单纯饲喂高脂饲料大鼠(H6)呈现出显著的体重增加以及肝脏脂肪浸润.饲喂添加去氧胆酸盐的高脂饲料后大鼠肝脏胆固醇水平显著降低,但血液丙氨酸转氨酶(ALT)和丙氨酸转氨酶(AST)水平显著高于H6大鼠.丙基硫氧嘧啶介导甲状腺机能减退脂肪肝模型(HP6)组大鼠呈现前期体重生长缓慢后期的体重减轻且高的血清甘油三酯(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)、ALT.四环素刺激下的甲状腺机能减退大鼠(HPT6)呈现严重肝脏病变以及低下肝脏脂肪蓄积和高水平的血清ALT.表明HP6大鼠存在进行性非酒精性脂肪肝的发生.而在四环素刺激下,甲状腺机能减退大鼠存在进行性肝纤维化以及肝脏疾病晚期的可能.为非酒精性脂肪肝研究提供了有力的基础数据.【期刊名称】《黑龙江八一农垦大学学报》【年(卷),期】2017(029)003【总页数】5页(P15-19)【关键词】高脂饮食;非酒精性脂肪肝;丙硫氧嘧啶;去氧胆酸盐;盐酸四环素【作者】杨威;徐闯;陈媛媛;郑家三;张洪友;夏成【作者单位】黑龙江八一农垦大学动物科技学院,大庆 163319;黑龙江八一农垦大学动物科技学院,大庆 163319;黑龙江八一农垦大学动物科技学院,大庆 163319;黑龙江八一农垦大学动物科技学院,大庆 163319;黑龙江八一农垦大学动物科技学院,大庆 163319;黑龙江八一农垦大学动物科技学院,大庆 163319【正文语种】中文【中图分类】S856.4近年来，人类脂肪肝的发病呈不断上升趋势，对人类的健康和生活质量造成严重威胁。
非酒精性脂肪肝病作为最常见的肝脏疾病之一，根据其严重程度不同可从简单的肝脏脂肪沉积到非酒精性脂肪肝炎，最后可发展为肝脏纤维以及肝硬化和肝细胞癌[1-2]。
大鼠脂肪肝模型复制试验
ｃ ｍ。 组织置 于 甲醛 溶 液 固定 用 于 病 理 组织 学 检 查 ，
常规 石蜡 切 片 ， Ｈ＿ Ｅ ． 染 色 。试 验 数 据 分 析 处 理 采 用 Ｓ Ｐ Ｓ Ｓ软 件 。
２ 试 验 结 果
２ ． １ 肝 脏 组 织 病 理 形 态 变 化 见 后 插 彩 版
图 １ ～６ 。
限公 司 ； 离 心机 Ｄ Ｉ 一 １ ０型 ， 上海 安 亭仪 器 有 限公 司 ； 普 通光 学 显 微 镜 ＸＳ Ｐ 一 ４ Ｃ型， 上 海 兴行 实 业 有 限 公 司显微 镜 器 制 造 部 ； Ｓ ＹＤ ２ Ｏ ０ １ 一 Ⅱ转 轮 式 石 蜡 切 片
机， 北 京兰泰 科技 有 限责任 公 司。药 品及试 剂 ： 谷 丙 转氨 酶 （ ＡＩ Ｔ） 、 谷草转 氨酶 （ ＡＳ Ｔ） 、 胆 碱 酯 酶 （ ＣＨＥ） 、 甘油 三酯 （ ＴＧ） 、 总蛋 白（ ＴＰ ） 、白 蛋 白
肪 性肝 病 的基础 ， 必须 有一 个可 重复 、 较 稳 定 且 简 便 易 行 的 动 物 模 型 。关 于 脂 肪 肝 动 物 模 型 的 建 立 ， 文
１ ． ２ 试 验 方 法 取 体 重 １ ８ ０ ±１ ０ ｇ Ｓ Ｄ 大鼠 １ ｌ ０
只， 雌雄 各半 ， 随 机 分 为 对 照 组 和 模 型 组 ２组 ， 每 组
四 环 素 的 方 法 复 制 大 鼠 脂 肪 肝 模 型 获 得 了 理 想 的 结
５ 、 奶粉 ５ 、 蛋 黄粉 ５ 、 胆 固醇 １ ， 制 成 颗 粒 饲 喂ｌ ２ ］ ） ， 并 于 造 模 第 １天 大 鼠 腹 腔 注 射 盐 酸 四 环 素
果， 研究 结果 报告 如下 。
２ ８
中 国 兽 医杂 志 ２ ０ １ ０年 （ 第 ４ ６卷 ） 第 １ 期
大鼠非酒精性脂肪肝模型的建立
摘Hale Waihona Puke 要： 利用不同高脂饲料配方建立大 鼠非酒精性脂肪肝病（ Ｎ Ａ Ｆ Ｌ Ｄ） 模型 ， 为非酒精性脂肪肝 的研究提供参考依据 。大 鼠饲喂
单纯高脂饲料以及分别含有去氧胆酸、 丙基硫 氧嘧啶的高脂 高胆 固醇饲料 ， 经６ 周 的实验周期。 结果显示 ， 单纯饲喂高脂饲料大 鼠（ Ｈ ６ ） 呈现出显著的体重增加 以及 肝脏脂肪浸润。 饲 喂添加去氧胆酸盐 的高脂饲料后大 鼠肝脏胆固醇水平显著 降低 ， 但血液丙 氨酸转氨酶（ Ａ Ｌ Ｔ ） 和丙氨酸转氨酶（ Ａ Ｓ Ｔ ） 水平显著高于 Ｈ ６大 鼠。丙基硫氧嘧啶介导 甲状腺机能减退脂肪肝 模型（ Ｈ Ｐ ６ ） 组大 鼠
肝 的发生。而在 四环素刺激下 ， 甲状腺机 能减退大 鼠存 在进行性肝纤维化 以及肝脏疾病晚期 的可能。为非酒精性脂肪肝研究提
供 了有力的基础数据 。
关键词 ： 高脂饮食 ； 非酒精性脂肪肝 ； 丙硫氧 嘧啶 ； 去氧胆酸盐 ； 盐酸四环素
中图分类号 ： ￥ ８ ５ ６ ． ４ 文献标识码 ： Ａ 文章 编号 ： １ ０ ０ ２ — ２ ０ ９ ０ （ ２ ０ １ ７ ） ０ ３ — ０ ０ １ ５ — ０ ５
呈现前期体 重生长缓慢后期的体重减轻且高的血清甘油三酯（ Ｔ Ｃ ） 、 低密度脂蛋 白胆 固醇（ Ｌ Ｄ Ｌ — ｃ ） 、 Ａ Ｌ Ｔ 。 四环素刺激下的 甲状腺 机能减退大鼠（ Ｈ Ｐ Ｔ ６ ） 呈现严重肝脏病变以及 低下肝脏脂肪蓄积 和高水平的血清 Ａ Ｌ Ｔ 。 表明 Ｈ Ｐ ６大鼠存在进行性非酒精性脂肪
