桦褐孔菌富锗培养及其总黄酮抗氧化活性
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4 摘要 ： 以菌落直径为指标考察桦褐孔菌富锗培养的适宜加锗量 ， 采用 L 9(3 ) 正交优选的提取 条件微波提取富锗培养后的桦褐孔菌总黄酮 ( 简称 Ge-TFIO) ， 并运用活性氧 (ROS) 试剂盒 、
DPPH・法、H2O2诱导小鼠氧化溶血抑制实验评价Ge-TFIO的抗氧化能力。结果表明：桦褐孔 菌富锗培养的适宜加锗量为 40 mg/L ； 富锗培养的桦褐孔菌总黄酮微波提取优化工艺条件为 乙醇浓度80%、料液比1:40、处理时间180 s、微波功率352 W，此条件下，Ge-TFIO提取率为 4.59%；2 mg/mL Ge-TFIO的抗活性氧单位为25.85 U/mL，DPPH・自由基清除率为91.39%， H2O2诱导红细胞氧化溶血抑制率约为29.13%，可见，富锗培养后的桦褐孔菌总黄酮含量较高， 具有较强的抗氧化活性。 关键词：桦褐孔菌；富锗；总黄酮；微波提取；抗氧化 中图分类号：TS 219 文献标志码：A 文章编号：1005-9989(2012)06-0037-05
ຫໍສະໝຸດ Baidu
GeO2–enriched culture and antioxidant activity of total flavonoids of Inonotus obliquus
HUANG Xiao-dong1, CAI Jing-xiu 2*, XU Li-xuan3, ZHENG Yue-bo2
(1.Institute of Wetland, Quanzhou Normal College, Quanzhou 362000; 2.College of Chemistry and Life Science, Quanzhou Normal University, Quanzhou 362000; 3.Quanzhou Preschool Education College, Quanzhou 362000)
食品科技
年 第 卷 第 期 FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY
生物工程
桦褐孔菌富锗培养及其 总黄酮抗氧化活性
黄晓冬1，蔡建秀2*，许丽璇3，郑越波2 (1.泉州师范学院湿地研究所，泉州 362000；2.泉州师范学院化生学院， 泉州 362000；3.泉州幼儿师范高等专科学校，泉州 362000)
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生物工程
食品科技
FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY 年 第 卷 第 期
TFIO had 25.85 U/mL anti-ROS units, 91.39% scavenging rate on DPPH· radical, 29.13% inhibitory rate on mice RBC hemolysis by H2O2-induced. Therefore, it can be clearly seen that total flavonoids of Inonotus obliquus from GeO2–enriched medium have higher yield and stronger antioxidant activities. Key words: Inonotus obliquus; GeO2–enriched; total flavonoids; microwave extract; antioxidant activity
锗是一种具有高度的生物活性的微量元素， 尽管迄今为止尚不能确定锗是人体必需微量元 素，也未发现有锗缺乏症的相关报道，但由于若 干中药的医疗保健作用曾被认为是与有机锗有 关，所以近20多年来人们对有机锗的合成、生物 活性及其应用进行了探讨，陆续发现锗在抗肿 瘤、消炎、免疫调节、抗氧化、抗病毒、降血脂 与抗衰老等方面的功效[1-2]。但是人工化学合成生 物有机锗难度较大，因此，研究者倾向于寻找与 利用现有的食用或药用生物资源将无机形态的锗 通过生物富集作用、生物转化作用进行天然有机 化，由于食用真菌的药、食价值，且真菌具有较 强的生物富集和转化能力，可以高效地将无机锗 结合到大分子活性物质、降低其毒性、并提高其 生物活性，因而广泛地应用于锗的天然有机化与 锗源食品的开发。 桦褐孔菌[Inonotus obliquus(Pers.Fr.)Aoshi]是生 长在俄罗斯、中国吉林长白山以及日本北海道等 寒冷地区白桦树上的一种特殊真菌，民间广泛用 于防治消化道疾病和肿瘤(胃癌、肠癌及肝癌等)、 心血管疾病和糖尿病等 [3] ，具有很强药用价值。 因此，国内外研究者致力于从化学成分、药理活 性[4-8]等两大方面进行广泛的深入研究。关于富锗 培养桦褐孔菌及其培养后活性成分提取与生物活 性、药理活性的研究尚未见文献报道，本研究拟 探讨锗对桦褐孔菌菌丝体生长影响的适宜浓度、 并以微波法提取富锗培养的桦褐孔菌菌丝体总黄 酮，进而测定与评价其体外抗氧化活性，为桦褐 孔菌富锗培养与开发提供科学依据。 1 1.1 材料与方法 材料
*通讯作者 收稿日期：2011-10-22 基金项目：福建省科技厅重点项目(2009N0049)；泉州师范学院福建省高校服务海西建设重点项目(A101)；福建省教育厅科技项目 (JA11352)；泉州师范学院开放实验室项目(20110111)；泉州师范学院大学生创新实验项目(2011CXSY校02)。 作者简介：黄晓冬(1973—)，男，福建南安人，硕士，副教授，主要从事资源植物化学与天然产物化学研究工作。
Abstract: The suitable dose of GeO2 in culture medium was investigated by the index of Inonotus obliquus colony diameter, then total flavonoids of Inonotus obliquus from GeO2–enriched medium (Ge-TFIO) were extracted by the optimum microwave technic conditions from L9(3 4) orthogonal experiment, meanwhile its antioxidant activities were evaluted by the ROS reagent kits, DPPH· model and the inhibition test on hemolysis of mice RBC(red blood cell) by H2O2–induced. The results showed that Inonotus obliquus were suitably growing in the culture medium added with 40 mg/L GeO2, its total flavonoids extracting rate was 4.59% while flavonoids were extracted by the conditions of 352 wattage microwave power, 40 ratio of liquid to material and 180 seconds microwave treatment time. The results also showed that 2 mg/mL Ge-
