土霉素片中间产品检验操作规程

目的：为检验土霉素片中间产品规定一个标准的程序，以便获得准确的实验数据。

范围：适用于土霉素片中间产品的检验。

职责：检验员、检验室主任对本规程实施负责。

规程：
1 性状：本品为淡黄色片。

2 鉴别
2.1 试剂与仪器
2.1.1 乙醇 2.1.2 烧杯
2.1.3 水浴锅 2.1.4 量杯
2.1.5 电子天平(万分之一克) 2.1.6 电炉
2.1.7 漏斗
2.2 项目与步骤
2.2.1 取本品细粉适量(约相当于土霉素25mg)，加乙醇25ml，浸渍20分钟，滤过，滤
液置水浴上蒸干，残渣照土霉素的鉴别法(1)项试验，显相同的反应为符合规定。

3 检查
3.1 试剂与仪器
3.1.1 电子天平(万分之一克) 3.1.2 AB-2片剂脆碎度仪
3.1.3 BJ2A片剂崩解仪
3.2 项目与步骤
3.2.1 重量差异：照片剂重量差异检查法(SOP-QC-334-00)检查，±7.5% 重量
差异限度为符合规定。

3.2.2 崩解时限：取本品6片,按崩解时限检查法(SOP-QC-330-00)检查，各片应在
15分钟内全部崩解，如有1片崩解不完全，应另取6片按同样方法复试，全部崩解完全均为
符合规定。

3.2.3 脆碎度：取本品约25片，用吹风机吹去脱落的粉末，精密称重，按脆碎度检查法 (SOP-QC-333-00)检查，减失重量不得过1%，且不得检出断裂、龟裂及粉碎的片。

如减失重量超过1%时，可复检2次，3次的平均减失重量不得过1%，并不得检出断裂、龟裂及粉碎的片，为符合规定。

4 含量测定：取本品10片，精密称定，研细，精密称出适量（约相当于土霉素0.25g），置250ml量瓶中，加盐酸(0.1mol/L)50ml，振摇,使土霉素溶解后,再加灭菌水稀释至每1ml 中约含1,000单位的悬浮液；摇匀，静置，精密量取悬浮液适量，照抗生素微生物检定法(SOP-QC-339-00)操作。

4.1 试剂与仪器
4.1.1 抗生素检定培养基Ⅱ(6.5～6.6) 4.1.2 磷酸盐缓冲液(PH6.0)
4.1.3 藤黄微球菌悬液 4.1.4 土霉素标准品
4.1.5 容量瓶(50ml,100ml) 4.1.6 灭菌刻度吸管,滴管
4.1.7 双碟 4.1.8 陶瓦盖
4.1.9 钢管放置器 4.1.10 电热隔水培养箱
4.1.11 称量瓶 4.1.12 CHB-1抗生素效价测量仪
4.1.13 电子天平(万分这一克) 4.1.14 超净工作台
4.1.15 酒精灯 4.1.16 三角烧瓶(50ml,150ml)
4.1.17 量筒(100ml) 4.1.18 镊子,接种棒
4.2 检验步骤
4.2.1 培养基的制备：称取抗生素检定培养基Ⅱ(PH6.5～6.6)28.5g，加水1000ml，加热溶解，分装，121℃高压灭菌30分钟，备用。

4.2.2 磷酸盐缓冲液(PH6.0)制备：称取磷酸氢二钾2g与磷酸二氢钾8g，加水使成1000ml，滤过，经121℃蒸气灭菌30分钟，备用。

4.2.3 藤黄微球菌悬液的制备：取藤黄微球菌(28001)的营养琼脂斜面培养物，接种于盛有营养琼脂培养基的培养瓶中，在26～27℃培养24小时，临用时用培养基Ⅲ将菌苔
洗下，合并菌液至灭菌大试管中，备用。

4.2.4 标准品溶液的制备：
4.2.4.1 将标准品从冰箱取出，使与室温平衡，准确称取土霉素对照品58mg 置50ml 容量瓶中,加(0.1mol/L) 盐酸溶液5ml 溶解，加灭菌水至刻度，精密吸取10ml 置25ml 容量瓶中，用磷酸盐缓冲液 (PH7.8) 稀释至刻度，备用。

4.2.4.2 高剂量标准品的制备： 精密吸取4.2.4.1制备的标准溶液2ml ，置50ml 容量瓶中，用磷酸盐缓冲液 (PH6.0) 稀释至刻度，备用。

4.2.4.3 低剂量标准品的制备： 精密吸取4.2.4.1制备的标准溶液2ml ，置100ml 容量瓶中，用磷酸盐缓冲液 (PH6.0) 稀释至刻度，备用。

4.2.5 样品溶液的制备：
4.2.
5.1 取本品20片，研细，精密称取重约0.66g 置250ml 容量瓶中，加 (0.1mol/L) 盐酸液100ml ，振摇，使土霉素溶解后，再加灭菌水稀释至刻度，摇匀，静置，精密量取上清液10ml 置25ml 容瓶中，用磷酸盐缓冲液 (PH
6.0) 稀释至刻度，备用。

4.2.
5.2 高剂量样品溶液的制备：，精密吸取4.2.5.1制备的样品溶液5ml ，置50ml 容量瓶中，用磷酸盐缓冲液 (PH
6.0) 稀释至刻度，备用。

4.2.
5.3 低剂量样品的溶液的制备： 精密吸取4.2.5.1制备的样品溶液5ml ，置100ml 容量瓶中，用磷酸盐缓冲液 (PH
6.0) 稀释至刻度，备用。

4.2.6 双碟的制备 ：按抗生素微生物检定法 (SOP-QC-339-00)操作。

4.2.7 小钢管的放置：按抗生素微生物检法 (SOP-QC-339-00)操作。

4.2.8 滴管、培养与测量：按抗生素微生物检法 (SOP-QC-339-00)操作。

5 记录与计算：
用电脑测试，计算、统计分析的打印纸贴附于记录后。

本品含土霉素 (C 22H 24H 2O 9)为标示量的90.0%～110.0% 为符合规定。

按下列计算土霉素的最终效价：
P T =P ×
%100 T
d ds
PT ：为样品的真实效价
P ：为样品(相当于标示量或估计效价)的百分数
对照品：
ds=
()
25
/mg u W 红霉素对⨯
ds ：为对照品每1ml 中约含1000单位浓度； W 对：为对照品称样量；
样品： dT=
25
标示含量
⨯V
dT ：为样品的每1ml 中约含1000单位浓度； V ：样品的吸取量；
效价比值(R)的计算值，若低于90%或高于110%均应重新测定，可信限率≤5%。

6
规格： 0.25g ；。