ｔ ｈ ｉ ｓ ｓ ｔ ｕ ｄ ｙ ． ｗ ｉ ｓ ｔ ａ ｒ ｒ ａ ｔ ｓ ｗ ｅ ｒ ｅ ｆ ｅ ｄ ｗ ｉ ｔ ｈ ｈ ｉ ｇ ｈ — ｆ ａ ｔ ｄ ｉ ｅ ｔ ｓ（ ｗ ｉ ｔ ｈ ｏ ｒ ｗ ｉ ｔ ｈ ｏ ｕ ｔ ｄ ｅ ｏ ｘ ｙ ｃ ｈ ｏ ｌ ｉ ｃ ａ ｃ ｉ ｄ ｏ ｒ ｐ ｒ ｏ ｐ ｙ ｈ ｈ ｉ ｏ ｕ ｒ ａ ｃ ｉ ｌ ） ｆ ｏ ｒ ６ ｗ ｅ ｅ ｋ ｓ ． Ｏ ｕ ｒ ｒ ｅ ｓ ｕ ｌ ｔ ｓ ｓ ｈ ｏ ｗ ｅ ｄ ｔ ｈ ａ ｔ ｒ ａ ｔ ｓ ｅｄ ｆ ａ ｈ ｉ ｇ ｈ — ｆ ａ ｔ ｄ ｉ ｅ ｔ （ Ｈ６ ） ｇ ａ ｉ ｎ ｅ ｄ ａ ｓ ｉ ｇ ｎ ｉ ｆ ｉ ｃ ａ ｎ ｔ ａ ｍｏ ｕ ｎ ｔ ｏ ｆ ｗ ｅ ｉ ｇ ｈ ｔ ａ ｎ ｄ ｓ ｅ ｖ ｅ ｒ ｅ ｓ ｔ ｅ ａ ｔ ｏ ｓ ｉ ｓ ． Ｃ ｏ ｍ ｐ ａ ｒ ｅ ｄ ｗ ｉ ｔ ｈ Ｈ ６ ｒ ａ ｔ ｓ ， ｒ ａ ｔ ｓ ｗ ｈ ｉ ｃ ｈ
大鼠非酒精性脂肪肝病程中细胞色素P450酶的分析
中 图分 类 号
文献 标 志 码 Ａ 文 章 编 号 １ ０ ０ ０—１ ４ ９ ２ （ ２ ０ １ ５ ） １ ０—１ ３ ８ ５— ０ ５
２ ０ １ ５— ０ ５— ０ ８接 收
基金项 目： 安 徽 省 高等 学 校 省 级 自然 科 学 研 究 重 点项 目（ 编号 ：
余
摘要 目的
庆， 许
曼， 赵倩 茹 ， 林元 节 ，陈
伟， 金
涌
探讨 ４种 主要 的细胞 色素 Ｐ ４ ５ ０酶在 非酒精性 建立 大 鼠
非 酒精 性 脂 肪 肝 （ ｎ ｏ ｎ—ａ ｌ ｃ ｏ ｈ ｏ ｌ ｉ ｃ ｆ ａ ｔ ｔ ｙ ｌ ｉ ｖ ｅ ｒ ｄ ｉ ｓ － ｅ ａ ｓ ｅ ， Ｎ Ａ Ｆ Ｌ Ｄ） 是 一种并 非 由于过度 饮酒 、 自身 免 疫、 药 物感染 等 因 素所 导 致 的一 种 以弥 漫 大 泡 性脂 肪 为 主要 特征 的 临床病理 综合 征 。其包 括 良性 的肝 脏 脂肪 变性 、 由其演 变 的非 酒 精 性脂 肪 性 肝 炎 和 肝
Ｔ Ｇ的水平则 在重度脂 肪肝时期 之前上 升 ， 而后显著 下降 （ Ｐ
＜ ０ ． ０ １ ） 。Ｃ Ｙ Ｐ １ Ａ ２和 Ｃ Ｙ Ｐ ２ Ｄ ６的表达 水平在 发病 进程 中总 体呈下 降趋 势， Ｃ Ｙ Ｐ ３ Ａ １虽 总 体 下 调 ， 但 幅 度 不 大， 而 Ｃ Ｙ Ｐ ２ Ｅ １的表 达 水 平 则 明 显 上 升 （ Ｐ＜０ ． ０ １ ） 。结 论 在
安徽 医科 大学学报
Ａ ｃ ｔ ａ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ａ ｔ ｉ ｓ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ｉ ｎ ａ ｌ ｉ ｓ Ａ ｎ ｈ ｕ ｉ ２ ０ １ ５ Ｏ ｃ ｔ ； ５ ０ （ １ ０ ）
祛肝脂合剂对脂肪肝模型大鼠的保护作用研究
Ｋ ｙｗ ｒｓ ｕ ａＺ ｉｅｉＦｔ ｉ ｒＲ ｔ；ｒｔｃｉ ｆ ｃ ｅ ｏｄ Ｑ Ｇ ｎ ｈＨ Ｊ；ａｔ Ｌｖ ； ａｓＰｏ ｔ ｅＥｆ ｔ ｙ ｅ ｅ ｖ ｅ
关键 词 祛 肝 脂 合 剂 ； 肪 肝 ； 鼠 ； 护 作 用 脂 大 保
中 图分 类 号 Ｒ ８ ． ２ ５５
文献 标 识 码 Ａ
文章 编 号 １ ０ — ６ ９ ２ ０ ） － ６ ７ ０ ０ ０ ２ ６ （０ ８ ６ ０ １ － ３
Ｓ ＵＤＹ ＯＮ ＲｏＴ Ｔ Ｅ Ｅ Ｆ Ｔ Ｐ ＥＣ Ⅳ Ｆ ＥＣＴ ｏＦ ＱＵＧＡＮＺ ＨＥ ＩｏＮ ＨＩ Ｊ
祛 肝 脂 合 剂 （ｕ ａ ｚｉ ｅｉＱ Ｚ Ｊ由 大 黄 、 Ｑ Ｇ ｎｈＨ Ｊ， Ｇ Ｈ ） 山 豆根 、 山楂 、 杞 等组 成 ， 有 清 热 解毒 、 枸 具 散瘀 行 气 、 消食 健 胃的功效 ， 临床 用 于 各 型脂 肪 肝 ， 高脂 血 症 。
ｉ ａ ｓ ａ ｄ ｉ ｃ ａ ｉｍ． ｅ ｈ ｄ ： ｄ ｌ ｆｆｔ ｉｅ ｒ ｅ ｐ ｂ ｅ ｄ ｎ ｉｈ ｆｔｄ ｅ ｏ ２ ． ｔ ｒａ － ｎ ｒ ｔ ｎ ｔ ｍｅ ｈ ｎ ｓ Ｍ ｔ ｏ ｓ Ｍｏ ｅｓ ｏ ａ ｔ ｌ ｒｗｅ ｅ ｓ ｔｕ ｙ ｆ ｅ ｉ ｇ ｈ ｇ ａ ｉ ｔｆ ｒ １ Ｗ Ａｆ ｄ ｓ ｙ ｖ ｅ
制。结果 ： 祛肝脂合剂能改 善肝脏功 能指标 ， 减轻脂肪肝大 鼠脂肪变性程度 ， 增强机体的抗氧化作用 ， 与模 型组 比较有显著性差
异 “＜ ．５。结 论 ： 肝 脂 合 剂 对 脂 肪肝 模 型 大 鼠具 有 保 护 作 用 ， 氧 化 可 能 是 其 作 用机 理 之 一 。 ）Ｏ ） ０ 祛 抗
脂肪肝大鼠模型建立的研究进展
* 基金项目：2019 年全国大学生创新创业项目（项目编号：S201910780149）。
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综述与进展
脂肪肝大鼠模型建立的研究进展 *
汪雪，杨洋，古恒莹，陶浪，王承杰，佘俊萍 （西南医科大学，四川泸州 646000）
摘要：非酒精性和酒精性脂肪性肝病的发病率逐年升高，其发病机制尚未完全明确，而大鼠模型对进一步阐明脂肪肝的发病机理及临床诊断 具有重要意义。本文综述了建立非酒精性和酒精性脂肪肝大鼠模型的最新研究进展，内容涉及基本机制、造模方法、物理、生化、组织学表 型改变和各种模型的优缺点，为脂肪肝的深入研究和治疗方案提供参考。 关键词：脂肪肝；非酒精性；酒精性；大鼠模型