DPPH・法、H2O2诱导小鼠氧化溶血抑制实验评价Ge-TFIO的抗氧化能力。结果表明：桦褐孔 菌富锗培养的适宜加锗量为 40 mg/L ； 富锗培养的桦褐孔菌总黄酮微波提取优化工艺条件为 乙醇浓度80%、料液比1:40、处理时间180 s、微波功率352 W，此条件下，Ge-TFIO提取率为 4.59%；2 mg/mL Ge-TFIO的抗活性氧单位为25.85 U/mL，DPPH・自由基清除率为91.39%， H2O2诱导红细胞氧化溶血抑制率约为29.13%，可见，富锗培养后的桦褐孔菌总黄酮含量较高， 具有较强的抗氧化活性。 关键词：桦褐孔菌；富锗；总黄酮；微波提取；抗氧化 中图分类号：TS 219 文献标志码：A 文章编号：1005-9989(2012)06-0037-05
ຫໍສະໝຸດ Baidu
GeO2–enriched culture and antioxidant activity of total flavonoids of Inonotus obliquus
HUANG Xiao-dong1, CAI Jing-xiu 2*, XU Li-xuan3, ZHENG Yue-bo2
(1.Institute of Wetland, Quanzhou Normal College, Quanzhou 362000; 2.College of Chemistry and Life Science, Quanzhou Normal University, Quanzhou 362000; 3.Quanzhou Preschool Education College, Quanzhou 362000)
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年 第 卷 第 期 FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY
生物工程
桦褐孔菌富锗培养及其 总黄酮抗氧化活性
黄晓冬1，蔡建秀2*，许丽璇3，郑越波2 (1.泉州师范学院湿地研究所，泉州 362000；2.泉州师范学院化生学院， 泉州 362000；3.泉州幼儿师范高等专科学校，泉州 362000)
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FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY 年 第 卷 第 期
TFIO had 25.85 U/mL anti-ROS units, 91.39% scavenging rate on DPPH· radical, 29.13% inhibitory rate on mice RBC hemolysis by H2O2-induced. Therefore, it can be clearly seen that total flavonoids of Inonotus obliquus from GeO2–enriched medium have higher yield and stronger antioxidant activities. Key words: Inonotus obliquus; GeO2–enriched; total flavonoids; microwave extract; antioxidant activity
锗是一种具有高度的生物活性的微量元素， 尽管迄今为止尚不能确定锗是人体必需微量元 素，也未发现有锗缺乏症的相关报道，但由于若 干中药的医疗保健作用曾被认为是与有机锗有 关，所以近20多年来人们对有机锗的合成、生物 活性及其应用进行了探讨，陆续发现锗在抗肿 瘤、消炎、免疫调节、抗氧化、抗病毒、降血脂 与抗衰老等方面的功效[1-2]。但是人工化学合成生 物有机锗难度较大，因此，研究者倾向于寻找与 利用现有的食用或药用生物资源将无机形态的锗 通过生物富集作用、生物转化作用进行天然有机 化，由于食用真菌的药、食价值，且真菌具有较 强的生物富集和转化能力，可以高效地将无机锗 结合到大分子活性物质、降低其毒性、并提高其 生物活性，因而广泛地应用于锗的天然有机化与 锗源食品的开发。 桦褐孔菌[Inonotus obliquus(Pers.Fr.)Aoshi]是生 长在俄罗斯、中国吉林长白山以及日本北海道等 寒冷地区白桦树上的一种特殊真菌，民间广泛用 于防治消化道疾病和肿瘤(胃癌、肠癌及肝癌等)、 心血管疾病和糖尿病等 [3] ，具有很强药用价值。 因此，国内外研究者致力于从化学成分、药理活 性[4-8]等两大方面进行广泛的深入研究。关于富锗 培养桦褐孔菌及其培养后活性成分提取与生物活 性、药理活性的研究尚未见文献报道，本研究拟 探讨锗对桦褐孔菌菌丝体生长影响的适宜浓度、 并以微波法提取富锗培养的桦褐孔菌菌丝体总黄 酮，进而测定与评价其体外抗氧化活性，为桦褐 孔菌富锗培养与开发提供科学依据。 1 1.1 材料与方法 材料
*通讯作者 收稿日期：2011-10-22 基金项目：福建省科技厅重点项目(2009N0049)；泉州师范学院福建省高校服务海西建设重点项目(A101)；福建省教育厅科技项目 (JA11352)；泉州师范学院开放实验室项目(20110111)；泉州师范学院大学生创新实验项目(2011CXSY校02)。 作者简介：黄晓冬(1973—)，男，福建南安人，硕士，副教授，主要从事资源植物化学与天然产物化学研究工作。
Abstract: The suitable dose of GeO2 in culture medium was investigated by the index of Inonotus obliquus colony diameter, then total flavonoids of Inonotus obliquus from GeO2–enriched medium (Ge-TFIO) were extracted by the optimum microwave technic conditions from L9(3 4) orthogonal experiment, meanwhile its antioxidant activities were evaluted by the ROS reagent kits, DPPH· model and the inhibition test on hemolysis of mice RBC(red blood cell) by H2O2–induced. The results showed that Inonotus obliquus were suitably growing in the culture medium added with 40 mg/L GeO2, its total flavonoids extracting rate was 4.59% while flavonoids were extracted by the conditions of 352 wattage microwave power, 40 ratio of liquid to material and 180 seconds microwave treatment time. The results also showed that 2 mg/mL Ge-