导致体重减轻，所以该模型主要用于研究 NAFLD 治疗药物 的效用。
1.2 有毒化学物质诱发脂肪肝模型 四氯化碳（CCl4）是一种肝毒性物质，通过影响细胞色
素对 CCl3 自由基的代谢形成诱发氧化应激，导致脂质代谢等 关键细胞坏死，破坏肝细胞的结构和功能，加快肝脂肪变性 的进程 [9]。Wistar 大鼠连续 10 d 腹腔注射 2 ml/kg 的 CCl4 与 橄榄油 1:1 混合液，血清 ALT、AST 活性升高，明显伴肝组 织弥漫性脂肪变性 [10]。雄性 SD 大鼠连续 6 周（每周 2 次） 皮下注射 40% CCl4 橄榄油混合液（2 ml/kg），ALT、AST 显 著升高，伴肝细胞脂肪变性和炎细胞浸润 [11]。这种模型的优 点是不仅可以缩短实验周期，同时诱导严重的脂变、肝纤维 化和炎症，还可以与其他方法共同构建模型，但其病程和发 病机制与人类 NAFLD 差异较大，由于药物毒性作用，大鼠 死亡率较高。
常用的为果糖、蔗糖。果糖和蔗糖摄入增加会促进非脂 化脂肪酸（NEFA）和乙酰辅酶 A 产生并引起高胰岛素血症， 导致 TG 酯化和合成增加，脂肪输出和氧化减少，因此长期 大量摄入将导致脂肪变性，肝脏血脂异常 [4]。将浓度为 30% 的果糖饮用水喂食大鼠 8 周后，大鼠体重增加，但所有大鼠 均无坏死性炎症和门脉纤维化 [5]。喂食大鼠高脂高糖饲料 12 周，肝脏出现大量脂肪沉积 [6]。这种模型方法简单，成本低， 但实验周期较长，且所造成的的肝细胞脂肪变较轻，血清指 标变化不明显，难以造成肝组织炎症反应和纤维化。 1.1.3 蛋氨酸和胆碱缺乏剂
大鼠非酒精性脂肪肝中UCP2动态表达研究
大鼠非酒精性脂肪肝中UCP2动态表达研究目的探讨大鼠非酒精性脂肪肝中UCP2的动态表达，进一步明确其在非酒精性脂肪肝中的发病机制。
方法选取大鼠60只进行实验，按照随机分组原则划分为观察组和对照组，观察组采用高脂饮食进行脂肪肝诱导，采用免疫组织学技术和Western blot技术对大鼠肝组织中的UCP2进行检测，对大鼠的血清甘油三脂（TG）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）和游离脂肪酸（FFA）含量进行检测。
结果大鼠在形成非酒精性脂肪肝过程中，体内UCP2阳性细胞的含量以及TG、ALT、FAA的表达和含量都会显著增加，在高脂饮食诱导8～12周期间最为明显。
结论大鼠非酒精性脂肪肝的形成与发展程度与体内UCP2表达强度呈正比例关系，UCP2的酶活性增高会导致促进脂质过氧化反应，促进脂肪肝的形成。
标签：非酒精性脂肪肝；UCP2；动态表达非酒精性脂肪肝，是一种无过度饮酒史，由于肝细胞内脂肪存积或变性所导致的临床病理综合征。
近年来，随着人们生活水平的不断提高，对高脂肪类食物的摄入增多，非酒精性脂肪肝的发病几率也呈现出逐年上升的趋势，并最终发展成为终末期肝病或肝硬化，对患者健康和生活造成严重影响，且当前仍没有有效的治疗药物[1]。
解耦联蛋白2（UCP2）是一种位于线粒体内膜上的载体蛋白，具有解偶联的作用，可以发挥脂质调节的作用，但当UCP2的表达增加时，却同时对机体产生不良的作用，在非酒精性脂肪肝的形成发展过程中具有重要的调节作用[2]。
为了探讨两者之间的关系，本研究选取大鼠建立非酒精性脂肪肝模型实验，对UCP2的动态表达变化进行研究，现报道如下。
1 资料与方法1.1 一般资料选取本医院动物中心的成年、雄性大鼠60只进行研究（合格证号：1003046），体重150～200g，首先全部采用普通饲料喂养1周。
按照随机分组原则将60只大鼠划分为观察组和对照组各30只。
观察组大鼠采用88%基础饲料加10%猪油加2%胆固醇，自由进食和饮水；对照组采用普通饲料进行饲养，两组患者均以12周为1个周期进行饲养[3]。
中药LN对复合方式所致大鼠脂肪肝的药效学研究
中药 LN 对复合方式所致大鼠脂肪肝的药效学研究
陈小睿，曾瑾，李佳川，孟宪丽*，叶娉
成都中医药大学药理研究室，成都 ( 610000)
E-mail：aphroragabriel@
摘 要：目的 研究中药LN胶囊对大鼠脂肪肝的防治作用及其机制。方法 用复合方式建立 大鼠脂肪肝模型，实验时间15天后，通过肉眼、血液生化、病理学检查等检测，观察中药 LN胶囊对脂肪肝大鼠的一般情况、肝脏指数、肝脏病理改变、多项生化指标等的影响。结 果 中药LN胶囊能降低脂肪肝大鼠的肝脏指数；明显改善脂肪肝大鼠的肝脏病理情况，减轻 肝脏的脂肪变性；降低脂肪肝大鼠血清和肝组织中TG水平；降低脂肪肝大鼠血清中LDL水 平、升高血清中HDL水平；增加血清和肝组织中SOD活力；降低脂肪肝大鼠血清中AST的活 性。结论 中药LN胶囊有显著的防治大鼠脂肪肝形成的作用。其作用机制为降低血清、肝组 织中的脂肪含量；清除机体自由基，增强抗氧化能力，调节和改善自由基代谢等。 关键词：中药LN胶囊；水飞蓟素黄酮；高脂饮食；四氯化碳；乙醇；脂肪肝
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1.4 仪器
722S 型分光光度计（上海棱光技术有限公司）、酶标仪（multiscan MK3 MODEL No. 353 Serial No. 3530904326）、DY89-Ⅱ型电动玻璃匀浆机（浙江宁波新芝科器研究所）。
1.5 方法
参照文献[3]将大鼠适应性饲养 1 周后，随机分为 6 组：空白对照组，模型对照组，东宝 肝泰片对照组（阳性对照组），中药 LN 胶囊高、中、低剂量组，每组 10 只。空白对照组给 予标准颗粒饲料喂养，其他各组给予由 79.5％纯玉米粉、20％猪油、0.5％胆固醇的高脂、 高胆固醇饲料喂养。除空白对照组外，其余各组在实验第 1 天按 0.5ml／l00g，之后每周 2 次隔 4 天均按 0.3ml／l00g 在大鼠后肢皮下注射 40％ CCl4 菜籽油溶液，期间每天按 1ml ／100g 给予 30％乙醇灌胃，治疗组于灌胃后 2h 灌服阳性药和中药 LN 高、中、低剂量 lml ／l00g，（阳性药和中药 LN 组溶液均用 0.5%的羧甲基纤维素钠混悬液配制），空白对照组以 等容积 0.9％氯化钠溶液注射于相同部位，并灌服等容积 0.5%的羧甲基纤维素钠混悬液。实 验时间为 15 天。末次给药后大鼠禁食 16 小时，于第 15 天末先称动物体重，股动脉放血， 低温条件下处死动物，接取血液，离心后得血清，-30℃低温保存。摘取肝脏并称重，观察 大体外观后，每只取肝左叶 2 块分别放于 10%中性甲醛溶液，待作肝组织病理学检查（固 定后，石蜡包埋，切片，分别作 H-E 染色和脂肪染色）；每只取肝右叶 1g，4℃条件下用生 理盐水制成 100g/L 的肝组织匀浆，离心后取上清液，-30℃低温保存。待测血清和肝组织中 的生化指标。
高脂饮食致大鼠脂肪肝实验模型的建立
高脂饮食致大鼠脂肪肝实验模型的建立随着人们膳食结构的改变，加上缺乏运动等原因，脂肪肝的发病率逐渐增高。
目前，西方发达国家中的脂肪肝发病率为10%～24%，而我国脂肪肝发病率也成为病毒性肝炎之后的第二大肝病，上海和广州两地，脂肪肝的发病率就高达20%。
如果不及时治疗，将会进一步恶化，导致肝纤维化甚至肝硬化，严重影响人们的身体健康，给家庭和社会带来很大的负担。
本实验旨在探讨脂肪肝模型的复制方法，为进一步研究脂肪肝发病机理提供一种较好的动物模型。
1 材料与方法1.1 材料1.1.1 高脂饲料配方胆固醇（批号：F***-*****）、脱氧胆酸钠（批号：F***-*****）、吐温80（批号：F***-*****）、1-2丙二醇（批号：F***-*****）均为分析纯，够自西格玛奥德里奇上海贸易有限公司；丙赛优（批号：0300，上海朝晖药业有限公司）；猪油自制。
1.1.2 脂肪乳的配制按12.%吐温80、10%1-2丙二醇、0.%丙基硫氧嘧啶、1%猪油、1%脱氧胆酸钠、%胆固醇的比例配制。
先将猪油30g 放在200ml的烧杯中，放在磁力搅拌器上加热至40℃水浴中融化，加入10g胆固醇、1g研细的丙基硫氧嘧啶，充分搅匀，加入适量吐温不断搅拌直至乳化现象产生，制成油相。
另一烧瓶中加入30ml蒸馏水和1-2丙二醇20ml，加热至60℃，然后加入胆盐2g溶解，制成水相。
将两个烧杯液体充分混匀即可成为稳定的脂肪乳剂，使用时37℃水浴融。
1.1.3 普通饲料玉米面3.4%，白面29.%，麸皮12.%，豆粉12%，鱼粉8%，酵母粉2%。
1.1.4 试剂盒G、C测定试剂盒（北京福瑞生物工程公司）；AS、AL考马斯亮蓝蛋白测定试剂盒（南京建成生物工程研究所）。
1. 2 方法雄性清洁级Wistar 大鼠28只（SCXK吉-*****-0004），体重（200±10）g。
随机抽取8只作为对照组，用生理盐水灌胃每日1次，3 d后腹腔静脉抽血行血脂四项及肝功能检测、肝重测定以及肝脏病理检查。
药物对非酒精性脂肪肝大鼠的实验研究
Ｆ ｒｔ ｓ ｉ ｌ ｆ Ｓ ａ ｘ ｄ ｃ ｌＵ ｉｅｓｔ ｉｓ Ｈｏ ｐ ｔ ｈ ｎ ｉ ａ ｏ Ｍｅ ｉａ ｎ ｖ ｒｉ ｙ，Ｔ ｉ ｕ ｎ０ ０ ０ ， ｈｎ ａ ｙ ａ ３ ０ １ Ｃ ｉａ ［ ｂｔａｔ ０ ｊｃ ｖ Ｔ ｖ ｓ ｇ ｔ ｅｅｆｃ ｏ ｄｃ ｅｏ ｌ ｍａｌｖ ｌ ｏ Ｘ ２ ａ ｄ ６ Ｋ ｔ— Ｇ Ｉ ｉ Ａｓ ｃ ｒ ］ ｂｅ ｔ ｅ ｏｉ ｅｔ ａｅｔ ｆ ｔ ｆ ｉ ｎ ｉ ｈ ｅ ｍｅ ｉｉ ｎ ｐａ ｅ ｅ ｆ Ｂ ｎ － ｅｏＰ Ｆ ａ ｎ ｎ ｓ ｓ Ｔ
ｎ ｎ ｌｏ ｏ ｉ ｆ ｔｙ ｌ ｅ ｉｅ ｓ ＮＡＦ ｏ ａｃ ｈ ｌ ａ ｔ ｉ ｒｄ ｓ ａ ｅ（ ｃ ｖ ＬＤ） ｒ ｔ ． ｅ ｈ ｄ Ｔｈ ａｓ Ｍ ｔｏ ｓ ｅ ＮＡＦ ＬＤ ｉｔ ｒ ｒ ｔｍｏ ｅ ｗａ ｓ ａ ｌ ｈ ｄ ｂ ｉ ｈ Ｗ ｓａ ａ ｄ ｌ ｓｅ ｔｂｉ ｅ ｙ ｈｇ ｓ
张 革 红 薛翠 芳 赵 和 平
【 摘
要 】 目的
观 察 药 物 对 非 酒 精 性 脂 肪 肝 大 鼠 血 浆 和 肝 组 织 血 栓 素 Ｂ （ Ｘ ２ 和 ６酮一 列 腺 素 Ｆ ｎ ２Ｔ Ｂ ） 一 前 １
（－ ｔ— Ｇ Ｉ） 影 响 。方 法 高 脂 饲 料 制 备 Ｗ ｉ ａ 大 鼠非 酒 精 性 脂 肪 肝 大 鼠模 型并 用 降 脂 益 肝 冲 剂 进 行 干 ６ＫｅｏＰ Ｆ￣ 的 ｓｒ ｔ 预 。苏 木 素 一 红 （ ） 色 观 察 肝 脏 病 理 组 织 学 改 变 ， 射 免 疫 法 测 定 血 浆 和 肝 组 织 Ｔ ２和 ６Ｋ ｔ— Ｇ １ 伊 ＨＥ 染 放 ＸＢ － ｅｏＰ Ｆａ含 量 及 其 比值 。结 果 治 疗 组 肝 脏 脂 肪 变 性 程 度 明 显 改 善 ，－ ｅｏＰ ｌ 含 量 显 著 高 于 模 型 组 （ ＜ ０ ０ ） Ｔ Ｂ ６Ｋ ｔ— ＧＦｕ Ｐ ．１，Ｘ ２ 含 量 、 Ｘ ２ ６ＫｅｏＰ Ｆ 比值 明显 低 于模 型组 （ ＜ ０ Ｏ ） 结 论 降 脂 益 肝 冲 剂 对 大 鼠血 浆 和 肝 组 织 Ｔ ２ Ｔ Ｂ ／ － ｔ— Ｇ ｈ Ｐ ．１。 ＸＢ 、 ６ＫｅｏＰ Ｆ ｎ 含 量 及 其 比值 具 有 调 节 作用 ， 可 能 是 其 抗 非 酒 精 性 脂 肪 肝 的 作 用 机 制 之 一 。 － ｔ—Ｇ ｌ 的 这
高脂饮食大鼠脂肪肝血清抵抗素的变化及多烯磷脂酰胆碱的干预作用
Hale Waihona Puke 肪 变性 ， 肝组织 Ｔ Ｇ、 Ｆ Ｆ Ａ含 量 均 显 著 升 高 （ ｔ 值分 别 为 １ ４ ． ８ ５和 １ ９ ． ６ １ ， Ｐ＜０ ． ０ １ ） ； 血 清抵 抗素 含量亦 显著 升高 （ ｔ ＝１ ２ ． ９ ４ ， Ｐ＜
０ ． Ｏ １ ） ； 多烯磷脂酰胆碱组的 Ｔ Ｇ、 Ｆ Ｆ Ａ含 量 显 著 低 于 模 型 组 （ Ｐ＜ ０ ． Ｏ １ ） ， 血清 抵抗 素含量 亦显著 低于模 型组 （ Ｐ＜ ０ ． Ｏ １ ） 。 肝 脏
ｄ ｙ ｌ ｃ ｈ ｏ ｌ ｉ ｎ ｅ ｏ ｎ ｆ ａ ｔ ｔ ｙ ｌ ｉ ｖ ｅ ｒ ｄ ｉ ｓ ｅ ａ ｓ ｅ ．Ｍ ｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｓ Ｆ ａ ｔ ｔ ｙ ｌ ｉ ｖ ｅ ｒ ｉ ｎ Ｓ Ｄ ｍａ ｌ ｅ ｒ ａ ｔ ｓ ｗｅ ｒ ｅ ｉ ｎ ｄ ｕ ｃ ｅ ｄ ｗ ｉ ｔ ｈ ｈ ｉ ｇ ｈ—ｆ ａ ｔ ｄ ｉ ｅ ｔ ｆ ｏ ｒ １ ２ ｗｅ ｅ ｋ ｓ ．Ｒ ａ ｔ ｓ ｗ ｅ ｒ ｅ ｄ ｉ ｖ ｉ ｄ ｅ ｄ
碱 灌 胃 干预 ５周 。观 察 项 目： 肝组 织 Ｈ Ｅ染 色 ， 观察 各组肝 脂肪 变性 程度变 化 ； 肝组织 甘油 三酯 （ ｔ ｒ ｉ ｇ ｌ ｙ ｅ ｅ ｒ ｉ ｄ ｅ ，Ｔ Ｇ） 、 游 离 脂 肪 酸 （ ｆ ｒ ｅ ｅ ｆ ａ ｔ ｔ ｙ ａ ｃ ｉ ｄ ， Ｆ Ｆ Ａ） 、 血清抵抗素含量 ； 肝组织 Ｔ Ｇ、 Ｆ Ｆ Ａ、 血 清 抵 抗 素 含 量 间 的相 关 性 分 析 。结 果 模 型 组 肝 组 织 出现 严 重 的 脂
高脂饮食致大鼠脂肪肝实验模型的建立
ｏ ｌ ｏ ｇ ｉ ｃ ｌ ａ ｎａ ａ ｌ ｙ ｓ ｉ ｓ ｏ ｆ ｌ ｉ ｖ ｅ ｒ ｌ ｉ ｐ ｉ ｄ ｃ ｈ ｎｇ ａ ｅ ｓ ｉ ｔ ｕ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ． Ｒ ｅ ｓ ｕ ｌ ｔ ｓ Ｉ ｎ ｈｅ ｔ ｈ ｉ 曲 ｆ ａ ｔ ｅ ｍｕ ｌ ｓ ｉ ｏ ｎ ｌ ａ ｖ ａ ｇ ｅ ａ ｆ ｔ ｅ ｒ １ ４ ｄ ａ ｙ ｓ ， ｓ ｙ ｍ ｐ ｔ ｏ ｍｓ ｏ ｆ ｈ ｙ ｐ ｅ ｒ ｌ ｉ ｐ ｉ ｄ ｅ ｍ ｉ ａ ｒ ａ ｔ ｓ ，
ｓ ａ ｌ ｉ ｎ ｅ ｌ ａ ｖ ａ ｇ ｅ ｇ ｒ ｏ ｕ ｐ ａ ｎ ｄ ｈ ｉ ｓ ｈ—ｆ ａ ｔ ｅ ｍｕ ｌ ｓ ｉ ｏ ｎ ｌ ａ ｖ ａ ｇ ｅ ｇ ｒ ｏ ｕ ｐ，ｈ ｉ ｇ ｈ — ａｔ ｆ ｅ ｍｕ ｌｓ ｉ ｏ ｎ ｌ ａ ｖ ａ ｇ ｅ ｃ ｏ ｐ ｙ ａｔ ｆ ｔ ｙ ｌ ｉ ｖ ｅ ｒ ｍｏ ｄ ｅ ｌ ，ｒ ｅ ｓ ｐ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ ｌ ｙ ｉ ｎ ｈ ｉ ｇ ｈ ａｔ ｆ ｅ ｍｕ ｌ—
后 ，大鼠出现高血脂症状并伴有轻度脂肪肝 ，随后出现血脂水平稳定上升，肝系数增大 ；２ ８ ｄ时出现 中度脂 肪肝；３ ５ ｄ时 出现重度脂肪肝 。结
论 ：经过高脂饲料灌 胃， ３ ５ ｄ 内即可形成不同脂变程度 的大鼠脂肪肝模 型，而且造模时间短 、价格低廉 ，是一种较好的脂肪肝模型制作方法 。
中国民族 民间医药
２ ０ １ ５年 ８月第 ２ ４卷第 １ ５期 Ｃ ｈ ｉ ｎ ｅ ｓ ｅ Ｊ ｏ ｕ ｒ ｎ ａ ｌ ｏ ｆ Ｅ ｔ ｈ ｎ ｏ ｍ ｅ ｄ ｉ ｃ ｉ ｎ ｅ ａ ｎ ｄ Ｅ ｔ ｈ ｎ ｏ ｐ ｈ ａ ｒ ｍ ａ ｃ ｙ ， ２ ０ １ ５ ， Ｖ ｏ １ ． ２ ４ ， Ｎ ｏ ． １ ５
大鼠非酒精性脂肪肝模型的建立
大鼠非酒精性脂肪肝模型的建立张青峰;刘咏煌【摘要】本文通过饲喂高脂饲料建立大鼠非酒精性脂肪肝模型．将40只雄性SD 大鼠随机分为正常对照组和模型组两组，正常对照组（10只）喂养普通饲料，模型组（30只）喂养高脂饲料，两组同时饲喂12周之后，观察大鼠血清生化指标如甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、谷丙转氨酶（AST）、谷草转氨酶（ALT）、高密度脂蛋白（HDL—C）、低密度脂蛋白（LDL—C）和肝脏病理结构的变化。
结果显示：模型组肝脏呈棕黄色。
肝内灶片状肝细胞有脂肪变性。
肝小叶中央区肝细胞脂肪病变严重，正常对照组肝细胞未发生脂肪变性，肝脏呈暗红色；模型组肝脏指数（TG、ALT、AST、LDL—C）明显高于正常对照组（P〈0．05），TC高于正常对照组，HDL—C低于正常对照组。
本试验证明：用改良的高脂饮食饲喂大鼠建立非酒精性脂肪肝模型成功且稳定。
%This paper established the model of nonalcoholic fatty liver disease (NAFLD) in rat through feeding high fat feed. Forty male SD rats were classified into two groups randomly, the normal control group (n=10) were fed with normal feed, the model group (n=30) were fed with high fat feedstuffs. Then the normal control group and the model group were administered for twelve weeks, theblood of these rats were sampled to determin the levels of the triacylglycerol (TG), total cholesterol (TC), aspartate aminotransferase( AST), alanine transaminase (ALT), high density lipoprotein cholesterol( HDL-C ), low density lipoprotein cholesterin ( LDL-C ), and the pathological changes of liver were observed. The results showed that the liver of .model group were brown and there were lipid degeneration inhePatic tissues of rats, the liver of normal control group were dark red and non-lipid degeneration. Compared with the control group, the model group's content of TG, TC, ALT, AST and HDL-C in serum were significantly higher and HDL-C was lower. This experiment suggested that it was successful and stable to establish model of NAFLD in rat by feeding improved high fat feed.【期刊名称】《四川畜牧兽医》【年(卷),期】2012(039)012【总页数】3页(P21-23)【关键词】非酒精性脂肪肝;动物模型;大鼠【作者】张青峰;刘咏煌【作者单位】贵州省遵义医学院珠海校区,广东珠海519041;贵州省遵义医学院（珠海）第五附属珠海医院,广东珠海519100【正文语种】中文【中图分类】S865.120.4非酒精性脂肪肝（NAFLD），是一种无过量饮酒史，以肝实质细胞脂肪变性和脂肪贮积为特征的临床病理综合征。
大鼠脂肪肝 文档
清脂益肝汤对非酒精性脂肪肝大鼠治疗的实验研究1．2．1 动物分组与模型建立：43只大鼠在动物房内适应性喂养1周后，随机分为4组：正常对照组(I组)10只，模型组(1I 组)l1只，清脂益肝汤组(Ⅲ组)11只、二甲双胍组(Ⅳ组)11只。
Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组饲以高脂饲料，配方为：普通饲料+1％胆固醇+ 14％猪油，由天津市华容实验动物中心饲料厂配制；正常对照组饲以普通饲料，实验动物自由饮水和进食。
4周后随机抽取Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ三组中各一只大鼠脱颈处死，病理证实脂肪肝已形成。
清脂益肝汤组给生药16 g·ks ·d～，灌胃治疗；二甲双胍组给170 mg·ks～·d (按成人剂量1．5 g／d折算)溶于5 rnl蒸馏水中灌胃。
正常对照组、模型组给予同量蒸馏水灌胃，各组按原饲料进行饲养。
8周后，全部脱颈处死，取血及肝组织待测。
1．2．2 观察指标及检测方法：(1)观察大鼠食欲、体重、毛发及死亡情况。
(2)血清指标测定：测定丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、甘油三酯(TG)、胆固醇(CHO)、空腹血糖(FBS)、游离脂肪酸(FFA)；放免法测定空腹胰岛素(FINS)。
胰岛素抵抗指数计算：胰岛素抵抗指数(HOME-IR)：(~33s×F~NS)／22．50。
(3)取肝组织一块马上置于液氮中用RTPCR 法检测肝组织中瘦素mRNA(1eptin mRNA)的表达。
1．3 组织病理学标本的制备取肝左叶用10％甲醛溶液固定，石蜡包埋，HE染色，光镜下观察组织学改变。
2、化痰泄浊方对脂肪肝模型大鼠胰岛素抵抗及瘦素的影响1．2．1 分组与模型制作 SD大鼠48只，常规饲养1周后随机分为5组：正常对照组、模型组、DBGTT组、HTXZR高剂量和低剂量组，其中正常对照组8只，其余4组各1O只。
正常对照组予以基础饲料喂养，其余4组均以高脂饲料(84 9／6基础饲料+1o猪油+5 蛋黄粉+1 胆固醇)喂养，并于造模第1天予以腹腔注射四环素150 mg／kg，后每隔6 d腹腔注射四环素110 mg／kg 1次，共6次。
大鼠实验性脂肪肝模型血浆和肝脏脂质含量变化比较
肝 脏 ２０ ０ ２年 ９月 第 ７卷 第 ３期
表 １ Ｉ 头 小 型 猪 肝 移 植 各 期 血 流 动 力学 及血 生 化 变 化 ９
与 无 肝 前 期 相 比 Ｐ＜０ ０ ５
离 心 泵 作 主 动 静 脉 转 流 是 一 较 理 想 的 方 式 ： 离 心 泵 是 一 旋 转 光 滑 圆锥 驱 动 血 流 ， 符 合 生 理 并 很 少 有 淤 血 和 血 细 胞 的 破 较 坏 。本 实 验 的 体 外 静 脉 转 流 的 要 点 ： １ （ ）转 流 插 管 和 转 流 连 接 管 的管 径要 适 当 ． 小 不 能 维 持 转 流 量 及 血 压 ， 过 大 则 插 管 过 而 困难 并增 加 了 预 充 液 的 量 ， 扰 血 流 动 力学 的 稳 定 ， 此 在 保 干 因 证 能 置 管 的 情 况 下 应 尽 可 能 小 ． 减 少 预 充 液 的 量 由 于 小 型 以
期 将 要 结 束 前 时 的有 效 血 容 量 较 低 ， 时 应 适 当 补 充 全 血 及 碳 此
猪 的全 身 容 量 少 ． 充 液 过 大 会 极 大 的 干 扰 其 血 流 动 力学 的 稳 预
定 。我 们 采 用 ｌ ｌ Ｆ 的 转 流 插 管 ， 连 接 管 的 管 径 为 ７ ４～ ６ 外 ｍｍ
ｔ ｐ ｃ ｌ ｅ ｎ ｐｌｎ ａ ｉ ｎ ｉ ｉ ｓ Ｔｒ ｎ Ｄ ａ ｔ “ ｎ、２ ０ １ ７ ３ ８ ３ ｏ ｉ ｉ ｒｔ ａ ｓ ａ ｔ ｔ ｎ ｐ ｇ ． ｖ ｒ ｏ ａ ｓ ｌｎａ ｏ ０ 、 １： ２ ３１ Ｌ ｐ ｚ Ｓ ｎ ａ ａ ｉ 、 Ｍ ｉ ｉ ｚ 、Ｇ ａ ｅ Ｚ ． ｅ ｌ Ｓｕ ｒ ｃ ｌ ｃ ａ ｒ ｉ ｏ ｅ ａ ｔｍ ｒａ Ｍ ｇｌ ｚ ａ Ｌ ａ ｍ Ｍ ｒ ａ ｐａ ｅｉ ｏ ｔ ａ ｃ ｃａ ｐ ｎ ｕ ｉｇ ｈ ａ ｅ ａ ｉ ｈ ｓ ｏ ｘ ｅ ｉ ｅ ｔ ｌ ｒｈ ｔ ｐ ｃ ｉｏ ｌ ｍ ｉｇ ｄ ｒｎ ｔ ｅ ｎｈ ｐ ｔ ｐ ａ ｅ ｆ ｅ ｐ ｒｍ ｎ ａ ｏ ｔ ｏ ｏ ｉ ｌ ｒ ｃ 、
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清脂益肝汤对非酒精性脂肪肝大鼠治疗
的实验研究
1．2．1 动物分组与模型建立：43只大鼠在动物房内适应性喂养1周后，随机分为4组：正常对照组(I组)10只，模型组(1I 组)l1只，清脂益肝汤组(Ⅲ组)11只、二甲双胍组(Ⅳ组)11只。
Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组饲以高脂饲料，配方为：普通饲料+1％胆固醇+ 14％猪油，由天津市华容实验动物中心饲料厂配制；正常对照组饲以普通饲料，实验动物自由饮水和进食。
4周后随机抽取Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ三组中各一只大鼠脱颈处死，病理证实脂肪肝已形成。
清脂益肝汤组给生药16 g·ks ·d～，灌胃治疗；二甲双胍组给170 mg·ks～·d (按成人剂量1．5 g／d折算)溶于5 rnl蒸馏水中
灌胃。
正常对照组、模型组给予同量蒸馏水灌胃，各组按原饲料进行饲养。
8周后，全部脱颈处死，取血及肝组织待测。
1．2．2 观察指标及检测方法：(1)观察大鼠食欲、体重、毛发及死亡情况。
(2)血清指标测定：测定丙氨酸氨基转移酶(ALT)、
天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、甘油三酯(TG)、胆固醇(CHO)、
空腹血糖(FBS)、游离脂肪酸(FFA)；放免法测定空腹胰岛素(FINS)。
胰岛素抵抗指数计算：胰岛素抵抗指数(HOME-IR)：
(~33s×F~NS)／22．50。
(3)取肝组织一块马上置于液氮中用RTPCR 法检测肝组织中瘦素mRNA(1eptin mRNA)的表达。
1．3 组织病理学标本的制备取肝左叶用10％甲醛溶液固
定，石蜡包埋，HE染色，光镜下观察组织学改变。
2、化痰泄浊方对脂肪肝模型大鼠胰岛素抵抗及瘦素
的影响
1．2．1 分组与模型制作 SD大鼠48只，常规饲养1周后随机分为5组：正常对照组、模型组、DBGTT组、HTXZR高剂量和低剂量组，其中正常对照组8只，其余4组各1O只。
正常对照组予以基础饲料喂养，其余4组均以高脂饲料(84 9／6基础饲料+1o猪油+5 蛋黄粉+1 胆固醇)喂养，并于造模第1天予以腹腔注射四环素150 mg／kg，后每隔6 d腹腔注射四环素110 mg／kg 1次，共6次。
1．2．2 给药方法自造模第1天起，除正常对照组外，其余各组均按5 ml〃kg 〃d一，1次／d，分别灌服生理盐水或相应的药物溶液。
HTXZR高剂量和低剂量组的给药浓度分别为HTXZR 2 g／ml和1 g／ml(相当于成人用药剂量的2O倍和1O倍)；DBGTT溶于蒸馏水中，制成浓度为0．06 g／ml的溶液，给药浓度为0．225 g〃kg。
〃d (相当于成人用药剂量的1O倍)。
连续7周。
4种中药复方对大鼠脂肪肝模型胰岛素抵抗及瘦素的影响
1．2．1 分组与模型制备：SD雄性大鼠，1 10只，随机分为空白组、模型组、东宝肝泰组(东宝组)、
化痰祛浊高剂量组(化痰高组)、化痰祛浊低剂量组(化痰低组)、疏肝健脾高剂量组(疏肝高组)、疏肝
健脾低剂量组(疏肝低组)、凉血活血高剂量组(凉血高组)、凉血活血低剂量组(凉血低组)、滋阴补肾
高剂量组(补肾高组)、滋阴补肾低剂量组(补肾低组)等
1 1组各10只；常规饲养1周后，除空白组给予基础饲料外，其余10组均饲以高脂饲料(质量分数84％
基础饲料+质量分数10％猪油+质量分数5％蛋黄粉+质量分数1％胆固醇)，并于造模第1 d腹腔注射
四环素150 mg／kg，其后每6 d 1次腹腔注射四环素1O0 mg／kg，计6次。
1．2．2 给药方法：自造模第1 d起，除空白组外，各组分别灌服生理盐水及相应药物，东宝肝泰溶
于蒸馏水中，制成0．06 g／ml的混悬液，灌服剂量为0．225 g／(kg·d)，相当于成人用药量的10倍。
高剂量组按10 ml／(kg·d)灌胃，相当于成人用药量的20倍，低剂量组按5 ml／(kg·d)灌胃，相当于成人用药量的10倍。
1．2．3 标本采取：于造模第7周结束时采集标本。
方法：隔夜禁食，次日以20 g／L戊巴妥钠溶液1 ml ／kg腹腔内注射麻醉后，从腔静脉采血，然后迅速取出肝脏称肝湿重，计算肝湿重／体重比值，即为肝指数。
所采血在30 min内离心取血清待检。
1．2．4 指标测定：瘦素及空腹胰岛素定量采用放1．6 标本采取于实验造模第7周结束时处死各组动物，方法：隔夜禁食，次日以2％戊巴妥钠溶液1ml／kg体重腹腔内注射麻醉后，迅速取出肝脏称肝湿重，并取肝左叶0．1cm x 0．1cm x 0．6cm 标本2～4块经戊二醛锇酸固定、然后取同部位肝左叶1块0．5cmX 1cm X 0．3cm 组织置于l0％磷酸缓冲甲醛液
固定。
1．7 指标涸定
1．7．1 瘦素及空腹胰岛素定量采用放射免疫方法，
单位以 g／ml表示。
根据_5】推荐公式计算胰岛素抵抗
指数(胰岛素抵抗指数=空腹血糖含量X空腹胰岛
素含量／22．5)。
1．7．2 肝脏病理光镜：取肝左叶，中性甲醛固定肝标本，肝组织石蜡切片HE染色观察肝脏病理学改变。
电镜：标本经戊二醛锇酸固定，环氧树脂包埋，超薄切片透射电镜观察肝组织超微结构变化。
光镜下评估肝脂肪变性程度，判断标准按照脂变细胞占肝细胞的百分比进行脂变程度分级_5】。
三七总皂苷对大鼠非酒精性脂肪肝模型
胰岛素抵抗及瘦素受体表达的影响
1．1 实验动物及饲料选取Wi~ar雄性大鼠40只(由山西医
科大学实验动物中心提供)，体重(180±20)g，实验室温度
(18-22)℃，湿度45％～65％，各组动物单笼喂养，自由饮水。
基础饲料(山西医科大学实验动物中心提供)；高脂饲料：基础饲
料84．5％、蛋黄粉10％、猪油5％，猪胆盐0．5％。
1．2 试验用药品及试剂三七总皂苷粉剂(云南玉溪市维和制1．4 动物模型分组及标本制备适应性饲养7 d后，按体重编
号，完全随机分组，正常组10只、造模组30只，均自由进食、进水。
正常组喂养基础饲料，造模组喂养高脂饲料。
3个月后随
机解剖正常组大鼠2只和造模组大鼠6只，取肝组织，HE染色。
造模成功后，造模组停喂高脂饲料，改为普通饲料喂养，剩余32 只大鼠再随机分为4组，每组8只。
正常组：纯净水4 mL／d灌
胃30 d；模型组：纯净水4 mL／d灌胃30 d；三七总皂苷低剂量组：三七总皂苷100 mg／(kg·d)灌胃30 d；三七总皂苷高剂量组：三七总皂苷200 mg／(kg·d)灌胃30 d。
各组大鼠药物干预
30 d后，禁食、禁水12 h，次日称体重，注射25％乌拉坦0，4 mL／kg，
麻醉后腹主动脉取血每只4 mL，室温下2 000 r／min离心15
mln，分离血清，一40℃冰箱保存。
迅速取出肝脏，称湿重，并取肝右叶2块用10％甲醛固定，分别用于HE 染色和瘦素受体免
疫组化染色。
1．5 指标测定
1．5．1 血清瘦素及空腹胰岛素采用放射免疫法，计算胰岛素抵抗指数(胰岛素抵抗指数=空腹血糖含量×空腹胰岛素含量／22．5)。
1．5．2 普通病理学检测10％甲醛固定，石蜡包埋，组织切片，HE 染色，光镜下观察普通病理学变化。
光镜下评估肝脂肪变
性程度，判断标准按照脂变细胞占肝细胞的百分比进行脂变程度分级 J。
1．5．3 免疫组化染色采用SABC法。
方法为切片脱蜡；3％
H202溶液处理；热修复抗原；5％BSA封闭；滴加大鼠瘦素受体单克隆抗体一抗(浓度1：100)，4℃冰箱过夜；隔夜滴加生物素化养抗兔Iga二抗，37℃孵育20 min，再滴加试剂SABC；DAB
显色；苏木精复染。
细胞呈棕黄色为阳性，蓝色为阴性。
1．5．4 病理指标分析对各组免疫组化染色最显著区域的表
达进行图像分析，在400倍光镜下测量每个显示屏的染色强度(平均光密度)。
每张切片选取染色最显著的6个视野，分别测
量光密度，然后计算其平均值，来说明各组瘦素受体的表达情况。
1．6 统计学处理使用SPSS 13．0统计软件进行统计学处理。
计量资料以均数±标准差(i±S)表示。
多组间比较采用方差
分析和两两比较的SNK—q检验、Pearson相。